猴头菇多糖对氧化应激IPEC-J2细胞抗氧化能力及紧密连接蛋白ZO-1的影响

摘要

目的:为了探究在H2O2诱导的氧化应激损伤状态下,猴头菇多糖对IPEC-J2细胞的保护作用.rn 方法:将IPEC-J2细胞分为5组:空白组、模型组、HEPs低剂量组、HEPs中剂量组、HEPs高剂量组.采用MTT法分别选取试验用的H2O2和HEPs的最佳剂量;利用DCFH-DA染色观察并测定细胞内ROS的含量;通过比色法检测培养细胞上清液中丙二醛(MDA)的含量,细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活力以及乳酸脱氧酶(LDH)的释放率;应用实时荧光定量PCR检测紧密连接蛋白ZO-1基因的表达水平.rn 结果:构建IPEC-J2细胞氧化应激模型的H2O2浓度为0.4mM.H2O2能够显著地增加细胞内的ROS含量,诱导细胞凋亡,同时显著地降低了SOD和CAT的活力,显著地升高MDA含量与LDH释放率.但是,与模型组相比,经过HEPs预处理后,细胞内ROS的含量显著地降低(P＜0.01);同时显著地提高了SOD和CAT的活力(P＜0.01),显著地降低了MDA含量与LDH释放率(P＜0.01).实时荧光定量PCR结果显示,H2O2能够显著地降低ZO-1基因的表达量(P＜0.01);与模型组比较,HEPs能够显著的提高ZO-1基因的表达量(P＜0.01).rn 结论:猴头菇多糖对H2O2诱导氧化损伤状态下的IPEC-J2细胞具有保护作用.