Occludin

摘要： Recent research on the underlying mechanisms of cerebral ischemia indicates that the neurovascular unit can be used as a novel subject for general surveys of neuronal damage and protein mechanisms.Fingolimod(FTY-720)is a newly developed immunosuppressant isolated from Cordyceps sinensis that exhibits a wide range of biological activities,and has recently attracted much attention for the treatment of ischemic cerebrovascular diseases.In the current research,the role of FTY-720 and its possible mechanisms were assessed from an neurovascular unit perspective using a rat cerebral ischemia model.Our results revealed that FTY-720 markedly decreased infarct volume,promoted neurological function recovery,and weakened the blood-brain barrier permeability of ischemic rats.The protective roles of FTY-720 in ischemic stroke are ascribed to a combination of sphingosin-1-phosphate receptor-1 and reduced expression of sphingosin-1-phosphate receptor-1 in microvessels and reduction of interleukin-17A protein levels.These findings indicate that FTY-720 has promise as a new therapy for neurovascular protection and functional recovery after ischemic stroke.

摘要： Studies have found that the phosphatase actin regulatory factor 1 expression can be related to stroke,but it remains unclear whether changes in phosphatase actin regulatory factor 1 expression also play a role in traumatic brain injury.In this study we found that,in a mouse model of traumatic brain injury induced by controlled cortical impact,phosphatase actin regulatory factor 1 expression is increased in endothelial cells,neurons,astrocytes,and microglia.When we overexpressed phosphatase actin regulatory factor 1 by injection an adeno-associated virus vector into the contused area in the traumatic brain injury mice,the water content of the brain tissue increased.However,when phosphatase actin regulatory factor 1 was knocked down,the water content decreased.We also found that inhibiting phosphatase actin regulatory factor 1 expression regulated the nuclear factor kappa B signaling pathway,decreased blood-brain barrier permeability,reduced aquaporin 4 and intercellular adhesion molecule 1 expression,inhibited neuroinflammation,and neuronal apoptosis,thereby improving neurological function.The findings from this study indicate that phosphatase actin regulatory factor 1 may be a potential therapeutic target for traumatic brain injury.

摘要： 目的观察千金消澼液(QXJP)对体外肠上皮炎症损伤模型中紧密连接蛋白(TJ)的影响,探讨其对肠上皮炎症损伤的保护机理。方法利用CCK-8法确定QXJP等药物对于Caco-2细胞的适宜给药浓度;后以脂多糖(LPS)刺激Caco-2细胞制备体外肠上皮炎症损伤模型,分为NC组、LPS组、柳氮磺吡啶(SASP)组和QXJP 1.0、2.5、5.0 mg·mL^(-1)组,预保护给予相应的药物后,以Western Blot法检测Zo-1、Occludin、Claudin-1的表达水平。结果与NC组比较,LPS组Zo-1、Occludin、Claudin-1蛋白水平显著降低(均P0.05);QJXP 1.0、5.0 mg·mL^(-1)组Zo-1、Occludin、Claudin-1蛋白水平均显著降低(P<0.05)。结论QXJP 2.5 mg·mL^(-1)能通过提高Zo-1、Occludin、Claudin-1含量进而保护肠黏膜上皮屏障,从而达到治疗UC的目的。

摘要： 目的:探讨芪箭消瘿方对自身免疫性甲状腺炎大鼠肠道菌群及肠黏膜屏障的影响。方法:48只雌性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、硒酵母组及芪箭消瘿方低、中、高剂量组各8只。采用高碘水联合皮下注射猪甲状腺球蛋白与弗氏佐剂的方法制备自身免疫性甲状腺炎大鼠模型,连续给药6周后采用16s rRNA高通量测序技术对肠道菌群进行测序,HE染色观察甲状腺及结肠组织形态学变化,透射电镜观察结肠黏膜上皮超微结构,ELISA法测定血清游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)、游离甲状腺素(free thyroxine,FT4)、甲状腺球蛋白抗体(thyroglobulin antibodies,TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(thyroid peroxidase antibodies,TPOAb)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素(interleukin,IL)-10及结肠组织分泌型免疫球蛋白(secretory immunoglobulin,sIg)A水平,Western blot法检测结肠组织闭锁连接蛋白(zonula occludens,ZO)-1、闭合蛋白(Occludin)表达。结果:模型组甲状腺滤泡结构破坏、炎症评分增高(P<0.01),结肠黏膜上皮损伤伴紧密连接结构完整性受损,血清FT3、FT4、TGAb、TPOAb、IFN-γ水平升高(P<0.01),IL-10、sIgA水平下降(P<0.01),结肠ZO-1、Occludin蛋白表达下降(P<0.01),肠道菌群多样性及丰度指数呈增加趋势,厚壁菌门比例升高(P<0.01),拟杆菌门、乳酸杆菌属、普雷沃氏菌属比例下降(P<0.01)。芪箭消瘿方可下调FT3、FT4、TGAb、TPOAb、IFN-γ水平及甲状腺组织炎症评分(P<0.05,P<0.01),上调IL-10、sIgA水平及结肠ZO-1、Occludin蛋白表达(P<0.05,P<0.01),增加肠道菌群多样性及丰度指数,调节厚壁菌门、拟杆菌门、乳酸杆菌属、普雷沃氏菌属相对丰度(P<0.05),改善甲状腺滤泡损伤及结肠黏膜病变程度。结论:芪箭消瘿方可能通过调节肠道菌群生物多样性及物种组成,增加结肠紧密连接蛋白及sIgA表达,改善肠黏膜屏障损伤而起到治疗作用。

摘要： 目的:观察丹参总酚酸通过调控紧密连接蛋白ZO-1、occludin表达对慢性肾衰竭大鼠肾脏纤维化的作用。方法:将120只大鼠分为正常组(Nor)、模型组(Mod)、丹参总酚酸组低剂量组(TSA-L)、丹参总酚酸组中剂量组(TSA-M)、丹参总酚酸组高剂量组(TSA-H)及福辛普利组(Fos)。模型组,丹参总酚酸低、中、高剂量组,福辛普利组均通过腺嘌呤灌胃建立大鼠慢性肾衰竭模型,丹参总酚酸组建模后分别按照低、中、高剂量给予丹参总酚酸灌胃,福辛普利组大鼠建模后予以福辛普利灌胃,模型组及正常组大鼠同等体积生理盐水灌胃。所有大鼠于建模后给药2周后采集血液标本行血肌酐、尿素氮检测;处死前收集24 h尿液行24 h尿蛋白定量检测。收集肾脏组织行HE和Masson染色观察病理及纤维化情况分析,且分别行Real time-PCR、免疫组织化学及免疫印迹法(Western Blotting)测定肾脏紧密连接蛋白ZO-1、occludin mRNA及蛋白表达。结果:丹参总酚酸中、高剂量组和福辛普利组大鼠血肌酐、尿素氮水平较模型组降低(P0.05);模型组,丹参总酚酸低、中、高剂量组,福辛普利组的ZO-1、occludinm RNA和蛋白表达均显著低于正常组(P<0.05);而丹参总酚酸中、高剂量组,以及福辛普利组明显高于模型组(P<0.05),其中以丹参总酚酸高剂量组增加最为显著。结论:丹参总酚酸可能通过调控紧密连接蛋白ZO-1、occludin的表达,从而干预慢性肾衰竭肾纤维化的发生,延缓肾功能进展。

摘要： 文章利用文献综述方法研究了血管生成素2(Agiopoietin 2, Ang2)对血脑屏障(Blood Brain Barrier,BBB)的作用机制。结果显示,Ang2调节血管和淋巴管的生成与发育,与血管通透性、炎症、血管生成重构和促进肿瘤区血管生成等密切相关;现今Ang2在诸多疾病研究中得到越来越多的重视,可以作为疾病发展及预后的敏感指标,但在急性高原病及急性高原脑水肿(High Altitude Cerebral Edema, HACE)的研究中报道较少。因此,Ang2对BBB结构蛋白Occludin,Claudin5,ZO-1作用机制值得进一步研究。

摘要： 急性脑梗死是造成不可逆脑损伤和严重残疾后遗症的常见原因,其中急性脑梗死后出血转化(HT)是急性缺血性脑卒中的常见并发症,是脑梗死后的一种特殊形式和自然预后的一个阶段。尤其是在经过血管内治疗后更易出现,HT出现后使病人症状迅速加重,并限制了下一步的治疗,使得病死率、致残率大大增加。所以早期预测HT有助于指导急性脑梗死的准确治疗,避免不良结局和不良预后,因此本文以讨论闭锁蛋白(Occludin, OCLN)、卵泡抑制素样蛋白1 (FSTL1)、β淀粉样蛋白(Aβ)等生物学标志物的研究进展来阐述其或可以作为预测出血转化的新生化指标,对HT的诊治提供帮助。

摘要： 目的 观察尿感方对膀胱上皮屏障完整性和通透性的影响,并探讨其作用机理。方法 采用Transwell小室建立单层膀胱上皮细胞尿道致病性大肠杆菌感染模型,通过菌落检出数量化穿过单层细胞的细菌数和酚红透过率的方法,观察尿感方含药尿液对细胞屏障完整性和通透性的影响,并运用Western blot法检测关键连接蛋白(ZO-1、Occludin、E-cadherin)的表达。结果 与正常组比较,模型组菌落检出数和酚红透过率增加(P0.05);与10%大鼠空白尿液组比较,10%尿感方大鼠含药尿液组菌落检出数和酚红透过率降低(P<0.05),ZO-1、Occludin、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05);与5%大鼠空白尿液组比较,5%尿感方大鼠含药尿液组酚红透过率降低(P<0.05),ZO-1、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。结论 尿感方对尿道致病性大肠杆菌所导致的膀胱上皮屏障损伤有一定修复作用,其作用机制与关键连接蛋白表达有关。

摘要： 紧密连接蛋白不仅是维持上皮屏障功能的重要蛋白,更是多种病毒感染细胞的受体与辅助分子。为了明确紧密连接主要组成蛋白occludin和claudin-1在鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus, DTMUV)入侵细胞中的作用,本试验利用荧光定量PCR方法对病毒感染的非洲绿猴肾(vero)细胞两基因mRNA的表达量进行动态检测。结果表明,occludin和claudin-1的表达量与病毒含量具有相关性,感染后48 h内随着病毒含量的增加,occludin和claudin-1的mRNA上调表达,当病毒拷贝数下降且细胞出现明显病变后,两基因变为下调表达。试验结果有助于明确occludin和claudin-1在介导DTMUV入侵细胞中的作用,为后续功能受体的筛选和抗病毒制剂的研发提供依据。

摘要： 溃疡性结肠炎是局限于黏膜和黏膜下层的肠道非特异性炎症,肠上皮细胞和细胞间连接构成了动态的物理屏障,将黏膜组织与腔内共生细菌、病原体和饮食抗原隔开.肠上皮屏障渗漏被认为是溃疡性结肠炎的重要发病机制,而紧密连接功能异常是造成渗漏的主要原因.通过对紧密连接在溃疡性结肠炎疾病进展中所起作用以及中药活性成分、中药复方对紧密连接的基础研究和临床研究加以整理,发现中医药能使紧密连接蛋白Claudin-2表达下调,使Claudin-1、Occludin、ZO-1、ZO-2表达上调,恢复肠黏膜屏障作用,维持肠道环境的稳态,减轻溃疡性结肠炎的症状.

摘要： 本发明公开了一种用于同时检测血液中MMP‑9和Occludin的试纸条及其制备方法，所述试纸条包括底板，以及依次固定在底板上的样品垫板层、结合垫板层、硝酸纤维素膜板层和吸水纸板层，相邻的两个板层之间交错重叠；硝酸纤维素膜板层位于最底层，吸水纸板层和结合垫板层靠近硝酸纤维素膜板层的一端底部均与硝酸纤维素膜板层的顶部接触，样品垫板层靠近结合垫板层的一端底部与结合垫板层的顶部接触；结合垫板层上含有抗MMP‑9免疫磁珠和抗Occludin免疫磁珠，纤维素膜板层上设有两条检测线和一条质控线，两条检测线分别被MMP‑9抗体和Occludin抗体包被，质控线被兔抗鼠IgG抗体包被。本发明能够同时对血液样本中的MMP‑9和Occludin进行检测，辅助脑卒中患者的早期诊断和治疗。

摘要： 本发明涉及检测试剂盒技术领域，具体是公开了一种定量检测紧密连接相关蛋白Occludin的ELISA试剂盒，所述试剂盒包括包被Occludin包被抗体的酶标板、HRP标记的羊抗兔IgG、兔抗人Occludin多克隆抗体、洗涤液、样品稀释液、显色剂、终止液、质控品和标准品，所述试剂盒以Occludin包被抗体和羊抗兔IgG为基础，以双抗体夹心法建立Occludin蛋白检测的ELISA方法。本发明克服了现有技术的不足，可以有效地检测血清样本中的Occludin蛋白的水平操作简便、快速，并且检测准确度和精密度好、特异性高、灵敏度好、稳定性好，能够迅速及时地帮助诊断病情，监测预后。

摘要： 本发明公开一种用于检测溶栓后脑出血31‑kDa Occludin的试纸条，所述试纸条由样品垫、反应垫、硝酸纤维素膜和吸收垫依次贴在PVC底卡上制成，所述硝酸纤维素膜采用羊抗兔抗体划线作为质控线C线，采用兔抗31‑kDa Occludin蛋白的IgG捕获抗体在硝酸纤维素膜上线作为检测线T线，所述反应垫喷涂Fe3O4纳米酶‑抗31‑kDa Occludin蛋白抗体偶联复合物，所述反应垫采用含有1‑2%的Casein‑PBS和0.5%‑1%Triton X‑100进行预处理，所述试纸条特异性好，灵敏度高是一种价格低廉、准确性高、快速检测、操作简单的脑卒中溶栓或取栓后脑出血风险的预测产品，具有良好市场应用价值。