抗性筛选

摘要： 菌核病是菊花生产中的一种重要病害。为明确菊花菌核病病原菌的种类、品种抗性差异和有效的防治药剂,本研究采用组织分离法对病原菌进行分离培养,结合形态学特征、生物学特征和分子生物学研究进行鉴定,并筛选了33个切花菊品种以及7种杀菌剂。结果表明,从感病植株上分离得到的病原菌能够重新感染菊花,并且再次分离得到的菌株与原菌株相同。通过病原菌的形态、感染特征和分子序列分析,确定了该病原菌为核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)。病原菌在酵母浸出粉胨葡萄糖培养基(YEPD)上的生长速度最快,在20~30°C时生长最好,在pH值5~7时生长较快,对碳源的种类要求不严格,以蛋白胨为氮源时生长较好。共筛选了33份菊花材料,未发现免疫及抗病品种,有6份中抗品种,13份中感品种,14份感病品种,且离体与活体接种差异性不大。氟酰胺和肟菌酯对核盘菌具有显著抑制效果,半数效应浓度(EC;)分别为0.09 mg·L^(-1)和0.65 mg·L^(-1);此外,通过接种后喷施杀菌剂发现,氟酰胺和肟菌酯的防治效果分别达到了98.26%和90.93%,显著优于其他杀菌剂。本研究建立了菊花菌核病的鉴定、筛选与防治的基本方法,为后续菊花抗性育种与品种改良奠定了基础。

摘要： 为了提升发酵法产L-色氨酸的生产效率,使用常压室温等离子(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变育种技术,并结合结构类似物抗性定向筛选的方法,选育高产色氨酸菌株。将出发菌Escherichia coli AC-1042经过ARTP诱变处理后,在抗性培养基平板上筛选具有5-甲基色氨酸、对氟苯丙氨酸抗性的突变菌株,选取产酸高、遗传稳定的菌株重复进行ARTP诱变处理和抗性筛选,不断提高菌株对结构类似物的抗性水平。经过多次ARTP诱变处理和抗性筛选,获得1株色氨酸高产菌株ACTRP104,经过30 L发酵罐培养44 h后L-色氨酸质量浓度可以达到61.65 g/L,葡萄糖转化率达到20.64%,比出发菌分别提高了20.69%和17.81%。结果表明,ARTP诱变和结构类似物抗性筛选相结合,可以有效地获得色氨酸高产突变菌株,大大提高色氨酸的发酵生产技术水平,获得的色氨酸高产菌株ACTRP104具有较好的工业化应用前景。

摘要： 探讨了人参(Panax ginseng C. A. Meyer)根腐病离体抗性筛选方法的可行性,初步建立了一种快速高效的人参根腐病抗性筛选的方法。采用离体叶片、根块2种方法进行接种,结果表明,2种方法接种的发病情况基本一致,且用离体叶片比用根块筛选操作更简单,观察更方便;采用菌块、菌液2种接种方法分别对人参叶片的正、反面进行接种,结果表明,用菌块正面接种发病效果更好。进一步通过人参须回接试验初步证明了离体叶片抗性筛选方法的可行性。通过对不同品系人参进行接菌,发现FS抗病能力最高,FX2抗病能力最低。

摘要： 以实验室保存的19株酿酒酵母为出发菌株,通过亚硒酸钠抗性筛选、耐硒驯化、硫酸二乙酯诱变、乙硫氨酸抗性筛选,成功得到一株能合成硒代谷胱甘肽的酿酒酵母菌株CMY-15-1,其有机硒含量达到2 663.3μg/g。单因素试验确定CMY-15-1最佳发酵条件,在该条件下筛选出碳源、有机氮源和无机氮源、无机盐等成分,并优化亚硒酸钠添加量。通过Plackett-Burman设计试验筛选出对CMY-15-1产硒代谷胱甘肽显著性影响成分。通过最陡爬坡试验,确定培养基中组分的添加量,由中心复合设计试验得到最佳发酵培养基组成,蛋白胨5.46 g/L、亚硒酸钠205.9 mg/L、氯化铵9.56 g/L、葡萄糖35 g/L、酵母粉8 g/L、磷酸氢二钾0.5 g/L、氯化镁0.5 g/L、氯化钙0.5 g/L,测得硒代谷胱甘肽含量为33.71μg/L,优化后的硒代谷胱甘肽产量是优化前的3.94倍左右。

摘要： 为获得抗二氯喹啉酸的烟草育种材料,本研究通过叶面喷施不同浓度二氯喹啉酸,研究受药害烟株叶面积变化规律和烟草药害等级情况,确定喷施二氯喹啉酸对烟草苗期药害的临界浓度及适宜观测时间,并对烟草EMS突变体材料进行规模化筛选鉴定。结果表明,喷施处理引起烟草药害的临界浓度为0.5 mg/L,超出临界值浓度,烟草叶片会出现明显药害症状;为获得较高抗性的突变体材料,以1 mg/L为最适施药浓度,在药害症状明显时(施药后14 d)进行观测,获得了多个对二氯喹啉酸高抗、中抗及敏感的突变体材料。对高抗材料QR-19的杂交一代株系抗性分析显示,该材料对二氯喹啉酸的抗性可能受隐性基因控制。本研究为解析烟草对二氯喹啉酸等激素型除草剂的抗药性机理及除草剂抗性育种奠定了材料基础。

摘要： 为了更好的利用微生物发酵合成谷胱甘肽(glutathione, GSH),本研究通过对产朊假丝酵母菌株进行紫外诱变,并选取抗性筛选物乙硫氨酸对出发菌株进行致死率实验,筛选到一株高产谷胱甘肽突变菌株。采用5因素5水平的正交设计实验对发酵合成GSH的培养条件中培养温度、摇床转速、蛋白胨和硫酸铵浓度之比、初始pH值及接种量的组成进行优化。结果表明:发酵条件为培养温度26°C、200 r/min、蛋白胨和硫酸铵浓度之比5:2、初始pH值5.0及接种量10%时突变菌株的谷胱甘肽产量最高,达到了187.31 mg/L,即有利于菌体合成GSH。

摘要： 目的 利用等离子体诱变,结合抗生素抗性筛选,获得西索米星高产菌株.方法 首先通过链霉素抗性筛选,获得一株比出发菌株产抗能力高的S4;随后以S4为出发菌株,经等离子体处理40s,借助巴龙霉素抗性筛选,得到双重抗性菌株.最后对突变株进行再次诱变,并结合高浓度链霉素抗性筛选.结果 获得一株高产突变株M inyoensis SAAP22,比出发菌株效价提高了38.18％,具有稳定的遗传性能.结论 通过等离子体诱变,结合抗生素抗性筛选,可有效提升伊尼奥小单孢菌的西索米星合成能力,所得高产菌株具有潜在应用价值.

摘要： 为明确T-2毒素作为抗病筛选指标的可行性,采用T-2毒素对不同抗性的马铃薯品种进行抗病性评价,对其进行抗病生理生化特性研究.结果 表明,50 ng/mL T-2毒素可以作为马铃薯抗干腐病抗病性筛选的最佳指标.在生理生化测定中,经T-2毒素处理的3个品种块茎内的可溶性糖和还原糖含量均增加;细胞防御酶——超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性增强;苯丙氨酸代谢途径关键酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)和4-香豆酰-辅酶A连接酶(4CL)活性提高;丙二醛(MDA)含量升高.抗病品种可溶性糖、还原糖、SOD、POD、PAL、4CL生理指标均高于感病品种,而抗病品种的MDA含量低于感病品种.由此表明,T-2毒素可以作为马铃薯抗病筛选的指标.

摘要： 以'福山包头'大白菜为试材,利用田间调查、显微观察和叶片离体培养的方法,对'福山包头'系列大白菜叶柄黑点病的发生特点及抗性进行了研究,以期为改善'福山包头'大白菜抗病性及新品种选育提供参考依据.结果 表明:1)大白菜叶柄黑点病主要发生于叶柄表皮细胞且起始于细胞周质或细胞壁,该病可发生于大白菜的整个生育期,且进入包心期后发展较快;2)氮素能诱导叶柄黑点病的发生,且铵态氮较硝态氮诱导效果更明显;3)氮素浓度与叶柄黑点病的发病程度呈正相关,但氮素并不是影响叶柄黑点病发生的唯一因素;4)'福山包头'系列大白菜种质资源中,'福东2号''福山82'对叶柄黑点病的抗性较强,'福小87-13-13''皱福'的抗性较弱.

摘要： 为了获得泰妙菌素高产菌株,以泰妙菌素19-127为出发菌株,采用微波对泰妙菌株进行诱变,并结合特比萘酚及制霉菌素2种抗生素经过抗性筛选法获得泰妙菌素高产菌株.结果表明,经过发酵验证最终选育出5株突变株,分别为20-016、20-029、20-048、20-072和20-088,较对照组效价分别增长19.9％、21.6％、20.2％、22.5％和23.1％,且连续传代5次,遗传性状稳定.比较2种抗生素在泰妙菌素高产菌株选育中的作用,制霉菌素更有利于高产菌株的选育.

摘要： 本文阐述了DNA疫苗生产工艺，包括受体菌的选择、质粒的设计、抗性筛选、下游纯化及发酵工艺，随着分子生物学技术的不断发展，许多公司针对DNA疫苗规模化生产工艺做了改进，并相应推出了专利产品，如Waisman针对客户的不同需求推出了GMP级别质粒DNA发酵和纯化服务，节省了客户的时间且降低了预算。由此，通过缩短在实验室研究的DNA疫苗进入规模化生产的平均周期，会极大推进各DNA疫苗产品化进程。

摘要： 节瓜枯萎病是节瓜主要病害之一,生产上没有抗病和高抗的品种,选育节瓜抗枯萎病品种是解决节瓜枯萎病危害的根本.通过节瓜再生体系建立,利用镰刀菌酸(FA)的胁迫作用对节瓜离体材料进行抗性筛选.找到了适宜节瓜离体再生的外植体以及快速增殖、生根的培养基,并得到了的阳性植株.

摘要： 车前草是江西省吉安市重要的经济作物和特色中药材，近年来，车前草穗枯病在当地为害严重，引起了各级有关部门的重视。对该病害进行了病原分子鉴定、病菌不同分离物生物学特性及致病性差异、病菌毒素产生条件和野生车前草抗性种质筛选4方面研究，取得以下结果。采用真核生物通用引物ITS1/ITS4扩增车前草穗枯病菌rDNA ITS序列，对获得的扩增片段进行测序及网上序列比对，根据序列同源性将车前草穗枯病菌鉴定为当归间座壳菌；从吉安市不同病区采集车前草穗枯病样品进行病菌分离，获得8个分离物。对8个分离物进行了在不同温度、pH值、碳源条件下的生长比较试验，结果表明，8个分离物具有较一致的温度和pH值生长曲线，且均以25°C和pH值为6.0的条件下生长最快;在碳源实验中，多数分离物以麦芽糖作碳源生长最好，少数分离物以可溶性淀粉作碳源生长最好。同时，对8个分离物进行了致病性测定和产毒素能力的比较试验，结果表明分离物DA-8致病力最强，而分离物DA-6产毒素能力最强；选取实验中产毒素能力最强的分离物DA-8进行产毒条件研究，结果表明该分离物在pH值为6.0的PS培养基中、于25°C培养产毒素能力最强;光照和培养方式对产毒能力不发生明显影响；从江西不同地区采集了175分野生车前草种质，采用致病力最强的分离物DA-8进行抗病性筛选鉴定，结果从中筛选到2份高抗车前草穗枯病种质，而大多数野生车前草种质表现为高感反应。

摘要： IPPA152201是华东理工大学药学院药物化工研究所通过化学结构多样性的衍生，成功独自开发获得的一个具有自主知识产权的高活性新烟碱类化合物，其活性显著高于商品化新烟碱杀虫剂毗虫琳，其生产成本低，对环境友好，并且杀虫谱扩大，不仅对同翅目超高效，对鳞翅目等害虫也具有显著的高活性。本文在室内对苜蓿蚜敏感种群进行IPPA152201抗性筛选和生物学特性观察，可以探讨评估靶标害虫对IPPA152201产生抗性风险的可能性，这对于评价该化合物的实际应用价值具有非常重要的意义。本研究结果表明，IPPA152201对同翅目苜蓿蚜较难产生抗药性，持续筛选23代的结果显示筛选品系处于敏感性下降。筛选品系和敏感品系在发育历期，生殖期和寿命存在差异，抗性品系较敏感品系具有显著生殖劣势，且繁殖时间缩短。

摘要： 目的：对Fe3O4磁性纳米粒子辅助微波诱变改造无活性放线菌野生株代谢功能的方法进行探索研究。方法：以无抗肿瘤活性的海洋来源放线菌野生株粪生链霉菌HLF-43（1000 μg/mL样品对K562细胞的IR%为3.9%）为原始菌，首先对其含有Fe3O4磁性纳米粒的菌悬液进行了微波辐照，继而通过新霉素抗性筛选，获得新霉素抗性突变株并对其进行抗肿瘤活性筛选结果共得到新霉素抗性突变株74株，其中28株突变株的发酵样品在100 μg/mL浓度下对K562细胞的抑制率大于20%。结论：与不加Fe3O4磁性纳米粒子的微波辐照结合新霉素抗性筛选实验相比，该方法更有利于筛选获得高浓度新霉素抗性突变株，同时活性突变株得率也有较大幅度提高。

摘要： 本文通过利用粘籽西瓜(编号S215及S216，果实具苦味，种子浅黄褐色具粘囊，)与黑籽瓜(编号D3及D7，果实无苦味，种子黑色外缘中部浅褐色)为亲本杂交配制了F1、F2、BC1和BC2世代并对各世代果实、种子粘囊及皮色性状表现及田间综合抗性进行观察统计，结果表明：粘籽西瓜果实苦味对无苦味表现为显性，其与籽用西瓜杂交F2和BC2代苦味与无苦味性状符合孟德尔的3:1和1:1的分离规律，种子粘囊及皮色性状则表现F1为黑籽无粘囊，其皮色与黑籽瓜相似，其F2和BC2世代则分别表现为3:1和1:1的黑籽无粘囊，与浅黄褐色具粘囊的分离规律；说明黑籽瓜皮色性状对粘籽西瓜种子性状变现完全显性。通过对F2及BC2代果实无苦味种子表现为黑籽性状的单株进行连续自交及田间抗性筛选，目前已获得部分籽用西瓜自交系。研究工作为今后选育抗病籽用西瓜新品种提供了一定的育种基础。

摘要： 茄科青枯病是一种毁灭性土传病害，主要危害番茄、烟草、辣椒、茄子等作物，至今还没有一种安全有效的药剂能够防治它，因此发掘有效的生防菌进行生物防治，其现实意义十分重大。本研究分离筛选出对番茄青枯病菌有拮抗作用的内生细菌001、009和011，对它们进行分类鉴定，测定它们的生物学特性和抑菌谱；着重对内生细菌001菌株的内生定殖、促生作用及产生的抗菌物质的纯化与其发酵条件等进行了研究，同时开展了对烟草青枯病的田间防治试验，为利用内生细菌防治烟草青枯病奠定了理论和应用基础。从湖南永州、郴州、衡阳和宁乡等的病区健康烟草茎秆中分离到160个内生菌株，其中32个在室内对19株不同青枯菌菌株具有拮抗效果，占到总菌株数的20.0%。在这32个菌株中以001、009、011抑制圈半径较大，分别为3.Omm、3．Omm、4.5mm，故将内生菌株001、009、011作为重点研究对象。抑制病力强的烟草青枯病菌2316菌株，作为测定拮抗菌拮抗性的标准病原菌株。结合001、009、011内生菌株形态学特征、生理生化性状、16SrDNA序列分析和根据MEGA3软件得到系统发育树等，确定001菌株属枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。菌株009和011属短短芽孢杆菌Brevibacillus brevis。菌株001、009、011的16S rDNA序列在GenBank数据库中的登录号分别为DQ444283、DQ444284、DQ444285。采用内生拮抗菌009和土壤菌株011混合防治烟草青枯病、番茄青枯病，其田间防治效果分别为82.5%和85.4%，其田间应用的剂型还有待进一步研究。

摘要： 茄科青枯病是一种毁灭性土传病害，主要危害番茄、烟草、辣椒、茄子等作物，至今还没有一种安全有效的药剂能够防治它，因此发掘有效的生防菌进行生物防治，其现实意义十分重大。本研究分离筛选出对番茄青枯病菌有拮抗作用的内生细菌001、009和011，对它们进行分类鉴定，测定它们的生物学特性和抑菌谱；着重对内生细菌001菌株的内生定殖、促生作用及产生的抗菌物质的纯化与其发酵条件等进行了研究，同时开展了对烟草青枯病的田间防治试验，为利用内生细菌防治烟草青枯病奠定了理论和应用基础。从湖南永州、郴州、衡阳和宁乡等的病区健康烟草茎秆中分离到160个内生菌株，其中32个在室内对19株不同青枯菌菌株具有拮抗效果，占到总菌株数的20.0%。在这32个菌株中以001、009、011抑制圈半径较大，分别为3.Omm、3．Omm、4.5mm，故将内生菌株001、009、011作为重点研究对象。抑制病力强的烟草青枯病菌2316菌株，作为测定拮抗菌拮抗性的标准病原菌株。结合001、009、011内生菌株形态学特征、生理生化性状、16SrDNA序列分析和根据MEGA3软件得到系统发育树等，确定001菌株属枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。菌株009和011属短短芽孢杆菌Brevibacillus brevis。菌株001、009、011的16S rDNA序列在GenBank数据库中的登录号分别为DQ444283、DQ444284、DQ444285。采用内生拮抗菌009和土壤菌株011混合防治烟草青枯病、番茄青枯病，其田间防治效果分别为82.5%和85.4%，其田间应用的剂型还有待进一步研究。

摘要： 茄科青枯病是一种毁灭性土传病害，主要危害番茄、烟草、辣椒、茄子等作物，至今还没有一种安全有效的药剂能够防治它，因此发掘有效的生防菌进行生物防治，其现实意义十分重大。本研究分离筛选出对番茄青枯病菌有拮抗作用的内生细菌001、009和011，对它们进行分类鉴定，测定它们的生物学特性和抑菌谱；着重对内生细菌001菌株的内生定殖、促生作用及产生的抗菌物质的纯化与其发酵条件等进行了研究，同时开展了对烟草青枯病的田间防治试验，为利用内生细菌防治烟草青枯病奠定了理论和应用基础。从湖南永州、郴州、衡阳和宁乡等的病区健康烟草茎秆中分离到160个内生菌株，其中32个在室内对19株不同青枯菌菌株具有拮抗效果，占到总菌株数的20.0%。在这32个菌株中以001、009、011抑制圈半径较大，分别为3.Omm、3．Omm、4.5mm，故将内生菌株001、009、011作为重点研究对象。抑制病力强的烟草青枯病菌2316菌株，作为测定拮抗菌拮抗性的标准病原菌株。结合001、009、011内生菌株形态学特征、生理生化性状、16SrDNA序列分析和根据MEGA3软件得到系统发育树等，确定001菌株属枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。菌株009和011属短短芽孢杆菌Brevibacillus brevis。菌株001、009、011的16S rDNA序列在GenBank数据库中的登录号分别为DQ444283、DQ444284、DQ444285。采用内生拮抗菌009和土壤菌株011混合防治烟草青枯病、番茄青枯病，其田间防治效果分别为82.5%和85.4%，其田间应用的剂型还有待进一步研究。

摘要： 茄科青枯病是一种毁灭性土传病害，主要危害番茄、烟草、辣椒、茄子等作物，至今还没有一种安全有效的药剂能够防治它，因此发掘有效的生防菌进行生物防治，其现实意义十分重大。本研究分离筛选出对番茄青枯病菌有拮抗作用的内生细菌001、009和011，对它们进行分类鉴定，测定它们的生物学特性和抑菌谱；着重对内生细菌001菌株的内生定殖、促生作用及产生的抗菌物质的纯化与其发酵条件等进行了研究，同时开展了对烟草青枯病的田间防治试验，为利用内生细菌防治烟草青枯病奠定了理论和应用基础。从湖南永州、郴州、衡阳和宁乡等的病区健康烟草茎秆中分离到160个内生菌株，其中32个在室内对19株不同青枯菌菌株具有拮抗效果，占到总菌株数的20.0%。在这32个菌株中以001、009、011抑制圈半径较大，分别为3.Omm、3．Omm、4.5mm，故将内生菌株001、009、011作为重点研究对象。抑制病力强的烟草青枯病菌2316菌株，作为测定拮抗菌拮抗性的标准病原菌株。结合001、009、011内生菌株形态学特征、生理生化性状、16SrDNA序列分析和根据MEGA3软件得到系统发育树等，确定001菌株属枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。菌株009和011属短短芽孢杆菌Brevibacillus brevis。菌株001、009、011的16S rDNA序列在GenBank数据库中的登录号分别为DQ444283、DQ444284、DQ444285。采用内生拮抗菌009和土壤菌株011混合防治烟草青枯病、番茄青枯病，其田间防治效果分别为82.5%和85.4%，其田间应用的剂型还有待进一步研究。

摘要： 提供对ToBRFV具有抗性的番茄植物。本发明的烟草花叶病毒组抗性番茄植物中，SlTOM1a基因、SlTOM1c基因和SlTOM1d已丧失功能。

摘要： 本发明公开了一种用于烟草根黑腐病主效抗性位点筛选/检测的功能分子标记及其应用，其中每个功能分子标记包含正反两个引物。所述功能分子标记所用成对引物选自组A或B，其中组A为选自以下引物对中的任意两个：第一引物对由SEQ ID NO:1和NO:2组成，第二引物对由SEQ ID NO:3和NO:4组成，第三引物对由SEQ ID NO:5和NO:6组成，第四引物对由SEQ ID NO:7和NO:8组成；另有组B为选自以下引物对中的任意两个：第五引物对由SEQ ID NO:9和NO:10组成，第六引物对由SEQ ID NO:11和NO:12组成；第七引物对由SEQ ID NO:13和NO:14组成。该功能分子标记在烟草辅助育种中具备便捷、高效且呈二元性的特点。遗传效应分析表明，分子标记辅助选择导入RBRR1位点能够极显著提高栽培烟草根黑腐抗性。

摘要： 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种筛选鉴定抗生素抗性菌的方法。本发明通过将不同浓度梯度的土壤悬浮液进行涂布，根据平板上生长的菌落情况确定有效挑选单菌落的最优稀释梯度，以便于后续大批量筛选鉴定抗生素抗性菌；本发明通过控制抗性培养基中红霉素、链霉素、硫酸多粘菌素B的浓度控制抗性菌生长速度，达到准确筛选耐药细菌的目的；而且本发明用灭菌枪头代替传统的接种环挑选单菌落，反复吹打即可完成挑菌步骤，避免灼烧冷却接种环消耗大量时间，且难以掌控冷却程度，无故烫死细菌。

摘要： 本发明公开了一种去势抵抗性前列腺癌核酸适配体及其筛选方法和应用，该适配体的核苷酸序列组成包含序列1或序列2中任意一条所示的DNA片段；具有分子量小、低免疫原性、高亲和性等优势；此外，本发明核酸适配体采用的筛选技术成本低，可在体外大批量生产，可重复性好，易于运输保存。本发明核酸适配体能以高亲和性高特异性结合去势抵抗性前列腺癌组织细胞。利用本发明核酸适配体能从细胞分子水平早期检测前列腺癌的去势抵抗状态，对于及时调整前列腺癌用药、改善预后具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种筛选抗稻瘟病(基因)材料的篦子筛及其应用，属于抗性育种技术领域。本申请通过大量实验筛选出与稻瘟病抗病基因对应的标准的优势无毒基因菌株篦子，能够定向给予水稻稻瘟病抗性压力，筛选出特定的稻瘟病抗性水稻品种(材料)，为水稻稻瘟病广谱抗性育种打下基础。

摘要： 本发明公开了基因GliT作为筛选标记基因在抗性筛选中的应用。GliT基因其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。鉴于目前尚未有关于深海真菌基因作为分子筛选标记的相关报道。因此本发明从深海真菌FS140的cDNA文库中获得了筛选标记GliT基因序列，并成功导入到酿酒酵母S.cerevisiae BJ5464中通过抗生素药物筛选进行功能验证，从结果推测GliT基因将抗生素药物转化成不具有生物活性的氧化产物，从而起到解毒作用。针对这一原理，GliT是一种非常有用的选择性标记，用来筛选和维持培养成功转染抗生素抗性基因的真核细胞，利于后续解析GliT基因与抗生素作用机制奠定分子生物学基础，同时可开发成一种高效表达且高抗的筛选标记基因应用于分子生物学、微生物学和医药等领域。

摘要： 本发明公开了基因GNATB作为筛选标记基因在抗性筛选中的应用及其应用。基因GNATB的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的新型筛选标记基因GNATB能够高效协助酿酒酵母抵抗放线菌酮，从而为后期在酿酒酵母重构放线菌酮的生物合成通路和解析筛选标记基因GNATB与放线菌酮的作用机制奠定基础，提升放线菌酮的异源表达水平并获得新型放线菌酮奠定分子生物学基础。此外，乙酰转移酶基因GNATB可开发成一种高效表达且高抗的筛选标记基因，用来筛选和维持培养成功转染放线菌酮抗性基因的真核细胞，应用于分子生物学、微生物学和医药等领域。

摘要： 本发明公开了基因GliT作为筛选标记基因在抗性筛选中的应用。GliT基因其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。鉴于目前尚未有关于深海真菌基因作为分子筛选标记的相关报道。因此本发明从深海真菌FS140的cDNA文库中获得了筛选标记GliT基因序列，并成功导入到酿酒酵母S.cerevisiae BJ5464中通过抗生素药物筛选进行功能验证，从结果推测GliT基因将抗生素药物转化成不具有生物活性的氧化产物，从而起到解毒作用。针对这一原理，GliT是一种非常有用的选择性标记，用来筛选和维持培养成功转染抗生素抗性基因的真核细胞，利于后续解析GliT基因与抗生素作用机制奠定分子生物学基础，同时可开发成一种高效表达且高抗的筛选标记基因应用于分子生物学、微生物学和医药等领域。

摘要： 本发明公开了一种利用烟草白粉病抗性筛选烟草单倍体及评估诱导率的方法，包括：1）以携带烟草单倍体诱导基因的植株A作为父本，以携带烟草白粉病抗性基因的植株B作为母本，杂交收获F1代种子；2）在F1代种子播种后进行白粉病接种鉴定，感白粉病的植株即为四倍体烟草，抗白粉病的植株即为单倍体烟草；3）分别统计感白粉病和抗白粉病的植株数量，抗白粉病的植株数量占感白粉病和抗白粉病的植株总数的百分比，即为单倍体诱导系的诱导率。本发明方法中白粉病抗性由双隐性基因控制，相比于植株形态和种子形态鉴定方法，准确性更高；相比于染色体数目鉴定、解剖学鉴定和放射性鉴定方法，操作简单，成本低，可用于大规模单倍体筛选和诱导率评估。

摘要： 本发明涉及一种奶牛产乳热抗性筛选的SNP分子标记及在育种领域的应用，属于奶牛育种分子标记技术领域。产乳热是5‑9岁奶牛群中最常见的一种急性低钙性代谢病，在奶牛生产的全阶段都可能发生，且容易复发，对奶牛的健康状况及产奶量都有明显的影响。本发明设计获取奶牛产乳热抗性相关的分子标记，辅助筛选优势性状母本育种进行奶牛遗传改良。基于上述技术目的，本发明具体提供了一种影响奶牛产乳热抗性的GRM8基因和分子标记，通过测序鉴别奶牛在该基因上的标签SNP的基因型，选择具有优势基因型或单倍型个体进行遗传改良，从而提高奶牛群体的抗产乳热能力，减少经济损失。