摘要:
目的:探讨糖尿病甜味剂赤藓糖醇对PC12细胞氧化损伤的保护作用.rn 方法:10%胎牛血清的RPMI-1640培养基培养PC12细胞于CO2培养箱中培养,取对数生长期细胞进行实验.分别设组:正常组、模型组、阳性对照组、给药组.阳性对照组为160mg·L-1依达拉奉溶液;给药组分别为50mg·L-1、100mg·L-1赤藓糖醇溶液;正常组和模型组给予等量RPMI-1640无血清培养基.继续培养24 h后,除正常组外,其余各组吸弃原培养液,加入含H2O2(终浓度为50μmol·L-1)的无血清培养基损伤细胞2h,弃原培养液,加180 L培养液继续培养42 h后,倒置显微镜下观察各组细胞形态变化.采用MTT比色法,造模损伤恢复培养42 h后,加5 g·L-1的MTT液20 μL,孵育4h,吸弃上清液,加150 μL100%DMSO,摇床上振荡10 min,使结晶物充分融解,570 nm波长下测定各孔吸光度(A).细胞造模处理后,收集细胞培养上清液,测定培养液中LDH活性.细胞造模处理后,收集细胞,测定细胞内GSH的含量.rn 结果:与正常组比较,模型组细胞数量明显减少,多数细胞突起收回,胞体变圆,部分变圆细胞成团存在,胞体边缘模糊,折光性减弱,贴壁能力降低,培养板底部可见细胞碎片;细胞存活率明显降低,仅为48.6%;细胞内GSH含量明显减少;细胞LDH泄漏量明显增加.与模型组比较,依达拉奉160mg·L-1和赤鲜糖醇50,100mg·L-1浓度下的细胞整体数量和梭形细胞数量增加,成团细胞数减少,细胞折光性和贴壁能力恢复良好.依达拉奉160mg·L-1组提高细胞存活率12%,赤鲜糖醇各给药组均具有提高细胞存活率的趋势,以50mg·L-1具有统计学意义.依达拉奉和赤鲜糖醇各给药组均能提高细胞内GSH含量;并降低细胞LDH泄漏量.rn 结论:赤鲜糖醇能明显改善氧化损伤后的PC12细胞形态,提高细胞存活率,同时保护细胞膜以降低LDH泄露,提高细胞内GSH含量,提示赤鲜糖醇对H2O2诱导的PC12细胞损伤具有显著保护作用.