PRRSV

摘要： 为了解北疆地区规模化猪场猪瘟,蓝耳,伪狂犬gE抗体水平,本研究选取3个规模化种猪场,共采集296份血清,采用ELISA抗体检测方法,对其进行猪瘟,蓝耳,伪狂犬gE血清抗体检测工作.结果显示,育肥猪猪瘟抗体阳性率为64.40％ ～100.00％,蓝耳病抗体阳性率为72.00％ ～98.33％,伪狂犬gE抗体阳性率为23.73％ ～55.00％;仔猪猪瘟抗体阳性率为64.00％ ～87.00％,蓝耳病抗体阳性率为73.91％ ～92.00％,伪狂犬gE抗体阳性率为8.00％ ～43.48％;保育猪猪瘟抗体阳性率51.85％ ～73.00％,蓝耳病抗体阳性率为75.00％ ～93.33％,伪狂犬gE抗体阳性率为13.33％ ～50.00％.同一地区不同猪场相同疾病之间的离散度差异较大,同一猪场不同阶段猪群抗体水平也有不同.其中猪瘟、蓝耳病抗体水平较好,具有较好的免疫效果,伪狂犬gE阳性率较高可能伴随伪狂犬疾病的发生.

摘要： 1猪繁殖与呼吸综合征持续存在的根源分析1.1病毒有较高的变异性猪繁殖与呼吸综合征由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起,该病也被称为蓝耳病,这种病毒常记为PRRSV,属于RNA病毒。PRRSV病毒变异性强,有欧洲型病毒,也有美洲型病毒,两者之间有较大的差异。

摘要： 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS),俗称猪蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种严重危害养猪行业的高度接触性传染病。PRRSV可分为欧洲型和美洲型两个基因型,前者主要流行于欧洲地区,后者主要流行于美洲和亚太地区。PRRSV型间差异显著,型内各毒株变异大。分子生物学研究表明欧洲和美洲两地区的分离株存在广泛的基因变异,美洲型毒株之间的差异性较大,而欧洲型毒株之间则相对保守。目前,PRRSV在我国的流行特点总体上来说是以美洲型毒株为主,但是欧洲型毒株在我国也有感染个例,有学者认为,欧洲型和美洲型毒株在我国已经并存多年。

摘要： 为了构建稳定表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白的Marc-145细胞系,以PRRSV全长感染性克隆为模板,通过PCR方法扩增PRRSV N基因,将N基因克隆到慢病毒载体中,获得重组质粒pLenti-CMV-N,利用三质粒慢病毒包装系统转染293T细胞,包装成表达N蛋白的慢病毒颗粒,将慢病毒颗粒转导至Marc-145细胞,用潮霉素B初步筛选阳性细胞,采用终点稀释的方法筛选出稳定表达PRRSV N蛋白的Marc-145细胞系。通过的PCR扩增N基因和测序表明细胞系基因组中存在N蛋白编码序列,IFA和Western blot试验验证了N蛋白在细胞系中稳定表达。为此,我们成功获得了稳定表达PRRSV N蛋白的Marc-145细胞系。

摘要： α-单月桂酸酯因其有调节炎症反应的能力而受到更多关注,多数研究显示促炎细胞因子的减少。虽然目前尚未完全了解其作用方式,但月桂酸甘油酯似乎有利于PRRSV的清除和降低PRRSV阳性猪继发感染的风险。

摘要： 抗原收获是疫苗生产中的一个重要环节。本文通过对比猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原收获时上清液与细胞液之间的病毒含量以及冻干后的病毒含量,筛选出较为优势的抗原收获方式。结果表明,从病毒含量上分析,收获上清液与细胞液这两种收获方式差异不显著;从生产工艺上分析,收获上清液更有利于提高生产效率,方便临床使用。

摘要： 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是一种病毒性传染病,也叫猪蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)所引起的一种猪的急性高致病性传染性疾病。“综合征”一词道出了该病的复杂程度,词条解释:“综合征”亦称“症候群”,代表一些相互关联的器官病变或功能紊乱而同时出现一群症状,往往不是一种独立的疾病,常可出现于几种疾病或由于几种不同原因所引起的疾病。

摘要： 2021年猪蓝耳病病毒(PRRSV)抗原检出率为33.0%,平均抗体合格率为74.6%。类NADC30毒株、类NADC34毒株与高致病性毒株几乎呈三足鼎立之势,并且后备猪、60-90日龄阶段的猪群抗体相对较差。猪蓝耳病依然非常严重。在重视生物安全的大背景下,走净化之路是解决猪蓝耳病的根本出路。

摘要： 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)俗称“蓝耳病”,最早1987年在美国暴发,除极少数养猪国家没有发生以外,已在美洲、非洲、欧亚大陆,甚至澳洲普遍发生并成为危害世界养猪业最重要的疾病之一[1-2]。我国作为世界上最大的养猪和猪肉生产、消费国,受PRRS的影响尤其严重,特别是高致病性蓝耳病病毒(Highly Pathogenic PRRSV,HP-PRRSV)的出现.

摘要： 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)俗称猪蓝耳病,是由PRRS病毒(PRRSV)引起的全球养猪业最具挑战性的病毒性疾病之一。PRRSV毒株具有多样性并且因为容易变异、感染时间长等特征,导致防控难度较大。该病在我国已经流行20多年,至今感染率仍居高不下,给我国养猪业造成了巨大的经济损失。

摘要： 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是一种由PRRSV引起的，以妊娠母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道症状为主要特征的高度接触性全球性的猪重要传染病，对养猪业造成了巨大的经济损失。但迄今猪对高致病性H-PRRSV和经典性N-PRRSV感染的免疫反应差异及分子致病机制还不清楚。本文通过比较H-PRRSV和N-PRRSV感染机体后，肺组织在转录组与蛋白质组方面的差异，以期了解宿主免疫反应的差异及H-PRRSV感染与机体严重的病理反应之间的关系。

摘要： 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是一种由PRRSV引起的，以妊娠母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道症状为主要特征的高度接触性全球性的猪重要传染病，对养猪业造成了巨大的经济损失。但迄今猪对高致病性H-PRRSV和经典性N-PRRSV感染的免疫反应差异及分子致病机制还不清楚。本文通过比较H-PRRSV和N-PRRSV感染机体后，肺组织在转录组与蛋白质组方面的差异，以期了解宿主免疫反应的差异及H-PRRSV感染与机体严重的病理反应之间的关系。

摘要： 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是一种由PRRSV引起的，以妊娠母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道症状为主要特征的高度接触性全球性的猪重要传染病，对养猪业造成了巨大的经济损失。但迄今猪对高致病性H-PRRSV和经典性N-PRRSV感染的免疫反应差异及分子致病机制还不清楚。本文通过比较H-PRRSV和N-PRRSV感染机体后，肺组织在转录组与蛋白质组方面的差异，以期了解宿主免疫反应的差异及H-PRRSV感染与机体严重的病理反应之间的关系。

摘要： 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是一种由PRRSV引起的，以妊娠母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道症状为主要特征的高度接触性全球性的猪重要传染病，对养猪业造成了巨大的经济损失。但迄今猪对高致病性H-PRRSV和经典性N-PRRSV感染的免疫反应差异及分子致病机制还不清楚。本文通过比较H-PRRSV和N-PRRSV感染机体后，肺组织在转录组与蛋白质组方面的差异，以期了解宿主免疫反应的差异及H-PRRSV感染与机体严重的病理反应之间的关系。

摘要： 本实验以唾液酸粘附素的克隆质粒为基础，通过PCR克隆得到唾液酸粘附素第—个结构域的基因，并连接到PET-28a载体上构建原核表达质粒pET-28a-Sn-D，将鉴定成功的重组质粒在大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达纯化。用SDS-PAGE和EJ ISA方法对表达的重组蛋白进行鉴定。SDS-PAGE和ELISA结果表明Sn-D成功获得高效表达，为下一步分析PRRSV与受体的相互作用及PRRSV的感染机制奠定了基础。

摘要： 本实验以唾液酸粘附素的克隆质粒为基础，通过PCR克隆得到唾液酸粘附素第—个结构域的基因，并连接到PET-28a载体上构建原核表达质粒pET-28a-Sn-D，将鉴定成功的重组质粒在大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达纯化。用SDS-PAGE和EJ ISA方法对表达的重组蛋白进行鉴定。SDS-PAGE和ELISA结果表明Sn-D成功获得高效表达，为下一步分析PRRSV与受体的相互作用及PRRSV的感染机制奠定了基础。

摘要： 本实验以唾液酸粘附素的克隆质粒为基础，通过PCR克隆得到唾液酸粘附素第—个结构域的基因，并连接到PET-28a载体上构建原核表达质粒pET-28a-Sn-D，将鉴定成功的重组质粒在大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达纯化。用SDS-PAGE和EJ ISA方法对表达的重组蛋白进行鉴定。SDS-PAGE和ELISA结果表明Sn-D成功获得高效表达，为下一步分析PRRSV与受体的相互作用及PRRSV的感染机制奠定了基础。

摘要： 本实验以唾液酸粘附素的克隆质粒为基础，通过PCR克隆得到唾液酸粘附素第—个结构域的基因，并连接到PET-28a载体上构建原核表达质粒pET-28a-Sn-D，将鉴定成功的重组质粒在大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达纯化。用SDS-PAGE和EJ ISA方法对表达的重组蛋白进行鉴定。SDS-PAGE和ELISA结果表明Sn-D成功获得高效表达，为下一步分析PRRSV与受体的相互作用及PRRSV的感染机制奠定了基础。

摘要： 本实验以唾液酸粘附素的克隆质粒为基础，通过PCR克隆得到唾液酸粘附素第—个结构域的基因，并连接到PET-28a载体上构建原核表达质粒pET-28a-Sn-D，将鉴定成功的重组质粒在大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达纯化。用SDS-PAGE和EJ ISA方法对表达的重组蛋白进行鉴定。SDS-PAGE和ELISA结果表明Sn-D成功获得高效表达，为下一步分析PRRSV与受体的相互作用及PRRSV的感染机制奠定了基础。

摘要： 本实验以唾液酸粘附素的克隆质粒为基础，通过PCR克隆得到唾液酸粘附素第—个结构域的基因，并连接到PET-28a载体上构建原核表达质粒pET-28a-Sn-D，将鉴定成功的重组质粒在大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达纯化。用SDS-PAGE和EJ ISA方法对表达的重组蛋白进行鉴定。SDS-PAGE和ELISA结果表明Sn-D成功获得高效表达，为下一步分析PRRSV与受体的相互作用及PRRSV的感染机制奠定了基础。

摘要： 本发明涉及病毒抗体研究，旨在提供一种抗PRRSV-N-IgY抗体的制备及在检测PRRSV中的应用。该抗体的制备包括：对PRRSV N蛋白基因序列PCR扩增N基因从而进行抗原制备、动物免疫、特异性卵黄免疫球蛋白的提取的步骤。本发明以重组PRRSV-N蛋白为抗原免疫蛋鸡获得了特异性的抗PRRSV-N-IgY抗体，制备的特异性抗PRRSV-N-IgY抗体可用于PRRSV间接免疫荧光(IFA)检测。与兔源、鼠源等动物的抗体相比，IgY具有物理性质稳定，具有不激活哺乳动物补体，不结合哺乳动物Fc受体或细菌，不与类风湿因子(RF)发生非特异反应等，可明显降低假阳性出现率等优点。

摘要： 本发明涉及一种荧光定量检测PRRSV的试剂、其应用于PRRSV分型的检测方法，所述的试剂包括引物组和探针组，引物组中，鉴定美洲型的引物对序列如SEQ NO.1‑2所示；鉴定欧洲型的引物对序列如SEQ NO.3‑4所示。探针组中，鉴定美洲型的探针序列如SEQ NO.5所示，鉴定欧洲型的引物序列如SEQ NO.6所示。本发明针对PRRSV美洲株、欧洲株分别保守序列，建立多重TaqMan荧光定量RT‑PCR技术，提供PRRSV美洲型和欧洲型分别通用的双通道分型检测方法，为猪场流行病学调查、病原排毒情况跟踪等提供重要的技术保障。

摘要： 本发明公开了一种CSFV、PRRSV-U和PRRSV-M的三色荧光PCR检测方法及其试剂盒，该检测方法可以实现在同一个待测样本中同时检测猪瘟病毒、猪蓝耳病毒通用型以及高致病性猪蓝耳病毒的存在，并能对每种病毒的负载水平进行定量。本发明还提供了一种用于猪瘟病毒、猪蓝耳病毒通用型以及高致病性猪蓝耳病毒三色荧光定量PCR 联合检测的试剂盒。本发明的检测方法及试剂盒操作简便快速，特异性高，检测效果敏感、可靠，最低检测浓度为1×10

摘要： 本发明涉及病毒抗体研究，旨在提供一种抗PRRSV-N-IgY抗体的制备及在检测PRRSV中的应用。该抗体的制备包括：对PRRSV N蛋白基因序列PCR扩增N基因从而进行抗原制备、动物免疫、特异性卵黄免疫球蛋白的提取的步骤。本发明以重组PRRSV-N蛋白为抗原免疫蛋鸡获得了特异性的抗PRRSV-N-IgY抗体，制备的特异性抗PRRSV-N-IgY抗体可用于PRRSV间接免疫荧光(IFA)检测。与兔源、鼠源等动物的抗体相比，IgY具有物理性质稳定，具有不激活哺乳动物补体，不结合哺乳动物Fc受体或细菌，不与类风湿因子(RF)发生非特异反应等，可明显降低假阳性出现率等优点。

摘要： 本发明公开了氯法齐明在制备预防、治疗蓝耳病以及抗PRRSV的药物中的应用。在细胞实验中，通过Western Blot和qRT‑PCR等技术在多个层面上证明了氯法齐明能够显著抑制PRRSV感染和复制，具有显著的抗PRRSV作用。

摘要： 本发明公开了鉴别美洲型和欧洲型PRRSV的荧光定量检测引物和探针组，鉴定美洲型PRRSV的引物和探针序列为AM‑F、AM‑R、AM‑P，鉴定欧洲型PRRSV的引物和探针序列为EU‑F、EU‑R、EU‑P。本发明根据美洲型和欧洲型PRRSV ORF6基因保守序列设计特异性引物和探针，建立了可以同时检测检测欧洲型和美洲型PRRSV的双重实时荧光定量PCR方法，标准品在1×109copies/μL~1×101copies/μL浓度范围内具有良好的线性关系，最低可检测到10copies/μL的标准品阳性质粒，使用本发明引物和探针的检测方法，其特异性强，重复性好，对不同基因型PRRSV快速、灵敏检测具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种ASFV、PRRSV和PRV三联检测试剂盒，属于分子诊断技术领域，该三联检测试剂盒可实现单管检测3种病原体，采用PCR扩增和荧光探针相结合的方法，针对ASFV、PRRSV、PRV的特异且高度保守区域设计荧光检测的引物探针，PCR产物的形成与荧光信号的累积完全同步，3小时左右可在单管反应液中实现靶标检测，一次试验完成3种病原体的测试，极大降低了检测的工作量；该三联检测试剂盒不仅灵敏度高，而且特异性好，灵敏度可以达到1copies/μL，且C值＜5％，不与猪感染的其他常见病毒产生交叉反应，检测猪瘟病毒、猪圆环病毒和猪细小病毒等，结果均为阴性。

摘要： 本发明公开了一种ASFV单基因嵌合重组PRRSV活载体疫苗的制备方法，属于生物工程技术领域，该ASFV单基因嵌合重组PRRSV活载体疫苗的制备方法包括下列步骤：ASFV P72中和抗体表位区cDNA的扩增；融合PCR引物的设计与合成；ASFV P72短片段嵌合重组PRRSV病毒的构建；ASFV P72短片段嵌合重组PRRSV的拯救；ASFV P72短片段嵌合重组PRRSV的生物学特性检测；ASFV P72短片段嵌合重组PRRSV的免疫攻毒试验，检测重组病毒的免疫保护力；本发明建立了一种ASFV单基因嵌合重组PRRSV活载体疫苗毒的制备方法，该方法能够同时对PRRSV和ASFV产生一定的免疫保护作用。

摘要： 本发明提供了一种用于制备PRRSV基因II型表位缺失疫苗毒株的N蛋白表位突变标记及其应用，属于生物制品技术领域。所述突变标记在PRRSV基因II型N蛋白C端92～103位表位序列的基础上突变一个或多个氨基酸，所述表位突变标记的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，其中X1可以为T、P或A，X2为V或A。本发明通过鉴定PRRSV基因II型病毒N蛋白中优势抗原表位，证明将此表位缺失后可以有效区分自然感染动物与表位缺失全病毒灭活疫苗或弱毒疫苗免疫动物，为PRRSV免疫净化防控产品的制备提供了依据。

摘要： 本发明公开了ASFV、CSFV、PRRSV三种病毒的微滴数字PCR（ddPCR）试剂盒及其检测方法，所述试剂盒包括如序列表中SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.9所述的引物对和探针，本发明方法针对三种病毒ASFV的P72、CSFV的5'UTR和PRRSV的ORF7的基因组区域设计引物对和探针，并且优化用于微滴数字PCR检测的样品选取及处理方法、扩增反应液组成和配比、微滴生成和PCR扩增步骤的工作条件，得到一种快速、准确、灵敏的且能够同时检测ASFV、CSFV和PRRSV三种病毒的微滴数字PCR检测方法，为实验室同时鉴别检测三种病毒提供了有效的技术手段。