脐带

摘要： 背景:多系分化应激耐受(multilineage-differentiating stress-enduring,Muse)细胞是一种具有自我更新和多向分化潜能、可向3个胚层分化的细胞,并且具有非致瘤性和低端粒酶活性,是组织工程、细胞移植及基因治疗领域的理想种子细胞,为临床上多种疾病的治疗提供了广阔的前景.目的:探讨脐带间充质干细胞与脂肪间充质干细胞分选获得的Muse细胞的生物学特性,为临床研究获得足量的Muse细胞提供实验数据.方法:胰酶长时间消化处理脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞,锥虫蓝染色及流式细胞仪检测比较不同消化时间下两种细胞的存活率与SSEA-3表达阳性率;通过悬浮贴壁法获取Muse细胞,碱性磷酸酯酶染色检测获取Muse细胞的多能干性,Muse细胞在不同诱导分化液作用下进行多系分化,油红O、茜素红、Von Kossa染色检测比较成脂、成骨诱导分化能力,RT-PCR检测多能干细胞标志基因Oct-3/4,Nanog,SSEA-3的表达及Muse细胞诱导分化后双皮质素、神经元特异性烯醇化酶、脂蛋白脂肪酶、骨桥蛋白、甲胎蛋白的表达变化.结果 与结论:①随着胰酶消化时间的延长,脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞存活率下降,SSEA-3阳性率上升;②悬浮贴壁获得的Muse细胞碱性磷酸酯酶染色呈阳性反应,间充质干细胞碱性磷酸酯酶染色阴性;③Muse细胞SSEA-3、Nanog、Oct-3/4基因表达水平明显高于间充质干细胞,与脐带来源Muse细胞相比,脂肪来源Muse细胞Nanog、Oct-3/4基因表达增加;油红O、茜素红、Von Kossa染色结果显示Muse细胞成脂、成骨能力高于间充质干细胞;④间充质干细胞及Muse细胞在成脂、成骨诱导培养液、神经元细胞诱导液、肝细胞诱导液作用下分化效率不一样,但均高表达脂蛋白脂肪酶、骨桥蛋白、神经元特异性烯醇化酶、双皮质素及甲胎蛋白,Muse细胞相关基因表达高于间充质干细胞;⑤实验结果证明,脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞在胰酶消化4 h时,SSEA-3阳性率与存活率达到最佳,脂肪间充质干细胞SSEA-3阳性率高于脐带间充质干细胞.脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞分选获得的Muse细胞高表达多能干细胞基因,具有三胚层分化潜能.

摘要： 背景:随着间充质干细胞临床应用研究的深入,间充质干细胞的临床使用方法逐渐发生变化,为增强干细胞在局部组织发挥作用,临床中一般选择干细胞联合凝胶局部使用,而自体富血小板血浆是一种理想的凝胶替代材料.目的:探讨人脐带间充质干细胞促进血小板血浆凝固的机制.方法:①将人脐带间充质干细胞与抗凝血浆混匀,添加氯化钙刺激凝血,记录血浆凝血时间,分析人脐带间充质干细胞数量对血浆凝固时间的影响;②通过流式分析CD142凝血因子在人脐带间充质干细胞内的表达情况,使用CD142抗体预处理人脐带间充质干细胞,验证CD142在人脐带间充质干细胞促进凝血过程中是否发挥作用;③查找数据库分析人脐带间充质干细胞中CD142的表达调控模式,并通过WGCNA方法以及文献语义分析CD142在人脐带间充质干细胞中高表达的机制.结果 与结论:①人脐带间充质干细胞通过表达CD142加速血小板血浆凝固,人脐带间充质干细胞中CD142表达随细胞代次增加而增加;②CD142表达上调是人脐带间充质干细胞自分泌的结果;③CD142能够影响人脐带间充质干细胞趋化性以及定植能力.

摘要： 背景:人脐带间充质干细胞提取方法主要有酶消化法和组织块贴壁法,明确两种方法提取的细胞在二维、三维培养下的生物学特性,对组织工程中种子细胞提取方法及培养方式的选择具有重要意义.目的:比较酶消化法和组织块贴壁法提取的人脐带间充质干细胞在二维、三维培养下的生物学特性.方法:酶消化法和组织块贴壁法分离人脐带间充质干细胞,扩增培养至第3代进行二维、三维培养;扫描电镜观察细胞球表征;死活染色观察细胞球存活情况;Alamar Blue检测细胞增殖能力;流式细胞术检测免疫表型CD34、CD44、CD45、CD90、CD105的表达;免疫荧光、免疫印迹检测多能性转录因子Sox2、Nanog、Oct4表达.结果 与结论:①酶消化法比组织块贴壁法获取细胞时间更短,二维培养下组织块贴壁法的细胞增殖能力优于酶消化法,但在三维培养条件下细胞增殖缓慢且无差异.三维培养3 d后细胞成紧密球体,存活良好.②两种方法提取的细胞在二维、三维培养条件下均表达CD44、CD90、CD105,不表达CD34、CD45.二维培养下,酶消化法提取细胞的CD105表达高于组织块贴壁法;三维培养下,酶消化法提取细胞的CD90、CD105表达也高于组织块贴壁法.③二维和三维培养下两种方法提取细胞均表达多能性转录因子Sox2、Nanog、Oct4.二维培养下,酶消化法提取细胞3个转录因子表达均高于组织块贴壁法;但三维培养下,组织块贴壁法提取细胞Sox2的表达高于酶消化法,Nanog、Oct4的表达两组间无差异.

摘要： “脐带挤压与延迟断脐对胎龄<34周早产儿早期预后影响的Meta分析”这篇文章发表在本刊本期第492~499页。该文被评为本期优秀论文。本刊邀请了唐军教授和秦家碧教授为该文做了点评,供读者阅读参考。

摘要： 孕妇32岁,孕30^(+2)周超声检出脐带与羊膜分离(图1A),孕33^(+5)周分离程度加重、脐动脉内径变窄;孕34^(+1)周无明显诱因出现下腹部阵痛,伴少量淡黄色、清亮、稀薄阴道流液,门诊以"先兆早产、胎膜早破"收治入院。既往孕3产0;无羊膜腔穿刺及脐带血穿刺史,孕期血压正常。胎儿超声:脐带表面长约10.8cm羊膜分离,最宽处约3.0cm,脐动脉内径较前变窄,最窄处约0.17cm.

摘要： 目的:探讨脐带来源的间充质干细胞(UC-MSCs)对人卵巢皮质异种移植模型血管生成的影响。方法:对1例捐赠的卵巢皮质进行玻璃化冷冻保存。复苏后移植到重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠背部皮下,配对分为UC-MSCs组和对照组各10只。移植后3,7,14d观察移植物局部血管重建情况,比较各组的卵泡存活、凋亡、微血管密度和微循环血流量情况。结果:移植后7d和14d UC-MSCs组卵泡形态正常率较对照组明显升高(50.2%比38.5%,45.4%比34.0%),卵巢组织中凋亡卵泡占比低于对照组(19.0%比27.2%,31.5%比46.3%)(均P<0.05)。移植后3,7,14d UC-MSCs组的微血管密度均高于对照组(P<0.05)。移植后7,14d UC-MSCs组移植物局部的血流灌流量均高于对照组[(106.4±12.2)PU比(87.8±11.9)PU,(124.5±18.4)PU比(99.3±16.6)PU](P<0.05)。结论:UC-MSCs可加速卵巢移植后局部微血管的生成,降低移植后卵泡发生凋亡比率。

摘要： 间充质干细胞(MSCs)的来源非常广泛。虽然各种组织来源的MSCs生物学特性不尽相同,但在标准培养条件下该类细胞均可以贴壁生长;细胞群体中有95%以上的细胞表达典型的间充质标记分子,如CD73、CD90和CD105,但缺乏造血标记分子CD14、CD19、CD34、CD45和CD79a的表达;特别是均具有分化为成脂细胞、成骨细胞和成软骨细胞的能力。这些性质是国际细胞治疗协会给出的定义该类细胞的最低标准。脐带间充质干细胞是指来源于新生儿脐带组织中的多能干细胞。目前来看,从脐带不同解剖学部位(区室)获得的MSCs的生物学性质也存在差异,其中从脐带华通氏胶中分离获得的华通氏胶间充质干细胞,在增殖能力、分化潜能、免疫调节能力等方面均明显优于其他区室来源的间充质干细胞,是用于组织器官损伤修复及免疫调节的一种理想的“种子”细胞,被认为具有更好的临床应用前景。本文围绕近年来华通氏胶间充质干细胞的分离建系、增殖特性、分化潜能以及临床应用方面的研究进展进行了综述,其中重点介绍了化学诱导分化方案的建立和优化,认为与通过遗传改变诱导重编程方法相比,化学诱导分化方法具有更好的临床应用潜力。

摘要： 目的探讨不同延迟脐带结扎方式对孕周 0.05)。结论延迟脐带结扎与切断脐带脐带挤压均可缩短超早产儿无创辅助通气时长、住院时间,减少住院期间输血次数,降低超早产儿脑室周围-脑室内出血和支气管肺发育不良的发生率。

摘要： 目的本实验将具有多向分化潜能的人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)作为种子细胞,诱导分化为组织工程脂肪,探讨其在脂肪移植中提高脂肪存活率的能力。方法选取健康雄性BALB/c裸鼠30只,随机分为7、14、28 d组,每组10只;选取健康雄性SD大鼠10只,脱椎处死后按照常规方法提取肠系膜、腹股沟处脂肪颗粒。培养hUC-MSCs并进行成脂诱导后混合大鼠脂肪颗粒移植于3组裸鼠左侧腹部筋膜下作为实验侧,将相同剂量的单纯脂肪颗粒移植于右侧腹部筋膜下作为对照侧。移植后对3组裸鼠的移植脂肪进行组织病理学检测,并比较移植脂肪组织的质量维持率。结果7、14及28 d组裸鼠间,实验侧移植脂肪组织质量维持率逐渐降低(F=58.47,P<0.05),对照侧移植脂肪组织质量维持率也逐渐降低(F=225.28,P<0.05);在3组裸鼠中,实验侧移植脂肪组织质量维持率均显著高于对照侧(F=1490.66~2142.95,P<0.05)。结论hUC-MSCs来源的脂肪细胞与天然的脂肪细胞颗粒混合后移植可以有效提高移植后脂肪细胞的存活率。本研究为以hUC-MSCs作为种子细胞的组织工程脂肪在脂肪移植中的应用奠定了实验基础。

摘要： 目的:通过观察妊高征患者胎儿脐带血管的胶原纤维分布情况,探究妊高征患者对胎儿脐带血管顺应性的影响及其临床意义。方法:收集胎儿脐带34条,其中来自健康孕妇17例,妊高征患者17例,取不同部分(胎盘端、中间部分、胎儿端)脐带组织,固定、脱水、包埋,制成石蜡切片,对胎儿脐带血管组织中的胶原纤维使用masson染色法进行染色,使用中性树胶封片。采用Image-pro Plus图像分析软件,对脐动脉和脐静脉的中膜厚度和胶原纤维密度进行检测。结果:妊高征患者胎儿脐动脉和脐静脉较正常孕妇胎儿脐动脉和脐静脉胶原纤维增多。结论:妊高征的患者血管顺应性变化与脐带血管中膜胶原纤维的变化密切相关。

摘要： 脐带、胎盘异常是胎儿死亡最常见的原因之一,本文对本院65例因脐带、胎盘异常而死亡的围产儿进行尸检,探讨脐带、胎盘异常与胎儿死亡的关系。

摘要： 早在1960年第一次冠状动脉旁路移植手术就揭开了心肌缺血血运重建的历史,这50年来临床心血管医学积累了很多经验,但是都不能从根本上解决血管再生的问题[1].以往的研究表明,内皮细胞是受损的血管内皮细胞和新生血管形成修复的重要参与者,并可能提高血管相关疾病如冠心病患者的心肌收缩功能和灌注能力.然而,内皮细胞治疗的一大障碍就是很难获得足够的细胞.虽然,内皮细胞可以在体外培养扩增,但随着培养代数的增加会逐渐失去其增殖潜力及功能.因此,找到可替代内皮细胞的种子细胞已成为解决问题的关键.发现Apelin可以操控干细胞定向血管分化。此外，随着Apelin浓度的增加，其诱导分化能力逐渐提高。因此，apelin在血管再生的发展中起到了重要作用。研究不仅揭示了Apelin可以作为一种新的促血管生成因素，同时有助于血管再生医学的进步。

摘要： 本发明提供一种有效降低脐带血采集污染率的脐带深度消毒方法及其应用，属于脐带血采集前消毒处理技术领域。一种有效降低脐带血采集污染率的脐带深度消毒方法，包括以下步骤：(1)将脐带放在无菌巾上，用含消毒剂的纱布对脐带进行包裹消毒；(2)另取含消毒剂的纱布，选择胎盘断端的脐带4～5cm位置作为穿刺部位，对穿刺部位擦拭消毒，由脐带胎盘短端向胎盘方向擦拭穿刺点，不能来回擦拭。本发明所选用的材料为含消毒剂的纱布或有尾纱条，材料容易获得。本消毒方法操作的用时不超过3分钟，不会对医护人员正常的治疗措施造成影响，也不会对脐带血的质量造成影响。

摘要： 本发明属于脐带间充质干细胞应用领域，特别是涉及一种脐带间充质干细胞用溶液及其应用、用于治疗溃疡性结肠炎疾病的脐带间充质干细胞制剂及其制备方法和应用。本发明提供了一种脐带间充质干细胞用溶液，所述脐带间充质干细胞溶液包括临床级DMSO、人血白蛋白、低分子右旋糖酐、海藻糖、褪黑素和复方电解质溶液。上述溶液能够有效稳定经过冻存的脐带间充质干细胞的细胞数量，还能够有效提高经过冻存的脐带间充质干细胞的细胞活力，同时能够维持经过冻存的脐带间充质干细胞的免疫抑制功能。便于含有脐带间充质干细胞的溶液进行长途运输和使用，能够有效促进脐带间充质干细胞的工业化生产和使用。

摘要： 本发明是关于一种脐带组织冻存液及其制备方法、脐带组织的冻存方法及培养方法。所述脐带组织冻存液由人自体血清、人血白蛋白和助剂组成；助剂由维生素K2、海藻糖、EGF和BFGF中的至少三种组成；制备方法是将人自体血清、20％人血白蛋白和助剂中的各组分混合均匀，得脐带组织冻存液；使用脐带组织冻存液冻存脐带组织；将冻存的脐带组织从液氮中取出，37°C水浴中融化后细胞培养。所要解决的技术问题是如何提供一种脐带组织冻存液使得由其冻存的脐带组织在融化后直接进行细胞培养，而无需清洗；且由其冻存的脐带组织增殖能力强，由其培养的原代细胞数量多，活率高，增殖能力不会随冻存时间增加而衰减；且成本经济，快捷高效，从而更加适于实用。

摘要： 本发明公开了一种免疫调节功能增强型脐带间充质干细胞、干细胞制剂及脐带间充质干细胞的制备方法。本申请通过分离脐带组织，将获得的间充质干细胞种子细胞进行细胞因子分泌水平的检测，对符合要求的种子细胞给与添加了炎性因子组合的特定培养基进行传代培养，从而获得免疫调节功能增强型脐带间充质干细胞。上述制备方法制得的间充质干细胞强化了其免疫调节功能，对免疫调节功能紊乱人群及自身免疫性疾病的治疗更具有针对性。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体地说，涉及一种基于脐带干细胞和脐带干细胞外泌体的复合水凝胶、其制备方法及应用。所述的复合水凝胶包括脐带干细胞、脐带干细胞外泌体和凝胶材料，其中所述的脐带干细胞、脐带干细胞外泌体和凝胶材料的体积比为1：1：2～4。本发明所提供的复合水凝胶可缓慢释放脐带干细胞外泌体，延长外泌体在创伤表面的驻留时间，加快伤口的修复愈合。同时，本发明通过在培养基中添加脐静脉内皮细胞外泌体提高脐带间充质干细胞的产量及活性；通过在培养基添加VCAM1试剂，提高脐带间充质干细胞外泌体的产量；通过对脐带间充质干细胞修饰使其高表达miR‑525‑3p后提高外泌体活性，进而促进外泌体对皮肤的修复作用。

摘要： 本发明公开提供了一种改良人脐带间充质干细胞培养基和人脐带间充质干细胞的分离纯化方法，所述培养基包括基础培养基和添加物，所述基础培养基为UltraCulture无血清培养基，添加物各组分及浓度为：1.0%‑5.0%血清替代物，1.0‑10.0mM烟酰胺，0.5‑5nM丙酮酸钠，1%非必需氨基酸，1%谷氨酰胺。本发明还公开了一种人脐带间充质干细胞的分离纯化方法，即采用组织培养法结合混合酶消化法，可快速、高效分离得到数量大，纯度高，状态好的脐带间充质干细胞，既缩短原代培养时间，又简便易操作。利用本发明可提高脐带组织的利用率和间充质干细胞得率，并且细胞纯度高，活性好，可满足临床应用的要求。

摘要： 本发明公开了一种多肽及其促进脐带MSCs增殖、制备脐带MSCs培养基的用途。本发明提供了一种氨基酸序列为VFGWMTED的多肽，该多肽在体外可以有效促进脐带MSCs增殖，具有开发成脐带MSCs增殖培养基的应用前景。

摘要： 本实用新型公开了一种用于水下充油式脐带缆箱的密封装置及其脐带缆箱，包括锁紧螺母、弹性密封垫和可密封焊接在脐带缆箱的出入口的密封座，密封座内设有可套设在脐带缆外的密封座孔，弹性密封垫内设置有可套设在脐带缆外的密封垫孔，锁紧螺母内设置有可套设在脐带缆上的锁紧螺母孔，密封座孔包括一端的锥形孔，锁紧螺母一端与密封座孔螺纹配合以通过将弹性密封垫挤入锥形孔内以密封密封座孔。本实用新型可确保脐带缆箱工作效率、可靠性均大幅提高，完全克服了现有方案安装困难、工作效率低下、不能通过实验室检测等致命缺点。

摘要： 本实用新型公开了一种用于脐带血待验罐内固定脐带血架的底槽，脐带血待验罐为圆筒形，底槽放入脐带血待验罐中，底槽包括与脐带血待验罐的罐底相匹配的圆形底板，固定在圆形底板上的方形框架，方形框架的中间设置十字型间隔板，十字型间隔板将方形框架内部分为相互独立的四个主存放空间，在方形框架外侧还固定有上部开敞的长方形框架的副存放空间，副存放空间也坐落在圆形底板上，在与圆形底板接触的主存放空间和副存放空间的各直角处均设有液氮渗入口。存放架为导热好的金属材质。本实用新型操作使用方便、安全可靠，可大幅提升脐带血放置环境，让脐带血摆放更加规律；同时可随时补充待验罐内的液氮含量。

摘要： 本实用新型公开了一种含有脐带血干细胞的脐带血样的冻存装置，包括运载车体，所述运载车体内部一侧设有液氮存放室，所述运载车体内部另一侧设有冻存室，所述冻存室数量设置为四个，四个所述冻存室均匀分布，所述液氮存放室内部设有液氮储罐，所述液氮存放室内壁一侧固定连接有导气管，所述导气管一端延伸至其中一个所述冻存室内部，所述液氮储罐数量设置为两个，两个所述液氮储罐输出端均与导气管相连通，两个所述液氮储罐输出端与导气管之间均固定连接有控制阀。本实用新型通过设置四个相互连通的冻存室，并通过封堵板对导气孔进行开关控制，能够实现对相应冻存室的隔离，可避免提取血样时低温氮气大量逸出，有利于降低装置内部的液氮损耗量。