microRNA

摘要： 背景:骨髓间充质干细胞已被广泛应用于临床治疗神经退行性相关疾病,但由于细胞在受损伤部位的存活率和迁移率低,从而降低了其疗效。目的:探讨miR-31是否能提高骨髓间充质干细胞的迁移和增殖能力。方法:培养和鉴定C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,将细胞分为对照组、miR-31 agomir组和miR-31 antagomir组。将第3代骨髓间充质干细胞接种于6孔板(1×105/孔),待细胞达到50%-80%融合度,将miR-31 agomir和miR-31 antagomir用不含血清的DMEM/F12培养基稀释后添加到6孔板,转染24 h后,用CCK-8分析细胞的增殖水平以及Transwell实验分析细胞的迁移能力,Western blot检测基质金属蛋白酶2和CXC趋化因子受体4的蛋白表达。结果与结论:①在不加转染试剂的情况下将miR-31成功转染至骨髓间充质干细胞,并发出红色荧光;②转染后,与对照组相比,miR-31 agomir组细胞的增殖能力增强,与时间呈正比(P<0.05);与对照组相比,miR-31 agomir组细胞的迁移能力增强(P<0.05),基质金属蛋白酶2和CXC趋化因子受体4蛋白表达上调(P<0.05);③结果表明,miR-31可以提高骨髓间充质干细胞的增殖能力,并且促进骨髓间充质干细胞的迁移,这为间充质干细胞高效靶向迁移至损伤部位奠定了基础。

摘要： Methylprednisolone pulse treatment is currently used fo r optic neuritis.It can speed visual recovery,but does not improve the ultimate visual outcomes.Recent studies have repo rted that miR-125 a-5 p has immunomodulatory effects on autoimmune diseases.However,it remains unclear whether miR-125 a-5 p has effects on optic neuritis.In this study,we used adeno-associated virus to overexpress or silence miR-125 a-5 p in mice.We found that silencing miR-125 a-5 p increased the latency of visual evoked potential and aggravated inflammation of the optic nerve.Ove rexpression of miR-125 a-5 p suppressed inflammation of the optic nerve,protected retinal ganglion cells,and increased the percentage of Treg cells.Our findings show that miR-125 a-5 p exhibits anti-inflammatory effects through promoting the diffe rentiation of Treg cells.

摘要： 背景:失神经骨骼肌萎缩尚缺乏较有效的治疗方法,预后差,microRNA在体内的表达谱不清楚。目的:采用高通量测序技术分析失神经支配骨骼肌萎缩大鼠microRNA表达谱及转化生长因子β1/Smad3信号通路的变化,探讨microRNA在骨骼肌萎缩中的作用及其机制。方法:12只SD大鼠随机分为2组,实验组采用坐骨神经截断的方法建立失神经肌萎缩模型,对照组仅暴露坐骨神经后缝合伤口。完整取下大鼠双侧腓肠肌计算肌湿质量比,苏木精-伊红染色观察肌萎缩和纤维化情况并测定肌纤维横截面积;应用Illumina HiSeq 2500测序技术筛查骨骼肌组织中的microRNA表达谱;结合火山图、层次聚类图、基因本体论、京都基因与基因组百科全书通路分析差异表达基因参与骨骼肌代谢的生物过程;采用实时荧光定量PCR验证候选基因在肌肉组织中的差异表达;Western blot检测转化生长因子β1、p-Smad3蛋白表达。结果与结论:①与对照组相比,实验组腓肠肌湿质量比和横截面积明显降低(P0.0),筛选出显著差异表达的microRNA共14个,其中2个表达上调,12个表达下调;③生物学功能和通路分析结果提示,miR-1247-3p、miR-132-5p、miR-21-3p、miR-363-3p、miR-451-5p等具有显著差异表达的microRNAs显著富集于细胞增殖、分化、凋亡等生物过程及转化生长因子β信号通路;④实时荧光定量PCR结果显示,miR-21-3p在实验组腓肠肌组织中呈显著低表达(P<0.001),与测序结果趋势一致;⑤Western blot结果显示,转化生长因子β1、p-Smad3蛋白表达水平较对照组明显升高(P<0.05);⑥提示microRNA在骨骼肌萎缩生理病理过程中扮演关键角色,miR-21-3p可能通过激活转化生长因子β1/Smad3信号通路的生物活性,进而在骨骼肌细胞代谢中发挥作用。

摘要： Temporal lobe epilepsy is the most common form of focal epilepsy in adults,accounting for one third of all diagnosed epileptic patients,with seizures originating from or involving mesial temporal structures such as the hippocampus,and many of these patients being refractory to treatment with anti-epileptic drugs.Temporal lobe epilepsy is the most common childhood neurological disorder and,compared with adults,the symptoms are greatly affected by age and brain development.Diagnosis of temporal lobe epilepsy relies on clinical examination,patient history,electroencephalographic recordings,and brain imaging.Misdiagnosis or delay in diagnosis is common.A molecular biomarker that could distinguish epilepsy from healthy subjects and other neurological conditions would allow for an earlier and more accurate diagnosis and appropriate treatment to be initiated.Among possible biomarkers of pathological changes as well as potential therapeutic targets in the epileptic brain are micro RNAs.Most of the recent studies had performed micro RNA profiling in body fluids such as blood plasma and blood serum and brain tissues such as temporal cortex tissue and hippocampal tissue.A large number of micro RNAs were dysregulated when compared to healthy controls and with some overlap between individual studies that could serve as potential biomarkers.For example,in adults with temporal lobe epilepsy,possible biomarkers are miR-199a-3p in blood plasma and miR-142-5p in blood plasma and blood serum.In adults with mesial temporal lobe epilepsy,possible biomarkers are miR-153 in blood plasma and miR-145-3p in blood serum.However,in many of the studies involving patients who receive one or several anti-epileptic drugs,the influence of these on micro RNA expression in body fluids and brain tissues is largely unknown.Further studies are warranted with children with temporal lobe epilepsy and consideration should be given to utilizing mouse or rat and non-human primate models of temporal lobe epilepsy.The animal models could be used to confirm micro RNA findings in human patients and to test the effects of targeting specific micro RNAs on disease progression and behavior.

摘要： 目的 探讨miRNA-132及相关蛋白Mecp2、CREB在甲基苯丙胺(methamphetamine,MA)神经毒性中的作用.方法 大鼠腹腔注射MA(10 mg·kg-1·d-1)建立1、2、4周3个不同依赖时程的MA依赖模型.取额叶皮质、海马,RT-qPCR检测miRNA-132、Mecp2 mRNA,Western blot检测Mecp2、p-Mecp2、CREB和p-CREB.结果 在额叶皮质,miRNA-132、Mecp2 mRNA在MA依赖1、2、4周组表达均升高(P<0.05和P<0.01),Mecp2表达明显降低(P<0.01),Mecp2磷酸化水平则明显升高.在海马,miRNA-132呈降低趋势,在2、4周组明显降低(P<0.01);Mecp2 mRNA表达则明显升高(P<0.01);Mecp2在1周组表达升高(P<0.05),之后呈降低趋势,在4周组表达明显降低(P<0.05);Mecp2磷酸化水平在1周组降低(P<0.01),之后呈升高趋势,在2周组明显升高(P<0.01).结论 MA可诱导miRNA-132异常表达.在额叶皮质,miRNA-132可能通过抑制mRNA的翻译,致Mecp2表达降低而发挥作用;但在海马,miRNA-132与Mecp2表达趋势未呈现反向对应关系,miRNA-132调节并不依赖于Mecp2.

摘要： 进行初步筛选,排除与文章主题无关的研究及试验,最后纳入61篇文献进行结果分析。结果与结论:①miRNAs通过直接靶向Runx2、Osterix基因或者影响其他增强或抑制Runx2、Osterix的基因表达水平,并与骨形态发生蛋白/Smads、Wnt/β-catenin信号通路和整合素等相互作用来参与成骨细胞分化的过程;②miRNAs通过刺激成骨细胞标记基因的表达调节成骨-血管生成偶联;③多项研究证实钛种植体的表面形貌影响miRNAs的表达,微/纳米结构对成骨细胞的增殖和分化具有更好的促进作用,具有纳米粗糙形貌的表面通过表达与成骨基因相关的miRNAs来改善骨组织修复的反应;④钛种植体微弧氧化涂层通过激活miRNAs促进间充质干细胞成骨分化,将miRNAs与微弧氧化钛植入物复合构建基因修饰的组织工程植入体是一个可行的方法。

摘要： 背景:细胞功能的调节是骨内种植体表面骨形成的关键,从细胞和分子的角度理解骨重建有助于提高牙种植体植入的成功率.研究发现microRNA(miRNA)作为控制细胞功能的关键因子,在牙种植体周围骨组织的细胞分化调控中可发挥重要作用.目的:文章对miRNAs在牙种植体周围骨组织修复中的作用机制、牙种植体表面形貌对miRNAs表达的影响以及miRNAs与骨组织修复的应用研究进展进行综述.方法:由第一作者在PubMed、Medline、Sciencedirect数据库检索,检索词为"microRNA,bone remodeling,dental implants,mesenchymal stem cells,titanium,osseointegration",阅读文题、摘要进行初步筛选,排除与文章主题无关的研究及试验,最后纳入61篇文献进行结果分析.结果 与结论:①miRNAs通过直接靶向Runx2、Osterix基因或者影响其他增强或抑制Runx2、Osterix的基因表达水平,并与骨形态发生蛋白/Smads、Wnt/β-catenin信号通路和整合素等相互作用来参与成骨细胞分化的过程;②miRNAs通过刺激成骨细胞标记基因的表达调节成骨-血管生成偶联;③多项研究证实钛种植体的表面形貌影响miRNAs的表达,微/纳米结构对成骨细胞的增殖和分化具有更好的促进作用,具有纳米粗糙形貌的表面通过表达与成骨基因相关的miRNAs来改善骨组织修复的反应;④钛种植体微弧氧化涂层通过激活miRNAs促进间充质干细胞成骨分化,将miRNAs与微弧氧化钛植入物复合构建基因修饰的组织工程植入体是一个可行的方法.

摘要： 目的探讨放射性视神经病变(RION)相关microRNA的差异表达及其应用价值。方法应用直线加速器对视网膜神经节细胞(RGC-5)进行照射,吸收剂量分别为0、2、4和8 Gy,分别于照射前和照射后1~7 d在显微镜下观察细胞形态的变化,测定细胞的存活状态,Real-time PCR检测microRNA在RGC-5细胞照射前后的表达情况。同时收集接受头颈部放疗并发生RION患者16例(RION组)和未发生RION患者16例(对照组),比较放疗前后外周血中microRNA表达情况。结果照射后4 Gy组和8 Gy组较其他各组细胞生长和形态发生明显改变;随着照射时间的增加,2、4、和8 Gy组细胞存活率较0 Gy组均下降(均P<0.05)。RGC-5细胞接受8 Gy照射7 d后,miR-192和miR-34a表达明显上调(均P<0.05);RION组放疗后miR-192和miR-34a均高于对照组(均P<0.05)。miR-192预测RION的敏感性和特异性分别为93.75%和81.25%,miR-34a预测RION的敏感性和特异性分别为87.75%和75.00%。结论 miR-192和miR-34a与RION有关,可作为预测其发生的血清学标志物。

摘要： MicroRNA(miRNA)在哺乳动物体内不仅能直接调控基因表达,还可通过靶基因间接参与多种信号通路的调控。miRNA参与骨骼生长、发育和修复过程,甚至引起骨骼发育修复的异常,导致骨疾病发生。改变相关miRNA及其靶基因的表达水平,可调节骨代谢,从而对骨疾病起到治疗作用。现对miRNA在动物骨骼发育与修复的功能研究进行综述,以期完善骨代谢相关生理过程机制,为骨相关疾病的治疗提供新的思路。

摘要： 植物内生菌能够促进植物生长,提高植物的抗逆性。此外,应用植物内生菌还可修复环境污染,保护濒危物种。在内生菌-植物互作过程中,一些共生相关基因及microRNA发挥了重要作用。microRNA是重要的转录后调节因子,对植物的生长发育及抵御逆境具有重要的调控作用。本文针对植物内生菌的功能和植物microRNA对植物-内生菌互作的影响进行综述,建议除了关注内生菌对植物的影响,也要加强植物对内生菌影响的研究;加强非模式植物、微生物互作及多种内生菌与植物互作中microRNA的变化及功能研究;此外,也要加强新植物内生菌资源及植物内生菌新功能的挖掘。

摘要： 细胞内源性microRNA(miRNA)在宿主与病原相互作用过程中发挥着重要的调节功能。为了分析细胞内源性miRNA与传染性法氏囊病病毒(IBDV)的相互作用，用IBDV弱毒和强毒分别感染鸡胚成纤维细胞(CEF)和SPF鸡，24 h后，取感染CEF和法氏囊组织，提取细胞总RNA，用Hy3／Hy5双色荧光标记，与miRNA芯片杂交，经芯片内标准化、芯片间标准化、表达差异比较以及聚类分析。结果显示：在IBDV弱毒感染的CEF中，有17个细胞内源性miRNA表达上调，17个miRNA表达下调;在IBDV强毒感染的鸡法氏囊组织细胞中，有30个细胞内源性miRNA表达上调，18个miRNA表达下调。根据表达差异显著的miRNA序列设计引物，用荧光定量RT-PCR方法验证芯片检测结果，两种方法的检测结果一致。本实验结果表明，IBDV感染可诱导细胞内源性miRNA表达变化，这些上调／下调的miRNA调控细胞内多种代谢和信号传导途径发生异常，引起细胞及组织器官发生病理变化。

摘要： 细胞内源性microRNA(miRNA)在宿主与病原相互作用过程中发挥着重要的调节功能。为了分析细胞内源性miRNA与传染性法氏囊病病毒(IBDV)的相互作用，用IBDV弱毒和强毒分别感染鸡胚成纤维细胞(CEF)和SPF鸡，24 h后，取感染CEF和法氏囊组织，提取细胞总RNA，用Hy3／Hy5双色荧光标记，与miRNA芯片杂交，经芯片内标准化、芯片间标准化、表达差异比较以及聚类分析。结果显示：在IBDV弱毒感染的CEF中，有17个细胞内源性miRNA表达上调，17个miRNA表达下调;在IBDV强毒感染的鸡法氏囊组织细胞中，有30个细胞内源性miRNA表达上调，18个miRNA表达下调。根据表达差异显著的miRNA序列设计引物，用荧光定量RT-PCR方法验证芯片检测结果，两种方法的检测结果一致。本实验结果表明，IBDV感染可诱导细胞内源性miRNA表达变化，这些上调／下调的miRNA调控细胞内多种代谢和信号传导途径发生异常，引起细胞及组织器官发生病理变化。

摘要： 细胞内源性microRNA(miRNA)在宿主与病原相互作用过程中发挥着重要的调节功能。为了分析细胞内源性miRNA与传染性法氏囊病病毒(IBDV)的相互作用，用IBDV弱毒和强毒分别感染鸡胚成纤维细胞(CEF)和SPF鸡，24 h后，取感染CEF和法氏囊组织，提取细胞总RNA，用Hy3／Hy5双色荧光标记，与miRNA芯片杂交，经芯片内标准化、芯片间标准化、表达差异比较以及聚类分析。结果显示：在IBDV弱毒感染的CEF中，有17个细胞内源性miRNA表达上调，17个miRNA表达下调;在IBDV强毒感染的鸡法氏囊组织细胞中，有30个细胞内源性miRNA表达上调，18个miRNA表达下调。根据表达差异显著的miRNA序列设计引物，用荧光定量RT-PCR方法验证芯片检测结果，两种方法的检测结果一致。本实验结果表明，IBDV感染可诱导细胞内源性miRNA表达变化，这些上调／下调的miRNA调控细胞内多种代谢和信号传导途径发生异常，引起细胞及组织器官发生病理变化。

摘要： 细胞内源性microRNA(miRNA)在宿主与病原相互作用过程中发挥着重要的调节功能。为了分析细胞内源性miRNA与传染性法氏囊病病毒(IBDV)的相互作用，用IBDV弱毒和强毒分别感染鸡胚成纤维细胞(CEF)和SPF鸡，24 h后，取感染CEF和法氏囊组织，提取细胞总RNA，用Hy3／Hy5双色荧光标记，与miRNA芯片杂交，经芯片内标准化、芯片间标准化、表达差异比较以及聚类分析。结果显示：在IBDV弱毒感染的CEF中，有17个细胞内源性miRNA表达上调，17个miRNA表达下调;在IBDV强毒感染的鸡法氏囊组织细胞中，有30个细胞内源性miRNA表达上调，18个miRNA表达下调。根据表达差异显著的miRNA序列设计引物，用荧光定量RT-PCR方法验证芯片检测结果，两种方法的检测结果一致。本实验结果表明，IBDV感染可诱导细胞内源性miRNA表达变化，这些上调／下调的miRNA调控细胞内多种代谢和信号传导途径发生异常，引起细胞及组织器官发生病理变化。

摘要： 细胞内源性microRNA(miRNA)在宿主与病原相互作用过程中发挥着重要的调节功能。为了分析细胞内源性miRNA与传染性法氏囊病病毒(IBDV)的相互作用，用IBDV弱毒和强毒分别感染鸡胚成纤维细胞(CEF)和SPF鸡，24 h后，取感染CEF和法氏囊组织，提取细胞总RNA，用Hy3／Hy5双色荧光标记，与miRNA芯片杂交，经芯片内标准化、芯片间标准化、表达差异比较以及聚类分析。结果显示：在IBDV弱毒感染的CEF中，有17个细胞内源性miRNA表达上调，17个miRNA表达下调;在IBDV强毒感染的鸡法氏囊组织细胞中，有30个细胞内源性miRNA表达上调，18个miRNA表达下调。根据表达差异显著的miRNA序列设计引物，用荧光定量RT-PCR方法验证芯片检测结果，两种方法的检测结果一致。本实验结果表明，IBDV感染可诱导细胞内源性miRNA表达变化，这些上调／下调的miRNA调控细胞内多种代谢和信号传导途径发生异常，引起细胞及组织器官发生病理变化。

摘要： 目的:筛选出骨髓增生异常综合征(MDS)向急性白血病转化(转白)特异性的microRNA(miRNA),以期发现可以预测MDS转白的特异性分子标志.方法：基于已建立的435例MDS患者的巢式病例对照研究队列,采用临床流行病学与分子生物学相结合的方法,应用人Agilent Human miR-NA芯片技术,通过对转白危险因素配对的病例组(转白组)和对照组(未转白组)MDS患者初诊时的骨髓单个核细胞检测,筛选出MDS转白特异性的miRNA.

摘要： 目的:筛选出骨髓增生异常综合征(MDS)向急性白血病转化(转白)特异性的microRNA(miRNA),以期发现可以预测MDS转白的特异性分子标志.方法：基于已建立的435例MDS患者的巢式病例对照研究队列,采用临床流行病学与分子生物学相结合的方法,应用人Agilent Human miR-NA芯片技术,通过对转白危险因素配对的病例组(转白组)和对照组(未转白组)MDS患者初诊时的骨髓单个核细胞检测,筛选出MDS转白特异性的miRNA.

摘要： 目的:筛选出骨髓增生异常综合征(MDS)向急性白血病转化(转白)特异性的microRNA(miRNA),以期发现可以预测MDS转白的特异性分子标志.方法：基于已建立的435例MDS患者的巢式病例对照研究队列,采用临床流行病学与分子生物学相结合的方法,应用人Agilent Human miR-NA芯片技术,通过对转白危险因素配对的病例组(转白组)和对照组(未转白组)MDS患者初诊时的骨髓单个核细胞检测,筛选出MDS转白特异性的miRNA.

摘要： 目的:筛选出骨髓增生异常综合征(MDS)向急性白血病转化(转白)特异性的microRNA(miRNA),以期发现可以预测MDS转白的特异性分子标志.方法：基于已建立的435例MDS患者的巢式病例对照研究队列,采用临床流行病学与分子生物学相结合的方法,应用人Agilent Human miR-NA芯片技术,通过对转白危险因素配对的病例组(转白组)和对照组(未转白组)MDS患者初诊时的骨髓单个核细胞检测,筛选出MDS转白特异性的miRNA.

摘要： microRNA(miRNA)是一类长度约为21～25 nt的RNA，它通过与靶mRNA互补结合在转录后水平调节靶基因表达。家猪作为一种重要的经济动物，不仅是重要的肉用家畜，也是脂肪蓄积能力最强的动物之一，是一种比啮齿类更适用于研究人类肥胖等疾病的模式动物，是研究脂肪组织形成与发育较为理想的动物模型。因此对猪中miRNA的研究也就显得尤为重要。本实验室进行了高通量的Solexa测序，获得5月龄大白猪与梅山猪背部脂肪组织的lniRNA表达谱，并对其加以实验验证。本研究不仅丰富了猪miRBase，更有利于下一步miRNA对猪脂肪代谢作用的功能研究，可以从一个全新的角度了解脂肪组织的生长发育机理。

摘要： 本发明提供一种MicroRNA捕获磁珠、制备方法及MicroRNA的检测方法，属于生物技术领域。该方法将链霉亲和素生物磁珠和生物素修饰的与待测hsa‑miRNA‑146b‑5p完全互补的ssDNA探针混合，得到MicroRNA捕获磁珠；将荧光基团FAM修饰的与ssDNA探针部分互补的荧光DNA和MicroRNA捕获磁珠混合杂交，制备得到荧光MicroRNA捕获磁珠；将含有hsa‑miRNA‑146b‑5p的待测液与荧光MicroRNA捕获磁珠混合，进行链置换反应，得到置换后的MicroRNA捕获磁珠。该方法操作简便，成本低。

摘要： 本发明属于生物技术领域，涉及一种循环microRNAs检测试剂盒和特异性检测循环microRNAs的方法及应用。该试剂盒包括：具有粘性末端的发卡结构DNA，其一部分与目标microRNA的至少一部分互补配对；双链特异性核酸酶及反应缓冲液；环状DNA探针，其一部分与发卡结构DNA的一部分互补配对；任选的以下组份之一：SYBR Gold荧光核酸染料；DNA聚合酶；DNA聚合酶反应缓冲液；4×dNTPs。本发明采用双链特异性核酸酶介导的靶标循环反应和滚环扩增反应对循环miRNAs进行特异性检测，既可以降低检测背景又可以起到双向信号放大的作用，具有操作简单、检测快速，灵敏度高、特异性好和成本低等特点。

摘要： 本发明涉及分子检测技术领域，尤其涉及microRNA检测探针组与microRNA的检测方法。本发明提供了用于microRNA检测探针组与microRNA的检测方法，该探针组设计合理，利用链替换反应使得荧光信号得到级联放大，从而实现了对细胞内miRNA的检测。该方法无需严格的操作条件，操作简单，特别是在miRNA分子低表达的细胞或者组织中具有非常好的优势。解决了在之前的检测技术中存在检测体系中信号分子输出中伴随着目标链损失的巨大困难。实验表明，采用本发明提供的探针对miRNA进行检测，能够使荧光信号在1h左右达到最高，且最大程度避免了荧光信号泄露现象的产生。

摘要： 本发明涉及医学生物检测技术领域，本发明提供了MicroRNA‑4454和MicroRNA‑7975在制备检测银屑病试剂或试剂盒中的应用。本发明通过前期应用Real‑Time PCR Array技术发现了在银屑病患者指甲中MicroRNA‑4454和MicroRNA‑7975水平存在显著下调，进而提供了从人类指甲提取RNA技术方法和试剂盒及利用该试剂盒提取指甲microRNA进行Real‑Time PCR检测，能够准确发现银屑病患者指甲中MicroRNA‑4454和MicroRNA‑7975水平的下调。本发明的试剂盒及方法可早期预测银屑病的发生和进行早期诊断，对于银屑病的防治具有重要意义。本发明是一种早期预测难治性皮肤疾病‑‑银屑病提供了新的临床检测方法。

摘要： 本发明公开了人工合成的microRNA簇及其构建方法与所用合成microRNA单元。该microRNA簇，是由X个合成miRNA单元串联而成的RNA分子，所述合成miRNA单元是人工合成的pri‑miRNA，X为4‑18的一个自然数，所述X个合成miRNA单元特异靶向1个或1个以上且不超过X个的位点；每个所述合成miRNA单元是SEQ ID No.1至SEQ ID No.4所示的四种RNA中的任一种RNA；SEQ ID No.1‑4中，第29‑49位是靶向靶基因mRNA的miRNA的反义序列，第69‑87位是该miRNA的正义序列。该microRNA簇没有明显的位置效应并具有低的脱靶效应。

摘要： 本发明提供一种MicroRNA捕获磁珠、制备方法及MicroRNA的检测方法，属于生物技术领域。该方法将链霉亲和素生物磁珠和生物素修饰的与待测hsa‑miRNA‑146b‑5p完全互补的ssDNA探针混合，得到MicroRNA捕获磁珠；将荧光基团FAM修饰的与ssDNA探针部分互补的荧光DNA和MicroRNA捕获磁珠混合杂交，制备得到荧光MicroRNA捕获磁珠；将含有hsa‑miRNA‑146b‑5p的待测液与荧光MicroRNA捕获磁珠混合，进行链置换反应，得到置换后的MicroRNA捕获磁珠。该方法操作简便，成本低。

摘要： 本发明属于生物技术领域，涉及一种循环microRNAs检测试剂盒和特异性检测循环microRNAs的方法及应用。该试剂盒包括：具有粘性末端的发卡结构DNA，其一部分与目标microRNA的至少一部分互补配对；双链特异性核酸酶及反应缓冲液；环状DNA探针，其一部分与发卡结构DNA的一部分互补配对；任选的以下组份之一：SYBR Gold荧光核酸染料；DNA聚合酶；DNA聚合酶反应缓冲液；4×dNTPs。本发明采用双链特异性核酸酶介导的靶标循环反应和滚环扩增反应对循环miRNAs进行特异性检测，既可以降低检测背景又可以起到双向信号放大的作用，具有操作简单、检测快速，灵敏度高、特异性好和成本低等特点。

摘要： 本发明涉及一种microRNA检测试剂盒和多生物素分子检测microRNA的方法。本发明将待测microRNA分子与放大桥分子、捕获桥分子一起加入到固相上进行杂交，通过捕获桥分子分别与microRNA分子和捕获分子的部分杂交，将microRNA分子捕获到固相上，而放大桥分子的一端与靶分子杂交识别，另一端与下一步加入的放大分子结合，放大分子上连接的多个生物素分子再与标记物如辣根过氧化物酶结合，最终实现microRNA分子的检测过程。本发明方法十分灵敏，而且是通过信号放大而不是基于PCR的模板扩增技术来实现对核酸的检测，从而避免PCR固有的污染问题。

摘要： 本发明公开了人工合成的microRNA簇及其构建方法与所用合成microRNA单元。该microRNA簇，是由X个合成miRNA单元串联而成的RNA分子，所述合成miRNA单元是人工合成的pri-miRNA，X为4-18的一个自然数，所述X个合成miRNA单元特异靶向1个或1个以上且不超过X个的位点；每个所述合成miRNA单元是SEQ ID No.1至SEQ ID No.4所示的四种RNA中的任一种RNA；SEQ ID No.1-4中，第29-49位是靶向靶基因mRNA的miRNA的反义序列，第69-87位是该miRNA的正义序列。该microRNA簇没有明显的位置效应并具有低的脱靶效应。

摘要： 本发明涉及分子检测技术领域，尤其涉及microRNA检测探针组与microRNA的检测方法。本发明提供了用于microRNA检测探针组与microRNA的检测方法，该探针组设计合理，利用链替换反应使得荧光信号得到级联放大，从而实现了对细胞内miRNA的检测。该方法无需严格的操作条件，操作简单，特别是在miRNA分子低表达的细胞或者组织中具有非常好的优势。解决了在之前的检测技术中存在检测体系中信号分子输出中伴随着目标链损失的巨大困难。实验表明，采用本发明提供的探针对miRNA进行检测，能够使荧光信号在1h左右达到最高，且最大程度避免了荧光信号泄露现象的产生。