成熟胚

摘要： [目的]建立高效的金粳818成熟胚遗传转化体系。[方法]以直播稻品种金粳818成熟胚为外植体,设计4种诱导培养基,筛选适合金粳818的诱导条件;设计5种分化培养基,筛选适合金粳818的分化条件;获得的愈伤组织用农杆菌介导法进行转基因再生。[结果]最佳诱导培养基为4.10 g/L NB+2 mg/L 2,4-D,诱导率为89.3%;最佳分化培养基为MS+5.0 mg/L KT+0.5 mg/L NAA,分化率为81.1%,成苗率为52.1%;经PCR分子检测,再生幼苗100%为转基因阳性植株。[结论]该研究建立了金粳818成熟胚遗传转化体系,为品种定向改良奠定了技术基础。

摘要： 为了提高谷子成熟胚愈伤组织的诱导率和分化率,建立高效、稳定的再生体系,以优质品种晋谷21号成熟胚为外植体,研究植物激素、蔗糖、硝酸银(Ag NO;)、多效唑(PP_(333))等不同物质对晋谷21号愈伤组织诱导、继代、分化和生根的影响,进而优化了晋谷21号离体再生培养方案,最终确定了晋谷21号各阶段的最适培养基和激素浓度。结果表明,在MS培养基中加入2.0 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、0.2 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)、5.0%蔗糖时愈伤组织诱导率最高,可达95.24%,较前期试验筛选出的诱导培养基(2.0 mg/L 2,4-D、0.2 mg/L 6-BA、3.0%蔗糖)提高了2.38百分点,产生的愈伤组织致密,颜色淡黄,状态更佳,有利于进一步的分化;再分化过程中添加1.0 mg/L 6-BA、0.5 mg/L NAA、3.0 mg/L PP_(333)、3.0%蔗糖、14 g/L琼脂时分化率最高,可达28.33%,较前期试验筛选出的分化培养基(1.0 mg/L 6-BA、3.0%蔗糖、5 g/L琼脂)提高了15百分点,且分化出的谷苗健壮;生根阶段最适培养基为1/2 MS培养基,生根健壮,适合移栽。

摘要： 以优质食味水稻品种金稻919成熟胚为外植体,设计4种激素配比诱导培养基和6种激素配比分化培养基,筛选最佳方案建立金稻919成熟胚再生体系。实验结果表明,Y2激素组合(4 mg/L 2,4-D)的诱导愈伤组织效果最佳,诱导率为77.3%;F5激素组合(4 mg/L 6-BA + 1 mg/L NAA)的分化成苗效果最佳,分化率为85.0%,成苗率为68.3%。本研究建立了金稻919成熟胚高效转基因再生体系,为利用基因工程技术定向改良奠定基础。

摘要： [目的]高粱是遗传转化最困难的作物之一,主要原因是由于高粱组织培养愈伤诱导及再生频率较低,高效再生体系建立比较困难,研究并使用新的植物诱导激素是改变这一困境的重要手段.[方法]以4个基因型的高粱种子(成熟胚)为外植体,高粱组织培养常用的诱导激素2,4-D为对照,研究Dicamba对高粱愈伤组织诱导、继代及愈伤组织再生质量的影响,经过统计分析,建立并优化高粱组培再生体系.[结果]高粱各基因型在不同浓度Dicamba的诱导培养基上出愈率在24.7％～90.7％,不同浓度的2,4-D诱导培养基上,出愈率为72.5％～90.5％,最高出愈率为88BP28,在Dicamb 7.5 mg·L-达到90.7％,2,4-D在2.5 mg·L-1时达到90.5％;继代培养与初代诱导培养比较,各基因型材料的褐变率均随着继代次数的增加而增加.Is-623在继代培养中,Ⅰ型愈伤组织向Ⅱ型和Ⅲ型愈伤组织转变的E值最高,达到20.1％;4种基因型以5 mg·L-1 Dicamba诱导的Is-623胚性愈伤率最高,达20.7％;不同处理中,所有基因型材料U值均在60％～ 100％.[结论]利用Dicamba对高粱成熟胚进行初代愈伤组织诱导,出愈率与2,4-D诱导差异不显著,在继代培养及胚性愈伤组织分化试验中,Dicamba作为激素更有利于Ⅱ型愈伤组织及胚性愈伤组织的形成,其效果优于2,4-D;高粱成熟胚诱导愈伤组织及胚性愈伤组织的发生受基因型影响较大,材料Is-623在Dicamba 5 mg·L-1时比其它材料的胚性愈伤发生率高,且褐化率及死亡率均较低;证实了高粱成熟胚胚性愈伤组织的形成绝大多数来自Ⅱ型愈伤组织.

摘要： 以不同品种树莓杂交种子为材料,采用成熟胚组织培养技术,研究了不同植物生长调节剂组合对其发芽、幼苗增殖和生根的影响.结果表明:树莓杂交种子(HT)成熟胚最适灭菌条件为0.1％HgCl2灭菌10 min;在1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA(1.5—2.0)mg/L培养基上,树莓杂交种子萌发率最高达88.9％(RQ);无菌苗在MS+6-BA(0.5—0.8)mg/L+IBA 0.1 mg/L+GA30.5 mg/L培养基上的增殖倍数最高达4.87倍(AT),且植株生长健壮;在生根培养基1/2MS+IBA(0.2—0.3)mg/L培养时生根率最高达96.35％(WH).可见,6-BA、IBA和GA3对树莓种子萌发和成苗具有明显促进作用,优化的培养基可显著提高树莓杂交种子成熟胚的萌发、成苗和生根.

摘要： 【目的】研究彩色小麦组织培养再生体系,为建立彩色小麦高频遗传转化体系提供理论基础。【方法】以中黑麦6号、CM-Z2和中蓝麦1号3个彩色小麦品种(系)的成熟胚作为外植体材料,在愈伤诱导8、14、20 d分别统计诱导情况;采用IAA+KT、IAA+6-BA生长调节剂组合进行彩色小麦愈伤组织的再分化,比较不同处理愈伤组织出愈率、分化率、成苗率等。【结果】中黑麦6号、CM-Z2、中蓝麦1号外植体在培养14 d时愈伤诱导效果最佳,出愈率在80.54%~95.39%。彩色小麦成熟胚愈伤组织再生能力与基因型、培养基有关,中黑麦6号再生能力最好,分化率在87.68%~97.50%、成苗率在17.26%~61.73%,在含有0.1 mg/L IAA和0.5 mg/L 6-BA、0.5 mg/L IAA和4 mg/L KT的分化培养基中成苗率较高,分别为61.73%、56.25%;其次为CM-Z2,分化率在60.23%~95.45%、成苗率在2.27%~34.09%,在含有0.5 mg/L IAA和4 mg/L KT的分化培养基中成苗率最高,为34.09%。【结论】中黑麦6号是彩色小麦遗传转化的良好材料;0.1 mg/L IAA和0.5 mg/L 6-BA、0.5 mg/L IAA和4 mg/L KT可以作为彩色小麦中黑麦6号和CM-Z2良好的再生培养基。

摘要： [目的]研究彩色小麦组织培养再生体系,为建立彩色小麦高频遗传转化体系提供理论基础.[方法]以中黑麦6号、CM-Z2和中蓝麦1号3个彩色小麦品种(系)的成熟胚作为外植体材料,在愈伤诱导8、14、20 d分别统计诱导情况;采用IAA+KT、IAA+6-BA生长调节剂组合进行彩色小麦愈伤组织的再分化,比较不同处理愈伤组织出愈率、分化率、成苗率等.[结果]中黑麦6号、CM-Z2、中蓝麦1号外植体在培养14 d时愈伤诱导效果最佳,出愈率在80.54％～95.39％.彩色小麦成熟胚愈伤组织再生能力与基因型、培养基有关,中黑麦6号再生能力最好,分化率在87.68％～97.50％、成苗率在17.26％～61.73％,在含有0.1 mg/L IAA和0.5 mg/L 6-BA、0.5 mg/L IAA和4 mg/L KT的分化培养基中成苗率较高,分别为61.73％、56.25％;其次为CM-Z2,分化率在60.23％～95.45％、成苗率在2.27％～34.09％,在含有0.5 mg/L IAA和4 mg/L KT的分化培养基中成苗率最高,为34.09％.[结论]中黑麦6号是彩色小麦遗传转化的良好材料;0.1 mg/L IAA和0.5 mg/L 6-BA、0.5 mg/L IAA和4 mg/L KT可以作为彩色小麦中黑麦6号和CM-Z2良好的再生培养基.

摘要： 分析比较了3种除草剂对玉米单倍体成熟胚的加倍效果,以期找到一种玉米单倍体加倍的新方法.以先玉335、中地88和郑单958这3个基因型诱导的单倍体籽粒为材料,分别以不同浓度(1、5、10、20 μmol/L)的甲基胺草磷、炔苯酰草胺和氟乐灵溶液作为加倍药剂处理玉米单倍体成熟胚,统计成熟胚的加倍率.结果 表明,不同浓度的3种除草剂对玉米单倍体成熟胚加倍均有效果,加倍率为7.83％～85.16％,其中,10 μ.mol/L的甲基胺草磷的效果最好,先玉335、中地88和郑单958的单倍体成熟胚平均加倍率分别为85.16％、80.20％和66.30％.说明甲基胺草磷对提高玉米单倍体成熟胚的加倍率最有效.

摘要： 目前有不少关于籼稻组织培养条件优化的研究,然而尚未实际突破籼稻组培的瓶颈.从生理生化水平、培养基成分、植物生长调节物质等方面,综述了籼稻成熟胚组织培养研究进展,以及与组培性状相关的QTLs,同时分析了籼稻组培的限制因子并提出可能的解决途径.通过搜集尽量多的水稻资源(包括籼稻、粳稻和野生稻)，分析不同水稻品种在分子水平上的进化情况，建立遗传进化树，分析水稻品种组培难易程度与其在进化树上位置的关系。以此从进化水平分析水稻品种组培特性演化进程。下一步研究中可以以难培养的籼稻品种为试验材料，检测其在不同铵态氮和硝态氮比例的愈伤诱导培养基上的反应，以此可能筛选出适宜不同籼稻的培养基。但要获得广谱适用于籼稻组织培养的培养基，必须依赖于从分子水平对控制组培性状的基因功能的分析。对于某些表型贡献率较大的QTLs，应尽快构建次级群体，精细定位并克隆这些QTLs.

摘要： 本研究以凤丹成熟胚为外植体,研究了不同光照条件、不同的基本培养基以及不同的植物激素对胚诱导不定芽的诱导.研究结果表明,暗培养7d有利于凤丹胚不定芽诱导;WPM培养基与MS和1/2MS培养基相比更适合胚的培养;激素6-BA、GA3对不定芽诱导有显著的促进作用,而NAA的作用效果不明显,最佳的实验组合为1.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA+0.5mg/L GA3,出芽数达到3.94.激素TDZ抑制芽的诱导,促进愈伤组织的产生.

摘要： 籼稻成熟胚培养由于取材容易,因此在转基因研究中具有广泛的应用前景.但籼稻成熟胚愈伤组织诱导率不高,继代易褐化,分化率不高,严重阻碍着基因工程技术在水稻育种中的应用.本研究选用了27不同类型的籼稻品种和常规粳稻品种作为实验材料,在同一培养方式下,分析了不同籼稻品种成熟胚愈伤组织诱导率和分化率之间的差异及籼稻品种与粳稻品种成熟胚愈伤组织诱导率与分化率之间的差异,为目前应用细胞工程和基因工程技术来改良籼稻品种提供理论依据.获得了如下主要研究结果:水稻基因型是影响籼稻成熟胚组织培养力高低的关键因素;籼型杂交水稻不育系和保持系比常规籼稻品种、杂交水稻F1种子和恢复系品种成熟胚的培养力低;杂交水稻F1种子受亲本恢复系基因型的影响较大.

摘要： 本文采用二次正交旋转组合试验设计,探讨了改良MS培养基中2,4-D、肌醇和激动素对陇鉴127和陕160小麦成熟胚愈伤组织诱导率的影响.结果表明,肌醇浓度对于小麦成熟胚愈伤组织的贡献率最大,其次为2,4-D,再次为激动素,并建立了适合两个小麦品种愈伤组织诱导率的数学模型,筛选出了适合两个小麦品种成熟胚愈伤组织诱导的最佳配比培养基配方.愈伤组织诱导率高达85％～95％,再生率达4％以上,胚芽形成对胚性愈伤组织形成不利.

摘要： 小麦成熟胚的生理状态影响其成愈率和萌发能力.较晚时间收获及低温处理的成熟胚形成愈伤组织的能力及萌发能力更强.九种不同浓度的2,4-D都能很好地诱导成熟胚形成愈伤组织.KT促进成熟胚萌发,2,4-D抑制成熟胚萌发.成熟胚在一定的生理状态下,KT促进愈伤组织形成的作用才能明显地体现出来.

摘要： 一种农业技术领域的利用成熟大豆胚尖获得体细胞胚的方法，通过将萌动的大豆种子的胚尖平铺于愈伤诱导培养基中暗培养生成愈伤组织，并将获得的愈伤组织平铺于体细胞胚诱导培养基中诱导体细胞胚的发生。本发明采用添加2，4-D的MS培养基诱导成熟大豆的胚尖获得愈伤组织后形成体细胞胚，通过培养再生出植株。解决了利用大豆未成熟子叶或幼胚等获得体细胞胚的外植体采集时间受季节限制的问题。

摘要： 一种诱导马尾松未成熟种子ESM再生植株的方法，利用马尾松未成熟种子ESM所具有的持续裂生能力特征，通过固体和液体培养的交替培养，经过维持、增殖、体胚成熟前期、成熟培养四个阶段，使ESM形成发育完整、结构正常的体胚，经萌发培养获得马尾松植株。采用本发明所提供的方法，可以获得大量遗传基础一致的马尾松体胚的再生植株，为马尾松珍稀遗传资源的保存、优良基因型苗木的大量生产，提供了一种周期短、发生效率高的新技术。

摘要： 本发明是一种诱导重楼未成熟合子胚产生体细胞胚的组织培养方法，步骤为：将带肉质种皮的重楼种子去掉附着的纤维组织后流水清洗后自来水浸泡后消毒、清洗；无菌条件下将已消毒的种子剥离掉肉质种皮纵切胚乳；将剥离的未成熟胚接种于培养基上持续暗培养；培养6个月后，将诱导成功的体细胞胚生长至纺锤形后剥离并置于新的诱导培养基上继续培养即可获得90％诱导成功率的重楼体细胞胚。本发明诱导的体细胞胚可以直接诱导生成具有根和芽的完整植株，较愈伤组织具有更好的可塑性；本发明获得的体细胞胚生长分化速度远高于营养器官诱导的愈伤组织，且具有更高的遗传稳定性，通过体细胞胚诱导生成的重楼植株重楼皂苷组分及含量与原植物相比差异不显著。

摘要： 本发明公开了一种应用于小麦成熟胚培养的干胚游离方法。本发明提供了一种禾本科植物取胚方法，包括如下步骤：将禾本科植物的籽粒打碎，先过9目网筛去除大颗粒，再过30目网筛去除小颗粒，从粒度介于9目筛和30目筛之间的颗粒中挑取1-2mm的胚组织。本发明提供的取胚方法与现有的刮胚法相比，在后续试验中的愈伤诱导及分化效果差异不大，但是在取胚、保存及消毒环节方便快捷，可以节约劳动力，且可以应用到种质资源的保存，以节约存储空间等。本发明大大方便了禾本科植物成熟胚的组织培养和遗传转化。综上所述，本发明具有重要的应用意义。

摘要： 本发明公开了一种利用中山杉未成熟胚诱导胚性愈伤组织与增殖的方法，属于林木细胞工程技术领域。该方法通过采集中山杉未成熟球果，取发育至早期子叶胚的种子，分离出未成熟合子胚，诱导培养出含胚性胚柄细胞团的胚性愈伤组织，并将获得的胚性愈伤组织转入维持和增殖固体培养基中，经继代培养，获得大量增殖的胚性愈伤组织。本发明不受季节和外部环境的限制，能高效诱导出胚性愈伤组织，并在维持和增殖培养基中短期内获得大量白色且质地紧实的胚性愈伤组织，为中山杉优良品系的快速繁殖提供了一种高效途径，不仅有利于优良种质资源的保存，为后续再生植株和遗转化受体体系提供前期基础，而且可以实现大量繁殖优质种苗的目标，极大满足市场需求。

摘要： 本发明是一种诱导重楼未成熟合子胚产生体细胞胚的组织培养方法，步骤为：将带肉质种皮的重楼种子去掉附着的纤维组织后流水清洗后自来水浸泡后消毒、清洗；无菌条件下将已消毒的种子剥离掉肉质种皮纵切胚乳；将剥离的未成熟胚接种于培养基上持续暗培养；培养6个月后，将诱导成功的体细胞胚生长至纺锤形后剥离并置于新的诱导培养基上继续培养即可获得90％诱导成功率的重楼体细胞胚。本发明诱导的体细胞胚可以直接诱导生成具有根和芽的完整植株，较愈伤组织具有更好的可塑性；本发明获得的体细胞胚生长分化速度远高于营养器官诱导的愈伤组织，且具有更高的遗传稳定性，通过体细胞胚诱导生成的重楼植株重楼皂苷组分及含量与原植物相比差异不显著。

摘要： 本发明涉及一种扬麦14成熟胚的胚性愈伤组织培养方法，该方法以扬麦14成熟胚为材料，在诱导培养基中，25±1°C，暗培养，10天为继代周期的条件下，继代1-3次获得具有较高再生率的胚性愈伤组织。本发明以扬麦14成熟胚为实验对象，诱导培养基(MS+500mg/L酪蛋白水解物+2mg/L？2，4-D+30g/L蔗糖+2.6g/L植物凝胶，PH5.8)为培养条件，25±1°C，10天为继代周期，对扬麦14成熟胚诱导继代培养。结果发现继代1-3次胚性愈伤组织生成率和再生率均保持上升趋势；继代次数超过5次则抑制扬麦14成熟胚胚性愈伤组织的再生能力。

摘要： 本发明公开了一种应用于小麦成熟胚培养的干胚游离方法。本发明提供了一种禾本科植物取胚方法，包括如下步骤：将禾本科植物的籽粒打碎，先过9目网筛去除大颗粒，再过30目网筛去除小颗粒，从粒度介于9目筛和30目筛之间的颗粒中挑取1-2mm的胚组织。本发明提供的取胚方法与现有的刮胚法相比，在后续试验中的愈伤诱导及分化效果差异不大，但是在取胚、保存及消毒环节方便快捷，可以节约劳动力，且可以应用到种质资源的保存，以节约存储空间等。本发明大大方便了禾本科植物成熟胚的组织培养和遗传转化。综上所述，本发明具有重要的应用意义。

摘要： 本实用新型公开了一种玉米转基因试验成熟胚划胚器，涉及划胚器技术领域。包括底座，底座顶部固定连接有支撑板，支撑板顶部固定连接有支撑柱，支撑柱顶部固定连接有支撑杆，支撑杆顶部固定连接有入料斗，入料斗底部固定连接有多个下料管，下料管底部开设有刀槽，支撑板转动连接有转动轴。本实用新型通过下料管和循环切割结构的设置，循环切割结构上设置有多个刀片和下料槽，下料管的内径只允许一个玉米粒通过，循环切割结构在转动过程中刀片对下料管最底部的玉米粒进行切割，切割过的玉米粒随即进入下料槽，随后的刀片继续对下料管中的玉米粒进行切割，形成循环，而下料槽中的玉米粒随着循环切割结构的转动落入下方的集料箱中。

摘要： 本实用新型公开了一种玉米转基因试验成熟胚划胚器，包括底座，所述底座顶部两侧设有轨道，底座顶部两轨道之间设有与轨道平行的刀轨，在刀轨顶部设有玉米籽粒安放槽，所述玉米籽粒安放槽顶部设有划开玉米籽粒的刀片，刀片顶部与刀盖的横杆连接，在横杆两端垂直连接有与轨道匹配的滑片。本实用新型将玉米籽粒平放在玉米籽粒安放槽内，通过手动滑动刀盖带动刀片将玉米籽粒划开。本实用新型解决了现有划胚不整齐、效率低且在切割时易损害成熟胚的问题。