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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

召开年：2013
召开地：徐州
出版时间： 2013-10-21

主办单位：中国畜牧兽医学会

会议文集：中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会论文集

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1.中兽药制剂使用中注意的问题
- 万遂如
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：当前我国中兽药制剂产品在药材生产、制剂生产中均存在质量不稳定、蓄意掺假等问题，且中兽药专业严重缺乏技术人才。鉴于此，提出兽医在临床上使用中兽药制剂应注意以下几点：改变兽医临床上用药的旧观念；选用优质合格的中兽药制剂用于防控；兽医临床上要重视联合用药；使用中兽药制剂时要注意对疫苗免疫产生的不良影响；使用中兽药制剂产品要认真进行选购；注意中兽药的不良反应。
2.PCV2构象中和表位关键氨基酸的鉴定
- 黄立平;陆月华;危艳武;郭龙军;吴洪丽;刘长明
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本试验利用猪圆环病毒2(PCV2)感染性克隆和突变技术研究PCV2a和PCV2b毒株嵌合体和突变体与单抗的反应特性，以达到鉴定PCV2-Cap蛋白构象中和表位关键氨基酸的目的。该研究有助于进一步深入研究PCV2的构象中和表位、了解PCV2毒株之间的抗原差异及为控制PCVD研究有效的疫苗。指出，具有中和活性的MAb 8E4可以用来鉴别PCV2a(CL、LG和JF2)毒株。这部分结果进步一证实了PCV2毒株之间存在抗原性的差异。另外，利用反向遗传学和突变技术研究PCV2-Cap蛋白构象中和表位的关键氨基酸，研究结果揭示59位氨基酸是PCV2-Cap蛋白构象中和表位的一个关键氨基酸。本研究的实验结果有助于进一步深入研究PCV2构象中和表位、了解PCV2毒株之间的抗原差异及为控制PCVD研究有效的疫苗。
3.猪圆环病毒2型毒株构象中和表位研究
- 刘建波;黄立平;危艳武;刘丹;王一平;李胜斌;吴洪丽;刘长明
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究旨在调查猪圆环病毒2型毒株PCV2b(YJ和JF)株Cap中哪些氨基酸突变可以使毒株由不与mAb 8E4反应到与mAb 8E4反应。研究证实PCV2 Cap蛋白的第59和60位氨基酸参与形成构象表位，并且突变其第59位或59位与60位氨基酸后，使对8E4单抗阴性的PCV2毒株获得了一个新的中和性表位。此外，研究为进一步研究PCV2构象表位以及对PCV2毒株进行抗原差异性分析提供了重要依据。并且获得了一个抵抗PCV2相关疾病的疫苗候选毒株。
4.新型鸭黄病毒病研究进展
- 吕素芳;郭广君;李峰;莫玲;沈志强
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：2010 年以来,在中国东南部众多省份相继爆发的鸭产蛋急剧下降疫病是由新型鸭黄病毒感染引起的.目前国内外专家学者对该病的流行病学、临床症状与病理剖检变化、病原学、快速诊断方法的建立等取得了阶段性的研究成果,本文就上述方面进行了较为系统的总结,以期为后续的深入研究提供参考和借鉴.
5.2010-2011年四川部分地区的PCV2的分子流行病学调查
- 赵春容;曹三杰;黄小波;文心田;邓静;袁明铭
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：为了解四川部分地区的猪圆环病毒2型(PCV2)的分子流行病学情况,本实验于2010-2011年从德阳、雅安、西昌市、遂宁市、成都等11个地区的疑是患病猪群中采集了共264份病料。通过PCR诊断,PCV2阳性病料为199份,PCV2感染率为75.4％。对11株PCV2分离株的全基因序列进行序列分析,结果显示:对11株分离株的全基因组分析,全都为PCV2b基因型,分离毒株间以及与参考毒株之间的全基因同源性分别为95.2％-99.7％,94.1-99.7％;与国内外参考毒株相比,ORF1的核苷酸及推导氨基酸的序列的同源性分别为96.7％-100％,98.4％-100％,ORF2核苷酸及推导氨基酸的序列的同源性88.0％-99.7％,85.4％-100％,发现ORF2变异位点较多,而ORF1相对保守得多。由此推测,四川地区近年来的PCV2的流行趋势可能是以PCV2b基因型为主。
6.中国东部PCV2分子流行病学调查2009-2013
- 邱小伙;吕朋;邢刚;金玉兰;廖敏;周继勇
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究从中国东部37个猪场分离到20株猪圆环病毒2型(PCV2)病毒。利用邻接法对其构建系统进化树,分析其基因型归属。结果显示,PCV2-HYan09和NBiao10毒株具有PCV2b标签序列,但在构建的系统进化树中却属于PCV2a,表明其可以归为一个新基因型(PCV2new).其余的18株PCV2分别属于PCV2b/1A和PCV2b/1C亚型。
7.泰州地区猪圆环病毒2型感染情况调查
- 郭广富;曹军平;吴艳涛;陆桂平;贺生中;程汉
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：为进一步摸清泰州地区猪群中猪圆环病毒2型(PCV2)的感染情况及危害程度,控制该病在泰州地区的流行,应用PCR方法对泰州所辖6个市区近两年116份病料进行PCV2的病原学检测。结果总阳性率为53.45％,每个地区都存在一定程度的感染。其中规模化养猪场阳性率为48.33％,散养户阳性率为58.93％。可见,PCV2在泰州地区猪群中普遍存在,应引起注意。
8.猪圆环病毒抗原快速检测试纸卡的制备
- 金玉兰;宋万杰;邱小伙;邢刚;周继勇
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：为了实现猪圆环病毒2型(PCV2)抗原的快速检测,本研究利用免疫胶体金技术,通过金标记抗猪PCV2的IgG,同时喷印猪IgG为检测线、猪PCV2-dCap蛋白为对照线,制备了一种检测PCV2抗原的试纸条。试纸条的检测灵敏度可达104TCID50/ml,可在4°C或室温有效保存12个月以上。试验中，对IgG标记的最佳条件进行了优化，确定了最佳标记条件，保证了试纸条性能的稳定性。通过灵敏度实验，试纸条对现行流行的PCV2病毒检测灵敏度可达104.0TCID50/mL，可用于疫苗生产上对病毒抗原含量进行定性检测，并有望用于临床上对猪场PCV2感染情况进行评估。本研究建立的PCV2抗原的胶体金试纸条检测技术，有望实现在养殖现场检测PCV2病毒抗原。
9.H7N9禽流感流行趋势、原因及防控策略
- 周祖华
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：2013年2月,我国上海发生人感染H7N9禽流感病例,到目前为止,中国内地已经有10个省市发生疫情,确诊病例131例,死亡37例,研究发现引发疫情的H7N9禽流感病毒是一种新型的重配病毒,人感染病例主要集中在长三角地区,呈散发状态.作为全球首次发生的新发人传染病,对人类生命安全构成重大威胁,全人类应当共同努力,采取有效措施,控制H7N9禽流感在人类、禽类发生和传播.
10.亚洲H5N1高致病性禽流感流行情况新进展
- 王晓虎;蔡春梅
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本文就亚洲H5N1高致病性禽流感的流行病学情况及各国政府的疫病防控体系进行了介绍，指出仍需要发生疫情的国家和受威胁国家政府主导对家禽和野生鸟类进行监控。
11.H7N9引发食品安全问题对中国肉鸡产业的影响
- 董航;丁壮
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：随着人们生活水平的提高,消费者对食品安全的关注也在深入.所以一旦有涉及食品安全问题的曝光就会产生巨大的影响.这是可以理解的,但是由于消费者或者媒体对关于食品安全的问题缺乏专业的理解,就会出现过度的恐慌,甚至会对一个产业链造成毁灭性的打击.至2013年2月19日上海发生第一例H7N9患者到5月6日全国已确诊病例128人,其中死亡23人.目前为止传染来源没有完全查明,没有证据可以证明是那种禽更没有证明是肉鸡是传染源,但是由于人们对H7N9的过度恐惧对禽业,特别是肉鸡产业造成了毁灭性的影响.
12.猪圆环病毒基因组复制机制的研究进展
- 张辉;唐青海;刘长明
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本文对近年来有关猪圆环病毒(PCV)基因组结构，以及病毒复制分子机制方面的研究进展进行了综述，以期为该病毒的分子生物学、致病机制和新型疫苗研究提供科学参考。指出，PCV基因组以RCR机制进行复制，这一复制机制在细菌质粒、噬菌体、植物和动物病毒中广泛存在，而且病毒的复制需要宿主细胞周期S期表达的酶类分子参与。在病毒感染期间，病毒脱衣壳后单链基因组运输到细胞核中。
13.猪支原体肺炎研究进展
- 李莹莹;何颖;赵武;李斌;秦毅斌;卢冰霞;梁家幸;陆芹章
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：猪支原体肺炎是猪肺炎支原体所引发的是一种以气喘为主要症状,以肺部对称性肉变为主要病理变化的慢性接触性呼吸道传染病,在世界各地普遍存在,极大危害养猪业的健康发展.随着对猪肺炎支原体的深入研究,发现其单一感染致死率虽低,但是易引发其它病毒或细菌等病原的续发或并发感染,导致猪呼吸道疾病综合症,使得疫情变得更为复杂,增加猪病诊断与防控的难度,造成巨大的经济损失.本文根据猪肺炎支原体的最新研究进展,从病原学、流行病学特点、主要抗原蛋白的研究、诊断、疫苗研制、防制措施等六个方面作一综述,从而为猪肺炎支原体的进一步研究及该病的防制提供新思路.
14.我国PEDV分子流行病学研究进展
- 董世娟;朱于敏;于瑞嵩;李震
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：2010-2011年我国境内的猪流行性腹泻(PED)大流行给我国养猪业造成重大经济损失。因疫苗免疫无法控制疫病流行,因此学者普遍认为猪流行性腹泻病毒(PEDV)出现了新的变种。本文综合分析了这个时期国内学者PEDV分子流行病学的研究结果,又对国内新近分离的PEDV的11个毒株的全基因序列进行遗传进化分析,进一步确定了国内暴发流行的PEDV毒株已远离中国86年分离的毒株和欧洲毒株CV777,成为了一个新的基因型。毒株基因变异应该是造成免疫失败和仔猪死亡率高的主要原因。进一步分析发现分离毒株的全长基因序列和棘突蛋白(S)基因序列长度有差异,其他基因长度保守性强。S基因的变异率高于其他基因,特别是短期内基因突变主要发生于S基因。综合分析认为国内变异毒株虽与韩国毒株遗传关系较近,但从境内毒株衍生和进化而来的可能性更大。因2006年已经观察到PEDV的免疫失效和PED流行,2010-2011年PED集中暴发可能是病原长期突变和适应性积累的结果,提示今后应充分发挥全国动物疫病预警网络的作用,加强毒株进化检测和疫病预警,优化疫病的防控手段,降低疫病发生频次和规模,减小疫病发生损失。
15.广西种猪布鲁氏菌病流行监测
- 李军;李常挺;许力干;陈泽祥;胡帅;李常春;彭昊;潘艳;杨威
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：2009年～2012年广西种猪布鲁氏菌病的监测结果显示，近四年广西种猪布鲁氏菌病试管凝集试验阳性率均在2%以下，依然在稳定控制标准要求以内，说明广西在2007年取得的布鲁氏菌病防治成果得到了巩固，这主要得益于各级畜牧兽医主管部门将布鲁氏菌病防治纳入工作重点，做到专人负责，强化防控，对老疫点常年实时监测，监测经费也年年得到落实。
16.某猪场腹泻仔猪沙门氏菌的分离鉴定与药敏试验
- 姚明;黄晓慧;陆萍;焦安心;孙裴;魏建忠;李郁
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：针对安徽某猪场仔猪腹泻病例,分别采集5头不同窝的肛拭子和肠道内容物样品,利用常规法结合PCR技术进行沙门氏菌的分离鉴定,玻片凝集试验和ERIC-PCR技术确定分离株的血清型与基因型,标准K-B纸片法进行20种抗生素敏感试验。结果显示,4头腹泻仔猪(4份肠道内容物样品、1份肛拭子样品)均分离到沙门氏菌,分离率80％,涉及明斯特沙门氏菌、纽兰沙门氏菌、新斯托夫沙门氏菌和乌干达沙门氏菌4种血清型,其中P2同时检出4种血清型沙门氏菌;8株沙门氏菌分离株为同一基因群,分属2个基因型,亲缘关系较近,对20种抗生素均敏感。结果表明,该猪场仔猪腹泻与不同血清型沙门氏菌的混合感染有一定的关系,母猪的清洁卫生与猪舍的消毒到位不容忽视,临床上常用抗生素可用于防治以减缓仔猪腹泻的发生。
17.猪细小病毒分子生物学诊断技术及疫苗的研究进展
- 寇亚楠;刘中原;魏战勇
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)是引起母猪繁殖障碍的主要病原之一,其广泛分布于世界各地,给我国乃至全世界的养猪业造成了巨大的经济损失.随着对猪细小病毒研究的不断深入,目前已经基本阐明了PPV的抗原性、组织嗜性、基因组、转录图谱和翻译图谱等,在病毒分子生物学诊断技术、疫苗研制等方面取得了很大的成就.
18.几种猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的比较与应用
- 张志慧;危艳武;吴洪丽;黄立平;李胜斌;刘建波;张辉;王一平;刘丹;刘长明
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究目的是以IPMA法标定的已知PCV2阳性和阴性血清样品为标准样品，对5种商品化的PCV2抗体检测的ELISA试剂盒进行了比较，评价了试剂盒的敏感性、特异性及符合率。选用其中一种试剂盒对PCV2疫苗免疫猪血清、人工感染猪血清及临床自然感染猪血清样品进行了抗体检测，旨在了解各种类型猪只对PCV2抗体应答规律，为临床PCV2疫苗免疫评价及流行病学调查提供科学依据。
19.副猪嗜血杆菌毒力与非毒力菌株菌体蛋白的比较蛋白质组学分析
- 曹会敏;李军星;袁秀芳;徐丽华;周晓丽;杜晓莉;姜平;王一成
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：为了筛选副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)毒力株与非毒力株之间的差异蛋白,通过比较蛋白质组学分析临床分离的毒力菌株14A7-2和非毒力菌株20A3-2之间2-DE图谱的差异,提取两个菌株的菌体蛋白进行双向电泳分离,Imagemaster2D Platinum7.0软件分析处理凝胶图像,MALDI-TOF/MS鉴定差异蛋白。在副猪嗜血杆菌毒力菌株中检测到596±10个蛋白质点而在非毒力菌株中检测到568±10个蛋白点,其中表达量差异达5倍以上及毒力菌株或非毒力菌株特有的蛋白点共有80个。选取毒力菌株或非毒力菌株特有的44个差异蛋白点进行质谱鉴定,成功鉴定42个蛋白点,对应37种蛋白。其中,毒力菌株特有蛋白27种,非毒力菌株特有蛋白5种,在毒力菌株特有蛋白中鉴定出潜在毒力因子铁摄取调节蛋白、触发因子、3-脱氢奎尼酸脱水酶等。研究结果为进一步研究副猪嗜血杆菌的毒力因子和致病机理以及鉴别诊断不同毒力株新技术研究提供新信息。
20.MRSA在欧洲和日本的流行病学及其应对策略
- 韩姗姗;任慧英
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究着重介绍12个欧洲国家(奥地利、德国、匈牙利、意大利、法国、西班牙、荷兰、丹麦、芬兰、瑞典、挪威和冰岛)和日本的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)流行状况、实验室诊断方法、对患者的治疗措施及医疗保障等以及国内流行状况和应对的国家方针。其中除西班牙外，其他国家均对入院病人进行MRSA的筛查，筛查的方法也是大致相同的，一般是对鼻粘膜、病人伤口，导管切口进行取样化验。除了意大利之外，所有国家都对控制MRSA该如何选择和使用抗生素提供了推荐方法。近年来全球MRSA的流行趋势让不同领域的专家对未来MRSA的发展态势并不乐观，不同国家所采取的MRSA防范措施多种多样，各个国家包括中国根据自己的相关政策制定了相应的应对政策以控制MRSA的流行。
21.特种毛皮动物(水貂、狐、貉)主要传染病防控技术研究进展及发展趋势
- 易立;程世鹏;仝明薇
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：中国是一个特种动物养殖大国,从业人员上百万,特种动物已经成为我国畜牧业的重要组成部分,特种动物重大疫病已经严重阻碍了产业的健康养殖持续发展,给农村养殖经济造成了巨大毁灭性打击.本文对我国毛皮动物主要传染病的防控技术研究进行了概述,总结了毛皮动物传染病防控制剂的研究现状,并提出了毛皮动物传染病防控技术的发展趋势.
22.猫杯状病毒感染疫苗研究现状与展望
- 赵艳丽;姜雪;刘秋艳;陈小庆;胡桂学
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：猫杯状病毒(Feline Calicivirus,FCV)是在猫群中高度流行的病原体之一。近年来由FCV进化而引发的严重、急性、致死全身性疾病(Virulent Systemic Disease,VSD)在世界范围内被频繁报道,严重影响猫群健康。目前该病尚没有特效的治疗方法，疫苗免疫接种是防制该病的主要措施。传统疫苗，如灭活疫苗及减毒活疫苗在病毒防制过程中起到重要的作用，但是这些疫苗只能减少临床发病率和病毒的排出，可能无法防止感染。随着分子生物学、基因工程技术的发展，新型疫苗如亚单位疫苗、核酸疫苗、病毒样颗粒疫苗等的研究也不断被尝试。
23.“高热病”发病猪场应用猪圆环病毒病疫苗和蓝耳病疫苗的成功控制经验
- 方树河;黄锦柳
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：近年来中国猪场流行的“高热病”是多病因引起的，PCV2在“高热病”中扮演重要角色，猪群免疫圆环苗有助于“高热病”的预防和控制。本文主要报告华南地区一个发病猪场，使用猪圆环病毒亚单位疫苗和蓝耳病活疫苗免疫接种，观察该场猪群的临床控制效果。从结果看，在临床上疫情很快得到控制，根据猪场养猪专家所说，生产性能的好坏转变在时间上与免疫接种接近，因此将疫情控制归因于免疫接种措施。
24.重组猪圆环病毒2型Rep/Rep'和Cap蛋白亚单位疫苗免疫保护性研究
- 刘丹;王一平;吴洪丽;危艳武;唐青海;刘建波;李胜斌;魏萍;刘长明
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究以重组杆状病毒表达的PCV2-rRep和-rRep’蛋白及PCV2-rCap蛋白制备亚单位苗，同时利用PCV2全病毒制备的灭活苗，在相同条件下进行鼠体免疫攻毒试验，旨在比较各自的免疫原性和攻毒保护性。以PCV2-rRep和-rRep’蛋白亚单位疫苗免疫应答结果表明，这2种复制酶蛋白均具有良好的免疫原性，能够诱导机体产生高水平的抗体滴度，但在鼠体攻毒模型中对PCV2感染无任何保护性，用各自的免疫血清进行的体外中和试验也证明这些抗体无中和病毒活性，研究证明PCV2-rRep和-rRep’蛋白不是病毒保护性抗体，其功能可能仅限于病毒复制。比较而言，PCV2-rCap亚单位疫苗和全病毒灭活苗均能够有效刺激机体产生较强的体液免疫反应，在攻毒后抗体滴度得到进一步提升，对免疫攻毒鼠体病毒载量检测显著低于攻毒对照组水平，表明Cap蛋白抗原在抗病毒感染过程中起关键作用。由此可见，PCV2疫苗都是Cap蛋白刺激机体产生的抗体起免疫保护作用，而且针对Cap蛋白的抗体具有中和活性。
25.猪圆环病毒Cap蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
- 曲信芹;何乃珠;涂伟;高崧;刘秀梵
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：利用重组杆状病毒表达系统在昆虫细胞中表达PCV2-ORF2基因,并以构建的重组杆状病毒为免疫原,通过杂交瘤技术,研制针对PCV2的单克隆抗体,为建立准确快速的PCV2诊断方法奠定基础。首先将PCV2-ORF2基因克隆到杆状病毒的转移载体pFastBacTM1中,然后将其转化入大肠杆菌感受态细胞DH10Bac中,与DH10Bac中的穿梭载体Bacmid发生转座,通过抗性和蓝白斑筛选,得到重组杆状病毒质粒reBacmid-ORF2,通过脂质体介导reBacmid-ORF2转染Sf9细胞,成功获得了表达PCV2-ORF2基因的P1代重组杆状病毒。将所获得的重组杆状病毒经Vivaflow200浓缩后,免疫6～8周龄BALB/c小鼠,取其脾脏与Sp2/0细胞融合,以IFA进行筛选,经多次亚克隆后得到3株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞,分别命名为5H6、4E2、5F7.通过IFA、IPMA及Western-blot试验对3株单抗特异性进行分析鉴定,结果显示,3株单抗均能与PCV2-Cap蛋白产生特异性的反应,并利用流式细胞术初步建立了对PCV2毒株感染PK15细胞的检测方法,从而为快速检测PCV2病毒奠定了基础。
26.猫杯状病毒基因和抗原多样性研究进展
- 赵艳丽;姜雪;刘秋艳;陈小庆;胡桂学
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：猫杯状病毒(Feline Calicivirus,FCV)是在猫群中高度流行的病原体之一.由于FCV具有基因、抗原多样性,致使强毒株感染不断暴发,疫苗免疫失败被频繁报道.本文综述了FCV基因和抗原多样性研究进展,认为FCV进化与毒株间的选择竞争无关。指出，当前疫苗免疫失败的主要原因是FCV抗原具有变异性，研究认为衣壳蛋白基因可变区免疫主导位点的抗原多样性解释了逃逸突变体的出现。一些研究认为FCV抗原的变异来自疫苗引起的免疫压力。抗原的变异对于选择制备疫苗的抗原带来困难，这就意味着没有疫苗能中和所有的病毒分离株，某些疫苗已经彻底失败。
27.戊型肝炎疫苗研究进展
- 李斌;苏乾莲;赵武;秦毅斌;梁家幸;何颖;闭炳芬;梁保忠;段群棚;卢冰霞;李莹莹;姜佳佳
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：戊型肝炎(Hepatitis E,HE)是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E Virus,HEV)引起的病毒性肝炎,是一种新发重要人兽共患传染病,呈全球分布,严重危害人们身体健康和动物养殖业健康发展。HEV有四种基因型(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型),但HEV只有一种血清型,因此应用HE疫苗进行免疫预防是最为经济、有效、可行的HE防控手段。目前HEV尚不能在体外细胞中进行稳定的大量培养,从而阻碍了HEV灭活疫苗和弱毒疫苗的研制,现在HE疫苗研究重点方向是基因工程疫苗的研发。本文就四种HE基因工程疫苗(重组HEV样颗粒疫苗、重组蛋白疫苗、核酸疫苗和转基因植物可食疫苗)的研究进展作一综述。
28.兽用狂犬病疫苗研究进展
- 刘林立;陈中秋;卫广森
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：预防狂犬病除对人进行有效的预防接种外,最主要的是应对犬进行全面的免疫,此为控制和消灭狂犬病的根本措施。针对我国目前情况，开发高效、安全、免疫方便且价格低廉的兽用狂犬病灭活疫苗，对预防和控制我国狂犬病，特别是农村地区的狂犬病有着重要的现实意义。目前，常规狂犬病疫苗仍为预防人和动物狂犬病的有效方法，常规疫苗尽管安全有效，同时也存在着一定的不足。随着分子病毒学和疫苗学的发展，研制安全、有效、经济、使用方便的狂犬病新型疫苗已成为当前的热点。目前使用和在研的狂犬病新型疫苗主要有亚单位疫苗、合成肽疫苗、DNA疫苗、活载体疫苗、基因缺失疫苗、抗独特型疫苗等。
29.嵌合型猪圆环病毒(PCV1-2)灭活苗对商品猪免疫保护效力的研究
- 汪正亮;周金柱;王小波;李基棕;高杏;俞天琦;高崧
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：目的：本文运用多功能细胞电穿孔仪将本实验室构建的重组pSK-dPCV1-2质粒转染Dulac细胞,传代培养后收获嵌合型猪圆环病毒PCV1-2.将该重组病毒灭活后与ISA206 VG佐剂乳化制成灭活苗,免疫商品猪以评价其免疫保护效力。方法：将42日龄PCV2母源抗体较低的20头商品猪随机分成5组,另外2头作为健康对照组。通过检测不同时间的间接免疫荧光抗体、中和抗体、攻毒后病毒血症以及病理变化和组织中的病毒载量等评价疫苗的免疫保护效果。结果：二免后14 d,所有免疫组试验猪都表现为PCV2血清学阳性,且中和抗体水平在1/15～1/20.攻毒后21 d扑杀试验猪,免疫组猪的淋巴结和各脏器的大体和显微病变都比攻毒对照组轻微。攻毒对照组的淋巴结出现多核巨细胞和嗜酸性粒细胞,且有多量的淋巴细胞缺失,免疫组未见多核巨细胞,淋巴细胞缺失也较少。淋巴结中PCV2病毒载量在攻毒对照组为5.566±0.432,在104.0 TCID50,105.0 TCID50,106.0 TCID50免疫组分别为4.469±1.023,4.434±0.716,3.521±0.958,其中105.0 TCID50,106.0 TCID50免疫组与攻毒对照组差异显著(P＜0.05),但是,试验期间各试验组和健康对照组均未观察到明显的临床症状。结论：断奶仔猪免疫105.0 TCID50以上嵌合型猪圆环病毒PCV1-2灭活苗可以有效地抵抗PCV2b/1B/Jiangsu/Jingjiang/2012/11/08病毒感染。
30.浅谈人畜共患病——布病
- 李满;史子学;志永
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：布鲁氏菌病(Brucellosis)是世界范围内发生的一种重要的人畜共患病.目前,该病已在世界范围内广泛流行,并呈一定上升态势,严重危害畜牧业发展和人类健康.因此,本文对布鲁氏菌病病原、发病机制、临床症状、诊断和免疫防控等方面作简单论述.指出，随着对布鲁氏菌病预防和控制监管力度的加大，及预防为主，同时采取监测、检疫、扑杀、消毒相结合的综合性防疫措施的实施，人类对布病的认识和关注度也在不断加深，同时分子生物学和分子免疫学技术的发展，为研制出安全、经济、有效的新型布鲁氏菌病疫苗提供了条件，特别是随着布鲁氏菌基因组测序及其功能基因组学的迅速发展，布鲁氏菌新型疫苗的进一步成功研制成为可能，将使以后布病的快速诊断、治疗和预防取得更好的效果。
31.病毒感染与细胞自噬的相互调控作用
- 王国超;孟庆玲;乔军;陈创夫
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本文对近年来有关病毒感染和细胞自噬之间相互作用研究的相关文献进行了综述,探讨病毒感染对宿主细胞自噬的调控作用。目前，对于自噬体双层膜的来源、形成的机制以及它对机体起保护性的作用还是有害的作用等这些基本问题仍不清楚。对于自噬的研究仍处于早期阶段。自噬做为细胞维持自稳定的一种自我保护机制，在病毒的感染过程中的作用尚需要进一步研究。随着病毒与自噬相互调控作用的分子机制的研究不断深入，将为阐明理解病毒的致病机制和为抗病毒药物的开发奠定基础。
32.两种猪伪狂犬病活疫苗产品免疫猪抗体消长规律比较
- 杨晓红;吕茂杰;丁旭娜;何召庆;杨保收;王宏伟
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究用两种不同基因缺失的伪狂犬病毒制备的活疫苗免疫17-21日龄仔猪,用ELISA方法检测免疫后猪血清中的gB抗体水平变化。结果表明A组疫苗免疫后7d抗体即出现阳转,而B组疫苗抗体阳转出现比A组要晚,且A组疫苗阳转后至实验结束,其抗体水平都高于B组疫苗。本研究显示A组疫苗的免疫效果优于B组疫苗。
33.我国猪群中新甲型H1N1流感病毒生物学特性的研究
- 孙怡朋;杨俊;刘金华
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：在本研究中，对猪群中的甲型H1N1流感病毒进行流行病学调查，并且研究了分离猪的遗传进化特点、受体结合特性和致病性。指出，本研究中的猪源甲型H1N1流感病毒对小鼠的致病性均强于CA04病毒，且本研究中的猪源甲型H1N1流感病毒除了有4株病毒具有HA-D222G突变外，其他的病毒都不具有这些毒力位点，暗示还有未知的甲流毒力因子。
34.猪瘟病毒NS5A蛋白的亚细胞定位及对宿主细胞的影响
- 张彦明;何雷;张成成;郭抗抗;宁蓬勃
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究的目的是了解猪瘟病毒(CSFV)NS5A蛋白对宿主细胞的影响，为揭示NS5A蛋白在CSFV致病中的作用及其机制提供科学资料。酵母双杂交技术在研究胞内蛋白与病毒蛋白相互作用中具有突出的优势。本研究进行了CSFV NS5A蛋白的酵母双杂交试验，寻找到了16个与CSFV NS5A蛋白相互作用的胞内蛋白。这些胞内蛋白的功能涉及细胞周期、细胞内新陈代谢、细胞的RNA转录、胞内蛋白的正确折叠、血管生成和通透性等细胞生理功能的众多方面。CSFV NS5A蛋白与这些蛋白的相互作用必将调节这些蛋白的正常的生理功能，在CSFV对宿主细胞生理功能的调节并导致疾病发生的过程中可能扮演着重要的角色。
35.猪瘟病毒Npro蛋白核仁穿梭及其对病毒复制的影响
- 李永锋;申梁;黄俊华;李超;李素;孙元;仇华吉
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：为了研究Npro蛋白细胞内运输对病毒复制的影响，构建了表达IRF3-Npro融合蛋白的突变体病毒vSM-IRF3和表达失去抑制干扰素产生功能的Npro-D136N的突变体病毒vSM-D136N，试验结果表明，vSM-IRF3表达的IRF3-Npro融合蛋白只定位于细胞质;vSM-IRF3的平均滴度比亲本病毒约低200倍，而vSM-D136N的平均滴度比亲本病毒低约30倍;多步生长曲线显示，vSM-IRF3的复制在病毒复制周期的晚期(36-72 hpi)受到明显抑制;干扰素启动子活性检测结果表明，vSM-IRF3与亲本病毒一样不诱导干扰素产生。以上结果证明，阻碍Npro蛋白的核仁穿梭是影响vSM-IRF3复制周期晚期增殖的主要因素。本研究首次发现，Npro蛋白具有独立于其切割活性和抑制干扰素产生功能的核仁穿梭功能;IRF3可以引起Npro蛋白细胞内的重新分布;Npro蛋白的核仁穿梭对于猪瘟病毒在其复制周期晚期的有效复制是必须的。
36.H1N2猪流感病毒基因型分析及其对小鼠的致病性和炎性反应
- 张艳;周红波;金梅林;陈焕春
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：中国报道过的20株H1N2猪流感病毒目前仍没有详细的基因型和重组特征分析，为此本研究根据流感病毒库中的序列对比，将H1N2猪流感病毒进行具体分型，并且利用2009年本实验室在湖北从猪体内分离到的两株H1N2猪流感病毒进行小鼠致病性研究，为H1N2猪流感的防控奠定基础。
37.宁夏屠宰场猪流感流行病学调查
- 李知新;王进香;周海宁;闫小芹;王磊;吴亚文;李志红
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：为调查宁夏生猪屠宰场猪流感流行情况,采集2009年12月至2011年4月份猪双孔鼻拭子和对应血清,同时收集2010年4月至2011年10月每月送检的猪双孔鼻拭子。采用血凝抑制试验对1600份血清样本进行H1和H3亚型抗体检测;采用RT-PCR方法对2391份鼻拭子进行病原学检测。血清学调查结果显示,SIV隐性感染阳性样品247份,阳性率为15.4％,临床感染阳性样品414份,阳性率25.9％;病原学调查结果表明,对鼻双孔拭子检测SIV阳性率为12.7％,对血清学检测阳性样本616份进行RT-PCR检测,阳性率为70.9％,对血清学检测阴性样品984份进行RT-PCR检测,阳性率为13.3％;调查发现,屠宰场SIV隐性感染十分普遍,11-4月份生猪带毒率和发病率较高,制约了宁夏养猪业的发展;生猪长途调运屠宰能加速猪流感病毒的扩散和蔓延;同时由于与其它病原微生物混合感染日趋复杂化,使得对猪病防控的难度也越来越大。
38.MEK2与猪瘟病毒E2蛋白的相互作用及其对猪瘟病毒复制的调控作用
- 廖亚金;李素;贺番;李丹;孙元;罗玉子;仇华吉
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起的一种烈性传染病。E2为CSFV主要结构蛋白，在介导CSFV感染宿主细胞方面发挥重要作用。rn 为研究E2蛋白与宿主细胞蛋白的相互作用，本研究以E2为诱饵蛋白，利用酵母双杂交系统从本实验室构建的猪外周血单个核细胞(PBMC) cDNA酵母表达文库中筛选得到与CSFV E2蛋白相互作用的宿主细胞蛋白MEK2，并用GST pulldown、双分子荧光互补和激光共聚焦等方法验证了E2与MEK2的相互作用。进一步研究证实，CSFV感染PK-15细胞后，可活化ERK通路并促进MEK2的表达，而用MEK1/2特异性抑制剂U0126抑制该通路，则可显著降低CSFV的增殖，表明CSFV通过调节该通路以促进其增殖。与以往研究不同的是，用MEK1特异性抑制剂PD98059处理PK-15细胞则对CSFV增殖无明显影响。分别于感染后不同时间用U0126处理CSFV感染的PK-15细胞，结果显示，阻断ERK通路不影响CSFV的吸附和进入细胞。采用β干扰素(IFN-β)双荧光素酶报告系统检测MEK2对IFN-β表达的影响，结果表明，MEK2以剂量依赖性的方式抑制IFN-β的表达，但其具体机制有待深入研究。rn 总之，本研究发现CSFV E2与MEK2存在相互作用并可激活MEK/ERK通路，阻断MEK/ERK通路显著抑制CSFV的复制，其机制可能是通过MEK2抑制IFN-β表达。
39.荧光定量RT-PCR检测猪瘟兔化弱毒疫苗方法的建立
- 范斌;马志亮;刘岳;杨洁;柴俊;刘旭川;张以芳
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：猪瘟是危害养猪业的重要传染病,猪瘟主要依靠猪瘟兔化弱毒疫苗预防,目前各厂家不同批次弱毒苗的质量效果,主要通过注射疫苗后,检测免疫抗体来验证,耗时费事.本研究设计合成了两对引物(一对质粒标准品引物和一对荧光定量PCR引物)及一条探针序列,构建了质粒标准品,在对质粒及样品检测验证的基础上,建立了测定猪瘟兔化弱毒疫苗病毒含量的荧光定量RT-PCR方法.该方法灵敏度高、特异性强、重复性好,检测时间短,可为疫苗生产厂家及疫苗应用单位检测弱疫苗质量效果提供科学依据.
40.甲型H1N1和猪流感病毒H3亚型二联胶体金检测试剂盒的制备及应用
- 明晓;但汉并;王盛羽;金梅林
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究以抗甲型H1N1病毒的单抗及抗猪流感病毒H3亚型的单抗为基础,建立了甲型H1N1和猪流感病毒H3亚型二联胶体金检测试剂盒。本试剂盒以2B3喷膜作为检测甲型H1N1的检测线,以1F6和3D1喷膜作为检测猪流感病毒H3亚型的检测线,以羊抗鼠IgG喷膜作为质控线,把金标4H9、金标2B8及金标2B3涂布在结合垫上,制备了灵敏度高、稳定性高、特异性好的甲型H1N1和猪流感病毒H3亚型二联胶体金检测试剂盒。此试剂盒检测甲型H1N1病毒、H3亚型病毒呈阳性,检测H5亚型流感病毒、经典H1N1猪流感病毒、H10亚型流感病毒、H9亚型流感病毒、PCV2、PRRSV、PRV、CSFV均呈阴性。此二联胶体金检测试剂盒对甲型H1N1和猪流感病毒H3亚型的诊断、监测及防控具有重要的意义,也为多联胶体金检测试剂盒的研发打下了坚实的基础。
41.乙型脑炎病毒感染小胶质细胞中TLR3、RIG-I信号通路分析
- 蒋蓉;叶静;陈焕春;曹胜波
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究拟从TLR3和RIG-I信号通路入手，研究乙型脑炎病毒刺激小鼠小胶质细胞之后炎症因子的表达、以及对信号通路激酶ERK、p38MAPK的激活情况，通过对TLR3与RIG-I进行抑制，观察二者被沉默之后对乙脑病毒所产生的炎症反应可能产生的影响，从而为揭示JEV诱导中枢神经系统炎症反应的分子机制奠定了基础。
42.猪乙型脑炎病毒LS株的理化特性及在BHK-21细胞上增殖特性的研究
- 王帅涛;李伟豪;赵军;陈陆;常洪涛;魏亚鹏;杨霞;王新卫;王川庆
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：乙型脑炎给养猪业造成严重的经济损失，也是人类公共卫生的潜在威胁。本试验对日本乙型脑炎病毒(JEV)LS株的理化特性及在金黄地鼠肾细胞系(BHK-21)细胞上的增殖特性进行研究，更进一步的了解毒株的特性，为疫苗候选株的筛选奠定基础。
43.猪瘟病毒诱变型E2基因重组干酪乳杆菌的构建及免疫学特性
- 孙绍美;张书光;张云娟;柴俊;刘旭川;张以芳
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究将为益生菌株的改造及表达猪瘟E2蛋白的重组乳酸菌作为口服疫苗防治猪瘟奠定科学的基础。rn 以pET28a-E2重组质粒为模板，应用PCR扩增得到猪瘟病毒诱变E2基因，并纯化后连接到pNZ44质粒载体中，并通过酶切及测序分析正确，表明成功构建了插入目的基因片段的pNZ44-E2重组表达质粒。重组质粒电转化入已筛选的动物源性干酪乳杆菌中，经培养诱导表达，超声波裂解，SDS-PAGE检测到E2蛋白目的条带，表明成功获得LV-pNZ44-E2重组乳酸菌工程菌;经免疫荧光抗体染色，能在重组菌菌体内见到特异性免疫荧光，而非重组菌菌体内没有荧光，说明E2蛋白能在乳酸菌表达并具有良好的生物学活性。rn 将筛选到的优良重组乳酸菌作为益生菌，经口服免疫实验动物家兔;从实验动物粪便中能分离到重组乳酸菌及用PCR检测到目的基因，表明该重组工程菌能在动物肠道内定植存活。采取血清用ELISA进行特异性抗体检测，ELISA检测实验动物的血清阻断率大于40%,判定为阳性，说明有免疫动物中有猪瘟抗体存在。采抗凝全血进行淋巴细胞增殖实验，猪瘟病毒抗原对实验动物的淋巴细胞有明显的刺激增殖作用，表明口服重组干酪乳杆菌后既可引发机体的体液免疫，也可引发细胞免疫应答。
44.腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2不同免疫途径的效力评价
- 孙元;秦华洋;袁晋;王春花;赵碧波;李素;罗玉子;仇华吉
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：猪瘟是一种非常重要的猪传染病,对养猪业危害极大。具有标记特性的新型猪瘟疫苗及相应的鉴别诊断方法将会对猪瘟的防控起到重要的作用。先前证实,构建的表达猪瘟病毒E2基因的腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体病毒rAdV-SFV-E2在猪体上可诱导高水平的猪瘟特异性体液免疫应答和细胞免疫应答,免疫攻毒的保护效果与猪瘟兔化弱毒疫苗C株相当。系统评价显示,该疫苗初步具备了理想猪瘟疫苗的特征。本研究对该腺病毒/甲病毒复制子嵌合病毒rAdV-SFV-E2以三种免疫途径(肌肉、皮下、滴鼻)在猪体上的免疫效果进行了比较。选取21头5周龄左右猪瘟抗体及抗原均为阴性的健康仔猪,将所有仔猪随机分成A、B、C和D四组,其中A、B、C三组分别经肌肉、皮下和滴鼻方式注射5×106 TCID50 rAdV-SFV-E2,D组分别经三种途径免疫5×106 TCID50 rAdV-SFV-empty.免疫后3周以同种疫苗、同样途径和剂量进行加强免疫。加强免疫后4周,所有猪用猪瘟病毒石门株进行攻毒。研究结果显示,皮下免疫组诱导的体液免疫水平较其他途径免疫组较高。在攻毒前,A组、B组和C组免疫猪的平均抗体阻断率分别为46.28％、51.66％和31.94％。皮下免疫组与滴鼻免疫组在攻毒前的抗体水平比较上差异显著(p＜0.05).攻毒后3 d,A组、B组和C组免疫猪的平均抗体阻断率分别为54.28％、62.39％和39.35％。皮下免疫组与肌肉免疫组、滴鼻免疫组间差异显著(p＜0.05).在细胞免疫方面,皮下免疫组诱导了高水平的特异性的淋巴细胞增殖、IFN-γ和IL-4的分泌,与rAdV-SFV-empty免疫组及肌肉和滴鼻免疫组之间差异显著(p＜0.05).本研究进一步证实了腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗作为一种理想猪瘟疫苗的可能性,将会对猪瘟的防控起到重要的作用。
45.高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒河北株HB-Xt1的分离鉴定
- 赵驻军;宋勤叶;李曼
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：应用MARC-145细胞从河北邢台某猪场的病猪脾脏和淋巴结内分离到一株病毒(命名为HB-Xt1).经免疫过氧化物酶单层实验检测,HB-Xt1能够与抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)E蛋白多克隆抗体发生特异性结合。RTPCR与序列分析表明,分离毒株的ORF5序列与国内近年流行的高致病性PRRSV分离株JXA1和HuB2的相似性在99.8％以上;非结构蛋白Nsp2基因中存在不连续的两处缺失(分别缺失3 bp和87 bp),与JXA1和HuB-2的相似性分别为99.4％和99.1％。基于ORF5和Nsp2基因部分序列的遗传进化分析结果,均显示HB-Xt1与美洲型PRRSV同处于一个大分支,与2006年后国内分离的高致病性PRRSV的遗传关系最近。HB-Xt1感染MARC-145细胞后60h左右,可见细胞变暗、聚集、崩解等病变效应,72h时病毒毒价最高,当连续传代4次后,其TCID50维持在106.0/mL左右。
46.福建省PRRSV分离株Nsp2基因不同变异序列鉴定
- 刘建奎;魏春华;杨小燕;戴爱玲;李晓华
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究通过对2009年-2012年福建省不同地区的PRRSV分离株的Nsp2基因进行分析。发现部分HP-PRRSV的Nsp2蛋白缺失正在进一步扩大由3个氨基酸到30个氨基酸再到78个氨基酸和81个氨基酸的缺失，同时还发现一株有5个氨基酸插入的毒株，这是国内首次发现在Nsp2基因中有插入的毒株。这些新缺失和插入毒株的出现，为进一步深入地研究HP-PRRSV的分子特性和致病机制提供了理论基础。
47.乙型脑炎病毒反向遗传系统的构建
- 郑浩;郑旭晨;郭亦非;童武;童光志
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本文以一株猪源GI JEV HEN0701株及其传代致弱珠10S3为基础，建立JEV的反向遗传系统，为深入研究GI JEV的遗传特征和毒力变异奠定基础。结果表明，本文成功建立了强毒株HEN0701及其弱毒株10S3的感染性克隆，并在弱毒株克隆中引入了SacI位点标记，拯救病毒具有与亲本毒株相同的体外生长特性和对小鼠的致病特性。以感染性克隆为基础，对强毒株核糖体移码信号序列进行突变，成功消除了病毒基因组翻译时的核糖体移码而不产生NS1’蛋白。
48.猪乙型脑炎病毒广西分离株FC792的囊膜糖蛋白E基因克隆及生物信息学分析
- 李斌;卢冰霞;秦毅斌;赵武;梁家幸;韦超文;何颖;苏乾莲;陈忠伟;闭炳芬;段群棚;李莹莹;姜佳佳;梁保忠;黄伟坚
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：为了研究开发快速、敏感、特异的猪乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)诊断试剂和免疫效果良好的猪JE基因工程疫苗,对2011年分离到的广西猪乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)FC792株的E基因进行克隆、测序及生物信息学分析。结果测序获得1500bp的完整FC792株E基因序列,经同源性比对及遗传进化树分析表明,FC792株为基因Ⅲ型JEV毒株,且属于弱毒株。应用在线软件SignalP4.1对FC792株E蛋白进行信号肽的预测,结果预测到FC792株E蛋白不存在信号肽。应用在线软件NetNGlyc1.0预测到FC792株E蛋白存在1个N-糖基化位点:154-NYSA,线软件NetPhos2.0预测到其存在如下磷酸化位点:丝氨酸(Ser)有10个位点;苏氨酸(Thr)有6个位点;酪氨酸(Tyr)有5个位点。应用在线免疫信息学软件预测到FC792株E蛋白有16个B细胞抗原优势表位(分值(score)≥0.85),5个CTL抗原表位,10个Th抗原表位。应用在线软件GOR4预测FC792株E蛋白的二级结构,发现α-螺旋区域占21.20％,延伸链区域占30.40％;无规则卷曲区域占48.40％。应用在线软件SWISS-MODEL对FC792株E蛋白进行三维结构预测的同源模建,结果可见FC792株E蛋白存在大量的无规则卷曲和延伸链区域,并有多个α-螺旋区域,它们螺旋扭转卷曲形成近似左右对称的2个亚基的二聚体空间立体结构。研究结果为今后研制猪JE诊断抗原和猪JE基因工程疫苗提供参考借鉴。
49.闽西地区PRRSV流行株ORF3基因克隆与序列分析
- 杨小燕;刘建奎;魏春华;戴爱玲;李晓华
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：为了解闽西地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株现状、分子生物学特征和遗传演化规律,本研究收集了闽西不同区(县)的6株PRRSV,并对其ORF3基因进行遗传变异分析。结果表明6株PRRSV ORF3基因与国内HP-PRRSV株的核苷酸和氨基酸同源性分别为97.2％～98.8％和97％～98.5％;而与VR-2332、CH-1а等经典株的核苷酸和氨基酸的同源性分别为87.8％～94.5％和87.1％～88.6％,系统进化树表明6株流行株与HP-PRRSV亲缘关系较近,与疫苗株亲缘关系较远。
50.2009-2012年西南地区猪繁殖与呼吸综合征Nsp2基因遗传变异分析
- 周英顺;姬高升;王红宁;张志坤;曾凡亚;许记刚;康润敏;杨鑫;张安云
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：目的：对所分离的19株猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的Nsp2基因进行序列测定分析。方法：使用前期研究报道的的方法从西南地区规模化猪场中采集疑似PRRSV感染病死猪组织样品(肺脏、淋巴、血清等)进行病毒分离。提取所分离病毒的RNA，使用RT-PCR扩增Nsp2基因全序列、对其进行克隆、测序和遗传进化分析。结论：我国西南地区猪场中PRRSV为北美型，同时存HP-PRRSV和C-PRRSV，以H-PRRSV为主。2009-2012年在西南地区的PRRSV起源于2006-2007年席卷中国的HP-PRRSV毒株类型，并在新的免疫压力下出现了新的变异。本文为对西南地区PRRS病毒的遗传变异进行了初步分析，为对该地区PRRSV的防控奠定了基础。
51.猪乙型脑炎病毒RT-LAMP检测方法的建立和应用
- 李海洋;哈卓;殷秀辰;饶柏钟;张磊峰;刘惠莉
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：为建立一种简单,快速,灵敏,特异性好的猪流行性日本乙型脑炎病毒(JEV)的检测方法,本研究根据Genbank登录的SA14-14-2疫苗株及SA14毒株的E基因组序列,利用在线软件Primer Explorer V3设计了6条特异性引物,优化反应体系,建立了环介导等温扩增(LAMP)检测方法。该方法灵敏度高、特异性强、方便快捷,在1 h～2 h内即可得到结果,被用于多种病毒的检测。该方法成本低,只需一个水浴锅即可完成实验,又可省略琼脂糖凝胶电泳步骤,更适合基层实验室应用。结果判定时只需要在扩增产物中加入SYBR GreenⅠ染料,就可以直接在可见光或紫外光下观察颜色变化。该方法省时省力,是一种适用于基层实验室快速、准确诊断流行性JEV的方法。
52.2012-2013河南地区猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查
- 周峰;杨霞;赵军;陈陆;王新卫;常洪涛;刘红英;姚慧霞;王川庆
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究对2012年～2013年采自河南各地的98份PRRSV疑似病料进行PRRSV核酸的检测，并对部分阳性样品的NSP2基因进行了RT-PCR扩增和序列分析，研究中国河南地区PRRSV流行株NSP2基因变异情况和发展趋势。作为PRRSV变异的独特标记，通过对NSP2的序列分析来了解河南PRRSV的多样性，将为河南区PRRS的防制提供参考依据。
53.猪乙型脑炎活疫苗耐热保护剂的研究
- 吕茂杰;丁旭娜;杨晓红;边程;何召庆;杨保收;梁武
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：应用冻干制品加速热稳定试验,测试几组冻干保护剂组方对猪乙型脑炎(SA14-14-2株)活疫苗效价的耐热保护效果.结果表明组方Ⅰ和组方Ⅴ的耐热保护效果理想,主要表现为2-8℃、37℃温度下保存病毒损失量低,耐热效果显著高于常规疫苗.
54.依那西普对乙型脑炎的治疗作用研究
- 叶静;蒋蓉;黄少梅;董倩;阮歆迪;陈焕春;曹胜波
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究拟利用小鼠模型，评价依那西普对猪乙型脑炎(JEV)感染的治疗效果，以期为JEV的治疗开辟新途径。指出，依那西普治疗能缓解JEV感染小鼠的临床症状，并降低致死率；能抑制JEV感染小鼠脑部炎症因子的表达；能减轻乙脑病毒感染小鼠中枢神经系统的病理损伤；能降低小鼠脑部乙脑病毒载量。
55.湖南省生猪腹泻病疫情流行病学调查
- 何世成;刘道新;王昌建;刘广红;邱立新;张朝阳;范仲鑫;黄建龙;唐小明;朱春霞
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：对湖南省7市10个生猪养殖大县,2011年冬至2012年春发生猪腹泻病疫情的50个规模猪场的疫病流行情况进行调查,结果显示,该病流行高峰期在2012年1-2月,临床上主要表现为水样腹泻,病程约1～7天,疫情期2周左右,各年龄段生猪均可感染发病,以哺乳仔猪的死亡为主,7日龄以下仔猪窝发病率窝死亡率均可高达100％。实验室检测结果显示,该病主要病原为猪流行性腹泻病毒。临床上无确切有效的防治措施。
56.病毒宏基因组学分析腹泻仔猪肠道病毒群落及变异PEDV的分离和鉴定
- 单同领;童光志
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究应用病毒宏基因组学技术结合高通量测序和生物信息学分析我国腹泻仔猪粪便内的病毒群落，初步鉴定出此次腹泻的主要病因为变异PEDV;分离和鉴定1株变异PEDV(JS-2013),其可作为研发疫苗的候选毒株。
57.浙江及周边地区猪流行性腹泻病毒的遗传进化分析
- 田朋飞;屈玲玲;张国瑞;邢刚;金玉兰;周继勇
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：为了解猪流行性腹泻病毒在浙江及周边地区的流行情况及遗传变化规律,本研究采集2012年2月-2013年2月浙江、江西等26个猪场的169份病料进行分析,PEDV的感染率为56.2％(96/169).对20株野毒株的5'-S-ORF3-E-M-N-3'的基因序列进行进化分析,表明,他们DNA同源性为98.3-100％,与其他毒株的DNA同源性为94.6-98.4％,同时发现CH/JXZS-3L/2012、CH/JXZS-1223L/2012在N基因后12nt处有一个17nt的插入,这些基因与最近流行于中国的PEDV相似,不同于2010年之前的病毒株及疫苗毒。
58.新生仔猪急性腹泻疫情中5种病毒感染的分子检测
- 常洪涛;杜季梅;陈陆;赵军;王新卫;姚惠霞;杨霞;郭占达;郭龙飞;王川庆
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究对河南省98家猪场送检的具有腹泻表现的仔猪病料较为全面系统地进行了PEDV、TGEV、GARV、CSFV和PRV的分子检测，结果显示，PEDV阳性检出率高达71.27%，是引起此次疫情的最主要病因。本研究结果提示猪场在进行返饲时应充分考虑病料中CSFV和PRV等强毒所带来的严重污染问题。同时98个发病送检猪场中猪腹泻性疫病病原呈阳性，豫东、豫南和豫北地区等养猪较为密集地区的阳性场所占比例均匀，表明新生仔猪急性腹泻疫情在河南全省已广泛发生和流行。在季节分布上，以秋、冬季节阳性猪场占比例较多，春、夏季节已呈逐步上升趋势，尤其是夏季也有15.31%的猪场发病，从而提示其季节性已不明显。因此应把新生仔猪急性腹泻疫情纳入规模化猪场和中小型猪场全年高度警惕和重点防控的重大疫病。
59.携带猪流行性腹泻病毒S基因的减毒沙门氏菌的构建与鉴定
- 梁恩涛;廖晓丹;文心田;黄小波;曹三杰;阳酉萍;段素芬;张丹;张小会
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究以RT-PCR扩增猪流行性腹泻病毒SC-L株的S基因抗原区域(简称S1,1-2367bp,编码S蛋白N末端1-789氨基酸位点),插入pMD19-T载体,酶切并回收目的片段插入双启动子真核表达载体pVAXD中,构建了pVAXD-S1表达载体。经免疫荧光法鉴定目的基因可在COS7细胞中正常表达后,将pVAXD-S1电转入鼠伤寒减毒沙门氏菌SL7207,构建了携带S基因的重组减毒沙门氏菌SL7207(pVAXD-S1),对该重组菌株的生长特性、携带质粒的稳定性、口服小鼠的安全性及目的基因在体内表达等进行鉴定。结果表明SL7207(pVAXD-S1)在含卡那霉素(100μg/mL)的培养环境中稳定,在1×109CFU/只口服免疫小鼠具有良好的安全性,携带的S1基因能在小鼠组织(回肠末端)内正常转录及表达。本研究为后续开展减毒沙门氏菌疫苗菌株SL7207(pVAXD-S1)的免疫评价及应用奠定了基础。
60.基于纳米材料的电化学免疫传感器检测H5N1亚型禽流感病毒的研究
- 黄娇玲;谢芝勋;罗思思;谢志勤;谢丽基;刘加波;庞耀珊;范晴
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本文将硫脲(Thiourea,Thi)自组装到金电极表面，通过电化学还原HAuCl4将金纳米粒子沉积到金电极的表面，得到一层均匀、稳定的金纳米粒子(AuNPs)层，用于固定H5N1亚型禽流感病毒单克隆抗体(MAb-H5N1)，利用抗体和不同浓度的抗原反应，改变电极界面的电子传导能力引起响应电流值的变化，从而达到对抗原进行定量分析检测的目的。对于病发初期，病毒含量较低的样品，本文首次提出采用氧化石墨烯(GO)负载H5N1多克隆抗体(PAb-H5N1)及牛血清白蛋白(BSA)作为该传感器的信号放大材料，提高传感器的灵敏度。
61.H9亚型禽流感病毒和鸡传染性支气管炎病毒双重RT-PCR检测方法的建立和优化
- 魏延迪;裴星瑶;俞晨芳;蒲娟;刘金华
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究建立的RT-PCR检测方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等优点,并可同时实现对H9亚型禽流感和鸡传染性支气管炎的快速诊断,其检测灵敏度达102EID50/100μL.通过对发病鸡采集的临床样品的检测,证实本检测方法可靠、稳定,适用于H9亚型禽流感和鸡传染性支气管炎的诊断。
62.猪流行性腹泻的综合防制
- 郭锐;田永祥;周丹娜;段正赢;杨克礼
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的、以水样腹泻、呕吐、脱水和食欲下降为主要特征的、一种急性、高度接触性肠道传染病,近年来给养猪业带来了巨大的经济损失.笔者主要对从病原学、流行病学、致病机理、诊断方法以及防制措施进行了综述,为该病的综合防控提供参考.
63.宁夏部分养猪小区病毒病流行现状调查及分析
- 李知新;王进香;周海宁;闫小芹;田进梅;赵燕
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：针对宁夏2007年以来部分地区调入生猪频繁发生猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)等疫情,对猪存栏较为集中的地区进行PRRSV、CSFV等病原学调查,并对其发展趋势进行分析。采用ELISA方法对297份血清样本进行抗体检测;采用RT-PCR方法对297份血清和送检的78份病料组织进行病原学检测。血清学调查结果显示,PRRSV隐性感染阳性样品111份,阳性率为37.4％。其中母猪带毒率较高,仔猪次之,育成猪最低,均不表现临床发病;病原学调查结果表明,对血清学检测PRRSV阳性样本111份进行RT-PCR检测,阳性率为100％;病料组织中单重感染PRRSV阳性样品18份,阳性率为23.0％,属于美洲型,与CH-1a遗传关系较近,归属同一基因亚型;猪群中PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV和PPV不同混合感染比较严重,以二重感染为主,三重感染次之。调查发现,PRRSV隐性感染十分普遍,严重危害着宁夏的养猪业;同时由于其它病原微生物的混合感染日趋复杂化,使得对猪病防控的难度也越来越大。
64.我国猪群中出现三个TTSuVs新亚群
- 刘建波;张龙;危艳武;黄立平;吴洪丽;刘长明
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究对从猪圆环病毒2型(PCV2)阳性病料中获得的TTSuVs基因组进行测序后，与GenBank中的基因序列进行了遗传变异分析及变异性研究。分别获得了8株TTSuV1基因序列和8株TTSuV2基因序列，并将其与GenBank中的序列进行了遗传变异分析，分析发现可分别将TTSuV1(TTSuV1a、TTSuV1b、TTSuV1c和TTSuV1d)和TTSuV2(TTSuV2a、TTSuV2b、TTSuV2c和TTSuV2d)划分为四个亚群。其中TTSuV1d、TTSuV2c和TTSuV2d首次出现于我国猪群中。对变异分析发现，变异率高的地发主要存在于ORF1区域。本研究为进一步研究TTSuVs的遗传变异分析提供了重要信息。
65.H3亚型流感重组腺病毒候选疫苗构建及鉴定
- 温树波;谭磊;赵权;任静强;靖杰;孙文超;阎富龙;张丹;鲁会军;金宁一
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究设计构建了季节性流感H3亚型重组腺病毒疫苗。通过RT-PCR、间接免疫荧光、Western Blot等方法检测其抗原的转录和反应原性，以期为后续动物免疫实验奠定基础。
66.Quil A为佐剂的H1、H3亚型流感病毒多表位DNA疫苗免疫评价
- 靖杰;鲁会军;刘昊;金宁一
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究对构建的H1、H3亚型流感多表位核酸候选疫苗及H1、H3亚型流感二价核酸疫苗，以Quil A为免疫佐剂进行了小鼠实验免疫，对免疫后小鼠的体液免疫和细胞免疫水平进行检测，为研制安全性好、免疫原性佳、成本低的通用流感疫苗的提供思路和参考。指出，本研究构建的H1、H3亚型流感病毒多表位核酸疫苗具有可以保护多个流感亚型的功能，从本实验选用表位相关亚型攻毒的保护效果分析，该疫苗可以刺激小鼠产生针对甲型H1N1流感病毒的特异性体液免疫和细胞免疫应答。
67.沙门氏菌鞭毛佐剂禽流感灭活疫苗可诱导良好免疫保护
- 黄秀芬;章振华;孙惠铃;孙盈;陈小铃;李永清
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究利用物理纯化的沙门氏菌鞭毛作为黏膜疫苗佐剂，包裹经灭活的禽流感病毒(H9N2亚型)抗原，以此制备禽流感(H9N2亚型)灭活疫苗，然后通过免疫保护试验测定了此疫苗的保护效果。攻毒保护试验结果表明，经肌肉注射免疫的鞭毛佐剂疫苗产生的免疫保护率达到60%，接近油佐剂疫苗的70%，而经鼻腔免疫时，鞭毛佐剂疫苗仅能提供10%免疫保护。这些结果进一步提示鞭毛蛋白对禽流感疫苗的免疫增强作用很可能是通过提高粘膜免疫和细胞免疫的功能来实现的，将进一步研究证实。
68.细菌内毒素对鸭禽流感疫苗免疫效果的影响
- 阮涌;嵇辛勤;文明;刘济丹;傅心亮;刘廷江;李世静
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：为研究低剂量细菌内毒素对鸭禽流感疫苗免疫效果的影响,选取5日龄健康三穗麻鸭140只,随机分为4组,即空白对照组、疫苗对照组、黄芪多糖组和内毒素组,参考常规免疫程序在注射禽流感疫苗同时分别注射黄芪多糖或细菌内毒素,空白对照组不作任何注射。应用间接血凝试验、ELISA试验和MTT法检测细菌内毒素对禽流感疫苗的影响。结果表明:①免疫后52日龄禽流感抗体效价达到高峰,其中内毒素组与疫苗对照组差异极显著(P＜0.01).②免疫后38日龄T淋巴细胞转化效率(OD490nm值)达到高峰,其中内毒素组与疫苗对照组差异极显著(P＜0.01).③免疫后第52日龄鸭INF-γ水平(OD450nm值)达到高峰,其中内毒素组与疫苗对照组差异显著(P＜0.05).因此,细菌内毒素能够有效提高鸭禽流感疫苗的免疫效果。
69.Gottfried和SB-1A株猪轮状病毒截短VP8*蛋白的免疫原性分析
- 闻晓波;冉旭华;魏晓曼;崔玉东
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：目的：原核表达猪轮状病毒(porcine rotavirus,PRV)Gottfried株和SB-1A株截短的VP8*基因,纯化重组蛋白并检测其免疫原性。方法：经PCR从含有全长VP4基因片段的重组质粒pCR4-Gottfried VP4和pCR4-SB-1A VP4中分别扩增截短的VP8*基因(△VP8*,64～223位氨基酸),分别插入原核表达载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET28a-Gottfried-△VP8*和pET28a-SB-1A-△VP8*,分别转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物。应用ProBondTM Resin纯化两种重组蛋白,重组蛋白与Al(OH)3佐剂混合后,经肌肉注射免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测免疫小鼠的血清抗体水平。结果：两种重组表达质粒经双酶切和测序证实构建正确;表达的两种目的蛋白相对分子质量约25000,均以包涵体和可溶性两种形式存在,均可与鼠源抗His tag单克隆抗体特异性结合;纯化的两种重组蛋白纯度均在95％以上,免疫BALB/c小鼠可产生较高的血清抗体水平。结论：成功在大肠埃希菌中表达了PRV Gottfried株和SB-1A株截短的VP8*基因,纯化的两种蛋白免疫原性较好,为进一步研制安全、高效的PRV亚单位疫苗奠定了基础。
70.H9亚型禽流感病毒WD株灭活疫苗对H9亚型禽流感流行毒株的保护效果观察
- 章振华;姜北宇;李林;景小冬;沈佳;郑小兰;张建伟;史爱华;黄凤军
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：将H9亚型禽流感灭活疫苗(WD株)免疫21日龄SPF鸡,免疫后3周采血测定AI(H9)HI抗体,并用WD株及2004～2012年分离的8株H9亚型禽流感病毒对免疫鸡进行攻毒试验。结果显示试验鸡免疫三联灭活苗后21d,WD株作为HI抗原测定其H9HI抗体效价可达8.4 log2,可抵抗9个不同H9亚型禽流感流行毒株的攻击,总攻毒保护率达91.1％(41/45).以WD株制备的灭活苗具有良好的免疫原性,能抵抗不同年代不同地区分离的H9亚型禽流感流行毒株的攻击。
71.关于尉氏县近三年来家禽新城疫流行病学的调查报告
- 段留德
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：文章对尉氏县养禽业新城疫流行情况进行了调查，指出该地区典型新城疫在高抗体水皮下时有发生，新型有针对性的疫苗急待投放市场。由于新城疫Ⅰ系存在散毒现象，Ⅰ系疫苗应紧急叫停。同时，该地区鸭新城疫首度流行，危害严重，对鸭新城疫的防控应提上日程。指出，生物安全控制措施普遍重视不够，应提高认识，构建完善的防控体系。
72.鹅源新城疫病毒NP、M基因shRNA的筛选
- 王泽;杨闽楠;李想;丁壮
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究利用自我失活型慢病毒shRNA表达载体,针对分离并鉴定的源新城疫病毒NA-1株NP、M基因设计shRNA序列,在细胞水平上实现shRNA对NP、M基因的抑制,从而筛选出对基因沉默效果较好的shRNA干扰靶位,为进一步研究基因功能奠定基础。
73.NDPK B稳定表达细胞系的建立及其对NA-1株NDV复制的影响
- 郭育培;丁壮
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：为了研究NDPK B蛋白表达对NA-1株NDV复制与增殖的影响,本实验将真核表达重组质粒pEGFP-NDPKB转染Vero细胞,经G418压力筛选阳性细胞单克隆,并通过RT-PCR、Western blot和倒置荧光显微镜观察鉴定NDPKB mRNA和蛋白质的表达;在细胞系基础上,通过HA-HI、TCID50及Real-time RT-PCR检测NDPK B蛋白对新城疫病毒复制和增殖的影响。结果表明,成功地构建了NDPK B蛋白高表达量的Vero/NDPK B细胞系,在此基础上,通过检测表明NDPK B能够抑制NA-1株NDV在Vero细胞中的复制与增殖。
74.表达鹅源新城疫病毒NP、M基因重组慢病毒假病毒包装及稳定表达shRNA Vero细胞系的建立
- 王泽;杨闽楠;李想;丁壮
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本实验以筛选的靶向鹅源新城疫病毒NA-1株NP、M基因的shRNA序列为目的基因,构建重组慢病毒干扰质粒(pLKD-shNP710和pLKD-shM646),并将包装好的浓缩慢病毒液侵染Vero细胞,实现细胞内的shRNA序列高效且可持续的基因转导。研究其对病毒基因表达的抑制作用,及对病毒复制增殖的影响,从而为转基因研究奠定一定基础。
75.基于LNA探针的两重实时荧光RT-PCR检测方法甄别新城疫中强毒株与弱毒株
- 孙洁;林庆燕;刘建利;吕建强;曹琛福;阮周曦;曾少灵;张彩虹;秦智锋;卢体康;花群义
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：新城疫强毒株是各国重点防控的重大动物疫病,对其的快速诊断和检测是防控新城疫暴发的前提和基础。为了建立基于新型LNA探针的实时荧光RT-PCR检测方法鉴别诊断新城疫中强毒株和弱毒株,设计了两条针对新城疫F基因裂解位点的新型LNA探针,通过对11株新城疫病毒株进行检测,建立了两重实时荧光RT-PCR检测方法来同时鉴别诊断新城疫的中强毒株和弱毒株方法。并与副粘病毒Ⅰ型(APMV-1)和新城疫中强毒株(vNDV)taqman实时荧光RT-PCR检测方法进行了灵敏度和特异性比较。结果显示所建立的双重LNA探针RT-PCR实时荧光方法与美国农业部推荐的Taqman实时荧光RT-PCR检测方法之间的灵敏度相差10倍,扩增效率也有一定的差距,但特异性较好。所建立的LNA探针两重实时荧光RT-PCR方法中,中强毒株探针的扩增扩增效率明显高于弱毒株探针方法的扩增效率。
76.猪嵴病毒的分子特征及流行病学研究
- 刘建;汤德元;李春燕;曾智勇;罗险峰;甘振磊;王凤;郝飞;王洪光
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：猪嵴病毒属于小核糖核酸病毒科Kobu病毒属成员,为单股正链RNA病毒,该病毒于2007年在匈牙利首次发现。此后,在一些亚洲和欧洲的国家不断有本病感染的报道。本文首先对Kobu病毒的由来、分类、基因组结构特征、猪嵴病毒的发现、流行病学及其病原学检测等方面进行了阐述;然后利用生物信息学软件比较分析了GenBank中已公布的9株猪嵴病毒全基因组和各基因的核苷酸及推导的氨基酸的同源性,结果表明,无论是在全基因组、各基因还是氨基酸水平,分离株swine/K-30-HUN/2008/HUN和swine/S-1-HUN/2007/Hungary之间的同源性均最高。在病毒基因结构的5'-UTR区域,分离株CH/HZ/2011和XX分别存在一个连续18个核苷酸和64个核苷酸缺失;在2B蛋白编码区域,CH/HNXX-4/2012和CH/HZ/2011分离株均存在一致的连续83个核苷酸缺失。在氨基酸水平,9株PKV分离株3D蛋白的同源性为最高,而VP1蛋白的同源性最低。系统发育分析显示,9株病毒的3D和VP1基因进化方向一致。
77.猪传染性胃肠炎在猪群中流行规律的调查
- 卫秀余;沈强;金爱华;余红梅;方桂明;李守刚
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：在2010年1月-2011年12月间通过对5个规模化猪场连续的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)抗体和抗原的检测，证实了在TGE非流行季节不存在TGEV的隐性感染。得出以下结论：rn (1)通过对哺乳仔猪腹泻样品中TGEV抗原的连续检测，证实在TGE非流行季节，母猪舍的环境中没有TGEV的存在。rn (2)通过2个年度对7-10月份连续4个月的育肥猪血清中TGEV抗体的检测，证实在TGE非流行季，保育舍和育肥舍的环境中没有TGEV的存在。rn (3)由于TGE和PED的临床症状非常相似，临床上很难区分;因此建立了能够区分TGEV和PEDV的多重RT-PCR方法对腹泻粪便进行检测，其得出的结果是可信的。rn (4)由于TGEV和PRCV的抗体有交叉反应，因此选择了能够区分这二种抗体的鉴别ELlSA方法进行TGE母源抗体和感染抗体的检测，其得出的结果是可信的。rn (5)终上所述，在TGE流行过后，TGEV不会在感染猪群中持续存在;TGE的每年季节性流行是由于外界病原的传入所致。有关TGEV感染后在猪体内的带毒持续时间有待进一步研究。
78.鸡传染性法氏囊病超强毒株的分子鉴定
- 詹丽娥;陆冰洋;刘华栋;王彩先;唐娟;詹海杰;李芹;王建忠;丁壮
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：通过RT-PCR方法从山西省不同地区养鸡场病、死鸡法氏囊组织中扩增得到IBDV SX/12 VP2基因全长,将其克隆至pMD18-T载体,测序分析结果表明IBDV SX/12 VP2全长为1356bp,推导其编码452个氨基酸,核苷酸与氨基酸同源性分析显示,均与超强参考毒株同源性最高,分别为99.2％和99.6％,遗传进化树分析结果表明IBDV SX/12与超强参考毒株位于同一进化分支,IBDV SX/12高变区关键氨基酸具有以下特征:222S、249Q、254G、256 I、279D、284A、294I、299S,SWSASGS七肽区不变,超强参考毒株高变区关键氨基酸为:222A、249Q、254G、256I、279D、284A、294I、299S,除222S外其他关键位点氨基酸均符合超强毒特征,因此,从分子水平推断IBDV SX/12属于超强毒株。
79.猪传染性胃肠炎病毒S基因B、C抗原位点的原核表达与免疫活性
- 汪洋阳;黄小波;曹三杰;文心田;张鑫淼;段素芬;阳酉萍;张丹;张小会
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究开展了猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因的B、C抗原位点区域的原核表达与免疫活性研究。根据S基因的B、C抗原位点区序列设计一对引物,从S基因克隆质粒19T-S1扩增了含B、C抗原位点的基因片段(以SBC表示).将SBC插入pMD19-T载体构建了19T-SBC,再用EcoRⅠ/HindⅢ酶切SBC亚克隆至pET-32a(+)构建了重组质粒pET-32a-SBC.将pET-32a-SBC转入BL21进行诱导表达,并确定其最佳表达条件。亲和层析纯化重组SBC蛋白,分别免疫兔和猪制备阳性血清,并测定了抗体效价和抗体活性。结果表明的SBC基因片段大小为549bp,pET-32a-SBC在大肠杆菌中的最佳表达条件为IPTG诱导浓度为0.6mmol/L、最佳诱导时间为4h,最佳诱导温度为32℃,重组SBC蛋白约为20.1KDa,主要以包涵体形式存在于细胞质中。琼脂扩散试验测定兔抗SBC蛋白血清和猪抗SBC蛋白分别为1:16和1:8,间接ELISA测定效价分别为1:1280和1:640.Western blot结果证实重组SBC蛋白与兔抗SBC蛋白血清、猪抗SBC蛋白血清以及猪抗TGEV阳性血清均发生特异性反应。本研究建立了SBC的原核表达系统并证实重组SBC蛋白具有良好的免疫活性,为开展SBC的应用研究奠定了基础。
80.猪细环病毒1型实时定量PCR检测方法的建立
- 王俊;单晶晶;孟凡伟;周双海;黎阳
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：为定量检测猪细环病毒1型(TTSuV1),建立了检测TTSuV1核酸的SYBR GreenⅠ实时定量PCR方法。构建含有TTSuV1基因249 bp片段的重组质粒,用该重组质粒进行SYBR GreenⅠreal-time PCR,来建立定量检测TTSuV1核酸的标准曲线与直线回归方程。结果显示,该方法的线性关系良好,相关系数达0.999以上;最低可检测到至少6.3×101拷贝/μL的核酸模板;重复性试验的变异系数小于2％;对TTSuV2、猪圆环病毒、伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒等常见猪源病毒均检测不到荧光信号;对临床样品的检出率高于常规PCR方法。结果表明,建立的SYBR GreenⅠreal-time PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可用于TTSuV1的检测与定量分析。
81.靶向VP1和VP2双拷贝shRNA重组表达质粒抑制传染性法氏囊病病毒复制的研究
- 欧阳伟;王永山;马金荣;张海彬
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：为抑制传染性法氏囊病病毒(IBDV)的复制,构建靶向IBDV VP1和VP2基因的鸡双向U6启动子(chU6)双拷贝shRNA重组表达质粒pchU6-shRNA12,转染鸡胚成纤维细胞(CEF),接种IBDV,72h后,未出现细胞病变效应(CPE),病毒滴度小于101TCID50/0.1mL;而两个对照组均出现明显的CPE,病毒滴度均达到108.75TCID50/0.1mL.将pchU6-shRNA12与IBDV混合,接种于10日龄SPF鸡胚尿囊腔,96h后,鸡胚发育良好,病毒滴度小于101ELD50/0.1mL,荧光定量RT-PCR检测VP1和VP2基因,比单纯接种IBDV组分别降低了92％和95％;而两个对照组鸡胚均死亡,病毒滴度均达到107.00ELD50/0.1mL.本研究结果表明,chU6启动子在双拷贝shRNA重组表达质粒pchU6-shRNA12中能高效驱动双拷贝shRNA的转录,生成的siRNA在CEF(in vitro)和鸡胚体内(in vivo)均能有效抑制IBDV的复制。
82.猪肾细胞系IBRS-2感染猪细小病毒的检测
- 李斌;梁家幸;苏乾莲;赵武;秦毅斌;何颖;卢冰霞;段群棚;李莹莹;姜佳佳;梁保忠
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本研究应用聚合酶链式反应技术对未接种猪细小病毒但出现类似猪细小病毒感染病变的日常培养猪肾细胞系IBRS-2进行检测,结果发现IBRS-2细胞感染了猪细小病毒。检测结果表明猪肾细胞系IBRS-2感染猪细小病毒较为常见,提示在IBRS-2细胞培养过程中要注意预防猪细小病毒的感染。
83.猪巨细胞病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用
- 拜廷阳;赵德明;吴志明;闫若潜;赵明军;刘梅芬
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：目的：建立一种特异、灵敏、快速检测猪巨细胞病毒的TaqMan荧光定量PCR方法。方法：根据GenBank已登录的猪巨细胞病毒(Porcine Cytomegalovirus,PCMV)DNA序列设计合成特异性引物对和TaqMan荧光探针,经优化反应条件,建立了猪巨细胞病毒的TaqMan荧光定量PCR检测方法(fluorescent quantitative real-time PCR,FQ-PCR),进行了FQ-PCR检测方法的敏感性、特异性和重复性试验;对疑似PCMV感染临床样品进行了应用检测,并与常规PCR方法进行了比对;对FQ-PCR检测结果为PCMV阳性猪的不同内脏器官进行病毒含量比较检测。结果：成功建立了PCMV的FQ-PCR方法,标准曲线的循环阈值(Ct值)与模板浓度有良好的线性关系,相关系数为0.998;检测灵敏度可达1拷贝/μL,是常规PCR的100倍;特异性高,对pGEM-T/PCMV重组质粒扩增呈现阳性反应曲线,而对6个对照病原的扩增曲线均呈现阴性反应;对不同浓度的pGEM-T/PCMV重组质粒分别重复扩增6次,重复结果良好;对15份临床疑似PCMV感染的组织病料进行应用检测表明,其中有9份样品为阳性,与常规PCR方法检测的阳性符合率为100％。猪的内脏器管中PCMV含量最高为扁桃体,最低的为小肠。结论：成功建立了PCMV FQ-PCR方法,可用于临床上PCMV感染猪的确诊和隐性感染猪的早期检测,对PCMV的快速诊断、综合防控及净化等具有重要意义。
84.传染性法氏囊病灭活疫苗对雏鸡的主动免疫研究—(I)SPF雏鸡的免疫期测定
- 王泽霖;赵军;王川庆;郑鹿平;赵静;郦晓琼;刘亚华;胡锁香
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：用鸡胚传代细胞培养传染性法氏囊病毒液制备灭活疫苗免疫1、7、14、21日龄SPF鸡,结果显示免疫后12～20天出现中和抗体,且抗体持续升高。1、7日龄免疫组45天攻毒10/10保护,对照组0/10保护;14、21日龄免疫组,60天后攻毒免疫组保护10/10;对照组0/10保护。因此二联苗对2周龄内雏鸡的免疫期至少45天,对2周龄以上雏鸡的免疫期至少60天。因此可用灭活疫替代IBD活毒疫苗免疫雏鸡,从而减少环境中的IBD野毒和疫苗毒污染,减少应激和免疫抑制,有望可控制和消灭鸡传染性法氏囊病。
85.重组鸡α-干扰素对鸡IBDV BC6/85株的实验室抗感染效果研究
- 马凤龙;石乔;张庆霞;王卓
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：重组鸡α-干扰素是一种抗病毒蛋白,具有广谱的抗病毒活性,对多种病毒有抑制作用。为了验证重组鸡α-干扰素对鸡传染性法氏囊病病毒的抗感染效果,在本研究中,使用法氏囊标准强毒BC6/85对适龄易感SPF鸡进行人工感染与抗感染试验,分别在攻毒的同时和临床症状出现时使用10万单位(高)、1万单位(中)和0.1万单位(低)三个剂量的重组鸡α-干扰素进行抗感染试验,同时使用法氏囊卵黄抗体做为对照药品,进行对比试验。结果表明,与攻毒对照组比较,重组鸡α-干扰素能够显著降低试验鸡的发病数量,减轻其临床发病症状和法氏囊病变,并且在生产性能上具有较好的增重作用。
86.母猪繁殖障碍的综合病因与防治(综述)
- 余广海
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：造成母猪繁殖障碍的原因包括先天因素、营养因素、品种、环境因素等多方面。重点介绍了传染性繁殖障碍疾病与导致繁殖障碍的霉菌毒素，同时列举了细菌性疾病、病毒性疾病等常见繁殖障碍病的有效防治措施。
87.氯仿抽提法清除猪细小病毒种子批中污染的支原体
- 郭龙飞;燕贺;赵军;杨霞;陈陆;王新卫;常洪涛;刘红英;姚惠霞;王川庆
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本实验利用猪细小病毒和支原体对氯仿敏感性不同，从而进行氯仿抽提达到去除支原体的目的。该方法的原理是脂溶剂氯仿对于具有脂质囊膜的病毒具有破坏和灭活作用，故只能清除非囊膜病毒中的支原体。本实验摸索了氯仿与猪细小病毒液的作用时间，表明静置作用15min可有效清除猪细小病毒液中污染的支原体，并对处理的病毒传至第五代，仍旧没有检测到支原体，表明支原体清除效果很好。
88.口服环丙沙星引起猪肠道大肠杆菌耐药性变化
- 黄康;王红宁;曾博;徐昌文;程菡;雷昌伟;邓春朋;李然
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：针对目前国内规模化猪场普遍使用抗生素的现实，本研究旨在探明口服环丙沙星是否以及怎样引起猪肠道大肠杆菌耐药性的变化。结果表明，未投药时，猪肠道已经可能存在少量耐药的大肠杆菌，投药后耐药的大肠杆菌成为优势菌大量存在，此时敏感大肠杆菌由于抗生素压力处于一个很低的浓度水平；而停药后没有抗生素压力，敏感大肠杆菌成为优势菌而大量存在。根据该结果，建议规模化猪场育肥猪喂服环丙沙星应控制在连续用药3天以内，超过3天就能引起高水平耐药的产生。另外猪场在投药后一般需经过一个月时间才能再次使用同种药物进行治疗，否则很可能继续加重该种药物耐药性，降低治疗效果。
89.重组鸡α-干扰素抗IBDV超强毒LX株感染试验研究
- 马凤龙;石乔;卢慧;王卓
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：为了使重组鸡α-干扰素在将来更全面的应用于临床，在本次试验中选用法氏囊超强毒IBDV LX株进行人工感染及抗干扰试验，同时使用法氏囊精致卵黄抗体进行对比，以验证其抗感染效果。结果表明，与攻毒对照组相比较，重组鸡α-干扰素和法氏囊精致卵黄抗体均能显著降低试验鸡只的发病数量，减轻其临床发病症状，并且在生产性能上具有较好的增重作用。
90.重组鸡α干扰素/白细胞介素-2复合蛋白体内抗传染性法氏囊病病毒作用研究
- 吴志明;闫若潜;程俊贞;赵明军;刘梅芬;杨晓璐;张书阳
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：为了研究基因工程重组鸡?干扰素/白细胞介素-2复合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组复合蛋白)在SPF鸡体内的抗病毒作用,本研究将120只21日龄SPF鸡随机平均分为4组,于21日龄时进行攻毒和重组复合蛋白注射,以进行重组复合蛋白在鸡体内抗传染性法氏囊病病毒(IBDV)作用实验。分别通过临床观察实验和检测4组鸡在攻毒前1d(0 DPC)和攻毒后(DPC)不同天泄殖腔的排毒率、外周血中持续带毒时间、IBDV在不同组织器官的动态分布、血清中IBDV抗体水平、外周血中鸡IFN-α、IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-6(ChIFN-α,ChIL-2,ChIFN-γ,ChIL-4和ChIL-6)的表达水平、外周血T淋巴细胞(PBLC)和脾脏淋巴细胞增殖活性等指标以揭示重组复合蛋白的抗病毒和免疫增强作用机理。结果表明:与IBDV攻毒对照组(第2组)相比,重组复合蛋白与IBDV同时应用组(第4组)鸡的发病率、死亡率和典型症状维持时间显著降低,且第4组鸡的排毒率、外周血持续带毒时间和不同组织器管带毒时间均显著低于第2组。攻毒后7d～42d(7～42 DPC),第4组鸡的IBDV ELISA抗体水平极显著低于第2组(P＜0.01).3～35 DPC,第4组鸡血清中ChIFN-α、ChIFN-γ和ChIL-2、ChIL-6的表达水平极显著高于其他3组对照组(p＜0.01),ChIL-4表达水平于3～21 DPC期间极显著高于其他3组对照鸡(p＜0.01).第4组鸡的PBLC增殖活性于7～21 DPC期间、脾淋巴细胞增殖活性于7～14 DPC期间均极显著高于第2组(p＜0.01).结果表明:重组复合蛋白在机体内对IBDV具有显著抑制作用;重组复合蛋白可通过上调机体细胞因子的表达水平、增强鸡体PBLC和脾淋巴细胞增殖活性等方式增强机体的细胞免疫能力,从而发挥抗病毒作用和免疫增强作用。
91.4株广西鸭源坦布苏病毒分离及初步鉴定
- 曾婷婷;谢芝勋;谢丽基;刘加波;范晴;庞耀珊;罗思思;邓显文;谢志勤
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：2012年，广西某种鸭场反映有种鸭发生急剧的产蛋下降，拉绿色稀粪，并有部分病鸭瘫痪在地。对该病进行了病原分离，结果从4羽病鸭身上分离到4个毒株，分别命名为GX201301、GX201302、GX201303和GX201304。经RT-PCR检测，测序后blast证实毒株为鸭坦布苏病毒。本实验测定了这4个毒株的E基因部分序列，经比对绘制系统进化树发现，这4个毒株处于一个独立的小分支，说明这4个广西分离株E基因与其他坦布苏病毒毒株的存在一定的差异。但是这些差异有没有引起毒力改变，或者其他生物学活性的变化，有待进一步研究。
92.鸭坦布苏病毒山东株的分离鉴定及特性研究
- 葛平萍;刁有祥;唐熠;刘鑫;高绪慧;于春梅;曲俊姿
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：采用鸭胚尿囊腔接种、盲传的方法从山东某地区以瘫痪为主要特征的雏鸭脑组织中分离到一株病毒,并对分离病毒的生物学特性和理化特性进行了研究。结果表明该病毒与GenBank上已发表的坦布苏病毒核苷酸同源性均高于98％,最高可达99.7％;病毒的ELD50为10-3.17/0.2 mL,接种9日龄鸭胚,68 h左右鸭胚死亡,胚体出血,肝脏肿大出血,尿囊膜增厚;病毒对胰蛋白酶、酸、氯仿和热敏感,0.5％的胰蛋白酶、pH＜5和4.8％的氯仿条件下可将其灭活,56℃水浴20 min或60℃水浴15 min可将其灭活,37℃处理24 h毒力由10-3.17/0.2 mL下降至10-1.8/0.2 mL;Mg2+不能提高病毒在50℃60min的稳定性;病毒未经酸碱处理不具有凝集鸡、鸭、鸽等红细胞的特性。接种7日龄雏鸭,48 h后陆续发病,表现为病毒性脑炎;剖检变化为雏鸭脑水肿,脑部毛细血管充血、肝脏出血、腺胃出血、肺出血水肿,临床表现与自然发病相同。因此确定该病毒分离株为坦布苏病毒,本研究为坦布苏病毒的防制提供理论基础。
93.一株鸭坦布苏病毒的分离鉴定及遗传进化分析
- 晁行周;刘志刚;邹忠;金梅林
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：从表现采食量,产蛋率迅速下降的蛋鸭中分离到１株病毒,暂命名为XN株,经RT－PCR检测初步认定所分离到的病毒为坦布苏病毒。序列分析表明,XN株与我国鸭坦布苏病毒的其他毒株核苷酸序列同源性在87％以上,系统进化分析表明,XN株病毒与坦布苏病毒共处同一分支,可以确定XN株属于新型鸭坦布苏病毒(Duck Tembusuvirus).
94.鸭坦布苏病毒AH-F10株全基因组的分子克隆与序列分析
- 王蓓;王楠楠;毕庄莉;王晓旭;李传峰;朱良强;刘光清;王桂军
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：为了解鸭坦布苏病毒安徽分离株AH-F10的分子特征及构建该病毒的感染性克隆,本文利用RT-PCR方法对其全基因组序列进行了测定,并将全基因组及其推导的氨基酸序列与参考毒株进行序列比对及系统进化分析。结果表明,AH-F10株的全基因组序列长10,990nt,含有一个大的阅读框架,两侧各有一个非编码区(Untranslation region,UTR).序列比对结果表明,AH-F10株与13株参考毒株的基因编码区具有较高的氨基酸序列同源性。其中,与JS2010株的同源性最高,达98％,提示安徽和江苏省流行的鸭坦布苏病毒可能来自同一祖先。相比之下,鸭坦布苏病毒的5'UTR的序列表现一定程度的变异,AH-F10株与参考株的核苷酸序列同源性在94％-97％之间。本文研究结果为了解鸭坦布苏病毒的遗传变异及构建该病毒的反向遗传学操作系统奠定了基础。
95.禽坦布苏病毒连接酶依赖RT-PCR检测方法的建立及应用
- 傅光华;黄瑜;程龙飞;陈翠腾;万春和;陈红梅;彭春香;施少华;林建生
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：根据连接酶依赖PCR工作原理设计并建立了一种禽坦布苏病毒RT-PCR快速检测方法。结果显示,该方法能特异性的检测不同禽源分离的坦布苏病毒分离株,且与常规RT-PCR检测敏感性相当。运用该方法对动物攻毒实验采集的6份样品及2011-2012年间采集自福建、江西、浙江及广东省4个省份发病鸭场的140份样品进行了检测。动物实验样品均为阳性,临床样品检出率为14.3％(20/140).试验结果表明,本研究所建立的连接酶依赖RT-PCR方法具有快速、敏感、特异优点,可用于禽坦布苏病毒的流行病学调查及病毒的检测。
96.鹅源鸭1型甲肝病毒的分离与鉴定
- 陈红梅;施少华;程龙飞;傅光华;万春和;黄瑜
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：2012年广东省某鹅场发生一种以肝脏出血为主要病变特征的传染病。从病死鹅肝脏中分离到一株病毒(命名为GD-01),该病毒能在96 h内致死10日龄番鸭胚。人工感染8日龄雏番鸭后,濒死前出现角弓反张,病变为肝脏出血。应用鸭1型甲肝病毒特异性引物对GD-01进行RT-PCR检测,可扩增到约199 bp的目的条带。经RT-PCR鉴定和遗传进化分析证实该病毒分离株为鹅源鸭1型甲肝病毒。
97.边缘无浆体MSP1α与MSP1β基因的克隆表达及其对牛红细胞的黏附特性
- 倪宏波;钱爱东;姜海芳
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：本实验旨在构建A.margihale MSP1α和MSP1β蛋白的原核表达质粒，在大肠埃希菌中表达重组MSP1α和MSP1β蛋白，并对其特性进行初步研究，为进一步探索A.margihale对红细胞致病的分子机制及亚单位疫苗的研制奠定基础。本实验阐明了A.margihale中MSP1α和MSP1β重组蛋白可在大肠埃希菌外膜上获得有效表达，并确认了MSP1α和MSP1β蛋白在侵入红血球过程中起到黏附素的作用，表明这2种蛋白在控制牛A.margihale感染方面具有重要作用。以其为研究对象进行A.margihale亚单位疫苗的研制也取得了相应的成果。随着对牛边缘无浆体病认识的不断深入，与其相关的基础研究和应用研究必将得到进一步开展，尤其在该病的防控、致病机理及新型疫苗研制等方面将取得突破性的进展。
98.宁夏牛传染性支原体肺炎的血清学调查
- 王晓亮;李知新;王进香;闫小芹;周海宁;张和平
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：为了解宁夏牛传染性支原体肺炎的感染情况,采用牛支原体间接ELISA试剂盒对发生4起牛支原体肺炎的疫区及其周边地区的牛进行了支原体肺炎抗体血清学调查。结果显示3月龄-1岁之间的牛发病明显,主要表现为肺炎和关节炎;调入牛经过长途运输后进入本地1周内发病,且发病数量急剧上升;调入隐性带菌牛与本地牛同群混合饲养后,3月龄-1岁之间的本地牛发病明显,有接触史的绵羊呈隐性感染。调查结果表明,在引进牛群时应该对全群引进牛进行牛传染性支原体肺炎检测;不要从疫区引进牛;发病后对疫区染疫牛进行扑杀和无害化处理,同时对检测阴性牛紧急隔离后,上述措施可以有效阻止疫情扩散和蔓延。
99.江苏部分地区羊群边界病的流行病学调查
- 李文良;毛立;赵永前;孙银华;王清益;丁永龙;杨建泉;王秋生;缪忠明;江杰元
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：2012年初,从安徽某羊场发生腹泻的山羊病料中检测分离到边界病病毒(Border disease virus,BDV),证明BDV在我国羊群中存在。为了进一步了解BDV在江苏羊群的流行情况,本研究收集江苏部分地区发生腹泻或健康羊群的血清和组织样品,采用RT-PCR方法进行检测,并对阳性样品进行病毒的分离鉴定,测定分离毒株5'-UTR基因片段,与其他已报道的毒株进行同源性比较并绘制进化树。结果表明有27.5％(33/120)样品呈阳性,不同羊场BDV阳性率为0-67％,共分离到4株不同的BDV毒株,它们与其他BDV毒株的同源性为75.7％-90.6％。进化分析表明这些毒株与BDV3型关系最近。采用ELISA试剂盒对血清样品BDV抗体进行检测发现不同羊场抗体阳性率存在较大差异(0-100％),还有抗体阴性持续感染个体的存在。以上结果为进一步探索BDV在我国羊群中的流行情况奠定了基础。
100.番鸭源鸭肝炎病毒CH12株的分离与全基因组序列测定
- 黄显明;张小飞;毛火云;尹秀凤;丁美娟;王伟;靳宇田
- 《中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会》 | 2013年
摘要：2012年9月从浙江某疑似鸭病毒性肝炎的发病番鸭群分离到一株鸭肝炎病毒CH12株，对其进行了病毒分离和全基因序列测定，比较分析该病毒在我国的遗传衍化及流行变异情况。