克拉维酸

摘要： 目的 本研究以棒状链霉菌(Streptomyces clavuligerus)F613-1为出发菌株,构建头霉素C基因簇中orf10、blp、lat、pcbAB和pcbC5个完整基因片段(cep)的基因缺失突变菌株,探究头霉素C和克拉维酸(clavulanic acid,CA)生物合成的关系.方法 通过生物活性测定法检测出发菌株F613-1和两株cep片段基因缺失突变菌株(△cep∷apra-2和△cep∷apra-4)中的头霉素C产量,同时通过HPLC检测上述菌株的生物量以及CA产量,分析头霉素C和CA生物合成之间的关系.结果 与出发菌株F613-1相比,△ cep∷apra-2和△cep∷apra-4菌株的表型没有明显变化;固体发酵168h,F613-1菌株中头霉素C产量为0.8875g/L,△cep::apra-2和△cep∷apra-4菌株中的头霉素C产量均为0;液体发酵144h,突变菌株△cep∷apra-2和△cep∷apra-4中CA产量的分别为4.28和4.26g/L,较F613-1(3.16g/L)分别提高了35％和34％.结论 在头霉素C生物合成能力缺失的情况下,CA产量明显提高,说明头霉素C和CA的生物合成存在明显的竞争作用,这对于探究CA与头霉素C生物合成之间的关系提供有力的证据,并且为提高CA产量提供新思路,对CA的工业生产有一定的指导意义.

摘要： 肺结核是目前致死率最高的传染类疾病,特别是耐药性肺结核的治疗缺乏有效的抗结核药,而β-内酰胺类抗生素作为目前使用最广泛的抗生素却很少用于肺结核的治疗.本文通过文献调研,分析了β-内酰胺类抗生素对结核杆菌无效的原因及其对耐药性肺结核和持留性结核杆菌的潜在活性.以期能够对抗结核药的研发起到积极推动作用.

摘要： 搅拌转速影响克拉维酸发酵水平,旨在研究搅拌转速影响棒状链霉菌F613-1克拉维酸(CA)生物合成的分子机制.采用转录组高通量测序,对比不同转速发酵条件之间的基因转录水平差异,分析克拉维酸代谢途径相关基因的转录水平变化.摇瓶发酵结果显示,高转速条件下F613-1的CA产量比低转速条件显著提高,发酵周期缩短.转录组分析显示,高转速条件下F613-1中CA合成基因簇中基因表达量无显著变化,但CA合成前体物质精氨酸和3-磷酸甘油醛代谢相关基因的转录水平发生显著变化,精氨酸合成基因簇中基因表达量明显升高,甘油代谢转化为3-磷酸甘油醛的基因表达量显著提高.因此,棒状链霉菌在高转速发酵条件下CA合成速度增加的主要原因是CA合成前体物质精氨酸和3-磷酸甘油醛的代谢活性增强和前体物质积累.

摘要： 该实验旨在获得克拉维酸高产菌株,并通过发酵条件优化提高其产量.以棒状链霉菌(Streptomycesclavulans)F613-1为出发菌株,通过紫外和亚硝基胍(NTG)联合诱变及含链霉素固定培养基筛选并在对突变菌株添加发酵前体研究基础上,通过单因素试验和响应面法优化其摇瓶发酵条件.结果表明,成功筛选一株棒状链霉菌衍生菌株,克拉维酸产量较出发菌株提高19.9％;添加1.5％甘油和0.15％谷氨酸可大幅缩短突变株发酵时间;突变株前36 h时25 °C培养,后37 h时29°C培养,发酵pH值为7,克拉维酸产量达5.44 g/L,较出发菌株提高了55.8％.棒状链霉菌高产菌株的摇瓶发酵条件优化效果显著,为进一步提高克拉维酸生产提供依据.

摘要： 建立了同时测定人血浆中阿莫西林和克拉维酸浓度的LC-MS/MS方法。采用50%乙酸水溶液作为稳定剂,采用冰浴条件下蛋白沉淀后取上清液吹干复溶的方法进行血浆样品前处理。采用Hedera ODS-2(2.1 mm×150 mm)色谱柱进行梯度洗脱,水相为含0.2%乙酸的水溶液,有机相为甲醇。选择三重四极杆串联质谱仪(Triple Quad TM 6500^+),采用电喷雾离子化方式(ESI),在多反应监测(MRM)模式下进行负离子检测,同时对阿莫西林(364.1→223.1)和克拉维酸(198.1→135.9)进行定量分析。结果表明,阿莫西林在20.0~5 000 ng/mL范围内线性关系良好,克拉维酸在10.0~2 500 ng/mL范围内线性关系良好,批内和批间准确度偏差均在±15.0%内,批内和批间精密度均小于15.0%,基质效应、回收率均满足接受标准,阿莫西林和克拉维酸在试验条件下稳定性良好。采用该方法对健康受试者服用受试制剂阿莫西林克拉维酸钾颗粒1袋(每袋颗粒中含有125 mg的阿莫西林和31.25 mg的克拉维酸钾)和参比制剂阿莫西林克拉维酸钾干混悬剂Augmentin█ 5 mL (每5毫升干混悬剂中含有125 mg的阿莫西林和31.25 mg的克拉维酸钾)进行阿莫西林和克拉维酸的血药浓度测定,进行非房室模型药代动力学参数的估算分析,计算阿莫西林和克拉维酸的药代动力学参数,评价受试制剂与参比制剂是否等效,评估饮食对阿莫西林和克拉维酸的药代动力学的影响。实验结果表明,该方法经考察符合生物样品的分析要求,可以应用于阿莫西林克拉维酸临床血药浓度的测定和生物等效性研究。

摘要： 采用超高效液相色谱-串联质谱建立了牛奶中阿莫西林、克拉维酸和泼尼松龙的多残留检测方法.5mL牛奶,加入乙腈:水(9:1)20mL沉淀蛋白后,取出上清液N2吹至＜1mL.用0.1％的甲酸水定容.净化后,供UPLC-MS/MS分析.流动相为0.1％甲酸水和0.1％的甲酸乙腈,梯度洗脱,经Acquity UPLC(R)BEH RP C18 Column(50mm×2.1mm,1.7μm)色谱柱分离,采用电喷雾电离,多反应监测正离子模式对阿莫西林和泼尼松龙进行定量分析,负离子模式对克拉维酸进行定量分析.结果表明,阿莫西林在2～1000ng/mL,克拉维酸在20～1000ng/mL,泼尼松龙在2～1000ng/mL范围呈良好线性,线性相关系数均大于0.99;样品检出限为0.5～10ug/kg(S/N≧3),定量限为1～20ug/kg(S/N≧10);对牛奶进行3个水平的加标回收实验(n=6),这三种药物的平均回收率为84.2％～107.0％,日内相对标准偏差为3.1％～8.7％日间相对标准偏差为4.6％～11.9％;该方法可用于牛奶中阿莫西林、克拉维酸和泼尼松龙残留的分析检测.

摘要： 在摇瓶水平上,研究了不同豆粉及其组成对棒状链霉菌发酵合成克拉维酸(CA)的影响.研究结果表明,豆粉组成对克拉维酸合成有明显影响,使用A豆粉比使用B豆粉克拉维酸效价高11.3％.对A、B两种豆粉进行氨基酸分析,得到五种在A、B两种豆粉中含量差异较大的氨基酸.在摇瓶水平上研究这五种氨基酸对Streptomyces Clavuligerus发酵合成克拉维酸的影响。结果表明当鸟氨酸、苏氨酸和谷氨酸浓度分别为2g/l,2g/l和2.5g/l时，克拉维酸效价分别提高了13.5%, 18.4%和26.5%。而当缬氨酸和甲硫氨酸浓度为0.5g/l和1.0g/l时，克拉维酸效价分别降低了17.2%和14.2%。鸟氨酸和谷氨酸的添加为克拉维酸的合成提供了前体和中间代谢产物，有利于克拉维酸的合成。苏氨酸与CA合成并无直接关系，其对克拉维酸合成的促进作用机理尚不清楚。撷氨酸和甲硫氨酸均有利于S.Clavuligerus合成头抱菌素C，从而使代谢朝着合成头抱菌素C方向进行，因而克拉维酸合成量减少。

摘要： 目的:建立同时测定血浆中阿莫西林和克拉维酸浓度的高效液相色谱法。rn 方法:分析柱为PHENOMENEX LUNA C18(2)5μm，250mm×4.6mm;柱温为室温；流动相为乙腈:磷酸盐缓冲溶液(pH=3.0)(5:95)；流速1.2mL .min-1;紫外检测波长为230nm。rn 结果:克拉维酸和阿莫西林的保留时间分别为5,9 min左右。克拉维酸在0.13-8.60 μg.mL –1内线性良好(r=0.999 4);阿莫西林在0.21-13.20μg.mL –1内线性良好(r=0.999 8)。日内和日间RSD均小于15.0%(n=5)。rn 结论:本法简便,准确,本方法适用于阿莫西林-克拉维酸血药浓度测定。

摘要： 采用多因素多层面连续复合诱变的方法，对克拉维酸产生菌棒状链霉菌(Streptomyces clavuligerus)进行诱变处理，并以抗生素抗性递增方式作为理性筛选选择压力，最终从含青霉素35μg／mL浓度的琼脂平板上筛选到青霉素抗性突变株YT-201-57#，该突变株对青霉素的最终抗性由8μg／mL提高到45μg／mL，其克拉维酸产量较出发菌株提高103％，且高产遗传特性稳定。

摘要： 本文研究了克拉维酸发酵液中甘油含量的测定方法,在412nm测定波长下,得到了甘油测定的线性回归方程:y=0.0236x-0.0036,R2=0.9997,在0～40mg/L范围内,线性关系良好.通过回收率实验,证明发酵液中其他成分对测定结果干扰较小.该方法重现性好,方法简单,比较适合发酵液中甘油含量的测定.目前国内尚无此方法的报道.

摘要： 本文介绍了三种测定克拉维酸含量的方法,即高效液相色谱法、紫外分光光度法与生物效价法三种方法.克拉维酸与咪唑反应衍生后在312nm处有特征吸收,衍生后的色谱图在反相高效液相色谱柱上可有效避免发酵液中其它组分的干扰;紫外分光光度法也基于克拉维酸与咪唑反应的衍生物在312nm具有特征吸收;生物效价法采用KlebsiellapneumoniaeATCC29665作为指示菌.并对三种方法测定同样发酵样品克拉维酸含量的结果进行了比较,得出高效液相色谱法具有操作简便、快速、色谱系统简单等特点,不仅适用于成品及半成品的检测,也适用于发酵液中克拉维酸含量的常规检测.生物效价测定法与高效液相色谱法所测结果存在一定差异,但它是生物活性最直接的反映,是评价发酵和产品质量的重要参数,当发酵液克拉维酸含量较高时二者的测定结果较为接近,但其测定方法复杂,难以掌握且测定时间长.紫外分光光度法是检测发酵液中最简便快速的方法,与高效液相色谱法所测结果存在一定偏差,适用于发酵液相对含量的测定,因此可以根据不同的实验目的选用不同的检测方法.

摘要： 分散片是近几年来发展起来的新型制剂技术,特别适合老人、儿童及吞服固体困难的患者使用.阿莫西林克拉维酸钾分散片是一口服有效β-内酰胺类复方抗生素,起效迅速,可快速治疗各类敏感细菌引起的感染症状.实验采用RC-HPLC法对制剂中两组份一次进样测定,取得了满意的结果.

摘要： 克拉维酸即棒酸是从链霉素菌的培养液中分离获得的氧青霉烷化合物,含一个β内酰胺环.临床上常与氨苄西林或阿莫西林等合用治疗感染性疾病.

摘要： 2005年6月和2006年I月美国临床实验室标准研究所(Clinical Laboratory Standards Institute CLSI)就药敏试验判定标准问题举行了讨论会，现将有关内容加予介绍，以使国内有关人员对药敏判定标准可能发生的变化有较为全面的了解。CLSI指南常用‘或'字来表示代表性药物的作用，这样有利于临床微生物室工作人员在众多抗菌药物中选择代表药物从而减少工作量。代表性药物在药敏试验中的作用不仅仅局限于该抗生素本身，还代表与其相关的抗菌药物。过去标准中所推荐的解释为，不动杆菌四环素的耐药同时也代表该菌对米诺环素的耐药。最近有研究表明，有50%的不动杆菌四环素耐药，但米诺环素敏感或中介。此外，阿莫西林/克拉维酸耐药的肠杆菌科细菌，其中仅有70%对氨节西枷舒巴坦耐药。

摘要： 本文主要从发酵车间的流程优化、工艺设备的平面布置、发酵罐的设计、移种和补料系统、无菌压缩空气等方面论述发酵车间设计中的核心问题。

摘要： 本发明公开了一种测定阿莫西林克维酸钾药物组合物中克拉维酸有关物质的液相色谱方法，该方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，以醋酸铵水溶液为流动相A，醋酸铵水溶液‑乙腈为流动相B，进行线性梯度洗脱，所述醋酸铵水溶液pH值为5.60～5.80。本发明提供的方法能够有效检出阿莫西林克拉维酸钾药物组合物中的克拉维酸杂质，分离度高，简单易行且分析成本低，结果准确可靠，便于生产和质控过程中产品质量的控制。

摘要： 本发明涉及制药技术领域，涉及一种由克拉维酸叔辛胺制备克拉维酸钾的方法。该方法包括：(1)克拉维酸叔辛胺的溶解和过滤：在有机溶剂正丁醇中加入克拉维酸叔辛胺、纯化水、活性炭过滤；(2)成盐剂溶解及过滤：在有机溶剂正丁醇中加入异辛酸钾、活性炭过滤；(3)克拉维酸叔辛胺与异辛酸钾结晶反应：溶解在正丁醇中的克拉维酸叔辛胺与异辛酸钾混合，搅拌结晶，养晶后得到克拉维酸钾晶体。本发明通过优化工艺方法获得了高品质，高纯度的克拉维酸钾。

摘要： 本发明涉及一种从克拉维酸胺盐结晶母液中回收克拉维酸的方法，该方法包括如下步骤：先用减压蒸馏将胺盐结晶母液中的丙酮除去，得到克拉维酸胺盐的水溶液，然后通过萃取、反萃取、结晶等过程得到克拉维酸的中间体胺盐。本发明创造性地开发了从克拉维酸胺盐结晶母液中回收克拉维酸的方法，该方法可提高生产收率，减少废水排放量，大幅度降低生产成本。

摘要： 本发明公开了一种测定阿莫西林克拉维酸钾药物组合物中克拉维酸有关物质的液相色谱方法，该方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，以醋酸铵水溶液为流动相A，醋酸铵水溶液‑乙腈为流动相B，进行线性梯度洗脱，所述醋酸铵水溶液pH值为5.60～5.80。本发明提供的方法能够有效检出阿莫西林克拉维酸钾药物组合物中的克拉维酸杂质，分离度高，简单易行且分析成本低，结果准确可靠，便于生产和质控过程中产品质量的控制。

摘要： 本发明涉及制药技术领域，涉及一种由克拉维酸叔辛胺制备克拉维酸钾的方法。该方法包括：(1)克拉维酸叔辛胺的溶解和过滤：在有机溶剂正丁醇中加入克拉维酸叔辛胺、纯化水、活性炭过滤；(2)成盐剂溶解及过滤：在有机溶剂正丁醇中加入异辛酸钾、活性炭过滤；(3)克拉维酸叔辛胺与异辛酸钾结晶反应：溶解在正丁醇中的克拉维酸叔辛胺与异辛酸钾混合，搅拌结晶，养晶后得到克拉维酸钾晶体。本发明通过优化工艺方法获得了高品质，高纯度的克拉维酸钾。

摘要： 本发明涉及一种从克拉维酸胺盐结晶母液中回收克拉维酸的方法，该方法包括如下步骤：先用减压蒸馏将胺盐结晶母液中的丙酮除去，得到克拉维酸胺盐的水溶液，然后通过萃取、反萃取、结晶等过程得到克拉维酸的中间体胺盐。本发明创造性地开发了从克拉维酸胺盐结晶母液中回收克拉维酸的方法，该方法可提高生产收率，减少废水排放量，大幅度降低生产成本。

摘要： 本发明提供了一种儿童用阿莫西林克拉维酸钾双相释放颗粒及其制备方法。该双相释放颗粒由速释颗粒和肠溶缓释颗粒组成；所述速释颗粒由以下质量百分比的原料组成：阿莫西林三水合物和克拉维酸钾混合物75～90％，崩解剂2～10％，助悬剂5～10％，助流剂0.2～5％，润滑剂0.5～2％，矫味剂1～3％；所述肠溶缓释颗粒由以下质量百分比的原料组成：阿莫西林三水合物和克拉维酸钾混合物65～80％，粘合剂5～10％，缓释包衣层材料5～10％，肠溶包衣层材料10～20％；所述速释颗粒中阿莫西林三水合物与肠溶缓释颗粒中阿莫西林三水合物的质量比为1:1，具有易吞服、快速达效、维持药效时间长、服用次数少的优点。

摘要： 本发明属于药物制剂技术领域，具体涉及一种阿莫西林钠克拉维酸钾脂质体及其制备方法，所述阿莫西林钠克拉维酸钾脂质体包括阿莫西林钠、克拉维酸钾、磷脂类化合物、胆固醇、透明质酸钠。本发明将阿莫西林钠克拉维酸钾制成脂质体，具有缓释作用，使得药效更加持久；通过优选空白脂质体材料，筛选其比例，提高了载药脂质体的包封率和载药量；另外优化制备方法，将透明质酸钠分步骤加入，提高了药物的包封率和稳定性，降低了有关物质的含量和脂质体的渗漏率。

摘要： 本发明公开一种替卡西林钠克拉维酸钾药物组合物及其制备方法。所述药物组合物含有以下质量比组成：替卡西林钠15份，克拉维酸钾1份，络合剂0.01‑0.08份，吸湿剂0.1‑0.3份。本发明还公开了制备该药物组合物的方法，该制备方法涉及“替卡西林钠和络合剂”包裹克拉维酸钾形成核壳结构。本发明所述药物组合物，其中含有络合剂和吸湿剂以及核壳结构特征，三者之间是协同作用显著提高替卡西林钠克拉维酸钾药物组合物的稳定性。

摘要： 本发明公开了克拉维酸免疫层析检测试纸条及检测方法。所述克拉维酸免疫层析检测试纸条，包括依次粘贴在底板上的样品垫、NC膜、吸水垫和底板，其中NC膜上设有检测线和质控线，检测线包被有完全抗原BSA‑SA2‑13，质控线包被有His融合标签抗体。本发明还提供克拉维酸检测试剂盒，包括反应孔和所述检测试纸条；其中反应孔包被有胶体金标记的β‑内酰胺酶蛋白复合物。本发明利用与克拉维酸高亲和力结合的S.AUREUS PC1蛋白建立了一种检测液样(如奶样)中克拉维酸的侧流免疫层析法。利用β‑内酰胺酶蛋白与克拉维酸的高亲和力结合，可快速、高灵敏度检测牛奶中的克拉维酸残留。