人脐带间充质干细胞

摘要： 背景:目前,缺乏有效的治疗方法促进糖尿病患者的皮肤创面愈合。人脐带间充质干细胞已被证明对皮肤再生具有多种治疗作用,可注射水凝胶具有良好的生物相容性和可调节性,可以提高干细胞治疗的效果。目的:以负载人脐带间充质干细胞的水凝胶为切入点,观察其对小鼠糖尿病皮肤创面的疗效,并探索可能的作用机制。方法:①链脲佐菌素溶液连续腹腔注射5 d构建C57BL/6J小鼠糖尿病模型,经尾静脉采血测血糖值评估模型是否建立成功。②造模成功后,利用打孔器建立小鼠背部皮肤损伤模型,水凝胶组给予纯水凝胶敷胶治疗,复合水凝胶组给予负载有人脐带间充质干细胞的水凝胶治疗,对照组给予等量生理盐水治疗,治疗第7,14天观察创面愈合情况。结果与结论:①敷胶后的14 d内,水凝胶组、复合水凝胶组小鼠皮肤创面面积明显低于对照组(P<0.05),复合水凝胶组的皮肤创面面积明显低于水凝胶组(P<0.05);②苏木精-伊红染色结果显示:复合水凝胶组创面肉芽组织新生率明显高于水凝胶组和对照组(P<0.05);③Masson染色结果显示:与对照组和水凝胶组相比,复合水凝胶组创面组织胶原沉积率明显增加(P<0.05);④免疫组化CD31染色结果显示:复合水凝胶组创面组织中新生微血管数量明显高于水凝胶组和对照组(P<0.05);⑤免疫组化CD45染色结果显示:与对照组和水凝胶组相比,复合水凝胶组创面组织中炎症面积明显减少(P<0.05);⑥免疫荧光染色和qRT-PCR结果显示:与对照组和水凝胶组相比,复合水凝胶组创面组织中M2巨噬细胞及其标志性因子白细胞介素10表达显著升高,且M1巨噬细胞及其标志性因子白细胞介素6表达明显降低(P<0.05);⑦上述结果提示:负载人脐带间充质干细胞的氯化壳聚糖-β-甘油磷酸钠复合水凝胶通过促进糖尿病创面肉芽组织和微血管形成,减轻炎症反应,从而促进创面愈合。

摘要： 背景:近年来,在肿瘤微环境中干细胞与肿瘤的相互作用已成为研究热点,但是多发性骨髓瘤细胞条件培养液对人脐带间充质干细胞影响的实验鲜有报道。目的:探讨多发性骨髓瘤细胞条件培养液对人脐带间充质干细胞增殖、迁移及分化能力的影响。方法:以组织块贴壁法提取人脐带间充质干细胞,同时培养并提取人多发性骨髓瘤RPMI8226和U266细胞上清液制备条件培养液。按培养基的不同进行细胞分组:对照组人脐带间充质干细胞仅用L-DMEM完全培养液培养;实验组人脐带间充质干细胞用20%RPMI8226细胞条件培养液或20%U266细胞条件培养液和80%L-DMEM完全培养液培养。培养24 h,通过CCK-8、EDU、结晶紫染色观察细胞增殖情况,划痕法评估细胞迁移情况,成骨成脂诱导实验检测细胞分化能力,Real-time PCR检测细胞中周期蛋白基因p16、p21 mRNA表达。结果与结论:实验组细胞的增殖数量多于对照组(P <0.05),迁移率高于对照组(P <0.05),矿化结节染色面积小于对照组(P <0.05),脂滴阳性染色面积大于对照组(P <0.05);实验组的细胞周期基因p16、p21 mRNA表达低于对照组(P <0.05)。结果表明,人多发性骨髓瘤细胞条件培养液可促进人脐带间充质干细胞的增殖、迁移和成脂分化,抑制成骨分化,可能与其抑制p16、p21基因表达有关。

摘要： 背景:已有研究表明外泌体可以改善低氧性肺动脉高压,而且不同来源、不同环境的外泌体功能存在显著差别。低氧预处理脐带间充质干细胞来源外泌体对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响尚不清楚。目的:探讨低氧预处理人脐带间充质干细胞来源外泌体对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法:采用组织贴壁法分离培养原代人脐带间充质干细胞,用超滤法提取人脐带间充质干细胞来源外泌体;采用组织消化法分离大鼠肺动脉平滑肌细胞,用CCK-8法测定不同质量浓度外泌体干预肺动脉平滑肌细胞不同时间后的细胞增殖抑制率,确定外泌体作用的适宜质量浓度和干预时间。将第3代肺动脉平滑肌细胞分为常氧对照组、低氧对照组、低氧+常氧外泌体处理组和低氧+低氧外泌体处理组,EdU法检测各组细胞增殖情况,Western blot检测各组细胞核增殖抗原蛋白表达水平。结果与结论:①与常氧对照组相比,低氧对照组肺动脉平滑肌细胞增殖能力明显增加;与低氧对照组相比,低氧+常氧外泌体组细胞增殖能力下降,且低氧+低氧外泌体组增殖能力下降更明显;②与常氧对照组相比,低氧对照组细胞的细胞核增殖抗原蛋白表达升高;与低氧对照组相比,低氧+常氧外泌体组细胞核增殖抗原蛋白表达水平稍微降低,低氧+低氧外泌体组细胞核增殖抗原蛋白表达水平明显降低;③结果表明,低氧预处理人脐带间充质干细胞来源外泌体具有抑制肺动脉平滑肌细胞增殖的能力。

摘要： 背景:人脐带间充质干细胞具有分化能力强、免疫调节作用强等特点,在细胞治疗方面受到广泛关注.目的:总结人脐带间充质干细胞治疗子宫内膜损伤相关疾病的研究进展.方法:以"人脐带间充质干细胞、子宫内膜、子宫内膜异位症、宫腔粘连、薄型子宫内膜"为中文检索词,以"human umbilical cord mesenchymal stem cells,endometrium,endometriosis,intrauterine adhesion,thin endometrium"为英文检索词,应用计算机检索PubMed、中国知网及万方数据库1991-2020年发表的相关文献,对64篇符合入组标准的文献进行综述分析.结果 与结论:①人脐带间充质干细胞作为一种有相当发展潜力的干细胞,具有来源丰富、采集方便、细胞增殖和分化特性显著的特点.②人脐带间充质干细胞通过免疫调节、细胞分化及下调纤维化基因表达等途径,促进子宫内膜细胞损伤修复,减少瘢痕形成,改善子宫内膜功能,从而有利于胚胎着床和妊娠.③人脐带间充质干细胞移植治疗子宫内膜损伤发挥作用的重要机制可能与其旁分泌的各种细胞因子和营养因子有密切关系,这些因子参与了子宫内膜修复及免疫调节作用.④以人脐带间充质干细胞为基础的治疗方法在子宫内膜损伤疾病治疗中取得了一些有希望的成果,例如可抑制子宫内膜异位细胞的体外增殖和促进其凋亡,通过修复受损内膜从而恢复子宫内膜异位症大鼠的受孕能力,能够明显促进重度宫腔粘连综合征大鼠子宫内膜再生性修复,促进血管再生,恢复内膜功能,通过免疫调节特性使子宫内膜厚度增加,改善子宫内膜容受性,为治疗薄型子宫内膜提供新的思路.⑤人脐带间充质干细胞可以逃避机体免疫系统的识别,避开宿主监视,因而输注到体内不会引发强烈的排斥反应.⑥目前的此类研究多数仍局限于动物实验阶段,其在临床治疗中的应用并不广泛,未来需要进行更多的临床试验,进一步深入研究人脐带间充质干细胞治疗子宫内膜相关疾病的治疗机制.

摘要： 背景:内皮功能障碍是动脉粥样硬化和心血管疾病的早期预测因子,脐带间充质干细胞移植为治疗血管损伤提供了可能性.目的:探讨过表达白细胞介素8受体A/B对人脐带间充质干细胞迁移能力的影响.方法:培养原代人脐带间充质干细胞和人脐静脉内皮细胞,转染含白细胞介素8受体A/B的腺病毒载体,荧光共聚焦和Western blot检测转染后细胞中白细胞介素8受体A/B的表达,然后通过CCK-8实验、竞争实验和黏附实验检测过表达白细胞介素8受体A/B对细胞增殖能力、竞争能力和迁移能力的影响.结果 与结论:过表达白细胞介素8受体A/B的荧光腺病毒载体对细胞增殖能力无明显影响,但过表达白细胞介素8受体A/B的人脐带间充质干细胞竞争和迁移能力明显高于过表达白细胞介素8受体A/B的人脐静脉内皮细胞(P<0.05).结果 表明,白细胞介素8受体提高了人脐带间充质干细胞的迁移能力,促进向损伤内皮的黏附.

摘要： 背景:内皮功能障碍是动脉粥样硬化和心血管疾病的早期预测因子,脐带间充质干细胞移植为治疗血管损伤提供了可能性。目的:探讨过表达白细胞介素8受体A/B对人脐带间充质干细胞迁移能力的影响。方法:培养原代人脐带间充质干细胞和人脐静脉内皮细胞,转染含白细胞介素8受体A/B的腺病毒载体,荧光共聚焦和Western blot检测转染后细胞中白细胞介素8受体A/B的表达,然后通过CCK-8实验、竞争实验和黏附实验检测过表达白细胞介素8受体A/B对细胞增殖能力、竞争能力和迁移能力的影响。结果与结论:过表达白细胞介素8受体A/B的荧光腺病毒载体对细胞增殖能力无明显影响,但过表达白细胞介素8受体A/B的人脐带间充质干细胞竞争和迁移能力明显高于过表达白细胞介素8受体A/B的人脐静脉内皮细胞(P<0.05)。结果表明,白细胞介素8受体提高了人脐带间充质干细胞的迁移能力,促进向损伤内皮的黏附。

摘要： 目的:目前脊髓损伤仍缺乏十分有效的治疗手段,细胞治疗可能是一种很有前景的治疗手段,其中人脐带间充质干细胞由于其具有易获取、低成本、伦理争议少和免疫原性低等优点受到广泛关注.但目前临床上并没有大范围使用人脐带间充质干细胞,对其有效性和安全性还有争议.文章使用Meta分析来评价人脐带间充质干细胞治疗脊髓损伤的有效性和安全性.方法:应用计算机检索英文数据库(PubMed、Web of Science、Cochrane、EMbase)和中文数据库(中国知网、万方医学网和维普数据库),搜集人脐带间充质干细胞治疗脊髓损伤的临床研究文献,检索时间为各数据库建库至2021年4月.由2位研究人员独立阅读纳入文献、提取资料和评价质量,随机对照试验使用改良Jadad评分量表对纳入文献进行评分,并使用Cochrane风险偏倚评估工具进行偏倚风险评估,队列研究采用NOS量表进行评价,使用RevMan 5.3软件进行Meta分析.结果:共纳入10篇文献,370例患者,包括6篇随机对照试验,4篇队列研究,文献总体质量较高.Meta分析结果显示:①人脐带间充质干细胞移植组的ASIA感觉功能评分(MD=5.20,95％CI:3.50-6.90,P<0.00001)、AIS分级改善率(RR=2.26,95％CI:1.40-3.65,P=0.0008)、日常生活能力评分(Barthel指数)(MD=5.12,95％CI:1.04-9.20,P=0.01)均高于对照组;②人脐带间充质干细胞移植组在ASIA运动功能评分(MD=3.48,95％CI:-0.14-7.10,P=0.06)、ASIA感觉功能评分中细化的针刺觉(MD=7.58,95％CI:-0.44-15.59,P=0.06)、轻触觉(MD=7.67,95％CI:-0.42-15.77,P=0.06)评分方面,与对照组相比差异无显著性意义;③敏感性分析结果显示,在人脐带间充质干细胞移植组ASIA运动功能评分高于对照组(MD=6.14,95％CI:4.46-7.81,P<0.00001),在日常生活能力评分方面,结论与之前保持一致.纳入的10篇文献中,均报道未有严重不良反应发生,但是个别病例存在轻微的不良反应,经对症治疗后均消失.结论:现有的临床证据表明,人脐带间充质干细胞治疗脊髓损伤安全有效,患者的感觉和运动功能以及日常生活能力可得到显著改善.

摘要： 背景:现有的外泌体蛋白组学研究中,只有不同来源外泌体或者不同条件下分泌的外泌体之间的蛋白组学对比,没有外泌体和其母体细胞之间的对比分析.目的:对人脐带间充质干细胞来源外泌体进行提取鉴定和蛋白组学分析.方法:培养人脐带间充质干细胞并采用超滤序贯超离法提取外泌体,通过透射电镜、纳米颗粒跟踪分析、蛋白质定量、蛋白质印迹法及蛋白组学分析等技术鉴定.结果 与结论:①提取的外泌体分散度较好且均一,多为杯状圆形或类圆形的膜性小囊泡,可见囊泡的双膜性结构,中央为低电子密度成分,分布较集中且边界清晰;②外泌体粒径分布峰值为(129.5±8.7)nm,膜表面带负电荷,浓度为8.375×1010粒子/mL,平均zeta电位为(-28.1±3.6)mV;③外泌体有特征性膜蛋白CD9、CD63的表达;④蛋白组学分析外泌体中高表达的蛋白质大多参与RNA剪接、mRNA加工、蛋白折叠等生物过程,参与RNA/DNA等遗传物质及蛋白质的合成、加工、降解过程,参与组成多种细胞器及亚细胞膜结构,参与多条信号通路、细胞黏附、细胞外基质受体相互作用,与多种疾病和病毒致癌也密切相关;⑤通过分析认为外泌体与其母体细胞相比有一定的同质性和差异性,差异蛋白功能均和免疫无关,故验证了人脐带间充质干细胞来源外泌体的低免疫原性和安全性.

摘要： 心力衰竭(HF)是各种心血管疾病的终末阶段,具有高患病率和病死率的流行病学特点。庞大的患者群体(我国约450万)和低生存率的预后特征给该疾病的治疗带来了巨大的挑战。目前HF的治疗包括药物治疗和非药物治疗。非药物治疗主要有心脏移植、左心室辅助装置置入术及细胞治疗等。近年来,包括间充质干细胞治疗在内的多种细胞疗法在修复受损心肌、改善心功能方面表现优良,但是其带来的心律失常、免疫排斥反应和治疗有效率不确定等问题也尚待解决。本综述从人脐带间充质干细胞入手,就目前应用该种干细胞治疗HF及相关疾病的临床研究进展作一综述。

摘要： 目的评估人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)多次输注食蟹猴的安全性,为hUC-MSCs临床应用的安全性提供支持。方法取第5代(P5)hUC-MSCs进行形态学、三向分化及免疫表型鉴定后静脉输注食蟹猴,分为低剂量组和高剂量组,每组3只,共输注5次,1次/周。在规定的时间点测量体温、体重、血压、血常规、血生化、血清IgG/IgM以及血液CD4^(+)/CD8^(+)T细胞,评估hUC-MSCs多次静脉输注后对食蟹猴的急性和长期毒性。结果获取的P5代hUC-MSCs符合典型的间充质干细胞特征。食蟹猴在接受3.0×10^(6) cells/kg或2.0×10^(7) cells/kghUC-MSCs多次静脉输注后不同的时间点检测,生理生化指标与输注前相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论P5代hUC-MSCs在3.0×10^(6) cells/kg或2.0×10^(7) cells/kg剂量下多次静脉输注食蟹猴是安全的。

摘要： 目的：制作帕金森病(Parkinson's disease,PD)细胞和动物模型,给予人脐带间充质干细胞(mesenchymal stem cells derived from human umbilicalcord,hUC-MSC)和姜黄素诱导的hUC-MSC处理后,观察并比较两种细胞对PD的治疗作用,并探讨其相关的机制. 方法：采用组织块法分离培养hUC-MSC,运用流式细胞仪检测多种分子表面标志,以确定分离培养出来的细胞符合hUC-MSC细胞免疫表型,同时对hUC-MSC进行相关质控工作.制作姜黄素活化hUC-MSC的浓缩条件培养液(ConditionMedium-curcumin,CM-CUR),hUC-MSC细胞上清浓缩成相同浓度的条件培养液CM-MSC;MPP+作用于SH-SY5Y细胞制成PD细胞模型,加入同浓度的CM-CUR和CM-MSC,CCK-8法和结晶紫染色检测PD模型细胞的增殖;免疫荧光检测细胞内酪氨酸羧化酶(tyrosine hydroxylase,TH)和特异性蛋白微管结合蛋白(Microtubule-associated protein2,MAP2)的表达.将MPTP和丙磺舒腹腔注射C57小鼠制作PD动物模型,尾静脉注射hUC-MSC和姜黄素活化的hUC-MSC,每周一次,107个/kg,持续治疗8周,治疗结束后再观察八周,自主活动计数实验和转棒法检测各组小鼠行为学的变化;免疫组化和Western blot检测小鼠纹状体区TH的表达;高效液相色谱法检测小鼠纹状体区DA含量的变化;Westernblot检测小鼠纹状体区还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶(nicotinamideadenine dinuleotide phosphate diaphorase,NADPH-d)的表达,以估测一氧化氮合成酶(Nitric Oxide Synthase,NOS)的表达水平;RT-PCR检测凋亡因子Bcl-2和Caspase-3的表达.将姜黄素刺激活化的hUC-MSC制作超薄切片,透射电镜下观察细胞超微结构的变化;ELISA检测姜黄素刺激活化的hUC-MSC细胞上清中多种细胞因子和生长因子的变化. 结果：采用组织块法可方便经济的从脐带中成功分离出间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表达间充质干细胞分子表面标志CD29,CD44和CD105,而不表达内皮细胞标志CD31、造血细胞表面抗原CD45和人白细胞抗原-DR(HLA-DR);分离培养的hUC-MSC没有细菌、真菌、乙肝病毒、HIV病毒和内毒素的污染,可用于接下来的实验;根据CCK-8的结果,选取5μmol/L作为刺激hUC-MSC的姜黄素的实验浓度;应用MPP+成功诱导SH-SY5Y细胞出现凋亡,制作PD细胞模型,加入CM-CUR和CM-MSC后,可促进凋亡的SH-SY5Y细胞出现增殖、分化,并促进TH和MAP2的表达.PD小鼠注射细胞后,无论从行为学、TH和DA的含量、NOS的表达还是凋亡因子的变化,结果均表明姜黄素刺激活化的hUC-MSC比单纯的hUC-MSC治疗PD的效果明显.透射电镜下观察可发现：姜黄素刺激活化的hUC-MSC比单纯的hUC-MSC细胞内粗面内质网和蛋白体增多;ELISA结果表明：同单纯的hUC-MSC相比,姜黄素刺激活化的hUC-MSC上清中IL-10、HGF、NGF和VEGF的表达上调.所有的实验数据使用SPSS10.0统计软件,两组间比较采用T检验,多个样本均数比较采用单因素方差分析. 结论：①在PD细胞模型中,姜黄素诱导的hUC-MSC细胞上清可促进已出现凋亡的细胞再次增殖,并向DA能神经元分化;②在PD动物模型中,行为学测试、免疫组化和Western blot结果表明姜黄素诱导的hUC-MSC比不做任何处理的hUC-MSC治疗PD的效果好,主要原因是姜黄素诱导的hUC-MSC可更好的抵抗PD小鼠脑内的氧化应激反应,并能有效的保护纹状体区DA能神经元,防止其凋亡变性;③为了探讨出现上述情况的机制,对姜黄素诱导的hUC-MSC细胞进行研究,结果提示姜黄素可使hUC-MSC分泌功能变强,上清中多种有利于PD修复的细胞因子如IL-10、HGF、NGF和VEGF的表达上调.

摘要： 目的：探讨人脐带间充质干细胞(HuMSCs)移植治疗自身免疫性心肌炎对心肌炎症反应程度、心肌细胞凋亡及心功能等方面的影响及其潜在的机制.rn 方法：1.将HuMSCs通过尾静脉注射的方式移植到自身免疫性心肌炎大鼠模型中;2.移植后11天,心脏彩超检查左心室收缩末期的内径、左室舒张末期的内径、室间隔厚度、左室后壁厚度,通过计算获取左心室短轴缩短率;3.取大鼠心脏组织、石蜡包埋固定切片,HE染色后检查大鼠心肌组织病理学改变及心肌炎严重程度评估;4.酶联免疫吸附试验检测大鼠血清中炎症因子IL-1β和TNF-a水平;5.TUNEL检测各组大鼠心肌组织中的凋亡细胞;6.提取各组大鼠心肌组织蛋白,免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织中ERK1/2、phospho-ERK-1/2、p38MAPK、phospho-p38MAPK、GRP78和caspase12的表达水平.设置正常大鼠为阴性对照组,造模未治疗大鼠为空白对照组.rn 结果：1．三组大鼠间心脏重量／体重比值无明显差异；2．心脏彩超检测显示，HuMSCs能明显减少自身免疫性心肌炎大鼠左心室收缩末期的内径、左室舒张末期的内径，提高左心室短轴缩短率；3．病理结果显示，HuMSCs能明显抑制自身免疫性心肌炎大鼠心肌组织炎症细胞浸润，减轻炎症反应程度；4．TUNEL检测发现，HuMSCs能明显抑制自身免疫性心肌炎大鼠心肌细胞凋亡：5．Western blot检测发现，HuMSCs能明显抑制自身免疫性心肌炎大鼠心肌组织phospho-ERK1/2、GRP78和caspase12的表达，提示HuMSCs能下调自身免疫性心肌炎大鼠心肌组织ERK1/2信号通路及内质网应激的活性。rn 结论：HuMSCs能通过抑制心肌炎性细胞浸润、下调炎症心肌组织中激活的ERK1/2信号通路和内质网应激减少心肌细胞的凋亡来减轻实验性自身免疫性心肌炎大鼠的心脏重构，改善心功能。

摘要： 本文探讨额颞叶痴呆(frontotemporal dementia,FTD)中的原发性进行性失语(primary progressive aphasia,PPA)亚型的临床、影像学特点和演变,提高对FTD的早期认识,并试用人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUC-MSC)治疗观察疗效.得出结论：PPA可以是FTD的早期表现，目前尚无特效治疗，HUC-MSC静脉输注长期疗效尚不确定，早期诊断是决定预后的先决条件。

摘要： 本文按照人脐带间充质干细胞(HU-MSC) "新药"产品申报及临床应用前研究要求,对HU-MSC的体外制备与鉴定、细胞资源库建设、临床级任间充质干细胞制剂制备与质量控制技术进行研究并建立了相应措施技术规范,对HU-MSC制剂进行了体内急慢性毒性实验及治疗系统性红斑狼疮(SLE)的疗效与机制评价,解决了HU-MSC制备、制剂化和临床应用前的关键技术问题,为细胞产品产业化及临床转化应用奠定了技术和理论基础。

摘要： 研究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)移植对帕金森病(Parkinson's disease,PD)患者的睡眠质量改善程度.结果表明hUC-MSCs经静脉移植对PD患者安全有效，可以改善PD患者运动功能及睡眠质量。与移植前相比较，移植后1个月、移植后3个月均有效，1个月到3个月期间基本处于稳定状态，疗效可维持到第3个月。病程对睡眠质量疗效有影响，病程≥5年组RBD症状、RLS症状疗效更明显。

摘要： 目的:基于Calpain/p35-Cdk5/p25通路探究肾脑复元汤联合人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)干预对缺氧缺糖神经元的保护作用.rn 方法:原代培养神经元,并随机分为正常组、模型组(缺糖缺氧造模,OGD)、中药组(OGD+含中药血清)、干细胞组(OGD+hUC-MSCs共培养)、联合组(OGD+含中药血清+hUC-MSCs共培养)、抑制剂组(OGD+Calpain抑制剂),采用CCK-8法检测神经元活力,AO/EB染色观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,Werstern blot法检测Cdk5、p25、p35的表达.rn 结果:模型组神经元缺糖缺氧后,突起回缩,轴突网络稀释,细胞核变性、甚至碎裂,与正常组比较,细胞活力明显下降,大量细胞凋亡,Cdk5、p25表达明显上升,p35表达明显下降(P＜0.01);与模型组比较,中药组、干细胞组、联合组及抑制剂组神经元活力升高,凋亡细胞数降低,Cdk5及p25表达下降,p35表达上升(P＜0.05,P＜0.01);与中药组、干细胞组及抑制剂组相比,联合组神经元活力升高、早凋细胞减少(P＜0.05);联合组及抑制剂组CDK5、p25表达较中药组及干细胞组下降,p35表达较中药组及干细胞组上升(P＜0.05).rn 结论:肾脑复元汤联合hUC-MSCs移植能显著改善缺糖缺氧神经元凋亡,其作用机制可能与调控Calpain/p35-Cdk5/p25通路有关.

摘要： 目的：HUMSCs在体外能够向生殖细胞诱导分化,移植到不育小鼠体内后能够分化表达生殖细胞标记,能够促进不育小鼠睾丸组织修复.本研究旨在前期研究基础上,进一步探讨人脐带间充质干细胞移植对不育小鼠睾丸生殖细胞、支持细胞及间质细胞的作用.rn 方法：采用组织块贴壁法分离、培养、扩增HUMSCs;采用腹腔内单次注射白消安的方法构建不育小鼠模型；通过显微注射法将HUMSCs移植到不育小鼠睾丸曲细精管内，移植后常规饲养；分别于移植后第l周、2周、1月、2月解剖收取小鼠睾丸。rn 结果：采用组织块贴壁法，用无血清培养体系体外培养、扩增HUMSCs能正常生长2个月以上；腹腔内单次注射白消安4周后，小鼠睾丸体积明显缩小，包膜松弛，管腔变小、质脆，镜下见生精上皮损伤，生精细胞脱落，绝大部分管腔呈“空泡样”改变，不育小鼠模型构建成功；通过显微注射法成功将细胞移植到小鼠睾丸曲细精管，移植l周后HuMSCs主要存在于睾丸曲细精管的官腔内，且有逐渐向基底膜移行的趋势，1月后即可观察到细胞分布在生精上皮近基底膜处，2月时定植于基底膜。rn 结论：采用无血清培养体系，运用组织块贴壁法，HuMSCs体外扩增培养能正常生长至少2个月；HUMSCs移植不育小鼠曲细精管后能够存活并发生迁移，1月后分布在生精上皮近基底膜处，2月时定植于基底膜；HUMSCs对不育小鼠生殖细胞生长有促进作用，并持续增强；HUMSCs对支持细胞的生长有促进作用，但2周后逐渐减弱；HUMSCs对间质细胞生长初期有促进作用，但两周后转为抑制。

摘要： 人脐带间充质干细胞(hUMSCs)是近年人们从胎儿脐带华尔通氏胶部位分离得到的基质细胞,具有一定的分化潜能.尽管干细胞移植治疗慢性肝损伤有较好的临床应用前景,单纯的脐带间充质干细胞移植修复受损肝组织的作用并不十分理想,仍然存在一些亟待解决的问题:研究发现移植细胞在体内受损肝组织生存率较低,基于中医“肾藏精”理论,前期采用ICA干预hUMSCs后细胞移植入急性肝损伤小鼠体内,观察到ICA干预后hUMSCs迁移到受损肝脏较未干预组明显增多,肝功能明显改善,且在体移植后没有明显的排除反应.基于此,本项目拟采用CCL4复制小鼠慢性肝损伤模型,尾静脉移植ICA体外干预后的hUMSCs,明确ICA干预的hUMSCs对肝损伤小鼠肝功能修复的影响,初步探究其机制.本研究发现hUCMSCs尾静脉移植慢性肝损伤小鼠后第14天,血ALT和AST水平,与模型组相比,MSC+I组有明显降低,肝组织中SOD,GSH活性MSC+I组明显升高;MDA含量MSC+I组有显著降低.此外,MSC+I组能上调基因TGF-a表达,同时下调基因COL-I,COL-III及TGF-β1表达.HE结果显示,hUCMSCs尾静脉移植14天后,与模型组相比,MSC组和MSC+I组肝组织损伤程度有所改善,且MSC+I组更为明显.TUNEL染色结果表明MSC+I组肝组织细胞凋亡较MSC组有所减弱,冰冻切片观察到MSC+I组肝组织中荧光标记细胞明显多于MSC组.综上,ICA干预hUMSCs可缓解小鼠慢性肝损伤,其作用机制可能是通过提高小鼠肝组织中抗氧化能力及调节肝损伤相关基因完成的.

摘要： 人脐带间充质干细胞具有多向分化的潜能,经诱导后可分化为心肌细胞,细胞外基质对于细胞的增殖与分化具有重要的作用,模拟体内心肌微环境,研究凝胶的软硬度,导电性和结构对干细胞向心肌细胞分化是否具有促进作用.研究结果表明具有合适弹性模量的明胶和氧化石墨烯复合凝胶适合心肌细胞生长,具有表面微结构的氧化石墨烯凝胶对于脐带干细胞向心肌细胞分化具有促进作用.但是由于诱导效率较低,仍需要探索其它高效的诱导方法,以获得足量的诱导的人心肌细胞,满足作为药物筛选平台的需要.

摘要： 牙周病是危害人类口腔健康的重要疾病,目前临床上牙周病的主要治疗手段包括基础治疗、结合药物治疗、牙周引导组织再生术及植骨术、生长因子治疗等,尽管取得了一定的牙周组织再生效果,但是仍然无法满足口腔临床对牙周骨组织修复的要求.前期研究建立了一个可信度高的、可预测水凝胶降解率的数学模型，可制备具有特定降解速率的复合水凝胶，此外PEG能够精细调挫水凝胶的降解，还能够显著改变水凝胶的结构致密程度，调控细胞的迁移行为。复合水凝胶与干细胞有很好的亲和性，可作为干细胞移植的载体。此外，复合水凝胶能够促进干细胞向成骨细胞分化，从而为明胶-PEG复合水凝胶在修复牙周骨组织缺损研究中提供了新方法、新思路。

摘要： 本发明涉及从脐带血中分离和培养间充质干细胞/祖细胞的方法，还涉及将脐带血来源的间充质干细胞/祖细胞分化成各种间充质组织的方法。所述方法包括如下步骤：将脐带血覆盖在Ficoll-Hypaque溶液上；将Ficoll-Hypaque溶液上的脐带血离心，获得单核细胞层；使通过单核细胞单层培养获得的细胞与针对间充质干细胞/祖细胞特异性抗原的抗体反应预定的孵育期；使用细胞分选仪仅分离与其相应抗体相结合的细胞；将分离的细胞培养，从而获得具有高纯度和极好生存能力的间充质干细胞/祖细胞。本发明的间充质干细胞/祖细胞能够分化成包括软骨细胞和成骨细胞在内的各种间充质组织。因此，根据本发明的细胞分离和培养方法能够实现间充质干细胞/祖细胞的大规模生产，本发明获得的细胞在受损间充质组织的再生和治疗上是有用的。

摘要： 本发明属于脐带间充质干细胞应用领域，特别是涉及一种脐带间充质干细胞用溶液及其应用、用于治疗溃疡性结肠炎疾病的脐带间充质干细胞制剂及其制备方法和应用。本发明提供了一种脐带间充质干细胞用溶液，所述脐带间充质干细胞溶液包括临床级DMSO、人血白蛋白、低分子右旋糖酐、海藻糖、褪黑素和复方电解质溶液。上述溶液能够有效稳定经过冻存的脐带间充质干细胞的细胞数量，还能够有效提高经过冻存的脐带间充质干细胞的细胞活力，同时能够维持经过冻存的脐带间充质干细胞的免疫抑制功能。便于含有脐带间充质干细胞的溶液进行长途运输和使用，能够有效促进脐带间充质干细胞的工业化生产和使用。

摘要： 本发明涉及从脐带血中分离和培养间充质干细胞/祖细胞的方法，还涉及将脐带血来源的间充质干细胞/祖细胞分化成各种间充质组织的方法。所述方法包括如下步骤：将脐带血覆盖在Ficoll－Hypaque溶液上；将Ficoll－Hypaque溶液上的脐带血离心，获得单核细胞层；使通过单核细胞单层培养获得的细胞与针对间充质干细胞/祖细胞特异性抗原的抗体反应预定的孵育期；使用细胞分选仪仅分离与其相应抗体相结合的细胞；将分离的细胞培养，从而获得具有高纯度和极好生存能力的间充质干细胞/祖细胞。本发明的间充质干细胞/祖细胞能够分化成包括软骨细胞和成骨细胞在内的各种间充质组织。因此，根据本发明的细胞分离和培养方法能够实现间充质干细胞/祖细胞的大规模生产，本发明获得的细胞在受损间充质组织的再生和治疗上是有用的。

摘要： 本发明公开了一种免疫调节功能增强型脐带间充质干细胞、干细胞制剂及脐带间充质干细胞的制备方法。本申请通过分离脐带组织，将获得的间充质干细胞种子细胞进行细胞因子分泌水平的检测，对符合要求的种子细胞给与添加了炎性因子组合的特定培养基进行传代培养，从而获得免疫调节功能增强型脐带间充质干细胞。上述制备方法制得的间充质干细胞强化了其免疫调节功能，对免疫调节功能紊乱人群及自身免疫性疾病的治疗更具有针对性。

摘要： 本发明属于脐带间充质干细胞应用领域，特别是涉及一种脐带间充质干细胞用溶液及其应用、用于治疗溃疡性结肠炎疾病的脐带间充质干细胞制剂及其制备方法和应用。本发明提供了一种脐带间充质干细胞用溶液，所述脐带间充质干细胞溶液包括临床级DMSO、人血白蛋白、低分子右旋糖酐、海藻糖、褪黑素和复方电解质溶液。上述溶液能够有效稳定经过冻存的脐带间充质干细胞的细胞数量，还能够有效提高经过冻存的脐带间充质干细胞的细胞活力，同时能够维持经过冻存的脐带间充质干细胞的免疫抑制功能。便于含有脐带间充质干细胞的溶液进行长途运输和使用，能够有效促进脐带间充质干细胞的工业化生产和使用。

摘要： 本发明公开了一种人脐带间充质干细胞培养基，包括基础培养基，添加在所述基础培养基中的复合添加剂，所述复合添加剂的成分以终浓度计包括：丝素蛋白6.5‑9.3μg/L、羧甲基纤维素钠5.4‑7.2μg/L、大豆低聚肽10.0‑14.0μg/L、3‑吡啶甲酸10.5‑14.8μg/L、辅酶Q10 8.0‑12.0μg/L、肌醇15.0‑20.0μg/L、蔗糖脂肪酸酯6.8‑7.2ng/L、α‑酮戊二酸8.2‑9.5μg/L、微量元素22.0‑26.0μg/L。本发明采用羧甲基纤维素钠和丝素蛋白配合，提高细胞的粘附性，有利于细胞固着，促进细胞的生长，还添加有大豆低聚肽、3‑吡啶甲酸、辅酶Q10、α‑酮戊二酸复配使用，提高细胞生长速度和增殖数量，提高细胞分泌生长因子的性能。添加微量元素镁、铁、锌、硒，为细胞的生长提供更好的营养环境，进一步促进细胞的增殖。

摘要： 本发明公开的人脐带间充质干细胞无血清培养基、制备方法及人脐带间充质干细胞无血清培养液的获取方法，包括基础培养基和无血清培养上清浓缩液，还包括如下组分及其浓度：维生素组合物5‑100ng/ml，葡多酚50‑200μg/ml，重组人表皮细胞生长因子1～50ng/ml，重组人碱性成纤维细胞生长因子1～50ng/ml，重组血小板衍生生长因子‑C 1～10ng/ml，重组人胰岛素样生长因子‑1 1～10ng/ml，β‑巯基乙醇50～200μM，人血白蛋白1～100μg/ml，谷胱甘肽1‑100μg/ml，碳酸氢钠1.2‑3.7g/L。利用人脐带间充质干细胞无血清培养基替代传统含动物血清的培养基来培养人脐带间充质干细胞，避免了干细胞被病原体或动物源性成分污染及异种蛋白引起人体免疫反应等不安全因素。

摘要： 本发明公开提供了一种改良人脐带间充质干细胞培养基和人脐带间充质干细胞的分离纯化方法，所述培养基包括基础培养基和添加物，所述基础培养基为UltraCulture无血清培养基，添加物各组分及浓度为：1.0%‑5.0%血清替代物，1.0‑10.0mM烟酰胺，0.5‑5nM丙酮酸钠，1%非必需氨基酸，1%谷氨酰胺。本发明还公开了一种人脐带间充质干细胞的分离纯化方法，即采用组织培养法结合混合酶消化法，可快速、高效分离得到数量大，纯度高，状态好的脐带间充质干细胞，既缩短原代培养时间，又简便易操作。利用本发明可提高脐带组织的利用率和间充质干细胞得率，并且细胞纯度高，活性好，可满足临床应用的要求。

摘要： 本发明公开了一种人脐带间充质干细胞培养基，包括基础培养基，添加在所述基础培养基中的复合添加剂，所述复合添加剂的成分以终浓度计包括：丝素蛋白6.5‑9.3μg/L、羧甲基纤维素钠5.4‑7.2μg/L、大豆低聚肽10.0‑14.0μg/L、3‑吡啶甲酸10.5‑14.8μg/L、辅酶Q

摘要： 本发明公开的人脐带间充质干细胞无血清培养基、制备方法及人脐带间充质干细胞无血清培养液的获取方法，包括基础培养基和无血清培养上清浓缩液，还包括如下组分及其浓度：维生素组合物5‑100ng/ml，葡多酚50‑200μg/ml，重组人表皮细胞生长因子1～50ng/ml，重组人碱性成纤维细胞生长因子1～50ng/ml，重组血小板衍生生长因子‑C 1～10ng/ml，重组人胰岛素样生长因子‑11～10ng/ml，β‑巯基乙醇50～200μM，人血白蛋白1～100μg/ml，谷胱甘肽1‑100μg/ml，碳酸氢钠1.2‑3.7g/L。利用人脐带间充质干细胞无血清培养基替代传统含动物血清的培养基来培养人脐带间充质干细胞，避免了干细胞被病原体或动物源性成分污染及异种蛋白引起人体免疫反应等不安全因素。