紧密连接蛋白

摘要： 背景:研究发现,干细胞衍生的外泌体可通过多种途径促进脊髓损伤后运动功能的恢复.目的:研究骨髓间充质干细胞来源外泌体是否通过减轻血脊髓屏障的破坏来促进脊髓损伤后运动功能的恢复.方法:60只SD大鼠随机分成假手术组、模型组和外泌体组(n=20),采用改良Allen's法建立大鼠脊髓损伤模型,外泌体组在损伤后30 min,1 d分别经尾静脉注射200μL骨髓间充质干细胞来源外泌体,在损伤后第3天,通过伊文思蓝染色观察血脊髓屏障通透性,Western blot检测基质金属蛋白酶9及紧密连接蛋白claudin-5,Occludin,ZO-1的表达,明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶9的活性,免疫荧光检测中性粒细胞浸润情况,苏木精-伊红染色观察脊髓损伤形态学变化;在损伤后第1,3,5,7,10,14,21天,采用BBB评分量表评价运动功能恢复情况.结果 与结论:①外泌体组大鼠的BBB评分在第10,14,21天显著高于模型组(P<0.05),苏木精-伊红染色结果显示外泌体组相比于模型组损伤区明显缩小(P<0.05);②外泌体治疗后血脊髓屏障染料渗出量显著减少(P<0.05),紧密连接蛋白claudin-5、Occludin、ZO-1的表达相比于模型组显著增加(P<0.05);③外泌体抑制基质金属蛋白酶9的表达和活性(P<0.05);④损伤后第3天于病变部位观察到髓过氧化物酶阳性的中性粒细胞浸润,外泌体治疗能显著减少中性粒细胞的浸润(P<0.05);⑤结果表明,骨髓间充质干细胞来源外泌体通过下调基质金属蛋白酶9的表达和活性来减少紧密连接蛋白的降解,从而减轻血脊髓屏障的破坏和随后的中性粒细胞浸润,进而促进脊髓损伤后运动功能的恢复.

摘要： 背景:研究发现,干细胞衍生的外泌体可通过多种途径促进脊髓损伤后运动功能的恢复。目的:研究骨髓间充质干细胞来源外泌体是否通过减轻血脊髓屏障的破坏来促进脊髓损伤后运动功能的恢复。方法:60只SD大鼠随机分成假手术组、模型组和外泌体组(n=20),采用改良Allen’s法建立大鼠脊髓损伤模型,外泌体组在损伤后30 min,1 d分别经尾静脉注射200μL骨髓间充质干细胞来源外泌体,在损伤后第3天,通过伊文思蓝染色观察血脊髓屏障通透性,Western blot检测基质金属蛋白酶9及紧密连接蛋白claudin-5,Occludin,ZO-1的表达,明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶9的活性,免疫荧光检测中性粒细胞浸润情况,苏木精-伊红染色观察脊髓损伤形态学变化;在损伤后第1,3,5,7,10,14,21天,采用BBB评分量表评价运动功能恢复情况。结果与结论:(1)外泌体组大鼠的BBB评分在第10,14,21天显著高于模型组(P<0.05),苏木精-伊红染色结果显示外泌体组相比于模型组损伤区明显缩小(P<0.05);(2)外泌体治疗后血脊髓屏障染料渗出量显著减少(P<0.05),紧密连接蛋白claudin-5、Occludin、ZO-1的表达相比于模型组显著增加(P<0.05);(3)外泌体抑制基质金属蛋白酶9的表达和活性(P<0.05);(4)损伤后第3天于病变部位观察到髓过氧化物酶阳性的中性粒细胞浸润,外泌体治疗能显著减少中性粒细胞的浸润(P<0.05);(5)结果表明,骨髓间充质干细胞来源外泌体通过下调基质金属蛋白酶9的表达和活性来减少紧密连接蛋白的降解,从而减轻血脊髓屏障的破坏和随后的中性粒细胞浸润,进而促进脊髓损伤后运动功能的恢复。

摘要： 目的:探讨桑叶生物碱对小鼠肠道屏障损伤的改善作用,旨在为桑叶的开发利用提供理论依据。方法:采用D-半乳糖诱导建立小鼠氧化损伤模型,造模成功后每天灌胃低(50 mg/kg mb)、中(100 mg/kg mb)、高(200 mg/kg mb)剂量的桑叶生物碱,45 d后测定各组小鼠血清中D-乳酸(D-lactic acid,D-LA)浓度、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)含量、肠型脂肪酸结合蛋白(intestinal fatty acid binding proteindityrosine,iFABP)质量浓度以及二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)的活力,取小肠组织进行苏木精-伊红染色观察组织病理学改变,实时定量聚合酶链式反应测定3种紧密连接蛋白(闭合蛋白(Occludin)、Claudins、ZO-1)的mRNA表达水平。结果:不同剂量的桑叶生物碱可显著改善模型组的以上指标水平,以高剂量的作用效果最佳。与模型组相比,高剂量桑叶生物碱使D-LA、LPS、iFABP水平分别降低了22.14%、32.12%、19.98%(P<0.05),DAO活力降低了23.22%(P<0.05),使Occludin、Claudins、ZO-1的mRNA表达水平分别上调了272.78%、81.16%、154.67%(P<0.05)。此外,小肠组织病理切片显示,桑叶生物碱可以显著改善肠细胞凋亡、排列紊乱的现象,并恢复细胞间的紧密连接。结论:桑叶生物碱可有效改善肠道屏障损伤,其机制可能与其能够显著上调Occludin、Claudins、ZO-1的mRNA表达水平,改善肠组织的病理学损伤,恢复细胞间的紧密连接结构有关。

摘要： 目的:比较早期肥胖、早期2型糖尿病(T2DM)及早期1型糖尿病(T1DM)大鼠空肠病变的差异。方法:选取SD雄性大鼠40只,随机分为4组,分别为对照组、早期肥胖组、早期T2DM组、早期T1DM组,每组10只。通过喂养高脂饲料构建肥胖大鼠模型,高脂饲料加腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ,30mg/kg)构建T2DM模型,直接腹腔注射STZ(60mg/kg)构建T1DM大鼠模型,对照组注射等量生理盐水。记录各组大鼠血糖变化,取空肠制成石蜡切片,经HE和免疫组化染色,观察分析其形态结构与紧密连接蛋白ZO-1、Occludin蛋白表达。结果:早期T2DM大鼠和早期T1DM大鼠血糖升高显著。早期T2DM和早期T1DM大鼠黏膜下层明显增厚;早期肥胖大鼠ZO-1、Occludin蛋白表达增加,而早期T1DM大鼠ZO-1、Occludin蛋白表达降低。结论:早期肥胖、早期T2DM与早期T1DM大鼠空肠组织形态均发生明显病理改变,但紧密连接蛋白表达出现差异化变化,揭示不同类型代谢性疾病早期空肠的不同变化,为早期干预提供实验依据。

摘要： 目的研究癫痫清颗粒通过调控核苷酸结合域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体信号通路对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠血脑屏障(BBB)损伤的改善作用。方法将125只小鼠按体质量随机分为假手术组(n=25)和造模组(n=100)。造模组小鼠采用侧脑室注射β-淀粉样蛋白25~35的方法复制AD模型;假手术组小鼠同法注射生理盐水。选取造模成功的100只小鼠,按体质量随机分为模型组、盐酸多奈哌齐片组(阳性对照1,1.3 mg/kg,灌胃给药)、MCC950组[阳性对照2(选择性NLRP3抑制剂),10 mg/kg,腹腔注射给药]和癫痫清颗粒组(以生药总量计12.48 g/kg,灌胃给药),每组25只。造模后第2天,各给药组小鼠给予相应药物,每天1次,连续21 d;假手术组和模型组小鼠灌胃水并腹腔注射生理盐水。末次给药后,采用Y迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力,采用伊文思蓝渗漏实验测定小鼠BBB通透性;检测小鼠脑组织中NLRP3、离子钙接头蛋白(IBA-1)、核转录因子κB(NF-κB)p65、p53上调凋亡调控因子(PUMA)、咬合蛋白(ocln)、闭锁小带蛋白1(ZO-1)、紧密连接蛋白5(cldn5)的表达水平。结果与模型组比较,各给药组小鼠的自发交替反应率和脑组织中ocln、cldn5、ZO-1蛋白表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),脑组织内的伊文思蓝含量及NLRP3、IBA-1、PUMA、NF-κB p65蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论癫痫清颗粒可通过抑制NLRP3炎症小体信号通路起到改善AD模型小鼠BBB损伤的作用。

摘要： 为评价Claudin-3与Claudin-12基因在珍珠龙胆石斑鱼Epinephelus fuscoguttatus♀×E.lanceolatus♂生长和肠道黏膜屏障中的作用,通过同源克隆及RACE PCR技术克隆珍珠龙胆石斑鱼Claudin-3和Claudin-12基因的全长,采用qRT-PCR技术分析Claudin-3和Claudin-12基因在珍珠龙胆石斑鱼脑、鳃、皮肤、肌肉、肝脏、胃、前肠、中肠、后肠、头肾、体肾、脾和心脏13种组织的表达情况,并通过饲料精氨酸干预评估上述两个基因在肠道的表达情况。结果表明:Claudin-3 cDNA全长序列为1544 bp,包括一个153 bp的5′末端非翻译区(UTR)和743 bp的3′UTR,Claudin-3的开放阅读框(ORF)为648 bp,可编码215个氨基酸的蛋白,预测该蛋白相对分子质量为23100;Claudin-12 cDNA全长序列为1236 bp,包括一个118 bp的5′UTR和92 bp的3′UTR,Claudin-12的ORF为1026 bp,可编码341个氨基酸的蛋白,预测该蛋白相对分子质量为37400;系统进化树和氨基酸序列比对显示,珍珠龙胆石斑鱼Claudin-3与斜带石斑鱼亲缘关系最近,同源性最高,一致性高达98.14%,珍珠龙胆石斑鱼Claudin-12与䲟的亲缘关系最近,同源性最高,一致性高达91.75%;Claudin-3和Claudin-12基因在被检测的13种组织中均有表达,Claudin-3 mRNA在鳃和体肾中表达量最高(P<0.05),其次是中肠和肝脏,Claudin-12在脑中表达量最高(P<0.05),其次是中肠和后肠;饲料中精氨酸含量为3.06%时,珍珠龙胆石斑鱼增重率及肠道Claudin-3和Claudin-12基因表达水平显著高于1.96%和3.74%精氨酸组(P<0.05)。研究表明,Claudin-3和Claudin-12基因表达在适宜精氨酸水平的影响下上调,可维护石斑鱼肠道黏膜屏障完整,并促进鱼体生长。

摘要： 目的研究菊苣酸(chicory acid,CA)对内毒素诱导的大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的保护作用及机制。方法将90只雄性SD大鼠随机分为6组:假手术组、CA组、高剂量CA组、中剂量CA组、低剂量CA组以及LPS组,每组15只。假手术组灌胃给予生理盐水(5 mL/kg)1 h后,腹腔注射生理盐水;CA组将CA(40 mg/kg)溶解于生理盐水灌胃1 h后,腹腔注射生理盐水;高、中、低剂量CA组分别灌胃CA 40 mg/kg、20 mg/kg、10 mg/kg后腹腔注射LPS(10 mg/kg);LPS组灌胃给予生理盐水(5 mL/kg)1 h后,腹腔内注射LPS(10 mg/kg)。苏木精-伊红(HE)染色组织切片评估肺损伤;测定肺湿干重比、支气管肺泡灌洗液(BALF)中的蛋白质含量和肺组织中的Evans蓝(EB)含量,以EB含量与湿肺重之比评估肺微血管通透性;免疫组织染色法检测骨髓过氧化物酶(MPO)及Western blotting法测定紧密连接蛋白Occludin、ZO-1、JAM-1的表达水平。结果HE染色结果显示,LPS组肺间质组织明显水肿增厚,CA处理组减轻了LPS诱导的肺水肿;免疫组化结果显示,各CA处理组的MPO阳性染色有明显下降;与LPS组相比,CA 20 mg/kg和40 mg/kg组的肺湿/干重比、EB外渗、BALF蛋白浓度和BALF总细胞数均显著降低;在CA 20 mg/kg和40 mg/kg剂量组中,肺组织紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和JAM-1的表达量显著高于LPS组。结论CA对LPS诱导的大鼠ALI具有保护作用,其机制可能与CA可抑制肺组织微血管屏障的破坏有关。

摘要： 目的观察千金消澼液(QXJP)对体外肠上皮炎症损伤模型中紧密连接蛋白(TJ)的影响,探讨其对肠上皮炎症损伤的保护机理。方法利用CCK-8法确定QXJP等药物对于Caco-2细胞的适宜给药浓度;后以脂多糖(LPS)刺激Caco-2细胞制备体外肠上皮炎症损伤模型,分为NC组、LPS组、柳氮磺吡啶(SASP)组和QXJP 1.0、2.5、5.0 mg·mL^(-1)组,预保护给予相应的药物后,以Western Blot法检测Zo-1、Occludin、Claudin-1的表达水平。结果与NC组比较,LPS组Zo-1、Occludin、Claudin-1蛋白水平显著降低(均P0.05);QJXP 1.0、5.0 mg·mL^(-1)组Zo-1、Occludin、Claudin-1蛋白水平均显著降低(P<0.05)。结论QXJP 2.5 mg·mL^(-1)能通过提高Zo-1、Occludin、Claudin-1含量进而保护肠黏膜上皮屏障,从而达到治疗UC的目的。

摘要： 目的探讨甲氰菊酯(Fen)对大鼠格列喹酮(Gli)口服吸收及小肠组织紧密连接蛋白表达的影响。方法将15只SD大鼠随机分为玉米油组、Gli组和Fen+Gli组。Fen+Gli组和Gli组分别连续ig给予Fen 3 mg·kg^(-1)或等体积玉米油14 d后,ig给予Gli 15 mg·kg^(-1),给Gli 15 min后不同时间点经眼眶静脉丛取血,采用高效液相色谱法检测Gli血药浓度。玉米油组仅ig给予等体积玉米油。采用DAS 2.0药动学软件拟合Gli药动学参数,HE染色法观察大鼠小肠组织形态,免疫组化及免疫荧光法检测小肠组织紧密连接蛋白(密封蛋白1、闭合蛋白和闭锁小带蛋白1)表达。结果与Gli组相比,Fen+Gli组药时曲线下面积(AUC_(0~t)和AUC_(0~∞))、吸收速率常数(K_(a))和峰浓度(C_(max))显著增加(P<0.05),达峰时间(T_(max))显著缩短(P<0.05);小肠绒毛顶端损伤,固有层与肠上皮细胞分离,杯状细胞减少,小肠组织紧密连接蛋白表达降低(P<0.05)。Gli组与玉米油组比较无显著差异。结论Fen显著促进Gli的吸收,这可能与其对小肠组织的损伤及减少紧密连接蛋白表达有关。

摘要： 目的:研究动脉内脑局部低温联合再灌注对急性缺血性卒中(AIS)大鼠脑组织的保护作用及其机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为假手术(sham)组、缺血(I,大脑中动脉永久闭塞)组、缺血再灌注(I/R,大脑中动脉闭塞后再灌注)组及低温(H,动脉内脑局部低温联合再灌注)组,每组24只。H组再灌注后经颈内动脉灌注约6.7 mL 4°C的生理盐水,灌注流量0.33 mL/min,灌注时间20 min。缺血24 h后对各组大鼠进行神经功能缺损评分(mNSS),2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色和核磁共振检测脑梗死体积,干湿重法测量脑组织含水量;通过伊文思蓝(EB)示踪法测定血脑屏障通透性,使用Western blot法检测紧密连接蛋白ZO-1、闭锁蛋白(occludin)、密封蛋白5(claudin-5)及水通道蛋白4(AQP4)和基质金属蛋白酶2和9(MMP2和MMP9)的蛋白表达水平。结果:缺血24 h后,与I和I/R组相比,H组大鼠的mNSS、脑梗死体积、脑含水量及EB渗透量均显著降低(P<0.05)。H组大鼠的ZO-1、occludin和claudin-5蛋白表达水平均显著高于I/R组(P<0.05),MMP2和MMP9蛋白表达水平显著低于I/R组(P<0.05)。结论:动脉内脑局部低温联合再灌注对AIS大鼠具有脑保护作用,可能与其抑制MMP2和MMP9蛋白的表达、减少紧密连接蛋白降解、维持血脑屏障完整性有关。

摘要： 目的:为了探究在H2O2诱导的氧化应激损伤状态下,猴头菇多糖对IPEC-J2细胞的保护作用.rn 方法:将IPEC-J2细胞分为5组:空白组、模型组、HEPs低剂量组、HEPs中剂量组、HEPs高剂量组.采用MTT法分别选取试验用的H2O2和HEPs的最佳剂量;利用DCFH-DA染色观察并测定细胞内ROS的含量;通过比色法检测培养细胞上清液中丙二醛(MDA)的含量,细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活力以及乳酸脱氧酶(LDH)的释放率;应用实时荧光定量PCR检测紧密连接蛋白ZO-1基因的表达水平.rn 结果:构建IPEC-J2细胞氧化应激模型的H2O2浓度为0.4mM.H2O2能够显著地增加细胞内的ROS含量,诱导细胞凋亡,同时显著地降低了SOD和CAT的活力,显著地升高MDA含量与LDH释放率.但是,与模型组相比,经过HEPs预处理后,细胞内ROS的含量显著地降低(P＜0.01);同时显著地提高了SOD和CAT的活力(P＜0.01),显著地降低了MDA含量与LDH释放率(P＜0.01).实时荧光定量PCR结果显示,H2O2能够显著地降低ZO-1基因的表达量(P＜0.01);与模型组比较,HEPs能够显著的提高ZO-1基因的表达量(P＜0.01).rn 结论:猴头菇多糖对H2O2诱导氧化损伤状态下的IPEC-J2细胞具有保护作用.

摘要： 目的:探究郁金散对肠黏膜上皮细胞及其紧密连接蛋白的影响. 方法:体外培养肠黏膜上皮细胞系IEC-6,将细胞分为空白组和郁金散组(100、10、1、0.1、0.01、0.001μg/ml),使用CCK8法检测细胞活性;将细胞分为空白组和郁金散给药组(1、0.1、0.01μg/ml),使用蛋白印迹法检测ZO-1、Occludin蛋白的变化. 结果:100μg/ml和10μg/ml郁金散能够引起细胞活性的显著下降,而其他作用条件下对细胞活性无显著的抑制作用.1μg/ml的郁金散能够引起ZO-1、Occludin蛋白表达的下降,而0.1、0.01μg/ml则能够显著促进ZO-1、Occludin蛋白的表达. 结论:高浓度郁金散能够损伤肠黏膜上皮细胞及其紧密连接蛋白,而中、低浓度的郁金散对肠黏膜上皮细胞没有明显的毒性.

摘要： 紧密连接蛋白是肠道黏膜屏障的重要组成部分.本文系统综述了紧密连接蛋白的结构、紧密连接蛋白对仔猪肠道健康的影响,以及总结了断奶应激、肠道微生物、饲料抗原和霉菌毒素、生物活性物质等因素对仔猪肠道紧密连接蛋白的影响.

摘要： 文中对肠道和肠道相关疾病中的自噬以及功能进行探讨。在人的肠道疾病里面，紧密连接的蛋白质表达是有异常或者是被调控的。自噬是细胞当中或者是哺乳类当中两大蛋白质降解系统中重要的基石，自噬在每种疾病当中扮演一个非常重要的角色。自噬可以通过调节紧密连接蛋白来维持紧密连接屏障健作康。

摘要： 背景：紧密连接是肠上皮细胞间的主要连接方式,在维持肠上皮细胞正常通透性中发挥重要作用.促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)属应激反应因子,能够引起肠上皮细胞通透性的改变,前期研究发现细胞角蛋白8 (CK8)参与肠易激综合征(IBS)肠上皮细胞通透性的改变,有研究提示角蛋白为应激相关蛋白,CRF可以引起P38 MAPK信号通路的活化并参与调控NF-κB,而NF-κB的活化与CK8过表达相关,CRF是通过何种途径引起CK8表达升高从而作用于紧密连接相关蛋白引起肠上皮细胞通透性改变需要进一步研究.rn 目的：探讨CRF通过P38 MAPK/NF-κB途径上调CK8，从而介导紧密连接蛋白改变。rn 方法：利用HT-29细胞株建立肠上皮屏障模型，采用免疫荧光及RT-PCR检测CRFRl及CRFR2受体，分为对照组和CRF处理组，CRF处理组以lOOnMCRF分别处理细胞72h后，免疫荧光检测两组CK8、肌动蛋白(F-actin)及紧密连接相关蛋白(zo-1、Claudin-1、Occiudin)的表达，以lOOnMCRF分别处理细胞24h、48h和72h，蛋白质印迹法检测相应蛋白表达量的变化及磷酸化P38 MAPK、NF-κB P65的表达。rn 结果：HT-29细胞表面存在CRFR1及CRFR2受体，CRF处理后HT-29细胞CK8的荧光强度增高，F-actin外周轮廓模糊，zo-l和Claudin-1荧光减弱、Occiudin胞内颗粒样浓聚。rn 结论：CRF可能通过P38 MAPK/NF-xB途径上调CK8表达，从而介导F-actin重排及紧密连接蛋白改变。

摘要： 本试验以分离自仔猪空肠上皮的IPEC-1细胞为模型,探讨丙氨酰-谷氨酰胺二肽(Ala-Gln)对仔猪小肠上皮细胞间紧密连接蛋白occludin定位与表达的影响.试验选取同代IPEC-1细胞接种至6块6孔细胞培养板上,分别用含0(对照组)、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00mmol/L Ala-Gln的DMEM高糖培养基进行培养,待细胞生长融合达70％以上时,对occlu-din进行免疫荧光定位和蛋白质印迹(Western Blot)检测.结果表明:1)对照组细胞可见其胞质内存在团状的阳性荧光染色,而细胞间连接处阳性荧光染色不明显;随着Ala-Gln浓度的升高,细胞间连接处荧光信号逐渐增强,细胞轮廓更加清晰,而胞质内荧光信号逐渐减弱.2)各添加组IPEC-1细胞间occludin的相对表达量均极显著高于对照组(P＜0.01).随着Ala-Gln浓度的升高,occludin的相对表达量呈先增后减的趋势,添加量为2.00mmol/L时达到峰值,且极显著高于其他添加量(P＜0.01).由此可知,Ala-Gln可以上调仔猪小肠上皮细胞间紧密连接蛋白occludin的表达,促进细胞间紧密连接结构的形成,进而增强仔猪小肠黏膜的屏障功能.

摘要： 目的：建立鼻腔给药直接通路与间接通路体外模型,考察微乳对葛根素在嗅神经鞘细胞(OECs)的摄取和在Calu-3细胞单层的转运影响并探讨作用机制. 方法：原代培养OECs,传代培养Calu-3细胞分别模拟穿细胞途径直接通路和细胞旁路途径间接通路.通过MTT实验考察葛根素溶液和微乳的细胞毒性.分别考察葛根素在Calu-3细胞单层的转运和OECs中的摄取.免疫组化考察微乳对Calu-3单层的紧密连接蛋白影响. 结果：原代培养嗅神经鞘细胞并通过差速贴壁和阿糖胞苷纯化,得到的纯化细胞可作为体外嗅神经通路模型.葛根素溶液在Calu-3细胞模型的转运PAPP值为(1.19±0.11)(A→B)和(1.21±0.06)(B→A).葛根素微乳的转运PAPP值显著高于葛根素溶液,PAPP值为(1.64±0.08)(A→B)和(1.86±0.17)(B→A).OECs对溶液中葛根素的摄取在30min达到平衡,浓度为0.095mg/g,对微乳中葛根素的摄取60min达到平衡,浓度为0.352mg/g,显著高于葛根素溶液组. 结论：本实验建立的Calu-3和OECs细胞模型可以在体外分别模拟鼻脑递送直接通路和间接通路,微乳可促进葛根素在体外鼻脑递送模型的转运,其作用机制与打开Calu-3细胞间紧密连接,增加葛根素细胞旁路转运.

摘要： 目的：本研究旨在观察苯甲酸对断奶仔猪生长性能、肠黏膜屏障及肠上皮紧密连接蛋白相关基因表达的影响. 方法：选用体重6.73±0.44kg的杜长大三元杂交猪90头,按试验要求随机分为3组,每组设10个重复,每个重复3头猪,分别饲喂含苯甲酸为0、2000或5000mg/kg的饲粮,饲喂时间为42d. 结果：与对照组相比,苯甲酸显著提高仔猪末重、ADFI和ADG(P＜0.05),显著降低仔猪料重比(P＜0.05);与对照组相比,苯甲酸显著提高了空肠绒毛高度、绒隐比(P＜0.05)及空肠黏膜ZO-1和Occludin mRNA的相对表达量(P＜0.05),显著降低了血清尿素氮含量(P＜0.05)和血浆D-乳酸含量及二胺氧化酶活性(P＜0.05). 结论：结果提示,饲粮中添加苯甲酸可改善仔猪血清生化指标、改善肠黏膜形态和上调紧密连接蛋白的表达,从而缓解肠屏障损伤,提高仔猪生产性能.

摘要： 目的:探讨通窍活血汤(TQHXD)对脑缺血模型大鼠血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)通透性及对BBB相关蛋白表达的影响.rn 方法:大脑中动脉阻塞法(MCAO)建立局灶性脑缺血损伤大鼠模型;HE法观察TQHXD对脑缺血损伤大鼠BBB组织病理变化;透射电镜观察TQHXD对脑缺血损伤大鼠海马神经元及半球额顶区皮质BBB的超微结构的影响;Western Blotting法检测TQHXD对脑缺血损伤大鼠BBB上紧密连接蛋白(ZO-1,Occludin,Claudin-5)、水通道蛋白4(AQP-4)和基质金属酶蛋白-9 (MMP-9)的表达水平的影响.rn 结果:HE染色结果显示，TQHXD各剂量可显著改善大鼠缺血侧脑神经元细胞核固缩、血管内皮细胞受损，梗死灶中央的充血等状态。透射电镜结果显示TQHXD各剂量组治疗后神经元细胞核较完整，少数粗面内质网轻度扩张，线粒体轻度空泡化，神经元的损伤情况较模型组大鼠有明显的改善作用。透射电镜观察显示，TQHXD各剂量可减少紧密连接的开放。Western Blotting法结果显示:TQHXD各剂量组均可抑制脑缺血大鼠ZO-1，OccludinClaudin-5表达的下降，抑制AQP-4蛋白、MMP-9表达量的增加。rn 结论:TQHXD能减轻缺血侧海马神经元细胞的损伤程度，对脑缺血模型大鼠海马区神经元具有一定保护作用。提示TQHXD可通过减少脑缺血大鼠BBB上紧密连接的开放，抑制BBB通透性的增加，从而减轻水肿带来的神经元的损伤。该作用可能与TQHXD上调ZO-1,Occludin,Claudin-5蛋白表达水平，下调AQP-4,MMP-9蛋白表达水平有关。

摘要： 观察紧密连接蛋白claudin-5在实验性视网膜变性大鼠视网膜中的表达,探讨不同引经药冰片和防风配伍六味地黄汤对血-视网膜屏障通透性的影响.将64只雄性SD大鼠随机分为实验组(n=60)和正常对照组(n=4).实验组大鼠注射碘酸钠(40mg/kg)舌下静脉造模,正常对照组注射等剂量生理盐水.于造模后第7天行视网膜电图(ERG)检查,显示造模成功后,将60只大鼠随机分为4组(每组15只):蒸馏水灌胃空白对照组、六味地黄汤对照组、冰片配伍六味地黄汤组、防风配伍六味地黄汤组,分别给予相应溶媒灌胃.灌胃前(每组各取1只)，灌胃后30min(每组各取2只)，灌胃后1h、2h、4h、8h(每组各取3只)，处死大鼠并摘取左眼眼球，观察病理切片，并用免疫组化的方法研究视网膜组织切片中claudin-5蛋白的表达。结果表明，引经药冰片和防风干预下血-视网膜中的紧密连接蛋白claudin-5能发生可逆性的重新分布，claudin-5可能是引经药对屏障通透性的重要影响因素。

摘要： 本发明属于医药领域，具体公开了一种提高细胞紧密连接蛋白表达的组合物，所述组合物包含槐花提取物、金银花提取物或栀子提取物中的至少两种。所述组合物可有效提高宿主肠道内紧密连接蛋白的表达，促进N钙粘蛋白向E钙粘蛋白转换，上调E钙粘蛋白水平，下调N钙粘蛋白的水平，提高了肠道上皮的完整性并进一步发挥抗癌与抗炎的作用，维护宿主肠道健康；本发明所述组合物所含的提取物源于安全性高的中药材，其副作用小、安全性高。本发明也公开了所述组合物的制备方法，以及将所述组合物应用于药物或饲料中。

摘要： 本发明公开了一株能够调节肠道紧密连接蛋白的发酵乳杆菌及其应用，属于微生物技术领域。本发明提供的发酵乳杆菌CCFM1058可以有效提高肠道粘膜的屏障功能，增加紧密连接蛋白Claudin‑1的表达(与结肠炎组相比，发酵乳杆菌CCFM1058将Claudin‑1蛋白基因表达水平提高了近两倍)，修复结肠黏膜损伤。发酵乳杆菌CCFM1058提高紧密连接蛋白Claudin‑1的水平要显著好于模式菌株发酵乳杆菌株CECT5716。因此，本发明所述具有调节紧密连接蛋白Claudin‑1保护肠粘膜屏障的发酵乳杆菌株在食品和微生态制剂方向具有广泛的应用前景。

摘要： 本发明提供了抗紧密连接蛋白18.2(CLDN18.2)抗体及其片段。还提供了编码抗CLDN18.2抗体的经分离核酸分子、包含此类核酸的载体和包含此类载体或核酸的宿主细胞。提供了制备抗CLDN18.2的方法。还提供了相关医药组合物和使用此类医药组合物治疗与异常CLDN18.2表达相关的病症(例如，癌症)的方法。

摘要： 本公开涉及一种结合紧密连接蛋白‑18.2的抗体或其抗原结合部分及其用途。该抗体可高亲和性地结合紧密连接蛋白‑18.2，可用于检测紧密连接蛋白‑18.2蛋白，诊断、治疗或预防与紧密连接蛋白‑18.2的细胞相关的疾病。

摘要： 提供了抗体药物偶联物，其包括连接至抗体或其片段的药物部分，所述抗体或其片段对野生型人紧密连接蛋白18.2(CLDN18.2)蛋白具有结合特异性。所述抗体或其片段与CLDN18.2的β3‑β4环(SEQ ID NO:30的第45‑63位残基，NYQGLWRSCVRESSGFTEC)和β5链(SEQ ID NO:30的第169‑172位残基，YTFG)结合。

摘要： 本发明涉及抗紧密连接蛋白1单克隆抗体和其药物组合物用于在患有肝病、尤其是与HCV感染无关的肝病的患者或已经治愈HCV感染的患者中预防和/或治疗肝细胞癌的用途。还描述了通过施用这种单克隆抗体或其药物组合物预防和/或治疗肝细胞癌的方法。给出了肝细胞癌细胞系HuH‑7.5.1的实验结果。

摘要： 本发明涉及靶向CAIX、ANO1、间皮素、TROP2或紧密连接蛋白18.2的多特异性结合蛋白。具体地，本发明描述了结合NKG2D受体、CD16和选自碳酸酐酶9(CAIX)、钙激活氯通道蛋白1(ANO1)、间皮素、TROP2、CEA和紧密连接蛋白‑18.2的肿瘤相关抗原的多特异性结合蛋白，以及可用于治疗癌症的药物组合物和治疗方法。

摘要： 描述了结合NKG2D受体、CD16和选自碳酸酐酶9(CAIX)、钙激活氯通道蛋白1(ANO1)、间皮素、TROP2、CEA和紧密连接蛋白‑18.2的肿瘤相关抗原的多特异性结合蛋白，以及可用于治疗癌症的药物组合物和治疗方法。

摘要： 提供了抗体药物偶联物，其包括连接至抗体或其片段的药物部分，所述抗体或其片段对野生型人紧密连接蛋白18.2(CLDN18.2)蛋白具有结合特异性。所述抗体或其片段与CLDN18.2的β3‑β4环(SEQ ID NO:30的第45‑63位残基，NYQGLWRSCVRESSGFTEC)和β5链(SEQ ID NO:30的第169‑172位残基，YTFG)结合。

摘要： 本申请属于肿瘤基因免疫技术领域，具体涉及一种免疫抑制细胞紧密连接蛋白的特异性靶向多肽及其应用。所述特异性靶向多肽的氨基酸序列如SEQ NO.1所示，具体为YNXXLNXKXXP，其中X为20种天然氨基酸的任一种或其D型氨基酸。本发明所述特异性靶向多肽能够阻断免疫抑制细胞（MDSCs）穿透血管内皮，具有促进肿瘤免疫治疗、肿瘤化疗等多种治疗方法的效果。