摘要:目的克隆cagAM1′基因,以其表达的蛋白为抗原,通过血清学方法检测幽门螺杆菌(Hp)cagA阳性菌株的感染.方法以既往克隆的cagAM1基因为模板设计引物,PCR扩增681bp cagAM1′基因,将其定向连接入载体pET-42a(+),转化宿主菌BL21,用IPTG诱导融合蛋白表达.可溶部分的表达产物用GST·Tag方法纯化.以该纯化抗原经Western-Blot方法,检测39份Hp培养阳性(其中28份cagA基因阳性,11份阴性)及17份无Hp感染患者的血清,以鉴定抗原检测的敏感性和特异性.同时用进口试剂盒进行对照实验.结果获得62kD的CagAM1′与GST融合蛋白,以此为抗原,28株cagA阳性患者的血清26份检出抗cagA抗体,表明cagAM1′蛋白具有抗原性,且该抗原检测相应抗体的敏感性为92.9%,高于进口试剂盒(71.4%),17份无Hp感染患者的血清14份抗cagA抗体阴性,表明该抗原检测相应抗体的特异性为82.4%,高于进口试剂盒(52.9%).结论 cagAM1′蛋白有望进一步开发用于临床Hp高毒株感染诊断.