抗原表位

摘要： 旨在制备鸡Toll样受体15(ChTLR15)的特异性单克隆抗体(mAb),并初步应用。利用PCR技术扩增ChTLR15第162—386位氨基酸,克隆于载体pET-30a中进行诱导表达,获得高纯度的重组ChTLR15(162—386 aa)蛋白。然后采用皮下多点注射方式将ChTLR15免疫6周龄的雌性BALB/c小鼠,常规获得针对ChTLR15蛋白的单克隆抗体。运用原核表达系统对ChTLR15基因进行截短表达,对单克隆抗体针对的ChTLR15抗原表位进行鉴定。利用6C7株单克隆抗体以激光共聚焦显微技术对鸡HD11细胞进行定位,同时,利用免疫组化技术确定ChTLR15在鸡部分组织中的分布情况。结果表明:成功构建重组质粒pET-30a-ChTLR15(162—386 aa),经IPTG诱导表达后,获得以包涵体形式存在的约26 ku的重组蛋白ChTLR15(162—386 aa)。方阵试验表明,最适血清稀释度为1∶6400,最适抗原包被浓度为0.35μg·mL^(-1)。采用有限稀释法进行4轮筛选,最终获得4株针对ChTLR15蛋白的单克隆抗体,将其以2G4、6C7、6D10、7C4进行命名。2G4与6C7的亚类为IgG2a,6D10与7C4的亚类为IgG1。Western blot结果显示,4株单抗均能与ChTLR15发生特异性反应,而不与其他受检蛋白反应。运用原核表达系统对ChTLR15(162—386 aa)进行截短表达,对ChTLR15单克隆抗体的抗原表位进行鉴定。结果显示,单抗2G4与7C4识别的抗原表位为^(230)QLGTVLEF^(237),6C7与6D10识别的抗原表位为^(245)EMDLLS^(250)。细胞定位结果显示,ChTLR15蛋白位于细胞表面。免疫组化结果显示,健康对照鸡肝、脾、肺、肾均有微弱阳性染色,禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli,APEC)感染鸡肝、脾、肺、肾阳性染色有所增强。本研究通过淋巴细胞杂交瘤技术成功获得4株抗ChTLR15蛋白的单克隆抗体,通过截短免疫原蛋白法对其识别的线性表位进行鉴定,可用于进一步研究ChTLR15的结构与功能,为后续信号通路、免疫机理、疫苗研发等相关领域的研究提供了有力工具。

摘要： 拟制备针对鸡传染性贫血病毒(CIAV)VP2蛋白的单克隆抗体(mAb),为CIAV的诊断和病毒生物学特性研究提供有用制剂。以PCR技术扩增CIAV VP2基因并克隆到原核表达载体pET-32a中,经IPTG诱导表达。以原核表达的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术研制并筛选分泌抗CIAV VP2蛋白mAb的阳性杂交瘤细胞;采用截短表达CIAV VP2基因方法鉴定mAb识别的抗原表位。结果显示:成功获得了1株能稳定分泌抗CIAV VP2蛋白mAb的杂交瘤细胞株,并命名为CIAV-VP2-4A12;亚类鉴定结果表明,该mAb重链为IgG_(1)型,轻链为kappa链;Western blot结果显示,该mAb可以识别大肠杆菌,Sf9细胞和转染pCAGGS-VP2-Flag的DF1细胞中表达的VP2蛋白。使用原核表达截短蛋白进行表位鉴定,发现该mAb识别抗原表位序列是^(155)KTVRW^(159),序列比对发现该表位在CIAV中高度保守。本研究成功制备了针对CIAV VP2蛋白的特异性mAb,并精确鉴定了其识别表位,为VP2蛋白功能的研究以及CIAV的诊断方法研发提供了有效工具。

摘要： 分析枣瘿蚊图尔病毒(DjTV-2a)衣壳蛋白的理化性质、蛋白结构及抗原表位。从UniProt数据库中得到DjTV-2a衣壳蛋白的氨基酸序列,利用Expasy、TMHMM、DNAStar、SignalP 5.0、TMHMM、NetPhos 3.1、NET CGlyc 1.0、SOPMA、SWISS-MODEL等生物信息学软件,预测DjTV-2a衣壳蛋白的理化性质、氨基酸组成、亲疏水性、信号肽、跨膜结构、磷酸化位点、糖基化位点、二级结构、三级结构和抗原表位等。结果表明,DjTV-2a衣壳蛋白是由449个氨基酸构成的亲水蛋白,分子式为C_(2337)H_(3607)N_(601)O_(689)S_(15),分子量为51.6 ku,理论等电点为5.98;主要二级结构是无规则卷曲,存在82个磷酸化位点和1个糖基化位点,无信号肽和跨膜结构;该蛋白有21个B细胞优势抗原表位和10个T细胞优势抗原表位。DjTV-2a衣壳蛋白属亲水蛋白,具有多个抗原表位,预测其具有免疫原性,是可用作建立血清学检测技术的潜在抗原。

摘要： 为鉴定猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳(N)蛋白的抗原表位,本研究通过原核表达N蛋白,纯化后免疫BALB/c小鼠,利用细胞融合和亚克隆技术,筛选出1株稳定分泌抗PEDV N蛋白抗体的杂交瘤细胞9B4。经鉴定单克隆抗体9B4的亚型为IgG1型,轻链为Kappa链。腹水抗体ELISA效价为10^(6)以上。ELISA、Western blot和免疫荧光鉴定结果显示该单克隆抗体反应原性和特异性良好。利用噬菌体展示技术对单克隆抗体9B4进行抗原表位鉴定,获得4个N蛋白的模拟抗原表位(C11、C12、C14和C26)。随后分别以噬菌体阳性克隆为模拟抗原,对临床PEDV血清样品进行检测,发现其均能与猪PEDV阳性血清发生特异性结合,而与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)阳性血清、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)阳性血清不反应,说明本研究获得的N蛋白模拟表位可用于PEDV抗体的检测,有助于PED流行病学调查和PEDV疫苗免疫效果的评价。

摘要： 我国是贝类生产和消费大国,近年来由食用贝类引发的食物过敏问题日益增多。贝类过敏好发于成人,通常持续影响人的一生,是需重视的食品安全问题,因此深入研究贝类主要致敏物质原肌球蛋白、开发低致敏或脱敏产品具有重要意义。该文详细介绍了贝类的主要致敏物质原肌球蛋白,重点总结了加工技术消减贝类原肌球蛋白致敏性的研究现状、消减机制及其优缺点,并提出未来解决贝类致敏原的需求和挑战,为我国低致敏或脱敏贝类产品的研发提供理论指导。

摘要： 【目的】纯化猪塞尼卡谷病毒(Seneca Valley virus,SVV)SVV-CH-HB2016毒株,并制备其结构蛋白VP1、VP2和VP3的单克隆抗体。【方法】以蔗糖密度梯度离心法纯化的SVV-CH-HB2016病毒颗粒作为抗原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行细胞融合。通过间接免疫荧光试验(IFA)结合间接ELISA筛选阳性细胞株,制备能特异性分泌针对结构蛋白的杂交瘤细胞株。采用Western blotting和IFA方法分别检测单克隆抗体与重组表达蛋白及天然结构蛋白的反应性,并对单克隆抗体的病毒中和保护效果进行测定。利用空斑试验和实时荧光定量PCR方法探究中和性单克隆抗体对SVV-CH-HB2016毒株吸附过程的影响,最后用抗体相加试验来分析14株单克隆抗体的抗原表位。【结果】在蔗糖密度梯度为5%~45%(W/V)时获得了纯度较好、浓度较高的SVV-CH-HB2016毒株结构蛋白,免疫小鼠血清抗体效价均达到了1∶12800,成功制备了17株能稳定分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经验证14株单克隆抗体能与重组结构蛋白发生Western blotting反应,17株单克隆抗体能与病毒发生IFA作用;2G6、4A3和4C113株单克隆抗体对SVV-CH-HB2016毒株感染的BHK-21细胞具有明显中和保护作用,也能有效抑制SVV-CH-HB2016毒株对293T细胞的吸附。经分析发现,除1F5与2E1、4B8与4F11外,其余10株单克隆抗体分别针对不同抗原表位。【结论】本研究初步建立了SVV的纯化方法,制备了17株特异性针对SVV-CH-HB2016毒株的单克隆抗体,为后期进一步开展SVV全病毒灭活疫苗的研发、ELISA检测方法的建立及保护性抗原表位的鉴定奠定了基础。

摘要： 目的通过对多房棘球蚴葡萄糖转运蛋白(Echinococcus multilocularis glucose transporter,EmGLUT)二级结构的分析,并结合在线工具来预测优势T细胞和B细胞抗原表位。方法从NCBI-Gen Bank库中获取EmGLUT基因的mRNA和氨基酸序列。二级结构特征预测使用SOPMA软件。使用IEDB、Syfpeithi软件分析T细胞优势抗原表位,使用Bcepred、ABCpred软件分析B细胞优势抗原表位。结果分析结果显示,在EmGLUT二级结构中α螺旋比例占51.08%,β折叠比例占17.88%,β转角比例占3.73%,无规则卷曲比例占27.31%。综合5个在线软件分析结果得出EmGLUT有10个T细胞优势抗原表位和18个B细胞优势抗原表位,其中5个同时具有T-B细胞双抗原表位。结论EmGLUT的优势T细胞和B细胞抗原表位被成功预测。

摘要： 为制备非洲猪瘟病毒(ASFV)A137R蛋白鼠源单克隆抗体(MAb),本研究通过原核系统表达并纯化了重组A137R(rA137R),将其免疫BALB/c小鼠并通过间接ELISA方法筛选到2株能够稳定分泌A137R MAb的杂交瘤细胞株3D1和2C3。亚类试剂盒鉴定结果显示,两株MAb重链亚类均为IgG1,轻链亚类均为Kappa链。采用间接ELISA方法测得MAb 3D1和2C3的腹水效价均高于10^(5),选取效价较高的MAb 3D1用于后续试验。采用western blot检测制备的MAb 3D1与293T细胞中过表达的A137R(不同剂量)及ASFV感染猪肺泡巨噬细胞(PAMs)后(感染后不同时间)天然表达的A137R的反应性;采用间接免疫荧光试验(IFA)检测MAb 3D1与293T细胞中过表达的A137R的反应性。Western blot结果显示,过表达A137R的293T细胞出现了15 ku左右的特异性条带,且随着转染质粒量浓度的增加,蛋白表达量增加;感染ASFV的PAMs中(感染后8 h)出现了15 ku左右的特异性条带,且随着感染时间的延长,蛋白表达量增加。IFA结果显示,在过表达A137R的293T细胞中出现绿色荧光。以上结果表明,制备的MAb 3D1既能够与过表达的A137R反应,也能够与天然表达的A137R反应,反应性较强。将MAb 3D1用于激光共聚焦试验中检测ASFV感染PAMs后不同时间A137R的细胞定位;用于免疫共沉淀(Co-IP)试验中检测293T细胞中过表达的A137R和Flag-Agarose结合的反应性。激光共聚焦试验结果显示,ASFV感染PAMs后6 h出现绿色荧光,且荧光主要在细胞质中,随着感染时间的延长,绿色荧光逐渐增多增强,表明A137R主要定位于细胞质中。Co-IP试验结果显示,MAb 3D1可以检测到结合在Beads上的A137R,出现约15 ku的特异性条带,表明MAb 3D1可以用于Co-IP试验。利用一系列表达部分重叠的重组A137R片段并经western blot鉴定两株MAb识别的表位;根据western blot结果合成一系列多肽并包被ELISA板,采用间接ELISA方法进一步筛选MAb识别的抗原表位,并利用western blot验证筛选到的抗原表位。结果显示,A137R氨基酸序列中的18NFHRCAWEE26和64AWHEVPECREFI75分别为MAb 3D1和2C3的抗原表位。本研究首次制备了ASFV A137R蛋白的MAb,并进行了初步应用研究,还对其进行了表位鉴定,为进一步将该MAb利用于ASFV的检测和疫苗研究提供了实验依据。

摘要： 目的:基于新型冠状病毒(SARS-CoV-2)全病毒或Spike蛋白作为免疫原可能存在的无关抗原表位干扰,筛选鉴定优势保护性抗原表位,构建候选多价表位疫苗。方法:以免疫信息学确定诱导主要中和抗体、激活细胞免疫应答的细胞保护性抗原表位,以Raptor X、trRosetta预测蛋白疫苗的二级、三级结构,并对候选蛋白疫苗进行二硫键的设计及对接分析,以C-ImmSim服务器模拟预测分析多表位疫苗的免疫原性和免疫应答。结果:实验筛选了Spike蛋白免疫原性强的B细胞表位,具有高保守性和人群覆盖度广的IFN-γ、IL-4阳性的Th表位及CTL表位,计算模拟验证了疫苗的免疫应答特性。结论:信息学分析结果初步显示候选表位疫苗具有良好的平衡体液免疫和细胞免疫应答能力。

摘要： 采用生物信息学方法对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N蛋白)进行亲疏水性、抗原表位预测及多序列对比分析,构建重组质粒pET28a/N,在大肠杆菌原核表达体系下通过调整诱导温度和时间,提升蛋白溶解度和表达量,并对表达出的重组N蛋白进行纯化和鉴定。结果表明:SARS-CoV-2 N蛋白编码419个氨基酸,等电点(PI)为10.10,无跨膜区,无信号肽序列,局部亲水性较强,全长蛋白抗原指数较高,高度保守,与SARS冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白同源性为90.5%;采用大肠杆菌原核表达体系发酵,工程菌BL21(DE3)/pET28a/N在IPTG终浓度为0.2 mmol/L、16°C低温条件下诱导20 h,蛋白呈可溶性表达,且此时蛋白的表达量最高,占总蛋白表达量的70%;通过Ni-NTA亲和层析、凝胶过滤层析纯化后的目的蛋白纯度达90%,分子质量为55 kDa,具有特异性。

摘要： 伪狂犬病(Pseudorabies,PR),是由伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的多种家畜、野生动物感染的一种急性传染病,给养猪业造成了巨大的经济损失.为了制备抗猪伪狂犬病病毒(PRV)HeNl株gE蛋白的单克隆抗体(MAh)并鉴定其免疫学特性，本研究将成功构建的表达部分gE蛋白的重组质粒pGEX-6p-l-gE2转化到大肠杆菌中进行原核表达，经0.5mmoL/LIPTG诱导，获得了高水平表达。对表达的gE2蛋白进行纯化，以蛋白免疫BALB/c小鼠，3次免疫后，取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/O)进行融合，以表达gE蛋白的293T细胞作为抗原，采用间接免疫荧光试验筛选杂交瘤培养上清，获得1株稳定分泌抗PRV gE蛋白的MAh杂交瘤细胞系，将其命名为mgE185.MAb亚型鉴定为IgGl型，轻链为K链。该MAh细胞培养上清及腹水IFA效价分别为1:320和1:160000,Westem blot试验显示这株MAb可以特异性识别gE蛋白，表明其针对的抗原表位为线性表位，中和试验结果显示该MAh无中和活性。通过截短表达gE蛋白鉴定该MAh抗原识别序列为151IGDYL155，该抗原表位在PRV中高度保守。本研究获得的MAh为进一步建立特异性强、灵敏度高的PRV gE-EUSA检测方法奠定了基础。

摘要： 为鉴定鸭坦布苏病毒(DTMUV)E蛋白的抗原表位,本研究以纯化的抗DTMUV E蛋白单克隆抗体(mAh)3B6为固相筛选分子,利用噬菌体表面展示技术,通过结合、洗脱、扩增的顺序筛选噬菌体随机12肽库,确定出DTMUV E蛋白模拟表位的氨基酸序列.设计合成针对表位的寡核苷酸序列,与GST蛋白融合表达进行Weslern-Blot分析,成功鉴定出了DTMUV E蛋白的一个线性抗原表位374EVEPPFG380.通过对DTMUV以及黄病毒属几种病毒E蛋白序列之间的比对,结果显示鉴定出的线性抗原表位在DTMUV中具有高度的保守性,无氨基酸位点的差异,且在其他黄病毒中也具有一定的同源性.利用Dot-Bloltting方法验证了该表位与DTMUV阳性血清具有良好的亲和性,同时该抗原表位与寨卡病毒(ZIKV)、登革热病毒(DENV)、日本乙型脑炎病毒(JEV)、西尼罗河病毒(WNV)、黄热病度(YFV)阳性血清具有交叉反应性.因此该表位可能为黄病毒属所共有的一个线性抗原表位,这对了解坦布苏病毒及黄病毒属其他病毒E蛋白的抗原表位结构功能以及研制表位疫苗和诊断抗原等具有重要意义.

摘要： 本实验通过肽扫描技术,利用原核表达载体pGEX-6p-1将重组表达质粒中的pET-30-gp85片段分段亚克隆并在大肠杆菌中成功表达后,用ALV-J gp85特异性单抗2D5株对分段表达的蛋白进行免疫分析.结果显示特异性单抗识别抗原表位区域为蛋白N端138aa-159aa.进一步合成小肽进行表位映射,精确定位了抗原表位关键氨基酸序列为N'-LRDFIAKWKSDDLLIRPYVNQS-C',并找到导致表位抗原性改变的关键氨基酸.对进一步分析ALV-J gp85结构与功能以及建立以表位为基础的抗原抗体诊断方法或表位疫苗具有重要意义.

摘要： 目的：构建含有人腺病毒3型、7型、11型、14型及55型抗原表位的嵌合蛋白,并对其进行免疫学研究.rn 方法：利用ANTHEWIN等软件,通过计算机分析人腺病毒3型、7型、11型、14型及55型六邻体蛋白的氨基酸序列,分别筛选出各类型腺病毒六邻体蛋白中具有强抗原性片段.利用基因工程方法将筛选所得蛋白片段的核酸序列进行串联,并将构建所得的重组序列插入载体pET28a(+)中,利用原核表达系统对构建的嵌合蛋白进行表达纯化.将纯化所得的嵌合蛋白作为抗原免疫Balb/c小鼠,制备抗血清.利用ELISA法检测嵌合蛋白的抗原性及免疫原性.rn 结果：纯化所得的嵌合蛋白浓度达到0.5mg/mL,具有较高的纯度.rn 结论：经4次免疫,小鼠抗血清效价达到640000,同时ELISA法证明嵌合蛋白具有较好的抗原性及免疫原性.本实验为进一步研制腺病毒疫苗、单克隆抗体以及诊断试剂奠定了基础.

摘要： 为进一步研究猪戊型肝炎病毒(HEV)开放阅读框3(ORF3)蛋白抗原表位的分布特征,本研究利用噬茵体随机肽库淘选技术,对本实验室制备并保存的一株抗HEV ORF3单克隆抗体进行4轮淘选,最终获得8种在目标区域编码不同12肽的噬茵体.经氨基酸序列比对发现,8种多肽中均含有与ORF3蛋白C末端一致的序列,主要集中在VVDLP、VDLP以及DLP,其中VVDLP所占比例最高.结果同时发现,在VVDLP上下游还存在不连续氨基酸,与其相距位置与ORF3 C末端一致,所有筛选得到的疑似氨基酸序列集中位于ORF3 C末端97位至112位区域内.利用ELISA方法对5段合成的多肽SAPPLPPVVDLPQLGL、VVDLP、SAPPLPPVVDLP、VVDLPQLGL和SAPPLPPQLGL进行免疫活性检测,仅有SAPPLPPVVDLPQLGL和SAPPLPPVVDLP能够和单克隆抗体结合.综上所述,本研究得到HEV ORF3疑似表位VVDLP,其上序列SAPPLPP对其抗原具有影响.

摘要： 禽戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)是2001年发现的导致鸡大肝大脾病或肝炎脾大综合症的主要病原,主要引起30～72周龄的蛋鸡和种鸡的死淘率升高(1-4％)和产蛋率下降(20％～40％).此外,该病毒引起的亚临床感染在鸡群中也非常普遍,当饲料或外界环境等因素发生改变时导致鸡群发病.目前,由于仍然没有一个合适有效的禽HEV体外培养系统,因此该病毒的诊断和防控仍然存在问题.rn VI产生短暂的抗体，因此抗原V区可以作为禽HEV血清学诊断的主要靶抗原区。另外，通过动物实验，ORF2蛋白的aa476~513和as 513~570区域包含两个中和抗原表位，两个表位可以延缓禽HEV感染鸡只后的排毒。而在抗原V区，针对两个抗原表位的单抗也可以体外捕获禽HEV，预示抗原V区中也可能存在着中和抗原表位。上述禽ITV的ORF2蛋白抗原表位的分析为禽HEV诊断抗原的设计及其免疫反应机制研究奠定了基础。

摘要： 水产品过敏是常见的食品安全问题,严重危及人类的生命健康.本文介绍了导致水产品过敏现象发生的蛋白质种类以及具有Ig E特异性结合能力的抗原表位,并阐述了热处理、超声处理、超高压处理和辐照处理等加工技术对水产品过敏蛋白的消除作用,对水产品过敏蛋白的未来研究方向进行了展望.

摘要： 0型FMDV的VPl和VP4结构蛋白中存在能够激活交叉细胞免疫保护的抗原表位，是研制通用型口蹄疫疫苗的理想后备抗原，故通过重组蛋白质工程技术制备了重组O型FMDVVPl-VP4蛋白，以此负载正常小鼠腹腔巨噬细胞(PMΦ)和事先用SR抑制剂处理的PMΦ，以未负载VPI-VP4蛋白的PMΦ为对照，于共培养24h收集不同处理组的PMΦ培养上清液，然后用蛋白质芯片检测上清液中97种蛋白质分子的表达水平。结果发现，PMΦ可自发分秘IFN-γ、IL-6、IL-17、IL-10和IL-α，并且有31种蛋白质分子的表达水平在不同处理组之间有显著性差异，具有统计学意义。抑制剂处理组IFN-γ、IL-17、IL-10和TNF-α的表达水平在负载VPI-VP4蛋白后24h均显著高于空白对照组;抑制剂处理组IFN-γ、IL-17和IL-6的表达水平在24h显著高于蛋白处理组，而抑制剂处理组IL-10和TNF-a在24h和负载蛋白组没有统计学差异。结果表明，小鼠PMΦ可以通过SR识别FMDV VPI-VP4，并藉此抑制巨噬细胞分泌IFN-γ、IL-6、IL-17，这可能是FMDV感染引起免疫抑制的原因之一，其发生机制有待进一步深入研究。

摘要： 尿激酶(uPA)含量不足或活性异常与一些男性不育症相关.令人感兴趣的是当雄性小鼠体内的uPA被抗体拮抗后其交配成功率明显低于对照组,妊娠率为零.这使人们看到应用uPA进行免疫避孕的可行性及有效性.本课题组已筛选出3个uPA的B细胞表位并合成相应的表位多肽,本研究用于免疫小鼠,观察避孕效果和副作用,以筛选出最佳B细胞表位多肽,为uPA作为避孕疫苗靶点的开发奠定基础.研究表明，uPA多肽免疫不会影响雄鼠的交配能力，但会降低致孕率，可能机制与降低雄鼠精子前向运动能力有关。从数据上来看，332组的免疫避孕效果最好。在整个实验过程中未见到雄鼠出凝血机制障碍的表现，主要器官未发现明显病理改变，提示uPA作为避孕疫苗有着较好的效果和安全性。其作用的可逆性有待进一步观察。

摘要： 本文构建羊种布鲁氏菌MS-90疫苗株bp26抗原表位55152和22191氨基酸区域的部分缺失株，并首次以小鼠肝脏为模型比较缺失株作为疫苗候选株的潜在价值，即是否能区分疫苗免疫与自然感染产生的抗体或/和降低疫苗株的毒力。本研究构建羊种布鲁氏菌表位缺失株MS-90bp26，以小鼠的肝脏为模型进行毒力评价。利用SacB负筛选标记的方法构建两株MS-90 bp26表位缺失株并进行生物学性状和Western Blot验证;用3.0×106CFU/0.2mL MS-90疫苗株及缺失株分别免疫BALB/c小鼠，在10d,20d,30d处死小鼠，HE染色观察肝脏的病理变化。经测序和Western Blot分析成功获得M5-90△bp261 M5-90△bp262两株突变株;常规生物学鉴定未发生生物学性状的改变;HE染色表明bp26缺失株毒力均低于疫苗株M5-90。结合CFU计数及脾脏指数首次证实肝脏可作为毒力判定的标准;构建的布鲁氏菌基因突变株M5-900bp262具有毒力弱，并具有血清学鉴别诊断的“标签”作用，可作为未来鉴别诊断新型布鲁氏菌疫苗的候选株。

摘要： 本发明涉及单片段重组梅毒螺旋体表位抗原，其氨基酸序列为ARRGEKEAVYDYQHKEGRFKSQDADYHRV或SVLSKQETEDSRGRKKWEYETDPSV。本发明还涉及包含上述表位抗原的多表位嵌合抗原。本发明的表位抗原活性高，多表位嵌合抗原特异性高、生产成本低。

摘要： 本发明涉及单片段重组梅毒螺旋体表位抗原,其氨基酸序列为ARRGEKEAVYD YQHKEGRFKSQDADYHRV或SVLSKQETEDSRGRKKWEYETDPSV。本发明还涉及包含上述表位抗原的多表位嵌合抗原。本发明的表位抗原活性高,多表位嵌合抗原特异性高、生产成本低。

摘要： 本发明公开了HMG‑COA还原酶的两个B细胞表位及包含其中一个或两个表位的抗原肽；这类抗原肽由HMG‑COA还原酶的一个或两个B表位与胰岛素瘤相关蛋白(IA‑2))近膜区JM2的B表位通过连接肽串联，串联后再通过连接肽与抗糖尿病的T表位P2的N端相连接。通过背部皮下免疫途径注射多次小剂量STZ诱导C57BL/6J小鼠的糖尿病模型，具有显著调脂和降血糖作用，同时显著降低血清HMG‑COA还原酶和尿酸水平，提高机体的抗氧化能力。本发明提供的抗原肽也可以用于重组微生物和转基因动物或植物，使它们作为生产工厂，生产该抗原肽或制作口服疫苗，用于糖尿病、调脂、动脉粥样硬化、氧化应激相关的疾病如糖尿病肾病、老年痴呆症以及痛风的治疗。

摘要： 本发明公开了黄嘌呤氧化酶B细胞表位及包含此表位的抗原肽；该抗原肽由黄嘌呤氧化酶B细胞表位通过柔性肽与胰岛素瘤相关蛋白-2近膜区的一个线性B细胞表位FEYQD串联，然后再与P277的Th2辅助表位P2的N端通过柔性肽串联而成；此抗原肽免疫小鼠得到的血清经Westem blot检测，结果显示能够产生特异性地与黄嘌呤氧化酶结合的抗体，可用于检测黄嘌呤氧化酶，此外抗原肽免疫小鼠后的血清能够抑制外源黄嘌呤氧化酶活性，抑制率与别嘌呤醇相比无显著差异(P＞0.05)，可用于制备黄嘌呤氧化酶抑制剂，用于治疗黄嘌呤氧化酶异常、尿酸异常、氧化应激紊乱引起的痛风、肝病、肾病、动脉粥样硬化、糖尿病、老年痴呆，眼病，心血管等疾病，具有重要的理论价值和广阔的应用前景。

摘要： 本发明涉及医药领域，公开了一种CD73酶活性相关的抗原表位及针对该表位的特异性抗体的制备方法。该CD73酶活性相关的抗原表位包括如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列，或与两者同源性在90%以上的氨基酸序列。该抗原表位的氨基酸序列具有很强的不可替代性，且利用多肽合成方法即可获得足量多肽，不需要生产大量的重组蛋白，节约了实验材料，缩短了抗原制备时间；且利用该抗原表位制得的表位特异性抗体能有效抑制CD73酶活性和刺激淋巴细胞释放干扰素，发挥抗肿瘤作用，具有广泛的应用前景和实用价值。

摘要： 本发明提供了一种HTNV抗原表位线性串联多肽。该线性串联多肽能够诱导特异性T细胞应答发挥免疫保护作用。本发明还公开了该表位线性串联多肽在制备多肽疫苗中的应用。本发明还公开了一种HLA‑A*02/表位肽‑复合物四聚体，其中，该四聚体具有表位VV9和荧光素PE，能够与相应TCR特异性结合，进而使得相应TCR能够被通过荧光检测出来。本发明还提供了四聚体的制备方法和在制备CTL检测试剂中的应用。

摘要： 本发明提供一种TNF‑α蛋白的B细胞表位、及基于该表位、结合MAP方案合成的8分支肽构象的多抗原肽，以及在制备溃疡性结肠炎疫苗中的应用。创造性地将MAP设计方案应用于小分子自身抗原的免疫学研究领域，通过大量试验，筛选出人TNF‑α蛋白的B细胞优势表位。在此基础上，应用MAP设计方案，得到以赖氨酸为核心基质的8分支肽构象，该8分支肽构象多肽属于自体抗原表位疫苗，因而有着给药方便且次数少、只需少量注射就可以诱发产生抗体的优点；且具有安全性及耐受性好、防治兼施等优势，有望为自体抗原MAP疫苗的研发提供重要的理论基础，也可为临床治疗溃疡性结肠炎提供新的思路。

摘要： 本发明属于分子生物学、免疫学和细胞生物学领域，涉及人VASN蛋白抗原表位及其制备方法和用途。通过噬菌体筛选技术，获得两条抗原表位肽VP1和VP2，其与VASN蛋白430‑441位氨基酸序列具有高度同源性。进而，通过ELISA、竞争ELISA、Transwell、CCK‑8等试验，确定了表位肽VP1和VP2能够拮抗VASN抗体抑制肝癌细胞迁移和增殖的功能。因此，VASN(430‑441位)抗原表位及其抗原模拟表位在肿瘤抗体药物和肿瘤疫苗的研发中具有良好的应用前景。

摘要： 本发明涉及医药领域，公开了一种CD73酶活性相关的抗原表位及针对该表位的特异性抗体的制备方法。该CD73酶活性相关的抗原表位包括如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列，或与两者同源性在90%以上的氨基酸序列。该抗原表位的氨基酸序列具有很强的不可替代性，且利用多肽合成方法即可获得足量多肽，不需要生产大量的重组蛋白，节约了实验材料，缩短了抗原制备时间；且利用该抗原表位制得的表位特异性抗体能有效抑制CD73酶活性和刺激淋巴细胞释放干扰素，发挥抗肿瘤作用，具有广泛的应用前景和实用价值。

摘要： 本发明提供一种TNF‑α蛋白的B细胞表位、及基于该表位、结合MAP方案合成的8分支肽构象的多抗原肽，以及在制备溃疡性结肠炎疫苗中的应用。创造性地将MAP设计方案应用于小分子自身抗原的免疫学研究领域，通过大量试验，筛选出人TNF‑α蛋白的B细胞优势表位。在此基础上，应用MAP设计方案，得到以赖氨酸为核心基质的8分支肽构象，该8分支肽构象多肽属于自体抗原表位疫苗，因而有着给药方便且次数少、只需少量注射就可以诱发产生抗体的优点；且具有安全性及耐受性好、防治兼施等优势，有望为自体抗原MAP疫苗的研发提供重要的理论基础，也可为临床治疗溃疡性结肠炎提供新的思路。