脐带间充质干细胞

摘要： 背景:创伤性脑损伤是世界范围内发生病率最高、最严重的神经系统疾病之一,暂无有效治疗方法,有研究表明间充质干细胞对创伤性脑损伤有一定的修复作用。目的:观察临床级人脐带间充质干细胞对创伤性脑损伤大鼠神经功能的改善作用。方法:将45只雌性SD大鼠随机分为3组,分别为假手术组(n=15)、模型组(n=15)和干细胞组(n=15),除假手术组外,其余两组采用改良的Feeney自由落体方法建立创伤性脑损伤模型,造模24 h后,模型组脑定位注射20μL生理盐水,干细胞组注射20μL临床级人脐带间充质干细胞悬液,共1×10^(6)个细胞,细胞移植后1,3,7,14,21 d采用改良神经功能缺损评分评估大鼠的神经功能运动;移植后21 d,采用RT-qPCR检测Bcl-2/Bax mRNA比值,RT-qPCR及免疫荧光法检测胶质细胞标记物GFAP和IBA1的表达,ELISA法检测血浆中肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和白细胞介素10水平,苏木精-伊红染色观察脑组织结构。结果与结论:①与模型组相比,干细胞组改良神经功能缺损评分明显降低,大鼠的运动功能明显改善;②与模型组相比,干细胞组脑组织Bcl-2/Bax mRNA比值显著升高,胶质细胞标记物GFAP和IBA1 mRNA的表达显著降低,血浆肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和白细胞介素10水平差异不显著;③苏木精-伊红染色观察干细胞组大鼠脑组织缺损、水肿和神经元凋亡等情况均有不同程度的改善;④结果表明,在创伤性脑损伤后移植临床级人脐带间充质干细胞可促进神经功能恢复,减少神经元细胞凋亡,抑制胶质细胞过度活化。

摘要： 背景:大量研究表明间充质干细胞能够通过多种免疫调节途径治疗自身免疫性疾病,基因修饰可能提高间充质干细胞的治疗潜力。miR-1-5p在系统性红斑狼疮中呈低表达,过表达miR-1-5p的间充质干细胞可能对系统性红斑狼疮具有治疗作用。目的:探讨miR-1-5p修饰的脐带间充质干细胞是否介导JAK2/STAT3通路对系统性红斑狼疮MRL/lpr模型小鼠存在治疗作用。方法:将20只MRL/lpr狼疮小鼠随机分为miR-1-5p转染脐带间充质干细胞治疗组(UC-MSCs+miR-1-5p组)、miRNA阴性对照转染脐带间充质干细胞治疗组(UC-MSCs+miR-NC组)、脐带间充质干细胞治疗组(UC-MSCs组)、PBS治疗组(PBS组)、MRL/lpr狼疮小鼠未处理组(对照组)。以尾静脉移植的方式治疗MRL/lpr狼疮小鼠,每周1次,治疗5次。结束治疗后间隔1周处死小鼠,苏木精-伊红染色观察各组MRL/lpr小鼠肝组织和肠组织的病理变化;Western blot法检测各组小鼠肾组织JAK2/STAT3通路蛋白及其磷酸化水平和白细胞介素18的表达水平。结果与结论:(1)与对照组相比,UC-MSCs+miR-1-5p组、UC-MSCs+miR-NC组和UC-MSCs组MRL/lpr小鼠肝组织中炎性细胞浸润明显减少,UCMSCs+miR-NC组可见肝细胞水肿变性;UC-MSCs+miR-1-5p组MRL/lpr小鼠肠组织中杯状细胞明显增多,其余各组差异不显著。(2)与对照组相比,UC-MSCs+miR-1-5p组狼疮小鼠肾组织中p-JAK2(Y1007+Y1008)、p-STAT3(s727)、白细胞介素18的表达水平显著下调(P 0.05)。与PBS组相比,UC-MSCs组白细胞介素18表达明显下调(P <0.05)。(3)结果表明,miR-1-5p修饰的脐带间充质干细胞可能通过抑制JAK2/STAT3通路的激活和白细胞介素18的表达来缓解MRL/lpr小鼠肝肠损害,从而对狼疮小鼠起到一定的治疗作用。

摘要： 通过中国知网、万方数据库和PubMed数据库检索2011—2021年脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)临床应用的文献.通过文献回顾,总结UC-MSCs治疗自身免疫性疾病、神经退行性疾病、代谢性疾病及心血管系统疾病的机制及应用前景.

摘要： 背景:脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)在诱导间充质干细胞神经分化及保护内源性神经元存活等方面具有重要作用.课题组在前期研究中构建了RADA16-BDNF多肽水凝胶支架,发现其具有良好的细胞及神经组织相容性,且能促进间充质干细胞的神经分化.目的:观察携带脐带间充质干细胞的RADA16-BDNF水凝胶支架移植促进脑出血大鼠神经元再生及神经功能恢复的效果及潜在作用机制.方法:①原子力显微镜、扫描电镜观测RADA16-BDNF水凝胶支架的表面结构及携带脐带间充质干细胞后的表观情况;②构建携带脐带间充质干细胞的RADA16-BDNF水凝胶复合支架,并以脐带间充质干细胞作为对照,体外诱导培养分化,免疫荧光染色观察Ki-67及B微管蛋白Ⅲ的表达及细胞形态;③以自体血立体定向注射法制备大鼠脑出血模型,3d后定向注射100 μL携带脐带间充质干细胞(PKH26标记)的RADA16-BDNF多肽水凝胶或PBS,移植后不同时间采用水迷宫实验检测大鼠逃逸时间,评估神经功能恢复情况;移植后60 d采用免疫荧光染色观察脑内微管相关蛋白2的表达.结果 与结论:①RADA16-BDNF水凝胶支架具有微孔隙结构,其孔隙可为携带的细胞提供黏附生长的空间;②RADA16-BDNF水凝胶支架能促进脐带间充质干细胞的体外增殖及神经元分化(P＜0.05),其微孔隙结构能促进神经突起的延伸;③RADA16-BDNF水凝胶支架能促进脐带间充质干细胞在大鼠脑内存活并分化为神经元,提高神经功能恢复效果.

摘要： 背景:脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)在诱导间充质干细胞神经分化及保护内源性神经元存活等方面具有重要作用。课题组在前期研究中构建了RADA16-BDNF多肽水凝胶支架,发现其具有良好的细胞及神经组织相容性,且能促进间充质干细胞的神经分化。目的:观察携带脐带间充质干细胞的RADA16-BDNF水凝胶支架移植促进脑出血大鼠神经元再生及神经功能恢复的效果及潜在作用机制。方法:①原子力显微镜、扫描电镜观测RADA16-BDNF水凝胶支架的表面结构及携带脐带间充质干细胞后的表观情况;②构建携带脐带间充质干细胞的RADA16-BDNF水凝胶复合支架,并以脐带间充质干细胞作为对照,体外诱导培养分化,免疫荧光染色观察Ki-67及β微管蛋白Ⅲ的表达及细胞形态;③以自体血立体定向注射法制备大鼠脑出血模型,3 d后定向注射100μL携带脐带间充质干细胞(PKH26标记)的RADA16-BDNF多肽水凝胶或PBS,移植后不同时间采用水迷宫实验检测大鼠逃逸时间,评估神经功能恢复情况;移植后60 d采用免疫荧光染色观察脑内微管相关蛋白2的表达。结果与结论:①RADA16-BDNF水凝胶支架具有微孔隙结构,其孔隙可为携带的细胞提供黏附生长的空间;②RADA16-BDNF水凝胶支架能促进脐带间充质干细胞的体外增殖及神经元分化(P<0.05),其微孔隙结构能促进神经突起的延伸;③RADA16-BDNF水凝胶支架能促进脐带间充质干细胞在大鼠脑内存活并分化为神经元,提高神经功能恢复效果。

摘要： 背景:在过去的数十年中,间充质干细胞作为组织工程种子细胞,在骨关节炎治疗中展现出了强大的疗效,在国内已开展了多项临床注册试验.研究表明,间充质干细胞主要依靠旁分泌效应释放外泌体等载体在体内发挥治疗作用.目的:比较骨髓间充质干细胞来源外泌体和脐带间充质干细胞来源外泌体治疗骨关节炎的效果.方法:采用超速离心法提取骨髓间充质干细胞来源外泌体和脐带间充质干细胞来源外泌体,采用透射电镜、Nanosight和Western blot鉴定两种外泌体;采用白细胞介素1β与软骨细胞共培养体外模拟骨关节炎环境,通过CCK-8、Western blot、qPCR评估两种外泌体对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡和细胞外基质分泌的影响;建立Ⅱ型胶原酶诱导的大鼠骨关节炎模型,通过大体和组织学染色评估体内注射两种外泌体治疗骨关节炎的疗效,ELISA检测关节液中白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α水平.结果 与结论:①两种外泌体在透射电镜下均为典型的圆形或杯状,粒径在105-120 nm之间,均表达CD63、CD81和TSG1010特征性蛋白;②脐带间充质干细胞来源外泌体的产量和纯度均高于骨髓间充质干细胞来源外泌体;③两种外泌体均能缓解白细胞介素1β对软骨细胞的炎症作用,主要表现在促进增殖、抑制凋亡和增加细胞外基质的分泌,其中脐带间充质干细胞来源外泌体的促软骨修复活性更强;④两种外泌体治疗后,骨关节炎大鼠关节软骨的宏观表现和OARSI评分均高于对照组,且关节液中炎症因子水平下降,其中脐带间充质干细胞来源外泌体的疗效更优;⑤结果表明:脐带间充质干细胞来源外泌体的产量和纯度均高于骨髓间充质干细胞来源外泌体,且脐带间充质干细胞来源外泌体对骨关节炎的治疗效果优于骨髓间充质干细胞来源外泌体,因此脐带间充质干细胞来源外泌体更适合作为治疗骨关节炎的新疗法.

摘要： 目的:探究过表达miR-145的脐带间充质干细胞外泌体对肾透明细胞癌细胞786-0舒尼替尼药物敏感性的影响。方法:分离纯化人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs),流式细胞术鉴定其细胞表型,茜素红及红油O染色观察其成骨与成脂分化能力;差速超速离心法分离hUCMSCs外泌体(hUCMSCs-Exo),电子显微镜观察外泌体的形态,粒径分析(nanoparticle tracking analysis,NTA)检测其大小及分布,Western blot检测外泌体标志性蛋白分子CD9、CD63及CD81的表达,PKH67标记外泌体观察其能否被肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)细胞786-0所摄取;重组腺病毒感染hUCMSCs以过表达miR-145,RT-PCR检测感染后的hUCMSCs及hUCMSCs-Exo中miR-145的表达水平;CCK-8法检测舒尼替尼对不同浓度hUCMSCs-Exo(50、100、200μg/mL)处理的786-0细胞增殖活力及半数抑制浓度(half-inhibitory concentration,IC_(50))改变,Annexin V-FITC/PI双染法结合流式细胞术检测舒尼替尼对上述不同浓度hUCMSCs-Exo处理的786-0细胞的促凋亡作用;BALB/c裸鼠体内验证过表达miR-145的hUCMSCs-Exo对舒尼替尼抑制肾透明细胞癌生长的影响。结果:成功分离具有干细胞表型,且具有成骨、成脂分化潜能的hUCMSCs;同时检测发现hUCMSCs-Exo直径约为30~130 nm之间,且高表达CD9、CD63及CD81;PKH67标记结果显示hUCMSCs-Exo能成功被786-0细胞摄取吞噬;重组腺病毒感染能显著提高hUCMSCs与hUCMSCs-Exo中的miR-145表达水平,且过表达miR-145的hUCMSCs-Exo能以浓度依赖性显著促进舒尼替尼对786-0细胞的增殖抑制率,降低其IC_(50)值,并增加细胞的凋亡率。裸鼠体内实验同样表明,过表达miR-145的hUCMSCs-Exo能在裸鼠体内提高786-0细胞对舒尼替尼的药物敏感性,增加后者对肾癌的生长抑制作用。结论:hUCMSCs能够有效地将过表达的miR-145转移到外泌体中,并被RCC细胞所摄取,从而在裸鼠体内外改善RCC对舒尼替尼的药物敏感性。

摘要： 目的:探讨人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)复合丝心蛋白/胶原/聚(左旋乳酸-己内酯)(SF/COL/PLCL)静电纺丝纳米纤维支架构建盆底重建组织工程补片的可行性。方法:培养UC-MSCs,构建慢病毒介导的绿色荧光蛋白标记的UC-MSCs,制备SF/COL/PLCL静电纺丝三维纳米纤维支架并复合形成新型组织工程盆底补片,同时观察形态。将组织工程补片植入相应大鼠皮下,对照组大鼠植入纳米纤维支架,观察其在体细胞相容性、力学性能及体内转归情况。结果:UC-MSCs体外增殖良好,SF/COL/PLCL静电纺丝纳米纤维支架性能良好,UC-MSCs可黏附于支架并形成细胞层。负载UC-MSCs补片在体生物相容性好,负载UC-MSCs补片组的支架周围组织中白细胞介素2(IL-2)、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子α表达水平随着在体时间延长下降速率相对较快,更利于血运重建,杨氏模量优于对照组(P<0.05),胶原含量增长更快,在体转归分布良好。结论:负载UC-MSCs补片展现了良好的细胞相容性,更强的顺应性和韧性,以及良好的抗炎性和组织修复能力,可为盆底重建提供新思路。

摘要： 干细胞治疗作为某些难治性疾病的新型治疗手段,在组织修复、自身免疫疾病和退行性疾病治疗中具有重要的临床价值。本研究以裸鼠为动物模型,通过裸鼠皮下成瘤、克隆形成和端粒酶活性等试验,评估人脐带间充质干细胞的安全性,为干细胞用于临床治疗的安全性提供参考。裸鼠成瘤性试验结果显示,阴性对照组和试验组成瘤数均为0,阳性对照组成瘤数为12。克隆形成试验结果显示,阴性对照组和试验组无克隆形成,阳性对照组有克隆形成。端粒酶活性测定结果显示,阴性对照组端粒酶相对活性为0.01,阳性对照组端粒酶相对活性为4.33,试验组P6代细胞端粒酶相对活性为1.70。因此,本研究的评估结果显示,人脐带间充质干细胞在裸鼠中不致瘤,克隆形成试验结果为阴性,端粒酶活性测定结果正常,具有良好的遗传稳定性。人脐带间充质干细胞在本试验中展现了良好的安全性,具有较好的临床应用价值。

摘要： 目的 观察体内外川芎嗪(TMP)对脐带间充质干细胞(ucMSCs)迁移的影响并研究其相关作用机制。方法 体内尾静脉移植ucMSCs入脑中动脉栓塞模型(MCAO)大鼠,荧光显微镜观察GFP-ucMSCs的迁移定位情况,Western blot检测基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其受体CXCR4的表达;体外采用Transwell法检测ucMSCs的迁移,观察TMP处理以及加入拮抗剂后对ucMSCs迁移率的影响,ELISA检测白介素-1β(IL-1β)的表达水平,检测迁移相关蛋白表达。结果 体内结果发现TMP预处理后ucMSCs迁移至脑梗死区的数量(IOD 2.9×105)较未处理组(IOD 0.4×105)显著增加(P <0.05),SDF-1和CXCR4的表达量也显著升高(P <0.05),且加入拮抗剂后各指标均明显降低(P <0.05);体外实验显示TMP预处理后的ucMSCs迁移细胞数由每区域20个提高至88个(P <0.05),与CXCR4的表达升高一致;TMP处理损伤PC12细胞可有效降低炎症因子IL-1β的表达(17.2 pg/mL降至13.5 pg/mL)。结论 川芎嗪通过调节SDF-1/CXCR4轴提高脐带间充质干细胞移植迁移率,并抑制炎症反应改善移植微环境,为中医药与干细胞联合治疗缺血性脑卒中提供实验依据。

摘要： 探讨联合应用脐带间充质干细胞(hUCMSCs)与白藜芦醇对于减轻自身免疫状态,保护β细胞,改善胰岛功能的作用.结果表明：应用hUCMSCs联合白葵芦醇治疗方案可以明显改善患TIDM的NOD小鼠体重减轻的状态，改善体内高血糖的状态，升高小鼠空腹血清C肤水平。这种效应主要是通过改善NOD小鼠体内自身免疫状况，减轻胰岛炎症，保护β细胞功能来实现的。通过观察，认为白黎芦醇可以作为一种辅助药物，增加hUCMSCs的治疗效果，减轻β细胞损伤，维持残存β细胞功能。

摘要： 为研究犬脐带间充质干细胞(UC-MSC)抗膝关节炎炎症反应的效果,本文首先通过手术打磨膝关节软骨的方式建立犬关节炎模型,造模后第1和第3d将异体UC-MSC悬液注入治疗组犬的膝关节腔内,而模型组注入等量生理盐水,然后测定试验犬体温、血常规及炎性因子进行分析.结果发现,试验后前11d模型组犬体温高于治疗组;在试验期间,模型组的白细胞总数和中性粒细胞数显著高于治疗组(P＜0.05),而淋巴细胞、红细胞、血红蛋白和血小板数量则显著低于治疗组(P＜0.05);模型组血液中的IL-6、IL-7和TNF-α显著高于治疗组(P＜0.05).试验结果为后续研究提供理论依据.

摘要： 人脱落乳牙牙髓干细胞、骨髓间充值干细胞和脐带间充质干细胞是三种来源广泛、研究较多的间充质干细胞。然而，现有的研究中干细胞种类的选择较为混乱，尚未涉及三种干细胞生物学特性的系统性比较。本研究旨在明确三种间充质干细胞的生物学性能并加以比较，为不同疾病的治疗中干细胞的选择提供理论基础。

摘要： 战伤是在战斗中,由武器直接或间接造成的损伤,以及战场环境因素直接造成的损伤.战伤包括常规武器、高新技术武器等造成的直接损伤和武器引起的设施、环境破坏而间接造成人员损伤,例如轰炸或炮弹爆炸使工事倒塌导致的挤压伤.脐带间充质干细胞是来源于新生儿脐带组织的干细胞，具有自我更新、快速生长、多向分化、免疫调节等生物学特点，在战创伤治疗方面，对挽救生命和减少残缺具有有较为重要的应用价值。

摘要： 目的：观察转染鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase-1,SPHK1)活性的脐带间充质干细胞(mesenchymal stem cells derived from human umbilical cord,UCMSC)和UCMSC对多发性硬化的实验动物模型：实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠治疗效果的研究,并探讨其可能的机制. 方法：采用组织块法分离培养UCMSC,运用流式细胞仪检测多种分子表面标志,以确定分离培养出来的细胞符合UCMSC细胞免疫表型,同时对UCMSC进行相关质控工作.携带SPHK1基因的腺病毒载体,滴度为1.2531011/ml.第三代UCMSC复苏在细胞培养皿中,培养基为含10％胎牛血清的DMEM培养基(dulbecco"sminimum essential medium,DMEM).当细胞长满细胞培养皿3/4时,更换血清浓度为5％的DMEM培养基,按照腺病毒滴度,每个细胞培养皿加入16ul携带有SPHK1基因的腺病毒.腺病毒刺激UCMSC48小时后收集UCMSC,然后提取蛋白.之后用westernblot实验方法检测UCMSC中SPHK1的表达,并和未转染病毒的UCMSC、转染未携带SPHK1基因病毒的UCMSC比较.采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG35-55)作为抗原与完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠制作EAE模型,UCMSC-SPHK1组小鼠分别在免疫后第7、14、21、28d通过尾静脉注射转染SPHK1活性的UCMSC(5.53106/只,0.2ml),UCMSC组小鼠尾静脉注射UCMSC(5.53106/只,0.2ml),对照组和EAE组注射同等体积的生理盐水.采用临床评分和脊髓病理切片评估各组小鼠发病情况.免疫组化方法检测各组小鼠脊髓星形胶质细胞酸性蛋白(GFAP)、髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达.流式细胞术检测小鼠脾脏淋巴细胞NK细胞、调节性T细胞CD4+CD25+的表达变化.ELISA检测小鼠外周血细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素17(IL-17)和白介素4(IL-4)的含量. 结果：采用组织块法可方便经济的从脐带中成功分离出间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表达间充质干细胞分子表面标志的CD44,CD29和CD105,并不表达人白细胞抗原-DR、内皮细胞标志的CD31和造血细胞表面抗原的CD45;分离培养的UCMSC没有细菌、真菌、乙肝病毒、HIV病毒和内毒素的污染,可用于接下来的实验.经westernblot分析,转染SPHK1基因的UCMSC明显高表达SPHK1蛋白,而未转染病毒的UCMSC、转染未携带SPHK1基因病毒的UCMSC,SPHK1蛋白表达量明显较低.髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG35-55)与完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠成功制作EAE模型,14天左右小鼠陆续出现神经功能缺失症状.经尾静脉注射干细胞治疗后,UCMSC-SPHK1组小鼠症状明显较UCMSC组小鼠和EAE组小鼠轻,临床评分明显减低.UCMSC-SPHK1组小鼠脊髓HE染色,炎性细胞较UCMSC组小鼠和EAE组小鼠明显减少,脊髓Fast-blue染色显示,髓鞘脱失较另外两组明显减少.各组小鼠脊髓免疫组化对比表明,在GFAP的表达上,UCMSC-SPHK1组小鼠明显少于UCMSC组和EAE组.在MBP表达上,UCMSC-SPHK1组小鼠髓鞘脱失较少,MBP表达量明显多于UCMSC组和EAE组.流式细胞术检测显示,UCMSC-SPHK1组小鼠脾脏淋巴细胞中,NK细胞较UCMSC组和EAE组明显减少,而调节性T细胞CD4+CD25+的表达较上述两组明显增多.外周血ELISA检测显示,UCMSC-SPHK1组小鼠外周血中细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-17表达量较UCMSC组和EAE组减少,而IL-4的表达量较上述两组升高.所有的实验数据都使用SPSS10.0统计软件统计分析,两组间比较采用T检验的方法,多个样本均数之间比较采用单因素方差分析的方法. 结论：转染SPHK1基因的UCMSC明显高表达SPHK1蛋白,具有SPK活性;MOG35-55与完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠成功制作EAE模型;经尾静脉注射转染SPHK1基因的UCMSC后,小鼠症状明显减轻,脊髓炎性细胞明显减少,髓鞘脱失也明显减少,脊髓GFAP表达减少,MBP损失较少.经尾静脉注射转染SPHK1基因的UCMSC后,小鼠脾脏中杀伤性细胞减少,而调节性T细胞增多;外周血ELISA表明,Th1型细胞因子减少,Th2型细胞因子增多.经尾静脉注射转染SPHK1基因的UCMSC后,小鼠免疫调节功能明显增强,因此,结果提示具有SPK活性的UCMSC可能成为治疗MS的一种新型生物方法.

摘要： 目的：放射性脑损伤的机制是多因素综合作用的结果,其尚无有效的治疗手段,人源性脐带间充质干细细胞(hUC-MSCs)已成为治疗中枢神经系统损伤的研究热点.本研究探讨注射脐带间充质干细胞对放射性脑损伤的神经保护作用. 方法：SPF级30只C57BL/6雌性小鼠,随机分为正常组,模型组,细胞治疗组,采用15Gy剂量钴元射线对实验小鼠进行单次全脑照射,于第4周处死、采样,用跳台实验观察小鼠学习记忆能力;用HE染色观察海马CA1区神经细胞的改变;用q-PCR方法,检测炎性相关因子TNF-α,IL-6,IL-10表达. 结果和结论：与模型组相比,细胞治疗组小鼠的学习记忆能力显著提高(P＜0.05),脑组织神经元变性坏死数显著减少(P＜0.05),促炎因子TNF-α,IL-6显著降低(P＜0.05),抑炎因子IL-10显著升高(P＜0.05).脐带间充质干细胞通过抑制脑细胞损伤及炎症反应,从而起到神经保护作用.

摘要： 目的：探讨过表达肝细胞生长因子的人脐带间充质干细胞对鼻黏膜上皮和兔鼻窦黏膜机械损伤模型的修复作用。rn 方法:通过酶消化法和组织块培养法分离hUC-MSCs，胰酶消化1:3传代扩增。使用腺病毒载体构建了含有HGF基因的重组腺病毒(Ad-HGF)，以MOI=100转染hUCMSCs(HGF-MSCs),PCR以及ELISA鉴定HGF在HGF-MSCs中的表达;体外原代培养鼻上皮细胞，建立鼻茹膜上皮机械划痕模型，利用hUCMSCs以及HGF-MSCs的条件培养液观察对上皮愈合能力的影响，并采用CCK-8法检测其能否促进上皮细胞增殖。建立兔上领窦茹膜机械损伤模型。rn 结果：两种方法均能获得足量原代hUC-MSCs，并且符合国际干细胞协会标准。hUCMSCs条件培养液可促进鼻上皮细胞增殖、划痕愈合，通过过表达HGF能够增强这种效应。在HGF-MSCs组中，其胶原沉积明显下降，并且能够降低TGF-betal在损伤组织中的浓度。rn 结论:成功从人脐带中分离培养hUC-MSCs，并且符合国际标准;hUC-MSCs能在体外促进鼻茹膜上皮增殖、划痕愈合，体内移植能促进茹膜的愈合，部分能分化为上皮和纤毛细胞。HGF-MSCs不仅具有增强以上效应还能降低组织修复时胶原沉积以及纤维化程度。

摘要： 检测脐带间充质干细胞重层化培养下条件上清液中生长因子群的变化,并应用于难愈性创面的治疗、皮肤再生年轻化.采集足月健康剖腹产后的脐带,体外分离培养扩增脐带间充质干细胞,达到一定数量后,进行重层化培养,提取条件培养上清液,检测上清液中多种生长因子的分泌水平变化.上清液离心、过滤灭菌、冻存、分装备用.将上清液注射于难愈性创面的创周以及创基,1次/3天,并观察照相记录;将上清液注射于颜面部衰老皮肤区域,1次/月,共3次,观察3-6月疗效.

摘要： 目的：针对临床治疗需要,标准化体外脐带间充质干细胞培养的技术方法. 方法：规范了脐带组织块贴壁法的标准化技术操作,材料的选取,取无菌条件下的剖腹产婴儿脐带,剪成1mm3的组织块,加入含10％胎牛血清的DMEM/F12在培养瓶中培养分离间充质干细胞,利用倒置相差显微镜观察细胞的生长形态,运用流式细胞仪检测细胞周期及免疫抗原表达,并检测体外多向分化潜能. 结果：脐带组织块贴壁法生长的细胞形态均一,成纤维样的梭形细胞,这些细胞表达CD90,CD105,CD29,不表达CD34,CD45,并在体外成功诱导分化成骨,软骨,脂肪细胞. 结论：在长期重复运用脐带组织块贴壁法可成功从人脐带中分离出间充质干细胞,其生物学特性与骨髓间充质干细胞相似.

摘要： 设计了一种基于T7核酸内切酶Ⅰ切割的类似于甲基化特异性PCR的检测基因羟甲基化特定位点的新方法,样品量只需0.5ug.本方法的最大优势是可以实现羟甲基化在甲基化环境里的高灵敏度的检测(5hmc∶5mc=1∶1000).此外还将本方法成功用于脐带间充质干细胞分化过程分析.

摘要： 本发明涉及从脐带血中分离和培养间充质干细胞/祖细胞的方法，还涉及将脐带血来源的间充质干细胞/祖细胞分化成各种间充质组织的方法。所述方法包括如下步骤：将脐带血覆盖在Ficoll-Hypaque溶液上；将Ficoll-Hypaque溶液上的脐带血离心，获得单核细胞层；使通过单核细胞单层培养获得的细胞与针对间充质干细胞/祖细胞特异性抗原的抗体反应预定的孵育期；使用细胞分选仪仅分离与其相应抗体相结合的细胞；将分离的细胞培养，从而获得具有高纯度和极好生存能力的间充质干细胞/祖细胞。本发明的间充质干细胞/祖细胞能够分化成包括软骨细胞和成骨细胞在内的各种间充质组织。因此，根据本发明的细胞分离和培养方法能够实现间充质干细胞/祖细胞的大规模生产，本发明获得的细胞在受损间充质组织的再生和治疗上是有用的。

摘要： 本发明涉及从脐带血中分离和培养间充质干细胞/祖细胞的方法，还涉及将脐带血来源的间充质干细胞/祖细胞分化成各种间充质组织的方法。所述方法包括如下步骤：将脐带血覆盖在Ficoll－Hypaque溶液上；将Ficoll－Hypaque溶液上的脐带血离心，获得单核细胞层；使通过单核细胞单层培养获得的细胞与针对间充质干细胞/祖细胞特异性抗原的抗体反应预定的孵育期；使用细胞分选仪仅分离与其相应抗体相结合的细胞；将分离的细胞培养，从而获得具有高纯度和极好生存能力的间充质干细胞/祖细胞。本发明的间充质干细胞/祖细胞能够分化成包括软骨细胞和成骨细胞在内的各种间充质组织。因此，根据本发明的细胞分离和培养方法能够实现间充质干细胞/祖细胞的大规模生产，本发明获得的细胞在受损间充质组织的再生和治疗上是有用的。

摘要： 本发明属于脐带间充质干细胞应用领域，特别是涉及一种脐带间充质干细胞用溶液及其应用、用于治疗溃疡性结肠炎疾病的脐带间充质干细胞制剂及其制备方法和应用。本发明提供了一种脐带间充质干细胞用溶液，所述脐带间充质干细胞溶液包括临床级DMSO、人血白蛋白、低分子右旋糖酐、海藻糖、褪黑素和复方电解质溶液。上述溶液能够有效稳定经过冻存的脐带间充质干细胞的细胞数量，还能够有效提高经过冻存的脐带间充质干细胞的细胞活力，同时能够维持经过冻存的脐带间充质干细胞的免疫抑制功能。便于含有脐带间充质干细胞的溶液进行长途运输和使用，能够有效促进脐带间充质干细胞的工业化生产和使用。

摘要： 本发明公开了一种人脐带间充质干细胞培养基，包括基础培养基，添加在所述基础培养基中的复合添加剂，所述复合添加剂的成分以终浓度计包括：丝素蛋白6.5‑9.3μg/L、羧甲基纤维素钠5.4‑7.2μg/L、大豆低聚肽10.0‑14.0μg/L、3‑吡啶甲酸10.5‑14.8μg/L、辅酶Q10 8.0‑12.0μg/L、肌醇15.0‑20.0μg/L、蔗糖脂肪酸酯6.8‑7.2ng/L、α‑酮戊二酸8.2‑9.5μg/L、微量元素22.0‑26.0μg/L。本发明采用羧甲基纤维素钠和丝素蛋白配合，提高细胞的粘附性，有利于细胞固着，促进细胞的生长，还添加有大豆低聚肽、3‑吡啶甲酸、辅酶Q10、α‑酮戊二酸复配使用，提高细胞生长速度和增殖数量，提高细胞分泌生长因子的性能。添加微量元素镁、铁、锌、硒，为细胞的生长提供更好的营养环境，进一步促进细胞的增殖。

摘要： 本发明公开的人脐带间充质干细胞无血清培养基、制备方法及人脐带间充质干细胞无血清培养液的获取方法，包括基础培养基和无血清培养上清浓缩液，还包括如下组分及其浓度：维生素组合物5‑100ng/ml，葡多酚50‑200μg/ml，重组人表皮细胞生长因子1～50ng/ml，重组人碱性成纤维细胞生长因子1～50ng/ml，重组血小板衍生生长因子‑C 1～10ng/ml，重组人胰岛素样生长因子‑1 1～10ng/ml，β‑巯基乙醇50～200μM，人血白蛋白1～100μg/ml，谷胱甘肽1‑100μg/ml，碳酸氢钠1.2‑3.7g/L。利用人脐带间充质干细胞无血清培养基替代传统含动物血清的培养基来培养人脐带间充质干细胞，避免了干细胞被病原体或动物源性成分污染及异种蛋白引起人体免疫反应等不安全因素。

摘要： 本发明公开了一种免疫调节功能增强型脐带间充质干细胞、干细胞制剂及脐带间充质干细胞的制备方法。本申请通过分离脐带组织，将获得的间充质干细胞种子细胞进行细胞因子分泌水平的检测，对符合要求的种子细胞给与添加了炎性因子组合的特定培养基进行传代培养，从而获得免疫调节功能增强型脐带间充质干细胞。上述制备方法制得的间充质干细胞强化了其免疫调节功能，对免疫调节功能紊乱人群及自身免疫性疾病的治疗更具有针对性。

摘要： 本发明公开提供了一种改良人脐带间充质干细胞培养基和人脐带间充质干细胞的分离纯化方法，所述培养基包括基础培养基和添加物，所述基础培养基为UltraCulture无血清培养基，添加物各组分及浓度为：1.0%‑5.0%血清替代物，1.0‑10.0mM烟酰胺，0.5‑5nM丙酮酸钠，1%非必需氨基酸，1%谷氨酰胺。本发明还公开了一种人脐带间充质干细胞的分离纯化方法，即采用组织培养法结合混合酶消化法，可快速、高效分离得到数量大，纯度高，状态好的脐带间充质干细胞，既缩短原代培养时间，又简便易操作。利用本发明可提高脐带组织的利用率和间充质干细胞得率，并且细胞纯度高，活性好，可满足临床应用的要求。

摘要： 本发明属于脐带间充质干细胞应用领域，特别是涉及一种脐带间充质干细胞用溶液及其应用、用于治疗溃疡性结肠炎疾病的脐带间充质干细胞制剂及其制备方法和应用。本发明提供了一种脐带间充质干细胞用溶液，所述脐带间充质干细胞溶液包括临床级DMSO、人血白蛋白、低分子右旋糖酐、海藻糖、褪黑素和复方电解质溶液。上述溶液能够有效稳定经过冻存的脐带间充质干细胞的细胞数量，还能够有效提高经过冻存的脐带间充质干细胞的细胞活力，同时能够维持经过冻存的脐带间充质干细胞的免疫抑制功能。便于含有脐带间充质干细胞的溶液进行长途运输和使用，能够有效促进脐带间充质干细胞的工业化生产和使用。

摘要： 本发明公开了一种人脐带间充质干细胞培养基，包括基础培养基，添加在所述基础培养基中的复合添加剂，所述复合添加剂的成分以终浓度计包括：丝素蛋白6.5‑9.3μg/L、羧甲基纤维素钠5.4‑7.2μg/L、大豆低聚肽10.0‑14.0μg/L、3‑吡啶甲酸10.5‑14.8μg/L、辅酶Q

摘要： 本发明公开了(S)‑3‑硫代吗啉甲酸促进脐带间充质干细胞增殖的用途、脐带间充质干细胞培养基。本发明发现，(S)‑3‑硫代吗啉甲酸具有促进UC‑MSCs增殖的作用，在培养基中添加适量(S)‑3‑硫代吗啉甲酸可以显著提高UC‑MSCs的增殖率，且培养增殖后的UC‑MSCs依然具有高纯度，不会被诱导分化。(S)‑3‑硫代吗啉甲酸促进UC‑MSCs增殖的作用可能与Notch1通路有关。(S)‑3‑硫代吗啉甲酸具有开发成脐带间充质干细胞体外增殖培养基的前景。