免疫逃逸

摘要： 目的构建基于噬菌体展示技术和新型冠状病毒的抗体检测方法,并验证其应用效果。方法制备含有新型冠状病毒受体结合域(RBD)及E484K、N501Y突变RBD片段的重组噬菌体,采用Western blotting法验证重组噬菌体展示效果。使用高吸附ELISA板包被RBD抗体及包被液作为实验组及对照组,分别加入RBD、突变RBD重组噬菌体以结合抗体,qPCR法扩增噬菌体的基因片段以间接地反映抗体与重组噬菌体的特异性结合情况。使用高吸附ELISA板包被经RBD免疫后分离的羊驼血清,加入含RBD片段的重组噬菌体及不含重组片段的噬菌体,qPCR法观察重组噬菌体在生物样本中与RBD抗体的特异性结合情况。使用高吸附ELISA板包被RBD抗体,加入含RBD及含突变RBD的重组噬菌体,qPCR法观察点突变对RBD与抗体结合能力的影响。结果通过Western blotting可以检测到清晰且符合预期大小的重组噬菌体条带。包被RBD抗体的实验组扩增噬菌体基因片段拷贝数均高于对照组(P均<0.01);加入含RBD片段重组噬菌体的羊驼血清扩增片段拷贝数高于加入无外源片段噬菌体的扩增片段拷贝数(P<0.01);加入含RBD片段重组噬菌体的RBD抗体扩增片段拷贝数高于加入含突变RBD片段重组噬菌体的扩增片段拷贝数(P<0.01)。结论成功构建基于噬菌体展示技术的抗体检测方法,该方法展示新型冠状病毒RBD片段的效果良好,并且在研究由病原突变导致的免疫逃逸方面具有潜在价值。

摘要： 人巨细胞病毒(HCMV)感染人体后终身潜伏体内,与人体免疫系统相互作用,其中体液免疫、细胞免疫均参与这一过程。HCMV感染后能在体内持续存在很大程度上与机体细胞免疫长期争斗有关,在感染早期,机体的自然杀伤细胞首先进行免疫应答,之后T细胞参与适应性免疫过程,以上针对HCMV的细胞免疫均能在不同时期控制HCMV的复制和增殖,但HCMV也会削弱机体抗病毒免疫及其他免疫功能,以逃避免疫系统对其控制和限制,从而在体内终身潜伏。进一步了解HCMV感染机体的细胞免疫学机制,可为临床上HCMV特异性T细胞过继细胞免疫治疗HCMV感染性疾病提供依据。

摘要： 目的研究不同宫颈组织中HPV16/18 E6和TRIM25蛋白表达水平及意义。方法选取宫颈癌患者105例、CINIⅠ~Ⅲ患者62例、CINⅠ患者58例和慢性宫颈炎患者50例,免疫组织化学方法检测在各宫颈组织中HPV16/18 E6和TRIM25的表达情况。用Spearman相关分析法分析HPV16/18 E6和TRIM25表达在宫颈癌组织中的相关性。用Kaplan-Meier法分析HPV16/18 E6和TRIM25表达水平与宫颈癌患者预后的关系;COX回归分析法分析宫颈癌患者预后的危险因素。结果HPV16/18 E6、TRIM25在不同宫颈组织中表达比较,差异有统计学意义。HPV16/18 E6和TRIM25在宫颈癌组织中表达水平呈负相关。HPV16/18 E6表达与组织分化程度、淋巴结转移、肿瘤直径有关,TRIM25表达与组织分化程度、淋巴结转移有关。HPV16/18 E6阳性表达患者的总生存期短于阴性表达患者。TRIM25阴性表达患者的总生存期短于阳性表达患者。淋巴结转移、HPV16/18 E6可作为宫颈癌患者预后的独立危险因素,TRIM25可作为宫颈癌患者预后的独立保护因素。结论HPV16/18 E6、TRIM25表达与不同宫颈病变的发生、发展及预后有关,有望成为HPV感染及宫颈癌辅助基因治疗的靶点。

摘要： 多原发癌(multiple primary cancer,MPC)是指同一患者患两个及以上、无相关性的恶性肿瘤,诊断标准多参考1932年Warren等[1]的论述,国内的发生率约为0.46%~4.1%[2]。恶性肿瘤的发生与免疫监察功能紊乱密切相关,免疫逃逸是肿瘤细胞的十大特征之一[3],而多原发癌更与机体免疫功能异常、免疫逃逸关系密切[4]。

摘要： 目前,迫切需要探索免疫检查点阻断治疗的耐受机制,并确定一种联合治疗策略以提高其在HCC治疗中的有效性。作为免疫豁免器官,肝脏含有大量巨噬细胞,包括常驻细胞(例如Kupffer细胞)和募集的巨噬细胞。浸润肿瘤组织的巨噬细胞也称为肿瘤相关巨噬细胞(TAM),在功能和表型上与交替激活的(M2样)巨噬细胞相似,在肿瘤进展、免疫逃逸和ICB治疗抵抗中起重要作用。

摘要： 结合纳米技术开发新剂型药物已成为提高免疫逃逸能力和增加治疗效率低的天然化合物局部药物浓度的有效策略。青蒿素和原花青素具有良好的抗动脉粥样硬化活性,但是两者药物体内清除速度快,生物利用度低,对动脉粥样硬化的治疗有限。

摘要： 目的:探究特异性溶瘤腺病毒(Ad-Mock、Ad-T)对肺癌细胞上PD-L1表达的调控作用及对细胞凋亡的影响。方法:采用荧光定量PCR法及Western blot检测溶瘤腺病毒在24 h和48 h对NCI-H446、NCI-H226、A549细胞表达PD-L1的影响;通过结晶紫染色、WST-1、Hoechst与JC-1法检测溶瘤腺病毒对肺癌细胞的凋亡抑制作用。结果:特异性溶瘤腺病毒在24 h和48 h均可抑制肺癌细胞表达PD-L1,抑制情况为Ad-T>Ad-Mock,且PD-L1表达量与作用时间呈负相关;溶瘤腺病毒对3种肺癌细胞均具有抑制作用并通过降低线粒体膜电位的方式诱导细胞凋亡,且抑制效果为Ad-T>Ad-Mock,抑制作用与时间呈正相关。结论:特异性溶瘤腺病毒可以抑制肺癌细胞PD-L1的表达并可诱导肺癌细胞的凋亡,对肺癌细胞具有抑制作用。

摘要： 卵巢癌在女性生殖系统恶性肿瘤中死亡率居首位,传统的手术和化疗对其生存率提高有限,免疫治疗是目前充满潜力的肿瘤治疗方式,卵巢癌有效免疫治疗的前提是对其免疫逃逸机制全面深刻的理解。卵巢癌的免疫逃逸机制包括卵巢癌相关抗原无法被识别、抗原递呈细胞的抑制、肿瘤杀伤性免疫细胞的抑制、免疫抑制细胞的激活等。

摘要： 细胞毒性T淋巴细胞(CTL)在识别肿瘤细胞后,释放穿孔素(Perforin)和颗粒酶(Granzymes)损伤肿瘤细胞的细胞膜并诱导其凋亡。然而,肿瘤细胞可通过修复细胞膜的损伤等途径逃避CTL的杀伤,但其修复膜损伤的具体机制尚不明确。近日,来自基因泰克(Genentech)的研究人员发现内吞体分选转运复合体(ESCRT)参与的细胞膜修复机制介导了肿瘤细胞的免疫逃逸,抑制ESCRT能够促进CTL对肿瘤细胞的杀伤。

摘要： 新型冠状病毒肺炎(Coronavirus disease 2019,COVID-19),简称“新冠肺炎”,是由严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)引起的急性呼吸道传染病。SARS-CoV-2的变异株中,有些表现出高传染性、免疫逃逸等特性,这些变异株被归为“需要关注的变异株”(variants of concern,VOC)。2021年11月新发现的omicron变异株是目前第五种VOC,其突变数量众多,传染性大幅增强,能够逃逸中和抗体,而致病性似乎有所减弱。本文就omicron的突变及其潜在的功能与特性的改变作一简要综述。

摘要： 经典型霍奇金淋巴瘤(cHL)是一个少见的B细胞来源恶性肿瘤,其恶性霍奇金和RS细胞(HRS)被大量但是不起作用的浸润炎症/免疫细胞包绕.这种令人惊异的现象提示恶性HRS细胞逃脱了免疫监控,肿瘤微环境中的免疫细胞对其生存和发育毫无作用.之前已经发现cHL存在免疫逃逸的遗传基础:几乎无一例外出现染色体9p24.1拷贝数改变,由此相应的PD-1配体基因位点,CD274/PD-L1和PDCD1LG2/PD-L2等的改变,以及这些配体拷贝数依赖性表达增加.HRS细胞表达PD-1配体被认为占用了肿瘤微环境中的PD-1受体阳性免疫效应细胞,从而诱导PD-1通路活化及相应的免疫逃逸.cHL中PD-1强化的遗传基础使这类肿瘤对PD-1阻滞特别有效.

摘要： 肿瘤免疫逃逸是目前研究的热点也是治疗的难点.近年来研究者在荷瘤鼠及肿瘤患者中都发现髓系来源的抑制细胞(MDSCs)的增多,且其与肿瘤免疫逃逸密切相关.大量体内外实验都证实中医药具有调节MDSCs的作用.本文就近几年来有关MDSCs、MDSCs负向免疫调节作用及中医药治疗研究进展做一综述.

摘要： 远处转移是恶性肿瘤的主要致死原因。目前的研究发现肿瘤细胞发生上皮．间质转化可以增加肿瘤细胞侵犯血管、转移和抗凋亡的能力，是肿瘤发现远处转移的重要步骤。循环肿瘤细胞(circulating tumorcells)是进入血液循环中的具有高转移潜能的肿瘤细胞。目前己在肺癌，乳腺癌等多种实体肿瘤中报道CTC数量与患者的预后存在明显的负相关性，且FDA己批准将CTC数量作为肺癌及乳腺癌的检测指标。目前各种CTC富集技术基本上是基于以下三种原理：免疫捕获、细胞大小、其他特征的识别（如细胞密度、电荷、形变能力等），前两种是目前应用较多的方法。富集后对其中的CTC进行鉴定，目前主要通过免疫荧光、荧光定量PCR、FISH等分子方法检测某个或某些生物标志物而实现。CTC从肿瘤局部进入循环系统后面临机体多重因素的打击，包括离开原发灶引起的失巢凋亡，血流的剪切力，大量免疫细胞的攻击等。在这些因素的作用下，大约只有千分之一的肿瘤细胞能存活下来进入转移至远处器官。目前认为CTC的免疫逃逸机制存在以下几个方面：1．一些CTC细胞具有肿瘤干细胞的特性，高表达干细胞基因，同时低表达MHC-I等分子，不易被化疗药物及免疫细胞识别杀伤；2．肿瘤病人中，DC细胞低表达TLR2/4，导致APC功能减弱，影响CTL及NK细胞的杀伤能力；CTC可以表达一些如CD47避免免疫细胞杀伤，还可以高表达FAS等诱导NK细胞凋亡；3．血小板在肿瘤细胞原位经历EMT过程，到在外周循环中形成CTC外壳保护其免受免疫细胞攻击，及促进其粘附于血管壁，并进一步穿过进入远处器官形成新的转移灶三个步骤中都起了关键性的作用。以上理论依据，为未来在研究如何克服肿瘤转移，逆转CTC的免疫耐受提供了新的思路。

摘要： 目的：丝氨酸蛋白酶抑制剂9(PI-9)与肿瘤免疫逃逸密切相关,雌激素可促进PI-9的表达.观察他莫昔芬(TAM)对雌激素受体β(ERβ)阳性的结肠癌Caco2细胞株,在雌激素诱导后PI-9表达和细胞凋亡的影响. 方法：筛选ERβ和PI-9阳性表达的结肠癌细胞株,确定雌激素预处理后促细胞增殖的最佳效应浓度,采用CCK8法检测TAM对雌激素预处理结肠癌细胞的增殖情况,RT-PCR和Western Blot法检测TAM干预后PI-9mRNA和PI-9蛋白表达的变化,流式细胞术检测凋亡情况. 结果：与雌激素100nmol/L千预对照组比较,TAM(0.1～10.0umol/L)可浓度依懒性地抑制雌激素(100nmol/L)诱导的结肠癌细胞的增殖活性,抑制雌激素诱导的PI-9mRNA和PI-9蛋白的表达(P＜0.05),PI-9被抑制后Caco2细胞的凋亡率显著升高. 结论：TAM作为雌激素受体拮抗剂,可显著抑制雌激素诱导的PI-9表达和细胞增殖活性,促进肿瘤细胞凋亡,TAM可能通过抑制PI-9表达阻碍PI-9介导的免疫逃逸机制的发生.

摘要： 肿瘤细胞表达PD-L1是发生免疫逃逸的重要原因.研究PD-L1在肿瘤中表达的调控途径,有助于进一步认识肿瘤细胞的免疫逃逸机制,将提高抗PD-L1治疗效果.

摘要： 三叶青黄酮可下调小鼠外周血、肿瘤组织、骨髓中MDSCs、Tregs和M2细胞的数量;能够下调小鼠外周血、肿瘤组织中相关因子(IL-10、TGF-β1、COX2/PGE2)的表达；具有抗肿瘤的作用，且抑瘤效果呈剂量依赖性，高剂量组效果最佳。

摘要： 猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起猪或野猪发病的急性传染病,临床上以全身败血症和白细胞减少的免疫抑制为主要特征.CSFV如何对宿主细胞的代谢进行调控,为自身复制提供充足的物质与能量的机制至今尚未完全阐明.本研究首次运用代谢组学技术证明了CSFV感染西藏小型猪后部分血浆代谢物浓度上调或下降,CSFV通过调节宿主体内糖代谢途径、氨基酸代谢途径、三羧酸循环与脂类代谢途径促进病毒复制与免疫逃逸.

摘要： 免疫逃逸是疱疹病毒重要的致病机制之一,通过下调宿主细胞MHC-Ⅰ分子干扰抗原递呈通路是逃避先天性免疫的重要途径,研究病毒下调MHC-Ⅰ的分子机理对于阐明病毒逃逸宿主先天性免疫的机制至关重要.猪伪狂犬病病毒(PRV)是当前危害中国养猪业的重要病原之一,本实验室的前期研究发现目前我国流行的PRV HB1201毒株能够下调猪肾细胞(PK15)SLAⅠ类分子的表达,但调控机制尚不清晰.本研究拟以猪肾细胞(PK15)作为病毒感染的靶细胞,通过流式细胞术、Western blot验证PRV下调SLAⅠ类分子的能力;利用免疫共沉淀、激光共聚焦验证与SLAⅠ类分子互作的病毒蛋白;通过感染性克隆确定能够下调SLAⅠ类分子的病毒蛋白并研究下调机制.研究结果将为解析PRV逃避宿主细胞先天性免疫的机制提供线索,也为抗PRV药物及新型疫苗的研发提供新的思路.

摘要： 肿瘤具有免疫原性,在人类肿瘤组织中可发现大量肿瘤浸润性淋巴细胞;大多数肿瘤患者在接受主动免疫治疗后可以检测到参与应答反应的肿瘤抗原特异性T细胞.但是主动免疫治疗并未给患者带来显著的临床获益,究其原因发现肿瘤微环境中的免疫抑制状态削弱了效应细胞的杀瘤活性.因此深入研究肿瘤与免疫系统的相互作用，将有助于提高临床生物治疗的疗效。

摘要： 2012年以来,中国多地免疫伪狂犬基因缺失苗的猪场爆发伪狂犬病.为了解新流行PRVFJ-2015株的主要免疫相关基因序列遗传进化情况,本研究参照GenBank已公布的PRV全基因序列设计了4对特异性扩增引物,并将扩增片段进行克隆及测序分析.结果显示gB、gC及gD基因氨基酸序列与其他来源的分离株同源性分别为96.5％-100％、92.1％-100％和97.3％-100％;遗传进化关系表明PRV FJ-2015毒株gB、gC基因在毒株分离国家与分离时间具有一定遗传演化关系,gD基因具有福建区域性遗传演化关系;免疫相关基因的氨基酸序列均存在一定程度的差异,可能影响了病毒抗原性,是造成疫苗抗体不能完全中和病毒的原因之一.

摘要： 公开了能够将大蛋白质(例如CD45、CD148和CD43)截留在移植细胞和CD45阳性宿主效应细胞(例如T细胞、NK细胞、B细胞或树突细胞)之间的细胞界面中间的治疗剂以及它们的使用方法和由这种治疗剂制成的产品。所述治疗剂防止或抑制功能性免疫突触(包括生理性SMAC)的形成。它们还导致了信号转导途径的持续去磷酸化。

摘要： 本发明公开了一种靶向树突状细胞促进抗原溶酶体逃逸激活免疫系统的抗原递送载体其制备方法与应用。本发明提供了一种用于向体内递送抗原的载体，该载体是利用聚乙烯亚胺和甘露糖对金属骨架材料进行功能化修饰所得的金属骨架复合物。本发明提供的抗原递送载体粒径均一、分散性好、生物安全性高、对抗原负载量大，展现出对树突状细胞的的高靶向性，增加树突状细胞对抗原的摄取，促进树突状细胞的成熟，并促使抗原在树突状细胞内的交叉递呈，能够高效的激活CD4+和CD8+T细胞，引起强烈的免疫反应，杀伤癌细胞。该载体应用广泛，可实现对单种、多种抗原的包覆，对常见肿瘤均具有杀伤能力。

摘要： 本发明涉及一种免疫逃逸纳米制剂，属于生物医药技术领域。所述免疫逃逸纳米制剂包括纳米胶束和包载于所述纳米胶束内的抗肿瘤药物，所述纳米胶束由多肽MSP和胶束材料Mal‑PEG‑PCL连接而成，所述多肽MSP为基于β2M与LILRB1相互作用的晶体结构设计而成，氨基酸序列为Cys‑GPLGVRGTLSQPKIVKWDRDM，将其与Mal‑PEG‑PCL偶联后，能够形成主动逃逸巨噬细胞吞噬的纳米胶束，将抗肿瘤药物包载于该纳米胶束后获得免疫逃逸纳米制剂，该纳米制剂能够主动逃逸巨噬细胞吞噬，并且能够被肿瘤相关巨噬细胞摄取。

摘要： 本发明提供了一种抑制肿瘤免疫逃逸多肽的应用。A11多肽为膜联蛋白A1(ANXA1)氨基端20‑30位氨基酸衍生肽(EYVQTVKSSKG)。通过一系列实验证实，A11多肽借助穿膜肽CPP(YGRKKRRQRRR)进入肿瘤细胞，与去泛素化酶USP7竞争性结合PD‑L1，增加PD‑L1的泛素化降解，显著下调乳腺癌、肺癌及黑色素瘤细胞PD‑L1的水平，抑制肿瘤免疫逃逸，发挥体外和小鼠体内抗肿瘤作用。此外，A11和PD‑1单抗(mAb)联合应用在小鼠体内具有协同抗肿瘤免疫逃逸的作用。因此，A11多肽可作为免疫检查点阻断治疗的新策略，用于肿瘤免疫治疗，具有重要的临床应用价值。

摘要： 本发明公开了一种免疫逃逸CD47过表达外泌体的制备方法，包括(1)构建CD47过表达质粒，并包装到慢病毒中形成CD47过表达慢病毒；(2)将此慢病毒转染大鼠脂肪间充质干细胞(ADMSC)构建稳定的CD47过表达细胞株(CD47‑ADMSC)；(3)分离并纯化第五代CD47‑ADMSC来源的CD47‑ES，即获得具有免疫逃逸潜能的CD47过表达外泌体。利用本方法成功构建的CD47‑ES表达量是普通ADMSC外泌体(ADMSC‑ES)的1.7倍，且CD47‑ES在大鼠体内的滞留量(即免疫逃逸量)高于ADMSC‑ES，约为ADMSC‑ES的1.377倍，因此利用本方法构建的CD47‑ES具有较强的免疫逃逸能力，能延长其作为药物载体在动物体内发挥功能的时间。

摘要： 开发了一种方案，用于对减毒病原体诸如流感病毒遗传工程化，使得其可以在没有干扰素的细胞中生长但在具有干扰素的细胞中生长被抑制。该方案包括系统性地鉴定病原体的基因组的免疫逃逸功能区域，然后消除免疫逃逸功区域能同时维持病原体的一定复制适合度。所得的减毒病原体引起强免疫应答并且可以被用于减毒活疫苗中。

摘要： 本发明提供一种能抑制炎症及免疫逃逸的抗癌四价铂配合物及制备方法，具体涉及生物医药领域，其分子结构如下：合成方法如下：S1、将二价铂配合物与双氧水H2O2反应，得到四价铂配合物；S2、将S1中所得的四价铂配合物与O‑苯并三氮唑‑N,N,N′,N′‑四甲基脲四氟硼酸(TBTU)、三乙胺(TEA)混合在N,N‑二甲基甲酰胺(DMF)溶液中，搅拌混合均匀；S3、待反应结束后，收集滤液，浓缩至0.5至5mL，滴加乙醇和水的混合物，离心收集沉淀；随后将沉淀物溶解在甲醇中，用乙醚洗涤沉淀3次，真空干燥即可获得目标产品。本发明所涉及的四价铂配合物不仅对肿瘤细胞具有很强的毒活性，而且通过多个作用靶点抑制炎症和免疫逃逸，在活体上表现出优异的抗肿瘤效果。

摘要： 本发明公开了一种能靶向Her2并干扰PD‑1降低肿瘤免疫逃逸的CAR‑T载体，包括：用于嵌合抗原受体基因的真核转录的人EF1α启动子，如SEQ ID NO.1所示；3′UTR中的PD‑1shRNA，所述PD‑1shRNA的序列如SEQ ID NO.25所示；基因传递载体；以及用于组成集识别、传递、启动于一体的二代CAR或三代CAR的嵌合抗原受体，该嵌合抗原受体包括Her2单链抗体轻链VL和Her2单链抗体重链VH。此外，本发明还公开了该载体的构建方法及其在制备干扰PD‑1降低肿瘤免疫逃逸的药物中的应用。本发明所采用的针对Her2的CAR‑T技术，并通过干扰T淋巴细胞内PD‑1的表达，抑制肿瘤细胞免疫逃逸的发生，增强T淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤，从而提高CAR‑T免疫疗法抗脑胶质瘤效果。

摘要： 本发明公开了一种能靶向Her2并封闭PD‑L1降低肿瘤免疫逃逸的CAR‑T载体，包括：用于嵌合抗原受体基因的真核转录的人EF1α启动子，如SEQ ID NO.1所示；用于组成集识别、传递、启动于一体的二代CAR或三代CAR的嵌合抗原受体，该嵌合抗原受体包括Her2单链抗体轻链VL和Her2单链抗体重链VH；IRES核糖体结合序列，如SEQ ID NO.10所示；PD‑L1 scFv以及基因传递载体。此外，本发明还公开了该载体的构建方法及其在制备降低肿瘤免疫逃逸的药物中的应用。本发明所采用的针对Her2的CAR‑T技术，并通过T淋巴细胞内表达的PD‑L1 scFv，封闭肿瘤细胞表面的PD‑L1，阻止PD‑1与PD‑L1的相互作用，抑制肿瘤细胞免疫逃逸的发生，增强T淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤，从而提高CAR‑T免疫疗法抗脑胶质瘤效果。

摘要： 本发明公开了一种靶向EGFRvIII干扰PD‑1降低肿瘤免疫逃逸的CAR‑T载体，包括：用于嵌合抗原受体基因的真核转录的人EF1α启动子，如SEQ ID NO.1所示；3′UTR中的PD‑1shRNA，所述PD‑1shRNA的序列如SEQ ID NO.25所示；基因传递载体；以及用于组成集识别、传递、启动于一体的二代CAR或三代CAR的嵌合抗原受体，该嵌合抗原受体包括EGFRvIII单链抗体轻链VL和EGFRvIII单链抗体重链VH。此外，本发明还公开了该载体的构建方法及其在制备干扰PD‑1降低肿瘤免疫逃逸的药物中的应用。本发明所采用的针对EGFRvIII的CAR‑T技术，并通过干扰T淋巴细胞内PD‑1的表达，抑制肿瘤细胞免疫逃逸的发生，增强T淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤，从而提高CAR‑T免疫疗法抗脑胶质瘤效果。