共培养

摘要： 背景:组织工程的发展为临床骨缺损治疗提供了新方法,但组织工程骨形成缓慢、血管化缓慢等问题一直存在.已有研究表明血管内皮细胞和脂肪干细胞联合培养体系修复骨缺损能力优于单种细胞.成纤维细胞具有优良增殖能力、分泌合成胶原能力,包含多种调控因子,可向成骨分化,具有成为优良种子细胞参与构建组织工程骨的潜力.目的:探讨成纤维细胞、血管内皮细胞和脂肪干细胞联合培养对脂肪干细胞增殖和成骨分化的影响.方法:①将细胞分为4组:脂肪干细胞组、脂肪干细胞+血管内皮细胞共培养组、脂肪干细胞+成纤维细胞共培养组、脂肪干细胞+血管内皮细胞+成纤维细胞共培养组,倒置显微镜下观察细胞的形态变化;②共培养第1,3,5,7,9天,采用CCK-8法检测各组脂肪干细胞增殖情况并绘制生长曲线;③共培养第7,14,21,28天,各组脂肪干细胞进行茜素红染色、碱性磷酸酶染色;④共培养第3周,采用Western blot检测各组脂肪干细胞中骨形态发生蛋白2的表达水平.结果 与结论:①培养14 d时,脂肪干细胞+血管内皮细胞+成纤维细胞共培养组部分细胞融合成团块状,呈巢状分布,而脂肪干细胞组细胞形态单一,未见细胞团出现;②各组细胞生长曲线形态基本相同,细胞吸光度值逐渐升高,脂肪干细胞+血管内皮细胞+成纤维细胞共培养组吸光度值最高,脂肪干细胞+血管内皮细胞共培养组次之,其次是脂肪干细胞+成纤维细胞共培养组;③共培养第28天时茜素红染色,各组细胞均有红色阳性细胞,以脂肪干细胞+血管内皮细胞+成纤维细胞共培养组最多,脂肪干细胞组最少.共培养第28天时碱性磷酸酶染色,各组细胞均有红色阳性颗粒,以脂肪干细胞+血管内皮细胞+成纤维细胞共培养组和脂肪干细胞+成纤维细胞共培养组最多,脂肪干细胞组最少;④各组细胞均有骨形态发生蛋白2表达,以脂肪干细胞+成纤维细胞共培养组和脂肪干细胞+血管内皮细胞+成纤维细胞共培养组较明显;⑤结果表明,体外共培养条件下成纤维细胞促进脂肪干细胞成骨分化的能力比血管内皮细胞强,但促增殖效果不如血管内皮细胞;成纤维细胞联合血管内皮细胞与脂肪干细胞共培养体系促进脂肪干细胞大量增殖、快速高效向成骨细胞分化的能力最强.

摘要： 背景:随着转基因技术的迅速发展,基因治疗和微囊化技术结合,形成微囊化基因给药技术.微囊化除了为干细胞生长提供良好的三维微环境,保证干细胞的大规模体外培养外,还可利用选择透过性膜将移植物与宿主免疫系统隔离,有效避免同种异体移植过程中的免疫排斥反应.目的:观察微囊化转基因骨髓间充质干细胞与成骨细胞共培养后的增殖活性及成骨分化潜能.方法:采用脉冲式高压静电微囊制备仪制备出APA-Foxc2-BMSCs微囊复合体,行吖啶橙/溴化乙锭双染色;共培养微囊化转基因骨髓间充质干细胞和成骨细胞,共培养3周,MTT检测细胞增殖能力;共培养1周,行碱性磷酸酶活性定量检测;共培养1,2周,行碱性磷酸酶定性检测及von Kossa染色;共培养2周,Western blot、Real time PCR检测成骨因子表达.结果 与结论:①吖啶橙/溴化乙锭染色见微囊内70％-80％的细胞染成绿色,镜下未见细胞逃出微囊及在囊外染色;破囊后重新培养的骨髓间充质干细胞生长良好;②微囊化共培养组碱性磷酸酶染色见胞浆内出现较多的棕褐色阳性颗粒,碱性磷酸酶活性显著升高,出现钙基质沉积;③微囊化共培养组Ⅰ型胶原、血小板衍生生长因子蛋白和mRNA表达显著升高;④结果表明,微囊化转基因骨髓间充质干细胞与成骨细胞共培养可增强骨髓间充质干细胞增殖活性,促进骨髓间充质干细胞成骨分化.

摘要： 目的:探讨烟酰胺-N-甲基转移酶(NNMT)在肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)中的表达。方法:分别采用条件培养基(CM)和Transwell小室两种共培养模式建立CAFs体外诱导模型,将人胚肺成纤维细胞MRC-5与鼻咽癌细胞系5-8F共培养48 h,显微镜下观察细胞形态学变化。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测NNMT及CAFs相关标志物[α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、成纤维细胞活化蛋白(FAP)、成纤维细胞特异性蛋白1(FSP-1)及波形蛋白(Vimentin)]基因表达,CCK-8法检测细胞增殖能力。分离纯化头颈肿瘤来源CAFs,RT-qPCR和Western blotting法检测CAFs相关标志物及NNMT的表达。结果:两种共培养模式均能成功诱导并上调MRC-5细胞中NNMT、α-SMA、FAP、FSP-1、Vimentin基因表达(P<0.05),其中Transwell小室共培养模式诱导效果较好。鼻咽癌细胞系5-8F-CM亦能促进MRC-5细胞生长;头颈肿瘤来源的CAFs中FAP、FSP-1、Vimentin、IL-6、NNMT表达量均升高(均P<0.05)。结论:Transwell小室共培养模式是体外诱导CAFs形成的良好建模方式,NNMT在CAFs中的表达上调。

摘要： 目的构建不同培养模式的血脑屏障(BBB)体外细胞模型并进行结构和功能的比较和分析。方法用人脑微血管内皮细胞系(hCMEC/D3)、人脑星形胶质母细胞瘤细胞系(U87MG)和人脑血管周细胞系(HBVP)3种细胞在Transwell装置中构建细胞模型。根据细胞种类和细胞位置的不同,将模型分为单培养、双培养(hCMEC/D3+U87MG或HBVP)、不接触共培养、半接触共培养和全接触共培养5种血脑屏障体外细胞模型。检测模型的通透性和渗透性以及相关蛋白和基因的表达,比较不同模型的结构和功能特点并分析。结果与单培养和双培养模型相比,共培养模型的渗透性降低,紧密性升高,血脑屏障相关的基因和蛋白的表达也升高(P<0.05)。在共培养模型中,半接触和全接触培养模型具有更低的渗透性(P<0.001),全接触细胞培养模型的紧密性更高(P<0.01),部分血脑屏障相关蛋白和基因的表达也更高(P<0.05)。结论全接触共培养细胞模型具有更优的血脑屏障相关性质,更适用于血脑屏障研究。

摘要： 为减轻化学药剂防治烟草疫霉带来的弊端,提高生防菌剂效果,通过琼脂糖扩散法筛选抗性木霉并构建木霉和枯草芽孢杆菌Tpb55共培养体系,采用菌丝生长速率法评价了种间互作防治烟草疫霉的效果,利用单因素法优化共培养体系的培养基成分和发酵条件,并通过盆栽试验验证其对烟草黑胫病的防治效果。结果表明,棘孢木霉HG1具有良好的抗烟草疫霉活性,与枯草芽孢杆菌Tpb55的共培养体系如下:HG1(10^(6)CFU/mL)接种量为2%,与Tpb55(10^(6)CFU/mL)接种比例为10∶1,采用序列共培养方式,即先接种HG1,24 h后接种Tpb55。优化后的最适培养基成分为木糖10 g/L,蛋白胨和酵母粉(质量比为2∶1)5 g/L;最佳发酵为温度25°C,初始pH 7.5,转速140 r/min。共培养发酵液盆栽防病效果显著优于单培养,防治效果达到74.72%。该体系发酵后能够明显提升两株生防菌抑制烟草疫霉的活性,并对烟草黑胫病具有显著防病效果,为后续多菌株共发酵生防菌剂的开发提供基础。

摘要： 粉红螺旋聚孢霉是一种重要的植病生防真菌。本文研究了不同营养条件下粉红螺旋聚孢霉67-1与枯草芽胞杆菌B006共培养发酵滤液的生物活性和生防作用。采用平板培养测定共培养发酵滤液对大豆菌核病菌菌核形成,以及甘蓝枯萎病菌和西瓜枯萎病菌菌丝生长的影响;采用6孔组织培养板测定对根结线虫2龄幼虫的抑杀活性;通过平皿测定和温室盆栽试验研究发酵滤液对黄瓜种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明,不同营养条件下粉红螺旋聚孢霉与枯草芽胞杆菌共培养发酵滤液能够显著降低立枯丝核菌菌核数量和尖孢镰孢菌生物量,其中对甘蓝枯萎病菌生长的抑制率提高40%以上,葡萄糖/硫酸铵培养基中发酵滤液抑菌率比粉红螺旋聚孢霉67-1和枯草芽胞杆菌B006分别提高了86.6%和62.7%。共培养发酵滤液杀线活性显著提高,玉米粉/豆粕粉和葡萄糖/硫酸铵培养基中真菌-细菌共培养无菌滤液处理后线虫死亡率达到65%以上,分别比菌株67-1发酵滤液提高了37.0%和50.8%,比菌株B006提高79.1%和94.7%。黄瓜种子浸种后活力指数、幼苗株高及地上部鲜重增加7.4%~30.4%。本研究为提高粉红螺旋聚孢霉防病效果、研发高效生防新产品提供了新思路。

摘要： 本文通过对亚硝酸盐降解菌Lactobacillus plantarum SD-7、抗氧化功能菌Lactobacillus plantarum FM-LP-9和抑菌功能菌Lactobacillus alimentarius FM-MM4间的生长相容性、共培养对菌株功能的影响及复合接种发酵豇豆品质和感官评定的研究,制备浅渍豇豆的复合功能发酵剂。结果表明:复合功能发酵剂的3菌株之间具有优良的生长相容性,共培养的菌体密度提高范围为0.49~6.32倍;在3株菌的接种比例为1:1:1的共培养体系中,功能特性发挥最优;复合体系中菌株的亚硝酸盐降解率为96.15%,与Lactobacillus plantarum SD-7单独培养相比,提高8.59%,DPPH自由基清除率为51.23%,ABTS;自由基清除率为64.52%,还原力为175.23μmol·L^(-1)(L-半胱氨酸),与Lactobacillus plantarum FM-LP-9单独培养相比,分别提高了15.82%、 14.58%和20.66%;抑菌能力与Lactobacillus alimentarius FM-MM4单独培养相比也有显著提高(P<0.05)。与自然发酵CK相比,接种发酵有利于提高浅渍发酵豇豆的品质。

摘要： 目的:探讨施万细胞样细胞(SCLCs)对大鼠背根神经节(DRG)细胞突起生长和神经生长因子(NGF)表达的影响,阐明SCLCs促进DRG细胞生长的作用及其机制。方法:分离培养脂肪源性干细胞(ADSCs),茜素红染色检测细胞中钙化结节从而观察其分化能力,将其诱导分化为SCLCs,免疫荧光法检测SCLCs中S100蛋白的表达。分离培养DRG细胞,免疫组织化学染色检测DRG细胞中神经元核抗原(NeuN)蛋白的表达。建立SCLCs与DRG细胞共培养体系,将细胞分为单培养组和共培养组。HE染色观察2组DRG细胞的形态结构,计数2组DRG细胞数和DRG细胞突起数,免疫组织化学染色检测2组DRG细胞中NGF蛋白的表达,Western blotting法检测2组DRG细胞中NGF蛋白表达水平。结果:原代ADSCs培养7 d,倒置显微镜下可见数量较多、体积较大、呈长梭形的细胞类似旋涡状或铺路石样排列。茜素红染色,镜下可见钙化结节,即所培养细胞具有分化能力。免疫荧光染色,大多数细胞均呈S100染色阳性,即ADSCs可成功诱导分化为SCLCs。培养72 h后,DRG细胞突起细而长、呈花环样排列,7~8 d后,细胞数量进一步增加,胞体较大,呈圆形,突起细长,相互连接似栅栏样。免疫组织化学染色,几乎所有细胞核均被标记为棕褐色,呈NeuN染色阳性。与单培养组比较,共培养组DRG细胞数及细胞突起数均明显增加(P<0.05),共培养组DRG细胞中NGF蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:共培养条件下SCLCs可增加DRG细胞数和细胞突起数,提高DRG细胞中NGF蛋白的表达,发挥促进DRG细胞生长的作用。

摘要： 为有效抑制萱藻种质保存和丝状体扩增时膨胀色球藻的污染,本实验应用实验生态学法,研究了恩诺沙星、磺胺嘧啶和呋喃西林3种抗菌药对共培养的萱藻丝状体和膨胀色球藻生长的影响。结果显示:在5~100 mg/L范围内,50 mg/L恩诺沙星适于除去萱藻种质保存或丝状体扩增过程中出现的膨胀色球藻,实验第18 d膨胀色球藻的日均增长率为-2.67%,萱藻丝状体的单室孢子囊发育良好;在10~150 mg/L范围内,100 mg/L磺胺嘧啶能有效抑制膨胀色球藻的生长,实验第18 d膨胀色球藻的日均增长率为-0.58%,萱藻丝状体日均增长率为2.91%,单室孢子囊发育良好;150 mg/L磺胺嘧啶会使萱藻丝状体的部分细胞呈浅褐色,单室孢子囊发育不良;在1~20 mg/L范围内,20 mg/L呋喃西林能抑制膨胀色球藻的生长,实验第18 d膨胀色球藻日均增长率为-0.78%,但同时影响了萱藻丝状体的正常生长,单室孢子囊发育不良。实验证明,50 mg/L恩诺沙星和100 mg/L磺胺嘧啶最适于解决萱藻种质保存和丝状体扩增过程中膨胀色球藻的污染。

摘要： 目的:探究Bcl-2小分子抑制剂ABT-737对肿瘤相关巨噬细胞(tumour-associated macrophages,TAMs)与人卵巢癌细胞SKOV3共培养体系内SKOV3细胞生长与血管生成拟态的影响。方法:使用白细胞介素-4(IL-4)和佛波酯(PMA)体外诱导THP-1细胞为TAMs细胞,MTT法检测不同浓度ABT-737处理SKOV3细胞24 h后的细胞存活率,建立SKOV3细胞和TAMs细胞的共培养体系,实验分组为对照组、SKOV3+ABT-737组(含5.0μmol/L ABT-737培养细胞)、TAMs+SKOV3组(SKOV3细胞与TAMs细胞共培养)、TAMs+SKOV3+ABT-737组(SKOV3细胞与TAMs细胞共培养,加入含5.0μmol/L ABT-737),24 h后收集细胞,MTT法检测细胞存活率,EdU染色检测细胞增殖情况,Transwell小室实验检测细胞迁移与侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡,血管拟态生成实验检测细胞血管形成能力,Western blot检测细胞血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9表达。结果:成功诱导THP-1细胞成为TAMs细胞;经ABT-737作用下SKOV3细胞存活率下降(P<0.01);与对照组比较,SKOV3+ABT-737组SKOV3细胞存活率降低,EdU标记的阳性细胞数目减少,细胞迁移与侵袭数目也减少,细胞凋亡率升高,管道分支减少,VEGF、MMP-2、MMP-9蛋白表达下降(P<0.01);与TAMs+SKOV3组比较,TAMs+SKOV3+ABT-737组细胞存活率降低,EdU标记的阳性细胞数目、细胞迁移与侵袭数目也减少,细胞凋亡率增加,管道分支减少,同时VEGF、MMP-2、MMP-9蛋白表达下降(P<0.01)。结论:ABT-737在共培养体系中能够抑制SKOV3细胞增殖、转移、凋亡以及血管拟生,影响肿瘤的进展。

摘要： 目的:研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)与同源树突状细胞(DC)共培养后对肝癌细胞株SMMC7721的杀伤作用,并探讨其作用机制.方法:应用透射电镜、HoechstPI法检测DC-CIK、CIK诱导肿瘤细胞的凋亡情况,Western Blotting法检测效应细胞FasL表达,以及肝癌细胞Fas分子的变化,MTT法检测DC-CIK,CIK对靶细胞杀伤活性,且用多克隆抗Fas分子抗体阻断后二者对靶细胞杀伤活性的变化.结果:透射电镜、HoechstPI显示肿瘤细胞发生了凋亡.DC-CIK、 CIK表面均大量表达Fas-L,肝癌细胞经DC-CIK、CIK作用后其表面的Fas分子的表达明显高于单纯对照组(strapE),且前者表达含量略强于后者.DC-CIK在效靶比5∶1,10∶1,20∶1,对肿瘤细胞的杀伤活性明显高于单纯的CIK组(P＜0.01),用抗体阻断Fas/Fas-L途径后,DC-CIK、CIK对肝癌细胞的杀伤率低于阻断前.结论:DC细胞可以显著提高CIK细胞的细胞毒活性,且Fas/Fas-L途径在CIK、DC-CIK诱导肿瘤细胞凋亡的过程中起着重要的作用,是增强后者杀伤活性的途径之一.

摘要： 本文对多株益生菌共培养的最佳增殖条件进行了研究,首先分别测定了5株益生菌的生长曲线,确定了最佳接种时间,然后通过单因素实验和正交实验确定出最佳培养条件.3株芽孢菌共培养增殖的最优条件:1％淀粉、1％麸皮、2％酵母膏、2％硫酸铵、0.5％NaCl,pH7.5,各菌株接种量分别为0.6mL,于37°C、150r/min振荡培养16h,测定含菌量为4.6×1011cfu/mL.2株乳酸菌共培养增殖的最优条件:3％葡萄糖、2％酵母膏、2％蛋白胨、0.05％MgSO4·7H2O、1％CaCO3,pH7.2,接种量各为0.6mL,于37°C静置培养9h,测定含菌量为6.4×1010cfu/mL.

摘要： 目的:采用永生化人肝星状细胞与肝细胞进行共培养,为生物型人工肝提供高活性、功能良好的肝细胞。方法:采用永生化人肝星状与肝细胞共培养方式进行C3A肝细胞培养,测定C3A细胞共培养后的细胞数量和药物代谢能力变化;采用荧光定量PCR等方法测定C3A肝细胞的相关基因的表达,并且,测定C3A肝细胞的白蛋白和尿素浓度.结果：荧光定量PCR实验结果显示:共培养后C3A肝细胞的Albumin,CYP3A4,CYPIA2等基因mRNA表达水平也显著增高。结论:永生化人肝星状细胞HSC-Li和C3A肝细胞共培养能够显著提高肝细胞活性和功能。

摘要： 本文以探索非纤维素分解菌株与纤维素分解菌株共培养过程中,非纤维素分解菌株对纤维素分解菌株的纤维素分解活性的影响为目的,将分离于纤维素分解菌群WDC2的非纤维素分解菌株Geobacillus sp.Strain 10与纤维素分解菌株Clostridium thermocellum strain CTL-6共培养,通过比较共培养与单培养过程中CTL-6的纤维素分解能力、酶活性、生物量、有机酸产量等性质的变化,解析菌株10对CTL-6分解纤维素活性的增益关系.结果表明,CTL-6具有显著的纤维素分解能力,在DNS112培养液中,3d可分解滤纸50.0％,而在PCS培养液中的滤纸分解能力有一个非常显著的下降,9d仅分解滤纸总重量的3.15％.

摘要： 本试验比较观察第一极体(The first polar body, pbⅠ)， Oosight imaging system观察和hocchst33342染色法对第二次减数分裂中期（Metaphase II，MⅡ）卵母细胞判定结果的相关性分析，并探讨卵巢皮质细胞(porcine ovarian cortex cells, pOCCs），猪输卵管上皮细胞(porcine oviductal epithelial cells, pOECs)和猪卵丘颗粒细胞（porcine cumulus cells, pCCs）三种单层细胞体外共培养体系对猪去卵丘卵母细胞（cumulus cells denuded oocytes, Dos）体外成熟（in vitro maturation, IVM）和孤雌发育的影响。结果显示：（1）Oosight imaging system判定卵母细胞成熟的结果与hocchst33342染色法判定的结果有很强相关性（R=0.973，P＜0.01，N=90）；（2）pOCCs单层细胞共培养体系中猪去卵丘卵母细胞成熟率显著高于pOECs（52.5±0.30%vs 43.8±2.18%，P＜0.05），且这两组成熟率显著高于其余各组（P＜0.05）；Dos在三种单层细胞共培养体系培养后，成熟卵母细胞GSH含量较非共培养组都能显著升高（P＜0.05），pOCCs组GSH含量最高（7.1±0.32 pmol/卵）；（3）成熟后的Dos经孤雌激活，pOCCs组和pOECs组卵裂率和囊胚率都显著高于其余两组（P＜0.05）。

摘要： 柑橘黄龙病是柑橘产业的一种毁灭性病害，由韧皮部限制性细菌所引起，目前我国只发现亚洲种韧皮杆菌。本研究改变传统的纯培养的研究思路，以催病柑橘寄主植物为材料，凭借高效灵敏的检测方法监测靶标细菌的种群数量动态变化，优化体系培养基配方及最适培养条件，以筛选鉴定对病原菌具有促生作用的伴生微生物为突破口，旨在建立一种模拟原生态的病原细菌和伴生菌的共培养体系，实现病原菌的增殖培养。柑橘黄龙病菌共培养体系的建成不但可以推动黄龙病病原学、病原生物学等基础研究，还有助于黄龙病杀菌剂的研制与开发、病害早期诊断和治疗性抗体研制等应用基础研究，为全世界柑橘黄龙病的病害防控开辟全新的途径。

摘要： 体外培养造血干/祖细胞(Hematopoietic stem/progenitor cells，HS/PCs)时,只有旁分泌而没有近分泌的间接接触式共培养效果优于非接触共培养,虽然非接触共培养也只有旁分泌.研究者们常使用transwell 小室实现造血干/祖细胞和基质细胞的间接接触共培养,然而这种共培养方式中两种细胞之间的距离是固定的.为了研究期待血来源的造血干/组细胞和人脂肪干细胞共培养时最佳的作用距离,本文设计了一种共培养距离可调的新的transwell 共培养方法.采用不同规格的砂纸打磨,经高精度游标卡尺测量,使两种细胞之间的有效接触间距为10-450μm 不等.然后以人脂肪来源干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)为基质细胞,分别考察了造血干/祖细胞和脂肪干细胞在不同的作用距离下共培养情况.共培养时先将ADSCs以2×105cells/ml 密度接种到六孔板中,然后将收获的MNCs以1×106cells/ml 密度接种到transwell 小室内,再将transwell 小室放到调节好HSCs和ADSCs 之间的作用距离的六孔板中进行7天的共培养.其间每24 小时进行细胞计数,观察细胞形态.培养7天后对造血单个核细胞表面抗原CD34+、CFU-GM 集落扩增倍数进行了检测;同时也对人脂肪来源干细胞表面抗原(CD13、CD29、CD34、CD44、CD45、CD73、CD105、CD166、HLA-DR)及其多向分化潜能(成骨、成软骨、成脂肪)进行分析以鉴定其干细胞性能.结果表明,通过transwell 共培养,细胞之间在作用距离为350μm时造血干/祖细胞的扩增效果最好,其中造血单核细胞(mononuclear cells，MNCs)扩增了15.1±0.2 倍，CD34+扩增了5.0±0.1 倍;扩增的脂肪干细胞表达CD29、CD44、CD166,而不表达CD34、CD45,且在适当诱导条件下可以向成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞分化.

摘要： 通过单培养和共培养的方法,研究了不同起始密度对海水小球藻(Chlorella vulgaris)和牟氏角毛藻(Chaetoceros muelleri)种间生长作用的影响,结果显示:不同起始密度对海水小球藻和牟氏角毛藻种间生长竞争具有明显的影响.5种不同的接种比例下,牟氏角毛藻在与海水小球藻的竞争中始终占优势,而且随着接种密度的增加,牟氏角毛藻在种间生长竞争中的优势更加明显.在接种比例为H∶M=4∶1时,海水小球藻对牟氏角毛藻的生长也会产生一定的抑制作用.

摘要： 目的:研究经不同分化诱导剂(全反式维甲酸、二甲基亚砜、佛波酯、1α,25二羟基维生素D3)预处理的HL-60细胞对新鲜HL-60细胞的诱导分化作用.方法:以白血病细胞HL-60细胞系为模型,采用Millicell半透膜将经诱导剂处理的HL-60细胞与新鲜HL-60细胞分隔培养,分别设置对照组、诱导剂处理组和共培养组,于各培养时间点对细胞计数测定细胞增殖比,利用流式细胞仪测定CD11b阳性率.结果:1μM全反式维甲酸(ATRA)预处理的HL60细胞与新鲜HL-60细胞共培养3d后,HL-60细胞增殖比下降,其CD11b阳性率与对照组相比显著升高(48.74±4.56);1.25％二甲基亚砜(DMSO)预处理的HL-60细胞与新鲜HL-60细胞共培养3d后,HL-60细胞的CD11b阳性率与对照组相比有所升高(8.43±0.61);经100nM佛波酯(PMA)预处理的HL-60细胞与新鲜HL-60细胞共培养3d后,HL-60细胞的CD11b阳性率比对照组显著升高(63.59±2.18),细胞增殖比较低;100nM 1α,25二羟基维生素D3(VD3)预处理的HL-60细胞与新鲜HL-60细胞共培养1d后,CD11b阳性率比对照组显著升高(25.25±1.45),细胞增殖比与对照组相近.结论:经ATRA、DMSO、PMA、VD3诱导分化的HL-60细胞均可不同程度地诱导新鲜HL-60细胞分化.

摘要： 多环芳烃(PAHs)是环境中普遍存在的一类典型有机污染物。由于PAHs排放量大、来源广泛且具有半挥发性、低溶解性、难生物降解性,常常在土壤中长期存在、大量积累[1]。PAHs污染土壤修复技术主要有化学修复、植物修复、微生物修复,微生物修复被认为是最有前景的PAHs修复方式。与低环多环芳烃不同,高环多环芳烃如苯并 [a]芘(BaP)很难被土著微生物降解[2]。绿色修复PAHs污染土壤已成为国内外环境和土壤界共同关注的热点问题之一。

摘要： 本发明涉及细胞生物学领域，公开了一种神经元细胞和神经胶质细胞有序共培养装置及其制备方法和应用。该装置包括基底和聚二甲基硅氧烷印章，所述聚二甲基硅氧烷印章可移除地复合在所述基底上；所述聚二甲基硅氧烷印章包含至少一个微孔单元，所述微孔单元包含依次排列的、至少一个垂直于所述基底的第一通孔和至少一个垂直于所述基底的第二通孔，所述第一通孔和第二通孔分别与基底表面形成一端开口的凹槽；所述第一通孔和第二通孔的距离为500μm～2000μm。本发明通过垂直于基底的第一通孔和第二通孔接种神经元细胞和神经胶质细胞，两种细胞在各自区域接种时均匀性易于控制，可使用的细胞量增大，群体效应明显，利于观察研究。

摘要： 本发明的共培养装置具备：第1密闭容器；配置于第1密闭容器外的共培养器件；配置于第1密闭容器内，贮存有第1培养基的第1培养基源；贮存有溶解氧浓度比第1培养基低的第2培养基的第2培养基源；与共培养器件和第1培养基源连接的第1导管。共培养器件具有：膜，包含第1主面以及位于第1主面的相反侧且用于培养细胞的第2主面；第1流路，配置为一部分由第1主面划分，且供第1培养基流动；第2流路，配置为一部分由第2主面划分，且供第2培养基流动。第1流路的入口与第1导管连接。

摘要： 本发明涉及一种多细胞和人肝微粒体共培养方法、共培养培养基及其应用。本发明提供了多细胞和人肝微粒体共培养方法，包括收集细胞、接种细胞、装载人肝微粒体以及共培养步骤，首次实现了Beas‑2b、HUVEC、人肺巨噬细胞和人肝微粒体的体外共培养，为表征肺、血液循环、肝脏共同参与的暴露和代谢后再次损伤的研究奠定了基础。

摘要： 本发明公开了一种用于细胞共培养的微流控芯片装置及使用该装置的细胞共培养方法。本发明的装置包括微流控芯片，所述微流控芯片包括细胞培养层和盖板层；所述细胞培养层设置有至少两个细胞培养通道，所述细胞培养通道包括细胞培养腔和分别与所述细胞培养腔相接的试剂注入通道、细胞注入通道和代谢物排出通道；所述细胞注入通道的体积≤所述细胞培养腔体积的20％；所述盖板层盖合于所述细胞培养层之上，与所述细胞培养层共同形成供细胞培养所需的密封环境。

摘要： 本发明的共培养装置具备:第1主体部，具有第1薄膜、第1流路与第2流路，所述第1薄膜包含用于培养细胞的第1主面以及与第1主面为相反侧的第2主面，所述第1流路的一部分由第1主面划分且供第1培养基流动，第2流路的一部分由第2主面划分且供溶解氧浓度比第1培养基高的第2培养基流动；氧浓度调整部，用于调整供给至第1流路的第1培养基的溶解氧浓度。

摘要： 本发明涉及细胞培养技术领域，尤其是涉及一种共培养体的建立方法及建立得到共培养体及其应用。本发明的共培养体的建立方法至少包括以下步骤：培养得到树突细胞或树突细胞的外泌体；培养得到肠道类器官；在培养有肠道类器官的孔板上放置transwell小室，将树突细胞的悬液或树突细胞的外泌体加入到transwell小室的上室内进行共培养，建立得到共培养体。

摘要： 本发明的一种细胞共培养的装置，涉及细胞培养领域，其是由皿体和皿盖构成，皿体为上开口的中空结构，皿体开口处有皿盖，皿体内有隔离圈，隔离圈将皿体的内部分割为区域Ⅰ和区域Ⅱ，隔离圈内有爬片。利用上述装置在实现牛肌细胞与脂肪细胞直接接触共培养的同时，又可将爬片上的单类细胞（肌细胞或脂肪细胞）进行收集进行后续转录组及蛋白组的分析处理，以用来研究共培养环境下对肌细胞或脂肪细胞的作用，因此有利于进一步探究肌细胞与脂肪细胞之间的相互作用；经多次观察证实用这种方法培养的肌细胞和脂肪细胞成活效率高、活力好、细胞特征明显，并与单独培养的肌细胞和脂肪细胞形态一致，是一种很好的体外研究模型，具有一定的推广研究价值。

摘要： 为了提供进行厌氧性细菌等细菌与上皮细胞的共培养的方式，本发明提供一种培养系统，其用于将第1细胞组和由第2细胞组形成的细胞层或组织进行共培养，所述第1细胞组由1种或多种细胞构成，所述第2细胞组由与第1细胞组不同的1种或多种细胞构成，所述培养系统的特征在于具有：将由厌氧性细菌等1种或多种细胞构成的第1细胞组与由第2细胞组形成的细胞层或组织在厌氧条件下进行共培养的第1培养槽，所述第2细胞组由上皮细胞等1种或多种细胞构成；储存需氧状态的培养液的第2培养槽；以连接所述第1培养槽和所述第2培养槽的方式配置的1个或多个物质交换结构；以及，以覆盖所述物质交换结构的第1培养槽侧的表面的方式设置的所述细胞层或组织。

摘要： 本发明涉及细胞生物学领域，公开了一种神经元细胞和神经胶质细胞有序共培养装置及其制备方法和应用。该装置包括基底和聚二甲基硅氧烷印章，所述聚二甲基硅氧烷印章可移除地复合在所述基底上；所述聚二甲基硅氧烷印章包含至少一个微孔单元，所述微孔单元包含依次排列的、至少一个垂直于所述基底的第一通孔和至少一个垂直于所述基底的第二通孔，所述第一通孔和第二通孔分别与基底表面形成一端开口的凹槽；所述第一通孔和第二通孔的距离为500μm～2000μm。本发明通过垂直于基底的第一通孔和第二通孔接种神经元细胞和神经胶质细胞，两种细胞在各自区域接种时均匀性易于控制，可使用的细胞量增大，群体效应明显，利于观察研究。

摘要： 本实用新型公开一种适用于细胞、组织和生物支架共培养的六孔共培养板，包括双排对称设置六个培养孔，所述培养孔的底部中央开设有漏斗状的小孔，所述小孔的底部安装有盖玻片。本实用新型在确保细胞及组织获得足够营养给及的同时，方便地使种子细胞局限分布在组织或生物支架周围，并且更倾向与生长在组织或生物支架上。