鞘氨醇激酶1

摘要： 目的探讨鞘氨醇激酶1(SPHK1)与血管内皮生长因子(VEGF)在人胃癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测SPHK1与VEGF蛋白在178例胃癌组织及其162份癌旁组织中的表达情况,使用Kaplan-Meier Plotter数据库了解SPHK1、VEGF对胃癌患者生存时间的影响。结果 SPHK1在胃癌组织中高表达率为75.3%,明显高于癌旁组织的32.1%(P0.05)。VEGF在胃癌组织中的高表达率为62.9%,明显高于癌旁组织中的44.4%(P0.05)。SPHK1与VEGF在胃癌组织中的表达呈正相关(r=0.207,P<0.05)。SPHK1高表达组的中位总生存期为25.0个月,显著短于SPHK1低表达组的57.1个月(HR=1.56,95%CI:1.29~1.89,P=0.000);VEGF高表达组的中位总生存期为20.5个月,显著短于VEGF低表达组的33.6个月(HR=1.49,95%CI:1.23~1.81,P=0.000)。结论 SPHK1可能与VEGF共同调控胃癌的生物学过程。

摘要： cqvip:脑卒中(Stroke)是全球第二大死亡原因和第三大致残原因[1],严重危害人类生命健康和生活质量。其中,急性缺血性脑卒中(Acute ischemic stroke,AIS)亦称急性脑梗死(Acute cerebral infarction,ACI),是最常见的卒中类型,占我国脑卒中的69.6%~70.8%[2]。AIS是指局部脑组织由于急性血液循环障碍,出现缺血、缺氧、坏死,引发局灶性或弥漫性神经功能缺损的疾病,其脑组织损伤的病理生理学过程较为复杂,包括能量衰竭、兴奋性毒性、氧化应激和神经炎症等一系列细胞和分子事件,而神经炎症的特征又包括中枢神经系统免疫细胞的浸润、神经胶质细胞(如小胶质细胞和星形胶质细胞)的激活以及多种神经毒性分子(包括促炎细胞因子)的产生,所有这些都会进一步引起中枢神经系统内皮功能障碍、血脑屏障破坏、神经细胞凋亡,从而造成神经功能缺损[3]。

摘要： 鞘氨醇激酶1(SphK1)是调控细胞膜脂质微环境的重要蛋白,在神经酰胺,鞘氨醇和鞘氨醇-1-磷酸的动态平衡中发挥重要作用。SphK1的过度表达与肿瘤的发生,发展和迁移过程以及产生耐药性有着密切的联系。SphK1抑制剂可以诱导多种肿瘤细胞凋亡,并且可以逆转肿瘤耐药性,具有良好的药物开发前景。本文综述了SphK1的结构生物学以及SphK1抑制剂的结构类型和构效关系研究进展。

摘要： 目的 探讨鞘氨醇激酶1(SPHK1)与基质金属蛋白酶2(MMP2)在人结肠癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系.方法 2014年1月至2018年12月于宝鸡市中心医院行结肠癌根治术患者共201例,使用免疫组织化学法检测SPHK1蛋白与MMP2蛋白在结肠癌组织中的表达情况,使用χ2检验分析其与临床各病理资料之间的关系.结果 SPHK1蛋白在结肠癌组织中的表达率为54.7％,明显高于癌旁组织中的39.7％,差异具有统计学意义(P<0.05);SPHK1蛋白的高表达与患者的淋巴结是否转移、T分期、组织学分化程度以及是否血管侵犯有关(P<0.05);MMP2在结肠癌组织中的表达率为64.7％,明显高于癌旁组织中的24.4％,差异具有统计学意义(P<0.05);MMP2蛋白的高表达与淋巴结转移与否、T分期、M分期以及血管侵犯有关(P<0.05);SPHK1蛋白在结肠癌组织中的表达与MMP2蛋白呈正相关(r=0.352,P<0.05).结论 SPHK1蛋白与MMP2蛋白在人结肠癌组织中均异常表达,且可能参与到结肠癌的侵袭与转移过程中.

摘要： 目的:探讨鞘氨醇激酶1(SphK1)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移和侵袭的影响及其作用机制.方法:选取31例外科手术切除并经常规组织学检查确诊为NSCLC的肿瘤组织标本和配对癌旁肺组织标本,应用免疫组织化学染色和RT-qPCR检测SphK1的表达.将pcDNA3.1-SphK1载体(SphK1组)、空白pcDNA3.1载体对照(NC组)、SphK1 siRNA(siSphK1组)和对照siRNA(siNC组)分别转染人肺腺癌A549细胞,Western blot法检测SphK1、E-cadherin、fibronectin和p-ERK1/2的表达;利用Transwell实验评估过表达SphK1和抑制ERK1/2对A549细胞迁移和侵袭的影响.结果:SphK1在NSCLC组织中高表达,并与肿瘤分期相关.SphK1过表达可显著促进A549细胞的迁移和侵袭,提高p-ERK1/2和fibronectin蛋白水平,减少E-cadherin蛋白表达(P<0.05),而干扰SphK1则呈现相反的结果.ERK1/2抑制剂U0126可显著抑制SphK1过表达诱导的p-ERK1/2和fibronectin上调及E-cadherin下调,也抑制了SphK1过表达增强的A549细胞侵袭和迁移能力(P<0.05).结论:SphK1可能通过ERK1/2通路降低E-cadherin蛋白水平、提高fibronectin蛋白水平,并促进NSCLC细胞的侵袭和迁移.

摘要： 目的 研究鞘氨醇激酶1(SphK1)过表达在丙烯酰胺(ACR)致神经细胞损伤中的保护作用以及影响.方法 将纯度为99％的ACR用生长液制备成浓度为1.25、2.5 mmol/L溶液;将人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞分为对照组(NC组)、实验组和SphK1激活剂组.NC组加入(12-)十四酸佛波酯(-13-)乙酸盐(PMA)溶液[SphK1特异性激活剂,二甲基亚砜(DMSO)配制,终浓度为100 nmol/L].实验组给予终浓度分别为1.25和2.5 mmol/L的ACR溶液,染毒24 h.SphK1激活剂组在实验组染毒浓度的基础上,每个染毒浓度分别加入PMA溶液,其他处理与实验组一致.各组采用免疫印迹(Western blot)法检测SphK1蛋白的表达含量;CCK-8检测SH-SY5Y细胞的增殖活性;Hoechst33342法观察神经细胞形态学改变;流式细胞术分析细胞的凋亡.结果 与NC组比较,实验组和SphK1激活剂组细胞SphK1蛋白表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05).与实验组比较,SphK1激活剂组细胞在1.25和2.5 mmol/L浓度的SphK1蛋白表达均增高,差异均有统计学意义(P<0.05).与NC组比较,实验组和2.5 mmol/L浓度SphK1激活剂组的细胞相对生长存活率均更低,差异有统计学意义(P<0.05).与实验组比较,SphK1激活剂组细胞相对生长存活率均更高,差异有统计学意义(P<0.05).随着染毒剂量的增加,实验组细胞在ACR 1.25 mmol/L浓度时呈现出早期凋亡、在ACR 2.5 mmol/L浓度时呈现出晚期凋亡的形态学特征.与NC组比较,实验组和SphK1激活剂组在ACR 2.5 mmol/L浓度时凋亡率差异均有统计学意义(P<0.05);与实验组比较,SphK1激活剂组在ACR2.5 mmol/L浓度时细胞凋亡率更低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 SphK1过表达可以对丙烯酰胺引起的神经细胞损伤起到保护作用.

摘要： 目的：观察转染鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase-1,SPHK1)活性的脐带间充质干细胞(mesenchymal stem cells derived from human umbilical cord,UCMSC)和UCMSC对多发性硬化的实验动物模型：实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠治疗效果的研究,并探讨其可能的机制. 方法：采用组织块法分离培养UCMSC,运用流式细胞仪检测多种分子表面标志,以确定分离培养出来的细胞符合UCMSC细胞免疫表型,同时对UCMSC进行相关质控工作.携带SPHK1基因的腺病毒载体,滴度为1.2531011/ml.第三代UCMSC复苏在细胞培养皿中,培养基为含10％胎牛血清的DMEM培养基(dulbecco"sminimum essential medium,DMEM).当细胞长满细胞培养皿3/4时,更换血清浓度为5％的DMEM培养基,按照腺病毒滴度,每个细胞培养皿加入16ul携带有SPHK1基因的腺病毒.腺病毒刺激UCMSC48小时后收集UCMSC,然后提取蛋白.之后用westernblot实验方法检测UCMSC中SPHK1的表达,并和未转染病毒的UCMSC、转染未携带SPHK1基因病毒的UCMSC比较.采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG35-55)作为抗原与完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠制作EAE模型,UCMSC-SPHK1组小鼠分别在免疫后第7、14、21、28d通过尾静脉注射转染SPHK1活性的UCMSC(5.53106/只,0.2ml),UCMSC组小鼠尾静脉注射UCMSC(5.53106/只,0.2ml),对照组和EAE组注射同等体积的生理盐水.采用临床评分和脊髓病理切片评估各组小鼠发病情况.免疫组化方法检测各组小鼠脊髓星形胶质细胞酸性蛋白(GFAP)、髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达.流式细胞术检测小鼠脾脏淋巴细胞NK细胞、调节性T细胞CD4+CD25+的表达变化.ELISA检测小鼠外周血细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素17(IL-17)和白介素4(IL-4)的含量. 结果：采用组织块法可方便经济的从脐带中成功分离出间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表达间充质干细胞分子表面标志的CD44,CD29和CD105,并不表达人白细胞抗原-DR、内皮细胞标志的CD31和造血细胞表面抗原的CD45;分离培养的UCMSC没有细菌、真菌、乙肝病毒、HIV病毒和内毒素的污染,可用于接下来的实验.经westernblot分析,转染SPHK1基因的UCMSC明显高表达SPHK1蛋白,而未转染病毒的UCMSC、转染未携带SPHK1基因病毒的UCMSC,SPHK1蛋白表达量明显较低.髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG35-55)与完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠成功制作EAE模型,14天左右小鼠陆续出现神经功能缺失症状.经尾静脉注射干细胞治疗后,UCMSC-SPHK1组小鼠症状明显较UCMSC组小鼠和EAE组小鼠轻,临床评分明显减低.UCMSC-SPHK1组小鼠脊髓HE染色,炎性细胞较UCMSC组小鼠和EAE组小鼠明显减少,脊髓Fast-blue染色显示,髓鞘脱失较另外两组明显减少.各组小鼠脊髓免疫组化对比表明,在GFAP的表达上,UCMSC-SPHK1组小鼠明显少于UCMSC组和EAE组.在MBP表达上,UCMSC-SPHK1组小鼠髓鞘脱失较少,MBP表达量明显多于UCMSC组和EAE组.流式细胞术检测显示,UCMSC-SPHK1组小鼠脾脏淋巴细胞中,NK细胞较UCMSC组和EAE组明显减少,而调节性T细胞CD4+CD25+的表达较上述两组明显增多.外周血ELISA检测显示,UCMSC-SPHK1组小鼠外周血中细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-17表达量较UCMSC组和EAE组减少,而IL-4的表达量较上述两组升高.所有的实验数据都使用SPSS10.0统计软件统计分析,两组间比较采用T检验的方法,多个样本均数之间比较采用单因素方差分析的方法. 结论：转染SPHK1基因的UCMSC明显高表达SPHK1蛋白,具有SPK活性;MOG35-55与完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠成功制作EAE模型;经尾静脉注射转染SPHK1基因的UCMSC后,小鼠症状明显减轻,脊髓炎性细胞明显减少,髓鞘脱失也明显减少,脊髓GFAP表达减少,MBP损失较少.经尾静脉注射转染SPHK1基因的UCMSC后,小鼠脾脏中杀伤性细胞减少,而调节性T细胞增多;外周血ELISA表明,Th1型细胞因子减少,Th2型细胞因子增多.经尾静脉注射转染SPHK1基因的UCMSC后,小鼠免疫调节功能明显增强,因此,结果提示具有SPK活性的UCMSC可能成为治疗MS的一种新型生物方法.

摘要： 目的：观察转染鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase-1,SPHK1)活性的脐带间充质干细胞(mesenchymal stem cells derived from human umbilical cord,UCMSC)和UCMSC对多发性硬化的实验动物模型：实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠治疗效果的研究,并探讨其可能的机制. 方法：采用组织块法分离培养UCMSC,运用流式细胞仪检测多种分子表面标志,以确定分离培养出来的细胞符合UCMSC细胞免疫表型,同时对UCMSC进行相关质控工作.携带SPHK1基因的腺病毒载体,滴度为1.2531011/ml.第三代UCMSC复苏在细胞培养皿中,培养基为含10％胎牛血清的DMEM培养基(dulbecco"sminimum essential medium,DMEM).当细胞长满细胞培养皿3/4时,更换血清浓度为5％的DMEM培养基,按照腺病毒滴度,每个细胞培养皿加入16ul携带有SPHK1基因的腺病毒.腺病毒刺激UCMSC48小时后收集UCMSC,然后提取蛋白.之后用westernblot实验方法检测UCMSC中SPHK1的表达,并和未转染病毒的UCMSC、转染未携带SPHK1基因病毒的UCMSC比较.采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG35-55)作为抗原与完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠制作EAE模型,UCMSC-SPHK1组小鼠分别在免疫后第7、14、21、28d通过尾静脉注射转染SPHK1活性的UCMSC(5.53106/只,0.2ml),UCMSC组小鼠尾静脉注射UCMSC(5.53106/只,0.2ml),对照组和EAE组注射同等体积的生理盐水.采用临床评分和脊髓病理切片评估各组小鼠发病情况.免疫组化方法检测各组小鼠脊髓星形胶质细胞酸性蛋白(GFAP)、髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达.流式细胞术检测小鼠脾脏淋巴细胞NK细胞、调节性T细胞CD4+CD25+的表达变化.ELISA检测小鼠外周血细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素17(IL-17)和白介素4(IL-4)的含量. 结果：采用组织块法可方便经济的从脐带中成功分离出间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表达间充质干细胞分子表面标志的CD44,CD29和CD105,并不表达人白细胞抗原-DR、内皮细胞标志的CD31和造血细胞表面抗原的CD45;分离培养的UCMSC没有细菌、真菌、乙肝病毒、HIV病毒和内毒素的污染,可用于接下来的实验.经westernblot分析,转染SPHK1基因的UCMSC明显高表达SPHK1蛋白,而未转染病毒的UCMSC、转染未携带SPHK1基因病毒的UCMSC,SPHK1蛋白表达量明显较低.髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG35-55)与完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠成功制作EAE模型,14天左右小鼠陆续出现神经功能缺失症状.经尾静脉注射干细胞治疗后,UCMSC-SPHK1组小鼠症状明显较UCMSC组小鼠和EAE组小鼠轻,临床评分明显减低.UCMSC-SPHK1组小鼠脊髓HE染色,炎性细胞较UCMSC组小鼠和EAE组小鼠明显减少,脊髓Fast-blue染色显示,髓鞘脱失较另外两组明显减少.各组小鼠脊髓免疫组化对比表明,在GFAP的表达上,UCMSC-SPHK1组小鼠明显少于UCMSC组和EAE组.在MBP表达上,UCMSC-SPHK1组小鼠髓鞘脱失较少,MBP表达量明显多于UCMSC组和EAE组.流式细胞术检测显示,UCMSC-SPHK1组小鼠脾脏淋巴细胞中,NK细胞较UCMSC组和EAE组明显减少,而调节性T细胞CD4+CD25+的表达较上述两组明显增多.外周血ELISA检测显示,UCMSC-SPHK1组小鼠外周血中细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-17表达量较UCMSC组和EAE组减少,而IL-4的表达量较上述两组升高.所有的实验数据都使用SPSS10.0统计软件统计分析,两组间比较采用T检验的方法,多个样本均数之间比较采用单因素方差分析的方法. 结论：转染SPHK1基因的UCMSC明显高表达SPHK1蛋白,具有SPK活性;MOG35-55与完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠成功制作EAE模型;经尾静脉注射转染SPHK1基因的UCMSC后,小鼠症状明显减轻,脊髓炎性细胞明显减少,髓鞘脱失也明显减少,脊髓GFAP表达减少,MBP损失较少.经尾静脉注射转染SPHK1基因的UCMSC后,小鼠脾脏中杀伤性细胞减少,而调节性T细胞增多;外周血ELISA表明,Th1型细胞因子减少,Th2型细胞因子增多.经尾静脉注射转染SPHK1基因的UCMSC后,小鼠免疫调节功能明显增强,因此,结果提示具有SPK活性的UCMSC可能成为治疗MS的一种新型生物方法.

摘要： 目的：观察转染鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase-1,SPHK1)活性的脐带间充质干细胞(mesenchymal stem cells derived from human umbilical cord,UCMSC)和UCMSC对多发性硬化的实验动物模型：实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠治疗效果的研究,并探讨其可能的机制. 方法：采用组织块法分离培养UCMSC,运用流式细胞仪检测多种分子表面标志,以确定分离培养出来的细胞符合UCMSC细胞免疫表型,同时对UCMSC进行相关质控工作.携带SPHK1基因的腺病毒载体,滴度为1.2531011/ml.第三代UCMSC复苏在细胞培养皿中,培养基为含10％胎牛血清的DMEM培养基(dulbecco"sminimum essential medium,DMEM).当细胞长满细胞培养皿3/4时,更换血清浓度为5％的DMEM培养基,按照腺病毒滴度,每个细胞培养皿加入16ul携带有SPHK1基因的腺病毒.腺病毒刺激UCMSC48小时后收集UCMSC,然后提取蛋白.之后用westernblot实验方法检测UCMSC中SPHK1的表达,并和未转染病毒的UCMSC、转染未携带SPHK1基因病毒的UCMSC比较.采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG35-55)作为抗原与完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠制作EAE模型,UCMSC-SPHK1组小鼠分别在免疫后第7、14、21、28d通过尾静脉注射转染SPHK1活性的UCMSC(5.53106/只,0.2ml),UCMSC组小鼠尾静脉注射UCMSC(5.53106/只,0.2ml),对照组和EAE组注射同等体积的生理盐水.采用临床评分和脊髓病理切片评估各组小鼠发病情况.免疫组化方法检测各组小鼠脊髓星形胶质细胞酸性蛋白(GFAP)、髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达.流式细胞术检测小鼠脾脏淋巴细胞NK细胞、调节性T细胞CD4+CD25+的表达变化.ELISA检测小鼠外周血细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素17(IL-17)和白介素4(IL-4)的含量. 结果：采用组织块法可方便经济的从脐带中成功分离出间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表达间充质干细胞分子表面标志的CD44,CD29和CD105,并不表达人白细胞抗原-DR、内皮细胞标志的CD31和造血细胞表面抗原的CD45;分离培养的UCMSC没有细菌、真菌、乙肝病毒、HIV病毒和内毒素的污染,可用于接下来的实验.经westernblot分析,转染SPHK1基因的UCMSC明显高表达SPHK1蛋白,而未转染病毒的UCMSC、转染未携带SPHK1基因病毒的UCMSC,SPHK1蛋白表达量明显较低.髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG35-55)与完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠成功制作EAE模型,14天左右小鼠陆续出现神经功能缺失症状.经尾静脉注射干细胞治疗后,UCMSC-SPHK1组小鼠症状明显较UCMSC组小鼠和EAE组小鼠轻,临床评分明显减低.UCMSC-SPHK1组小鼠脊髓HE染色,炎性细胞较UCMSC组小鼠和EAE组小鼠明显减少,脊髓Fast-blue染色显示,髓鞘脱失较另外两组明显减少.各组小鼠脊髓免疫组化对比表明,在GFAP的表达上,UCMSC-SPHK1组小鼠明显少于UCMSC组和EAE组.在MBP表达上,UCMSC-SPHK1组小鼠髓鞘脱失较少,MBP表达量明显多于UCMSC组和EAE组.流式细胞术检测显示,UCMSC-SPHK1组小鼠脾脏淋巴细胞中,NK细胞较UCMSC组和EAE组明显减少,而调节性T细胞CD4+CD25+的表达较上述两组明显增多.外周血ELISA检测显示,UCMSC-SPHK1组小鼠外周血中细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-17表达量较UCMSC组和EAE组减少,而IL-4的表达量较上述两组升高.所有的实验数据都使用SPSS10.0统计软件统计分析,两组间比较采用T检验的方法,多个样本均数之间比较采用单因素方差分析的方法. 结论：转染SPHK1基因的UCMSC明显高表达SPHK1蛋白,具有SPK活性;MOG35-55与完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠成功制作EAE模型;经尾静脉注射转染SPHK1基因的UCMSC后,小鼠症状明显减轻,脊髓炎性细胞明显减少,髓鞘脱失也明显减少,脊髓GFAP表达减少,MBP损失较少.经尾静脉注射转染SPHK1基因的UCMSC后,小鼠脾脏中杀伤性细胞减少,而调节性T细胞增多;外周血ELISA表明,Th1型细胞因子减少,Th2型细胞因子增多.经尾静脉注射转染SPHK1基因的UCMSC后,小鼠免疫调节功能明显增强,因此,结果提示具有SPK活性的UCMSC可能成为治疗MS的一种新型生物方法.

摘要： 目的：观察转染鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase-1,SPHK1)活性的脐带间充质干细胞(mesenchymal stem cells derived from human umbilical cord,UCMSC)和UCMSC对多发性硬化的实验动物模型：实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠治疗效果的研究,并探讨其可能的机制. 方法：采用组织块法分离培养UCMSC,运用流式细胞仪检测多种分子表面标志,以确定分离培养出来的细胞符合UCMSC细胞免疫表型,同时对UCMSC进行相关质控工作.携带SPHK1基因的腺病毒载体,滴度为1.2531011/ml.第三代UCMSC复苏在细胞培养皿中,培养基为含10％胎牛血清的DMEM培养基(dulbecco"sminimum essential medium,DMEM).当细胞长满细胞培养皿3/4时,更换血清浓度为5％的DMEM培养基,按照腺病毒滴度,每个细胞培养皿加入16ul携带有SPHK1基因的腺病毒.腺病毒刺激UCMSC48小时后收集UCMSC,然后提取蛋白.之后用westernblot实验方法检测UCMSC中SPHK1的表达,并和未转染病毒的UCMSC、转染未携带SPHK1基因病毒的UCMSC比较.采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG35-55)作为抗原与完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠制作EAE模型,UCMSC-SPHK1组小鼠分别在免疫后第7、14、21、28d通过尾静脉注射转染SPHK1活性的UCMSC(5.53106/只,0.2ml),UCMSC组小鼠尾静脉注射UCMSC(5.53106/只,0.2ml),对照组和EAE组注射同等体积的生理盐水.采用临床评分和脊髓病理切片评估各组小鼠发病情况.免疫组化方法检测各组小鼠脊髓星形胶质细胞酸性蛋白(GFAP)、髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达.流式细胞术检测小鼠脾脏淋巴细胞NK细胞、调节性T细胞CD4+CD25+的表达变化.ELISA检测小鼠外周血细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素17(IL-17)和白介素4(IL-4)的含量. 结果：采用组织块法可方便经济的从脐带中成功分离出间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表达间充质干细胞分子表面标志的CD44,CD29和CD105,并不表达人白细胞抗原-DR、内皮细胞标志的CD31和造血细胞表面抗原的CD45;分离培养的UCMSC没有细菌、真菌、乙肝病毒、HIV病毒和内毒素的污染,可用于接下来的实验.经westernblot分析,转染SPHK1基因的UCMSC明显高表达SPHK1蛋白,而未转染病毒的UCMSC、转染未携带SPHK1基因病毒的UCMSC,SPHK1蛋白表达量明显较低.髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG35-55)与完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠成功制作EAE模型,14天左右小鼠陆续出现神经功能缺失症状.经尾静脉注射干细胞治疗后,UCMSC-SPHK1组小鼠症状明显较UCMSC组小鼠和EAE组小鼠轻,临床评分明显减低.UCMSC-SPHK1组小鼠脊髓HE染色,炎性细胞较UCMSC组小鼠和EAE组小鼠明显减少,脊髓Fast-blue染色显示,髓鞘脱失较另外两组明显减少.各组小鼠脊髓免疫组化对比表明,在GFAP的表达上,UCMSC-SPHK1组小鼠明显少于UCMSC组和EAE组.在MBP表达上,UCMSC-SPHK1组小鼠髓鞘脱失较少,MBP表达量明显多于UCMSC组和EAE组.流式细胞术检测显示,UCMSC-SPHK1组小鼠脾脏淋巴细胞中,NK细胞较UCMSC组和EAE组明显减少,而调节性T细胞CD4+CD25+的表达较上述两组明显增多.外周血ELISA检测显示,UCMSC-SPHK1组小鼠外周血中细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-17表达量较UCMSC组和EAE组减少,而IL-4的表达量较上述两组升高.所有的实验数据都使用SPSS10.0统计软件统计分析,两组间比较采用T检验的方法,多个样本均数之间比较采用单因素方差分析的方法. 结论：转染SPHK1基因的UCMSC明显高表达SPHK1蛋白,具有SPK活性;MOG35-55与完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠成功制作EAE模型;经尾静脉注射转染SPHK1基因的UCMSC后,小鼠症状明显减轻,脊髓炎性细胞明显减少,髓鞘脱失也明显减少,脊髓GFAP表达减少,MBP损失较少.经尾静脉注射转染SPHK1基因的UCMSC后,小鼠脾脏中杀伤性细胞减少,而调节性T细胞增多;外周血ELISA表明,Th1型细胞因子减少,Th2型细胞因子增多.经尾静脉注射转染SPHK1基因的UCMSC后,小鼠免疫调节功能明显增强,因此,结果提示具有SPK活性的UCMSC可能成为治疗MS的一种新型生物方法.

摘要： 目的：研究姜黄素对链脲霉素(STZ)诱导的糖尿病大鼠糖尿病肾病的改善作用,及其对糖尿病大鼠肾脏鞘氨醇激酶-1-磷酸鞘氨醇(SphK1-S1P)信号通路和肾脏纤维化的抑制作用.方法：本研究采用链脲霉素(STZ)诱导的糖尿病大鼠,观察姜黄素对糖尿病大鼠肾脏功能和病理形态的影响,对大鼠肾组织的SphK1、S1P、FN及TGF-β1等指标的影响.用Real-time PCR和Western blotting的方法检测SphK1,FN和TGF-β1的表达.用LC-MS/MS的方法检测SphK1活性和S1P含量.结果：姜黄素能够明显改善糖尿病大鼠的肾功能与肾病理的变化;明显降低糖尿病大鼠肾脏的SphK1的表达和活性以及S1P的含量,进而抑制SphK1-S1P诱导的FN和TGF-β1的表达.结论：姜黄素对于糖尿病肾病肾损伤的改善作用可能与其影响肾脏SphK1-S1P信号通路密切相关.

摘要： 目的：研究姜黄素对链脲霉素(STZ)诱导的糖尿病大鼠糖尿病肾病的改善作用,及其对糖尿病大鼠肾脏鞘氨醇激酶-1-磷酸鞘氨醇(SphK1-S1P)信号通路和肾脏纤维化的抑制作用.方法：本研究采用链脲霉素(STZ)诱导的糖尿病大鼠,观察姜黄素对糖尿病大鼠肾脏功能和病理形态的影响,对大鼠肾组织的SphK1、S1P、FN及TGF-β1等指标的影响.用Real-time PCR和Western blotting的方法检测SphK1,FN和TGF-β1的表达.用LC-MS/MS的方法检测SphK1活性和S1P含量.结果：姜黄素能够明显改善糖尿病大鼠的肾功能与肾病理的变化;明显降低糖尿病大鼠肾脏的SphK1的表达和活性以及S1P的含量,进而抑制SphK1-S1P诱导的FN和TGF-β1的表达.结论：姜黄素对于糖尿病肾病肾损伤的改善作用可能与其影响肾脏SphK1-S1P信号通路密切相关.

摘要： 目的：研究姜黄素对链脲霉素(STZ)诱导的糖尿病大鼠糖尿病肾病的改善作用,及其对糖尿病大鼠肾脏鞘氨醇激酶-1-磷酸鞘氨醇(SphK1-S1P)信号通路和肾脏纤维化的抑制作用.方法：本研究采用链脲霉素(STZ)诱导的糖尿病大鼠,观察姜黄素对糖尿病大鼠肾脏功能和病理形态的影响,对大鼠肾组织的SphK1、S1P、FN及TGF-β1等指标的影响.用Real-time PCR和Western blotting的方法检测SphK1,FN和TGF-β1的表达.用LC-MS/MS的方法检测SphK1活性和S1P含量.结果：姜黄素能够明显改善糖尿病大鼠的肾功能与肾病理的变化;明显降低糖尿病大鼠肾脏的SphK1的表达和活性以及S1P的含量,进而抑制SphK1-S1P诱导的FN和TGF-β1的表达.结论：姜黄素对于糖尿病肾病肾损伤的改善作用可能与其影响肾脏SphK1-S1P信号通路密切相关.

摘要： 目的：研究姜黄素对链脲霉素(STZ)诱导的糖尿病大鼠糖尿病肾病的改善作用,及其对糖尿病大鼠肾脏鞘氨醇激酶-1-磷酸鞘氨醇(SphK1-S1P)信号通路和肾脏纤维化的抑制作用.方法：本研究采用链脲霉素(STZ)诱导的糖尿病大鼠,观察姜黄素对糖尿病大鼠肾脏功能和病理形态的影响,对大鼠肾组织的SphK1、S1P、FN及TGF-β1等指标的影响.用Real-time PCR和Western blotting的方法检测SphK1,FN和TGF-β1的表达.用LC-MS/MS的方法检测SphK1活性和S1P含量.结果：姜黄素能够明显改善糖尿病大鼠的肾功能与肾病理的变化;明显降低糖尿病大鼠肾脏的SphK1的表达和活性以及S1P的含量,进而抑制SphK1-S1P诱导的FN和TGF-β1的表达.结论：姜黄素对于糖尿病肾病肾损伤的改善作用可能与其影响肾脏SphK1-S1P信号通路密切相关.

摘要： 目的：研究姜黄素对链脲霉素(STZ)诱导的糖尿病大鼠糖尿病肾病的改善作用,及其对糖尿病大鼠肾脏鞘氨醇激酶-1-磷酸鞘氨醇(SphK1-S1P)信号通路和肾脏纤维化的抑制作用.方法：本研究采用链脲霉素(STZ)诱导的糖尿病大鼠,观察姜黄素对糖尿病大鼠肾脏功能和病理形态的影响,对大鼠肾组织的SphK1、S1P、FN及TGF-β1等指标的影响.用Real-time PCR和Western blotting的方法检测SphK1,FN和TGF-β1的表达.用LC-MS/MS的方法检测SphK1活性和S1P含量.结果：姜黄素能够明显改善糖尿病大鼠的肾功能与肾病理的变化;明显降低糖尿病大鼠肾脏的SphK1的表达和活性以及S1P的含量,进而抑制SphK1-S1P诱导的FN和TGF-β1的表达.结论：姜黄素对于糖尿病肾病肾损伤的改善作用可能与其影响肾脏SphK1-S1P信号通路密切相关.

摘要： 本发明属于医药领域，具体涉及羧胺三唑类化合物或其盐作为鞘氨醇激酶2(SPHK2)抑制剂的应用。羧胺三唑类化合物或其药学上可接受的盐具有高效的选择性SPHK2抑制作用，能够用作SPHK2相关疾病、特别是肾纤维化的预防和/或治疗剂。

摘要： 本发明提供了属于生物医药技术领域，具体涉及鞘氨醇激酶1及其融合蛋白及其用途，一种鞘氨醇激酶1或具有其活性的氨基酸序列在制备用于预防和/或治疗肥胖、高血脂症或糖尿病的蛋白质类药物中的用途。本发明还提供了一种蛋白质类药物，所述蛋白质类药物包含鞘氨醇激酶1或具有其活性的氨基酸序列。本发明还提供了上述蛋白质类药物、编码基因、表达构建体、所述的宿主细胞在制备用于预防和/或治疗肥胖、高血脂症或糖尿病的药物中的应用。本发明人发现鞘氨醇激酶1及其融合蛋白具有显著的降血糖作用和减轻体重作用，可用于制备肥胖等代谢性疾病的控制和糖尿病的蛋白质类药物。

摘要： 本发明涉及用于治疗受抑制Sph激酶1影响的疾病的式(I)化合物及其生理学可接受的盐、衍生物、前药、溶剂化物、互变异构体和立体异构体、包括其所有比例的混合物，其中R

摘要： 本发明公开了一种鞘氨醇激酶激动剂K6PC‑5的合成方法，属于有机合成技术领域，所述合成方法的具体步骤为：(1)以辛酰氯(化合物II)为原料，在三乙胺作用下，在二氯甲烷中反应得到中间体III；(2)中间体III与丝氨醇反应得到化合物I，即所述激动剂K6PC‑5。本发明合成方法一种操作简单，经济高效的可用来大规模生产的合成方法，一锅法的使用避免了中间体III形成后过度的暴露在空气中，降低了其变质的可能性，使得整个操作安全可靠，快速高效。

摘要： 本发明属于医药领域，具体涉及羧胺三唑类化合物或其盐作为鞘氨醇激酶2(SPHK2)抑制剂的应用。羧胺三唑类化合物或其药学上可接受的盐具有高效的选择性SPHK2抑制作用，能够用作SPHK2相关疾病、特别是肾纤维化的预防和/或治疗剂。

摘要： 本发明涉及一种鞘氨醇激酶1抑制剂在制备用于预防和/或治疗脑出血后继发性脑损伤的药物中的应用，属于医药技术领域。本发明提供一种鞘氨醇激酶1抑制剂在制备用于预防和/或治疗脑出血后继发性脑损伤药物中的应用，将现有的鞘氨醇激酶1抑制剂5C应用于制备预防和/或治疗脑出血后继发性脑损伤的药物方面，不仅为制备预防和/或治疗脑出血后继发性脑损伤的药物提供了一种新来源，同时也发掘出了鞘氨醇激酶1抑制剂5C的新的药用价值。本发明技术受广西科技基地与人才专项基金(桂科AD18281013)、广西自然科学基金面上项目(2020GXNSFAA259036)广西自然科学基金青年基金(2018GXNSFBA138046)资助。所述鞘氨醇激酶1抑制剂的结构式如下所示，

摘要： 本发明提供了属于生物医药技术领域，具体涉及鞘氨醇激酶1及其融合蛋白及其用途，一种鞘氨醇激酶1或具有其活性的氨基酸序列在制备用于预防和/或治疗肥胖、高血脂症或糖尿病的蛋白质类药物中的用途。本发明还提供了一种蛋白质类药物，所述蛋白质类药物包含鞘氨醇激酶1或具有其活性的氨基酸序列。本发明还提供了上述蛋白质类药物、编码基因、表达构建体、所述的宿主细胞在制备用于预防和/或治疗肥胖、高血脂症或糖尿病的药物中的应用。本发明人发现鞘氨醇激酶1及其融合蛋白具有显著的降血糖作用和减轻体重作用，可用于制备肥胖等代谢性疾病的控制和糖尿病的蛋白质类药物。

摘要： 本文公布了(+)‑2‑莰醇在制备促进鞘氨醇激酶‑1和/或BDNF(脑源性神经营养因子)表达上调的药物中的应用，在本文中，(+)‑2‑莰醇可以用于制备促进鞘氨醇激酶‑1和/或脑源性神经营养因子表达上调的药物，该药物可以诱发星形胶质细胞扩散和迁移、少突细胞分化和生存、神经突生长和神经再生，并且可以促进脑源性神经营养因子的表达上调，促进神经元的存活和轴突的生长，抑制梗死体积扩大，实现在防止梗塞面积的进一步扩大同时对直接损伤部位达到修复损伤的功效，以彻底解决脑损伤，使得其远期治疗效果显著提升。

摘要： 本发明提供了一种鞘氨醇激酶抑制剂在制备治疗肝纤维化药物中的应用，所述鞘氨醇激酶抑制剂为SphK1抑制剂5C或SphK2抑制剂ABC294640或SphK抑制剂SK I‑II。通过利用SphK抑制剂制备的药物来阻断促进肝纤维化的炎症反应和胶原沉积，从而抑制了肝星状细胞的活化、缓解了肝纤维化的病理进程，在根本上遏制了肝纤维化的发展。本发明为制备治疗肝纤维化的药物提供了一种新的药物来源。本发明技术受国家自然科学基金重点项目（81530102）、广东省自然科学基金重点项目（2016A030311014）、广东省科技计划（2017A020211007）资助。

摘要： 提供了独特地抑制1型鞘氨醇激酶(SphK1)并且可用于多种应用的新的组分，所述应用包括：杀死或损伤癌细胞，诱导细胞凋亡，抑制癌细胞、白血病的生长、转移和其中化疗抗性的产生，增加抗癌试剂的有效性，减弱免疫反应性，抑制癌细胞中的生存信号，和减少多发性硬化的症状。