诱导多能干细胞

摘要： 背景:诱导多能干细胞定向分化后移植治疗解决了免疫排斥及伦理问题,其向心肌细胞的定向分化为心肌细胞再生研究提供了可能.目的:观察诱导多能干细胞分化的心肌细胞电生理功能.方法:体外培养诱导多能干细胞,采用直接悬浮培养法及分化培养基诱导形成拟胚体,观察细胞生长情况,记录心肌细胞的形成时间、数目和收缩率;使用Axon Axopatch 200B单探头超低噪声膜片钳放大器及MED64多电极阵列系统检测心肌细胞的电生理特点,以及观察分化心肌细胞对异丙肾上腺素的反应性;免疫荧光检测分化心肌细胞中心肌肌钙蛋白T的表达.结果 与结论:①诱导多能干细胞生长特点与胚胎干细胞相似,形似鸟巢,呈集落样生长;②在分化培养基培养下,悬浮培养5 d后诱导多能干细胞聚集而形成大小不一的拟胚体,在拟胚体贴壁生长期间,最高将近10％的菌落出现跳动的心肌细胞,第20天和第25天时的搏动率明显高于其他时间点,差异有显著性意义(P<0.05);③诱导多能干细胞分化的心肌细胞观察到了心室、心房和窦房结样细胞的动作电位;④异丙肾上腺素可以提高诱导多能干细胞分化的心肌细胞自发搏动频率;⑤细胞免疫荧光提示诱导多能干细胞分化的心肌细胞中肌钙蛋白T呈阳性表达;⑥结果表明,诱导多能干细胞分化的心肌细胞具有窦房结样、心房样和心室样的动作电位,且具有肾上腺素信号传导.

摘要： 背景:诱导多能干细胞定向分化后移植治疗解决了免疫排斥及伦理问题,其向心肌细胞的定向分化为心肌细胞再生研究提供了可能。目的:观察诱导多能干细胞分化的心肌细胞电生理功能。方法:体外培养诱导多能干细胞,采用直接悬浮培养法及分化培养基诱导形成拟胚体,观察细胞生长情况,记录心肌细胞的形成时间、数目和收缩率;使用Axon Axopatch 200B单探头超低噪声膜片钳放大器及MED64多电极阵列系统检测心肌细胞的电生理特点,以及观察分化心肌细胞对异丙肾上腺素的反应性;免疫荧光检测分化心肌细胞中心肌肌钙蛋白T的表达。结果与结论:(1)诱导多能干细胞生长特点与胚胎干细胞相似,形似鸟巢,呈集落样生长;(2)在分化培养基培养下,悬浮培养5 d后诱导多能干细胞聚集而形成大小不一的拟胚体,在拟胚体贴壁生长期间,最高将近10%的菌落出现跳动的心肌细胞,第20天和第25天时的搏动率明显高于其他时间点,差异有显著性意义(P<0.05);(3)诱导多能干细胞分化的心肌细胞观察到了心室、心房和窦房结样细胞的动作电位;(4)异丙肾上腺素可以提高诱导多能干细胞分化的心肌细胞自发搏动频率;(5)细胞免疫荧光提示诱导多能干细胞分化的心肌细胞中肌钙蛋白T呈阳性表达;(6)结果表明,诱导多能干细胞分化的心肌细胞具有窦房结样、心房样和心室样的动作电位,且具有肾上腺素信号传导。

摘要： 目的:阿尔茨海默病(AD)是常见的神经退行性疾病之一,目前仍未有理想的研究模型,这使得其发病机制尚不完全清楚。因此,本研究将利用非侵袭性方法收集的尿道上皮细胞重编程为诱导多能干细胞(iPSC)从而构建AD疾病研究模型。方法:本研究选取3名男性AD患者作为实验组和2名正常男性作为对照者组,通过分离实验组和对照组的尿道上皮细胞,并将其重编程成为iPSC,利用碱性磷酸酶染色、RT-qPCR及畸胎瘤形成实验等验证其干细胞特性。随后将iPSC定向神经分化成为神经细胞,采用ELISA方法验证AD特异性标志物的表达水平。同时,将BACE1基因在iPSC细胞系中过表达,采用ELISA方法验证AD特异性标志物的表达水平,以上实验每组研究对象均进行2~3次重复实验。结果:尿道上皮细胞被成功地重编程成iPSC,且具有分化为三种不同胚层来源组织的多能性。定向分化患者来源的神经细胞分泌AD标志物的水平与正常对照比较没有显著差异(P>0.05)。但是,过表达BACE1后的iPSC细胞系和分化的神经细胞,AD相关标志物表达水平较对照组显著增高(P<0.05),说明该细胞系作为AD模型的可行性。结论:本研究成功地将AD患者的尿道上皮细胞重编程为iPSC,并将其与正常来源的iPSC进行比较,观察到患者来源的iPSC具有相对正常的蛋白表达谱,提示该细胞的临床应用价值。同时,过表达BACE1基因的iPSC能检测到高表达的AD相关标志物,提示该细胞可以作为研究AD发病机制的细胞模型。

摘要： 肝脏是人体最大的实质性器官,是不可或缺的“化工厂”。肝细胞的非正常死亡影响肝脏功能进而影响人体物质代谢,终末期肝病的高死亡率尚未得到有效解决。人类诱导多能干细胞提供了一种潜在的、取之不尽的自体干细胞来源,在不同生长因子和小分子物质诱导下逐步分化成包含肝细胞样细胞在内的多种组织细胞。近年来,通过模拟肝脏发育的三维环境,干细胞分化的肝细胞样细胞在表型和功能表达上更接近成人肝细胞,为肝脏疾病治疗研究和药物开发提供广阔的平台。本文将阐述人诱导多能干细胞向肝脏细胞分化的新技术及相关应用前景。

摘要： 目的探讨诱导多能干细胞来源的心肌细胞用于心肌梗死大鼠模型心肌修复的有效性,并阐明其改善心脏功能的机制。方法体外培养诱导多能干细胞并诱导分化为心肌细胞;心肌梗死模型SD大鼠随机分为心肌梗死组和细胞移植两组,正常SD大鼠为对照组,每组10只。建模成功后,心肌梗死组和细胞移植组分别在心肌梗死边界附近的3个点注射30μL的生理盐水和分化心肌细胞,对照组行开胸手术,不结扎冠状动脉;在第7、14和28天时通过心脏彩超和有创血流动力学测量心功能;第28天时RT-PCR检测组织衰老指标,Masson染色法评估梗死面积的大小和免疫组化检测梗死边缘区毛细血管密度。结果28天时,与心肌梗死组相比,细胞移植组左室射血分数(LVEF)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期压力(LVEDP)及最大正负左室内压力变化速率(±dP/dt)明显改善(均P<0.05);细胞移植组的梗死面积明显小于心肌梗死组,而毛细血管生成明显多于心肌梗死组(P<0.05);心肌梗死组的基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、内皮细胞型纤溶酶原激活物抑制因子(PAI-1)和白细胞介素-6(IL-6)的mRNA表达量明显升高(P<0.05)。结论移植诱导多能干细胞分化的心肌细胞可通过旁分泌作用改善心肌梗死大鼠模型的心脏功能。

摘要： 目的探讨人牙源性诱导性多能干细胞(iPSCs)分化心肌细胞对急性心肌梗死(AMI)小鼠心功能的影响。方法采用仙台病毒诱导、单克隆挑选和无饲养层体系将人牙根尖乳头干细胞(SCAP)重编程为iPSCs,心肌分化培养基定向诱导。9只BALB/C雄性小鼠按照随机数字表法分为正常组(不干预)、AMI组(AMI造模)和实验组(AMI造模+iPSCs-CMs注射),每组3只。通过冠状动脉结扎法建立急性心肌梗死小鼠模型,iPS分化心肌细胞行心肌内局部注射,超声心动图评估心脏功能。结果人SCAP-iPSCs呈现典型胚胎干细胞样克隆形态,体内具备多向分化潜能,分化心肌细胞具有自主搏动性,表达特异性标志物α-辅肌动蛋白(α-actinin)和肌钙蛋白T(TNNT-2)。术后即刻心电图和超声心动图证实AMI模型成功。与正常组相比,AMI组左心室短轴缩短率(LVFS)和左心室射血分数(LVEF)明显下降,实验组LVFS和LVEF显著高于AMI组(P<0.05)。结论人牙源性iPSCs分化心肌细胞局部注射可以明显改善AMI小鼠的心功能,促进心肌修复。

摘要： 嵌合抗原受体(CAR)T细胞是血液系统恶性肿瘤的有效治疗方法,其发展经历了针对B细胞性白血病和淋巴瘤的CD19靶向的CAR-T细胞治疗、针对多发性骨髓瘤的B细胞成熟抗原(BCMA)靶向的CAR-T细胞治疗,近年已经开发出针对T细胞性血液系统恶性肿瘤的CD7靶向的CAR-T细胞治疗。另外,与其他血液系统恶性肿瘤相比,针对髓细胞性恶性肿瘤的CAR-T细胞治疗具有更多阻碍,相关研究也更多样化。为获得在临床上更有效和低毒性的CAR-T细胞,国内外学者开发了多靶点CAR-T细胞、通用型CAR-T细胞,以及从多能干细胞经过基因工程方法获得CAR-T细胞、CAR-自然杀伤细胞、CAR-诱导多能干细胞来源的巨噬细胞。我国学者从新型CAR-T细胞的研发到CAR-T细胞治疗临床研究体系的建立均开展了一系列研究。本文介绍CAR-T细胞治疗在B细胞性、T细胞性、髓细胞性血液系统恶性肿瘤等最新临床研究进展,也展望了多靶点、通用型和诱导多能干细胞来源的新型CAR相关细胞治疗的未来发展方向。

摘要： 据日本共同社22日消息,日本大阪大学林龙平(干细胞应用医学)教授等人的团队日前在英国《自然》杂志上发表研究成果称,全球首次实现了用诱导多能干细胞(iPS细胞)制成与泪腺相似的立体组织。团队表示,该成果有望带动对重症干眼症治疗方法和药物的研究。

摘要： 帕金森病(PD)是一种进行性神经退行性疾病,当前治疗措施主要包括药物和手术治疗,药物治疗仅缓解症状,手术治疗风险性较大。近年来,细胞重编程方法为PD的治疗带来新进展,经细胞重编程技术获得的诱导多能干细胞(iPSCs)、诱导神经干细胞(iNSCs)和诱导多巴胺神经元(iDNs)可移植治疗PD。文章主要综述iPSCs和iNSCs治疗PD的局限性,总结体细胞直接重编程为iDNs的方法,并探讨体细胞直接重编程为iDNs的优缺点。

摘要： 目的观察冠心丹参滴丸联合人诱导多能干细胞(iPSC)来源的心肌细胞移植对心肌梗死(MI)大鼠心功能的影响,探讨其可能的作用机制。方法体外培养iPSC并诱导其分化成心肌细胞。将50只大鼠随机分为假手术组、模型组、细胞移植组、冠心丹参滴丸组和冠心丹参滴丸+细胞移植组(联合组),每组10只,采用结扎左冠状动脉前降支建立MI大鼠模型。相应方法干预4周后,采用超声心动图检测大鼠心功能,Masson染色检测大鼠心肌梗死面积和胶原纤维沉积,ELISA检测梗死心肌组织和血清基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、干细胞因子(SCF)、血管内皮生长因子(VEGF)含量。结果与假手术组比较,模型组大鼠左室射血分数(EF)、左室短轴缩短分数(FS)明显降低(P<0.01),左室舒张末期内径(LVDd)、左室收缩末期内径(LVDs)、左室舒张末期容积(LVEDV)、左室收缩末期容积(LVESV)明显升高(P<0.01),心肌梗死面积和胶原纤维含量明显增加(P<0.01),梗死心肌组织和血清SDF-1、SCF、VEGF差异无统计学意义;与模型组比较,细胞移植组和联合组大鼠EF、FS明显升高(P<0.01),LVDs、LVESV明显降低(P<0.01),心肌组织梗死面积和胶原纤维含量明显减少(P<0.01),细胞移植组、冠心丹参滴丸组和联合组大鼠梗死心肌组织SDF-1、SCF、VEGF含量明显增加(P<0.01),联合组大鼠血清SDF-1、VEGF含量明显增加(P<0.01),联合组总体效果优于细胞移植组和冠心丹参滴丸组。结论冠心丹参滴丸联合iPSC来源的心肌细胞移植可以提高MI模型大鼠心功能,减少梗死面积,其机制可能与促进旁分泌有关。

摘要： 诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)最初是Yamanaka采用细胞重编程方法由小鼠成纤维细胞建立的.随后,Yamanaka和Thomson小组成功地构建了人iPSCs.iPSCs具有自我更新和多向分化潜能,因此在再生医学、疾病模型和药物研发等方面具有广阔的应用前景.早期iPSCs的构建是在有滋养层细胞条件下，采用逆转录病毒或慢病毒在细胞中过表达重编程因子来制备的。由于这种基因表达方法能够将外源基因整合在基因组上，因此存在插入突变引起肿瘤的风险；在iPSCs分化过程中，残留的或重新活化的转基因可能会影响细胞的分化及分化细胞的功能。外周血采集容易，对人体损伤小，因此外周血单个核细胞是细胞重编程非常有吸引力的细胞来源之一。然而，外周血单个核细胞是非贴壁生长的细胞，重编程效率低。因此，外周血细胞重编程在技术上是一大难题。本研究将由外周血单个核细胞构建非整合的、无滋养层细胞的临床级iPSCs。

摘要： 目前大面积烧伤、糖尿病溃疡、褥疮等难愈创面的治疗仍缺乏有效的方法.自体细胞替代治疗及组织工程皮肤的运用虽为创面修复提供了新的思路,但均面临种子细胞来源有限的问题.将体细胞重编程为诱导多能干细胞的成功开启了再生医学的新时代,同时也为众多疾病的个性化治疗提供新的选择.应用重编程技术促进创面表皮、真皮、皮肤附属器及血管的再生并确保皮肤功能的恢复将是创面治疗的新方向.然而,在以重编程技术为基础的治疗试用于临床之前,简单、高效、安全的重编程技术仍有待探索.

摘要： 目的:探讨诱导多能干细胞体内外分化残留特性,评估其作为组织工程种子细胞的致瘤性风险.rn 方法:小鼠Oct-4-GFP诱导多能干细胞(iPSCs)体外类胚体分化20天或者裸鼠皮下注射6-8周形成畸胎瘤后消化打散,重新给予诱导多能干细胞常规培养液培养.观察类胚体或者畸胎瘤中残留未分化细胞形态;流式细胞仪和免疫荧光检测和观察类胚体和畸胎瘤中残留细胞表面标志物及体内外再次分化能力.将残留细胞扩增后注入裸鼠皮下,6周后取材进行大体观和组织学检测.rn 结果:体外分化20天的类胚体和体内分化6-8周的畸胎瘤中，始终存在小部分的残留未分化的诱导多能干细胞，这些细胞生长形态呈克隆羊，AKP染色呈阳性，表达Oct-4和SSEA-1。这些残留细胞可以再次体内形成类胚体分化和畸胎瘤，并且可以反复残留。rn 结论:应用诱导多能干细胞作为组织工程种子细胞具有致瘤性的风险，需要解决其分化残留问题。

摘要： 诱导多能干细胞(Induced Pluripotent Stem Cells，iPSCs)是应用生物学方法使分化的体细胞发生重编程，从而获得的可不断自我更新并具有多向分化潜能的细胞。iPSCs既具有向多种细胞或组织分化的特性，又可避免免疫排斥，并且不涉及伦理道德方面的争议，已成为了再生医学领域的研究热点，具有重要的临床应用价值。自首例iPSCs的成功诱导以来，各国科学家纷纷投入研究，使iPSCs的研究取得了巨大的进展。本文就近年iPSCs研究领域的新进展和发展前景进行探讨。

摘要： 将人毛囊间充质干细胞(human hair follicle mesenchymal stem cells,hHF-MSCs)重编程为iPSCs(induced pluripotent stem cells,iPS),旨在为iPSCs的产生及应用提供一种更为安全、理想便捷的细胞源.通过拔取头发的方式分离培养并鉴定hHF-MSCs;利用分别携带有Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4的pLV-EF1α-CDNA-IRES-EGFP慢病毒载体与慢病毒包装质粒共转染293T细胞,收集病毒上清并进行滴度测定;联合携带有Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4四种慢病毒对hHF-MSCs进行感染,经25～30天的诱导培养后获得两个iPSCs系即hHF-MSC-derived iPSCs 10-1及20-1;对iPSCs进行多能性检测:检测其是否具有碱性磷酸酶的表达,是否具有与人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)相同的细胞表面标记,采用Realtime PCR检测其内源性多能性基因的表达是否上调以及外源导入的多能性基因是否发生下调,核型是否正常以及将iPSCs注射入NON-SCID小鼠体内能否形成畸胎瘤.研究表明，hHF-MSCs通过Yamanaka因子的导入能够被重编程去分化为iPS细胞。

摘要： 将人毛囊间充质干细胞(human hair follicle mesenchymal stem cells,hHF-MSCs)重编程为iPSCs(induced pluripotent stem cells,iPS),旨在为iPSCs的产生及应用提供一种更为安全、理想便捷的细胞源.通过拔取头发的方式分离培养并鉴定hHF-MSCs;利用分别携带有Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4的pLV-EF1α-CDNA-IRES-EGFP慢病毒载体与慢病毒包装质粒共转染293T细胞,收集病毒上清并进行滴度测定;联合携带有Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4四种慢病毒对hHF-MSCs进行感染,经25～30天的诱导培养后获得两个iPSCs系即hHF-MSC-derived iPSCs 10-1及20-1;对iPSCs进行多能性检测:检测其是否具有碱性磷酸酶的表达,是否具有与人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)相同的细胞表面标记,采用Realtime PCR检测其内源性多能性基因的表达是否上调以及外源导入的多能性基因是否发生下调,核型是否正常以及将iPSCs注射入NON-SCID小鼠体内能否形成畸胎瘤.研究表明，hHF-MSCs通过Yamanaka因子的导入能够被重编程去分化为iPS细胞。

摘要： 将人毛囊间充质干细胞(human hair follicle mesenchymal stem cells,hHF-MSCs)重编程为iPSCs(induced pluripotent stem cells,iPS),旨在为iPSCs的产生及应用提供一种更为安全、理想便捷的细胞源.通过拔取头发的方式分离培养并鉴定hHF-MSCs;利用分别携带有Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4的pLV-EF1α-CDNA-IRES-EGFP慢病毒载体与慢病毒包装质粒共转染293T细胞,收集病毒上清并进行滴度测定;联合携带有Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4四种慢病毒对hHF-MSCs进行感染,经25～30天的诱导培养后获得两个iPSCs系即hHF-MSC-derived iPSCs 10-1及20-1;对iPSCs进行多能性检测:检测其是否具有碱性磷酸酶的表达,是否具有与人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)相同的细胞表面标记,采用Realtime PCR检测其内源性多能性基因的表达是否上调以及外源导入的多能性基因是否发生下调,核型是否正常以及将iPSCs注射入NON-SCID小鼠体内能否形成畸胎瘤.研究表明，hHF-MSCs通过Yamanaka因子的导入能够被重编程去分化为iPS细胞。

摘要： 将人毛囊间充质干细胞(human hair follicle mesenchymal stem cells,hHF-MSCs)重编程为iPSCs(induced pluripotent stem cells,iPS),旨在为iPSCs的产生及应用提供一种更为安全、理想便捷的细胞源.通过拔取头发的方式分离培养并鉴定hHF-MSCs;利用分别携带有Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4的pLV-EF1α-CDNA-IRES-EGFP慢病毒载体与慢病毒包装质粒共转染293T细胞,收集病毒上清并进行滴度测定;联合携带有Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4四种慢病毒对hHF-MSCs进行感染,经25～30天的诱导培养后获得两个iPSCs系即hHF-MSC-derived iPSCs 10-1及20-1;对iPSCs进行多能性检测:检测其是否具有碱性磷酸酶的表达,是否具有与人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)相同的细胞表面标记,采用Realtime PCR检测其内源性多能性基因的表达是否上调以及外源导入的多能性基因是否发生下调,核型是否正常以及将iPSCs注射入NON-SCID小鼠体内能否形成畸胎瘤.研究表明，hHF-MSCs通过Yamanaka因子的导入能够被重编程去分化为iPS细胞。

摘要： 本发明涉及用于使诱导性多能干细胞去分化的培养基组合物，所述培养基组合物含有腔昆布提取物。另外，本发明涉及使用该培养基组合物生产诱导性多能干细胞的方法。根据本发明，当使用该培养基组合物时，可安全、容易且高效地使用间充质干细胞生产诱导性多能干细胞，并且所生产的多能干细胞通过能够分化成多种细胞而可用作细胞治疗剂。

摘要： 本发明涉及用于使诱导性多能干细胞去分化的培养基组合物，所述培养基组合物含有腔昆布提取物。另外，本发明涉及使用该培养基组合物生产诱导性多能干细胞的方法。根据本发明，当使用该培养基组合物时，可安全、容易且高效地使用间充质干细胞生产诱导性多能干细胞，并且所生产的多能干细胞通过能够分化成多种细胞而可用作细胞治疗剂。

摘要： 本发明提供了一种诱导性多能干细胞的制备方法，该方法包括以下步骤：步骤1，将一个或多个干细胞多能性因子导入体细胞；步骤2，使用干细胞培养基对步骤1中制备的导入了干细胞多能性因子的体细胞进行培养，其中，在该过程中，进一步包括使用高渗透压培养基对所述细胞进行培养；和步骤3，鉴定诱导性多能干细胞克隆。此外，本发明还提供了一种用于制备诱导性多能干细胞的培养基。本发明提出了将提高渗透压的培养基应用于高效制备iPS中。在本发明中，高渗透压环境能够使小鼠iPS细胞的产生效率提高10-25倍。本发明提供的高效率诱导iPS细胞的方法对iPS技术安全性的提高和iPS细胞在再生医学领域的应用有重要意义。

摘要： 本发明提供了一种干细胞制造系统，包括：发送通道(20)，含有细胞的溶液流动通过所述发送通道；装置(30)，所述装置(30)连接到所述发送通道(20)并将多能性诱导物转移到所述细胞中以生产携带所述诱导物的细胞；以及装置(40)，所述装置(40)培养携带所述诱导物的所述细胞以生产由干细胞组成的细胞簇。

摘要： 本发明提供了一种干细胞制造系统，包括：发送通道(20)，含有细胞的溶液流动通过所述发送通道；装置(30)，所述装置(30)连接到所述发送通道(20)并将多能性诱导物转移到所述细胞中以生产携带所述诱导物的细胞；以及装置(40)，所述装置(40)培养携带所述诱导物的所述细胞以生产由干细胞组成的细胞簇。

摘要： 本发明公开了一种多能干细胞形成必需蛋白CREPT在诱导多能干细胞中的应用。本发明发现降低成纤维细胞中CREPT的表达，成纤维细胞不能被4种Yamanaka因子诱导形成iPS细胞，在不表达CREPT的细胞中表达CREPT后，细胞能被诱导为iPS细胞。表明，CREPT及其编码基因可以用于调控细胞向iPS细胞的转化，可以用于制备不能诱导为多能干细胞的细胞模型，还可以用于制备iPS细胞。

摘要： 本发明涉及包含腔昆布(Ecklonia cava)提取物的诱导多能干细胞(induced pluripotency stem cell)重编程用培养基组合物。并且，本发明涉及利用上述培养基组合物的诱导多能干细胞的制备方法。若利用本发明的培养基组合物，则可通过利用脂肪来源间充质干细胞来安全并简单地有效制备诱导多能干细胞，所制备的多能干细胞可分化成多种细胞，因此，可用作细胞治疗剂。

摘要： 本发明提出了一种诱导多能干细胞及其诱导多能干细胞的制备方法。根据本发明的实施例，该诱导多能干细胞来源于绒毛细胞。通过本发明获得的诱导多能干细胞核型正常，具有诱导多能干细胞的多能性特征。

摘要： 本发明提供了一种诱导性多能干(iPS)细胞的制备方法，该方法包括以下步骤：步骤1，将一个或多个干细胞多能性因子导入体细胞；步骤2，使用添加了锂盐的培养基培养步骤1中导入了干细胞多能性因子的体细胞；以及步骤3，鉴定诱导性多能干细胞克隆。此外，本发明还提供了一种用于制备诱导性多能干细胞的培养基，其进一步包含锂盐。本发明将含有锂盐的培养基应用于高效产生诱导多能干细胞中。在本发明中，锂盐能够使小鼠iPS细胞的产生效率提高5-60倍。本发明提供的高效率诱导iPS细胞的方法对iPS技术安全性的提高和iPS细胞在再生医学领域的应用有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种多能干细胞形成必需蛋白CREPT的在诱导多能干细胞中的应用。本发明发现降低成纤维细胞中CREPT的表达，成纤维细胞不能被4种Yamanaka因子诱导形成iPS细胞，在不表达CREPT的细胞中表达CREPT后，细胞能被诱导为iPS细胞。表明，CREPT及其编码基因可以用于调控细胞向iPS细胞的转化，可以用于制备不能诱导为多能干细胞的细胞模型，还可以用于制备iPS细胞。