旁分泌

摘要： 背景:间充质干细胞是再生医学中的理想候选者,目前其临床应用受限于由移植微环境改变导致的细胞存活率降低和旁分泌能力差。预处理策略被认为可以最大限度地提高间充质干细胞在移植微环境的存活率和生物学作用,为严重烧伤的治疗提供新思路和潜力。目的:对间充质干细胞预处理策略在严重烧伤治疗中的潜力进行综述。方法:以“间充质干细胞,严重烧伤,间充质干细胞预处理,烧伤病理生理学,严重烧伤”和“mesenchymal stem cells,MSCs,preconditioning,pretreatment,burn injury,severe burn injury,burn pathophysiology”为检索词,在中国知网数据库和PubMed数据库检索自2000年1月至2022年1月收录的论著和综述,并将其进行筛选和分析,排除研究内容不符、陈旧、重复性文献,以及可信度低、逻辑严谨性差的文献,最终选择81篇文献进行综述。结果与结论:①严重烧伤后传统救治方法为液体复苏、气道管理、感染防控、脏器支持、早期焦痂切开减压及切削痂自体和异体皮移植,临床治疗依然面临很大的挑战;②间充质干细胞因其低免疫原性、易获取、组织修复能力强等优点成为治疗的热点;③间充质干细胞一旦被应用于烧伤创面,就会面临缺血缺氧、活性氧产生增加引起的氧化应激环境,导致细胞存活率和生物学活性降低;④细胞因子预处理、低氧预处理、基因修饰和药物预处理等策略可以在严重烧伤病理进展的不同阶段发挥治疗创面感染、减轻过度炎症、缓解高代谢状态、调节免疫系统、促进创面愈合、抑制增生性瘢痕的治疗潜力;⑤由于严重烧伤患者少,没有足够的临床数据支持,限制了预处理策略在严重烧伤临床治疗中的应用;⑥需要通过大量的临床前研究和临床病例确定预处理策略在严重烧伤治疗中的有效性和安全性。

摘要： 背景:经血来源干细胞是从女性月经血中提取的,有多向分化潜能的间充质干细胞,具有易获取、弱免疫原性、增殖能力强、传代稳定及无伦理争议等特点。经血来源干细胞中提取的外泌体在组织再生和损伤恢复方面具有与经血来源干细胞相同的功效。经血来源干细胞及其外泌体已经在多种疾病治疗的临床前研究和临床研究中取得了令人兴奋的成果。目的:文章将就经血来源干细胞及其外泌体相关的基础研究与临床应用研究进展及未来潜在的应用前景和需要考虑的问题加以综述。方法:应用计算机检索PubMed、中国知网期刊全文数据库2000-2022年与经血来源干细胞和经血来源干细胞外泌体相关的文献,最终筛选出75篇进行综述分析。结果与结论:①经血来源干细胞是具有多向分化功能的间充质干细胞,具有来源丰富、免疫原性弱和增殖能力强的特点。②经血来源干细胞外泌体是发挥经血来源干细胞旁分泌功能的主要介质,在促进组织再生和损伤修复方面具有与来源细胞相同的功效。二者都具有抗炎、抗凋亡和促进组织器官功能恢复的能力,并在各系统疾病的动物实验模型中展现了较为优秀的治疗水平,其中经血来源干细胞已经在宫腔粘连、充血性心力衰竭、多发性硬化及病毒性肺炎等疾病中应用于临床患者,在没有产生肿瘤或过敏反应等不良作用的情况下显著延缓了疾病的进展。③但从经血来源干细胞从2007年被发现至今只过了短短15年,因此经血来源干细胞及其外泌体具有试验样本不足和应用年限过短的短板,仍需长期的临床前研究验证其安全性和有效性,此外,要真正应用于临床,也需要找到更加规范的给药方式,因此未来出台相关应用指南也是必要的。④经血来源干细胞及其外泌体结合三维支架技术已在盆腔器官脱垂、糖尿病导致的皮肤损伤、骨软骨缺损及膀胱壁重建的动物实验研究中验证了治疗的有效性,未来希望借助经血来源干细胞及其外泌体的各种优点与组织工程学和材料学相结合,逐步开展临床研究。

摘要： 背景:人脐带间充质干细胞具有分化能力强、免疫调节作用强等特点,在细胞治疗方面受到广泛关注.目的:总结人脐带间充质干细胞治疗子宫内膜损伤相关疾病的研究进展.方法:以"人脐带间充质干细胞、子宫内膜、子宫内膜异位症、宫腔粘连、薄型子宫内膜"为中文检索词,以"human umbilical cord mesenchymal stem cells,endometrium,endometriosis,intrauterine adhesion,thin endometrium"为英文检索词,应用计算机检索PubMed、中国知网及万方数据库1991-2020年发表的相关文献,对64篇符合入组标准的文献进行综述分析.结果 与结论:①人脐带间充质干细胞作为一种有相当发展潜力的干细胞,具有来源丰富、采集方便、细胞增殖和分化特性显著的特点.②人脐带间充质干细胞通过免疫调节、细胞分化及下调纤维化基因表达等途径,促进子宫内膜细胞损伤修复,减少瘢痕形成,改善子宫内膜功能,从而有利于胚胎着床和妊娠.③人脐带间充质干细胞移植治疗子宫内膜损伤发挥作用的重要机制可能与其旁分泌的各种细胞因子和营养因子有密切关系,这些因子参与了子宫内膜修复及免疫调节作用.④以人脐带间充质干细胞为基础的治疗方法在子宫内膜损伤疾病治疗中取得了一些有希望的成果,例如可抑制子宫内膜异位细胞的体外增殖和促进其凋亡,通过修复受损内膜从而恢复子宫内膜异位症大鼠的受孕能力,能够明显促进重度宫腔粘连综合征大鼠子宫内膜再生性修复,促进血管再生,恢复内膜功能,通过免疫调节特性使子宫内膜厚度增加,改善子宫内膜容受性,为治疗薄型子宫内膜提供新的思路.⑤人脐带间充质干细胞可以逃避机体免疫系统的识别,避开宿主监视,因而输注到体内不会引发强烈的排斥反应.⑥目前的此类研究多数仍局限于动物实验阶段,其在临床治疗中的应用并不广泛,未来需要进行更多的临床试验,进一步深入研究人脐带间充质干细胞治疗子宫内膜相关疾病的治疗机制.

摘要： 骨骼肌是人体蛋白质储备最大的场所,是参与葡萄糖调节的主要器官,也是能量消耗的关键部位。肌肉因子是主要由骨骼肌产生和分泌的能通过多种分泌方式如自分泌、旁分泌和内分泌调节多个靶器官如肝脏、心脏、骨骼肌等生理功能的多种生物因子[1]。

摘要： 支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)是一种因早产儿肺发育受阻和损伤而导致的慢性肺疾病,是造成早产儿呼吸衰竭的主要病因之一。合并BPD的早产儿其他并发症发生率和病死率显著高于一般早产儿。目前主要通过综合管理对BPD进行干预,包括合理的呼吸循环支持,恰当的肠内、外营养,咖啡因、糖皮质激素及肺表面活性物质等药物的应用和出院后的院外管理。近年来干细胞医学的不断进展为治疗BPD提供了新的思路。多项临床前试验已证实干细胞治疗在有效避免肺损伤的同时促进肺的生长和损伤修复。因此,该文对间充质干细胞治疗BPD的作用机制进行全面分析,以期为临床应用提供依据。[中国当代儿科杂志,2022,24 (1):108-114]

摘要： 随着生活水平及生活方式的改变,以肥胖为特征的代谢性心血管疾病呈逐年增加的趋势。肥胖诱导脂肪组织的病理性扩充所导致的脂肪功能紊乱和脂肪因子内分泌失调参与心血管疾病发生发展的全过程。本文旨在综述不同类型的脂肪组织及新近发现的脂肪因子在生理或病理状态下,通过内分泌或旁分泌作用,参与心血管稳态维持或心血管疾病的调节,从而为肥胖相关的代谢性心血管疾病的防治提供新思路和新靶点。

摘要： 自2001年Zuk等人首次从脂肪组织中分离、提取出脂肪干细胞(ADSCs)并命名以来,ADSCs因来源广泛、取材方便、组织损伤小、扩增迅速等优点,已成为细胞治疗和组织工程应用中的理想工具。众多研究发现,ADSCs在体内损伤修复、抗衰老等方面均可发挥较为显著的作用;其生物学作用的实现,一部分通过多向分化能力,ADSCs可分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱等多种细胞,补充替代老化、缺损的组织细胞。

摘要： 目的探讨淫羊藿苷(icariin,ICA)诱导人牙囊干细胞(dental follicle stem cell,DFSC)旁分泌作用对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)的影响。方法分离培养并鉴定DFSC;分别使用0、1和10μmol的ICA处理DFSC,24h后收集培养上清,CCK-8法和结晶紫染色检测MC3T3-E1的增殖活性;划痕实验和Transwell小室实验检测MC3T3-E1的迁移能力;qRT-PCR检测MC3T3-E1成骨相关基因的表达情况。结果DFSC具有间充质来源干细胞特征;与对照组比较,0ICA-CM组和1ICA-CM组促进了MC3T3-E1增殖(3天,P<0.001;5天,P<0.001);并且1ICA-CM组显著促进了MC3T3-E1迁移(P<0.001),上调了成骨标志基因的表达。结论ICA具有调控DFSC旁分泌的作用,可促进MC3T3-E1迁移和成骨分化。

摘要： 目的观察冠心丹参滴丸联合人诱导多能干细胞(iPSC)来源的心肌细胞移植对心肌梗死(MI)大鼠心功能的影响,探讨其可能的作用机制。方法体外培养iPSC并诱导其分化成心肌细胞。将50只大鼠随机分为假手术组、模型组、细胞移植组、冠心丹参滴丸组和冠心丹参滴丸+细胞移植组(联合组),每组10只,采用结扎左冠状动脉前降支建立MI大鼠模型。相应方法干预4周后,采用超声心动图检测大鼠心功能,Masson染色检测大鼠心肌梗死面积和胶原纤维沉积,ELISA检测梗死心肌组织和血清基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、干细胞因子(SCF)、血管内皮生长因子(VEGF)含量。结果与假手术组比较,模型组大鼠左室射血分数(EF)、左室短轴缩短分数(FS)明显降低(P<0.01),左室舒张末期内径(LVDd)、左室收缩末期内径(LVDs)、左室舒张末期容积(LVEDV)、左室收缩末期容积(LVESV)明显升高(P<0.01),心肌梗死面积和胶原纤维含量明显增加(P<0.01),梗死心肌组织和血清SDF-1、SCF、VEGF差异无统计学意义;与模型组比较,细胞移植组和联合组大鼠EF、FS明显升高(P<0.01),LVDs、LVESV明显降低(P<0.01),心肌组织梗死面积和胶原纤维含量明显减少(P<0.01),细胞移植组、冠心丹参滴丸组和联合组大鼠梗死心肌组织SDF-1、SCF、VEGF含量明显增加(P<0.01),联合组大鼠血清SDF-1、VEGF含量明显增加(P<0.01),联合组总体效果优于细胞移植组和冠心丹参滴丸组。结论冠心丹参滴丸联合iPSC来源的心肌细胞移植可以提高MI模型大鼠心功能,减少梗死面积,其机制可能与促进旁分泌有关。

摘要： 作为一种能够危及生命的疾病,心力衰竭当前在全球范围内已经威胁到大约6 400万人民的健康,并且患病率仍在逐年增加[1]。心肌纤维化是心力衰竭的重要病理特征,也是引起心功能不全的主要原因之一。在心肌损伤后(如过度的机械牵拉、缺血、梗死和再灌注损伤等),成纤维细胞被激活合成大量的胶原蛋白,损伤或死亡的心肌细胞被富含胶原蛋白的疤痕包裹甚至代替,在一定范围内的纤维化是心脏对原发性坏死性损伤的修复.

摘要： 本文研究目的:探讨巨噬细胞和PHT介导的旁分泌机制对心肌梗死后组织修复和心室重塑过程的影响并探讨其可能机制.建立Wistar大鼠心肌缺血再灌注模型,并在梗死后早期进行PHT预刺激的腹腔巨噬细胞心肌内移植,观察其对组织病理学、分子生物学和血流动力学的影响。 研究方法:贴壁法培养Wistar大鼠腹腔巨噬细胞,并以苯妥英钠对部分体外培养的巨噬细胞进行预刺激(24h),移植前用荧光染料DAPI标记.建立Wistar大鼠心肌缺血再灌注模型,成活动物随机分为假手术组(Sham组,12只),对照组(AMI组,23只),苯妥英钠组(PHT组,17只),单纯巨噬细胞移植组(MФ组,20只),以及苯妥英钠预刺激的巨噬细胞移植组(MФ-PHT组,16只).再灌注同时,MФ组MФ-PHT组向左心室缺血区中心及周边分别以1×105细胞/只,100 μ L的剂量多点注射巨噬细胞和苯妥英钠预刺激的巨噬细胞;AMI组和PHT组注射不完全LG-DMEM培养基(100μ L);PHT组从术后即刻开始,连续14天腹腔内注射PHT(75mg/kg/天).术后第7天和第28天,通过苦味酸-天狼猩红染色测定胶原容积分数(CVF)、膨展指数、梗死面积,及反映胶原成熟度的胶原成分比例;抗α-SMA、vWF及WGA荧光染色分别测定梗死区小动脉密度和毛细血管密度,及非梗死区心肌细胞横截面积(CSA).术后7天采用Western blot分析梗死区血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、组织型蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)、组织型蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)蛋白表达水平.术后第28天行有创血流动力学分析. 研究结果:体外培养的巨噬细胞经苯妥英钠刺激后生长状况稳定;贴壁的细胞绝大多数细胞呈CD68阳性;贴壁的巨噬细胞被DAPI成功标记.术后1天心肌梗死区组织CD68免疫荧光染色显示DAPI标记的巨噬细胞表达CD68.MФ-PHT组较AMI组及MФ组,术后第28天LV+dp/dtmax均显著增高(P＜0.05).与AMI组比较,PHT组、MФ组和MФ-PHT组术后第7天和第28天膨展指数均显著减少(P＜0.05);与AMI组比较,MФ-PHT组术后第28天梗死面积显著减小(P＜0.05);与AMI组比较,MФ组和MФ-PHT组术后7天和28天非梗死区CSA显著减小(P＜0.05).与AMI组比较,PHT组、MФ组和MФ-PHT组术后第7天和第28天梗死区CVF显著增加(P＜0.05);与MФ组比较,MФ-PHT组术后第7天梗死区CVF显著增加(P＜0.05);与AMI组比较,MФ组和MФ-PHT组术后第7天和第28天非梗死区CVF显著减少(P＜0.05).与AMI组比较,PHT组、MФ组和MФ-PHT组术后第7天和第28天梗死区胶原成熟度显著增加(P＜0.05);与MФ组比较,MФ-PHT组术后第7天和第28天梗死区胶原成熟度显著增加(P＜0.05).与AMI组比较,PHT组、MФ组和MФ-PHT组术后第7天和第28天小动脉密度显著增加(P＜0.05).与AMI组比较,PHT组术后第7天和第28天毛细血管密度有增加趋势;与MФ组比较,MФ-PHT组术后第7天和第28天毛细血管密度有增加趋势.MФ-PHT组与AMI组及MФ组比较,术后第7天梗死区VEGF、b-FGF、MMP-2、TIMP-1和TIMP-2蛋白表达水平均显著增强(P＜0.05). 研究结论:苯妥英钠可能通过激活巨噬细胞介导旁分泌效应,上调多种与组织修复密切相关的生长因子/关键酶系的蛋白表达水平,加速组织修复过程,改善心肌梗死后心室重塑和心脏功能.

摘要： 本文研究目的:建立大鼠心肌60分钟缺血再灌注(I/R)模型,给与同种异体骨髓间充质干细胞(MSCs)心肌内注射、PHT腹腔内注射或者二者的联合应用,观察MI后上述处理因素对心脏组织病理学、分子生物学以及血流动力学的综合影响,在证实MSCs和PHT改善MI后组织修复的基础上,探索二者联合应用的综合效应,分析MSCs和PHT介导的旁分泌机制在心肌修复中的可协同性. 研究方法: 56只建模成功并存活的雄性Wistar大鼠随机分为5组:假手术组(12只)、对照组(12只)、PHT组(12只)、MSCs组(11只)以及MSCs+PHT组(9只).采用全血贴壁法培养的3-4代MSCs在移植前用荧光染料DAPI标记,于建模恢复再灌注之时按照1×106/100 μL/只的剂量注射至梗死周边区域.对照组和PHT组注射细胞培养基.PHT组和MSCs+PHT组在建模后,连续14天给与腹腔内注射PHT 75mg/kg/day.通过天狼猩红染色测定术后第7、 28天梗死范围、胶原容积分数(CVF)等,结合偏振光显微镜分析梗死区胶原成熟程度,麦胚凝集素(WGA)荧光染色测定室间隔心肌细胞横截面积(CSA);vWF和α-SMA免疫荧光染色分别计算梗死区及其边缘的毛细血管和小动脉密度;Western blot检测梗死区血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的蛋白表达水平.术后第28天行有创血流动力学检查,评价心功能. 研究结果:MSCs移植至梗死边缘区后,主要分布于梗死区边缘和梗死区内.部分DAPI标记的MSCs表达vWF或α-SMA,提示MSCs分化为内皮细胞或平滑肌细胞,参与毛细血管、小动脉的发生.术后第28天,和对照组(41.80±5.21％)比较,PHT组、MSCs组和MSCs+PHT组梗死范围减小,而且MSCs组和MSCs+PHT组梗死范围小于PHT组(P＜0.05).而且,PHT组、MSCs组和MSCs+PHT组梗死区室壁厚度增大、膨展指数减小,室间隔心肌细胞CSA减小.和对照组比较,PHT组、MSCs组和MSCs+PHT组术后第28天梗死区及室间隔CVF均减小;MSCs组和MSCs+PHT组术后第28天胶原成熟度低于对照组或PHT组比较(P＜0.01),与术后第7天水平接近.术后第7天,和对照组比较,MSCs组和MSCs+PHT组毛细血管及小动脉密度增大;术后第28天,和对照组比较,PHT组、MSCs组和MSCs+PHT组毛细血管及小动脉密度均增大;而且MSCs+PHT组毛细血管密度高于PHT组.3个处理组梗死区VEGF、bFGF、MMP-2蛋白的表达水平无差异;PHT组TIMP-1蛋白表达水平低于其他各组,剩余组间差异无显著性.3个处理组主动脉收缩压、舒张压、左室舒张末压、左室内压最大上升速率和最大下降速率(+dp/dtmax以及-dp/dtmax)的差异均无统计学意义. 研究结论: 1)MSCs移植主要通过旁分泌机制介导加速心肌修复、促进血管形成、改善心室重塑的作用,但细胞移植显著抑制梗死区的胶原成熟; 2)PHT亦可通过旁分泌机制介导加速心肌修复、促进血管新生、改善心室重塑的作用,但效果不如MSCs移植显著; 3)PHT依赖旁分泌作用加速梗死区的胶原更新与成熟,对非梗死区的基质代谢无显著影响; 4)MSCs和PHT联合应用加速心肌修复、改善心室重塑,而且促进血管形成的作用得到增强,二者介导的旁分泌效应具有一定的协同性; 5)MSCs和PHT联合应用显著抑制梗死区的胶原成熟,彼此存在较强的拮抗作用.

摘要： 本发明公开了一种调控间充质干细胞分化和旁分泌功能的方法，包括将无异种添加成分的间充质干细胞体外扩增培养基与间充质干细胞接触的步骤；无异种添加成分的间充质干细胞体外扩增培养基，包括基础培养基和人源血小板裂解液，基础培养基为MEM‑α或DMEM，人源血小板裂解液在所述间充质干细胞体外扩增培养基中的体积含量为1‑10％。人源血小板裂解液通过PI3K‑Akt/HIF‑1信号通路改变间充质干细胞的能量代谢进而调控间充质干细胞的分化和旁分泌功能。

摘要： 格外地，本文中提供的是用于治疗和修复由心血管疾病，心肌梗死(MI)，其它缺血性事件，或心脏生长缺陷引起的对心脏组织的损伤的包含心外膜衍生的旁分泌因子(诸如低糖基化的卵泡抑素样1(FSTL1))的组合物和试剂盒，以及使用它们的方法。

摘要： 本发明提供了用于治疗、改善或防止(预防)个体或患者的对体内升高的旁分泌多肽水平有反应的疾病、感染或病况的方法，所述方法包括：提供可操作地连接到转录调节序列的编码旁分泌多肽的核酸或基因；或其中已含有编码旁分泌的核酸或基因的表达运载体、载体、重组病毒或等同物，并且所述表达运载体、载体、重组病毒或等同物能够在细胞中或体内表达所述编码旁分泌的核酸或基因；以及向有需要的个体或患者施用或递送可操作地连接到转录调节序列的所述编码旁分泌多肽的核酸或基因，或所述表达运载体、载体、重组病毒或等同物，从而治疗、改善或防止(预防)所述个体或患者的对升高的旁分泌多肽水平有反应的所述疾病、感染或病况。

摘要： 本发明提供了一种验证沉默PHD2能够增强BM－MSCs旁分泌效果的试验方法，包括：第一步、制备PHDMSC－CM与MSC－CM，第二步、获取实验NEC幼鼠，第三步、实验验证，第四步、处理数据，其中，制备PHDMSC－CM的过程为将大鼠PHD2·shRNA构建到慢病毒基因转移载体pGCSIL－GFP上，在感染复数(MOI)为10下，用含shPHD2－GFP的慢病毒转染BM－MSCs，通过检测GFP荧光及PHD2蛋白表达确定稳定转染的BM－MSCs，运用流式细胞仪进行细胞分选富集，然后进一步培养，培养后将其在新的无血清基础培养基中再培养48小时，将细胞与培养基分离后，得到含有BM－MSCs高效表达旁分泌物质的基础PHDMSC－CM；本发明通过实验验证了沉默PHD2能够以及如何增强骨髓间充质干细胞旁分泌的效果。

摘要： 本发明公开了一种能够调控间充质干细胞旁分泌的仿生骨单位结构及其制备方法。该结构设计基于骨单位的结构，骨单位由多层同心圆排列的哈弗氏骨螺旋环绕哈弗氏管所构成。本发明利用微加工技术在二维平面上实现对骨单位结构的仿生构建。该制备方法包括如下步骤：利用光刻技术及翻模法制备出具有类骨单位同心圆微沟槽结构的PDMS基底；将PCL颗粒溶解于二氯甲烷，利用溶剂挥发法得到PCL膜；将PCL膜置于表面具备类骨单位同心圆微沟槽结构的PDMS基底表面，利用熔融浇铸法即可得到表面具备类骨单位同心圆微沟槽结构的PCL膜。该设计在二维平面上对骨单位的结构进行仿生构建，制备工艺简单，成本较低。

摘要： 本发明提供一种间充质干细胞旁分泌因子的制备方法及旁分泌因子应用，属于化妆品技术领域，其中一种间充质干细胞旁分泌因子的制备方法是由如下步骤制得，（1）将间充质干细胞接种于含有10%胎牛血清的α‑MEM培养基中，调整细胞浓度1×107L‑1置于培养箱内培养，用0.2%胰酶消化传代，得到的间充质干细胞密度大于90%传代，得到所需数量的间充质干细胞；（2）向间充质干细胞内接种于诱导培养基内，并向诱导培养基内加入二甲双胍水溶液培养20～30h；（3）将步骤（2）采用无血清间质细胞培养基换液，进行饥饿处理；（4）收集步骤（3）中的细胞培养液进行浓缩，真空冻干成粉状。

摘要： 本发明提供一种通过使用特定类型的间充质饲养细胞或由那些细胞产生的一种或一种以上旁分泌信号在体外控制肝祖细胞的生存、繁殖和/或分化的方法。

摘要： 一种大规模分离干细胞旁分泌蛋白和分泌体囊泡的方法，具体为利用双重滤过快速、大量提取粒径在20nm～200nm之间的蛋白与外泌体囊泡的方法，本发明利用两个管膜孔径不同的血浆过滤器实现对干细胞上清液中所含分子粒径进行限制，筛选出20nm～200nm符合干细胞旁分泌蛋白和外泌体囊泡的直径区间内的分子，利用二次分离，实现连续大量获得旁分泌蛋白和外泌体囊泡。

摘要： 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种FGF10旁分泌通用型人成纤维细胞制剂的制备方法。CIITA基因CRISPR/Cas9敲除载体的构建，CIITA基因缺陷型人成纤维细胞的构建，SPRY2基因酪氨酸突变pegRNA构建，NLRC5基因核定位序列突变pegRNA构建，FGF10旁分泌通用型人成纤维细胞制剂的获得。本发明的成纤维细胞制剂的生产，提升了移植细胞形成良性微环境的功能且降低了免疫排异，细胞能做到储存后随取随用，可以用于医学美容、关节炎及其他疾病的防治，并能为类似新型细胞的开发提供参考。

摘要： 本文中提供的是用于修复心脏组织的心外膜衍生的旁分泌因子。格外地，本文中提供的是用于治疗和修复由心血管疾病，心肌梗死(MI)，其它缺血性事件，或心脏生长缺陷引起的对心脏组织的损伤的包含心外膜衍生的旁分泌因子(诸如低糖基化的卵泡抑素样1(FSTL1))的组合物和试剂盒，以及使用它们的方法。