雷公藤内酯醇

摘要： 本研究以脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠急性肺损伤为实验模型,探究了雷公藤内酯醇对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的影响。采用ELISA、BCA和HE染色等技术测定了促炎性细胞因子的水平、渗出蛋白总量以及雷公藤内酯醇治疗前后小鼠肺部组织生理病理变化。结果表明雷公藤内酯醇可以抑制促炎性细胞因子白介素-6(IL-6)的过度分泌,减少渗出蛋白总量,并且逆转肺部病理变化。这些结果说明雷公藤内酯醇对于脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤有一定的缓解作用。

摘要： 目的:研究葡聚糖硫酸(dextransulfate sodium,DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型肠黏膜通透性变化及雷公藤内酯醇(triptolide,TL)的治疗作用。方法:将80只BALB/c雄性小鼠随机分成8组,其中10只为空白对照组(NC组),其余70只饮用5%DSS溶液建立UC模型,于第3天随机分为模型组(M组)、丙二醇组(PG组)、TL低浓度组(TLL组)、TL中浓度组(TLM组)、TL高浓度组(TLH组)、地塞米松组(D组)和美沙拉嗪组(MS组),每组10只,分别通过腹腔注射或灌胃给予相应药物。对各组小鼠进行大便隐血观察和疾病活动指数(DAI)评分;于第8天采用异硫氰酸荧光素-葡聚糖(f1uorescein isothiocyanate-dextran,FITC-D)示踪法检测小肠黏膜通透性,透射电镜观察肠黏膜超微结构变化,ELISA法检测肠组织中髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、白介素-10(interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)及肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)水平。结果:除NC组外,其余各组小鼠在饮用5%DSS溶液后第5天出现血便,隐血试纸测试阳性。造模后第1、第2天各组小鼠DAI评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。MS组从第3天开始DAI评分较NC组显著升高(P0.05)。M组肠组织中IL-10含量降低,仅TLH治疗后IL-10含量有所升高,但与M组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:雷公藤内酯醇可改善DSS诱导的小鼠肠黏膜损伤,降低肠黏膜通透性,减轻肠黏膜炎症反应。

摘要： 目的研究雷公藤内酯醇(Triptolide,TL)对人结直肠腺癌细胞Caco-2紧密连接蛋白(Zonula Occludens 1,ZO-1)表达的影响。方法在Caco-2细胞建立肠黏膜屏障体外模型的基础上,通过荧光定量PCR、Western Blot和免疫荧光分析紧密连接蛋白ZO-1的表达变化。结果与对照组相比,TL不同浓度组Caco-2细胞内ZO-1基因和蛋白表达水平无显著变化;TNF-α组ZO-1表达显著降低;在不同浓度TL预保护后加入TNF-α,ZO-1表达水平随加入药物浓度的增加逐渐增加。对照组和TL不同浓度组内ZO-1的免疫荧光染色均表现为整齐、连续且分布规律;TNF-α组荧光强度则明显减弱,单层细胞散架且缺损,位于细胞边界的蛋白染色较模糊,蛋白定位出现弥散和不连续,表达信号减弱;在不同浓度TL预保护后加入TNF-α,ZO-1表达随药物浓度增加逐渐恢复,最高浓度下信号最强。结论TNF-α破坏单细胞层,且抑制ZO-1表达,TL通过ZO-1促进肠黏膜屏障紧密连接恢复。提示TL可能对肠黏膜屏障有一定保护作用。

摘要： 目的:探讨雷公藤内酯醇(TPL)对人源套细胞淋巴瘤细胞JeKo-1增殖、凋亡的影响,以及Nrf2/ARE信号通路的可能作用。方法:常规条件培养JeKo-1细胞,不同浓度TPL(0、25、50、100 ng/ml)处理细胞,MTT检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测Ki67、Bcl-2、Bax、Nrf2、NQO-1和HO-1蛋白表达。qRT-PCR和Western blot检测TPL对转染Nrf2 pcDNA的mRNA和蛋白表达的影响,观察TPL对Nrf2/ARE信号通路增殖和凋亡的作用。结果:随着TPL浓度增加,TPL明显抑制JeKo-1细胞活力,促进细胞凋亡,下调Ki67、Bcl-2、Nrf2、NQO-1和HO-1蛋白表达,上调Bax蛋白表达,且呈剂量依赖性。与TPL+vector组相比,TPL+Nrf2 pcDNA组Nrf2 mRNA和蛋白表达显著增加,细胞活力显著提高,凋亡率显著降低,Ki67、Bcl-2蛋白表达上调,Bax蛋白表达下调。结论:TPL可明显抑制JeKo-1细胞增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与Nrf2/ARE信号通路有关。

摘要： 目的:探讨雷公藤内酯醇对人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞凋亡的影响及机制。方法:应用不同浓度(40、80和160 nmol/L)的雷公藤内酯醇作用于RPMI8226细胞不同时间(24、48和72 h)或联合转染CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)siRNA处理细胞,采用MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测CHOP和BCL-2的mRNA表达,Western blot检测CHOP和BCL-2的蛋白表达。结果:不同浓度(40、80和160 nmol/L)的雷公藤内酯醇作用于RPMI8226细胞不同时间(24、48和72 h)后,各浓度组细胞活力随药物浓度的升高和作用时间的延长呈逐渐降低趋势。不同浓度的雷公藤内酯醇作用于RPMI8226细胞48 h后,各浓度组细胞的凋亡率逐渐升高(P<0.05),各组细胞CHOP的mRNA和蛋白表达水平逐渐上调,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05),而BCL-2的mRNA和蛋白表达水平随药物浓度的升高而逐渐下调,组间比较差异亦均有统计学意义(P<0.05)。浓度为80 nmol/L的雷公藤内酯醇联合CHOP siRNA转染的作用下,RPMI8226细胞中CHOP的表达被抑制,细胞凋亡率与转染对照组比较显著下降(P<0.05);同时CHOP的mRNA和蛋白表达水平较转染对照组显著降低(P<0.05),而BCL-2的mRNA和蛋白表达水平较转染对照组显著升高(P<0.05)。结论:雷公藤内酯醇可通过内质网应激途径诱导人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞凋亡,其机制与调控CHOP/BCL-2信号通路有关。

摘要： 目的:探究葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(UC)模型中胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、闭锁小带蛋白1(ZO-1)的表达以及雷公藤内酯醇(TL)对肠黏膜稳定性的影响。方法:将80只BALB/c雄性小鼠随机分成8组,其中10只为空白对照组(NC),其余70只饮用5%DSS溶液建立UC模型。建模第3天将70只小鼠随机分为模型组(M),丙二醇组(PG),雷公藤内酯醇低浓度组(TLL)、中浓度组(TLM)和高浓度组(TLH),地塞米松组(D),美沙拉嗪组(MS),分别给予相应药物治疗。7天后处死动物,取结肠组织进行病理学检查,采用实时定量PCR法及Western Blot法检测GDNF、ZO-1 mRNA及蛋白的表达。结果:与NC组比较,TL低中高剂量组从第4天至第7天体质量下降,但明显高于M组,差异有统计学意义(P<0.05)。病理检查显示M组小鼠肠黏膜明显受损,杯状细胞减少,出现大量炎性肉芽组织。TLM、TLH组结肠黏膜相对完整,大部分上皮细胞及腺体结构完整,极少量炎症细胞浸润,黏膜下层未见水肿。与NC组比较,模型组肠黏膜中GDNF、ZO-1 mRNA表达水平明显降低,而TLL组、TLM组、TLH组中GDNF、ZO-1 mRNA表达水平均升高,呈剂量依赖性,其中TLH组表达升高最为显著(P<0.01)。与NC组比较,模型组肠黏膜中GDNF、ZO-1蛋白表达水平明显降低,且呈剂量依赖性(P<0.05),TLL组、TLM组、TLH组中GDNF、ZO-1蛋白表达水平均升高,其中TLH组表达升高最为显著(P<0.01)。结论:雷公藤内酯醇治疗能显著减轻DSS诱导的结肠炎,可能通过增加GDNF、ZO-1的表达而保护肠黏膜结构稳定性,有望成为治疗UC的新方法。

摘要： 目的通过体内实验探究雷公藤内酯醇对SKOV3细胞成瘤裸鼠的作用机制。方法实验分组为:SKOV3组和SKOV3+雷公藤内酯醇组。ELISA检测各组血清IL-2、TNF-α、HIF-1α、CSF-1的含量,蛋白质免疫印迹及免疫组化检测肿瘤组织中VEGF-1、MMP-2的表达,观察瘤体大小、TUNEL检测各组肿瘤细胞凋亡情况。结果与SKOV3组相比,SKOV3+TP组裸鼠血清中的CSF-1和HIF-1α表达明显下降(P<0.05),而IL-2和TNF-α表达明显上升(P<0.05);与SKOV3组相比,SKOV3+TP组的细胞凋亡明显升高、肿瘤大小减小,免疫组化及蛋白质免疫印迹提示MMP-2及VEGF-1表达明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论雷公藤内酯醇能显著抑制人上皮性卵巢癌细胞SKOV3的增殖,并诱导肿瘤细胞凋亡。雷公藤内酯醇作用于SKOV3细胞后,肿瘤微环境中的相关细胞因子及蛋白发生改变,从而影响肿瘤的生长,最终诱导肿瘤发生凋亡。

摘要： 目的探究雷公藤内酯醇(TPL)调控核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌纤维化的影响。方法取Wistar大鼠采用结扎冠状动脉左前降支的方法建立AMI大鼠模型,分为假手术组、模型组、TPL低剂量(25μg/kg)组、TPL高剂量(50μg/kg)组、Nrf2抑制剂(7 mg/kg)组、TPL(50μg/kg)+Nrf2抑制剂(7 mg/kg)组,每组12只。给予相应的药物干预4周后,超声检测大鼠左心室功能;试剂盒法测血清心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶(CK-MB)、谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平;TTC法检测心肌梗死面积;透射电子显微镜观察心肌细胞结构损伤;Masson染色观察心肌组织纤维化变化;免疫组织化学法检测心肌组织核因子E2相关因子2(Nrf2)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性表达;DHE荧光探针法检测心肌组织活性氧(ROS)水平;Western Blon检测心肌组织Nrf2及下游炎症、氧化应激、纤维化相关蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠LVESD、LVEDd、血清CK-MB、GOT、LDH、cTnI水平、心肌梗死面积、胶原容积分数、α-SMA阳性表达、ROS荧光强度、HO-1、SOD2、GPx、NLRP3、IL-6、IL-1β、Nrf2、TGF-β1、(p-Smad2/3)/(Smad2/3)、COL-Ⅰ蛋白表达升高,FS降低,差异有统计学意义(P<0.05),心肌细胞体积变小、胞质浓缩、胞核裂解、线粒体肿胀、心肌肌节断裂且排列紊乱。与模型组相比,TPL低、高剂量组大鼠LVESD、LVEDd、血清CK-MB、GOT、LDH、cTnI水平、心肌梗死面积、胶原容积分数、α-SMA阳性表达、ROS荧光强度、NLRP3、IL-6、IL-1β、TGF-β1、(p-Smad2/3)/(Smad2/3)、COL-Ⅰ蛋白表达降低,FS、HO-1、SOD2、GPx、Nrf2蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05),心肌细胞结构损伤缓解;Nrf2抑制剂可逆转TPL的上述作用(P<0.05)。结论TPL可激活Nrf2/ARE介导的抗氧化、抗炎反应途径,改善AMI大鼠心肌坏死及纤维化。

摘要： 背景:继发性脊髓损伤致残率高的主要诱因之一是氧化应激和炎症反应,如何抑制脊髓继发性损伤是目前研究的热点.目的:探讨雷公藤内酯醇对大鼠脊髓损伤后运动功能障碍的改善作用及其可能机制.方法:将48只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、脊髓损伤组和雷公藤内酯醇组,每组16只.采用改良的Allen法建立大鼠脊髓损伤模型.雷公藤内酯醇组大鼠行脊髓损伤30 min后腹腔注射雷公藤内酯醇[0.1 mg/(kg·d)],假手术组及脊髓损伤组均经相同途径给予等量含体积分数1％二甲亚砜的生理盐水,连续治疗10 d,假手术组仅行椎板切除不损伤脊髓.于术后第7,14,21,28,35天采用脊髓损伤的行为学评分法评定各组SD大鼠后肢运动功能;于术后第10天收集大鼠的胸脊髓(T8-11),用于组织学检测和蛋白质印迹、实时定量聚合酶链式反应分析.结果 与结论:①脊髓损伤组和雷公藤内酯醇组的脊髓损伤的行为学评分随着伤后天数的增加而增加,且雷公藤内酯醇组在受伤后第14,21,28,35天的行为学评分均显著高于脊髓损伤组(P＜0.05);②术后10 d切取各组大鼠的胸脊髓(T8-11)组织经苏木精-伊红染色发现,脊髓损伤组大鼠胸脊髓核心区纵切面显示严重水肿、出血和炎性细胞浸润,而这些异常现象均可被雷公藤内酯醇治疗明显减弱(P＜0.05);③RTPCR检测发现,与脊髓损伤组相比,雷公藤内酯醇组大鼠脊髓中肿瘤坏死因子α,p-STAT3和p-JAK2 mRNA表达显著降低(P＜0.05),且超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的mRNA表达水平明显升高(P＜0.05);④结果证实,脊髓损伤后腹腔注射雷公藤内酯醇可适度改善运动功能障碍,其作用机制可能与雷公藤内酯醇调控JAK/STAT信号通路的异常活化有关.

摘要： 背景:继发性脊髓损伤致残率高的主要诱因之一是氧化应激和炎症反应,如何抑制脊髓继发性损伤是目前研究的热点。目的:探讨雷公藤内酯醇对大鼠脊髓损伤后运动功能障碍的改善作用及其可能机制。方法:将48只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、脊髓损伤组和雷公藤内酯醇组,每组16只。采用改良的Allen法建立大鼠脊髓损伤模型。雷公藤内酯醇组大鼠行脊髓损伤30 min后腹腔注射雷公藤内酯醇[0.1 mg/(kg·d)],假手术组及脊髓损伤组均经相同途径给予等量含体积分数1%二甲亚砜的生理盐水,连续治疗10 d,假手术组仅行椎板切除不损伤脊髓。于术后第7,14,21,28,35天采用脊髓损伤的行为学评分法评定各组SD大鼠后肢运动功能;于术后第10天收集大鼠的胸脊髓(T8-11),用于组织学检测和蛋白质印迹、实时定量聚合酶链式反应分析。结果与结论:①脊髓损伤组和雷公藤内酯醇组的脊髓损伤的行为学评分随着伤后天数的增加而增加,且雷公藤内酯醇组在受伤后第14,21,28,35天的行为学评分均显著高于脊髓损伤组(P<0.05);②术后10 d切取各组大鼠的胸脊髓(T8-11)组织经苏木精-伊红染色发现,脊髓损伤组大鼠胸脊髓核心区纵切面显示严重水肿、出血和炎性细胞浸润,而这些异常现象均可被雷公藤内酯醇治疗明显减弱(P<0.05);③RTPCR检测发现,与脊髓损伤组相比,雷公藤内酯醇组大鼠脊髓中肿瘤坏死因子α,p-STAT3和p-JAK2 mRNA表达显著降低(P<0.05),且超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的mRNA表达水平明显升高(P<0.05);④结果证实,脊髓损伤后腹腔注射雷公藤内酯醇可适度改善运动功能障碍,其作用机制可能与雷公藤内酯醇调控JAK/STAT信号通路的异常活化有关。

摘要： 目的：探讨三氧化二砷(AS2O3)联合雷公藤内酯醇(triptolide)协同诱导骨髓增生异常综合征(MDS)SKM-1细胞凋亡及其作用机制. 方法：将不同浓度单药AS2O3、triptolide或两药联合与SKM-1细胞共育48h,采用光学显微镜观察细胞形态学;MTT法检测细胞增殖抑制作用,计算CI;AnnexinV-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡,计算CI;DCFH-DA标记流式细胞术检测细胞内ROS水平,计算CI;RQ-RT-PCR检测抗凋亡基因bcl-2和促凋亡基因bax与caspase-3的表达,计算CI. 结果：除0.25umol/L AS2O3+10ng/ml triptolide低浓度两药联合组对SKM-1细胞无明显增殖抑制及促凋亡作用(P＞0.05),其余两药联合组比单药AS2O3或triptolide有明显抑制SKM-1细胞增殖及促凋亡作用,且随着联合两药浓度增加对SKM-1细胞增殖抑制作用逐渐增加(P＜0.01),CI＜1,凋亡发生率逐渐增加(P＜0.01),CI＜1,细胞内ROS水平逐渐增加(P＜0.01),CI＜1,促凋亡基因Bax-mRNA、caspase-3-mRNA表达水平逐渐增加(P＜0.01),CI＜1,而抗凋亡基因Bcl-2-mRNA表达水平逐渐下降(P＜0.01),CI＜1. 结论：三氧化二砷联合雷公藤内酯醇对SKM-1细胞有明显增殖抑制及促凋亡作用,且二者具有协同作用.其作用机制可能通过增加细胞内ROS、下调抗凋亡基因Bcl-2与上调促凋亡基因Bax、caspase-3来发挥细胞增殖抑制及促凋亡作用.

摘要： 目的:为了研究不同剂量雷公藤内酯醇对佐剂性关节炎大鼠的镇痛效应及对腰5脊髓背角和背根神经节中IL-1β、TNF-α表达变化的影响,探讨TP对RA镇痛作用的可能机制. 方法:选用SD大鼠50只,随机分成正常组(A组)、模型组(B组)、TP低(C组)、中(D组)、高(E组)剂量治疗组.B、C、D、E组大鼠右后趾皮内注入0.1ml弗氏完全佐剂造模.造模后14d,C、D、E组大鼠采取不同剂量(C组0.1mg/kg,D组0.2mg/kg,E组0.4mg/kg)TP腹腔注射给药,每天一次,连续给药9d之后检测热痛阈、足跖肿胀度(EdemaRate,ER％)前后变化,用免疫组织化学的方法检测腰5(L5)脊髓背角和DRG节段中IL-1β、TNF-α的蛋白表达变化情况,同时RT-PCR检测IL-1βmRNA、TNF-αmRNA的表达变化. 结果:B组大鼠热痛阈显著低于A组(P＜0.01),经过TP治疗后,C、D、E组热痛阈显著高于B组(P＜0.01),TP可显著提高AA大鼠热痛阈;B组大鼠足跖肿胀度显著高于A组(P＜0.01),C、D、E组足跖肿胀度显著低于B组(P＜0.01),TP可显著降低AA大鼠足跖肿胀度;免疫组化结果表明:与A组比较,B组IL-1β、TNF-α阳性表达水平显著升高(P＜0.01),而C、D、E组大鼠L5节段脊髓背角和DRG中IL-1β、TNF-α阳性表达水平显著低于B组(P＜0.01),并呈一定的量效关系;RT-PCR检测显示:B组大鼠IL-1βmRNA、TNF-αmRNA水平显著高于A组(P＜0.01),C、D、E组大鼠IL-1βmRNA水平显著低于B组(P＜0.01),C组TNF-αmRNA水平与B组无显著差异,D、E组大鼠TNF-αmRNA水平显著低于B组(P＜0.01). 结论:TP对AA具有良好抗炎镇痛作用;TP可抑制AA大鼠脊髓背角和DRG中IL-1β、TNF-α的表达,这可能是TP产生镇痛作用机制之一.

摘要： 雷公藤总萜片,是南京军区南京总医院研究人员以雷公藤干燥根提取物为原料,吸取国内外研究成果,借鉴雷公藤多甙片和雷公藤片制备工艺优点而研制出来的药物.其指标性成分也是有效成分为雷公藤内酯醇.雷公藤内酯醇(triptolide,又称雷公藤甲素),是环氧二萜类化合物,白色晶体,不溶于水,分子量360,分子式C20H24O6,结构图见图1.1972年文献首次报道了雷公藤内酯醇抗白血病的作用,从此开始了国内外雷公藤内酯醇的药理学研究.而进入二十一世纪后,雷公藤内酯醇的研究飞速.截止到2016年,有超过十个国家在进行雷公藤内酯醇相关的研究,约900篇论文被发表在PUBMED上,Blood、Clinical Cancer Research、Natural product reports等期刊都曾刊登过雷公藤内酯醇的研究成果.

摘要： 目的：研究雷公藤内酯醇抑制皮肤鳞癌细胞株(A431)增殖、诱导凋亡的作用. 方法：将雷公藤内酯醇按不同浓度(0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml)、不同作用时间(12h、24h、48h)分别处理皮肤鳞癌细胞(A431),MTT法测定A431细胞的生长抑制率,分光光度法检测Caspase-3活性. 结果：雷公藤内酯醇对皮肤鳞癌细胞A431增殖有抑制作用,10μg/ml、100μg/ml组最为明显,并能诱导细胞凋亡.其作用均有时间、浓度依赖关系(p＜0.05).在雷公藤内酯醇作用A431细胞的不同浓度与不同时间中Caspase-3活性明显高于相应对照组(p＜0.05). 结论：雷公藤内酯醇对皮肤鳞癌细胞A431增殖有明显抑制,并能诱导凋亡作用,其与Caspase-3途径激活有关.

摘要： 目的：研究雷公藤内酯醇对抑郁模型小鼠抑郁样行为的改善及脑源性神经营养因子(BDNF)的影响.rn 方法：成年雄性ICR小鼠,每天选取8种刺激中的1种进行刺激应激,每日1次,共计14d,制备慢性不可预知应激抑郁模型.每天应激前10 min,ip给予雷公藤内酯醇20,40,80和160 μg·kg-1,第15天起,给予药物处理10 min后,每天检测一个行为学指标.采用自发活动实验测定运动总路程,强迫游泳实验和悬尾实验测定累计不动时间.采用Western蛋白印迹法检测小鼠海马和前额叶中磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(p-CREB)和BDNF的蛋白表达.rn 结果：雷公藤内酯醇不影响小鼠的自主活动能力.慢性应激组表现出明显的抑郁样行为,给予雷公藤内酯醇80和160 μg· kg-1后在强迫游泳实验的不动时间分别由慢性应激组的(160±18)s下降为(102±14)s (P＜0.05)和(83±14)s(P＜0.01),而丙米嗪(10 mg·kg-1)和氟西汀组(10 mg·kg-1)分别为(77±11)s(P＜0.01)和(96±9)s(P＜0.01).给予雷公藤内酯醇40,80和160 μg·kg-1后在悬尾实验中的不动时间分别由慢性应激组的(128±8)s下降为(93±9)s(P＜0.05),(85±8)s(P＜0.01)和(77±1 1)s(P＜0.01),丙米嗪和氟西汀组分别为(64±9)s(P＜0.01)和(72±6)s(P＜0.01).雷公藤内酯醇80和160 μg·kg-1组海马内p-CREB蛋白表达增加(P＜0.05),前额叶内p-CREB蛋白表达亦显著性增加(P＜0.05).雷公藤内酯醇80和160 μg·kg-1组海马和前额叶中BDNF的表达显著性增加(P＜0.05).rn 结论：雷公藤内酯醇对慢性不可预知应激引起的小鼠抑郁样行为有一定程度的改善作用,且这种改善作用可能与其参与调节p-CREB-BDNF通路有关.

摘要： 目的：探讨雷公藤内酯醇对体外培养人黑素瘤M14细胞增殖与凋亡的影响.rn 方法：利用CCK8检测不同浓度和时间雷公藤内酯醇作用下对黑素瘤M14细胞的增殖抑制作用;用10nmol/L、20nmol/L和30nmol/L三种浓度雷公藤内酯醇作用48h 后,以流式细胞仪检测细胞周期变化、Annexin-Ⅴ/PI法观察M14细胞凋亡的变化;用Hoechst33258染色法观察30nmol/L雷公藤内酯醇作用48h后细胞凋亡的形态变化.rn 结果：细胞周期显示雷公藤内酯醇处理过的M14细胞S期比例高于对照组,G2/M期比例低于对照组.空白对照组及10nmol/L、20nmol/L和30 nmol/L浓度雷公藤内酯醇处理的M14细胞凋亡率分别为2.92 ± 0.17％,20.99±0.40％,34.28±2.04％和63.38±0.71％,呈剂量依赖性诱导M14细胞凋亡,经30nmol/L雷公藤内酯醇作用后Hoechst33258染色示凋亡细胞形态改变.rn 结论：雷公藤内酯醇对黑素瘤M14细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用.

摘要： 近年来,雷公藤内酯醇作为从雷公藤中提取的二萜类化合物,其对多种人肿瘤细胞系的抗肿瘤活性已受到广泛重视.本研究通过CCK8实验,Hoechst33258染色及流式细胞术首次表明雷公藤内酯醇对于人黑素瘤A375细胞系的抑制增殖和诱导凋亡的活性.接着,caspase活性检测提示雷公藤内酯醇通过caspase和细胞内凋亡通路诱导凋亡.同时,NF-kB(p65)的表达及其下游基因如Bcl-2,Bcl-XL的下调显示雷公藤内酯醇通过NF-kB介导A375细胞凋亡,同时,该结果证实了前述雷公藤内酯醇通过caspase及NF-kB介导A375细胞凋亡的信号通路.

摘要： 目的：通过观察雷公藤内酯醇(TP)干预高糖环境下小鼠足细胞表达NEPH1、desmin、TGF-β1和Smad7的变化,探讨其保护足细胞损伤的可能机制.rn 方法：将培养成熟的小鼠足细胞随机分为对照组(D-葡萄糖5mmol/L)、高糖组(D-葡萄糖25mmol/L)、TP低剂量组(25mmol/LD-葡萄糖+ 8ng/ml TP)、TP中剂量组(25mmol/LD-葡萄糖+16ng/ml TP)和nTP高剂量组(25mmol/L D-葡萄糖+32ng/ml TP).体外培养24h后,倒置显微镜下观察足细胞形态变化,采用RT-PCR和western-blot技术分别检测各组足细胞NEPH1、desmin、TGF-β1和Smad7的mRNA和蛋白表达变化.rn 结果：1、高糖诱导的足细胞NEPH1和Smad7mRNA和蛋白的表达较对照组显著减少(P＜0.01),desmin和TGF-β1的mRNA和蛋白的表达较对照组显著增加(P＜0.01).2、TP各剂量组足细胞NEPH1和Smad7的mRNA和蛋白的表达均较高糖组显著上调(P＜0.05或P＜0.01),desmin和TGF-β1的mRNA和蛋白的表达较高糖显著下降(P＜0.05或P＜0.01),以TP中剂量组的干预作用最显著(P＜0.05).rn 结论：TP可能通过抑制TGF-β/Smad信号通路缓解高糖诱导的足细胞转分化.

摘要： 为探究雷公藤内酯醇生物合成途径关键基因,论文以SMART技术成功构建雷公藤根cDNA文库,质量检测表明,文库滴度为1.3×107pfu·mL-1,重组率为94％,插入片段平均为1.0kb左右;随机挑选克隆并测序,得到226个有效EST序列,初步对其进行了生物信息学分析.为研究雷公藤内酯醇生物合成相关基因,以Efα为持家基因对从雷公藤根cDNA文库中筛选出的DXS、DXR、IPK、GGPPS等基因进行荧光定量PCR测定,结果表明,上述4个基因均为雷公藤内酯醇生物合成途径中的相关基因,其中DXR和GGPPS为关键基因,上述试验结果为进一步研究雷公藤内酯醇生物合成途径奠定了基础.

摘要： 目的：探讨雷公藤内酯醇对糖尿病大鼠肾皮质RANTES表达的影响及其机制.方法：SD大鼠随机分为正常对照组(NG)、糖尿病模型组(DM)、小剂量雷公藤内酯醇治疗组(T1)、大剂量雷公藤内酯醇治疗组(T2).实验第4、8、12周,各组随机选出5只大鼠检测体重、肾重、24h尿白蛋白、血糖、血脂、肝肾功能、血常规、糖化血红蛋白;RT-PCR、ELISA法检测肾皮质中RANTES的表达;肾常规病理观察.结果：DM组肾皮质RANTES的表达在第4、8、12周较NG组显著升高(p＜0.01),T1、T2组较DM组表达量显著降低(p＜0.01);12周的DM组较4周的RANTES表达显著升高(p＜0.01);12周的T1、T2组较4周的RANTES表达显著降低(P＜0.05).雷公藤内酯醇干预前后DM组RANTES mRNA的表达与24h尿蛋白、肾小球硬化和肾间质纤维化指数变化呈显著正相关.结论：雷公藤内酯醇可能通过抑制糖尿病大鼠肾皮质RANTES的过度表达,改善肾小球硬化及肾间质纤维化.

摘要： 本发明涉及雷公藤内酯甲、雷公藤内酯酮、雷公藤甲素和雷公藤红素的液相色谱‑串联质谱检验方法，包括如下步骤：取液体样品或组织样品剪碎于具塞试管中；上述样品加一定量的氢氧化钠溶液调pH9～10，加入乙酸乙酯，振荡10min，高速离心10min；分离有机相后，加有机溶剂进行第二次提取，合并两次有机相，置于50°C浓缩仪上挥干；残渣用初始流动相定容，过0.22μm微孔有机滤膜，滤液供液相色谱‑串联质谱仪分析。本发明的检测方法简单高效、快速灵敏、准确度高，具有广泛的实用性，能够应用于生物样品中雷公藤内酯甲、雷公藤内酯酮、雷公藤甲素和雷公藤红素的定性定量检验，以及适用于体外样品和可疑物证的检验。

摘要： 本发明公开了一种自雷公藤前段浸膏中提取雷公藤氯内酯醇的方法。目前对雷公藤多甙或者直接用乙醇提取雷公藤原料后的提取物进行层析分离，工艺是采用多次层析的方法，并经过旋转薄层层析，最终得到的雷公藤氯内酯醇量很少，根本不能用于大生产。本发明首先使用亲水性溶剂低级醇/酮对雷公藤多苷前段浸膏进行提取，将大部分前段浸膏中的亲脂性杂质分离，然后用三氯甲烷萃取，将在低级醇/酮溶液中有较小溶解度的另一些非目标产物分离，接着层析分离纯化，最后用氯仿重结晶。本发明分离、纯化工艺简单易行，适合工业化大生产，所制得的雷公藤氯内酯醇可用于开发新药。

摘要： 本发明公开了一种从雷公藤中分离制备雷公藤内酯二醇的方法。它是将含雷公藤内酯二醇的雷公藤根皮提取物做原料，用混合溶剂萃取数次，得到的固体物分散在水中用有机溶剂萃取数次，收集有机相，蒸干得到的固体物上一次硅胶柱或中性氧化铝柱，用二氯甲烷、三氯甲烷或二氯乙烷洗脱，得到雷公藤内酯二醇粗品，用二氯甲烷-乙醚结晶，得到雷公藤内酯二醇粗晶，重结晶两次，即得纯晶。本发明所用原料廉价易得，对环境污染小，工艺简单易行、快捷，所获得的雷公藤内酯二醇成本较低、纯度高，适合工业规模化生产。

摘要： 本发明涉及雷公藤内酯甲、雷公藤内酯酮、雷公藤甲素和雷公藤红素的液相色谱-串联质谱检验方法，包括如下步骤：取液体样品或组织样品剪碎于具塞试管中；上述样品加一定量的氢氧化钠溶液调pH9～10，加入乙酸乙酯，振荡10min，高速离心10min；分离有机相后，加有机溶剂进行第二次提取，合并两次有机相，置于50°C浓缩仪上挥干；残渣用初始流动相定容，过0.22μm微孔有机滤膜，滤液供液相色谱-串联质谱仪分析。本发明的检测方法简单高效、快速灵敏、准确度高，具有广泛的实用性，能够应用于生物样品中雷公藤内酯甲、雷公藤内酯酮、雷公藤甲素和雷公藤红素的定性定量检验，以及适用于体外样品和可疑物证的检验。

摘要： 本发明公开了一种自雷公藤前段浸膏中提取雷公藤氯内酯醇的方法。目前对雷公藤多甙或者直接用乙醇提取雷公藤原料后的提取物进行层析分离，工艺是采用多次层析的方法，并经过旋转薄层层析，最终得到的雷公藤氯内酯醇量很少，根本不能用于大生产。本发明首先使用亲水性溶剂低级醇/酮对雷公藤多苷前段浸膏进行提取，将大部分前段浸膏中的亲脂性杂质分离，然后用三氯甲烷萃取，将在低级醇/酮溶液中有较小溶解度的另一些非目标产物分离，接着层析分离纯化，最后用氯仿重结晶。本发明分离、纯化工艺简单易行，适合工业化大生产，所制得的雷公藤氯内酯醇可用于开发新药。

摘要： 一种从雷公藤叶中分离雷公藤内酯二醇的方法，步骤为：雷公藤叶粉末通过乙醇水溶液提取，蒸去乙醇得到水悬浮物，向水悬浮物中加正己烷脱脂，取下相，加有机混合溶剂萃取，取有机相，蒸干得到有机相萃取物，有机相萃取物上硅胶柱层析，蒸干洗脱剂得到雷公藤内酯二醇粗品，用四元两相体系，对该粗品进行分配，取上相蒸干得到四元分配物，最后通过高速逆流色谱精制得到雷公藤内酯二醇精品。本发明的提取方法工艺简单、耗时短、易操作，所涉及到的溶剂不含对环境和人体损害较大的氯代溶剂，生产过程安全环保，而且成本低，提取的雷公藤内酯二醇的纯度在95%以上，提取率也较高。

摘要： 本发明涉及一种植物有效成分的提取工艺，具体是提供一种用雷公藤叶生产雷公藤内酯醇的工艺，包括干叶磨粉→水煮→第一次浓缩→离心除杂→氯仿萃取→第二次浓缩→浸膏上硅胶柱→第三次浓缩→二次上柱→第四次浓缩→结晶→重结晶→纯品→检验入库步骤。本发明具有工艺流程简单、生产安全、收率高的优点，适合工业化生产。

摘要： 本发明公开了一种从雷公藤叶中分离雷公藤内酯醇的方法，雷公藤叶粉末通过乙醇提取，乙醇提取物先用乙酸乙酯-水体系分配，上相蒸干得到乙酸乙酯萃取物，乙酸乙酯萃取物再用石油醚-甲醇体系分配，下相蒸干得到甲醇萃取物，通过以上两次分配减少了柱层析步骤的上样量。经过简单柱层析，蒸干洗脱剂得到雷公藤内酯醇粗品，用四元两相体系对该粗品进行分配，除去色素等杂质，减少了高速逆流色谱步骤的上样量，最后通过高速逆流色谱精制得到了雷公藤内酯醇精品，其纯度在95％左右，相对干叶子得率在0.008％以上。本方法所涉及到的溶剂不含对环境和人体损害较大的氯代溶剂。

摘要： 本发明涉及一种植物有效成分的提取工艺，具体是提供一种用雷公藤叶生产雷公藤内酯醇的工艺，包括干叶磨粉→水煮→第一次浓缩→离心除杂→氯仿萃取→第二次浓缩→浸膏上硅胶柱→第三次浓缩→二次上柱→第四次浓缩→结晶→重结晶→纯品→检验入库步骤。本发明具有工艺流程简单、生产安全、收率高的优点，适合工业化生产。

摘要： 本发明公开了一种从雷公藤叶中分离雷公藤内酯醇的方法，雷公藤叶粉末通过乙醇提取，乙醇提取物先用乙酸乙酯—水体系分配，上相蒸干得到乙酸乙酯萃取物，乙酸乙酯萃取物再用石油醚—甲醇体系分配，下相蒸干得到甲醇萃取物，通过以上两次分配减少了柱层析步骤的上样量。经过简单柱层析，蒸干洗脱剂得到雷公藤内酯醇粗品，用四元两相体系对该粗品进行分配，除去色素等杂质，减少了高速逆流色谱步骤的上样量，最后通过高速逆流色谱精制得到了雷公藤内酯醇精品，其纯度在95％左右，相对干叶子得率在0.008％以上。本方法所涉及到的溶剂不含对环境和人体损害较大的氯代溶剂。