实验性自身免疫性脑脊髓炎

摘要： 背景:神经营养因子表达减少和再生抑制因子表达增多是神经损伤的主要机制,前期研究显示线粒体分裂抑制剂1(Mdivi-1)能明显降低多发性硬化模型小鼠的临床症状评分和病理学损伤,然而其对神经保护的作用仍需进一步研究。目的:观察实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型神经元和轴突的状态,评估线粒体分裂抑制剂1的神经保护作用。方法:C57BL/6小鼠经髓鞘少突胶质细胞糖蛋白第35-55位肽片段(MOG35-55)免疫制备实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型,随机分为模型对照组和线粒体分裂抑制剂1干预组。于免疫后第28天麻醉后处死小鼠,免疫荧光染色分析脊髓组织中神经元胞体和突触的状态、动力相关蛋白1磷酸化水平以及神经营养因子、再生抑制因子及其信号通路分子的表达。结果与结论:①与模型对照组相比,线粒体分裂抑制剂1干预组小鼠脊髓组织神经元特异性核蛋白标记的神经元数量较多、胞体形态完整,突触素标记的突触明显更长,中分子质量神经丝蛋白缺失率明显较低,动力相关蛋白1磷酸化水平较低;②线粒体分裂抑制剂1干预可明显促进胶质细胞源性神经营养因子、睫状神经营养因子和脑源性神经营养因子的表达;③线粒体分裂抑制剂1干预可明显降低小鼠髓鞘相关糖蛋白、轴突生长抑制因子A、轴突生长抑制因子蛋白受体、p75神经营养因子蛋白受体、Rho相关蛋白激酶Ⅱ的表达量;④提示线粒体分裂抑制剂1能抑制动力相关蛋白1磷酸化水平,提高神经营养因子蛋白的表达水平,降低再生抑制因子及相关信号通路分子蛋白的表达,进而降低脊髓神经元胞体、轴突和囊胞的损伤。

摘要： 目的生酮饮食已被报道具有神经保护作用,但其在多发性研究化中的作用机制尚不明确。文章旨在探讨生酮饮食(KD)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的治疗作用及其对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响。方法C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为对照组、EAE模型组(EAE模型组)、KD治疗组(KD组)和芬戈莫德(Fingolimod,FTY720)组,每组各10只。采用5分法评估小鼠神经功能,采用流式细胞仪检测脾淋巴细胞Th17和Treg细胞比例,采用酶联免疫吸附法检测白细胞介素(IL)-4、IL-17A、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素γ(INF-γ)水平,采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法检测NOD样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和半胱天冬酶-1(Caspase-1)水平,采用Okuda标准病理组织炎症评分评估脑脊髓炎症程度。结果EAE模型组神经功能评分、炎症评分、Th17比例、TNF-α水平、IL-17A水平、INF-γ水平、NLRP3、ASC和Caspase-1mRNA表达水平显著高于对照组、KD组和FTY720组(P0.05)。EAE模型组IL-4、Treg水平低于对照组、KD组和FTY720组(P0.05)。结论KD可改善EAE模型小鼠的神经功能评分,其作用机制可能是通过抑制NLRP3炎性小体减轻中枢系统免疫炎症反应。

摘要： 多发性硬化(multiple sclerosis,MS)是一种由免疫介导的中枢神经系统(central nervous system,CNS)慢性炎症性疾病,受多种病理生理机制调控。MS临床表型主要包括复发缓解型(relapsing-remitting MS,RRMS)、原发性进展型(primary progressive MS,PPMS)、继发性进展型(secondary-progressive MS,SPMS)和进行性复发型(progressive relapsing MS,PRMS)四种类型,其中以RRMS最为常见。MS发病原因不明,不能治愈,患者需接受长期治疗。动物模型的应用在MS防治药物的临床前研究中发挥了重要作用。目前,用于研究MS的动物模型主要分为实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)模型、毒素诱导的脱髓鞘模型和病毒诱导的脱髓鞘模型三种,以EAE模型应用最为广泛。三种动物模型又因其诱导方式和动物种类的不同呈现不同的特点,并对应MS的不同临床分型。研究人员针对其特定的临床分型,采用合适的动物模型进行药物研发,将有助于开发出更具针对性和潜力的治疗药物,使MS治愈成为可能。

摘要： 目的:探讨苦参素通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠巨噬细胞M1/M2极化的影响。方法:50只雌性C57BL/6小鼠分为对照组、EAE组、醋酸泼尼松(PA)组、苦参素组及激动剂组,每组各10只,除对照组外均建立EAE模型。于发病日开始给药干预,苦参素组腹腔注射200 mg/kg苦参素注射液,EAE组和对照组腹腔注射10 mL/kg生理盐水,激动剂组腹腔注射200 mg/kg苦参素注射液+2 mg/kg p38MAPK特异性激动剂茴香霉素,PA组灌胃6 mg/kg PA溶液,1次/d,连续给药14 d。取脊髓组织,采用HE染色及LFB染色检测炎性细胞浸润、髓鞘脱失情况;免疫荧光双染法检测M1型、M2型巨噬细胞,qRT-PCR检测iNOS、TNF-α、精氨酸酶-1(Arg-1)、IL-10 mRNA表达情况,Western blot法检测p38MAPK、p-p38MAPK蛋白表达情况。结果:与EAE组比较,PA组、苦参素组及激动剂组脊髓组织炎性细胞浸润评分、髓鞘脱失评分均降低,但仍高于对照组,且PA组苦参素组>激动剂组(P<0.05)。结论:苦参素可抑制脊髓组织炎症及髓鞘脱失,诱导巨噬细胞向M2型极化,其作用机制可能与抑制p38MAPK磷酸化有关。

摘要： 目的探讨塞来昔布对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型小鼠脊髓中Th1/Th17细胞分化的抑制作用。方法将36只C57BL/6小鼠随机分为对照组(等体积生理盐水)、模型组(等体积生理盐水)、塞来昔布组(5 mg/kg),各12只。皮下注射髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG_(35-55))混合乳剂以复制EAE小鼠模型。建模成功后,各组小鼠灌胃给予相应药物或生理盐水,每天1次,连续35 d。对小鼠进行神经功能缺损评分;光学显微镜下观察小鼠脊髓髓鞘脱失程度;采用流式细胞仪测定小鼠脊髓中CD_(4)^(+)T细胞与CD_(8)^(+)T细胞占比,分析CD_(4)^(+)T细胞的分化程度;采用酶联免疫吸附法测定小鼠脊髓中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平;采用Western blot法测定小鼠脊髓中环氧合酶2(COX-2)、核因子κB(NF-κB)、含NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)蛋白表达水平。结果与模型组比较,塞来昔布组小鼠同时间点神经功能缺损评分显著降低,小鼠脊髓中CD_(4)^(+)T细胞占比,CD_(4)^(+)T细胞中Th1与Th17细胞占比,TNF-α,IL-6,IL-1β水平,以及COX-2,p-NF-κB,NLRP3蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。模型组小鼠脊髓髓鞘脱失严重,塞来昔布组虽可见部分髓鞘破坏,但整体染色更深,且髓鞘空泡区域较少。结论塞来昔布可在一定程度上改善模型小鼠EAE症状,其机制可能与抑制COX-2活性,减少CD_(4)^(+)T细胞向Th1与Th17亚型分化,降低TNF-α,IL-6,IL-1β等炎性细胞因子水平有关。

摘要： 目的探讨在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠和健康对照小鼠不同中枢神经系统区域和在不同神经功能评分时维生素D受体(VDR)表达量的差异。方法按Weaver’s 15分神经功能评分法将EAE小鼠分为0分组、高分组、低分组,采用透射电子显微镜观察各组小鼠髓鞘结构;采用Western Blot测定EAE高分组小鼠和健康对照组小鼠皮质、白质、小脑、脑干、脊髓组织的VDR蛋白表达量;根据结果,选择在脊髓组织进一步对健康对照组与EAE各组间进行VDR蛋白表达量的比较。结果在透射电子显微镜下观察EAE 0分组、高分组、低分组小鼠髓鞘结构,对比健康对照组都有不同程度的破坏:0分组、低分组髓鞘环形结构存在,高分组髓鞘环形结构消失。在皮质、白质、小脑、脑干、脊髓组织中,EAE组的VDR蛋白表达均较健康对照组低(皮质P=0.893;白质P=0.767;小脑P=0.225),其中脑干和脊髓的VDR蛋白表达明显低于健康对照组(P=0.046;P=0.009);在脊髓组织中,EAE 0分组、高分组、低分组VDR蛋白表达都低于健康对照组(P=0.005;P=0.009;P<0.0001);高分组较0分组低(P=0.716),低分组较0分组进一步下降(P=0.003),同时低分组较高分组也呈下降趋势(P=0.013)。结论EAE小鼠不同中枢神经系统区域VDR蛋白表达有差异,不同神经功能评分组VDR蛋白表达有差异。

摘要： 目的:探讨维生素D(VD)干预对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的保护机制。方法:采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白MOG35-55和百日咳毒素(PTX)免疫小鼠建立EAE模型,将EAE小鼠随机分为VD治疗组(VD组)和非VD治疗组(NOVD组),每组24只,按照Benson评分标准评估EAE小鼠神经功能。ELISA检测血清IFN-γ、IL-10和25-羟基维生素D3水平。RT-qPCR检测EAE小鼠脊髓miR-326和miR-96表达。结果:免疫后第10、16天,VD组小鼠神经功能评分显著低于NOVD组(P<0.05)。与NOVD组相比,VD组小鼠血清25-羟基维生素D3、IL-10水平显著升高(P<0.000 1),IFN-γ水平显著降低(P<0.000 1),脊髓miR-326和miR-96表达显著降低(P<0.01)。结论:VD可通过减少IFN-γ分泌促进IL-10产生,下调miR-326和miR-96表达减轻EAE症状,改善神经功能。

摘要： 目的探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)促进活化T淋巴细胞凋亡发生的作用特点及机理,在此基础上观察Res对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的治疗效果。方法Annexin V/PI双染法考察Res对小鼠原代naive T淋巴细胞和anti-CD3/anti-CD28活化的T淋巴细胞凋亡的影响。体外在CD4^(+)T淋巴细胞和Jurkat细胞上建立活化诱导的细胞死亡模型,PI单染法或Annexin V/PI双染法考察Res促进T淋巴细胞活化诱导的细胞死亡发生的时间效应,Western blot法检测细胞内凋亡相关蛋白的变化情况。利用MOG35-55诱导小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎模型,观察Res治疗效果,并检测模型组和给药组小鼠CD4^(+)T淋巴细胞凋亡情况。结果Res不影响na ve T细胞的存活,而促进活化T淋巴细胞的凋亡。随着Res浓度的增加,T淋巴细胞活化诱导的细胞死亡发生明显增加,凋亡相关蛋白PARP、Caspase-3的剪切增多。此外,Res可以延迟小鼠EAE发病时间,降低临床评分,减少脊髓中炎性细胞的浸润,并且给药组小鼠CD4^(+)T淋巴细胞对活化诱导的细胞死亡更加敏感。结论Res促进T淋巴细胞活化诱导的细胞死亡并能改善小鼠EAE。

摘要： 目的:研究维生素D受体(VDR)启动子DNA甲基化对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)病程的影响。方法:C57BL/6雌性小鼠,分为对照组(n=12)和EAE组(n=48),EAE组通过注射MOG35-55建立EAE模型,对照组不予任何处理。EAE组按Weaver’s 15分神经功能评分法分为0分亚组(n=10)、高分亚组(n=10)、低分亚组(n=10)。荧光定量PCR(QPCR)和免疫印迹(WB)检测VDR在各组小鼠脊髓腰段的表达水平;亚硫酸钠测序技术(BSP)检测各组VDR启动子DNA甲基化水平。结果:在透射电镜下观察EAE 0分亚组、高分亚组、低分亚组小鼠髓鞘结构,较对照组都有不同程度的破坏:0分亚组、低分亚组髓鞘环形结构存在,高分亚组髓鞘环形结构消失。在脊髓组织中,EAE 0分亚组、高分亚组、低分亚组VDR蛋白表达都低于对照组(P_(0分亚组)=0.0046;P_(高分亚组)=0.0088;P_(低分亚组)0.05;P_(高分亚组)=0.0439;P_(低分亚组)=0.0349),与0分亚组比较,低分亚组减少明显(P=0.0142)。各组小鼠VDR启动子DNA甲基化率都较低,且无变化趋势,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:VDR在EAE模型的不同神经功能评分亚组之间有表达差异,VDR启动子DNA的甲基化不是导致这些差异的主要原因。

摘要： 目的 探究不同剂量硫辛酸对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠脊髓内核转录因子-κB(NF-κB)的表达的影响.方法 将50％豚鼠全脊髓匀浆诱导的80只Wistar大鼠EAE模型采用随机数字表法分为4组,每组20只,A组为EAE模型组,B、C、D组为硫辛酸干预组,同时选取20只健康Wistar大鼠作为健康对照组(E组),B、C、D组大鼠在免疫第1天开始腹腔注射1 mL的50、100、200μmol/L浓度的硫辛酸进行干预(共21 d);A组和E组每日腹腔注射1 mL生理盐水.比较4组大鼠EAE的发病情况及干预的第7、14、21天的NF-κB阳性细胞及NF-κB mRNA表达、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-10(IL-10)水平.结果 随干预时间的延长,A、B、C、D组大鼠神经功能评分先升高后降低,第14天达到高峰,A组大鼠的神经功能评分最高.且B、C、D组间随着硫辛酸浓度的升高,神经功能评分降低,潜伏期延长,发病率和死亡率降低;A、B、C、D组大鼠IL-2、NF-κB阳性细胞及NF-κB mRNA表达先升高后降低,第14天达到高峰,E组大鼠的IL-2、NF-κB阳性细胞及NF-κB mRNA表达最低,且B、C、D组随着硫辛酸浓度的升高,IL-2、NF-κB阳性细胞及NF-κB mRNA表达降低;IL-10水平先降低后升高,第14天达到最低值,E组大鼠的IL-10水平最高,且B、C、D组随着硫辛酸浓度的升高,IL-10水平升高.结论 随EAE大鼠病情的进展,其神经功能降低,NF-κB阳性细胞及NF-κB mRNA表达升高;不同剂量的硫辛酸均可缓解EAE大鼠病情,且高剂量的硫辛酸作用效果较强,随着硫辛酸剂量的升高,EAE的发病潜伏期延长,NF-κB异常表达及机体炎症反应缓解显著.

摘要： 目的：观察转染鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase-1,SPHK1)活性的脐带间充质干细胞(mesenchymal stem cells derived from human umbilical cord,UCMSC)和UCMSC对多发性硬化的实验动物模型：实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠治疗效果的研究,并探讨其可能的机制. 方法：采用组织块法分离培养UCMSC,运用流式细胞仪检测多种分子表面标志,以确定分离培养出来的细胞符合UCMSC细胞免疫表型,同时对UCMSC进行相关质控工作.携带SPHK1基因的腺病毒载体,滴度为1.2531011/ml.第三代UCMSC复苏在细胞培养皿中,培养基为含10％胎牛血清的DMEM培养基(dulbecco"sminimum essential medium,DMEM).当细胞长满细胞培养皿3/4时,更换血清浓度为5％的DMEM培养基,按照腺病毒滴度,每个细胞培养皿加入16ul携带有SPHK1基因的腺病毒.腺病毒刺激UCMSC48小时后收集UCMSC,然后提取蛋白.之后用westernblot实验方法检测UCMSC中SPHK1的表达,并和未转染病毒的UCMSC、转染未携带SPHK1基因病毒的UCMSC比较.采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG35-55)作为抗原与完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠制作EAE模型,UCMSC-SPHK1组小鼠分别在免疫后第7、14、21、28d通过尾静脉注射转染SPHK1活性的UCMSC(5.53106/只,0.2ml),UCMSC组小鼠尾静脉注射UCMSC(5.53106/只,0.2ml),对照组和EAE组注射同等体积的生理盐水.采用临床评分和脊髓病理切片评估各组小鼠发病情况.免疫组化方法检测各组小鼠脊髓星形胶质细胞酸性蛋白(GFAP)、髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达.流式细胞术检测小鼠脾脏淋巴细胞NK细胞、调节性T细胞CD4+CD25+的表达变化.ELISA检测小鼠外周血细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素17(IL-17)和白介素4(IL-4)的含量. 结果：采用组织块法可方便经济的从脐带中成功分离出间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表达间充质干细胞分子表面标志的CD44,CD29和CD105,并不表达人白细胞抗原-DR、内皮细胞标志的CD31和造血细胞表面抗原的CD45;分离培养的UCMSC没有细菌、真菌、乙肝病毒、HIV病毒和内毒素的污染,可用于接下来的实验.经westernblot分析,转染SPHK1基因的UCMSC明显高表达SPHK1蛋白,而未转染病毒的UCMSC、转染未携带SPHK1基因病毒的UCMSC,SPHK1蛋白表达量明显较低.髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG35-55)与完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠成功制作EAE模型,14天左右小鼠陆续出现神经功能缺失症状.经尾静脉注射干细胞治疗后,UCMSC-SPHK1组小鼠症状明显较UCMSC组小鼠和EAE组小鼠轻,临床评分明显减低.UCMSC-SPHK1组小鼠脊髓HE染色,炎性细胞较UCMSC组小鼠和EAE组小鼠明显减少,脊髓Fast-blue染色显示,髓鞘脱失较另外两组明显减少.各组小鼠脊髓免疫组化对比表明,在GFAP的表达上,UCMSC-SPHK1组小鼠明显少于UCMSC组和EAE组.在MBP表达上,UCMSC-SPHK1组小鼠髓鞘脱失较少,MBP表达量明显多于UCMSC组和EAE组.流式细胞术检测显示,UCMSC-SPHK1组小鼠脾脏淋巴细胞中,NK细胞较UCMSC组和EAE组明显减少,而调节性T细胞CD4+CD25+的表达较上述两组明显增多.外周血ELISA检测显示,UCMSC-SPHK1组小鼠外周血中细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-17表达量较UCMSC组和EAE组减少,而IL-4的表达量较上述两组升高.所有的实验数据都使用SPSS10.0统计软件统计分析,两组间比较采用T检验的方法,多个样本均数之间比较采用单因素方差分析的方法. 结论：转染SPHK1基因的UCMSC明显高表达SPHK1蛋白,具有SPK活性;MOG35-55与完全弗氏佐剂免疫C57BL/6小鼠成功制作EAE模型;经尾静脉注射转染SPHK1基因的UCMSC后,小鼠症状明显减轻,脊髓炎性细胞明显减少,髓鞘脱失也明显减少,脊髓GFAP表达减少,MBP损失较少.经尾静脉注射转染SPHK1基因的UCMSC后,小鼠脾脏中杀伤性细胞减少,而调节性T细胞增多;外周血ELISA表明,Th1型细胞因子减少,Th2型细胞因子增多.经尾静脉注射转染SPHK1基因的UCMSC后,小鼠免疫调节功能明显增强,因此,结果提示具有SPK活性的UCMSC可能成为治疗MS的一种新型生物方法.

摘要： 探讨CD8+CD28-T淋巴细胞在骨髓间充质干细胞治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的免疫调节作用.CD8+CD28-调节性T细胞可能不是MSCs促进EAE小鼠神经功能恢复的主要效应细胞，可能只是起到协同治疗作用。

摘要： 前期的临床研究发现,补肾益髓胶囊(原称二黄胶囊)是治疗多发性硬化(multiple sclerosis,MS)的有效方剂,但其对MS早期出现的轴突损伤和修复是否有作用还不清楚.本实验采用皮下背部注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG)35-55免疫C57BL/6小鼠,制备实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)-即MS模型,并给予补肾益髓胶囊灌胃治疗40d.结果显示补肾益髓胶囊能有效地改善EAE小鼠的临床症状和神经功能,减少发病率及死亡率,延长潜伏期,缩短病程的趋势,减轻髓鞘和轴突的损伤,且能减少脑和脊髓组织中急性轴突损伤的特异性指标淀粉样前体蛋白和神经再生的标志物微管相关蛋白2的表达.提示补肾益髓胶囊防治EAE的作用机制可能与减轻轴突损害和促进其再生修复有关.

摘要： 目的：本研究探讨淫羊藿黄酮(epimedium flavonoids,EF)对模拟多发性硬化的实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠模型的干预并阐明其作用机制.方法：通过经豚鼠全脊髓匀浆免疫Lewis大鼠诱导EAE大鼠动物模型,EF在免疫后当天灌胃给药直至免疫后第14天,借助组织病理染色、酶联免疫吸附法(ELISA)、生化检测和蛋白印迹等方法评价疾病的发生率、严重程度、以及中枢神经系统炎症和神经营养情况。结果:灌胃给予EF(20 and 60mg/kg)可显著降低EAE模型动物的神经功能评分，减轻髓鞘脱失和炎性细胞浸润，抑制星形胶质细胞激活，抑制炎性因子白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)的产生及核转录因子(NF-κB)的表达。同时EF还能增强髓鞘标志蛋白CNPase和神经生长因子的表达，增加少突胶质细胞数量和保护脊髓组织髓鞘和轴突的超微结构。结论：EF能够抑制由部分MBP介导的EAE大鼠模型进展，其机制可能是通过降低神经炎症和增强髓鞘及神经营养作用来实现的，研究结果提示EF很可能对多发性硬化的治疗有较好疗效。

摘要： 目的：建立实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE）大鼠模型，观察其组织病理特征。以Lewis大鼠EAE模型为多发性硬化模型，来研究中药有效成分YH对该疾病模型髓鞘的保护作用及其机制。 rn 方法：采用豚鼠全脊髓匀浆制备抗原免疫Lewis大鼠建立EAE模型。每天监测动物体重和行为学变化。应用HE染色观察脑和脊髓炎性浸润、血管袖套等变化，LFB染色观察脊髓脱髓鞘变化，电子显微镜观察脊髓髓鞘超微结构。并研究中药有效成分YH对EAE大鼠炎性脱髓鞘的干预作用。rn 结果：（1）随着病程进展，EAE模型组大鼠体重明显下降；从第8天起出现行为学异常，神经功能损伤评分逐渐增高，于第12天达峰值。病理形态学检查显示，EAE模型组大鼠脑组织血管周围和脑实质有大量炎性细胞浸润；脊髓腰膨大脊膜出现炎性水肿，并有炎症细胞浸润；脊髓血管周围有大量炎性细胞密集环绕，呈"袖套样"改变；脊髓髓鞘大面积脱失，且髓鞘板层松散。（2）YH灌胃给药能显著增加EAE模型大鼠的体重，延迟发病进程，缓解发病症状。（3）YH能减轻EAE模型大鼠脊髓腰膨大和脑实质炎性浸润和髓鞘脱失的病理变化，保护神经元、少突胶质细胞的正常结构，抑制模型大鼠星形胶质细胞的异常活化。（4）EAE模型大鼠脑和脊髓中炎性因子TNF-α和IL-1β含量明显升高，YH能显著减少TNF-α和IL-1β含量。（5）EAE模型大鼠NF-κB的抑制蛋白IκBα含量降低，间接反映该模型中NF-κB活性增高；YH能增加IκBα含量，提示可能减少NF-κB的活化。（6）EAE模型大鼠脊髓腰膨大中神经生长因子（NGF）和脑源性神经生长因子（BDNF）表达降低；YH能增加NGF和BDNF的含量，提示可能促进髓鞘的再生和修复。rn 结论：采用该模型作为急性MS的研究模型较为理想。中药有效成分YH能改善EAE大鼠模型炎性脱髓鞘变化，减轻神经细胞结构损伤，从而能改善其临床症状。YH保护髓鞘的作用机制主要包括：降低神经炎性反应，减少氧化应激反应，从而减少对髓鞘的直接损伤；并且通过改善中枢神经系统微环境促进髓鞘的再生修复。

摘要： 目的：研究Src抑制的蛋白激酶c底物（SSeCKS)在实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE)进程中的表达情况，探讨其在EAE病理过程中可能的功能及意义，为多发性硬化（MS）和EAE提供新的治疗靶点。

摘要： 实验性自身免疫性脑脊髓炎(expermientalautomimune encephalomyelitis,EAE)是多发性硬化的实验动物模型,经过近2个多世纪的发展,EAE的实验动物模型已较丰富,不同模型的敏感性和临床过程的特点具有多样性.本研究就EAE的发展史和目前不同品系实验动物、不同抗原制备EAE模型的特点做一述评,对未来EAE模型的发展前景进行探讨.

摘要： 目的:观察补肾益髓胶囊对多发性硬化模型实验性自身免疫性脑脊髓炎experi mental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠脑组织中Tau、生长相关蛋白(growth associated protein,GAP)-43及轴突抑制因子NogoA、NgR和RhoA蛋白的影响,探讨其对轴突损伤的保护作用及分子机制.rn 方法:小鼠皮下四点注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(mye-linoligodendrocyte glycoprotein,MOG)35-55与完全弗氏佐剂(Complete Freund's Adjuvant,CFA)的混合抗原,辅以腹腔注射百日咳毒素(pertussis toxin,PTX),建立EAE模型.并连续40d给予小鼠补肾益髓胶囊及激素灌胃治疗.利用Western blot法观察小鼠脑组织中Tau、GAP-43及NogoA、NgR和RhoA蛋白的表达情况.rn 结果:模型组小鼠脑组织中Tau蛋白及NogoA、NgR和RhoA蛋白表达显著升高,与正常对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05).用补肾益髓胶囊治疗后,Tau蛋白及NogoA、NgR和RhoA蛋白表达则明显下调,与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05);GAP-43蛋白则显著上调,与其余三组比较差异均有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05).rn 结论:补肾益髓胶囊能够减轻轴突损伤,促进其修复再生,其作用机制可能是通过下调NogoA、NgR和RhoA蛋白信号通路实现的.

摘要： 目的：探讨电针对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）急性期的治疗效果及其作用机制。方法：采用豚鼠髓鞘碱性蛋白(MBP)与完全福氏佐剂混合免疫Wistar 大鼠制备EAE 模型，观察各组急性期发病情况及血清TNF-α、IL-10 含量的变化。结果：电针及激素组均能明显改善急性期EAE的症状，显著提高血清中IL-10的含量，降低TNF-α的含量，且两者之间没有差异。结论：电针治疗通过提高血清中IL-10 含量，降低TNF-α含量，干预调节Th1/Th2细胞的分化，为电针治疗多发性硬化的作用机理提供实验依据。

摘要： 经粘膜诱导免疫耐受是免疫学领域迅速发展的一个分枝,用于研究并试验性治疗某些器官特异性自身免疫病.这些研究均首先从动物模型开始,应用最多的是实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimentalautoimmuneencephalomyelitis,EAE),或称实验性变态反应性脑脊髓炎(experimentalallergicencephalomyelitis,EAE),是人类多发性硬化症(multiplesclerosis,MS)的动物模型.本文简要介绍了以EAE研究粘膜耐受的概况,可能的机理及应用前景.

摘要： 本发明公开了一种实验大鼠自身免疫性脑脊髓炎多标志物联合检测系统及其检测方法，属于医学检验技术领域，所述系统包括大鼠培养模块、大鼠检测样品采集模块、指标检测模块、数据分析模块；所述大鼠培养模块和大鼠检测样品采集模块数据连接；所述大鼠检测样品采集模块和指标检测模块数据连接；所述指标检测模块和数据分析模块数据连接；大鼠培养模块和数据分析模块数据连接。本发明可以大规模的检测实验大鼠，系统性的进行实验动物管理、样品采集、药品配置，方便海量检测数据的采集和分析，对于自身免疫性脑脊髓炎的研究有重要作用。

摘要： 本发明公开了一种诱导食蟹猴实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型的蛋白和应用。所述的rhMOG30‑154蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明创新使用人源MOG胞外抗原结构域重组人MOG30‑154(以下简称rhMOG30‑154)皮下多点免疫的方法建立与人类病理特征更为相似的复发缓解型食蟹猴EAE动物模型(食蟹猴实验性自身免疫性脑脊髓炎模型)。

摘要： 本发明公开了鼠尾草酚在制备防治实验性自身免疫性脑脊髓炎药物中的应用，以整体动物模型实验，验证了鼠尾草酚不仅能够有效地延缓实验性自身免疫性脑脊髓炎的发生与发展，显著降低外周炎症细胞向中枢神经系统的浸润、减轻脱髓鞘程度，还能促进浸润的巨噬细胞和固有小胶质细胞促炎表型向免疫调节功能的M2表型的转变。此外，鼠尾草酚能抑制Th17细胞分化和STAT3磷酸化，并阻断转录因子NF‑κB核易位。因此，鼠尾草酚用于制备防治自身免疫性疾病如多发性硬化症的药物具有巨大的潜力。

摘要： 本发明涉及医药技术领域，本发明利用600余种FDA批准的小分子药物进行了高通量筛选，发现其中盐酸苯海拉明对CD4+T细胞的抑制作用最明显。本发明进一步构建了实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型(EAE模型)，并采用EAE模型研究盐酸苯海拉明对体内炎症性脱髓鞘损伤的作用，实验发现盐酸苯海拉明具有能够调节TH17细胞分化和体内炎症性脱髓鞘损伤等作用。本发明提供了盐酸苯海拉明在制备预防或治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎药物，以及在制备预防或治疗多发性硬化药物中的应用。

摘要： 本发明公开了5Z‑7‑oxozeaenol在制备治疗自身免疫性脑脊髓炎药物中的应用。申请人所在研究团队经过两年的动物实验发现转化生长因子‑β激活激酶抑制剂5Z‑7‑oxozeaenol能有效改善实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的症状，通过抑制p38MAPK、JNK、ERK通路，减轻中枢神经系统炎症反应，减少免疫细胞分泌炎症细胞因子，抑制脊髓小胶质细胞活化。将5Z‑7‑oxozeaenol能有效治疗EAE，为临床治疗多发性硬化提供新的药物选择。

摘要： 一种小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎模型的建立方法，包括以下步骤：（1）称取6mg多肽于7.2mlPBS搅拌均匀后，再加入7.2mlFCA平均分装在两个20ml玻璃注射器内，中间用胶管连接，冰浴上反复推拉2h成油包水的乳液；（2）每只小鼠于蹊部一点，背部三点皮下注射乳液，每个点位注射0.1ml；（3）随后腹腔注射PTX，用量0.5ml/只，于48h再次腹腔注射PTX，用量0.5ml/只，第7天再次注射PTX，用量0.5ml/只。通过建立小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎模型，可以有效促进临床神经免疫学的研究，通过对EAE发病机制、病情发生发展规律、临床及病理改变、治疗及预防等方面的深入研究，能够为MS的治疗提供充分的实验依据。本发明的方法模型建立效果稳定，临床评分稳定。

摘要： 本发明公开了一种6‑姜酚在制备防治实验性自身免疫性脑脊髓炎药物的应用。以动物模型实验，验证了6‑姜酚能有效改善EAE的临床疾病严重程度，促进髓鞘再生。该防治实验性自身免疫性脑脊髓炎药物是用于防治多发性硬化的药物，6‑姜酚在通过抑制脂多糖的骨髓来源DCs中炎症信号传导的两个调节因子NF‑κB和MAPK的磷酸化来抑制刺激骨髓来源DCs的活化，以此来抑制Th17细胞分化。6‑姜酚能诱导耐受性DCs的表达，从而诱导抗炎细胞因子IL‑10表达。本发明6‑姜酚用于制备防治自身免疫性疾病如多发性硬化症的药物具有巨大的潜力。

摘要： 本发明公开了鼠尾草酚在制备防治实验性自身免疫性脑脊髓炎药物中的应用，以整体动物模型实验，验证了鼠尾草酚不仅能够有效地延缓实验性自身免疫性脑脊髓炎的发生与发展，显著降低外周炎症细胞向中枢神经系统的浸润、减轻脱髓鞘程度，还能促进浸润的巨噬细胞和固有小胶质细胞促炎表型向免疫调节功能的M2表型的转变。此外，鼠尾草酚能抑制Th17细胞分化和STAT3磷酸化，并阻断转录因子NF‑κB核易位。因此，鼠尾草酚用于制备防治自身免疫性疾病如多发性硬化症的药物具有巨大的潜力。

摘要： 本发明公开了一种诱导食蟹猴实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型的蛋白和应用。所述的rhMOG30‑154蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明创新使用人源MOG胞外抗原结构域重组人MOG30‑154(以下简称rhMOG30‑154)皮下多点免疫的方法建立与人类病理特征更为相似的复发缓解型食蟹猴EAE动物模型(食蟹猴实验性自身免疫性脑脊髓炎模型)。

摘要： 本发明涉及医药技术领域，本发明利用600余种FDA批准的小分子药物进行了高通量筛选，发现其中盐酸苯海拉明对CD4+T细胞的抑制作用最明显。本发明进一步构建了实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型(EAE模型)，并采用EAE模型研究盐酸苯海拉明对体内炎症性脱髓鞘损伤的作用，实验发现盐酸苯海拉明具有能够调节TH17细胞分化和体内炎症性脱髓鞘损伤等作用。本发明提供了盐酸苯海拉明在制备预防或治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎药物，以及在制备预防或治疗多发性硬化药物中的应用。