突变体库

摘要： 穗型是构成小麦穗部的重要性状,与小麦产量和品质密切相关。本研究利用甲基磺酸乙酯(EMS)处理小麦新品系河科大527(KD 527),通过多年农艺性状鉴定,从KD 527的EMS处理后代中选育出的一系列穗型突变体,对其穗型进行遗传分析及其效应评价。结果显示,1)构建出了包含15种(类)不同穗型的突变体(库),综合农艺学鉴定表明,与野生型KD 527相比,除了穗型发生异变外,各种突变体在株高、穗长、穗粒数、千粒重等性状均表现降低,同时伴随旗叶、穗下节、芒等器官发生异常。2)不同穗型突变体自交后代单株的穗型遗传分析表明,所有穗型突变体自交后代均出现正常穗型、扭曲穗型的分离;对不同突变体的238个自交单株的统计分析,其中:具有正常穗型的单株69株,扭曲穗型单株169株(极端扭曲穗型单株37株),经X^(2)检验,扭曲穗型∶正常穗型符合3∶1分离规律,正常穗型呈单隐性基因遗传。3)突变体后代自交分离单株农艺学性状的统计结果显示,正常穗型单株的平均株高53.1 cm、平均穗长8.42 cm、平均千粒重55.9 g,扭曲穗型单株的平均株高、穗长与千粒重分别为43.1 cm、6.20 cm、35.2 g,正常穗型单株与扭曲穗型单株的株高、穗长、千粒重等性状差异均达极显著,而极端扭曲穗型单株表现不抽穗、不结实。构建的不同穗型突变体为小麦穗型遗传分析及其遗传效应解析提供了种质基础,对小麦穗部相关性状的遗传改良具有重要的应用价值。

摘要： 本研究利用^(60)Co-γ射线辐射诱变希腊牛至(Origanum vulgare ssp. hirtum)种子,构建突变体群体,并筛选具有优异性状的牛至突变体。结果表明,随着辐射剂量的增加,牛至种子的发芽率和发芽势显著下降(P <0.05),400 Gy及以上的辐射剂量导致牛至种子萌发后胚根停止生长,无法成苗。在100~200 Gy辐射剂量下,获得8 170株M;代突变体群体。参考未处理对照株系的田间表型,筛选获得了一批植株高大、茎节短、分枝多、大叶、叶色及花色变异等诸多类型的突变体,为高产优质牛至新品种培育奠定了基础。

摘要： 目的筛选小分子抗菌药物,探讨选择性雌激素受体调节剂(SERMs)对变异链球菌的抗菌作用及作用机制。方法采用微量稀释法,筛选426个美国食品药物管理局批准的小分子药物对变异链球菌的最低抑菌浓度,通过建立变异链球菌的随机突变体库,探究SERMs作用于变异链球菌的靶点。结果小分子药物库中归属于SERMs的托瑞米芬、他莫昔芬、克罗米芬和雷洛昔芬对变异链球菌具有良好的抗菌作用。通过构建变异链球菌的突变体库,筛选发现了两个突变菌株对克罗米芬产生了抗性,对耐药株的基因序列的分析表明,转座子插入位点位于smu_546、smu_874的基因。结论托瑞米芬、他莫昔芬、克罗米芬、和雷洛昔芬等SERMs药物对变异链球菌有明显的抗菌作用,且克罗米芬的作用靶点可能位于smu_546、smu_874基因表达的蛋白上。

摘要： 2月8日,河北农业大学大联合中国农业科学院蔬菜花卉研究所在《MolecularPlant》在线发表题为"Construction of a high-density mutant population of Chinese cabbage facilitates the genetic dissection of agronomic traits"的论文。研究通过EMS诱变技术构建了以结球大白菜A03为遗传背景的表型丰富的突变体库;结合Pac Bio、Illumina和Hi-C测序技术,完成了A03基因组组装、基因注释。

摘要： 黄瓜(Cucumis sativus L.)是重要的鲜食类蔬菜之一,是我国保护地生产的第一大蔬菜作物。随着国家经济发展,人们对黄瓜品质、抗性的要求越来越高,然而由于黄瓜的遗传基础趋于单一化,自然变异频率低,以及常规育种的年限长等限制因素,依靠黄瓜自发突变获得优良的遗传材料十分困难,黄瓜遗传育种进程变得愈发缓慢,因此选育高品质、抗性强的黄瓜新品种迫在眉睫。诱变育种技术以其可以提高变异频率、扩大变异谱等特点,近年来在选育新品种方面受到广泛的应用。本文通过对黄瓜诱变育种进行系统性的论述,从诱变方法的作用机理和在黄瓜育种中的应用着手,概述了化学诱变方法、物理诱变方法、航天诱变及插入突变的方法,并分析其优缺点;总结了诱变育种对黄瓜表型性状、生理生化和分子水平的影响以及黄瓜突变体的鉴定方法;重点阐述了突变体在黄瓜新品种选育过程中的应用;最终探讨了黄瓜诱变育种进程中存在的问题及解决办法;为科研工作者后续的研究提供参考与借鉴,对加快黄瓜育种进程具有重要意义。

摘要： 淮稻5号是江苏地区粳稻主栽品种之一,该品种具有灌浆速度快、出糙率高、千粒质量高、抗倒能力强、耐低温等特点.但由于缺少适宜的研究材料,淮稻5号中优良农艺性状的调控机制一直没有得到解析.突变体是研究基因功能最直接、最有效的途径之一,本研究利用N-甲基-N-亚硝脲(MNU)化学诱变构建了包含3562个家系的淮稻5号突变体库,并从中筛选获得了512个表型稳定的突变体,包括株型、叶色、育性、抽穗期、早衰、类病斑等8种类型,利用MutMap技术完成了2个株型突变体的突变位点初步定位,该突变体库的构建及MutMap技术的应用,以期为淮稻5号优良性状的解析提供突变体资源.

摘要： 为构建具有自主知识产权的大麦突变体库,从而为大麦种质创新和解析作物主要农艺性状形成机理提供材料,本研究通过^(60)Co-γ和甲基磺酸乙酯(EMS)复合诱变处理,构建了自育大麦品种鄂大麦934的突变体库,包含982株与对照存在明显差异且性状无分离、可遗传的变异株,涉及叶片、茎秆、穗子、籽粒、分蘖、株型、抽穗期、结实率等多个农艺性状。通过扫描电镜对叶宽突变体的叶片细胞进行显微观察,发现突变体在细胞水平上变化各异。本研究构建的突变体库为开展大麦功能基因组学研究奠定了基础。

摘要： [目的]明确甲基磺酸乙酯(EMS)诱变处理菜心种子的最佳浓度和处理时间,为EMS诱变技术在菜心种质资源创新利用方面及丰富菜心种质资源选育提供支持.[方法]设4种不同浓度的EMS溶液(0.2％,0.4％,0.6％和0.8％)和3种不同处理时间(8、12和16 h)共12个组合,诱变处理2个菜心自交系(C40和小80天)的种子,并对诱变后代出苗率和结籽株比例进行分析,筛选EMS诱变菜心种子的最佳处理条件.[结果]随着EMS浓度的增加,菜心种子成苗率和结籽株比例逐渐降低.诱变处理8 h,EMS浓度为0.6％时,C40和小80天菜心的成苗率分别65％和70％,结籽株比例分别为13％和31％;EMS浓度升高至0.8％时,C40菜心的成苗率降至50％,2个菜心材料的结籽株比例均低于20％.随着EMS处理时间的延长,菜心种子成苗率和结籽株比例逐渐降低.EMS处理浓度为0.4％时,诱变12 h,2个菜心材料(C40和小80天)的成苗率均为75％,结籽株比例分别为30％和45％;诱变16 h,C40和小80天菜心的成苗率分别降至60％和55％,结籽株比例均低于20％.EMS诱变处理不仅抑制成苗率,还严重影响结实情况.根据成苗率和M1群体植株的结籽株比例,并保证最大诱变效率和突变体群体,确定菜心种子EMS诱变处理的最佳条件为0.4％EMS诱变处理12 h.不同基因型菜心材料对EMS的耐受性不同,生长势强的菜心材料EMS处理的时间或浓度可适当增大或降低.采用最佳诱变条件处理3000粒小80天菜心种子,在M1群体中出现黄化、白化、皱缩、矮化及嵌合等变异性状,M1群体包含500个突变株系.随机选取种子量大的M1群体中176个家系,构建包含2110个单株的M2群体,在M2群体中发现94个突变单株,总的突变频率为4.3％.其中,叶片叶色或形状突变的单株61株,株型变异的单株共31株,花色突变的单株2株.[结论]利用EMS诱变菜心种子有明显效果,构建的菜心EMS突变体库表型变异丰富,尤其是出现株型紧凑,叶色浓绿的有益突变,可用于菜心功能基因组学研究和育种.

摘要： 【目的】明确甲基磺酸乙酯(EMS)诱变处理菜心种子的最佳浓度和处理时间,为EMS诱变技术在菜心种质资源创新利用方面及丰富菜心种质资源选育提供支持。【方法】设4种不同浓度的EMS溶液(0.2%,0.4%,0.6%和0.8%)和3种不同处理时间(8、12和16 h)共12个组合,诱变处理2个菜心自交系(C40和小80天)的种子,并对诱变后代出苗率和结籽株比例进行分析,筛选EMS诱变菜心种子的最佳处理条件。【结果】随着EMS浓度的增加,菜心种子成苗率和结籽株比例逐渐降低。诱变处理8 h,EMS浓度为0.6%时,C40和小80天菜心的成苗率分别65%和70%,结籽株比例分别为13%和31%;EMS浓度升高至0.8%时,C40菜心的成苗率降至50%,2个菜心材料的结籽株比例均低于20%。随着EMS处理时间的延长,菜心种子成苗率和结籽株比例逐渐降低。EMS处理浓度为0.4%时,诱变12 h,2个菜心材料(C40和小80天)的成苗率均为75%,结籽株比例分别为30%和45%;诱变16 h,C40和小80天菜心的成苗率分别降至60%和55%,结籽株比例均低于20%。EMS诱变处理不仅抑制成苗率,还严重影响结实情况。根据成苗率和M_1群体植株的结籽株比例,并保证最大诱变效率和突变体群体,确定菜心种子EMS诱变处理的最佳条件为0.4%EMS诱变处理12 h。不同基因型菜心材料对EMS的耐受性不同,生长势强的菜心材料EMS处理的时间或浓度可适当增大或降低。采用最佳诱变条件处理3000粒小80天菜心种子,在M_1群体中出现黄化、白化、皱缩、矮化及嵌合等变异性状,M_1群体包含500个突变株系。随机选取种子量大的M_1群体中176个家系,构建包含2110个单株的M_2群体,在M_2群体中发现94个突变单株,总的突变频率为4.3%。其中,叶片叶色或形状突变的单株61株,株型变异的单株共31株,花色突变的单株2株。【结论】利用EMS诱变菜心种子有明显效果,构建的菜心EMS突变体库表型变异丰富,尤其是出现株型紧凑,叶色浓绿的有益突变,可用于菜心功能基因组学研究和育种。

摘要： 近日,中国农业科学院农业资源与农业区划研究所土壤植物互作创新团队与国内科研单位合作,组装了我国玉米骨干自交系RP125的高质量参考基因组,并在该背景下创制了一个EMS突变体库,为玉米基因功能研究和遗传改良提供了重要理论基础和宝贵种质资源。

摘要： 低能离子束注入技术是近年来发展起来的一种物理性诱发突变技术,在作物诱变育种中应用越来越广泛.为进一步探讨低能离子束的诱变功效,构建小麦突变体库,本试验采用两种不同剂量的低能氮离子束对软质小麦品种偃展4110进行了诱变处理,共获得了1024份M2代单株.然后随机选取其中600份材料,采用单籽粒谷物特性测试仪(SKCS)进行籽粒硬度表型测试,结果表明,共有31份突变体为混合麦,3份突变体为硬质麦,突变率为5.7％.为进一步探索离子束诱变的分子机制,采用Ha住点Puroindoline基因不同区段的特异引物对部分突变材料进行扩增后发现,选用的14份参试材料中有6份材料的Ha位点包含至少一个大的片段缺失,从而导致小麦胚乳质地变硬.本试验利用低能离子束技术成功构建了一个小麦品种偃展4110的突变体库,为小麦功能基因组学研究提供重要的材料基础.

摘要： 目的：用化学诱变方法构建菊花突变体库,为菊花新品种培育和功能基因组学研究奠定基础.rn 方法：利用化学诱变剂甲基磺酸乙酯(ethyl methane sulfonate,EMS)处理菊花品种'神马'茎尖,并对其M1代和M2代无性系变异植株的观赏性状进行调查、鉴定和分析.rn 结果：对EMS处理的菊花材料的突变体表型进行调查和统计,结果表明突变群体的表型变异率达到6.31％,获得了菊花株高、叶片、开花期、花序以及花瓣等观赏性状的突变体.表型变异类型多样,获得的突变体库较为理想,特别是发现了自然突变或人工诱变中少见的开花期提早突变体和花器官的变异类型,如花苞片消失或易位、舌状花和筒状花增加或缺失等.rn 结论：本试验所用EMS构建的菊花的突变群体变异类型丰富,可有效的被用于菊花新品种培育和功能基因组学的研究.

摘要： 生防蜡样芽孢杆菌905(Bacillus cereus905)是本实验室从小麦体内分离获得的一株有益芽孢杆菌,温室和田阃应用结果显示.该细菌在小麦、水稻等很多作物上都表现出促生和防病效果,能在小麦根际稳定定殖.本实验室前期研究发现B.cereus 905的细胞破碎液中含有大量的SOD.当sodA(Mns0D的编码基因)缺失突变后.B.cereus 905在小麦根围的定殖能力与野生型菌株相比急剧下降.说明SOD与有益菌B.cereus 905在小麦根围的定殖能力密切相关.在纳米二氧化钛(TiO2)光催化氧化胁迫下.sdA缺失突变体存活能力相对于野生型B.cereus 905显著下降,功能互补sodA后能突变株的存活能力恢复到野生型水平,深入研究发现B.cereus 905 soda的表达水平在TiO2光催化氧化胁迫下显著提高,表明MnSOD在B.cereus 905抵御纳米TiO2光催化氧化毒性过程中起重要作用.目前对B.cereus 905定殖的分子机制还仅局限于对SOD的研究.其它方面尚不清楚.转座子标签技术是研究功能基因的有效的工具之一,因此,本研究将构建B.cereus 905转座子随机插入突变体库,为深入研究B.cereus 905定殖的分子机制奠定基础.pMarA转座质粒具有高效和稳定的优点,目前已经成功用于枯草芽孢杆菌,苏云金芽孢杆菌插入突变体库的构建.pMarA是一个大小为8253 bp的转座质粒.其上舍有转座子ThYLB-1和温度敏感型复制子repG+tm(30°C复制,50°C不能复制).在低温条件下,pMarA上的Himatl在启动子PA作用下表达,识别转座子ThYLB-1(KanR)两端的反向重复序列ITR,使转座子从pMaxA质粒上跳跃到B.cereus 905基因组上;由于repG+tm复制子不能复制,在高温条件下.未发生转座的pMarA(ErmR,KanR)将被消除;因此转座子成功插入到基因组上的菌株对卡邢霉素具有抗性,而对红霉素敏感(ErmS,KdnR).本实验中,将带有pMarA的B.cereus 905接种至LB培养液中,37°C振荡培养12 h,诱导TnYLB-1发生转座;取合适菌液稀释LB涂板(无抗性).46°C高温培养8 h,挑取长出的单菌落,同时点接至LB(Kan,50ug/mL)平板和LB(Erill,10ug/mL)平板上,30°C培养过夜;挑取具有卡那霉素抗性而对红霉素敏感的单菌落至LB(Kan,50ug/mL)平板上保存备用,这些菌株即为插入突变子.实验结果显示,pMarA在B.cereus905中的转座效率为9.8×10-3,比报道的其在枯草芽孢杆菌中的转座效率高.随机挑取15个单菌落,提取基因组,用EcoRI酶切12h,进行SOUtl[1ernbIot分析,结果显示80％的突变子是转座子单位点插入基因组中;从中挑取了7个菌落.提取基因组,进行采用反向PCR及测序技术检测插入住点,测序结果显示插入住点的序列均不同,表明TnYLB-1转座子的插入为随机插入.以上结果表明,利用37°C诱导转座,46°C消除质粒技术使转座子TnYLB-1转座子随机插入到B.cereus 905基因组上,成功构建了B.cerells905的转座子插入突变体库.B.cereus 905突变体库的建立,不仅有助于揭示B.cereus 905定殖的分子机制.而且有助于探索提高B.cereus 905生防效果的途径.

摘要： 本研究运用农杆菌介导的T-DNA 转化技术（ATMT），对生防绿木霉（Trichoderma viride）ZBS6 进行了转化，共获得468个转化子，转化效率为234 转化子/10 6个分生孢子。对随机挑选的20个转化子进行PCR 验证表明，含有T-DNA的转化子比率达90.0％。对所有转化子进行表型分析，筛选出生长速度变异的转化子12个，菌落颜色变化的转化子8个，产孢能力明显减弱的转化子11个；同时，以小麦全蚀病菌作为供试病原菌，测定了转化子的拮抗作用，最终筛选出2个拮抗作用显著增强的转化子，分别为T-79和T-89。目前正在分离突变体T-79和T-89的T-DNA 标记基因。该研究为构建高质量木霉T-DNA 插入突变体库及其拮抗作用分子机理研究奠定了坚实基础。

摘要： 定向进化是改造蛋白质分子的一种有效的新策略,已经被广泛应用于修饰和加强蛋白质性能的研究.但其构建的文库非常大,待筛选的克隆的数量常常会达到105-1013.同时在目的蛋白筛选中,至关重要的是找到高灵敏度、高选择性和高通量的筛选方法.近年来,许多新的高通量筛选方法不断涌现并被报道.

摘要： 本研究利用携带mariner-Himar转座酶和含有卡那霉素抗性转座元件TnYLB-1的pMarA质粒，以杀线虫芽抱杆菌B.nematocida B16g为出发菌株，构建了B16g的插入突变体文库，该库共含5103个转化子。随机挑选30个突变子经卡那霉素抗性和PCR分析检测，结果显示突变体均有卡那霉素抗性和卡那霉素抗性基因，表明文库是可靠的。

摘要： 灰葡萄孢引起植物灰霉病，寄主达200多种植物，造成严重的经济损失。一般认为该菌的致病因子包括细胞壁降解酶、毒素及激素等。本文从分子水平上探究灰葡萄孢的致病性及其机理，从而为制定持久控制灰霉病的策略提供理论依据和实践基础。以灰葡萄孢菌株RosaBC-3为材料，采用农杆菌介导转化技术获得了1000多个插入突变体，采用离体油菜叶片接种技术筛选出了9个致病力增强的突变体和12个致病力完全丧失的突变体。分析其生物学特性，并用PCR方法对其T-DNA侧翼序列进行克隆，将获得的序列信息与NCBI及Broad Institute B.cinerea BO5.10 database中的序列比对进行分析。结果发现:突变体AT15的生长速度稍慢于出发菌株RosaBC-3;分生孢子产量与出发菌株无显著差异(P>0.05)，在1%的葡萄糖溶液中经8h培养后萌发率显著低于出发菌株;菌丝块在洋葱表皮接种12h后，形成的侵染结构数量与出发菌株无显著差异(P>0.05)。该菌株中T-DNA插入在B.cinerea BC1G-00493基因前17bp处，该基因全长594bp，编码198氨基酸的假定蛋白，含有一个内含子，分析后发现该假定蛋白没有己知功能的功能域。突变体AT239的生长速度、侵染结构数量与出发菌株均无显著差异(P>0.05);不产生分生孢子;产酸的平板试验表明其产酸量高于出发菌株;菌丝块在洋葱表皮接种12h后，洋葱表皮可以发病，发病率为19%。该菌株中T-DNA插入在BC1G-03701基因前653bp处，该基因全长1548bp，编码433aa的保守假定蛋白，含有2个内含子，该假定蛋白含有DUF2414 super family domain，该结构域在真菌和哺乳动物中都是保守的，但是功能未知。这两个基因在B.cinerea致病中的功能未见研究报道，需要通过敲除与互补等试验进一步验证其功能。

摘要： 本文以含CIAV标准毒CuX-1株VP3突变体的pTCAVM阳性质粒为基础,通过重叠PCR在基因组位点nt682、nt808、nt829处进行定点突变,构建pTCAVM1、pTCAVM2、pTCAVM3突变体;在此基础上,对上述三个位点进行组合定点突变,构建成功pTCAVMa、pTCAVMb、pTCAVMc突变体;此外,成功构建克隆出三个位点均发生突变的pTCAVMd突变体。所有的突变体都保证VP3定点突变位点的碱基变化,同时不引起VP2蛋白的氨基酸残基序列发生变化,保证了突变体和原始病毒抗原性的一致;将得到的突变体转染易感细胞MSB1,获得具有复制特性的病毒,将病毒接种1日龄的SPF雏鸡,发现病毒可以在鸡体内复制,并引起CAV感染的病理学变化。本研究成功获得了多株感染性克隆毒株,为研究CAV病毒致病性以及开发鸡贫血弱毒活疫苗奠定了基础。

摘要： 高质量的突变体库的建立是开展功能基因组学研究的基础.本研究利用农杆菌介导技术,构建稻瘟菌突变体库,并对部分突变体进行田间致病性筛选及表型分析.

摘要： 马铃薯是重要的粮食作物之一,马铃薯基因组的测序工作已于2011年7月完成。在此基础上,以挖掘基因功能为研究目的的功能基因组研究正在世界各国全面迅速展开。利用农杆菌介导的遗传转化法,将已经构建好的增强子捕获T-DNA双元载体转入马铃薯外植体中得到转化植株,对转化植株进行突变体筛选,可以为结合马铃薯基因组测序计划发布的数据开展大规模的马铃薯功能基因组学研究提供材料,为利用反向遗传学手段研究马铃薯功能基因组搭建平台。

摘要： 本发明提供了头孢菌素羟化酶突变体、编码该突变体的DNA、使用该突变体的方法及其应用。所述头孢菌素羟化酶突变体的氨基酸序列以序列表中的SEQ ID NO.:2为参考序列，具有位于第29位甘氨酸、第40位丙氨酸、第41位甘氨酸、第182位精氨酸和第272位苏氨酸中的至少一者的突变，并且与野生型头孢菌素羟化酶相比，所述头孢菌素羟化酶突变体的酶活性高至少10％，耐热性高至少150％。本发明的头孢菌素羟化酶突变体具有提高的催化活性和耐热性，更适于商业和工业应用。

摘要： 本发明提供了青霉素扩环酶突变体、编码该突变体的DNA、含有该突变体的试剂盒及其应用。所述青霉素扩环酶突变体的氨基酸序列以序列表中的SEQ ID NO.:2为参考序列，具有位于第42位苏氨酸和第126位谷氨酰胺中的至少一者的突变，所述第42位苏氨酸突变为除其自身以外其他天然氨基酸中的任一者，所述第126位谷氨酰胺突变为除其自身以外其他天然氨基酸中的任一者。本发明的青霉素扩环酶突变体具有提高的催化活性和耐热性，更适于商业和工业应用。

摘要： 本发明披露利用基因突变技术改良的耐热高催化活性Methanococcus jannaschii S-腺苷甲硫氨酸合成酶突变体，该突变体的特征在于，以说明书中所附的序列2为参考序列，其具有选自第102位、第93位、第230位和第357位的至少一个突变，并且以三磷酸腺苷(ATP)和甲硫氨酸为底物其具有比亲本高出至少70％的S-腺苷甲硫氨酸合成酶催化活性。该S-腺苷甲硫氨酸合成酶突变体可用于生产S-腺苷甲硫氨酸。

摘要： 本发明公开了一种褐藻胶裂解酶突变基因、褐藻胶裂解酶突变体、含该突变体的工程菌及构建方法和应用。本发明还公开利用基因工程的技术方法，将该新褐藻胶裂解酶的突变基因克隆到大肠杆菌表达载体上，获得可异源表达该酶的大肠杆菌重组菌株，用该菌株异源表达来制备的褐藻胶裂解酶突变体mAlgNJU‑03，具有降解褐藻酸钠制备褐藻酸钠寡糖并改变了寡糖聚合度的功能。本发明提供的褐藻胶裂解酶突变体mAlgNJU‑03可广泛应用于化工、农业、食品、饲料添加、医药及海藻遗传工程等领域。

摘要： 本发明公开了一种反式茴香脑加氧酶突变体的高通量筛选方法及突变菌株和突变体，包括以反式茴香脑加氧酶基因为模板，进行易错PCR，获得反式茴香脑加氧酶突变体文库；将所述反式茴香脑加氧酶反应底物添加入含有反式茴香脑加氧酶突变体的溶液中进行催化反应，将反应液与2,4‑二硝基苯肼进行显色反应，并加入碱溶液及有机溶剂反应，测定吸光度。本发明通过易错PCR构建突变库，并建立以2,4‑二硝基苯肼为显色剂，酶标仪测定OD470为基础的高通量筛选方式，筛选合成洋茉莉醛重组菌株的突变菌株，该方式具有高效、精准、快速的优势，突变株LSQ‑3对于合成洋茉莉醛、对茴香醛以及香兰素的催化效率均显著提高，具有良好的应用价值。

摘要： 本发明公开了突变体xSUMO、突变体xE1和xSUMO‑xE1组合突变体及其相关产品和用途，所述突变体xSUMO，为如下(1)或(2)的蛋白：(1)由如SEQ ID NO.1或如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(2)将如SEQ ID NO.1或如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由(1)衍生的蛋白质。本发明构建了突变体xSUMO、突变体xE1以及xSUMO‑xE1组合突变体，能特异性识别SUMO结合酶E2(Ubc9)的底物或E3底物，能作为靶蛋白用于筛选抗神经退行性疾病或抗癌药物。

摘要： 本发明提供了头孢菌素羟化酶突变体、编码该突变体的DNA、使用该突变体的方法及其应用。所述头孢菌素羟化酶突变体的氨基酸序列以序列表中的SEQ ID NO:2为参考序列，具有位于第29位甘氨酸、第40位丙氨酸、第41位甘氨酸、第182位精氨酸和第272位苏氨酸中的至少一者的突变，并且与野生型头孢菌素羟化酶相比，所述头孢菌素羟化酶突变体的酶活性高至少10％，耐热性高至少150％。本发明的头孢菌素羟化酶突变体具有提高的催化活性和耐热性，更适于商业和工业应用。

摘要： 本发明提供了青霉素扩环酶突变体、编码该突变体的DNA、含有该突变体的试剂盒及其应用。所述青霉素扩环酶突变体的氨基酸序列以序列表中的SEQ ID NO.:2为参考序列，具有位于第42位苏氨酸和第126位谷氨酰胺中的至少一者的突变，所述第42位苏氨酸突变为除其自身以外其他天然氨基酸中的任一者，所述第126位谷氨酰胺突变为除其自身以外其他天然氨基酸中的任一者。本发明的青霉素扩环酶突变体具有提高的催化活性和耐热性，更适于商业和工业应用。

摘要： 本发明披露利用基因突变技术改良的耐热高催化活性Methanococcus jannaschii S－腺苷甲硫氨酸合成酶突变体，该突变体的特征在于，以说明书中所附的序列2为参考序列，其具有选自第102位、第93位、第230位和第357位的至少一个突变，并且以三磷酸腺苷(ATP)和甲硫氨酸为底物其具有比亲本高出至少70％的S－腺苷甲硫氨酸合成酶催化活性。该S－腺苷甲硫氨酸合成酶突变体可用于生产S－腺苷甲硫氨酸。

摘要： 本发明公开了一种褐藻胶裂解酶突变基因、褐藻胶裂解酶突变体、含该突变体的工程菌及构建方法和应用。本发明还公开利用基因工程的技术方法，将该新褐藻胶裂解酶的突变基因克隆到大肠杆菌表达载体上，获得可异源表达该酶的大肠杆菌重组菌株，用该菌株异源表达来制备的褐藻胶裂解酶突变体mAlgNJU‑03，具有降解褐藻酸钠制备褐藻酸钠寡糖并改变了寡糖聚合度的功能。本发明提供的褐藻胶裂解酶突变体mAlgNJU‑03可广泛应用于化工、农业、食品、饲料添加、医药及海藻遗传工程等领域。