变异链球菌

摘要： 龋病发生发展与牙菌斑生物膜微生态平衡密切相关。氧化应激是调控口腔微生物群落组成及结构的重要因素。变异链球菌与龋病的发生发展密切相关,变异链球菌氧化应激耐受能力会影响其在牙菌斑生物膜中的竞争力。变异链球菌氧化应激调控机制包括合成还原酶、通过金属调节蛋白调控铁、锰等金属离子摄入、转录调节因子Spx、从胞外摄取谷胱甘肽及相关的信号传导系统等。目前的研究焦点为变异链球菌如何通过氧化应激反应适应复杂的外环境及对口腔微生态的影响。通过针对关键信号通路设计靶向小分子化合物等途径,抑制变异链球菌氧化应激能力,削弱其毒力,对于口腔微生态调节和龋病防治具有重要意义。

摘要： 目的筛选小分子抗菌药物,探讨选择性雌激素受体调节剂(SERMs)对变异链球菌的抗菌作用及作用机制。方法采用微量稀释法,筛选426个美国食品药物管理局批准的小分子药物对变异链球菌的最低抑菌浓度,通过建立变异链球菌的随机突变体库,探究SERMs作用于变异链球菌的靶点。结果小分子药物库中归属于SERMs的托瑞米芬、他莫昔芬、克罗米芬和雷洛昔芬对变异链球菌具有良好的抗菌作用。通过构建变异链球菌的突变体库,筛选发现了两个突变菌株对克罗米芬产生了抗性,对耐药株的基因序列的分析表明,转座子插入位点位于smu_546、smu_874的基因。结论托瑞米芬、他莫昔芬、克罗米芬、和雷洛昔芬等SERMs药物对变异链球菌有明显的抗菌作用,且克罗米芬的作用靶点可能位于smu_546、smu_874基因表达的蛋白上。

摘要： 目的评价氟化钠(NaF)对变异链球菌的抑菌效能;白色念珠菌代谢产物对变异链球菌代谢活性和NaF作用下的耐药性影响。方法分别采用肉汤稀释法和重水拉曼技术,参考最低抑菌浓度(MIC)及最小代谢活性抑制浓度(MIC-MA)指标,评价NaF对变异链球菌生长及代谢的抑制效果;采用重水拉曼技术,检测不同浓度白色念珠菌上清液对变异链球菌代谢活性的影响;采用重水拉曼技术,检测在加入白色念珠菌上清液的混合培养体系中变异链球菌对NaF耐药性的变化,评价两菌互作对于耐药性的影响。结果NaF对变异链球菌的MIC为0.4 g·L^(-1),MIC-MA为1.2 g·L^(-1)。在MIC下,该菌生长受到完全抑制,但仍具有很高的代谢活性,存在再次恢复毒力的可能;只有达到3×MIC,即MIC-MA,该菌的生长和代谢才能得到完全抑制。当白色念珠菌上清液OD;≥0.5时,变异链球菌的代谢活性明显高于纯培养体系,且在不同时间点差异均存在统计学意义(P<0.05)。混合体系中NaF对变异链球菌的抑菌效能较纯培养降低,且在不同时间点差异均存在统计学意义(P<0.05),直到4×MIC,即1.6 g·L^(-1),该菌的代谢才能得到完全抑制。结论重水拉曼技术适用于评价药物对细菌代谢活性的影响;混合体系中一定浓度(OD;≥0.5)的白色念珠菌上清液中的代谢产物可增强变异链球菌的代谢活性,降低变异链球菌对于NaF的药物敏感性。

摘要： 目的:探讨人参皂苷Rh2型(G-Rh2)联合氟化钠(NaF)对体外变异链球菌生长及生物膜形成的抑制作用,为其将来在口腔临床上的应用提供理论依据。方法:采用微量稀释法分别测量G-Rh2与NaF对变异链球菌的半数最小抑制浓度(MIC_(50));采用棋盘微量稀释法测量G-Rh2与NaF联合应用于变异链球菌的MIC_(50)值,并计算分级抑菌浓度(FIC)指数来判断两者的联合效应,当FIC<0.5时证明2种药物间具有协同抑制变异链球菌的作用;采用结晶紫染色实验分别测量G-Rh2与NaF对变异链球菌的半数最小生物膜抑制浓度(MBIC50)值;实验分为空白对照组、MIC_(50)G-Rh2组、MIC_(50)NaF组和MIC_(50)G-Rh2+MIC_(50)NaF联合组,采用生长曲线及产酸实验评估各组变异链球菌浮游菌生长速度及产酸抑制率;实验分为空白对照组、MBIC50G-Rh2组、MBIC50NaF组及MBIC50G-Rh2+MBIC50NaF联合组,采用结晶紫染色实验及扫描电镜观察各组变异链球菌生物膜形成量及结构的变化;空白对照组内不含任何药物。结果:G-Rh2与NaF作用于变异链球菌的MIC_(50)分别为25.000和125.000 mg·L^(-1);G-Rh2与NaF联合应用时MIC_(50)分别为5.00和31.25 mg·L^(-1),FIC指数为0.45,小于0.50,证明2种药物间具有协同抑制变异链球菌的作用;G-Rh2与NaF作用于变异链球菌的MBIC50分别为22.5和62.5 mg·L^(-1)。与空白对照组、MIC_(50)G-Rh2组和MIC_(50)NaF组比较,MIC_(50)G-Rh2+MIC_(50)NaF联合组变异链球菌的生长速度明显降低(P<0.05)。与空白对照组比较,MIC_(50)G-Rh2组、MIC_(50)NaF组和MIC_(50)G-Rh2+MIC_(50)NaF联合组ΔpH值均降低,且MIC_(50)G-Rh2+MIC_(50)NaF联合组ΔpH值低于MIC_(50)G-Rh2组和MIC_(50)NaF组(P<0.05);MIC_(50)G-Rh2+MIC_(50)NaF联合组的产酸抑制率高于MIC_(50)G-Rh2组和MIC_(50)NaF组(P<0.05)。MBIC50G-Rh2+MBIC50NaF联合组的生物膜形成量明显少于空白对照组、MBIC50G-Rh2组和MBIC50NaF组(P<0.01)。扫描电镜观察,MBIC50G-Rh2组和MBIC50NaF组生物膜厚度降低,胞外基质量减少,细菌之间排列疏松,而MBIC50G-Rh2+MBIC50NaF联合组生物膜结构消失,细菌数量减少且细菌形态发生变化。结论:G-Rh2与NaF联合应用对体外变异链球菌生长及生物膜形成具有协同抑制作用。

摘要： 为了确定桑枝低聚糖抑制变异链球菌生长的最佳工艺,在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken响应面法优化桑枝低聚糖的酶解工艺,以桑枝多糖为原料,以变异链球菌的抑菌率为指标,考察酶添加量、酶解时间和酶解温度等因素对抑菌率的影响,得到生物酶法制备桑枝低聚糖的优化工艺:β-葡聚糖酶添加量为485 U/mL,酶解时间3.6 h,酶解温度44°C,在此条件下变异链球菌抑菌率为(68.30±3.96)%,与预测值相符,表明优化工艺可行。同质量浓度下桑枝低聚糖对变异链球菌的抑菌率均高于桑枝多糖,证明该酶解工艺能有效提高抑菌活性。桑枝抗氧化活性表明优化工艺后的桑枝低聚糖对DPPH、ABTS+自由基有清除作用,对Fe3+具有还原能力,并且其总抗氧化能力随着质量浓度的升高而增强。

摘要： 为评估市售饮料对低龄儿童龋主要致病菌变异链球菌和白色念珠菌致龋性的影响,通过测定饮料的酸度、饮料对双菌生物膜形成量、对双菌群体感应系统以及对羟基磷灰石脱矿程度的影响等指标来进行评价。结果表明:在自身特性方面,与其他饮料相比,可乐的缓冲容量最强,可能具有最强的酸蚀能力;在生物膜形成方面,酸奶能抑制生物膜的形成,而其他饮料均促进生物膜的形成,且可乐、纯牛奶显著促进了调控生物膜形成的群体感应信号分子AI-2的产生;在羟基磷灰石脱矿方面,可乐对钙流失的影响最为显著。同种酸度的饮料,由于酸的类型不同对双菌致龋性的影响不同,其中可乐酸蚀能力最强,造成牙齿钙流失率最高。该研究可为儿童饮料的选择提供参考。

摘要： 目的:观察变异链球菌(S.mutans)对人唾液腺细胞系(HSG)中多聚免疫球蛋白受体(Pigr)表达的影响。方法:用免疫荧光染色验证细胞系来源与Pigr在HSG中的表达。将对数生长中期的S.mutans水热灭活后与HSG细胞共培养,CCK-8法观察细胞增殖,qPCR与Western blot检测S.mutans对Pigr表达的影响。结果:S.mutans对HSG细胞的增殖无显著影响,但在S.mutans作用下,HSG中Pigr的mRNA及蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。结论:S.mutans可抑制HSG中Pigr的表达。

摘要： 口腔微生物之间的相互作用对口腔疾病的发生至关重要。变异链球菌和白色念珠菌是幼儿龋病常见的致龋微生物。两种微生物之间可通过葡糖基转移酶、蔗糖、SigX因子、群体感应信号分子法尼醇、化合物代谢等多种方式相互协同或者拮抗致龋。本文主要综述了二者的致龋机制、在生物膜中的协同和抑制作用以及混合生物膜抗菌疗法如抗菌剂、化合物、光动力疗法等。从生物膜角度阐释两种微生物与龋病发生的关系以及抑制生物膜活性的方法,为开发龋病治疗新策略提供了新视角。

摘要： 目的:探讨对二氧化钛纳米粒子(TiO_(2)NPs)进行锌(Zn)和氮(N)共掺杂时最适掺杂浓度及Zn和N共掺杂TiO_(2)NPs(Zn-N-TiO_(2) NPs)对口腔变异链球菌的抑制作用,阐明其作用机制。方法:采用钛酸丁酯、硝酸锌和氨水分别作为钛(Ti)源、Zn源和N源,利用溶胶-水热法合成TiO_(2) NPs和不同掺杂浓度的Zn-N-TiO_(2) NPs,通过X射线衍射(XRD)、拉曼光谱、扫描电子显微镜(SEM)和紫外-可见光吸收光谱分析(UV-vis)对纳米粒子进行表征,采用Cure Rite辐射仪对牙科发光二极管(LED)光固化灯进行表征。变异链球菌分为空白对照组、单独LED光照组、TiO_(2)NPs组、1%Zn-3%N-TiO_(2)NPs(Zn1)组、3%Zn-3%N-TiO_(2)NPs(Zn3)组、5%Zn-3%N-TiO_(2)NPs(Zn5)组和7%Zn-3%N-TiO_(2)NPs(Zn7)组。将各组纳米粒子与变异链球菌菌液混合(终浓度为2 g·L^(-1))摇匀。除空白对照组,其他各组采用牙科LED光分别照射1、3和5 min,空白对照组仅用培养基处理,采用平板菌落计数法记录各组平板菌落数。选取抗菌效果最佳组(Zn3组),利用1,3-二苯基异苯并呋喃(DPBF)探针检测活性氧(ROS)释放量,分为0 min组、1 min组、3 min组和5 min组,每组取2 g·L^(-1)的Zn3-DPBF溶液100μL分别采用牙科LED光照0、1、3和5 min,观察各组溶液在波长410 nm处吸收峰值,即代表ROS释放量。变异链球菌分为对照组、N-乙酰半胱氨酸(NAC)组、Zn3组和NAC+Zn3组,LED光照射5 min后避光培养24 h,采用平板菌落计数法计数各组平板菌落数。结果:成功合成Zn-N-TiO_(2)NPs,晶体结构为锐钛矿型,TiO_(2)NPs组、Zn1组、Zn3组、Zn5组和Zn7组纳米粒子平均晶粒尺寸分别为15.6、11.3、9.8、9.4和7.3 nm;SEM观察纳米粒子为分布均匀的球形颗粒;UV-vis显示Zn3在400~500 nm波长范围内吸光度(A)值明显升高。与空白对照组比较,LED光照射5 min时Zn3组菌落数最少(P<0.05)。与0 min组比较,1 min组、3 min组和5 min组Zn3-DPBF溶液在波长410 nm处吸收峰值依次下降,表明各组纳米粒子溶液ROS释放量随光照时间延长而逐渐增加。与Zn3组比较,NAC+Zn3组菌落数明显增加(P<0.05)。结论:Zn和N掺杂浓度均为3%的TiO_(2) NPs(3%Zn-3%N-TiO_(2)NPs)联合LED光照射通过光催化作用能有效抑制口腔变异链球菌的生长。

摘要： 龋病是最常见的口腔感染性疾病之一,变异链球菌是龋病的主要致病微生物。糖类是细菌最主要的碳源,也是能量代谢,物质代谢和生理功能等方面重要的物质基础。糖转运是糖代谢的首要过程,且与变异链球菌致龋毒力因子的形成密切相关。本文对变异链球菌糖转运方式及其调控机制的研究进展进行综述,以期为口腔中其他细菌糖转运相关机制研究提供参考。

摘要： 细菌的早期黏附是细菌生物膜形成的关键步骤.本研究的目的是采用原子力显微镜构建的单细胞力学测试平台(single cell force spectroscopy,SCFS)测量分析口腔唾液PH值对变异链球菌与不同材料表面黏附力的影响.为研究口腔细菌对材料表面初期黏附的力学机制提供参考依据,并指导口腔抗菌材料的表面构建.

摘要： 研究致龋菌变异链球菌luxS基因对口腔常见细菌混合培养形成牙菌斑生物膜的影响.将变异链球菌野生株(UA159)及其两种luxS基因突变株(luxS基因高表达株和luxS基因缺陷株)与口腔常见细菌粪肠球菌(ATCC33186)、具核梭杆菌(ATCC10953)、嗜酸乳杆菌(ATCC4356)按照100∶1,10∶1,1∶1,1∶10和1∶100五个不同数量级比例分别接种于牛心脑浸液培养基,体外混合培养不同时间,通过MTT法检测混合菌在生物膜形成过程中的数量.在96孔板中形成生物膜,选择的时间点包括生物膜形成过程中的初期(4h)、中期(14h)、晚期(24h)等,吸去上清液,用无菌的PBS溶液冲洗三次,去除表面的浮游细菌.

摘要： 龋齿是人群中普遍存在的感染性疾病.这是由变异链球菌感染引发的.许多科学家经研究后都建议采用被动免疫法防治龋齿.因此,开发能抵抗和预防龋齿的免疫球蛋白,就显得十分必要.美国及日本都在研究开发具有抗龋齿功能的活性免疫球蛋白,市场上也已出现了含免疫球蛋白的防龋齿口腔喷雾剂和漱口水产品.浙江长兴艾格生物制品有限公司与江南大学通力合作,通过采用变异链球菌免疫母鸡的方法获得了高活性的蛋黄免疫球蛋白,并采用国际领先的生产工艺提取分离蛋黄免疫球蛋白.实验结果显示经变异链球菌免疫后可得到高活性蛋黄免疫球蛋白.体外模拟实验表明经变异链球菌免疫的蛋黄免疫球蛋白确实具有抗牙菌斑形成的能力,从而具备防龋齿的功效.并在此基础上成功开发出安全无毒的具有抗龋齿功能的漱口剂产品.

摘要： 目的：观察蜂胶与厚朴酚混合物对变形链球菌的生长抑制作用,以期为进一步开发利用复方中药防龋提供参考.方法：根据蜂胶、厚朴酚及二者混合液的最小抑菌浓度选择实验所需的质量浓度分别为:蜂胶250、125、62.5、31.25、15.625 g/L(蜂胶组),厚朴酚0.0625、0.0313、0.0156、0.0078、0.0039g/L(厚朴酚组),蜂胶与厚朴酚混合液A1(250g/L蜂胶+0.0625 g/L厚朴酚)、A2(125 g/L蜂胶+0.0313 g/L厚朴酚)、A3(62.5 g/L蜂胶+0.0156 g/L厚朴酚)、A4(31.25g/L蜂胶+0.0078 g/L厚朴酚)、A5(15.6 g/L蜂胶+0.0039 g/L厚朴酚)(混合组),另设0.95％乙醇组和菌液组作为对照,将蜂胶、厚朴酚及两者混合物分别倍比稀释至各浓度,采用纸片法观察各组对变形链球菌生长的影响.结果：蜂胶及厚朴酚组分别在质量浓度为62.5、0.0156g/L时才出现明显的抑菌环,而混合组在蜂胶及厚朴酚最小质量浓度A5时即出现了明显的抑菌环;蜂胶组、厚朴酚组及混合组的抑菌作用均随质量浓度的增大而增强,3组分别在最小质量浓度时的抑菌环直径为(0.000±0.000)、(0.000±0.000)、(0.770±0.085) mm,在最大质量浓度时的抑菌环直径为(1.515±0.017)、(1.837±0.283)、(2.853±0.229) mm,且5种质量浓度下混合组的抑菌环直径均显著大于蜂胶组和厚朴酚组(P＜0.05).结论：蜂胶与厚朴酚混合物抑菌效果较二者单独作用时明显增强,提示复方中药防龋存在很大的开发潜力.

摘要： 目的：观察蜂胶与厚朴酚混合物对变形链球菌的生长抑制作用,以期为进一步开发利用复方中药防龋提供参考.方法：根据蜂胶、厚朴酚及二者混合液的最小抑菌浓度选择实验所需的质量浓度分别为:蜂胶250、125、62.5、31.25、15.625 g/L(蜂胶组),厚朴酚0.0625、0.0313、0.0156、0.0078、0.0039g/L(厚朴酚组),蜂胶与厚朴酚混合液A1(250g/L蜂胶+0.0625 g/L厚朴酚)、A2(125 g/L蜂胶+0.0313 g/L厚朴酚)、A3(62.5 g/L蜂胶+0.0156 g/L厚朴酚)、A4(31.25g/L蜂胶+0.0078 g/L厚朴酚)、A5(15.6 g/L蜂胶+0.0039 g/L厚朴酚)(混合组),另设0.95％乙醇组和菌液组作为对照,将蜂胶、厚朴酚及两者混合物分别倍比稀释至各浓度,采用纸片法观察各组对变形链球菌生长的影响.结果：蜂胶及厚朴酚组分别在质量浓度为62.5、0.0156g/L时才出现明显的抑菌环,而混合组在蜂胶及厚朴酚最小质量浓度A5时即出现了明显的抑菌环;蜂胶组、厚朴酚组及混合组的抑菌作用均随质量浓度的增大而增强,3组分别在最小质量浓度时的抑菌环直径为(0.000±0.000)、(0.000±0.000)、(0.770±0.085) mm,在最大质量浓度时的抑菌环直径为(1.515±0.017)、(1.837±0.283)、(2.853±0.229) mm,且5种质量浓度下混合组的抑菌环直径均显著大于蜂胶组和厚朴酚组(P＜0.05).结论：蜂胶与厚朴酚混合物抑菌效果较二者单独作用时明显增强,提示复方中药防龋存在很大的开发潜力.

摘要： 目的：观察蜂胶与厚朴酚混合物对变形链球菌的生长抑制作用,以期为进一步开发利用复方中药防龋提供参考.方法：根据蜂胶、厚朴酚及二者混合液的最小抑菌浓度选择实验所需的质量浓度分别为:蜂胶250、125、62.5、31.25、15.625 g/L(蜂胶组),厚朴酚0.0625、0.0313、0.0156、0.0078、0.0039g/L(厚朴酚组),蜂胶与厚朴酚混合液A1(250g/L蜂胶+0.0625 g/L厚朴酚)、A2(125 g/L蜂胶+0.0313 g/L厚朴酚)、A3(62.5 g/L蜂胶+0.0156 g/L厚朴酚)、A4(31.25g/L蜂胶+0.0078 g/L厚朴酚)、A5(15.6 g/L蜂胶+0.0039 g/L厚朴酚)(混合组),另设0.95％乙醇组和菌液组作为对照,将蜂胶、厚朴酚及两者混合物分别倍比稀释至各浓度,采用纸片法观察各组对变形链球菌生长的影响.结果：蜂胶及厚朴酚组分别在质量浓度为62.5、0.0156g/L时才出现明显的抑菌环,而混合组在蜂胶及厚朴酚最小质量浓度A5时即出现了明显的抑菌环;蜂胶组、厚朴酚组及混合组的抑菌作用均随质量浓度的增大而增强,3组分别在最小质量浓度时的抑菌环直径为(0.000±0.000)、(0.000±0.000)、(0.770±0.085) mm,在最大质量浓度时的抑菌环直径为(1.515±0.017)、(1.837±0.283)、(2.853±0.229) mm,且5种质量浓度下混合组的抑菌环直径均显著大于蜂胶组和厚朴酚组(P＜0.05).结论：蜂胶与厚朴酚混合物抑菌效果较二者单独作用时明显增强,提示复方中药防龋存在很大的开发潜力.

摘要： 目的：观察蜂胶与厚朴酚混合物对变形链球菌的生长抑制作用,以期为进一步开发利用复方中药防龋提供参考.方法：根据蜂胶、厚朴酚及二者混合液的最小抑菌浓度选择实验所需的质量浓度分别为:蜂胶250、125、62.5、31.25、15.625 g/L(蜂胶组),厚朴酚0.0625、0.0313、0.0156、0.0078、0.0039g/L(厚朴酚组),蜂胶与厚朴酚混合液A1(250g/L蜂胶+0.0625 g/L厚朴酚)、A2(125 g/L蜂胶+0.0313 g/L厚朴酚)、A3(62.5 g/L蜂胶+0.0156 g/L厚朴酚)、A4(31.25g/L蜂胶+0.0078 g/L厚朴酚)、A5(15.6 g/L蜂胶+0.0039 g/L厚朴酚)(混合组),另设0.95％乙醇组和菌液组作为对照,将蜂胶、厚朴酚及两者混合物分别倍比稀释至各浓度,采用纸片法观察各组对变形链球菌生长的影响.结果：蜂胶及厚朴酚组分别在质量浓度为62.5、0.0156g/L时才出现明显的抑菌环,而混合组在蜂胶及厚朴酚最小质量浓度A5时即出现了明显的抑菌环;蜂胶组、厚朴酚组及混合组的抑菌作用均随质量浓度的增大而增强,3组分别在最小质量浓度时的抑菌环直径为(0.000±0.000)、(0.000±0.000)、(0.770±0.085) mm,在最大质量浓度时的抑菌环直径为(1.515±0.017)、(1.837±0.283)、(2.853±0.229) mm,且5种质量浓度下混合组的抑菌环直径均显著大于蜂胶组和厚朴酚组(P＜0.05).结论：蜂胶与厚朴酚混合物抑菌效果较二者单独作用时明显增强,提示复方中药防龋存在很大的开发潜力.

摘要： 目的：观察蜂胶与厚朴酚混合物对变形链球菌的生长抑制作用,以期为进一步开发利用复方中药防龋提供参考.方法：根据蜂胶、厚朴酚及二者混合液的最小抑菌浓度选择实验所需的质量浓度分别为:蜂胶250、125、62.5、31.25、15.625 g/L(蜂胶组),厚朴酚0.0625、0.0313、0.0156、0.0078、0.0039g/L(厚朴酚组),蜂胶与厚朴酚混合液A1(250g/L蜂胶+0.0625 g/L厚朴酚)、A2(125 g/L蜂胶+0.0313 g/L厚朴酚)、A3(62.5 g/L蜂胶+0.0156 g/L厚朴酚)、A4(31.25g/L蜂胶+0.0078 g/L厚朴酚)、A5(15.6 g/L蜂胶+0.0039 g/L厚朴酚)(混合组),另设0.95％乙醇组和菌液组作为对照,将蜂胶、厚朴酚及两者混合物分别倍比稀释至各浓度,采用纸片法观察各组对变形链球菌生长的影响.结果：蜂胶及厚朴酚组分别在质量浓度为62.5、0.0156g/L时才出现明显的抑菌环,而混合组在蜂胶及厚朴酚最小质量浓度A5时即出现了明显的抑菌环;蜂胶组、厚朴酚组及混合组的抑菌作用均随质量浓度的增大而增强,3组分别在最小质量浓度时的抑菌环直径为(0.000±0.000)、(0.000±0.000)、(0.770±0.085) mm,在最大质量浓度时的抑菌环直径为(1.515±0.017)、(1.837±0.283)、(2.853±0.229) mm,且5种质量浓度下混合组的抑菌环直径均显著大于蜂胶组和厚朴酚组(P＜0.05).结论：蜂胶与厚朴酚混合物抑菌效果较二者单独作用时明显增强,提示复方中药防龋存在很大的开发潜力.

摘要： 本发明提供肺炎链球菌蛋白在抗肺炎链球菌感染中的应用。本发明的肺炎链球菌肽链内切酶O(PepO)为皮下免疫佐剂，与锌金属蛋白酶B(ZmpB)第673位至第863位氨基酸肽段的混合及融合表达，制备的肺炎链球菌蛋白质疫苗对抵抗肺炎链球菌感染都具有良好的保护效果。

摘要： 本发明公开一种双重PCR早期快速检测无乳链球菌和海豚链球菌的引物及其应用。利用本发明的引物对样品进行检测，可实现一次性同时特异性检测样本中的无乳链球菌和海豚链球菌。本发明建立的检测方法可检测到基因组含量分别为9.84×10‑5ng/μL的无乳链球菌和9.30×10‑5ng/μL的海豚链球菌，以及菌液浓度为2.76×102cfu/mL的无乳链球菌和2.51×102cfu/mL的海豚链球菌。本方法在罗非鱼样品检测过程中快速准确具有较高的特异性、灵敏度、重复性和稳定性，可实现罗非鱼链球菌病的早期分子预警，应用前景广阔，为罗非鱼链球菌病的快速诊断、流行病学调查等提供了准确而有效的手段。

摘要： 本发明公开了驴源马链球菌马亚种HLJ2018D‑LX株及其在制备马链球菌马亚种灭活疫苗中的应用，属于生物疫苗领域。本发明的驴源马链球菌马亚种HLJ2018D‑LX株具有免疫原性好、培养特性好等优点，将本发明的马链球菌马亚种HLJ2018D‑LX株接种于链球菌增菌液，培养后，用甲醛(终浓度0.2％v/v)灭活后，制备成灭活疫苗。实验证明，使用本发明制备得到的马链球菌马亚种灭活疫苗免疫小鼠后，能够使小鼠免于强毒马链球菌马亚种的攻击，在驴体试验上大大降低发病率，此疫苗具有安全、低剂量免疫等优点，是首个驴用马链球菌马亚种灭活疫苗，可以作为一种预防由马链球菌马亚种引起的腺疫。

摘要： 本发明涉及一种无乳链球菌扩增引物组和应用及无乳链球菌的检测方法，属于微生物检测技术领域。无乳链球菌的检测方法，包括以下步骤：1)设计特异基因groEL的MCDA扩增引物组：CP1、CP2、F1、F2、D1*、D2、C1、C2、R1*以及R2；2)在包括所述扩增引物组的反应体系下，以待测无乳链球菌样品的基因组作为模板进行MCDA恒温扩增，得到扩增产物；3)使用金纳米生物传感器检测步骤2)的扩增产物，获得检测结果。本发明方法以多交叉恒温扩增为基础，结合纳米生物检测技术，能够直接从临床样本中快捷、敏感、高特异性的检测及鉴定无乳链球菌。

摘要： 本发明涉及一株马兽疫链球菌(又称马链球菌兽疫亚种,Streptococcus equi subsp.zooepidemicus)XJMSY16‑1，CGMCC No.12428，具有序列表1中的16S rRNA基因序列；该菌株分离自马链球菌病病马,革兰氏阳性细菌，细胞呈球状，排列成对，或呈弯曲的长链，在普通肉汤和平板生长不良；5%绵羊鲜血平板上发生β型溶血，露珠状小菌落周围形成完全透明的溶血带，宽度可达2.5～3.2 mm。生长呈兼性厌氧，生长温度从26°C～40°C，最适生长温度37°C，最适生长pH7.4～7.5。发酵葡萄糖产酸，不能发酵乳糖，甘露醇及山梨醇。该菌株可用于制备马链球菌病灭活疫苗。由该菌株制备的疫苗针对性好，成本低，安全，保护效果好。

摘要： 本发明公开了一株高产胞外多糖的嗜热链球菌，其保藏号为CGMCC No.14809；本申请还公开了利用该高产胞外多糖的嗜热链球菌的制备发酵乳的方法，包括如下步骤：(1)将高产胞外多糖的嗜热链球菌采用M17斜面培养基活化；(2)将步骤(1)活化后的高产胞外多糖的嗜热链球菌添加到液体培养基中进行厌氧培养；(3)将经过步骤(2)培养的液体种子与待发酵乳品按照体积比5％～10％进行接种后厌氧发酵获得富含胞外多糖的发酵乳。本发明的产胞外多糖的嗜热链球菌在发酵过程中可以减少或者完全替代食品添加剂的使用，从而不需要添加稳定剂，同时该高产胞外多糖的嗜热链球菌还具有改善产品质构的作用，提高产品的保水性和爽滑性。

摘要： 本发明涉及一种以具备专门杀灭海豚链球菌的能力并具有用序列号1标记的基因组为特征从自然界分离的长尾噬菌体Str‑INP‑1（保藏号：KCTC 12687BP）及利用以所述噬菌体为有效成分的组合物预防及处置海豚链球菌感染的方法。

摘要： 本发明公开了一株高产γ‑氨基丁酸嗜热链球菌，其保藏号为CGMCC No.14810；本申请还公开了该高产γ‑氨基丁酸的嗜热链球菌的保存培养方法，包括如下步骤：(1)从酸马奶中分离出含γ‑氨基丁酸的嗜热链球菌；(2)将步骤(1)得到的产γ‑氨基丁酸嗜热链球菌接种于适合嗜热链球菌生长的斜面培养基上；(3)经步骤(2)斜面培养后，再接种于液体培养基中厌氧培养；本发明还公开了利用产γ‑氨基丁酸嗜热链球菌发酵的方法。本发明的优点在于，该菌种能高产γ‑氨基丁酸，并且在牛奶中生长速度快，用该菌制备的发酵产品中γ‑氨基丁酸的含量高，具有极大的应用价值。

摘要： 一种辅助鉴定猪链球菌2型、猪链球菌7型和猪链球菌9型的引物组及其应用，该引物组由如下引物对组成：由如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列和如SEQIDNO.2所示的核苷酸序列组成的用于辅助鉴定猪链球菌2型的引物对；由如SEQIDNO.3所示的核苷酸序列和如SEQIDNO.4所示的核苷酸序列组成的用于辅助鉴定猪链球菌7型的引物对；由如SEQIDNO.5所示的核苷酸序列和如SEQIDNO.6所示的核苷酸序列组成的用于辅助鉴定猪链球菌9型的引物对。本发明将引物组制备成试剂盒，建立了猪链球菌2、7、9型PCR定型方法，实现了1次PCR同时检测3个血清型，大大缩短了工作内容。

摘要： 本发明公开了一种猪链球菌的反向筛选标记、含有该反向筛选标记的猪链球菌及其应用。所述的反向筛选标记为突变后的编码猪链球菌苯丙氨酸tRNA合成酶α亚基的pheS基因，突变后的pheS基因导致了编码的猪链球菌苯丙氨酸tRNA合成酶α亚基发生了T261S和A315G双取代突变，PheS突变体通过与菌株自身的野生PheS蛋白竞争，翻译过程中将p‑Cl‑Phe错误地掺入到合成的蛋白质中，从而在p‑Cl‑Phe存在条件下，表达PheS突变体的菌株死亡，不表达PheS突变体的菌株生存。利用这一高效反向筛选标记，本发明还建立了高效的猪链球菌无痕基因操作方法，用于实现猪链球菌的无痕基因缺失、基因融合和基因突变等无痕基因操作，在研究猪链球菌生理和病理机制、制备疫苗株方面具有很好的应用前景。