诱导分化

摘要： 背景:小胶质细胞是中枢神经系统最主要的免疫细胞,对研究多种疾病的发生和治疗有重要意义,但体外个体化细胞的获得受限。目的:建立一种新的小胶质细胞诱导培养体系,将小鼠角膜上皮细胞诱导成为小胶质样细胞并对其进行鉴定。方法:裂解2周龄小鼠角膜上皮组织获得上皮细胞,先后加入含有白细胞介素34(100 ng/mL)、集落刺激因子1(5 ng/mL)和转化生长因子β(1 ng/mL)、白细胞介素6(1 ng/mL)、重组血管内皮生长因子(1 ng/mL)的改良培养基,并且持续处理到16 d。通过转录水平、蛋白表达水平、亚细胞定位、流式分析和形态学观察多角度评估诱导后的细胞性质。结果与结论:诱导后获得表达TMEM119、CXCL11、CD11b、CD68小胶质细胞特征分子的细胞,形态学观察、流式分析和荧光检验后确定其表达产物具有较高丰度,与小胶质细胞极为相似。

摘要： 背景:体外人工肝系统已成为临床上非常有效且实用的肝衰竭治疗手段,但仍存在细胞来源有限和获得细胞的功能有限等问题.目的:优化和筛选符合细胞生长需要的明胶-胶原复合凝胶,以复合凝胶为细胞生长的基底材料,探究诱导骨髓间充质干细胞肝向分化的方案.方法:将明胶溶液与胶原溶液按照不同的体积比(1:1、2:1、4:1)混合,分别制备明胶质量浓度为50,100,150,200 g/L的明胶-胶原复合凝胶,通过熔点、微观形貌、吸水率和孔隙率筛选溶液的体积比与明胶的质量浓度,进行后续实验.将大鼠骨髓间充质干细胞接种于复合水凝胶中(实验组),以单独培养的细胞为对照,采用CCK-8法检测细胞增殖;采用两阶段分步诱导方案来诱导两组大鼠骨髓间充质干细胞的肝向分化,于诱导培养的3,7,14,21 d检测上清中白蛋白与尿素的水平.结果 与结论:①对比熔点、微观形貌、吸水率和孔隙率检测结果,当明胶溶液与胶原溶液按照4:1体积比混合、明胶质量浓度为150 g/L时制备的复合凝胶最适宜用于细胞培养.②CCK-8检测显示,实验组培养1,3,5 d的细胞增殖活性低于对照组,此后两组间的差距逐渐减小,至10 d时已无差异.③肝向诱导分化实验显示,随着诱导时间的延长,两组白蛋白合成量逐渐增加,其中实验组14,21 d的白蛋白合成量高于对照组(P0.05).④结果表明,以明胶-胶原复合凝胶为细胞生长的基底材料联合诱导因子可诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞.

摘要： 背景:体外人工肝系统已成为临床上非常有效且实用的肝衰竭治疗手段,但仍存在细胞来源有限和获得细胞的功能有限等问题。目的:优化和筛选符合细胞生长需要的明胶-胶原复合凝胶,以复合凝胶为细胞生长的基底材料,探究诱导骨髓间充质干细胞肝向分化的方案。方法:将明胶溶液与胶原溶液按照不同的体积比(1∶1、2∶1、4∶1)混合,分别制备明胶质量浓度为50,100,150,200 g/L的明胶-胶原复合凝胶,通过熔点、微观形貌、吸水率和孔隙率筛选溶液的体积比与明胶的质量浓度,进行后续实验。将大鼠骨髓间充质干细胞接种于复合水凝胶中(实验组),以单独培养的细胞为对照,采用CCK-8法检测细胞增殖;采用两阶段分步诱导方案来诱导两组大鼠骨髓间充质干细胞的肝向分化,于诱导培养的3,7,14,21 d检测上清中白蛋白与尿素的水平。结果与结论:(1)对比熔点、微观形貌、吸水率和孔隙率检测结果,当明胶溶液与胶原溶液按照4∶1体积比混合、明胶质量浓度为150 g/L时制备的复合凝胶最适宜用于细胞培养。(2)CCK-8检测显示,实验组培养1,3,5 d的细胞增殖活性低于对照组,此后两组间的差距逐渐减小,至10 d时已无差异。(3)肝向诱导分化实验显示,随着诱导时间的延长,两组白蛋白合成量逐渐增加,其中实验组14,21 d的白蛋白合成量高于对照组(P0.05)。(4)结果表明,以明胶-胶原复合凝胶为细胞生长的基底材料联合诱导因子可诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞。

摘要： 目的:观察鼠神经生长因子(NGF)对大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤PC12细胞活性及形态的影响。方法:体外培养PC12细胞,将其分为阴性对照组和诱导分化组。诱导分化组使用浓度为50 ng/ml NGF,阴性对照组加入等量的磷酸盐缓冲液。采用CCK-8实验检测细胞活性。制作细胞爬片后,于显微镜下直接观察活细胞形态。HE染色后,采用Image J软件对图片进行分析。经神经元特异性烯醇化酶(NSE)抗体荧光染色后,于荧光显微镜下观察细胞染色情况。结果:CCK-8实验显示,诱导分化组PC12细胞活性高于阴性对照组(P<0.001)。经Image J软件分析,诱导分化组PC12细胞贴壁面积大于阴性对照组,突起数量多于阴性对照组,轴突长度长于阴性对照组(均P<0.001)。PC12细胞诱导分化后的类神经元样细胞经NSE抗体染色后,在荧光显微镜下可见胞体及轴突均被染色。结论:鼠NGF诱导后PC12细胞活性增加,细胞贴壁面积增加,细胞轴突增多、增长,为后续研究提供了基础。

摘要： 目的:探讨增龄对大鼠心成纤维细胞(CFs)生长和功能的影响。方法:体外培养新生、1月龄、3月龄大鼠CFs,利用MTT法检测细胞生长能力变化;免疫荧光、免疫细胞化学检测干细胞表面标志物nanog、sox2、oct4、scal-1和c-kit的表达差异,利用成脂、成骨、成心肌诱导液检测各组CFs多向分化能力差异。结果:培养的各组CFs均表达盘状结构域受体2(DDR2),符合心成纤维细胞特性;贴壁2~4d时,各组CFs处于对数生长期,4~5 d时处于平台期,5~6 d时处于下降期;贴壁2~6 d时,新生组CFs生长速度高于1月龄组,1月龄组CFs生长速度高于3月龄组;各组CFs均表达nanog、sox2、oct4、scal-1、c-kit,nanog的荧光定量结果为新生组>3月龄组>1月龄组,sox2的荧光定量结果为新生组>1月龄组>3月龄组,oct4的荧光定量结果为新生组>1月龄组>3月龄组,scal-1的荧光定量结果为1月龄组>新生组>3月龄组,c-kit的荧光定量结果为1月龄组和3月龄组>新生组,而1月龄组和3月龄组间差异无统计学意义。各组CFs在多向诱导分化后,均有成脂、成骨、成心肌能力。结论:增龄可影响CFs的生长速度和多种表面标志物表达量,但对其多向分化潜能并无明显影响。

摘要： 目的探讨建立一种新型、简便易行的小鼠牙龈间充质干细胞(GMSC)体外提取及培养方法。方法选择C57BL/6小鼠,使用Ⅳ型胶原酶消化分离其牙龈组织,种板培养并传代。利用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(CCK-8法)观察小鼠GMSC的增殖规律,流式细胞术检测小鼠GMSC的细胞表面标志物,进行成脂、成骨诱导分化实验,观察所提取GMSC的多向分化潜能。结果CCK-8试验显示小鼠GMSC在培养第3~4日增殖活跃(第2~5日相邻时间点间,P均0.05)。流式细胞术结果显示,与小鼠口腔黏膜上皮细胞相比,GMSC高表达CD29、CD44、CD73、CD90和CD105(P均0.05);多向分化诱导实验中,GMSC成功分化为对应的组织细胞,证实了GMSC的多向分化功能。结论本研究成功提取小鼠GMSC,首次发现了一种新的、操作简便的、对原代细胞伤害少且有较高细胞获得率的科学提取GMSC方法,并鉴定了其细胞标志物和分化功能。

摘要： 分离鉴定羚牛骨髓间充质干细胞,为开展羚牛细胞治疗与体细胞核移植的深入研究提供有效载体。分离培养来源于羚牛骨髓的间充质干细胞;通过染色体G显带技术进行核型分析;利用流式细胞技术检测细胞表面标记物;通过定向诱导培养探究细胞的分化潜能。结果表明,羚牛骨髓间充质干细胞能够维持正常核型,对间充质干细胞特异性表面标记CD105、CD73、CD90、CD166、CD44呈阳性,对CD14(单核细胞和巨噬细胞标记物),CD19(b细胞标记物),CD34(造血干细胞标记物),CD45(泛白细胞标记物)和HLA-DR均呈阴性,具有成脂、成骨与成软骨多向分化潜能。表明成功分离羚牛骨髓间充质干细胞并对其表面抗原与分化潜能进行鉴定,为羚牛生物多样性保护与内源物种间充质干细胞的应用研究奠定基础。

摘要： 雄性生殖干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是一类具备自我更新和分化潜能的干细胞,也是雄性个体一生中不断产生精子细胞的基础。雄性生殖干细胞的体外诱导分化能为精子发生机理的研究提供重要理论依据,对恢复不育个体的精子发生,医治雄性动物的生殖障碍具有重要意义。该文主要对精原干细胞诱导分化的试剂诱导法和细胞移植法两种方法,以及细胞因子诱导、转录因子诱导、miRNA诱导等三种诱导机理进行综述,旨在对雄性动物辅助生殖的研究提供借鉴。

摘要： 随着医疗基础研究的飞速发展,间充质干细胞的功能用途也日益多样化。间充质干细胞具有强大的增殖能力和多向分化潜能,使得其在人体的多种系统里都可以充分发挥作用;它同时还具有较好的免疫调节功能和低程度的异体移植排异性。此外,间充质干细胞来源相对广泛易得,易于进行培养增殖分化,即使传代多次,其干细胞特性仍可维持稳定。诸多优势使它成为近年来研究的前沿热点,而对于骨科而言,它的成骨性、成软骨性及成纤维细胞性最博得学者们的关注。随着研究的深入,间充质干细胞向韧带成纤维细胞定向分化的程度得到了关节外科的重视,该研究对于关节韧带及重要肌腱组织损伤的治疗具有临床意义。本文就近年来国内外有关间充质干细胞在韧带组织修复领域的应用进展进行综述。

摘要： 2022年2月2日,一则#院士放弃专利让救命药一盒仅290元#冲上热搜词条。这位就是中国工程院院士、我国著名内科血液专家王振义,在国际上首创使用国产全反式维甲酸治疗急性早幼粒细胞白血病。他曾先后培养出三位院士,师徒接力攻克白血病,被称为“癌肿诱导分化第一人”。

摘要： 目的：探讨漆姑草醇提物(HSJ)对人急性早幼粒白血病细胞(NB4)的诱导分化作用. 方法：实验设HSJ组(30、60、120μg/mL)和不含药物的阴性对照组;HSJ作用NB4细胞48h后,采用透射电镜法观察NB4细胞形态;硝基四唑氮(NBT)还原实验检测NB4细胞分化能力;流式细胞术检测NB4细胞周期分布;流式细胞术检测NB4细胞表面分化抗原CD14和CD11b细胞的表达率;Real time-PCR检测c-fos mRNA表达;Western-Blot法检测c-fos蛋白表达. 结果：与对照组比较,HSJ组NB4细胞胞核缩小,胞浆呈空泡状,核形呈肾形或蚕豆形;与对照组NBT还原率(0.93±0.10)％比较,HSJ组(30、60、120μg/mL)NB4细胞的NBT还原率[分别为(15.18±0.38)％、(19.47±1.46)％、(29.71±2.57)％]升高,差异具有统计学意义(P＜0.05);与对照组比较,HSJ组G2期细胞比例上升,而S期细胞比例则相应的减少,差异具有统计学意义(P＜0.05);与对照组CD14(51.01±0.38)％和CD11b(69.29±5.08)％比较,HSJ组(30、60、120μg/mL)的CD14和CD11b阳性细胞表达率[分别为(54.45±1.13、68.19±6.91、84.02±7.99)％和(80.92±4.09、90.73±8.47、98.17±2.77)％]增加,差异具有统计学意义(P＜0.05);与对照组比较,HSJ组(30、60、120μg/mL)的c-fos mRNA表达量[分别为(1.30±0.62、1.53±0.17、2.10±0.63)]升高,差异具有统计学意义(P＜0.05);与对照组c-fos[(0.23±0.04)]比较,HSJ组(30、60、120μg/mL)的c-fos蛋白表达量[分别为(0.33±0.06、0.76±0.08、1.12±0.12)]升高,差异具有统计学意义(P＜0.05). 结论：HSJ能诱导NB4细胞向成熟粒细胞方向分化.

摘要： 间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)是指在体外培养过程中可以由一类细胞塑造成另外一个种类的细胞，并有较强的扩增能力和自我复制更新能力、以及在体内特定组织中有重建功能的一种干细胞。本实验应用IBMX、胰岛素、地塞米松和吲哚美辛联合诱导胎牛骨骼肌来源MSCs，结果发现诱导4d后就可以观察到有明显的淡黄色脂滴形成，用油红O染色为阳性表达；RT-PCR检测诱导后细胞的PPAR-γ、C/EBPδ、FABP4也为阳性表达，其中PPAR-γ是在调控成脂细胞诱导分化中占有主要地位的特异性脂肪组织。本实验中，成功的诱导了胎牛骨骼肌来源的MSCs成为脂肪细胞，此诱导可作为组织工程种子细胞的依据。

摘要： 目的:白血病化疗药物的毒副反应极其耐药性仍是尚未解决的难题,本项目受科技部"十一五"重大新药创制专项资助,自行提取分离出多个中药有效部位或成分,采用抗白血病的生物学活性试验,筛选并确定了作用最佳的低极性人参皂苷ALK,成分含量明确.前期实验证明ALK通过抑制白血病细胞增殖、促进凋亡、增强化疗药敏,并阻滞异常增殖的恶性信号传导而抗白血病.本文在此基础上，采用细胞学和动物模型实验，研究ALK体内外对红白血病K562细胞的抑制增殖、阻滞细胞增殖周期及诱导分化的作用，并通过对特异性BCR/ABL融合蛋白，信号传递途径和分化相关蛋白等方面的研究，探索ALK抗白血病的作用机制。rn 方法:① MTT法和半固体集落培养检测不同浓度的ALK抑制K562细胞增殖的作用。②流式细胞术分析ALK处理对白血病细胞增殖周期的影响。③Western blot分析增殖相关信号传递途径蛋白激酶的表达。④采用皮下接种高增殖潜能K562细胞，建立荷白血病瘤裸鼠模型，ALK低、中和高剂量灌胃治疗4周，阳性对照药高三尖杉醋碱。⑤免疫细胞化学、激光共聚焦显微术和Western Blot检测体外白血病细胞和体内皮下瘤组织BCR/ABL融合蛋白，及分化相关GATA-1转录因子和γ-珠蛋白的表达。rn 结果:①体外培养体系中ALK20-100mg/L有效地抑制白血病细胞增殖，呈时间和剂量依赖性，液体培养的抑制率25.5±17.7%-66.1±13.3%半固体培养集落生成的抑制率37.7±16.8%-83.8±5.8%.②中剂量ALK 60mg/L阻滞细胞进入增殖周期，S期细胞率下降为37.8±3.2%，明显低于对照组的54.7±0.3%。增殖指数从52.8±0.8%下降为30.3±0.5%.③免疫细胞化学、激光共聚焦显微术和Western Blot显示ALK处理后，K562细胞内BCR/ABL融合蛋白的表达水平明显降低。④Western Blot显示ALK能够不同程度地抑制K562细胞内AKT-1、AKT-2、ERK-2、MEK-1和MEK-2等增殖相关蛋白激酶的表达水平。⑤小剂量ALK孵育细胞14d，免疫细胞化学显示分化相关GATA-1转录因子和γ-珠蛋白表达强阳性细胞率分别为40.8±10.5%和62.0±5.6%，明显高于对照组的23.6±3.2%和21.3±7.3%，激光共聚焦显微术和Western Blot也证实了同样结果。)ALK有效地抑制荷瘤裸鼠体内瘤体的生长，ALK低、中、高剂量治疗组的抑瘤率分别为35.1%, 61.6%和72.9%。病理检查显示ALK中、高剂量治疗组的瘤组织有不同程度的坏死现象，白血病瘤细胞出现肿胀、破裂，胞核溶解等，并有不同程度的分化趋向。⑦免疫组化染色显示ALK中、高剂量组的瘤组织分化相关GATA-1转录因子和γ-珠蛋白表达的水平明显增高。rn 结论:ALK在体内外有效地抑制K562白血病细胞的增殖，阻滞细胞进入增殖周期，治疗白血病荷瘤裸鼠的体内疗效显著，其作用机制通过抑制特异性BCR/ABL融合蛋白的表达，并阻滞异常增殖恶性信号的传导。鉴于白血病细胞是难以分化的，ALK体内外诱导白血病细胞分化的作用显著，是药效学研究的突破点，具有重要的应用价值，其作用机制不同于传统化疗药物，可通过上调分化相关转录因子和蛋白的表达而抗白血病。上述结果提示ALK是抗白血病的有效成分，为中药5类新药的开发奠定基础，可望成为安全有效抗白血病的中药新药。

摘要： 目的:白血病化疗药物的毒副反应极其耐药性仍是尚未解决的难题,研发安全有效抗白血病的中药新药很有必要.受科技部"十一五"重大新药创制专项资助,采用抗白血病的生物学活性试验,筛选并确定了作用最明显的低极性人参皂苷ALK,成分含量明确.前期实验证明ALK通过抑制白血病细胞增殖、促进凋亡、增强化疗药敏,并阻滞异常增殖的恶性信号传导而抗白血病.本文在此基础上，研究ALK阻滞白血病细胞进入增殖周期，诱导原始细胞分化的作用，并通过DNA甲基化表观遗传的调控而抗白血病。rn 方法:①中剂量ALK孵育K562, HEL, SHI-1和Meg-O1白血病细胞48h，流式细胞术检测对细胞增殖周期的影响。② Western blot分析增殖相关MAPK信号传递途径多种蛋白激酶的表达水平。③小剂量ALK孵育白血病细胞7-14d，流式细胞术检测细胞分化相关抗原。④免疫细胞化学、激光共聚焦显微术及Western blot等分析多种分化相关蛋白的表达。⑤提取ALK处理细胞的DNA，经亚硫酸盐处理后与Illumina公司人甲基化芯片杂交。⑥对甲基化程度显著增高的白血病特异性WT1基因，经MS-PCR、半定量RT PCR, Western blot和免疫细胞化学等方法验证。rn 结果:① ALK有效地阻滞白血病K562, HEL, SHI-1和Meg-O1进入增殖周期，S期细胞的百分率显著下降，增殖指数(%)明显低于对照细胞。同时，上调细胞周期抑制因子P21蛋白的表达水平。②下调白血病细胞增殖相关MAPK信号途径多种蛋白激酶的表达，不同程度地抑制KG-la, K562细胞内AKT1,AKT2,ERK-2,MEK-1和MEK-2等蛋白激酶的表达水平，提示通过阻滞恶性信号的传导而抑制白血病细胞增殖。③诱导K562细胞分化相关CDllb,CD14,CD42b阳性细胞率从5.0%-18.6%提高到7.2%-28.2%.HEL细胞分化相关CDllb,CD14阳性率从5.0%-19.9%提高到9.1%-37.0%.SHI-1细胞CD1lb阳性率从61.2%提高到77.9%。诱导原始KG-1a白血病干细胞向巨核系细胞分化，CD41,CD61阳性细胞率均明显提高。④上调K562细胞分化相关GATA-1和Y一珠蛋白的表达，并诱导SHI-1细胞分化相关PU.1及(3-catenin蛋白的表达。⑤ ALK作用后，甲基化芯片显示SHI-1,KG-1a细胞DNA甲基化程度上调2倍以上的基因分别为28个、17个，下调2倍以上的基因为16个、30个。甲基化程度上调基因主要为致癌基因和抗凋亡基因，提示ALK抑制这类基因的表达，而下调的则为抑癌基因、DNA修复和分化相关基因，提示ALK促进这些基因的表达。)ALK作用HEL细胞后，DNA甲基化上调与下调2倍以上基因分别2个与3个。提示其通过下调WT1基因的表达而抑制白血病细胞的增殖。⑦验证甲基化芯片的结果，选择ALK作用后甲基化程度显著增高的WT1基因。K562和HEL细胞经ALK处理后，MS-PCR检测显示随着ALK剂量的增加，WT1基因甲基化程度从低下逐渐转变为明显增高。同时，WT1基因mRNA及其蛋白的表达水平则明显下降。rn 结论:ALK通过阻滞细胞增殖周期，上调周期抑制因子而有效地抑制白血病细胞的异常增殖。诱导分化是药效学研究的突破点，具有重要的实用价值。ALK通过诱导DNA甲基化表观遗传的调控，上调抑癌基因、DNA修复和分化相关基因，下调致癌基因和抗凋亡基因的表达，而发挥抑制增殖和诱导分化的抗白血病功效，机制不同于传统化疗药。综合其它的白血病动物模型、细胞学、分子实验及毒理学等结果，证明ALK能够有效地抗白血病而无明显毒副反应，为中药5类新药的开发奠定基础，可成为安全有效治疗白血病的中药新药。

摘要： 目的：探讨山核桃叶总黄酮对体外培养的骨髓间充质干细胞(MSC)向成骨细胞分化的影响.rn 方法：通过全骨髓贴壁法及密度梯度离心法获取SD大鼠骨髓间充质干细胞,通过流式分析仪鉴定细胞表面标志;骨髓间充质干细胞体外培养、传代,在体外设不同总黄酮浓度(1-10ug/ml),观察其对MSC向成骨细胞分化的影响;ELISA法进一步检测不同药物浓度作用下,MSC诱导为成骨细胞后上清中的骨钙素含量,茜素红染色检测诱导分化为成骨细胞后的相关指标.rn 结果：骨髓间充质干细胞的表面标志为CD29,CD44,CD90高表达。倒置显微镜下观察间充质干细胞形态，培养初期呈圆形、三角形或不规则形，培养后期呈现纺锤体形或呈现向四周放射样生长状态。rn 结论：山核桃叶总黄酮可以诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化，并且与药物浓度呈正相关。

摘要： 目的：观察胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对体外培养神经干细胞(NSCs)向神经元分化的影响,并探讨PI3K/Akt信号通路与其关系.rn 方法：取新生小鼠海马组织分离、培养NSCs,将细胞团吹散以1×104·mL-1密度接种24孔板并分别加入终浓度100ng·mL-1的IGF-1和50μmoL·L-1的PI3K/Akt通路特异抑制剂LY294002.β Ⅲ Tubulin免疫荧光细胞化学染色法检测NSCs分化为神经元的荧光表达情况,DAPI染核以计细胞总数;p-Akt免疫荧光染色检测各组细胞Akt磷酸化的表达情况;Western blot方法检测Akt和p-Akt蛋白的表达量,并对各组进行比较.rn 结果：IGF-1组可促进NSCs向神经元分化,分化率显著高于对照组,LY组和IGF-1+LY组;IGF-1组p-Akt免疫荧光表达量也显著高于对照组,LY组和IGF-1 +LY组;Western blot结果显示,IGF-1促进Akt磷酸化,LY294002抑制Akt的活化.rn 结论：IGF-1诱导Akt的磷酸化,从而激活PI3K/Akt信号通路,促进NSCs向神经元分化.

摘要： 目的：观察胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对体外培养神经干细胞(NSCs)向神经元分化的影响,并探讨PI3K/Akt信号通路与其关系.rn 方法：取新生小鼠海马组织分离、培养NSCs,将细胞团吹散以1×104·mL-1密度接种24孔板并分别加入终浓度100ng·mL-1的IGF-1和50μmoL·L-1的PI3K/Akt通路特异抑制剂LY294002.β Ⅲ Tubulin免疫荧光细胞化学染色法检测NSCs分化为神经元的荧光表达情况,DAPI染核以计细胞总数;p-Akt免疫荧光染色检测各组细胞Akt磷酸化的表达情况;Western blot方法检测Akt和p-Akt蛋白的表达量,并对各组进行比较.rn 结果：IGF-1组可促进NSCs向神经元分化,分化率显著高于对照组,LY组和IGF-1+LY组;IGF-1组p-Akt免疫荧光表达量也显著高于对照组,LY组和IGF-1 +LY组;Western blot结果显示,IGF-1促进Akt磷酸化,LY294002抑制Akt的活化.rn 结论：IGF-1诱导Akt的磷酸化,从而激活PI3K/Akt信号通路,促进NSCs向神经元分化.

摘要： 目的：观察胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对体外培养神经干细胞(NSCs)向神经元分化的影响,并探讨PI3K/Akt信号通路与其关系.rn 方法：取新生小鼠海马组织分离、培养NSCs,将细胞团吹散以1×104·mL-1密度接种24孔板并分别加入终浓度100ng·mL-1的IGF-1和50μmoL·L-1的PI3K/Akt通路特异抑制剂LY294002.β Ⅲ Tubulin免疫荧光细胞化学染色法检测NSCs分化为神经元的荧光表达情况,DAPI染核以计细胞总数;p-Akt免疫荧光染色检测各组细胞Akt磷酸化的表达情况;Western blot方法检测Akt和p-Akt蛋白的表达量,并对各组进行比较.rn 结果：IGF-1组可促进NSCs向神经元分化,分化率显著高于对照组,LY组和IGF-1+LY组;IGF-1组p-Akt免疫荧光表达量也显著高于对照组,LY组和IGF-1 +LY组;Western blot结果显示,IGF-1促进Akt磷酸化,LY294002抑制Akt的活化.rn 结论：IGF-1诱导Akt的磷酸化,从而激活PI3K/Akt信号通路,促进NSCs向神经元分化.

摘要： 目的：观察胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对体外培养神经干细胞(NSCs)向神经元分化的影响,并探讨PI3K/Akt信号通路与其关系.rn 方法：取新生小鼠海马组织分离、培养NSCs,将细胞团吹散以1×104·mL-1密度接种24孔板并分别加入终浓度100ng·mL-1的IGF-1和50μmoL·L-1的PI3K/Akt通路特异抑制剂LY294002.β Ⅲ Tubulin免疫荧光细胞化学染色法检测NSCs分化为神经元的荧光表达情况,DAPI染核以计细胞总数;p-Akt免疫荧光染色检测各组细胞Akt磷酸化的表达情况;Western blot方法检测Akt和p-Akt蛋白的表达量,并对各组进行比较.rn 结果：IGF-1组可促进NSCs向神经元分化,分化率显著高于对照组,LY组和IGF-1+LY组;IGF-1组p-Akt免疫荧光表达量也显著高于对照组,LY组和IGF-1 +LY组;Western blot结果显示,IGF-1促进Akt磷酸化,LY294002抑制Akt的活化.rn 结论：IGF-1诱导Akt的磷酸化,从而激活PI3K/Akt信号通路,促进NSCs向神经元分化.

摘要： 目的：观察胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对体外培养神经干细胞(NSCs)向神经元分化的影响,并探讨PI3K/Akt信号通路与其关系.rn 方法：取新生小鼠海马组织分离、培养NSCs,将细胞团吹散以1×104·mL-1密度接种24孔板并分别加入终浓度100ng·mL-1的IGF-1和50μmoL·L-1的PI3K/Akt通路特异抑制剂LY294002.β Ⅲ Tubulin免疫荧光细胞化学染色法检测NSCs分化为神经元的荧光表达情况,DAPI染核以计细胞总数;p-Akt免疫荧光染色检测各组细胞Akt磷酸化的表达情况;Western blot方法检测Akt和p-Akt蛋白的表达量,并对各组进行比较.rn 结果：IGF-1组可促进NSCs向神经元分化,分化率显著高于对照组,LY组和IGF-1+LY组;IGF-1组p-Akt免疫荧光表达量也显著高于对照组,LY组和IGF-1 +LY组;Western blot结果显示,IGF-1促进Akt磷酸化,LY294002抑制Akt的活化.rn 结论：IGF-1诱导Akt的磷酸化,从而激活PI3K/Akt信号通路,促进NSCs向神经元分化.

摘要： 本发明涉及一种成脂诱导培养液及成脂分化方法。该成脂诱导培养液包括：3‑异丁基‑1‑甲基黄嘌呤、胰岛素、地塞米松、三氟柳。本发明多种诱导因子联合应用作用于人脂肪干细胞，能有效的诱导脂肪干细胞成脂分化，缩短成脂时间，提高成脂的质量。其成脂分化效果显著优于现有常规的诱导方法。

摘要： 本发明涉及用于诱导从体细胞脱分化为诱导性多能干细胞的组合物及利用其的脱分化诱导方法，上述用于诱导从体细胞脱分化为诱导性多能干细胞的组合物及利用其的脱分化诱导方法通过刺激作为人类体细胞受体的CXC趋化因子受体2(CXCR2，CXC chemokine receptor 2)来增加诱导从体细胞脱分化为诱导性多能干细胞的效率，因此，可以将其有效用于脱分化为诱导性多能干细胞的诱导。

摘要： 本发明涉及用于诱导从体细胞到诱导性多能干细胞的脱分化的来源于胎盘的细胞条件培养基及利用其的脱分化诱导方法。当使用本发明的用于诱导脱分化的来源于胎盘的细胞条件培养基时，仅使用由来源于人的产物构成的培养基便可稳定确立个性化定制的脱分化干细胞，并通过提供来源于人胎盘的环境来再现成类似生物环境，从而可制备适用于临床的细胞治疗剂。

摘要： 本发明涉及一种高效诱导脂肪干细胞骨分化的培养基及制备和诱导分化方法及应用。本发明提供了SAFit2在制备高效诱导脂肪干细胞骨分化的培养基中的应用。小分子化合物SAFit2的加入能够大大提高脂肪干细胞向骨细胞分化的效率。

摘要： 一种基于弓形虫外分泌蛋白的成骨诱导分化培养基、制备方法及成骨诱导分化方法，其成骨诱导分化培养基含有弓形虫外分泌蛋白。成骨诱导分化培养基还含有地塞米松、L‑抗坏血酸、β‑甘油磷酸钠和完全培养基。含量如下：弓形虫外分泌蛋白：0.5mg/mL～15mg/mL；地塞米松：80nM～120nM；L‑抗坏血酸：30mM～80mM；β‑甘油磷酸钠：3mM～15mM。本发明的弓形虫外分泌蛋白作为成骨诱导培养基添加成分可大幅提高间充质干细胞成骨分化效果。

摘要： 本发明提供了一种小鼠前脂肪细胞3T3‑L1的诱导分化剂及诱导分化方法。所述的诱导分化剂组成为：3‑异丁基‑1‑甲基黄嘌呤，胰岛素，地塞米松，罗格列酮，FBS。诱导分化方法为：3T3‑L1细胞常规复苏培养后用含有所述诱导分化剂的高糖DMEM培养液培养，再用含胰岛素和10％FBS的高糖DMEM培养液培养，之后用含10％FBS的高糖DMEM培养液半液换液法培养。本发明的方法分化周期短，仅为6‑7天，前脂肪细胞转化率高，且细胞分化一致，将极大地促进脂肪代谢疾病研究的开展。

摘要： 本发明公开了一种异甜菊醇诱导干细胞分化的用途及含有异甜菊醇的干细胞诱导分化培养基。本发明研究结果表明，异甜菊醇具有诱导人骨髓间充质干细胞成骨分化的作用，同时还可以促进人骨髓间充质干细胞增殖，可以用作活性成分制备人骨髓间充质干细胞成骨诱导分化培养基。因此，请求保护异甜菊醇用于体外诱导人骨髓间充质干细胞成骨分化的用途，以及含有异甜菊醇的人骨髓间充质干细胞诱导分化培养基。

摘要： 本发明涉及一种基于hPSCs诱导分化得到的纹状体类器官及hPSCs诱导分化方法，属于生物医学和发育生物技术领域。方法包括如下步骤：将hPSCs贴壁培养，增殖后消化制成拟胚体，在神经诱导培养液中悬浮培养分化，分化第1天后每天用含腹侧化因子SHH的NIM培养液半换液进行培养。分化第7天时进行贴壁培养。分化第16天将形成的神经管样细胞结构吹下，用NIM培养液悬浮培养，第17天将自发形成球状神经前体细胞。分化第20天使用不添加SHH的NIM继续培养，在分化第60天获得包含大量中棘神经元的纹状体类器官。一种纹状体类器官，由所述方法所得。该方法利用SHH诱导hPSCs向LGE分化，能有效获得含有大量中棘神经元的纹状体类器官。

摘要： 本发明提供了一种TGF‑β小分子抑制剂在神经再生领域的新用途，可用于多种神经细胞及类脑器官的体外再生和定向分化。通过将其添加在一组化学成分明晰的基础培养基中，可以将多能干细胞诱导转变为多种神经干细胞来源的成体细胞，并且极大的提高了诱导得到的神经细胞数量。本发明提供的诱导系统拓展了单一小分子在外胚层细胞诱导分化领域里的崭新功能，同时避免了B27等代血清的使用，从而完全免除在细胞培养过程中动物源性成分的存在带来的潜在危险，大大拓展了多种神经细胞移植的临床前景。

摘要： 一种基于弓形虫外分泌蛋白的成骨诱导分化培养基、制备方法及成骨诱导分化方法，其成骨诱导分化培养基含有弓形虫外分泌蛋白。成骨诱导分化培养基还含有地塞米松、L‑抗坏血酸、β‑甘油磷酸钠和完全培养基。含量如下：弓形虫外分泌蛋白：0.5mg/mL～15mg/mL；地塞米松：80nM～120nM；L‑抗坏血酸：30mM～80mM；β‑甘油磷酸钠：3mM～15mM。本发明的弓形虫外分泌蛋白作为成骨诱导培养基添加成分可大幅提高间充质干细胞成骨分化效果。