表达调控

摘要： 目的:基于肿瘤基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库的多组学数据,分析线粒体呼吸链复合体I组装因子NADH∶泛醌氧化还原酶复合体组装因子2(NADH∶ubiquinone oxidoreductase complex assembly factor 2,NDUFAF2)基因在肝癌组织中的表达、临床及预后意义,并探讨其参与肝癌发生发展的可能机制。方法:利用TCGA肝癌样本的RNA测序、全外显子组测序、单核苷酸多态芯片和DNA甲基化测序数据,分析NDUFAF2在肝癌中的表达特征及其异常高表达的可能机制。基于TCGA肝癌RNA测序数据获得与NDUFAF2高度相关性的共表达基因,进行Reactome、MSigDB通路和人类表型富集分析,并利用Cytoscape软件绘制功能网络。结果:对TCGA肝癌RNA测序数据的表达和生存分析显示,线粒体呼吸链复合体的全部亚基中,仅NDUFAF2在肝癌组织中显著高表达,且与不良的总生存率和无复发生存率均相关。肝癌组织中NDUFAF2的高表达与性别、人种、肿瘤分化程度和微血管侵犯显著相关(P均<0.05)。基因扩增和肝癌驱动基因TP53和CTNNB1的突变,以及MYC扩增是造成NDUFAF2高表达的可能原因。对肝癌组织中与NDUFAF2共表达的411个基因的富集分析显示,NDUFAF2可能通过调控细胞能量产生、氧化应激、RNA加工、蛋白翻译和c-Myc、mTORC1相关信号传导通路,促进肝癌的发生发展。结论:NDUFAF2在肝癌组织中的高表达可能通过调控RNA加工和蛋白翻译等生物学通路参与细胞癌变,可作为潜在的肝癌预后预测标志物和新的治疗干预靶点。

摘要： 为探析大豆斑疹病菌(Xanthomonas axonopodis pv.glycines,Xag)基因组中唯一注释编码内切甘露聚糖酶(mannan endo-1,4-β-mannosidase,ManA)基因是否参与Xag的内切甘露聚糖酶活性及其他功能,采用同源重组策略创制了Xag的manA基因缺失突变株(ΔmanA),并对该突变株进行功能分析.结果表明:相对于野生型,该突变株的胞外纤维素酶活性和内切甘露聚糖酶活性均显著增强,而且能形成明显的胶状物;功能互补使ΔmanA的上述3种表型均恢复至野生型水平;manA基因突变不影响菌株的生物膜形成、胞外多糖合成及蛋白酶和淀粉酶活性;负责胞外纤维素酶合成的egl2和engXCA基因也共同控制Xag的内切甘露聚糖酶活性;荧光定量PCR结果显示,ManA涉及负调控egl2和engXCA基因的表达.总之,manA基因突变导致egl2和engXCA基因的表达水平上调,从而增强菌株的内切甘露聚糖酶活性.研究为深度解析植物病原黄单胞菌Ⅱ型分泌系统胞外酶类的生物学特性提供了科学线索.

摘要： 目的分析非小细胞癌组织中β-连环蛋白(β-catenin)和程序性死亡配体1(PD-L1)在mRNA和蛋白水平中的表达,探讨二者表达水平之间的关系。方法用qRT-PCR方法检测非小细胞肺癌组织和配对的癌旁组织中β-catenin和PD-L1 mRNA表达水平;用免疫组织化学方法检测β-catenin和PD-L1蛋白表达水平,通过染色强度来评价其蛋白水平。结果和配对的癌旁组织比较,非小细胞肺癌组织中β-catenin(18/35)和PD-L1(20/35)mRNA表达水平明显升高,二者之间呈正相关(r=0.582);非小细胞肺癌组织中β-catenin(17/35)和PD-L1(22/35)蛋白表达均升高,且二者的免疫组化染色强度一致。结论非小细胞肺癌组织中β-catenin和PD-L1在m RNA和蛋白水平中表达明显升高,二者之间呈正相关,Wnt/β-catenin信号通路可能参与了非小细胞肺癌中PD-L1的表达调控,促进肿瘤进展。

摘要： 目的:探索类固醇分泌功能的肾上腺皮质三维培养体系。方法:选取2019—2021年于广西医科大学第二附属医院的流产胚胎肾上腺组织,消化成细胞悬液,基质胶包裹三维培养。培养基中添加FGF2生长因子,Wnt信号通路激活因子(CHIR99021、R-spondin1),通过病理组织染色、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、免疫荧光和透射电镜等方法检测相关基因及蛋白表达水平,并分析其对于类固醇分泌功能培养体系建成的影响。结果:(1)添加FGF2生长因子后,3D培养球体直径明显增加。(2)添加CHIR99021、R-spondin1后,球状体具有显著外层致密内层疏松的肾上腺特殊结构,更有利3D培养肾上腺立体结构的形成;(3)RT-qPCR显示3D培养形成的球状类器官结构表达SF-1、CYP17A1、CYP11A1、CYP11B1、HSD3B2类固醇合成关键酶表达,免疫荧光染色证实了CYP17A1蛋白在类器官球状结构的表达。(4)球体结构的类器官表达黑皮质素2受体(MC2R)受体,在受促肾上腺皮质激素(ACTH)刺激下,皮质醇分泌增加。结论:添加FGF2、Wnt信号通路激活因子CHIR99021、R-spondin1,可建立一种具有类固醇激素分泌功能且受促肾上腺皮质激素调控的肾上腺皮质三维培养体系。

摘要： 【目的】试验前期组学数据提示甲型流感病毒(Influenza A Virus,IAV)感染A549细胞后宿主的环状RNA(circular RNA,circRNA)hsa_circ_004389表达显著上调。为进一步明确hsa_circ_004389表达和IAV感染间的关联,研究其对IAV复制的影响。【方法】(1)采用荧光定量PCR等方法,确定在IAV病毒感染后不同时间点和不同感染复数(Multiplicity of Infection,MOI)条件下hsa_circ_004389的表达水平;(2)检测聚肌苷酸胞苷酸(Polyinosinic acid:polycytidilic acid,poly I∶C)和细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)处理后hsa_circ_004389的表达情况;(3)干扰素(Interferon,IFN)β和JAK的抑制剂处理细胞后检测hsa_circ_004389的表达情况;hsa_circ_004389过表达和敲低后,在mRNA和蛋白水平上检测该环状RNA对IAV复制的影响。【结果】宿主细胞内hsa_circ_004389表达的增加与IAV感染相关,且与病毒复制呈明显正相关,而JAK-STAT信号通路参与hsa_circ_004389的表达调控,并且hsa_circ_004389能够抑制IAV复制。【结论】hsa_circ_004389是宿主应答IAV感染的产物,为潜在的细胞Ⅰ型IFN应答IAV的拮抗因子。

摘要： 本研究旨在利用Flp-FRT位点特异性重组系统建立副猪嗜血杆菌(Glaesserella parasuis)的无抗性标记基因敲除方法,为G.parasuis的毒力因子、致病机制和基因工程疫苗研究提供有力的遗传操作工具。首先利用λ噬菌体cI857/P_(RM)/P_(R)基因表达调控系统调控Flp重组酶的表达,实现抗性突变体中抗性基因的消除;然后将Flp表达质粒电转化引入G.parasuis CF7066,再自然转化介导同源重组的自杀性质粒获得有抗性标记的基因缺失突变株,调节Flp酶表达并筛选无抗突变株,提高培养温度消除表达Flp酶的温敏质粒;进一步通过筛选突变FRT位点以保证基因敲除的效率。结果表明成功构建了温敏穿梭质粒pSHG5C-Flp,证实了λcI857/P_(RM)/P_(R)表达系统可调控Flp重组酶在G.parasuis中表达并切除抗性突变株ΔnanH::Kan_(R)中的抗性基因;然后用Flp重组酶表达质粒pSHG5C-Flp电转化G.parasuis CF7066,再用自杀性质粒pKF-ΔnanH和pKF-Δapd2对其进行两次连续自然转化,依次在自然转化的初代转化子中筛选并获得了无抗的单基因缺失株ΔnanH和双基因缺失株ΔnanHΔapd,提高培养温度至42°C培养消除了Flp重组酶表达质粒。尽管该系统实现了G.parasuis两个基因的连续敲除,但敲除第2个基因时的效率明显下降,这很可能源于细菌细胞中Flp重组酶表达的积累,对转化质粒介导的同源重组产生了干扰。因此,作者筛选了突变的FRT位点、构建自杀性质粒pKFM-Δapd进行自然转化,显著提高了自然转化后获得突变株的效率,从而保证了该敲除系统的有效性和稳定性。本研究首次报道了可用于G.parasuis的无抗性标记双基因缺失突变系统,为其分子致病基因与基因工程疫苗的研究奠定了基础。

摘要： 肌肉生长抑制素(Mstn,myostatin)也称gdf-8(growthdifferentiationfactor 8),通过负向调控肌肉组织的增殖与分化,参与动物体的生长发育过程。部分鱼类肌肉生长抑制素具有两种或以上基因型,其时空表达特征较为独特,存在调控如脑、性腺等其他组织生长发育的可能性。此外,鱼类肌肉生长抑制素的功能和作用机制与其他动物类似,可通过迟滞细胞周期对成肌细胞产生影响。本文从结构、表达、功能和作用机制等方面对鱼类肌肉生长抑制素的研究进展进行概括,并结合现代生物学技术讨论其应用和研究前景,为深入研究鱼类生长发育机制提供理论基础。

摘要： 黑色素瘤相关抗原A3(melanoma-associated antigen-A3,MAGE-A3)属于癌-睾抗原。MAGE基因家族的肿瘤特异性源于其只在肿瘤、睾丸和胎盘组织中表达,而在其他正常组织中不表达。MAGE-A3在癌症和正常细胞中的差异表达使其成为研究肿瘤治疗方法的一个有吸引力的靶点,当前有关MAGE-A3在肿瘤中的表达、调控及免疫治疗方面研究较多,而其在肿瘤化疗耐药中的作用机制在国内外报道少见。

摘要： 为研究6种外源因素处理对三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶(DXS)基因表达的影响,通过高通量转录组测序技术获得三角褐指藻dxs基因cDNA全长序列,并对其进行生物信息学分析。研究结果表明,三角褐指藻dxs基因cDNA全长2476 bp,ORF全长2193 bp,编码730个氨基酸,具有高度保守的ThDP结合位点和转酮醇酶结构域。三角褐指藻DXS蛋白为亲水性稳定蛋白,相对分子质量(M_(w))为79.31 kD,理论等电点为6.65,具有信号肽、跨膜区域、卷曲螺旋和TM-螺旋等。系统进化树分析结果表明,DXS蛋白进化树分为高等植物和藻类2个分支,高等植物DXS蛋白进一步分为DXS1和DXS2两支,藻类DXS蛋白聚类为3个分支,分别为硅藻门、红藻门和绿藻门分支,三角褐指藻聚类在硅藻门分支上。诱导表达调控结果表明,三角褐指藻dxs基因受到茉莉酸甲酯(MeJA)、花生四烯酸(AA)、硫酸铈铵(ACS)、光合诱导素(PIF)、光合抑制剂(DCMU)和光质等6种外源因素的诱导调控。在100μmol/L MeJA、62.5 mg/L AA、1.6 mg/L ACS、1.00μg/L PIF、0.2 mg/L DCMU和紫光处理下,三角褐指藻dxs基因表达量最高。在MeJA和光质处理下,三角褐指藻dxs基因表达量与岩藻黄素含量变化趋势一致,说明DXS是MeJA和光质等诱导子促进三角褐指藻岩藻黄素积累的关键酶之一。研究为进一步利用代谢工程手段提高藻细胞内岩藻黄素含量提供了良好的基因资源,为深入探索三角褐指藻岩藻黄素合成的分子调控机制提供了一定的理论依据。

摘要： 花青素是植物中广泛存在的一类水溶性天然色素,是许多植物叶片、果实、花等器官呈现丰富颜色的主要呈色物质,并广泛参与植物抵御低温、干旱等非生物胁迫及病害、虫害等各种生物胁迫的生化进程。MYB是植物中最大的转录因子家族之一,广泛参与植物的细胞形态建成、次生代谢物生物合成、分生组织形成、抵御生物及非生物胁迫等众多生理生化进程,同时也是植物花青素生物合成过程中最重要的调控因子,直接影响着花青素的种类和含量,影响花的最终呈色。本文综述了植物花青素生物代谢相关研究,总结了植物花青素的基本特征、生物合成的主要途径、涉及的主要结构基因及其功能等;综述了MYB类转录因子的结构特征及其参与植物花青素代谢调控的主要方式,并重点综述了MBW复合体在植物花青素代谢中的重要作用,以期为进一步研究花青素生物合成调控机制、花色设计育种等奠定基础。

摘要： 为了研究大丽花花瓣发育过程中XTH基因的调控作用,以大丽花(Dahlia pinnata)'单瓣黄'品种为材料,利用SYBR Green I实时荧光定量PCR技术,对大丽花现蕾期、初花期、盛花期和衰败期花瓣中DpXTH1和DpXTH2的表达变化进行了定量分析.结果表明DpXTH1和DpXTH2均在花瓣发育前期呈上调表达,至盛花期达到表达峰值,之后随着花瓣的衰老进程表达量有所下降.推测大丽花花瓣的生长发育受到DpXTHs基因的表达调控,与细胞壁组分木葡聚糖的代谢密切相关.

摘要： 为研究金黄色葡萄球菌(S.aureus)对奶牛乳腺上皮如胞(BMEC)E-cadherin表达的影响.本研究分别采用金黄色葡萄球菌及热灭活的金黄色葡萄球菌菌液作用于BMEC,金黄色葡萄球菌以MOI100:1感染细胞0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h、3.5h、4h后;热灭活的金黄色葡萄球菌菌液以不同浓度(0、104、105、106、107、108cfu/mL)剌激细胞后,利用实时荧光定量PCR方法和western blot方法检测E-cadherin mRNA及其蛋白的相对表达量.结果显示,金黄色葡萄球菌在感染细胞2h之后,E-cadherin mRNA及其蛋白的表达量较未感染组显著降低(p＜0.05);不同浓度的热灭活的金黄色葡萄球菌菌液处理细胞的E-cadherin mRNA及其蛋白的表达量较对照组显著降低(p＜0.05).本研究表明,金黄色葡萄球菌及热灭活的金黄色葡萄球菌菌液能够降低奶牛乳腺上皮细胞E-cadherin mRNA及其蛋白的表达.

摘要： 为研究金黄色葡萄球菌(S.aureus)对奶牛乳腺上皮如胞(BMEC)E-cadherin表达的影响.本研究分别采用金黄色葡萄球菌及热灭活的金黄色葡萄球菌菌液作用于BMEC,金黄色葡萄球菌以MOI100:1感染细胞0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h、3.5h、4h后;热灭活的金黄色葡萄球菌菌液以不同浓度(0、104、105、106、107、108cfu/mL)剌激细胞后,利用实时荧光定量PCR方法和western blot方法检测E-cadherin mRNA及其蛋白的相对表达量.结果显示,金黄色葡萄球菌在感染细胞2h之后,E-cadherin mRNA及其蛋白的表达量较未感染组显著降低(p＜0.05);不同浓度的热灭活的金黄色葡萄球菌菌液处理细胞的E-cadherin mRNA及其蛋白的表达量较对照组显著降低(p＜0.05).本研究表明,金黄色葡萄球菌及热灭活的金黄色葡萄球菌菌液能够降低奶牛乳腺上皮细胞E-cadherin mRNA及其蛋白的表达.

摘要： 为研究金黄色葡萄球菌(S.aureus)对奶牛乳腺上皮如胞(BMEC)E-cadherin表达的影响.本研究分别采用金黄色葡萄球菌及热灭活的金黄色葡萄球菌菌液作用于BMEC,金黄色葡萄球菌以MOI100:1感染细胞0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h、3.5h、4h后;热灭活的金黄色葡萄球菌菌液以不同浓度(0、104、105、106、107、108cfu/mL)剌激细胞后,利用实时荧光定量PCR方法和western blot方法检测E-cadherin mRNA及其蛋白的相对表达量.结果显示,金黄色葡萄球菌在感染细胞2h之后,E-cadherin mRNA及其蛋白的表达量较未感染组显著降低(p＜0.05);不同浓度的热灭活的金黄色葡萄球菌菌液处理细胞的E-cadherin mRNA及其蛋白的表达量较对照组显著降低(p＜0.05).本研究表明,金黄色葡萄球菌及热灭活的金黄色葡萄球菌菌液能够降低奶牛乳腺上皮细胞E-cadherin mRNA及其蛋白的表达.

摘要： 为研究金黄色葡萄球菌(S.aureus)对奶牛乳腺上皮如胞(BMEC)E-cadherin表达的影响.本研究分别采用金黄色葡萄球菌及热灭活的金黄色葡萄球菌菌液作用于BMEC,金黄色葡萄球菌以MOI100:1感染细胞0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h、3.5h、4h后;热灭活的金黄色葡萄球菌菌液以不同浓度(0、104、105、106、107、108cfu/mL)剌激细胞后,利用实时荧光定量PCR方法和western blot方法检测E-cadherin mRNA及其蛋白的相对表达量.结果显示,金黄色葡萄球菌在感染细胞2h之后,E-cadherin mRNA及其蛋白的表达量较未感染组显著降低(p＜0.05);不同浓度的热灭活的金黄色葡萄球菌菌液处理细胞的E-cadherin mRNA及其蛋白的表达量较对照组显著降低(p＜0.05).本研究表明,金黄色葡萄球菌及热灭活的金黄色葡萄球菌菌液能够降低奶牛乳腺上皮细胞E-cadherin mRNA及其蛋白的表达.

摘要： 为研究金黄色葡萄球菌(S.aureus)对奶牛乳腺上皮如胞(BMEC)E-cadherin表达的影响.本研究分别采用金黄色葡萄球菌及热灭活的金黄色葡萄球菌菌液作用于BMEC,金黄色葡萄球菌以MOI100:1感染细胞0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h、3.5h、4h后;热灭活的金黄色葡萄球菌菌液以不同浓度(0、104、105、106、107、108cfu/mL)剌激细胞后,利用实时荧光定量PCR方法和western blot方法检测E-cadherin mRNA及其蛋白的相对表达量.结果显示,金黄色葡萄球菌在感染细胞2h之后,E-cadherin mRNA及其蛋白的表达量较未感染组显著降低(p＜0.05);不同浓度的热灭活的金黄色葡萄球菌菌液处理细胞的E-cadherin mRNA及其蛋白的表达量较对照组显著降低(p＜0.05).本研究表明,金黄色葡萄球菌及热灭活的金黄色葡萄球菌菌液能够降低奶牛乳腺上皮细胞E-cadherin mRNA及其蛋白的表达.

摘要： 目的：检测贝伐单抗对lewis肺癌移植瘤中VEGF、CD34表达的影响.rn 方法：选择BALB/c小鼠32只,制作lewis肺癌裸鼠皮下移植瘤模型,后随机平均分为4组,分别为未用药对照组、贝伐单抗组、顺铂组、贝伐单抗联合顺铂组.用药后3周处死裸鼠,取出皮下瘤做病理切片观察血管情况,并用免疫组化方法检测VEGF及CD34,取出的血清用ELISA法检测VEGF.rn 结果：病理下,贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的裸鼠皮下瘤较未用药组坏死更少、血管更少;联合用药组较贝伐单抗组及顺铂组的坏死更少、血管更少;贝伐单抗组较顺铂组的血管更少,坏死无明显差别.ELISA下,未用药组、贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的VEGF浓度分别为(131.40±4.82)pg/ml,(111.89±5.38)pg/ml,(116.99±6.14)pg/ml,(105.46±8.87)pg/ml.贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的VEGF均比未用药组的高,差异均有统计学意义(P＜0.05).贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的VEGF之间均无统计学差异(P＞0.05).免疫组化下,CD34标记的微血管密度方面,贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的微血管密度均比未用药组更低,差异有统计学意义(P＜0.05);联合用药组的微血管密度比贝伐单抗组、顺铂的都低,差异也有统计学意义(P＜0.05).免疫组化的VEGF方面,贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的阳性数均比未用药组更低,差异有统计学意义(P＜0.05);联合用药组的VEGF阳性数比贝伐单抗组、顺铂的都低,差异也有统计学意义(P＜0.05).贝伐单抗组的VEGF阳性数比顺铂组的更低,但差异无统计学意义(P＞0.05).rn 结论：贝伐单抗能抑制lewis肺癌移植瘤的生长,可能和抑制VEGF和CD34的表达下降有关.

摘要： 目的：检测贝伐单抗对lewis肺癌移植瘤中VEGF、CD34表达的影响.rn 方法：选择BALB/c小鼠32只,制作lewis肺癌裸鼠皮下移植瘤模型,后随机平均分为4组,分别为未用药对照组、贝伐单抗组、顺铂组、贝伐单抗联合顺铂组.用药后3周处死裸鼠,取出皮下瘤做病理切片观察血管情况,并用免疫组化方法检测VEGF及CD34,取出的血清用ELISA法检测VEGF.rn 结果：病理下,贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的裸鼠皮下瘤较未用药组坏死更少、血管更少;联合用药组较贝伐单抗组及顺铂组的坏死更少、血管更少;贝伐单抗组较顺铂组的血管更少,坏死无明显差别.ELISA下,未用药组、贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的VEGF浓度分别为(131.40±4.82)pg/ml,(111.89±5.38)pg/ml,(116.99±6.14)pg/ml,(105.46±8.87)pg/ml.贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的VEGF均比未用药组的高,差异均有统计学意义(P＜0.05).贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的VEGF之间均无统计学差异(P＞0.05).免疫组化下,CD34标记的微血管密度方面,贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的微血管密度均比未用药组更低,差异有统计学意义(P＜0.05);联合用药组的微血管密度比贝伐单抗组、顺铂的都低,差异也有统计学意义(P＜0.05).免疫组化的VEGF方面,贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的阳性数均比未用药组更低,差异有统计学意义(P＜0.05);联合用药组的VEGF阳性数比贝伐单抗组、顺铂的都低,差异也有统计学意义(P＜0.05).贝伐单抗组的VEGF阳性数比顺铂组的更低,但差异无统计学意义(P＞0.05).rn 结论：贝伐单抗能抑制lewis肺癌移植瘤的生长,可能和抑制VEGF和CD34的表达下降有关.

摘要： 目的：检测贝伐单抗对lewis肺癌移植瘤中VEGF、CD34表达的影响.rn 方法：选择BALB/c小鼠32只,制作lewis肺癌裸鼠皮下移植瘤模型,后随机平均分为4组,分别为未用药对照组、贝伐单抗组、顺铂组、贝伐单抗联合顺铂组.用药后3周处死裸鼠,取出皮下瘤做病理切片观察血管情况,并用免疫组化方法检测VEGF及CD34,取出的血清用ELISA法检测VEGF.rn 结果：病理下,贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的裸鼠皮下瘤较未用药组坏死更少、血管更少;联合用药组较贝伐单抗组及顺铂组的坏死更少、血管更少;贝伐单抗组较顺铂组的血管更少,坏死无明显差别.ELISA下,未用药组、贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的VEGF浓度分别为(131.40±4.82)pg/ml,(111.89±5.38)pg/ml,(116.99±6.14)pg/ml,(105.46±8.87)pg/ml.贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的VEGF均比未用药组的高,差异均有统计学意义(P＜0.05).贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的VEGF之间均无统计学差异(P＞0.05).免疫组化下,CD34标记的微血管密度方面,贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的微血管密度均比未用药组更低,差异有统计学意义(P＜0.05);联合用药组的微血管密度比贝伐单抗组、顺铂的都低,差异也有统计学意义(P＜0.05).免疫组化的VEGF方面,贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的阳性数均比未用药组更低,差异有统计学意义(P＜0.05);联合用药组的VEGF阳性数比贝伐单抗组、顺铂的都低,差异也有统计学意义(P＜0.05).贝伐单抗组的VEGF阳性数比顺铂组的更低,但差异无统计学意义(P＞0.05).rn 结论：贝伐单抗能抑制lewis肺癌移植瘤的生长,可能和抑制VEGF和CD34的表达下降有关.

摘要： 目的：检测贝伐单抗对lewis肺癌移植瘤中VEGF、CD34表达的影响.rn 方法：选择BALB/c小鼠32只,制作lewis肺癌裸鼠皮下移植瘤模型,后随机平均分为4组,分别为未用药对照组、贝伐单抗组、顺铂组、贝伐单抗联合顺铂组.用药后3周处死裸鼠,取出皮下瘤做病理切片观察血管情况,并用免疫组化方法检测VEGF及CD34,取出的血清用ELISA法检测VEGF.rn 结果：病理下,贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的裸鼠皮下瘤较未用药组坏死更少、血管更少;联合用药组较贝伐单抗组及顺铂组的坏死更少、血管更少;贝伐单抗组较顺铂组的血管更少,坏死无明显差别.ELISA下,未用药组、贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的VEGF浓度分别为(131.40±4.82)pg/ml,(111.89±5.38)pg/ml,(116.99±6.14)pg/ml,(105.46±8.87)pg/ml.贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的VEGF均比未用药组的高,差异均有统计学意义(P＜0.05).贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的VEGF之间均无统计学差异(P＞0.05).免疫组化下,CD34标记的微血管密度方面,贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的微血管密度均比未用药组更低,差异有统计学意义(P＜0.05);联合用药组的微血管密度比贝伐单抗组、顺铂的都低,差异也有统计学意义(P＜0.05).免疫组化的VEGF方面,贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组的阳性数均比未用药组更低,差异有统计学意义(P＜0.05);联合用药组的VEGF阳性数比贝伐单抗组、顺铂的都低,差异也有统计学意义(P＜0.05).贝伐单抗组的VEGF阳性数比顺铂组的更低,但差异无统计学意义(P＞0.05).rn 结论：贝伐单抗能抑制lewis肺癌移植瘤的生长,可能和抑制VEGF和CD34的表达下降有关.

摘要： 本发明公开了CABYR-a/b在调控YAP表达和磷酸化水平及调控p73表达中的应用。本发明提供了CABYR蛋白抑制剂在如下a1)-a4)至少一种中的应用：a1)抑制YAP蛋白磷酸化和/或制备抑制YAP蛋白磷酸化的产品；a2)促进YAP蛋白表达和/或制备促进YAP蛋白表达的产品；a3)促进p73蛋白表达和/或制备促进p73蛋白表达的产品；a4)制备用于治疗和/或预防由于YAP蛋白磷酸化水平升高和/或YAP蛋白表达降低和/或p73蛋白表达降低所致疾病的药物。实验证明，沉默CABYR-a/b可提高YAP的表达量，降低YAP？S127位点的磷酸化，并提高p73蛋白的表达。本发明对于防治由于YAP蛋白表达量和磷酸化水平，以及p73蛋白表达量异常引起的疾病具有重要意义。

摘要： 本发明涉及用于提高哺乳动物细胞转基因表达的调控序列、表达载体、表达系统及其应用，属于基因工程技术领域。本发明根据CMV启动子、增强子的序列特征，结合生物学信息及实验，发明了3种用于组合启动子的调控序列，分别为人CMV启动子核心序列(hCPE)、合成的调控元件(SEE)、人巨细胞病毒即早期增强子(hCMVE)，将这三种调控序列插入表达载体的启动子上游，可以驱动外源基因高效、持续、稳定表达。同等条件下，与不含上述调控序列的表达载体相比，本发明中表达载体能显著提高外源基因的表达水平，可用于重组蛋白的生产等。

摘要： 本发明公开了上游调控因子IbSCF及其在调控紫心甘薯IbMYB1表达中的应用。本发明以紫心甘薯品系“A5”为实验材料，克隆了IbMYB1的启动子序列，通过酵母单杂交文库筛选实验，成功获得了IbMYB1基因的上游调控因子IbSCF。运用酵母单杂交回转实验和双荧光素酶报告系统检测证实，IbMYB1启动子与上游调控因子IbSCF之间存在相互作用。通过酵母双杂交和双分子荧光互补实验，研究了调控因子之间的相互作用，结果显示，IbSCF与IbEBF2存在相互作用。本发明在理论上可以丰富和深化植物花色素苷生物合成分子调控的基础理论，同时还可望为提高紫心甘薯块根中色素含量的栽培措施提供新的思路和线索。

摘要： 本发明公开了上游调控因子IbERF1及其在调控紫心甘薯IbMYB1表达中的应用。本发明以紫心甘薯品系“A5”为实验材料，克隆了IbMYB1的启动子序列，通过酵母单杂交文库筛选实验，成功获得了IbMYB1基因的上游调控因子IbERF1。运用酵母单杂交回转实验和双荧光素酶报告系统检测证实，IbMYB1启动子与上游调控因子IbERF1之间存在相互作用。亚细胞定位结果显示，IbERF1定位在细胞核。自激活活性实验结果表明，IbERF1具有自激活活性。本发明在理论上可以丰富和深化植物花色素苷生物合成分子调控的基础理论，同时还可望为提高紫心甘薯块根中色素含量的栽培措施提供新的思路和线索。

摘要： 本发明公开了上游调控因子IbWRKY1及其在调控紫心甘薯IbMYB1表达中的应用。本发明以紫心甘薯品系“A5”为实验材料，克隆了IbMYB1的启动子序列，通过酵母单杂交文库筛选实验，获得了IbMYB1基因的上游调控因子IbWRKY1。运用酵母单杂交回转实验和双荧光素酶报告系统检测证实，IbMYB1启动子与上游调控因子IbWRKY1之间存在相互作用。通过酵母双杂交和双分子荧光互补实验，研究了调控因子之间的相互作用，结果显示，IbWRKY1与IbEBF2存在相互作用。本发明在理论上可以丰富和深化植物花色素苷生物合成分子调控的基础理论，还可望为提高紫心甘薯块根中色素含量的栽培措施提供新的思路和线索。

摘要： 本发明公开了上游调控因子IbEBF2及其在调控紫心甘薯IbbHLH2表达中的应用。本发明以紫心甘薯品系“A5”为实验材料，克隆了IbbHLH2的启动子序列，通过酵母单杂交文库筛选实验，成功获得了IbbHLH2基因的上游调控因子IbEBF2。运用酵母单杂交回转实验和双荧光素酶报告系统检测证实，IbbHLH2启动子与上游调控因子IbEBF2之间存在相互作用。亚细胞定位结果显示，IbEBF2定位在细胞核。自激活活性实验结果表明，IbEBF2具有自激活活性。本发明在理论上可以丰富和深化植物花色素苷生物合成分子调控的基础理论，同时还可望为提高紫心甘薯块根中色素含量的栽培措施提供新的思路和线索。

摘要： 本发明公开了上游调控因子IbERF73及其在调控紫心甘薯IbWD40表达中的应用。本发明以紫心甘薯品系“A5”为实验材料，克隆了IbWD40的启动子序列，通过酵母单杂交文库筛选实验，成功获得了IbWD40基因的上游调控因子IbERF73。运用酵母单杂交回转实验和双荧光素酶报告系统检测证实，IbWD40启动子与上游调控因子IbERF73之间存在相互作用。亚细胞定位结果显示，IbERF73定位在细胞核。自激活活性实验结果表明，IbERF73具有自激活活性。本发明在理论上可以丰富和深化植物花色素苷生物合成分子调控的基础理论，同时还可望为提高紫心甘薯块根中色素含量的栽培措施提供新的思路和线索。

摘要： 本发明公开了热休克蛋白基因启动子在调控siRNA表达中的应用及其表达系统和重组载体，能够通过温度诱导或关闭siRNA的表达，从而控制目的基因的表达，其调控方便，不需要表达调控蛋白，能够避免机体发生免疫反应；同时在非诱导条件下不存在漏表达，将热休克蛋白基因启动子用于构建表达系统和重组载体，下游连入siRNA序列后，在热刺激下能够诱导siRNA高效表达，从而抑制目的基因的表达，为基因的靶向治疗提供了有力的工具。

摘要： 本发明公开了热休克蛋白基因启动子在调控siRNA表达中的应用及其表达系统和重组载体，能够通过温度诱导或关闭siRNA的表达，从而控制目的基因的表达，其调控方便，不需要表达调控蛋白，能够避免机体发生免疫反应；同时在非诱导条件下不存在漏表达，将热休克蛋白基因启动子用于构建表达系统和重组载体，下游连入siRNA序列后，在热刺激下能够诱导siRNA高效表达，从而抑制目的基因的表达，为基因的靶向治疗提供了有力的工具。

摘要： 一种四环素调控蛋白突变体基因及其在调控基因表达和环境检测中的应用，涉及基因工程全菌生物传感器及基因表达调控领域，四环素类抗生素诱导型操纵子基因具有如SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。该四环素类抗生素诱导型操纵子是野生型四环素调控蛋白TetR的突变子，可直接用于四环素类抗生素诱导型生物传感器的优化构建，用于检测四环素类抗生素含量，检测限高，具有良好的专一性，并且可检测包含四环素在内的八种四环素类抗生素。该四环素类抗生素诱导型操纵子基因还可用于基因表达调控，其对Dox的响应性能提高，低浓度的Dox就可使下游基因表达沉默，尽可能降低药物处理对实验结果的影响，确保实验结果的准确性。