铜锌超氧化物歧化酶

摘要： 本试验旨在研究日粮中添加铜对冬毛期雄性乌苏里貉毛皮品质、脏器指数、血清生化指标及相关基因表达的影响.随机选取体重相近的雄性乌苏里貉105只,采用单因子试验设计,随机分为7组,每组15个重复,每个重复1只.分别饲喂添加蛋氨酸铜为0(对照组)、30(Ⅰ组)、45(Ⅱ组)、60(Ⅲ组)、75(Ⅳ组)、90(Ⅴ组)和200 mg ? kg-1(Ⅵ组)的试验日粮,预饲期7 d,正式期60 d.试验结束后每组选择8只乌苏里貉采血、屠宰,检测毛皮长、铜蓝蛋白酶活性、超氧化物酶活性及肝中相关基因表达的测定.结果表明:1)铜添加水平对貉的体长、鲜皮长、针毛长与针毛细度有显著影响(P＜0.05),对鲜皮重、绒毛长与绒毛细度没有显著影响.2)日粮铜添加水平对乌苏里貉的心脏指数、肝脏指数、肾脏指数与脾脏指数没有显著影响.3)随着铜水平的升高,血清葡萄糖(glucose,GLU)含量也随之升高(P＜0.05),不同铜添加剂量对血清中乳糖脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)、天门冬酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)与丙氨酸氨基转移酶(alanine amino transferase,ALT)活性有显著影响(P＜0.05),使血清铜蓝蛋白(ceruloplasmin,CER)、总超氧化物歧化酶(Total superoxide dismutase,T-SOD)与铜锌超氧化物歧化酶(copper and zinc superoxide dismutase,Cu-Zn SOD)的活性先升高后趋于稳定(P＜0.05).4)日粮不同铜添加水平对肝的CER、Cu-Zn SOD、生长激素受体(Growth hormone receptor,GHR)与胰岛素生长因子Ⅰ(insulin-like growth factor 1,IGF-1)基因表达有显著影响,90与200 mg·kg-1组的肝CER和Cu-Zn SOD基因表达水平显著高于30 mg ? kg-1组,30 mg ? kg 1组肝CER和Cu-Zn SOD基因表达水平显著高于未添加组(P＜0.05).90 mg ? kg-1的肝GHR和IGF-1基因表达水平显著高于未添加组(P＜0.05).饲粮中铜添加水平为60?75 mg ? kg-1时,貉的毛皮品质最佳;血清中CER和Cu-Zn SOD的酶活不会随着铜水平的变化而显著变化;血清中AST、ALT和LDH的酶活没有显著变化;此外,还提高了肝内GHR和IGF-1基因的表达量,促进貉生长.结合以上测定指标,建议貉的饲粮中铜添加含量为60～75 mg ? kg-1.

摘要： 目的 探讨食管癌中铜锌超氧化物歧化酶(SOD1)的表达及其对细胞增殖的影响和机制.方法 选取食管癌组织和癌旁组织各32例,利用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)和免疫组织化学法检测SOD1表达.将食管癌细胞系KYSE510随机分为3组:对照组、腺相关病毒(AAV)-绿色荧光蛋白(GFP)组和AAV-SOD1组.AAV-GFP组和AAV-SOD1组细胞分别转染AAV-GFP和AAV-SOD1重组病毒载体,对照组则加磷酸盐缓冲液(PBS)处理.利用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性、二氢乙锭(DHE)探针检测活性氧簇(ROS)产生、Western blot检测Wnt5a和β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达.两组间比较采用t检验,3组间比较采用单因素方差分析并采用Tukey法进行两两比较.结果 与癌旁组织(1.00±0.33)比较,食管癌组织中SOD1 mRNA表达升高(3.76±0.51,t=-25.595,P＜0.01).食管癌中SOD1蛋白表达水平(1.93±0.35)也高于癌旁组织(1.00±0.28,t=-11.734,P＜ 0.01).转染24、48、72 h后,AAV-SOD1组细胞活性(0.165±0.016、0.283±0.023、0.391±0.036)明显高于对照组(0.133±0.017、0.213±0.028、0.326±0.038)和AAV-GFP组(0.129±0.015、0.209±0.024、0.316±0.032,P＜0.01).转染48 h后,AAV-SOD1组细胞ROS水平(0.757±0.062)明显低于对照组(1.000±0.079)和AAV-GFP组(1.048±0.108,P＜0.01),而SOD1、Wnt5a和β-catenin蛋白表达水平则明显高于对照组和AAV-GFP组(P＜0.01).结论 SOD1的表达在食管癌中升高,过表达SOD1通过抑制ROS和调节Wnt信号通路活化诱导细胞增殖.

摘要： 拟南芥铜锌超氧化物歧化酶(AtSOD1)是理想的研究植物SOD酶结构与功能关系的模式蛋白,对于理解植物抗逆性有着重要的意义.目前对该酶稳定性、活性等基本性质了解得不够充分,影响了相关研究的开展.研究在大肠杆菌中异源表达出具有生物活性的AtSOD1蛋白,通过电子顺磁共振波谱(EPR)检测,活性中心电子结构准确.对AtSOD1的稳定性进行研究,其中,AtSOD1的尿素解折叠实验的圆二色谱(CD)结果发现,在225 nm附近出现了一个α-螺旋和β-折叠比例变化的拐点,且当尿素浓度为4～5 mol/L时,天然态AtSOD1解折叠曲线出现了一个平台期.在利用差示扫描量热(DSC)检测天然态AtSOD1的物理稳定性时发现,该酶在单体重构为二聚体过程中,也存在两个Tm值,分别为102.2°C和100.5°C.根据上述结果,推测认为,AtSOD1从二聚体解聚为单体过程中存在一个中间态,与该酶结构稳定性有关.

摘要： 目的:研究乐尔脉胶囊对脑缺血再灌注损伤大鼠大脑皮层组织中氧化应激损伤的影响及机制.方法:将65只大鼠随机分为假手术组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、阳性对照组(脑心通胶囊,3.40 g/kg)和乐尔脉胶囊高、低剂量组(0.37、0.18 g/kg),每组13只.除假手术组大鼠行假手术外,其余各组大鼠均采用线栓法复制大鼠中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)模型.造模后24 h开始灌胃给药,每天给药1次,连续给药7 d.末次给药2 h后,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定大鼠脑缺血面积;苏木精-伊红(HE)染色后在显微镜下观察脑组织病理学变化;Western blot法检测大脑皮层组织中血红素加氧酶1(HO-1)、铜锌超氧化物歧化酶(SOD1)、锰超氧化物歧化酶(SOD2)和核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达水平.结果:与假手术组比较,模型组大鼠脑缺血面积显著增加(P<0.05),间质重度水肿,炎性细胞浸润明显;大脑皮层组织中HO-1和SOD1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),SOD2和Nrf2蛋白表达水平显著降低(P<0.05).与模型组比较,乐尔脉胶囊高、低剂量组大鼠脑缺血面积均显著减小(P<0.05),间质水肿减轻,炎性细胞浸润减少,小胶质细胞增生减弱;大脑皮层组织中HO-1、SOD1、SOD2和Nrf2蛋白表达水平均显著升高(P<0.05).结论:乐尔脉胶囊对脑缺血再灌注损伤大鼠具有一定改善作用,可能与上调皮层组织中抗氧化因子HO-1、SOD1、SOD2和Nrf2蛋白的表达有关.

摘要： Apostichopus japonicus Cu/Zn-superoxide dismutase (Aj-SOD1) with activity was successfully expressed in prokaryotic host E.coli BL21(DE3).Total RNA was extracted from the intestinal tissue of Apostichopus japonicus by Trizol.Cu/Zn-SOD1 gene was amplified by RT-PCR to obtain the coding gene sequence of Aj-SOD1 (GenBank:JX097096.1,459 bp) and pMD18-Aj-SOD1 was constructed.Cloning vector of pMD18-Aj-SOD1 with restriction sites of Nde Ⅰ /Xho Ⅰ was constructed.The recombinant expression vector of pET 30a-Aj-SOD1 was constructed with pET30a(+ ) double enzyme digested by Nde Ⅰ /Xho Ⅰ and Aj-SOD1.pET30a-Aj-SOD1 was transformed into E.coli BL21(DE3) competent cells and Kan+ resistance screening positive transformants were selected.Aj-SOD1 proteins with antioxidant activity were successfully obtained by inducing with 0.1 mmol/L IPTG after 8 h and detected by SDS-PAGE and pyrogallol autoxidation method.%采用原核宿主大肠杆菌BL21(DE3)成功表达了具有活性的仿刺参铜锌超氧化物歧化酶(A pos-tichopus japonicus Cu/Zn-superoxide dismutase,Aj-SOD1)蛋白.利用Trizol法从海参肠组织中提取总RNA,通过反转录PCR扩增获得Aj-SOD1基因的编码序列(GenBank:JX097096.1,459 bp),构建克隆载体pMD18-Aj-SOD1;在目的基因两端引入(XhoⅠ/N deⅠ)酶切位点,构建克隆载体pMD18-Aj-SOD1(XhoⅠ/N deⅠ).将此载体与表达质粒pET30a(+)分别双酶切后连接,构建重组表达载体pET30a-Aj-SOD1.转化至大肠杆菌BL21(DE3),Kan+抗性筛选阳性转化子,获得基因工程菌BL21(DE3)-pET30a-Aj-SOD1.SDS-PAGE和邻苯三酚自氧化法检测发现,经0.1mmol/L IPTG诱导8h后,成功获得具有抗氧化活性的Aj-SOD1蛋白.

摘要： 目的 拟构建蛋白转导结构域(PTD)4-铜/锌-超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)原核表达质粒,纯化制备PTD4-Cu/ZnSOD融合蛋白,探讨其穿膜能力.方法 设计合成hCu/ZnSOD引物,扩增hCu/ZnSOD cDNA片段;采用PCR靶向克隆法将扩增产物与含有相同酶切位点载体质粒PET16b-PTD4进行重组,扩增质粒,双酶切鉴定和DNA测序;获得PET16b-PTD4-Cu/ZnSOD(CDs)原核表达载体,导入感受态E.coli BL21(DE3)中,进行扩增培养,收集菌体,将其裂解离心、Ni+2亲和层析、收集目的蛋白.融合蛋白孵育人心肌细胞,免疫荧光法检测融合蛋白穿膜能力.结果 通过测序证实实验扩增所得的PTD序列与设计的预期序列一致.设计并简并PTD4-Cu/ZnSOD基因长度为567 bp,通过引物进行正反向测序证实该序列与已被登录的GEN-BANK中Cu/ZnSOD序列相一致,并构建了相应的原核表达质粒.并在E.coli BL21进行大量表达,最终收集的PTD4-Cu/Zn-SOD具有良好水溶性.SDS-page分析显示构建的PTD4-Cu/ZnSOD分子量约为20 kDa,与预期的蛋白分子量20.45 kDa相符合.融合蛋白可以穿透心肌细胞胞膜,进入细胞后主要分布在胞质和胞核内并具有天然活性.结论 成功地构建了PET16b-PTD4-Cu/ZnSOD原核表达质粒,获得了可穿透心肌细胞膜的PTD4-Cu/ZnSOD融合蛋白,为应用Cu/ZnSOD治疗缺血性疾病的研究奠定了基础.%Objective This study is aimed to construct prokaryotic expression plasmid PTD4-Cu/ZnSOD and purify PTD4-Cu/ZnSOD fusion protein,to explore the property of intercellular transport.Methods The primers of hCu/ZnSOD were designed and synthesized to amplify full-length hCu/ZnSOD cDNA by PCR cloning assay.After double-enzyme digestion,the linearized PET16b-PTD4 and hCu/ZnSOD cDNA was ligated with PCR cloning reaction to construct PET16b-PTD4-Cu/ZnSOD.The recombinant plasmid was verified by PCR and DNA sequencing,and transformed into E.coli BL21 (DE3)host bacteria which was induced to obtain fusion protein PTD4-Cu/ZnSOD.The fusion protein was purified with affinity chromatography because of the recombinant protein having an N-terminal His-tag sequence and characterized by SDS-PAGE and Western blot.The transmembrane ability of fusion protein was investigated by exami-nation of PTD4-Cu/ZnSOD in cells using immunofluorescence on cultured cardiomyocytes.Results The sequence of amplified PTD4 was identical with the designed The PTD4-Cu/ZnSOD fusion gene was amplified successfully and the length of thesequence was 567 bp.The PTD4-Cu/ZnSOD (CDs)prokaryotic expression vectors inplasmiwere successfully constructed and inserted into E.coli BL21 to produce alarge quantity of recombinant PTD4-Cu/ZnSOD proteins.The expressed fusion proteinPTD4-Cu/ZnSOD was souble and about 20 kDa which was accroding with the expected recombinant products.The result of immunofluorescence suggested that the fusion protein could transduce into cardiomyocytes with native activity.Conclusion The PTD4-Cu/ZnSOD fusion protein was successfully prepared and could be efficiently transduced into cardiomyocytes with native activity,which provides a basis for the research on treatment and prevention of myocardial ischemia-reperfusion injury with Cu/ZnSOD.

摘要： Copper/zinc superoxide dismutases are important antioxidant enzymes to guard cells against superoxide toxicity. The over?expression of CuZnSOD can improve the resistance and recovery ability of plants to abiotic stresses such as salt,drought,cold and high temperature stress.The plant genome encodes three types of CuZnSOD,the CuZn?SOD1 in cytoplasm,the CuZnSOD2 in chloroplast and the CuZnSOD3 in peroxisome or extracellular. The cytosolic Eu?CuZnSOD1 gene was cloned from Eucalyptus grandis×E.ophylla(GenBank Accession Number:JX138573)and the bi?ological function was verified by prokaryotic expression system.The fusion vector of sense EuCuZnSOD1 gene derived by CaMV35S promoter was constructed and transformed to Eucalyptus grandis ×E. ophylla by Agrobacterium. Using Kana?mycin selection and PCR analysis,ten transgenic eucalyptus lines were obtained. Compared with the control plants the tissue culture transgenic eucalyptus No. 40 and No. 41 could be well tolerant in -13.1°C for 5 h and recovery without obvious damage.There was no distinct increase in SOD enzyme activity in transgenic plant paralleled with wild plant un?der room temperature and 4°C for 48 h. However, the real?time PCR analysis showed that the expression of EuCuZn?SOD1 was raised to about nine times higher than wild line under room temperature.After 4°C for 36 h,the expression of EuCuZnSOD1 in No.40 and No.41 line was respectively increased about 16 and 36 times higher than the wild plant and then down to the normal level at 4 °C for 48 h. The data indicated that the increased expression of EuCuZnSOD1 im?proves the cold tolerance of Eucalyptus. The klason lignin content of transgenic Eucalyptus was reduced especially the No. 41 Eucalyptus was decreased to 56% of the control plant except for the No. 40 plant was no significantly different from the control plant. In conclusion,over?expression of the cytosolic EuCuZnSOD1 in Eucalyptus grandis ×E. ophylla could enhance the cold?tolerance and improve the recovery ablity.%铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)是一种清除超氧阴离子自由基的金属酶,与多种抗逆性相关.该研究利用CaMV35S启动子融合巨尾桉EuCuZnSOD1基因通过根癌农杆菌介导的叶盘转化法导入巨尾桉中,经卡那霉素初步筛选和PCR鉴定,得到10株转基因阳性植株.结果表明:通过-13.1°C暗处理5 h的抗寒性实验,发现40和41号植株在低温下无叶片萎蔫现象,组培室培养100 d后全株存活无白化叶片,说明这两株转基因巨尾桉的抗低温和冻害后恢复能力较强.在4 °C低温胁迫下跟踪监测转基因温室苗的SOD酶活性发现,与对照相比转基因植株的SOD酶比活力无规律性且变化不大,但是相同条件下实时定量PCR检测结果表明抗寒性较强的40和41号植株在常温下EuCuZnSOD1的表达量较对照增加了约9倍,4 °C处理36 h后EuCuZnSOD1的表达量相比对照植株分别增加了16倍和36倍,说明EuCuZnSOD1在低温胁迫下的表达量增加提高了巨尾桉的耐寒性.分析转基因组培苗全株的硫酸木质素含量,表明EuCuZnSOD1高表达不影响甚至降低了巨尾桉的木质素含量,40号植株的木质素含量与对照相同,而41号整株植株的木质素含量相比对照降低了56%,其他检测转基因植株的木质素含量均有不同程度的降低.该研究结果表明巨尾桉中大量表达EuCuZnSOD1基因可以提高巨尾桉的抗寒能力以及寒害后的恢复能力,不影响甚至可能是负调控了转基因巨尾桉的木质素生物合成.

摘要： 铜锌超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)是一种广泛存在于生物体中最主要的抗氧化酶之一,在抵御过多活性氧簇对机体毒害的过程中起重要作用.本研究以太洋真宽水蚤为研究对象,采用RT-PCR与RACE方法克隆得到太平洋真宽水蚤Cu/Zn SOD基因全长cDNA序列.Cu/ZnSOD (GenBank登录号:MF289343)基因序列全长837bp,其中完全开放阅读框为456bp编码152个氨基酸,5'非编码区长297bp,3'非编码区长84bp,分子量约为15.050kDa,理论等电点为5.73.序列比较表明,太平洋真宽水蚤Cu/Zn SOD cDNA的氨基酸序列与其他甲壳动物的一致性较高;存在8个蛋白翻译后修饰位点及蛋白家族标签序列,无跨膜结构域与信号肽.在重金属铬与镍胁迫下,通过实时荧光定量PCR对太平洋真宽水蚤Cu/Zn SOD mRNA体内表达特点分析显示,其表达量均呈现先升后降趋势,在暴露12小时后表达量达到峰值;铬胁迫下的表达量略高于镍;联合胁迫下呈现出拮抗作用.本研究结果将有利于深入探讨桡足类Cu/Zn SOD基因的结构与功能,为进一步研究抗氧化分子机理奠定基础.

摘要： 铜锌超氧化物歧化酶(Copper-zinc Superoxide Dismutase,SOD1)是胞内广泛存在的抗氧化酶,催化O2·-歧化为H2O2和O2,维持胞内活性氧物种(ROS)内稳态.癌细胞的生长、增殖都依赖于适度高浓度的H2O2,高表达的SOD1维持癌细胞内较高水平的H2O2和ROS内稳态.抑制癌细胞内SOD1的活性,可以有效调节ROS信号通路,抑制癌细胞的生长、增殖,阻滞癌细胞周期,促进癌细胞凋亡.因此,通过抑制其活性调控癌细胞内ROS信号网络并选择性杀死癌细胞已经成为抗癌药物设计的一个重要方向.本文主要总结了各类SOD1抑制剂,以及SOD1抑制对ROS信号转导的调控,分析了SOD1特异抑制选择性杀死癌细胞的机制.

摘要： 分别利用离子淌度质谱和荧光光谱方法研究了5-氟尿苷(5-Furd)与铜锌超氧化物歧化酶(SOD1)的相互作用.离子淌度质谱研究结果表明, 5-Furd能够稳定SOD1构型, 减缓其碰撞诱导去折叠;外源荧光光谱方法进一步证明5-Furd可以抑制SOD1的聚集.利用荧光光谱研究了不同温度下5-Furd与SOD1的相互作用, 阐明了二者的作用机制、 结合常数和结合位点数, 并根据热力学函数推断二者的作用力类型为典型的疏水作用.%The interaction between 5-Furd and Cu, Zn superoxide dismutase(SOD1) was investigated by means of electrospray-ion mobility mass spectrometry(ESI-IMS-MS) and fluorescence spectroscopy.The result of ESI-IMS-MS showed that 5-Furdis could stabilize the conformation of SOD1 against unfolding transition at different collision voltages.Through the ThT fluorescence method, it was further testified that 5-Furd could {inhibit} the aggregation of apo-SOD1.In addition, the interaction between SOD1 and 5-Furd at different temperatures was investigated by fluorescence spectrometry, and the characters of their interaction were elucidated including the interaction mechanism, the binding constant, binding site number and the corresponding thermo-dynamic parameters(ΔH, ΔS and ΔG).According to the thermo-dynamic parameters of interaction, it was found that the hydrophobic forces play an important role on their interaction.

摘要： 本文首次从耗牛血红细胞中提取出Cu,Zn-SOD(铜锌超氧化物歧化酶)，获得国家专利。此原料与青藏高原珍贵天然活性物质合理组方，制成抗疲劳保健食品。实验证明，给小鼠口服不同剂量的耗牛SOD胶囊，30天能明显延长小鼠的游泳时间，显著提高小鼠肝糖原含量，并显著降低小鼠运动后血乳糖曲线下面积。根据保健食品功能学评价和检验分析的规定，判定耗牛SOD胶囊具有抗疲劳功能。并根据SOD是大分子不能被吸收，且被吸收的极少部分异体SOD有可能引起抗原、抗体的过敏反应原理推理SOD作用机制，只能是除了在消化道中发挥清除超氧化物自由基(O2·-)的作用外，在消化过程中，水解成内源性活性肽而发挥重要作用。

摘要： 铜锌超氧化物歧化酶(SOD)作为歧化超氧阴离子为氧气和过氧化氢的酶为人们熟知.在本工作中,通过测定SOD与小牛胸腺DNA(ctDNA)相互作用的紫外-可见吸收光谱,SOD断裂pBR322DNA及λDNA的核酸电泳等实验,首次验证了SOD在二价Mn2+、Zn2+、Co2+、Mg2+、Ni2+、Ca2+等金属离子存在下具有全新的类核酸酶性质.动力学实验表明SOD可通过连续反应的方式将超螺旋质粒DNA断裂为缺口和线性形式.

摘要： 铜锌超氧化物歧化酶(CSD)是植物响应逆境胁迫过程中的关键酶,其含量和活性与植物抗逆性密切相关.本研究以结缕草(Zoysia japonica)cDNA为模板,利用同源克隆法,从结缕草转录组数据库中克隆获得了结缕草ZjCSD基因,该基因编码一个含有152个氨基酸的蛋白质.生物信息学分析结果显示:ZjCSD基因编码蛋白为稳定的、亲水的、酸性、非分泌脂溶蛋白,定位于细胞质中,含有CSD蛋白家族特有的保守结构域;与小米、玉米等禾本科植物具有较高的同源性,进化关系较近.采用实时荧光定量PCR研究该基因在干旱胁迫(30％PEG)、盐胁迫(150mMNaCl)和重金属胁迫(200mg·L-1Cd2+,ig·L-1Pb2+)下的表达模式,结果表明,干旱胁迫、盐胁迫和Cd2+胁迫均能诱导ZjCSD基因表达量上调,pb2+胁迫诱导ZjCSD基因表达量下调.故推测结缕草ZjCSD基因在结缕草应对干旱、盐和重金属胁迫的过程中发挥作用.

摘要： 目的：为甘蔗的抗旱基因工程育种提供理论依据和候选基因.方法：以甘蔗近缘种斑茅为材料,采用同源克隆的方法,以高粱Cu/Zn-SOD(登录号:XM 002445626.1)cDNA序列为探针,对甘蔗属EST数据库进行检索、比对和拼接,并设计特异引物.结果：克隆获得了2个Cu/Zn-SOD(SaSOD-1a和SaSOD-1b,登录号:KJ001795和KJ001796)基因全序列,其中SaSOD-1a基因组序列全长2473bp,SaSOD-1b基因组序列全长2228bp,均有8个外显子,7个内含子,其cDNA序列长度均为692bp,编码206个氨基酸.序列比较分析表明,SaSOD-1a和SaSOD-1b序列相似性为98.6％,有8个单核苷酸多态性位点,蛋白质相似性为99.0％,2个氨基酸变异位点.用推导出的氨基酸序列与其它植物做同源进化分析,均表现出较高的保守性.结论：基因的获得为进一步了解超氧化物歧化酶与斑茅耐旱性的关系奠定了基础.

摘要： [目的]了解燃煤砷暴露人群外周血中铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)mRNA、谷胱甘肽过氧化物酶1(GSH-Px1)mRNA转录表达与酶活力的关系,探讨其在燃煤污染型地方性砷中毒(以下简称燃煤型砷中毒)肝损伤发生发展中的作用。[方法]选择贵州省兴仁县燃煤型砷中毒病区133例砷暴露者为砷暴露组(包括病区非病人组和病例组),将病例组参照《职业性中毒性肝病诊断标准》(GBZ 59-2010)分为无明显肝病组和肝病组(分为轻度肝病组和中重度肝病组);在距病区约13km的非砷暴露村,确定34例经健康体检无异常的居民作为对照组。知情同意下采集上述观察对象的外周血,采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测CuZn-SOD mRNA和GSH-Px1 mRNA表达,化学法检测超氧化物歧化酶(SOD)、CuZn-SOD和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力。[结果]与对照组比较,肝病组CuZn-SOD和GSH-Px1 mRNA表达量均显著升高(P<0.05或P<0.01);与病区非病人组比较,肝病组CuZn-SOD mRNA表达量显著升高(P<0.05),而GSH-Px1 mRNA表达量仅有升高趋势;各病例组间比较差异无统计学意义。与对照组和病区非病人组比较,肝病组SOD、CuZn-SOD和GSH-Px活力均显著降低(P<0.05或P<0.01);与无明显肝病组比较,轻度肝病组SOD和CuZn-SOD活力均显著下降(P<0.05),GSH-Px活力仅有下降趋势,而中重度肝病组三种酶活力均显著下降(P<0.05或P<0.01);与轻度肝病组比较,中重度肝病组SOD活力显著降低(P<0.05),而CuZn-SOD和GSH取活力仅有下降趋势。CuZn-SOD和GSH-Px1转录表达和酶活力分别与肝损伤程度呈正相关和负相关(P<0.01),且转录表达与其酶活力均呈负相关(P<0.01)。[结论]燃煤砷暴露可导致人体外周血CuZn-SOD mRNA和GSH-Px1 mRNA表达上调,CuZn-SOD和GSH-Px活力降低;砷可能通过调控CuZn-SOD和GSH-Px1的转录表达水平而影响其酶活力,参与砷中毒肝损伤的发生发展。

摘要： 超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SoD)作为一种抗衰老剂广泛应用于医药、食品及化妆品行业。本文描述了一种利用脆壁克鲁维酵母生产高品质基因重组人源铜锌超氧化物歧化酶的方法，具体包括工程菌的构建和菌体发酵诱导两部分。

摘要： 利用植物有益内生细菌进行植物病害生物防治和提高作物产量是当前农用微生物研究的一个热点。在我国,以植物有益内生细菌为主体的植物微生态制剂已经进入田间的农业生产应用,取得了良好的经济和生态效益。细菌在植物上发挥其功能的关键是细菌可以在作用部位很好的定殖。研究发现,在细菌与植物相互作用时,会引起该区域的氧自由基浓度的急剧升高；同时植物也会代谢分泌出一些酚类物质,这些物质都会产生氧自由基。在该环境中定殖的细菌必须克服这种氧自由基对细胞的毒性。

摘要： 目的:研究铜锌超氧化物歧化酶(Cu, Zn-Superoxide dismutase,Cu, Zn-SOD)经低分子肝素(Low molecular weight heparin,LMWH)化学修饰前后蛋白分子二级结构的变化. 方法:使用KBr法、溶剂挥发成膜法和液体膜法测定Cu, Zn-SOD和LMWH修饰后结合物(LWMH-SOD)的傅立叶转换红外(FTIR)谱,并利用傅立叶去卷积和二阶求导技术对获得谱图的酰胺Ⅰ带(1700～1600cm-1)进行计算机分峰和图谱拟合来分析不同物理状态下Cu, Zn-SOD和LMWH-SOD酶蛋白分子的二级结构,同时,运用圆二色谱(CD谱)技术对修饰前后酶蛋白分子的二级结构变化进行佐证分析. 结果:FTIR和CD分析结果表明,LMWH-SOD与Cu, Zn-SOD相比,酶蛋白分子二级结构中α-螺旋构象比例上升,β-构象成分比例接近且在两者中均为主要构象成分. 结论:Cu, Zn-SOD和LMWH-SOD结合物二级结构中均以β-构象为优势构象,使用LMWH进行适当的化学修饰,主要是影响酶蛋白分子二级结构中的α-螺旋构象,使其含量上升,对酶蛋白优势构象同时也是构成酶分子活性中心的β-构象的影响微弱.

摘要： 目的：探讨中国汉族人群中噪声性听力损失易感性与SOD1rs1041740、rs2070424、rs10432782和rs4998557单核苷酸多态性之间的关联。方法：利用病例对照研究，通过比较同一噪声暴露强度噪声作业人员的左耳3000Hz频段听阈位移情况，筛选出听阈位移最大的10％个体作为本研究的易感人群组，共201例，听阈位移最小的10％个体作为耐受人群组，共202例，并进行相关的职业卫生调查和问卷调查。抽取易感人群和耐受人群空腹外周静脉血5ml用于常规方法抽提基因组DNA，TaqMan探针法化学荧光等位基因鉴别试验检测SNP。结果：SODI基因rs2070424．A等位基因是NIHL的保护因素，与G等位基因相比，OR值为0．67，95％CI为(0．50，0．88)，携带AA基因型的个体患NIHL的风险是GG基因型的0．46倍，95％CI为(0．26，0．79)。校正混杂因素后OR值0．44，95％CI为(0．25，0．78);rs10432782位点G等位基因是NIHL的危险因素，与T等位基因相比，OR值为1．39，95％CI为(1．05，1．83)，携带GG基因型患NIHL的风险是是TT基因型的1．84倍，95％CI为(1．07，3．14)。校正混杂因素后OR值为1．83，95％CI为(1．04，3．21)。结论：在中国汉族人群中，噪声性听力损失易感性与SOD1 rs2070424、rs10432782位点单核苷酸多态性有关。

摘要： 目的：探讨中国汉族人群中噪声性听力损失易感性与SOD1rs1041740、rs2070424、rs10432782和rs4998557单核苷酸多态性之间的关联。方法：利用病例对照研究，通过比较同一噪声暴露强度噪声作业人员的左耳3000Hz频段听阈位移情况，筛选出听阈位移最大的10％个体作为本研究的易感人群组，共201例，听阈位移最小的10％个体作为耐受人群组，共202例，并进行相关的职业卫生调查和问卷调查。抽取易感人群和耐受人群空腹外周静脉血5ml用于常规方法抽提基因组DNA，TaqMan探针法化学荧光等位基因鉴别试验检测SNP。结果：SODI基因rs2070424．A等位基因是NIHL的保护因素，与G等位基因相比，OR值为0．67，95％CI为(0．50，0．88)，携带AA基因型的个体患NIHL的风险是GG基因型的0．46倍，95％CI为(0．26，0．79)。校正混杂因素后OR值0．44，95％CI为(0．25，0．78);rs10432782位点G等位基因是NIHL的危险因素，与T等位基因相比，OR值为1．39，95％CI为(1．05，1．83)，携带GG基因型患NIHL的风险是是TT基因型的1．84倍，95％CI为(1．07，3．14)。校正混杂因素后OR值为1．83，95％CI为(1．04，3．21)。结论：在中国汉族人群中，噪声性听力损失易感性与SOD1 rs2070424、rs10432782位点单核苷酸多态性有关。

摘要： 本发明提供了一种从猪血中提取超氧化物歧化酶的方法及该超氧化物歧化酶，以猪血为原料在提取、分离超氧化物歧化酶过程中，不使用任何有机溶剂，避免了环境污染和对酶活性的毒害，并使生产工艺简化。该方法，在超氧化物歧化酶纯化过程中，使用月桂酰氯作为保护剂，将超氧化物歧化酶保护起来，以避免热、酸、碱对超氧化物歧化酶的破坏作用，并结合热变性和等电点沉淀技术，使超氧化物歧化酶粗品得到进一步提纯和精制，具有生产周期短、成本低、更适合工业化规模生产的特点。所制备的超氧化物歧化酶，活性高，单位酶活力达到4500U/mg干粉以上。

摘要： 本发明涉及一种锌铜超氧化物歧化酶SOD1表达量的分子检测方法及所用的引物，正向引物序列见序列1，反向引物序列见序列2。本发明提供一种锌铜超氧化物歧化酶SOD1表达量的分子检测方法，首次用qPCR的方法，以基因水平的检测来鉴定SOD1的含量，同时提供一套有针对性引物序列和内参序列，即使在样品提取的RNA中有DNA污染的情况下，也可以稳定、特异、准确的检测出人的不同组织、细胞中SOD1基因的表达量差异，且有极高的重复性，克服了市场上常用酶活检测试剂盒的人为因素影响大、稳定性差、重复性差等因素。

摘要： 本发明提出了超氧化物歧化酶及其制备方法、超氧化物歧化酶口服液和固体制剂，所述超氧化物歧化酶具有：SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列；或者与SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列具有至少80%同源性的同源序列，所述同源序列中第15位为T、第67位为G、第87位为I、第143位为V。本发明的超氧化物歧化酶具有较高酶活以及热稳定性，且经高压处理可显著提高酶活性，可应用于食品、医药和化妆品领域中，应用前景广泛。

摘要： 本发明提供一种从动物心肌组织中制备锰型超氧化物歧化酶(Mn‑SOD)的方法，根据动物心肌组织富含Mn‑SOD的特点，选择动物心肌作为制备Mn‑SOD的原料，依据Mn‑SOD分子内含有锰离子的特性，采用现代的金属螯合介质层析分离技术，结合先进的膜超滤技术、免疫学鉴定技术以及超低温冻干技术，设计和开发了适合于规模化制备Mn‑SOD蛋白的新工艺方法，本发明方法操作简单，生产成本低廉，适用于大规模工业化生产，实现了从动物心肌组织中高效分离锰型超氧化物歧化酶的目的。

摘要： 本发明提供了一种从猪血中提取超氧化物歧化酶的方法及该超氧化物歧化酶，以猪血为原料在提取、分离超氧化物歧化酶过程中，不使用任何有机溶剂，避免了环境污染和对酶活性的毒害，并使生产工艺简化。该方法，在超氧化物歧化酶纯化过程中，使用月桂酰氯作为保护剂，将超氧化物歧化酶保护起来，以避免热、酸、碱对超氧化物歧化酶的破坏作用，并结合热变性和等电点沉淀技术，使超氧化物歧化酶粗品得到进一步提纯和精制，具有生产周期短、成本低、更适合工业化规模生产的特点。所制备的超氧化物歧化酶，活性高，单位酶活力达到4500U/mg干粉以上。

摘要： 本发明公开了一种食品中铜锌‑超氧化物歧化酶酶活的检测方法，其包括以下步骤：制备待检测样品提取液，并分为等量的第一份样品提取液和第二份样品提取液；以邻苯三酚自氧化法测定第一份样品提取液的酶活为U1；在第二份样品提取液中加入酶灭活剂，酶灭活剂为酶抑制剂和氨基酸的混合物，用邻苯三酚自氧化法测定第二份样品提取液的伪酶活U2；计算待检测样品提取液酶活实际值U＝U1‑U2。本发明综合采用酶抑制剂结合氨基酸的处理手段，能有效检测出样品中真实的SOD酶活性，而且操作简单、成本低、易于在基层检测机构推广应用。

摘要： 本发明提供了一种金纳米簇与铜锌超氧化物歧化酶的用途及试剂盒，属于荧光检测领域。铜锌超氧化物歧化酶的用途包括：铜锌超氧化物歧化酶在淬灭金纳米簇产生的荧光中的用途；铜锌超氧化物歧化酶在抗金纳米簇的荧光干扰中的用途。金纳米簇的用途包括：金纳米簇在铜锌超氧化物歧化酶的检测中的用途；金纳米簇用于制备铜锌超氧化物歧化酶的检测试剂盒中的用途。本发明还提供一种铜锌超氧化物歧化酶的检测方法，其包括：将待测溶液与金纳米簇混合。发明人研究发现，铜锌超氧化物歧化酶对金纳米簇所产生的荧光具有淬灭效应，其为后期金纳米簇的广泛应用、以及铜锌超氧化物歧化酶的准确检测提供了新的思路。

摘要： 本发明属于蛋白质医药生物工程与技术领域，公开了一种重组人铜锌超氧化物歧化酶活性恢复的方法，使SOD蛋白处于舒展状态后加入含有Cu

摘要： 本发明属于生物基因工程技术领域，尤其涉及一种短须裂腹鱼铜锌超氧化物歧化酶基因、克隆方法及其应用。本发明从短须裂腹鱼的肝脏提取总RNA，反转录得到cDNA第一条链，采用RACE扩增法进行超氧化物歧化酶基因5'‑和3'‑序列的克隆，利用软件对克隆得到的中间序列、5'‑和3'‑序列进行拼接成为Cu/Zn‑SOD cDNA全长序列。该序列共801bp，包括完全开放阅读框465bp，5'‑UTR为60bp，3'‑UTR为276bp。本发明首次公开了短须裂腹鱼超氧化物歧化酶基因全序列及其全序列的克隆方法。同时，为深入研究短须裂腹鱼的超氧化物歧化酶的抗氧化分子机理提供理论依据。

摘要： 本发明公开了一种人源铜锌超氧化物歧化酶的制备方法，将SEQ ID NO.2所示的序列插入原始载体，构建重组载体，扩大培养后提取表达产物，N‑His‑TEV‑hSOD1酶解，纯化得到无标签的hSOD1。本发明提供的方法，目的基因根据密码子偏爱性设计目的基因序列，并且在N末端添加His‑TEV标签，既避免了表达异源性，又避免了动物或人来源的安全性风险；方法中序列设计添加了His纯化标签和标签切除TEV识别位点，既有利于纯化，也便于切除His标签以达到药用蛋白的要求。本发明提供的方法表达菌株表达出的hSOD1为可溶性表达，并且添加Cu