拮抗菌

摘要： 1番茄简介及主要病害1.1番茄简介番茄人工种植历史长,是中国重要果蔬。番茄含有丰富的维他命和抗氧化成分,中国番茄年产量为1.21亿t。中国蔬菜生产面积较大,种类较多,番茄产量占全国蔬菜总产量的34.7%。番茄含有大量维生素,其中蕃茄红素抗氧化性较好,可以降低罹患前列腺癌的风险。1.2番茄灰霉病菌番茄灰霉病是灰葡萄孢菌侵袭植物所引起的一类疾病,主要危害蔬菜、果树和花卉。

摘要： 为减少化学农药的使用,丰富生物防治菌株资源库,在分离大白菜菌核病菌的过程中,筛选到一株对其具有抑制作用的拮抗菌,命名为DG1。本研究通过形态观察、生理生化特征检测及16S rDNA序列分析,对拮抗菌DG1进行种属鉴定;通过测量菌落直径,研究DG1发酵液及挥发性物质对大白菜菌核病菌的抑制作用;通过平板对峙法测定拮抗菌DG1对4种植物病原真菌的抑菌带宽度;通过离体叶片接种试验测定拮抗菌DG1对大白菜菌核病菌的生防效果。结果表明,拮抗菌DG1为克里布所类芽孢杆菌(Paenibacillus kribbensis);拮抗菌DG1发酵液和其产生的挥发性物质均可抑制大白菜菌核病菌菌丝的生长;拮抗菌DG1对4种植物病原真菌有抑制作用,抑菌带宽度范围3.0~9.5 mm;拮抗菌DG1发酵液可有效保护大白菜离体叶片受菌核病菌的感染,使病斑明显变小。本研究为大白菜菌核病及其他作物病害的生物防治提供了优良的菌种资源。

摘要： 为获得对槟榔根腐病菌具有生防作用的菌株,以发病槟榔园健康植株根及根部土为材料,采用平板对峙培养法对尖孢镰刀菌(F.oxysporum)、可可毛色二孢菌(Lasiodiplodia theobromae)和奇异根串珠霉菌(Thielaviopsis paradoxa)3种槟榔根腐病菌的拮抗菌株进行筛选。从分离到的247株细菌中,获得了1株对尖孢镰刀菌、可可毛色二孢菌和奇异根串珠霉菌拮抗效果好且稳定性高的菌株brj-21,抑菌率分别为68%、73.66%和74.33%。经形态学观察和生理生化特征、16S rDNA碱基序列分析,brj-21被鉴定为粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)。采用单因素及正交实验对拮抗菌(brj-21)的培养基组分进行优化,确定最佳培养基配方为酵母浸粉2.5 g、葡萄糖1 g、七水合硫酸镁0.4 g、水100 mL。室内实验结果表明,菌株brj-21对由可可毛色二孢菌引起的槟榔根腐病具有较好的防治效果,可作为潜在的生防菌株开发利用。

摘要： 【目的】筛选和研究拮抗霍乱弧菌菌株,为水产养殖业中弧菌病生物防治提供思路,对促进水产养殖的绿色生态持续发展具有重要意义。【方法】通过滤纸片法和共培养法筛选到1株高效拮抗霍乱弧菌的菌株枯草芽孢杆菌,并将其应用于南美白对虾养殖中,观察其对水产养殖池水体霍乱弧菌的拮抗效果。【结果】共培养复筛试验中,枯草芽孢杆菌YB-99与霍乱弧菌共培养16 h后对霍乱弧菌的拮抗率达96.80%,明确其为高效拮抗霍乱弧菌菌株;在南美白对虾养殖试验中,施用枯草芽孢杆菌YB-99的水体其霍乱弧菌总量一直维持在安全限值内(小于103 cfu/mL),与对照组(弧菌清药剂)相比,施用菌组的对虾成活率达92.81%,提高9.1%;虾重21.74 g/尾,提高13.04%;对虾收益提高18.38%。【结论】拮抗霍乱弧菌的枯草芽孢杆菌可有效抑制养殖水体中霍乱弧菌繁殖,维持水体环境平衡,提高南美白对虾成活率与收益,降低养殖成本且安全环保。

摘要： 为了挖掘人参立枯病生物防治高效拮抗菌株,以新疆荒漠植物和盐沼植物中分离出的31种内生真菌为供试菌株,人参立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kuhn)为靶标菌,采用平板对峙法筛选出了1株对人参立枯丝核菌有较强拮抗作用的菌株396,通过形态学观察和ITS序列分析鉴定为球毛壳(Chaetomium globosum)。对该菌株进行了生物学特性试验观察,同时采用盆栽试验研究其发酵液对人参立枯病防治效果及对人参植株的促生效果。结果表明:拮抗菌株396最适培养基为MEA培养基和MA培养基,最适氮源为牛肉膏和硝酸钾,最适碳源为木糖和葡萄糖,适宜酸碱度为pH 7~8,最适生长温度为27°C,致死温度为60°C。菌株发酵液对人参立枯病防治效果与农药对照组相比持平,对人参有明显促生作用,经其处理后的人参平均株高、植株鲜质量、植株干质量、根长、根粗和根鲜质量均有不同程度增加,其中平均株高、植株鲜质量和植株干质量增长了51.21%、115.02%和47.37%,根干质量与对照相比增加不明显。

摘要： 研究立枯丝核菌拮抗青霉菌绳状青霉和草酸青霉发酵液稳定性,为今后生防青霉菌的开发提供理论依据。采用牛津杯法测定立枯丝核菌拮抗青霉菌绳状青霉、草酸青霉发酵液对于温度和酸碱度的稳定性,结果发现,绳状青霉菌株发酵液在20°C、处理10 min和pH=3、处理2 h的情况下,抑菌活性最高,而当温度超过50°C,中性条件会抑制绳状青霉菌株的抑菌活性;草酸青霉菌株发酵液在40°C、处理10 min和pH=9、处理2 h的情况下抑菌活性最高,而当温度超过60°C,中性条件或过碱性条件会抑制该菌株的抑菌活性。

摘要： 为挖掘烟草青枯病抑病型土壤有益微生物资源,通过大田试验分析了不同海拔高度抑病型和导病型土壤的微生物群落结构以及青枯菌、拮抗菌等的相对丰度。结果表明,与导病型土壤相比,烟草青枯病抑病型土壤中有益细菌门放线菌门(Actinobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、蓝藻门(Cyanobacteria)和有益真菌门接合菌门(Zygomycota)、壶菌门(Chytridiomycota)的相对丰度较高。在属水平上,抑病型土壤中一些有益微生物中慢生根瘤菌属(Mesorhizobium)、亚硝化螺菌属(Nitrosospira)等及拮抗微生物假单胞菌(Pseudomonas)、黄杆菌(Flavobacterium)、根瘤菌(Rhizobium)等细菌属和曲霉菌(Aspergillus)、木霉菌(Trichoderma)、漆斑菌(Myrothecium)等真菌属的相对丰度显著高于导病型土壤,其相对丰度与青枯病的发病率均存在显著负相关;而致病微生物劳尔氏菌属(Ralstonia)的相对丰度显著低于导病型土壤。因此,烟草青枯病抑病型土壤中含有丰富的拮抗微生物。

摘要： 以致急性肝胰腺坏死病的副溶血性弧菌(VP_(AHPND)急性肝胰腺坏死病)为靶标菌,用LB、2216E和高氏一号三种培养基分离细菌,通过滤纸片法自江苏沿海海域沉积物及海洋生物分离的152株细菌中筛选出一株对VP_(AHPND)具有显著抑制作用的拮抗菌H36。通过菌体形态观察、生理生化特征及16S rDNA和gyrB序列分析,发现菌株H36与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)聚为一支,且形态特征、培养特征和生理生化特征也与枯草芽孢杆菌相符。H36对5株不同来源的VP_(AHPND)的抑菌圈直径达13.25~24.15 mm,具有良好的拮抗效果,并初步判断其活性物质为胞外产物,包含蛋白类物质。结果表明,该菌株具有开发成为副溶血性弧菌(VP_(AHPND))生物防治菌株的潜在价值。

摘要： 为筛选出对葡萄贮藏中污染黑曲霉具有良好抑制作用的拮抗菌,本研究通过平板稀释法从土壤中筛选出对葡萄采后引起霉菌病变的黑曲霉有较强抑菌作用的菌株,采用形态学和分子生物学相结合的方式对拮抗细菌进行鉴定,并使用单因素和正交试验方法优化其生防条件。结果表明:本研究从新疆葡萄园土壤中分离到14株对黑曲霉具有抑菌效果的细菌,其中,菌株G8对黑曲霉的抑菌效果最佳。经鉴定,黑曲霉拮抗细菌G8为暹罗芽孢杆菌(Bacillus siamensis)。暹罗芽孢杆菌G8最佳生防条件为:接种量3%,培养基初始pH为7,培养温度为33°C,培养温度摇床转速为160 r/min,培养时间为33 h,该条件下抑菌直径达到28.79 mm。研究结果将为拮抗细菌在葡萄采后黑曲霉生物防治中的应用提供理论依据。

摘要： 采用梯度稀释法从葡萄园土壤中筛选到9株抑制葡萄白腐病的放线菌,研究了其抑菌情况和离体果防治效果,其中对葡萄白腐病抑菌效果最好的菌株为K5,其抑菌率为62.56%。处理1(喷发酵原液50倍稀释液24 h后再刺伤接种葡萄白腐病菌)和处理2(刺伤接种白腐病菌24 h后,再喷拮抗菌50倍稀释发酵液)两个处理中,K5的相对防效分别为63.75%和58.75%。形态学和16S rDNA测序鉴定表明K5菌株为淡紫灰链霉菌(Streptomyces lavendulae)。

摘要： 茄科青枯病是一种毁灭性土传病害，主要危害番茄、烟草、辣椒、茄子等作物，至今还没有一种安全有效的药剂能够防治它，因此发掘有效的生防菌进行生物防治，其现实意义十分重大。本研究分离筛选出对番茄青枯病菌有拮抗作用的内生细菌001、009和011，对它们进行分类鉴定，测定它们的生物学特性和抑菌谱；着重对内生细菌001菌株的内生定殖、促生作用及产生的抗菌物质的纯化与其发酵条件等进行了研究，同时开展了对烟草青枯病的田间防治试验，为利用内生细菌防治烟草青枯病奠定了理论和应用基础。从湖南永州、郴州、衡阳和宁乡等的病区健康烟草茎秆中分离到160个内生菌株，其中32个在室内对19株不同青枯菌菌株具有拮抗效果，占到总菌株数的20.0%。在这32个菌株中以001、009、011抑制圈半径较大，分别为3.Omm、3．Omm、4.5mm，故将内生菌株001、009、011作为重点研究对象。抑制病力强的烟草青枯病菌2316菌株，作为测定拮抗菌拮抗性的标准病原菌株。结合001、009、011内生菌株形态学特征、生理生化性状、16SrDNA序列分析和根据MEGA3软件得到系统发育树等，确定001菌株属枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。菌株009和011属短短芽孢杆菌Brevibacillus brevis。菌株001、009、011的16S rDNA序列在GenBank数据库中的登录号分别为DQ444283、DQ444284、DQ444285。采用内生拮抗菌009和土壤菌株011混合防治烟草青枯病、番茄青枯病，其田间防治效果分别为82.5%和85.4%，其田间应用的剂型还有待进一步研究。

摘要： 本研究,从贵州采集的烟草根际土壤中,筛选到22株对烟草黑胫病菌具有稳定拮抗能力的菌株.对拮抗细菌进行形态学观察、生理生化检测和16S rDNA测序鉴定,发现芽孢杆菌有14株,占据较大比例.用抗生素依枯草菌素A (iturinA)、杆菌霉素D(bacillomycin D)、丰原素(fengycin)和表面活性肽(surfactin)的特异引物通过PCR扩增相应合成基因,22株拮抗细菌中,有9株含有iturinA生物合成基因,5株含有bacillomycin D生物合成基因,13株含有surfactin生物合成基因,没有菌株检测到fengycin生物合成基因.研究发现，一些潜在的抗生素基因不能功能性表达;有些菌株虽然具有多种抗生素的生物合成基因，但在一定时间只有一或两种抗生素能够大量产生，在特定条件下起作用的主要抗生素也因菌株而异;菌株产生的大多数抗生素可能受细菌遗传因素影响并受环境信号诱导。本研究分离的拮抗菌株具有产生多种抗生素的能力，使之具有成为烟草黑胫病生物防治工具的潜能，从分子水平上和生化水平上理解生物防治的机制将有利于在农业生态系统中创建合理的拮抗物和代谢物的应用策略。

摘要： 根肿菌是一种专性寄生菌,不能在人工培养基上通过传统的方法进行拮抗菌的平板筛选.本文首先采用传统的土样分离方法,从采集的19个土样中共分离得到放线菌94株,细菌111株,然后结合研究所提供的拮抗菌株,选择一种病原真菌作为指示菌进行平板筛选,初步得到拮抗效果较好的菌株15株,其中放线菌9株,细菌6株,抑菌带半径达8～17mm.进一步用初筛所得的拮抗菌无菌发酵液处理休眠孢子囊,通过统计休眠孢子囊萌发率判断不同菌株对休眠孢子囊萌发的影响,进而验证上述平板指示菌筛选方法的可行性.

摘要： 花椒枯穗病(Pricklyash peel ear blight disease)是2009年河北省林业科学研究院引进花椒新品种上发现的一种新病害,在示范种植期间发现该病害主要危害花椒穗部和叶部,导致穗部干枯、叶片脱落,有时也可侵染果皮,造成花椒产量和品质的下降.通过对引起花椒枯穗病的病原菌形态学和分子生物学鉴定，将其病原鉴定为细极链格孢菌。

摘要： 本实验拟分离获得对葡萄霜霉病菌(Plasmopara viticola)具有明显拮抗效果的菌株,优化其产生抑菌活性物质的发酵条件,为葡萄霜霉病菌的生物防治提供潜在的生防资源菌.从染病葡萄植株健康叶片中分离内生菌,采用离体叶片防效试验筛选拮抗菌.根据菌株的形态与生理生化特征、16S rDNA序列分析对其进行鉴定,并采用单因素试验优化培养基组分及发酵条件.结果表明:从健康叶片中共分离得到56株内生细菌,其中编号为CS5的菌株对葡萄霜霉病菌的拮抗效果最佳,7d后对葡萄离体叶片霜霉病防治效果达96.23％,初步鉴定该菌株属于芽孢杆菌属.其最佳发酵碳源为可溶性淀粉,氮源为酵母膏,初始pH值为6.0.经鉴定,拮抗菌株为Bacillus amyloliquefaciens.在优化的发酵条件下,该菌株对葡萄霜霉病具有更好的拮抗作用.

摘要： 从烟台近郊土壤中分离出一株单核缅胞增生李斯特菌拮抗微生物sly-3，利用传统分类学和分子生物学相结合的方法对其进行鉴定，并采用生物测定的方法评价其抑菌活性。菌株的形态学特征和生理生化特征与枯草芽孢杆菌基本一致，其16S rDNA序列与GenBark中已鉴定的枯草芽孢杆菌的16S rDNA序列同源性达99％以上，据此初步确定其为枯草芽孢杆菌。抑菌谱研究发现，该菌仅对革兰氏阳性菌有抑制作用，而对革兰氏阴性菌无明显抑制作用。Sly-3菌株发酵过滤液初步作用于水产品中单核增生李斯特菌，发现可有效抑制该致病菌的生长。

摘要： @@通过对嫁接西瓜根际细菌、真菌、放线菌、2,4-DAPG产生菌种群数量变化及根际细菌及2,4-DAPG产生菌群落结构的变化的研究，来阐明嫁接西瓜根际微生物种群结构与土传病害的关系，旨在从化感角度进一步揭示嫁接西瓜的抗病机理。

摘要： 从柑橘园根系土壤中分离到1株对柑橘青、绿霉病菌有强烈拮抗作用的酵母(34-9)菌株，在活体及离体试验中其抑制病菌的作用均较强，在柑橘果实表面接种6天都未然发病。并且取其上清液和灭菌液对柑橘青、绿霉病菌没有抑制作用，初步断定该菌株不产生抗生素。经形态特征和生理生化检测，确定其为柠檬形克勒克酵母(Kloeckeraapiculata)。扫描电镜观察结果表明：菌株34-9对柑橘青、绿霉病菌直接作用，可观察到菌株34-9紧紧包围柑橘青、绿霉病菌菌丝或附着吸附在柑橘青、绿霉病菌菌丝上，最终使柑橘青、绿霉病菌菌丝浓缩，菌丝畸形等现象。

摘要： 通过对来源于水稻田、蔬菜地和农药厂附近的67份不同土样进行拮抗细菌的分离,共分离到细菌382株采用对峙培养法对分离菌株进行抑菌活性测定.从土样中分离获得的382株细菌分离物中,对辣椒疫霉具有较强拮抗能力的菌株有6株,占1.6％;拮抗能力中等的菌株9株,占2.3％;略有拮抗能力的菌株18株,占4.7％;发现bGV1-1、bNV5-4、bYD2-7、bND6-4、bGD3-1和bGD2-6对稻瘟病菌(Pyricularia grisea)、水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)、油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)、辣椒炭疽病菌(Colletotrichum capsici)、水稻恶苗病菌(Fusarium moniliforme)和白菜黑斑病菌(Alternaria brassicae)具有抑菌活性,抑制率在60％以上,其中YD4-6、bGV1-1、bYD6-7、bGD2-6对辣椒疫霉具有较好的抑菌活性,其中GV1-1对辣椒疫霉具有较好的抑菌活性.

摘要： 以MS加蕙兰根部浸出液为培养基，从蕙兰根部，假鳞茎、芽及蝴蝶兰的肉质根中分离得到66株内生细菌，通过平板对峙法与96孔板高通量筛选后得到7株对于蝴蝶兰软腐病有抑制作用以及三株对于植物真菌病原菌有较强抑制作用的内生细菌，并通过16S rDNA序列分析进行初步鉴定。

摘要： 一种桑树内生真菌柄孢壳菌(Podospora sp.)7GJ‑4，该菌株经中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC NO：M 2018118，保藏日期2018年03月24日。本发明具有如下的优点：从桑树中分离获得对桑椹缩小性菌核病病原菌桑椹核地杖菌有很强的拮抗作用内生真菌，经形态学及分子生物学鉴定该菌株为柄孢壳菌属(Podospora)的新种；该菌株在15°C～30°C范围内均可生长，且无菌发酵滤液有较强的热稳定性，能够适应田间的温度且对桑树组培苗无致死作用；因此具有潜在的商业开发和应用价值，在桑椹菌核病的生物防治实践中具有重要的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种产脂肽类抗菌素的梨火疫病菌拮抗细菌及其发酵方法和应用，属于农业微生物技术领域。该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，分类命名为贝莱斯芽孢杆菌，保藏编号为CGMCC No.24843。该菌株产生的脂肽类抗菌素对梨火疫病菌具有显著拮抗作用和优良的防病效果，对高温、酸碱、蛋白酶、紫外线有一定耐受性，且生长繁殖速度快、竞争能力强，可廉价生产，具有良好的开发应用前景。本发明还公开了一种提高该菌株产生脂肽类抗菌素的发酵方法，该方法成本低廉、操作简便，同时能够提高在梨火疫病生物防治中的效果，为该菌株工业化发酵生产和梨火疫病生物农药的研发提供了理论基础和技术参考。

摘要： 本发明公开了一种防治姜瘟病的拮抗菌YJ32及其应用，本发明筛选得到一株双向伯克霍尔德氏菌(Burkholderia ambifaria)YJ32，保藏号为CGMCC NO.15922。本发明的拮抗菌株YJ32适生范围宽，易培养，对姜瘟病的病原菌具有靶向抑制作用，是一种防治姜瘟病效率高、环境友好的生防菌株，应用前景广阔。

摘要： 本发明公开了一种氧化石墨烯和拮抗菌复配的植物疫霉病抗菌剂，具体是氧化石墨烯和拮抗菌解淀粉芽孢杆菌复配在防治植物疫霉病方面的应用。本发明研究显示，氧化石墨烯对多种疫霉病菌具有显著的抑制作用，尤其是与拮抗菌解淀粉芽孢杆菌联用可发挥明显的协同增效作用，对植物疫霉病防效显著，可应用于研制防治植物病害、提高作物产量的生物防病制剂，在相关的农业生产上具有很好的推广应用前景。

摘要： 本发明涉及拮抗菌株1X1Y及其应用，属于植物病害生物防治技术领域，本发明提供的拮抗菌株1X1Y可显著抑制多种疮痂链霉菌和致病疫霉菌生长，能有效防治马铃薯疮痂病和晚疫病，可为马铃薯疮痂病和晚疫病的防治提供新的生防资源。

摘要： 本发明涉及生防菌领域，具体涉及一株番茄青枯病拮抗菌株及其在防治番茄青枯病方面的应用，该拮抗菌株为铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa B‑6，其16S rDNA序列如SEQ ID NO:1所示，于2021年12月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC No：24048；保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编：100101。本发明的拮抗菌株B‑6具有良好的生防潜能，可开发具有促生抗病作用的生防菌剂。

摘要： 本发明涉及拮抗菌株JYC 314及其应用，属于植物病害生物防治技术领域，本发明提供的拮抗菌株JYC 314可显著抑制多种疮痂链霉菌和致病疫霉菌生长，能有效防治马铃薯疮痂病和晚疫病，可为马铃薯疮痂病和晚疫病的防治提供新的生防资源。

摘要： 本发明涉及一种烟草种子内生拮抗菌DW15，保藏编号：CCTCC NO：M 2022820，分类命名为副黄假单胞菌Pseudomonas parafulva，保藏于中国典型培养物保藏中心。该菌株呈黄色圆形，表面湿润光滑，微隆起。本发明筛选的种子内生菌DW15对青枯雷尔氏菌的抑菌作用强，是对烟草青枯病具有良好效果的生防细菌，能产生较多的蛋白酶，以及较强的解磷和固氮能力。同时对烟草植株具有良好的促生效果，能显著提高烟苗生物量，可单用或复配使用，对烟草青枯病生物防治具有广阔的应用前景，对保护生态环境也有重要意义。

摘要： 本发明涉及一种光叶苕子拮抗菌的高效筛选方法，属于菌株筛选技术领域。本发明的筛选方法包括如下步骤：(1)将光叶苕子样品液涂布于固体培养基中，培养，得到菌落；(2)将步骤(1)所述的菌落接种至已含有靶标微生物的固体培养基中，继续培养，筛选靶标微生物生长受抑制区域的菌落，得到拮抗菌。本发明的筛选方法无需事先分离单菌落，节约时间，简单高效；不易遗漏样品中的微生物；能定量把控靶标微生物的含量；还能使靶标微生物在培养基中均匀接种，避免了靶标微生物喷洒不均匀影响拮抗菌的筛选，也避免了靶标微生物泄露导致的二次污染。为筛选植物拮抗菌提供了依据。

摘要： 本发明涉及一株烟草青枯菌耐酸性拮抗菌DW68，分类命名Bacillus panaciterrae，保藏编号：CCTCC NO：M 2022677。其菌落呈白色，圆形，边缘光滑凸起有光泽，湿润，不透明；菌株呈细杆状，有鞭毛，革兰氏染色为阳性，且具有良好的耐酸能力，在酸性条件下生长速率高于青枯菌。DW68在pH 4.5和铝离子浓度为2.4mmol/L时的生长速率显著高于青枯雷尔氏菌，对青枯雷尔氏菌的抑菌圈直径分别为13.12mm，在酸性土壤中对烟草青枯病的最高防效可达到83.33％。为有效防治烟草青枯病的发生提供新方向。