神经干细胞

摘要： 背景:成年哺乳动物脊髓室管膜细胞损伤后表现出干/祖细胞特性。目的:利用Nestin和Foxj1转基因小鼠标记室管膜细胞,以便追踪室管膜细胞及其子代在成年小鼠脊髓损伤后的增殖分化命运。方法:对转基因小鼠T_(8)脊髓节段完全切除1 mm脊髓组织,术后1-7 d连续腹腔注射BrdU动态观察室管膜细胞,在脊髓损伤后不同时间点(3,7,14,28,56 d)借助BrdU,GFAP,Tuj1,NeuN免疫荧光染色,观察损伤区边缘室管膜细胞的遗传命运谱。结果与结论:①未损伤脊髓中,Nestin阳性的室管膜细胞处于静止状态;脊髓损伤后室管膜细胞被激活,第3天时在损伤区周围大量增殖;②在损伤后第28天,约3.3%Nestin阳性的室管膜细胞表达神经元标记物Tuj1;③在损伤后第56天,约25.7%Nestin阳性的室管膜细胞分化为星形胶质细胞并构成胶质瘢痕的核心,参与胶质瘢痕的形成;④通过检测室管膜细胞在脊髓损伤后的时空动态变化、增殖和分化特征,为理解脊髓损伤的病理过程提供理论依据,为脊髓损伤修复提供新的思路。

摘要： 背景:随着交通事故、坠落伤、运动损伤等不断增多,创伤性脊髓损伤已成为危及脊髓健康的一个重要问题。目的:探讨胶原/丝素蛋白支架联合神经干细胞治疗创伤性脊髓损伤的疗效。方法:①分别提取胶原和丝素蛋白原料,将二者以质量比2∶4混合,采用真空冷冻干燥法制备胶原/丝素蛋白支架;将第3代GFP小鼠神经干细胞接种至胶原/丝素蛋白支架上,光学显微镜和扫描电镜下观察神经干细胞生长情况。②采用随机数字表达将40只成年SD大鼠分5组,正常组不进行任何处理,模型组建立T10段脊髓缺损模型,干细胞组脊髓缺损处注射神经干细胞,支架组脊髓缺损处植入胶原/丝素蛋白支架,联合组脊髓缺损处植入接种神经干细胞的胶原/丝素蛋白支架,每组8只。术后每周进行旷场实验BBB评分和斜坡实验,术后第8周行神经诱发电位检测、苏木精-伊红和免疫荧光染色,评价创伤性脊髓损伤大鼠恢复情况。结果与结论:①光学显微镜和扫描电镜下观察显示,胶原/丝素蛋白支架上有利于神经干细胞的黏附、伸展与分化。②旷场实验BBB评分和斜坡实验结果显示,脊髓损伤各组大鼠的运动功能随时间的延长均有不同程度的恢复,各治疗组大鼠的运动功能的恢复速度与程度均优于模型组,其中以联合组大鼠运动功能恢复最好。术后第8周,脊髓损伤后各治疗组大鼠的运动诱发电位和体感诱发电位的潜伏期、振幅检测结果均优于模型组(P<0.05),联合组检测结果优于干细胞组、支架组(P<0.05)。术后第8周苏木精-伊红染色显示,模型组大鼠脊髓损伤部位修复效果最差,联合组修复效果最好;免疫荧光染色显示,模型组大鼠脊髓损伤部位神经丝蛋白阳性细胞最少,各治疗组神经丝蛋白阳性细胞均多于模型组,其中以联合组最多。③胶原/丝素蛋白支架联合神经干细胞对创伤性脊髓损伤大鼠双下肢功能改善和脊髓组织修复具有一定效果。

摘要： 背景:神经干细胞具有修复和代替受损神经细胞、刺激神经发生、重建细胞环路、抑制细胞凋亡的作用,治疗阿尔茨海默病的效果良好,中药在调控神经干细胞增殖、分化及提高神经细胞活力与细胞生存率等方面亦存在显著疗效。目的:综述中药调控神经干细胞治疗阿尔茨海默病的机制,以期为阿尔茨海默病的新药研究及治疗提供参考。方法:检索万方、CNKI、PubMed、Web of Science等数据库2010-2022年期间关于中药调控神经干细胞治疗阿尔茨海默病的文献,以“神经干细胞,中药,阿尔茨海默病”为中文检索词,以“neural stem cells(NSCs),Alzheimer’s disease,Traditional Chinese medicine(TCM)”为英文检索词。排除陈旧及重复的观点,将检索到的文献进行分析整理,共纳入121篇文献进行分析。结果与结论:①梳理了神经干细胞、阿尔茨海默病的定义及发病机制;②总结了中药调控神经干细胞治疗阿尔茨海默病的作用机制,主要包括促进神经干细胞增殖、改善脑内微环境、抑制神经细胞凋亡、诱导神经干细胞向神经元分化、改善神经炎症、调控血管神经单元;③通过现有的研究总结了中药调控神经干细胞治疗阿尔茨海默病的相关因子及信号通路,如Nestin蛋白、微管相关蛋白、脑源性神经营养因子、血管内皮生长因子及Notch信号通路、P13k/Akt信号通路、脑源性神经营养因子/TrkB信号通路和Wnt/β-catenin信号通路等,为今后阿尔茨海默病特效药物及新治疗方法的研究提供相关参考。

摘要： 背景:神经炎症是影响肌萎缩侧索硬化进展的重要因素,体外研究显示神经干细胞有一定的抗炎作用,但在肌萎缩侧索硬化鼠体内能否抗炎,其机制及最佳移植途径尚不清楚。目的:研究不同途径移植神经干细胞对肌萎缩侧索硬化模型G93A-SOD1小鼠的抗炎作用及机制。方法:分离、鉴定神经干细胞后用绿色荧光蛋白转染;将78只70日龄G93A-SOD1小鼠分为脑室内注射组、尾静脉注射组、对照组,适应性喂养后,于84日龄经侧脑室移植入5×10^(5) 个绿色荧光蛋白转染神经干细胞,经尾静脉注射1×106个绿色荧光蛋白转染神经干细胞;从85日龄开始,每周进行1次改良Wrathall运动评分、旋转实验来评价运动功能,记录起病时间、病程时间及生存时间;10^(5) 日龄时,采用免疫荧光检测绿色荧光蛋白转染的神经干细胞存活、迁移、分化情况,采用Nissl染色检测运动神经元数量、Western blot检测ChAT的表达、免疫荧光检测脊髓前角运动神经元中NeuN的表达,采用ELISA和RT-PCT检测脑脊液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6、转化生长因子β的蛋白和mRNA水平,采用Western blot检测脊髓组织中iNOS、CD206及NF-κB通路蛋白表达,采用苏木精-伊红染色检测腓肠肌病理变化。结果与结论:①提取的神经干细胞生长、分化良好,可被绿色荧光蛋白转染;②起病后超早期,侧脑室途径更利于神经干细胞进入中枢神经系统,降低肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6并提升转化生长因子β水平,降低iNOS并提升CD206表达水平,抑制NF-κB通路激活,减缓运动功能损害进展,减轻骨骼肌病理损害程度;③起病后超早期,2种途径移植神经干细胞保护脊髓前角运动神经元、延长小鼠病程时间及生存时间的能力均有限;④结果表明,在肌萎缩侧索硬化的起病后超早期,侧脑室可能是神经干细胞更好的移植途径,具有良好的抗炎作用,其机制可能与调节小胶质细胞极化方向、抑制NF-κB通路激活有关。

摘要： 背景:干细胞是一种可以自我更新并且具有分化潜能的细胞,干细胞治疗是一种很有前景的治疗方法。巨噬细胞迁移抑制因子几乎在所有哺乳动物细胞中都有表达,对许多生理过程至关重要。现有研究证明,巨噬细胞迁移抑制因子在多种干细胞上表达并且调节多种干细胞的增殖、分化和迁移。目的:描述巨噬细胞迁移抑制因子的基本特征并着重阐述巨噬细胞迁移抑制因子对于干细胞的作用及机制。方法:在PubMed和中国知网数据库中检索近10年文献,英文检索词为“macrophage migration inhibitory factor,cancer stem cell,embryonic stem cell,neural stem cell,mesenchymal stem cell,endothelial progenitor cell,stem cell therapy,tissue engineering”,中文检索词为“巨噬细胞移动抑制因子、肿瘤干细胞、胚胎干细胞、神经干细胞、间充质干细胞、内皮祖细胞、干细胞治疗、组织工程”,经过文题、摘要的筛选,排除相关性差及陈旧和重复的文献,对最终符合标准的85篇文献进行综述。结果与结论:(1)巨噬细胞迁移抑制因子蛋白由3个亚基构成,在细胞表面通过与受体CD74,CD44,CXCR2,CXCR4和CXCR7产生作用。巨噬细胞迁移抑制因子储存在细胞内,通过非经典途径分泌,多种因素能影响其表达以及分泌。(2)巨噬细胞迁移抑制因子通过不同的信号通路促进肿瘤干细胞的迁移、侵袭、转移、逃逸和致瘤性。(3)当前研究中,比较明确的是巨噬细胞迁移抑制因子促进小鼠胚胎干细胞的神经分化。(4)巨噬细胞迁移抑制因子通过多个信号通路促进神经干细胞的增殖和存活。(5)巨噬细胞迁移抑制因子作用于间充质干细胞能够抑制凋亡、促进存活、延缓衰老并增加间充质干细胞的旁分泌作用,除此之外,巨噬细胞迁移抑制因子也证明可以通过结合受体CD74抑制间充质干细胞的归巢。(6)多项研究证明巨噬细胞迁移抑制因子通过CXCR4受体激活下游信号通路促进内皮细胞的迁移以及血管重建。(7)巨噬细胞迁移抑制因子作用于肿瘤干细胞、胚胎干细胞、神经干细胞、间充质干细胞、内皮祖细胞,对它们的增殖、分化、迁移和凋亡等过程产生影响,但其中部分作用还存在争议,确切机制需要更进一步验证。

摘要： 背景:胚胎期的神经干细胞可向神经元和神经胶质细胞分化,而实际应用中希望神经干细胞更多地分化成神经元。因此,研究神经干细胞向神经元的定向分化机制至关重要。DNA拓扑异构酶Ⅱ是一类广泛存在于生物体内的核蛋白,在DNA复制、修复、转录、重组以及染色体分离等生命活动中发挥重要作用。目的:探讨神经干细胞及其向神经元定向分化过程中DNA拓扑异构酶Ⅱ的表达及意义。方法:从ICR小鼠(E12.5 d)大脑皮质中分离培养神经干细胞,将神经干细胞球消化成单细胞后,以5×10^(8)L^(-1)密度接种于用Matrigel铺底的培养皿上,加入含B27、N2、10μg/L胶质细胞源性神经营养因子的成神经诱导分化条件培养液,诱导培养1,2,3 d采用免疫细胞化学、Western blot、实时定量PCR检测DNA拓扑异构酶Ⅱα和β的表达。结果与结论:①DNA拓扑异构酶Ⅱα阳性细胞在神经球内数量较多,且均匀分布,在向神经元诱导分化后阳性细胞有所减少;DNA拓扑异构酶Ⅱβ阳性细胞在神经球内数量较少,主要分布在神经球中央,在向神经元诱导分化后强表达的阳性细胞开始增多,在诱导分化2 d达到高峰,之后呈减少趋势;②在神经球中DNA拓扑异构酶Ⅱα蛋白和mRNA表达较高,在向神经元诱导分化后逐渐降低;在神经球中DNA拓扑异构酶Ⅱβ蛋白和mRNA表达较低,在向神经元诱导分化后显著增高;③通过实验得出DNA拓扑异构酶Ⅱβ参与神经干细胞向神经元的定向分化。

摘要： 目的 观察Pluronic F-127(PF-127)水凝胶负载编码慢病毒LINGO-1 shRNA(LV)及神经营养因子混合物(NTFs)(PF-127-LV-NTFs)三维复合支架对大鼠神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响.方法 构建慢病毒(LV)后以不同感染复数(MOI)感染NSCs,用RT-qPCR及Western blot检测NSCs中LINGO-1的表达;按照一定比例将脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养素-3(NT-3)、血小板衍生生长因子(PDGF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、神经胶质细胞来源的神经营养因子(GDNF)配制成NTFcocktail(NTFs),PF-127水凝胶负载LV和NTFcocktail并分组培养NSCs;用CCK-8法检测NSCs的细胞活力,LIVE/DEAD染色检测NSCs的存活率,免疫荧光染色检测NSCs增殖和分化情况.结果 LV感染NSCs的最适MOI=5;PF-127对NSCs的细胞活力没有影响;PF-127+LV+NTFs组NSCs存活、增殖及神经元分化比例较高(P<0.01).结论 PF-127-LV-NTFs三维复合支架有利于大鼠NSCs的增殖和神经元的定向分化.

摘要： 背景:脊髓损伤是中枢神经系统的严重损伤,目前尚未有一种有效的方法可以将其治愈.脊髓损伤患者在生理和心理上都承受巨大的痛苦,而高昂的治疗费用以及严重的后遗症,已成为患病家庭的主要负担.随着对内源性神经干细胞分子生物学研究的不断发展,研究发现利用内源性神经干细胞修复受损脊髓传导束有巨大潜力,这也为重建功能神经环路带来了希望.目的:综述脊髓损伤后内源性神经干细胞如何反应及其调控因素.方法:检索PubMed、Web of Science数据库及万方、CNKI中国期刊全文数据库收录的脊髓损伤后内源性神经干细胞反应的相关文章,英文检索词为"spinal cord injury,endogenous neural stem cell",中文检索词为"脊髓损伤,内源性神经干细胞",按纳入和排除标准共纳入70篇文献进行归纳总结.结果 与结论:脊髓损伤后室管膜区的内源性神经干细胞被激活,迁移至受损部位,分化为功能性神经元及胶质细胞,限制损伤进一步扩大,修复受损的神经结构,这一过程受到了继发性脊髓损伤时释放的多种因子的影响,而对于内源性神经干细胞的来源及其被激活的机制,以及如何诱导其向更利于修复脊髓损伤的方向分化仍需要更深一步的研究.

摘要： 背景:颅脑外伤后形成的反应性星形胶质细胞可能对神经干细胞向神经元分化产生不利影响,因此研究颅脑外伤后反应性星形胶质细胞对神经干细胞分化的调节作用及其机制对促进神经功能恢复具有很大临床应用前景.目的:探讨反应性星形胶质细胞对神经干细胞向神经元分化的影响.方法:体外培养SD大鼠星形胶质细胞,分为对照组和脂多糖刺激组,干预3 d后,采用PCR、ELISA、Western blot检测星形胶质细胞中集落刺激因子1的表达;体外培养SD大鼠原代神经干细胞,在成神经元诱导培养基中加入星形胶质细胞条件培养基共培养3 d,通过免疫荧光和流式细胞术检测β微管蛋白Ⅲ、胶质纤维酸性蛋白的表达;体外培养原代神经干细胞,在成神经元诱导培养基中加入集落刺激因子1重组蛋白干预3 d,应用流式细胞技术和免疫荧光检测集落刺激因子1对神经干细胞向神经元分化的作用.结果 与结论:①脂多糖刺激后的星形胶质细胞及条件培养基中集落刺激因子1表达极低;②脂多糖刺激的星形胶质细胞条件培养基与神经干细胞共培养后,抑制了神经干细胞向神经元分化;③神经干细胞加入集落刺激因子1重组蛋白干预后,促进了神经干细胞向神经元分化;④结果表明,脂多糖刺激后星形胶质细胞中集落刺激因子1分泌水平下调,抑制神经干细胞向神经元分化,而集落刺激因子1过表达可促进神经干细胞向神经元分化,对大鼠脑损伤具有修复作用.

摘要： 背景:脊髓损伤是中枢神经系统的严重损伤,目前尚未有一种有效的方法可以将其治愈。脊髓损伤患者在生理和心理上都承受巨大的痛苦,而高昂的治疗费用以及严重的后遗症,已成为患病家庭的主要负担。随着对内源性神经干细胞分子生物学研究的不断发展,研究发现利用内源性神经干细胞修复受损脊髓传导束有巨大潜力,这也为重建功能神经环路带来了希望。目的:综述脊髓损伤后内源性神经干细胞如何反应及其调控因素。方法:检索PubMed、Web of Science数据库及万方、CNKI中国期刊全文数据库收录的脊髓损伤后内源性神经干细胞反应的相关文章,英文检索词为"spinal cord injury,endogenous neural stem cell",中文检索词为"脊髓损伤,内源性神经干细胞",按纳入和排除标准共纳入70篇文献进行归纳总结。结果与结论:脊髓损伤后室管膜区的内源性神经干细胞被激活,迁移至受损部位,分化为功能性神经元及胶质细胞,限制损伤进一步扩大,修复受损的神经结构,这一过程受到了继发性脊髓损伤时释放的多种因子的影响,而对于内源性神经干细胞的来源及其被激活的机制,以及如何诱导其向更利于修复脊髓损伤的方向分化仍需要更深一步的研究。

摘要： 目的：探索不同声压的治疗级超声波调控神经干细胞(NSCs)干性基因表达的可行性、有效性及安全性. 方法：采用悬浮神经球培养法从C57BL/6胎鼠大脑半球分离并培养得到NSCs,然后将NSCs贴壁接种于6孔板中进行超声处理.超声探头置于6孔板底部向上辐照NSCs.超声分组为0.1MPa、0.3MPa、0.5MPa、0.7MPa、0.9MPa声压组和假照组,占空比为0.5％,各组辐照时间为5min.超声处理24h后,显微镜下观察NSCs的贴壁情况,并采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western Blot检测干性相关基因SOX-2和Bmi-1的表达情况. 结果：不同声压的超声处理NSCs后相差显微镜观察，发现声压为0.7MPa和0.9MPa组悬浮单细胞较其余各组更多；流式细胞仪检测各组对应的凋亡分别为6.0%、5.2%、5.9%、7.8%、8%和4.8%，差异无统计学意义（P>0.05）;Western Blot结果显示，当声压为0.1～0.3MPa时，SOX-2表达呈现明显抑制现象，当声压为0.5～0.7MPa，SOX-2表达呈现轻度抑制现象，且有上升趋势，0.9MPa时SOX-2表达量高于其余超声处理组（P>0.05）；当声压为0.1～0.7MPa时，Bmi-1表达呈抑制现象；当声压为0.9MPa时，Bmi-1表达上调，高于假照组，且差异有统计学意义（P<0.05）。 结论：声压在0.1～0.9MPa之间时，NSCs凋亡率<8%且组间无统计学差异，是相对安全的。在该声压范围内，不同干性基因对超声辐照的敏感性不同，Sox2表达以抑制效应为主，声压越低，抑制效应越明显，Bmi-1基因较Sox2的敏感性高，呈现高声压促进、低声压抑制Bmi-1基因的双向调控效应。

摘要： 脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)在临床具有较高的发病率,其引发的一系列临床症状严重影响患者的生活质量,目前尚未找到确切有效的治疗方法.研究结果表明,神经干细胞(neural stemcells,NSCs)具有自我更新、多潜能分化、高度增殖和迁移等多项特性,应用NSCs治疗脊髓损伤时,可在损伤处定向分化成为功能细胞,在修复受损的脊髓神经组织中发挥着重要的作用.随着神经干细胞在临床治疗SCI相关试验的广泛开展,神经干细胞的来源、特点、移植途径和作用机制等逐渐明朗,并为神经干细胞治疗SCI临床应用研究工作奠定坚实的基础.

摘要： 目的：研究人参皂苷对体外氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)神经干细胞(NSCs)自我更新、增殖和分化的影响及其机制. 方法：分离胎鼠海马神经干细胞,采用MTT法测定不同时间点人参阜昔对神经干细胞增殖分化的影响,并筛选出人参皂苷促进神经干细胞增殖分化的最佳浓度和最佳作用时间窗.建立神经干细胞缺氧缺糖/再灌注(OGD/R)的体外模型,并给予人参皂苷治疗,通过ELISA和Western blot方法检测培养液中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及细胞核中HIF-1α蛋白的表达量.采用免疫荧光双标记方法检测各组神经干细胞特异性标志物巢蛋白(Nestin)、神经干细胞增殖标记物(Brdu)、神经元祖细胞特异性标记物(Tuj-1)及星形胶质细胞祖细胞标记物(Vimentin)的表达,统计各组阳性细胞的个数、面密度值和光密度值,研究验证人参皂苷对神经干细胞的增殖与分化的影响及可能的机制. 结果：筛选出人参萆背促进神经干细胞增殖分化的最佳浓度为1μg/mL,作用的最佳时间点为24h. 结果：发现,与正常组比较,模型组HIF-1α蛋白和VEGF蛋白含量增加,阳性细胞的细胞个数、光密度和面密度减少,提示缺血再灌注后,导致了神经干细胞的损害,神经干细胞细胞核中HIF-1α基因转录翻译增强,促进了其下游粑基因VEGF的转录翻译增强,使HIF-1α蛋白与VEGF蛋白表达均增加,从而启动了神经干细胞增殖和分化的神经修复过程;与模型组比较,人参皂苷治疗组HIF-1α蛋白和VEGF蛋白含量增加,且阳性细胞的细胞个数、光密度和面密度比模型组明显增加(P<0.05)：结论：人参皂苷可促进缺血再灌注后HIF-1α蛋白和VEGF蛋白含量进一步增加,通过促进神经干细胞的增殖与分化而促进脑损伤结构和功能的修复.

摘要： 目的：观察艾灸百会、神庭、大椎对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠海马区神经干细胞增殖、分化的影响. 方法：采用改进的颈动脉结扎法制备VD大鼠模型.培养神经干细胞(Neural stem cells,NSCs)与内皮祖细胞(endothelial cells,EPCs),并经慢病毒介导增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)转染后准备细胞移植.大鼠随机分为NSCs+EPCs空白组(NE空白组,NE group,n=12)、NSCs+EPCs艾灸组(NE艾灸组,NEM group,n=12).每组分为2个亚组,每亚组6只.2组大鼠分别艾灸干预,在1、2疗程后灌注取脑,激光共聚焦显微镜检测大鼠脑内标志蛋白表达. 结果：MAP表达,NE空白组T2疗程较T1表达明显减少(P＜0.05).T2疗程NE艾灸组表达量高于NE空白组(P＜0.05).NeuN表达,NE空白组T2疗程低于T1(P＜0.05).T2疗程NE艾灸组表达高于NE空白组(P＜0.05). 结论：艾灸可以促进VD大鼠海马区NSCs增殖、分化.

摘要： 目的：通过综述针刺促进脑卒中后神经功能缺损的修复,以及针刺促进脑卒中后内源性神经干细胞的增殖分化作用,初探针刺促进脑卒中后神经功能重塑的内源性修复机制,为脑卒中后神经功能重塑的研究提供新思路. 方法：本文通过在Pubmed、OVID、EMBASE等文献检索网站输入针刺、脑卒中(中风)、神经干细胞、神经功能缺损等关键词,选择2014年01月01日-2017年10月01日发表的相关文章,共检索到16篇,就针刺对脑卒中后神经功能恢复以及对脑卒中后内源性NSCs增殖分化的作用方面进行综述. 结果：针刺可改善脑卒中后包括肢体运动、吞咽、学习、记忆、认知等神经功能的恢复,同时也可直接或间接促进脑卒中后内源性NSCs增殖分化,而且在恢复神经功能与促进NSCs增殖分化间有密切联系. 结论：针刺可能是通过促进脑卒中后内源性NSCs增殖分化,在不同程度上改善各种神经功能缺损症状.

摘要： 碳纳米管自被发现以来,就因独特的物理化学性质而受到广泛的关注,在电学、光学和功能复合材料领域都有极大的应用前景.但是碳纳米管极易团聚和缠结,大大限制了其应用.利用多巴胺碱性有氧条件下自聚合反应在碳纳米管表面包覆一层聚多巴胺，对其进行功能化修饰。进一步，以聚邻苯二甲酸二乙二醇二丙烯酸酯(PDDA)为聚阳离子，通过层层组装技术制备聚多巴胺修饰碳纳米管静电叠层复合膜。利用TEM, XPS, SEM等技术表征复合膜结构。将神经干细胞种植在复合膜，利用CCK8试剂盒、免疫化学染色和电生理技术考察神经干细胞活性、分化和神纤元成熟。

摘要： 甲基汞是普遍存在的环境污染物之一,可对正在发育和成熟的神经系统造成损害.线粒体是已知的甲基汞细胞毒性的靶细胞器,而目前关于甲基汞对线粒体发生及mtDNA损伤的研究仍十分有限.本研究以人胚胎神经干细胞系--ReNcell CX细胞为研究对象,从线粒体的发生和mtDNA损伤的角度观察低浓度甲基汞对神经干细胞损伤的可能分子机制.

摘要： 目前干细胞移植修复中枢神经损伤后功能缺损,并没有标准化的、有效的方法.本研究作为军队"十二五"干细胞临床转化研究的一部分,使用已知稳定传代和分化的人脊髓来源的神经干细胞(NSI-566RSC)在脑内进行多靶点精准移植.研究此移植方法的安全性,并观察其有效性.

摘要： 目的：研究实验性MCAO大鼠脑内不同部位NSCs移植对MCAO的损伤修复作用,筛选出最佳移植部位; 方法：选用孕龄16～18天的胎鼠脑组织进行NSCs培养,移植到MCAO后1周时的大鼠脑内不同部位(同侧纹状体、同侧皮层、同侧脑室、对侧纹状体)进行观察,动物分为6组,分别在移植后24小时、1、2、3个月进行神经功能评分;2个月后部分鼠被处死行电镜检查;3个月后处死行病理学检查并测定脑内BDNF、FGF-2分泌量. 结果：培养的NSCs Nestin免疫组化染色呈阳性;移植后24小时、1个月时各实验组行为学评分与假移植组相比无差异(P＞0.05);2个月时同侧纹状体移植组行为学评分明显优于假移植组及其它实验组(P＞0.05);3个月时的行为学评分依次为：同侧纹状体移植、同侧脑室移植组、同侧皮层移植组、对侧纹状体移植组、假移植组.免疫组化染色证实移植组大鼠脑中有移植入脑的Brdu阳性细胞存活;透射电镜可见NSCs存活良好并且相互之间及与宿主细胞之间有特异性连接形成;NSCs移植后3个月时脑内BDNF、FGF-2分泌增多,以同侧纹状体、同侧脑室最明显. 结论：移植细胞可在宿主脑内存活并分化为神经元及胶质细胞,并且能与宿主脑内细胞发生联系;病灶同侧纹状体、同侧脑室进行的NSCs移植,3个月时神经功能改善效果最好;NSCs移植后3个月时脑内BDNF、FGF-2分泌增多,以同侧纹状体、同侧脑室最明显.

摘要： γ-氨基丁酸能神经元立体定向移植治疗对海水浸泡颅脑损伤大鼠的神经功能改善效果.将神经干细胞诱导分化为γ-氨基丁酸能神经元细胞.利用自由落体致伤模型加海水浸泡建立动物模型.研究得出神经干细胞与γ-氨基丁酸能神经元联合移植治疗对于海水浸泡脑损伤大鼠的运动功能恢复有较好疗效，但对于其记忆功能恢复效果仍有待探究。

摘要： 本发明涉及一种神经干细胞培养基及利用其进行的人神经干细胞体外长期培养扩增方法。该神经干细胞培养基包括以下重量配比的组分：肝素钠100‑1000μg，维生素E10‑100 μg，人重组胰岛素5‑50 mg，腐胺0.5‑5 mg，亚硒酸钠2‑10 μg，人转铁蛋白2‑10 mg，黄体酮2‑10 μg，L－谷氨酰胺300mg，4‑羟乙基哌嗪乙磺酸5.9 g，人重组表皮生长因子10‑100μg，人重组碱性成纤维生长因子10‑100μg，维生素C 葡萄糖苷20‑200 mg，庆大霉素40000‑400000 IU。该神经干细胞培养基解决了人神经干细胞体外培养易分化和难以长期培养扩增的技术难题。

摘要： 本发明涉及细胞培养技术领域，特别涉及一种神经干细胞培养基及神经干细胞贴壁培养方法。该神经干细胞培养基包括DMEM/F12、非必需氨基酸、表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素、氢化可的松、WNT3a、Notch1和牛血清白蛋白。本发明提供的神经干细胞培养基能够大大增强神经干细胞的增殖能力，同时能够使得神经干细胞在不用明胶预铺板的情况下贴壁生长，免除了繁琐的操作步骤简化了生产流程。

摘要： 本发明涉及通过在聚合物多孔膜上培养神经干细胞而实现抑制神经干细胞分化的方法、制备神经干细胞的方法和分化诱导神经干细胞的方法。

摘要： 本发明涉及一种神经干细胞培养基、冻存液以及神经干细胞的制备方法。所述神经干细胞培养基包含基础培养基以及FBS、L‑谷氨酰胺、D‑葡萄糖、ng/mL表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、转铁蛋白、孕酮、腐氨、亚硒酸钠、胰岛素、肝素、Human Noggin、SB4315422和烟酰胺；所述基础培养基包含DMEM培养基和F12培养基。采用该特定配方的神经干细胞培养基对神经干细胞进行培养，能够实现神经干细胞的高效扩增，且扩增所得神经干细胞保持良好的干性，克服传统神经干细胞存在短期扩增量低、容易分化导致干性丧失的缺陷。

摘要： 本发明公开了一种成分在促进神经干细胞体外增殖进而用于神经干细胞移植方面的应用。神经干细胞(NSCs)作为干细胞治疗神经类疾病中最有前景的细胞类型在治疗帕金森、脊髓损伤、脑中风等疾病中治疗前景广阔。外源性的NSCs移植对神经干细胞数量要求较高。但如果仅仅依赖NSCs常规培养，速度有限。本发明发现，异柚葡糖苷具有促进NSCs体外增殖的活性，且高浓度异柚葡糖苷对NSCs体外增殖活性的促进作用越强。

摘要： 本发明公开了一种神经干细胞诱导分化培养基及神经干细胞诱导分化的方法。其中，该神经干细胞诱导分化培养基包括基础培养基和添加剂；其中，基础培养基为DMEM/F12培养基；添加剂包括谷氨酰胺1～5mM，GSK‑3抑制剂2～8μM，BMP抑制剂2～10μM，ALK抑制剂2～10μM，细胞培养添加剂0.5％～2％和双抗0.5％～2％。本发明的神经干细胞诱导分化培养基成分明确且简单、分化效率高、分化时间短，且不含动物源成分，分化过程中不需要动物源细胞做饲养层，无需形成EB，也不需要多次更换分化中的培养液组分，短时间内可获得大量高纯度的神经干细胞。

摘要： 本发明涉及一种更换细胞培养液的方法，特别涉及一种神经干细胞换液系统及其用于神经干细胞培养的换液方法。一种神经干细胞换液系统，该系统包括依次连接的细胞拦击器、废液储存瓶、无菌空气瓶和抽气泵，细胞拦击器是由钛棒滤头与不锈钢管相连而成，钛棒滤头的孔径为4.0-5.0μm。该系统的另一种结构是：包括依次连接的细胞拦击器、注射器和连接管，细胞拦击器是内置不锈钢滤网的不锈钢管，不锈钢滤网的孔径为4.0-5.0μm。本发明神经干细胞换液系统及其用于神经干细胞培养的换液方法可以缩短神经干细胞培养过程中换液时间，防止了换液过程中珍贵的神经干细胞流失，清除培养液中残留的组织碎片，延长体外培养细胞的寿命，节约了人力、提高了生产力、便于工业化生产。

摘要： 本发明涉及一种神经干细胞培养基及利用其进行的人神经干细胞体外长期培养扩增方法。该神经干细胞培养基包括以下重量配比的组分：肝素钠100-1000μg，维生素E10-100μg，人重组胰岛素5-50mg，腐胺0.5-5mg，亚硒酸钠2-10μg，人转铁蛋白2-10mg，黄体酮2-10μg，L－谷氨酰胺300mg，4-羟乙基哌嗪乙磺酸5.9g，人重组表皮生长因子10-100μg，人重组碱性成纤维生长因子10-100μg，维生素C葡萄糖苷20-200mg，庆大霉素40000-400000IU。该神经干细胞培养基解决了人神经干细胞体外培养易分化和难以长期培养扩增的技术难题。

摘要： 本发明公开了一种用于制备神经干细胞的试剂盒，包括神经组织保存液、神经组织洗涤液、神经组织分解液、细胞洗涤液、原代细胞培养液、细胞消化液、继代细胞培养液、细胞冻存液；本发明提供的制备神经干细胞的方法为：取得脑神经组织放入神经组织保存液中；将脑神经组织从神经组织保存液中取出，使用神经组织洗涤液漂洗；将脑神经组织切成碎块，并加入神经组织分解液消化分解；向消化分解后的液体中加入继代细胞培养液，混合液通过细胞筛，收集过滤液，并使过滤液离心处理；离心后的过滤液加入原代细胞培养液，培养后即得到P0代神经干细胞。本发明使用简单，操作方便，成本较低，培养过程较稳定，可在短时间内获得大量的神经干细胞。

摘要： 本发明涉及细胞培养技术领域，特别涉及一种神经干细胞培养基及神经干细胞贴壁培养方法。该神经干细胞培养基包括DMEM/F12、非必需氨基酸、表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素、氢化可的松、WNT3a、Notch1和牛血清白蛋白。本发明提供的神经干细胞培养基能够大大增强神经干细胞的增殖能力，同时能够使得神经干细胞在不用明胶预铺板的情况下贴壁生长，免除了繁琐的操作步骤简化了生产流程。