实时荧光定量

摘要： 为了研究青海省小麦条锈菌在小麦潜育期叶片菌源量,文中以小麦条锈菌延伸因子EF1为引物,利用实时荧光定量PCR技术建立了小麦条锈菌潜育期菌源量检测体系。结果表明:(1)小麦条锈菌延伸因子EF1引物能从小麦叶片gDNA中扩增出特异性目的片段243 bp。(2)实时荧光定量PCR检测体系的灵敏度是常规PCR灵敏度的100倍。(3)铭贤169叶片接种小麦条锈菌后第1天到第8天均检测到条锈菌,且菌源量随着天数的变化呈指数型增长趋势。本研究建立的检测体系可检测到小麦条锈菌在小麦潜育期叶片菌源量,为早期小麦条锈病的发生和防治提供理论依据。

摘要： 目的:探讨实时荧光定量PCR仪器对流感病毒检测效果。方法:选择2019年6月~2020年6月本中心采集的流感病毒咽拭子及血液样本各116份,根据检测方法将其分为三个不同的组别,分别用实时荧光定量PCR仪、普通PCR仪、酶标仪进行检测、最终采用病毒分离培养法进行验证。结果:本次实验研究结果显示,使用实时荧光定量PCR仪检测流感病毒的灵敏性和准确度要比传统血清学检测的灵敏性和准确度都高。结论:虽然流感病毒检测中使用实时荧光定量PCR仪需要消耗高一些的成本,但使用此种方法可以节省检测的人力,并缩短人员的检测时间,可以根据PCR检测的特点,将其使用于公共场所从业人员的流感病毒快速筛选工作中,从而帮助更多的人及时检测病原,最终展开针对性的治疗方案。

摘要： 为鉴定草原短尾羊TBXT mRNA在胚胎发育中的表达趋势,分析其TBXT cDNA全长序列。本研究使用实时荧光定量PCR(Quantitative Real time PCR)方法对草原短尾羊14、16、20 d和25 d胚胎中TBXT mRNA相对表达量进行分析,之后使用RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)技术克隆TBXT cDNA全长。结果显示:TBXT mRNA在16 d胚胎中相对表达量最高,草原短尾羊TBXT cDNA全长为2426 bp(GenBank登录号:MZ146381),其中开放阅读框(ORF)为1335 bp,编码444个氨基酸,3’非编码区(3’UTR)和ployA尾长度为763 bp,5’非编码区(5’UTR)长度为328 bp;系统进化树显示草原短尾羊Brachyury与山羊进化关系最近,与羊驼关系最远,氨基酸同源性比对结果显示不同物种之间Brachyury同源性很高,表明在脊索动物进化过程中Brachyury功能相对保守。

摘要： WUSCHEL-related homeobox(WOX)转录因子是植物特有的转录因子,具有调控植物生长发育和非生物胁迫响应的作用。该研究通过生物信息学的方法对GuWOX基因家族进行分析,并利用qRT-PCR方法检测该基因家族在不同组织和非生物胁迫下的表达情况,利用RT-PCR方法克隆得到4个GuWOX基因。结果显示,(1)GuWOX基因家族共有16个成员,均含有保守的HD,为亲水性不稳定蛋白质;系统进化分析表明,GuWOX基因家族分为3个进化支(远古支、中间支和现代支);启动子序列中包括响应多种逆境和激素的顺式作用元件。(2)qRT-PCR结果显示,在侧根中GuWOX1的表达量最高,在茎中GuWOX15的表达量最高;GuWOX在盐、无磷和GA_(3)处理后不同时间段都有表达;干旱和ABA处理GuWOX15的表达模式相近,且在处理12 h时均上调表达。(3)成功克隆得到GuWOX1、GuWOX5、GuWOX6、GuWOX12基因,其长度分别为557 bp、707 bp、716 bp和578 bp,分别编码184、237、237和191个氨基酸。该研究结果表明,GuWOX基因参与甘草发育、对逆境胁迫的响应以及植物激素调节,为进一步分析GuWOX基因功能奠定了基础。

摘要： [目的]研究SbGA20ox1、SbGA20ox3和SbGA2ox3基因对高粱品种赤霉素表达水平的影响。[方法]以不同高粱品种为试材(9544.7057为父本与不同母本进行杂交得到子代:辽夏梁1号、辽2297、辽2697、辽5397、01-26B;以及01-26A为母本与不同父本进行杂交得到子代:辽杂35、0-01、9544.7057、3550、辽2697),利用实时荧光定量PCR技术比较不同时期(拔节期、抽穗期、成熟期),不同品种的高粱之间SbGA20ox1基因、SbGA20ox3基因、SbGA2ox3基因表达含量规律。[结果]SbGA20ox1基因在同一父本不同母本高粱组的基因表达规律基本符合抽穗期>成熟期>拔节期;SbGA2ox3基因在同一父本不同母本高粱组的基因表达规律基本符合抽穗期>成熟期>拔节期,SbGA2ox3基因在同一母本不同父本高粱组的基因表达规律基本符合拔节期>成熟期>抽穗期。而SbGA20ox1基因在同一母本不同父本高粱组的基因表达以及SbGA20ox3基因在各品种高粱的基因表达并未发现明显规律,各时期基因的相对表达量大部分品种间无明显差异。[结论]该研究一定程度上揭示了SbGA20ox1、SbGA20ox3和SbGA2ox3基因在多个高粱品种各时期的基因表达规律,为进一步研究调控赤霉素水平的小基因家族的作用机制提供启示。

摘要： 目的 分析荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测法对阴道内加德纳菌的诊断效果。方法 选择30例细菌性阴道炎患者作为实验组,另选择30例体检的健康女性作为对照组。两组均采用实时荧光定量PCR检测法检测阴道加德纳菌,对比两组检测结果。结果 实验组标本进行实时定性PCR检测, PCR扩增产物经过电泳检测后发现111 bp特异性条带。对其进行序列分析,实验结果与同源性对比发现,扩增DNA片段与序列符合率100%。依据Amsel诊断标准,实验组30份样本中加德纳菌阳性标本数为28份,阳性率为93.33%;对照组30份样本中加德纳菌阳性标本数为12份,阳性率为40.00%。实验组加德纳菌阳性率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 在细菌性阴道炎检测中应用荧光定量PCR检测法检测加德纳菌效果明确,可以为医生提供诊断依据,具有临床应用价值。

摘要： 目的通过网络药理学方法和分子对接技术研究复方芩兰口服液治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的潜在靶点和作用机制,为其临床应用及科研提供理论依据。方法利用TCMSP数据库和Swiss数据库筛选复方芩兰口服液中活性化学成分及作用靶点;通过GeneCards数据库获取COVID-19相关靶点;成分靶点与COVID-19靶点映射后应用Cytoscape 3.7.2软件构建“中药-成分-靶点”(herb-componenttarget,H-C-T)调控网络;使用STRING数据库构建PPI网络并筛选出核心靶点;采用Omicshare软件进行GO和KEGG分析,进一步挖掘复方芩兰口服液对COVID-19的多维药理作用机制;采用SYBYL-X 2.1.1软件将关键活性成分与治疗COVID-19的潜在靶点进行分子对接;最后,采用实时荧光RT-PCR技术检测复方芩兰口服液对肺损伤小鼠肺组织TP53基因表达的影响,进一步证实网络药理学分析的结果。结果从复方芩兰口服液中筛选出82个活性成分和309个靶点,获取新型冠状病毒肺炎靶点259个,复方芩兰口服液与COVID-19有20个共表达靶点,主要核心靶点为TP53、CCND1、JUN、EGFR、MAPK3。GO富集分析得到886个生物过程(P value<0.01且FDR<0.01),KEGG分析得到112条信号通路(P value<0.01且Q value<0.01)。分子对接表明,复方芩兰口服液中汉黄芩素为degree最高的活性成分与5个主要核心靶点均具有较强的结合能力。实时荧光定量RT-PCR结果显示复方芩兰口服液能显著降低肺损伤小鼠TP53的表达(P<0.05)。结论复方芩兰口服液可能作用于病毒感染、抑制细胞因子风暴和炎症反应相关靶点及通路,以多成分、多靶点、多通路发挥对COVID-19的治疗作用。

摘要： 以宁杞1号无菌实生苗的叶片、下胚轴以及茎尖生长点组织为材料,以MS为基础培养基,设置不同的激素浓度比例,诱导不同外植体产生丛生芽并完成形态建成.采用水培处理方式,分别设置0、100、200 mmol/L NaCl胁迫梯度,于处理后1、2、3 d分别测定地上部超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)的活性,利用实时荧光定量PCR技术检测APX、Cu/Zn-SOD、GST、Fe-SOD基因的表达变化模式.结果表明,MS+1.0 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)+0.2 mg/L萘乙酸(NAA)的培养基能快速诱导顶端组织及叶片组织中丛生芽的生长,而茎段呈现愈伤化和玻璃化情况,丛生芽在MS培养基上能完成生根,形态建成良好.盐胁迫下的叶片中保持着较高浓度的POD酶活性,而CAT活性却被抑制,与抗氧化胁迫相关的SOD、GST以及APX基因在盐胁迫下表达倍数显著性增加,而Fe-SOD酶基因却显著性被抑制,本研究为宁夏枸杞组培快繁体系的建立,组培苗抗盐机制提供了理论支持.

摘要： 依据马铃薯转录组数据,鉴定马铃薯脯氨酸转运体(Proline transporter,ProTs)在逆境中的作用.以马铃薯GS393(Solanum commersonii-LZ3.4-Wisconsin,United States)为材料,采用实时荧光定量PCR对StProT3基因在不同组织及激素、重金属、盐、干旱和低温处理下的表达模式进行分析.该基因CDS长度为1317 bp,编码438个氨基酸.序列比对显示与SlyProT3有96％的相似性,因而命名为StProT3(NCBI登陆号为MH027990.1).StProT3基因在马铃薯根、茎、叶、匍匐茎以及块茎中均有表达,其中根中表达量最高;重金属(氯化汞、氯化镉、氯化铜、氯化铝)、干旱、盐渍、激素(IAA、GA3、6-BA)处理能诱导该基因表达,而低温和ABA处理则抑制该基因表达,这表明StProT3基因参与了马铃薯的激素信号传导以及非生物胁迫响应.

摘要： 目的 分析实时荧光定量RT-PCR在麻疹病毒检测中的应用价值.方法 选取2018年12月～2020年12月我院收治的65例疑似麻疹患者作为研究对象,分别通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法和实时荧光定量RT-PCR法对麻疹病毒进行检测,比较两种方法检测阳性率以及不同检测时间阳性率.结果 实时荧光定量RT-PCR检测阳性率为29.23％,高于ELISA法的10.77％,差异有统计学意义(P＞0.05);第1天,ELISA法检测阳性率低于实时荧光定量RT-PCR法,差异有统计学意义(P＜0.05),第5天,ELISA法检测阳性率高于实时荧光定量RT-PCR法,差异有统计学意义(P＜0.05),其余时间段两种方法检测阳性率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 实时荧光定量RT-PCR法检测麻疹病毒具有较高的应用价值,灵敏度较高,且操作简单.

摘要： 为检测鸡抗病毒相关基因在病毒感染过程中的动态变化规律,本研究建立了鸡IFN-α、IFN-β、TLR-3和TLR-7的实时荧光定量RT-PCR的检测方法.根据Genbank提供的鸡IFN-α、IFN-β、TLR-3和TLR-7参考序列设计了相应的特异引物,用常规RT-PCR方法从鸡脾脏总RNA中扩增得到鸡相应基因.将其eDNA分别克隆到pMD19-T载体中进行测序鉴定,采用SYBR Green Ⅰ染料法,建立标准曲线并分析其熔解曲线.结果表明这四种基因的检测灵敏度可高达46 copies/μL,且具有良好的特异性和重复性.此检测方法的建立为动态定量检测及研究鸡IFN-α、IFN-β、TLR-3和TLR-7基因的表达变化提供了有效的手段.

摘要： 目的:评估实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(real-time fluorescent quantitative reverse transcription polymerase chain reaction, FQ-RT-PCR)方法检测胃癌腹腔冲洗液沉渣中CK19 mRNA的表达,探讨其对预测胃癌腹膜微转移的临床意义.方法:收集36例胃癌和7例胃良性病变患者腹腔冲洗液沉渣及临床病理资料,分别采用FQ RT-PCR检测腹腔冲洗液沉渣中CK19mRNA的表达;HE染色行腹腔冲洗液细胞学(peritoneal lavage cytology,PLC)检查.结果:胃癌CK19mRNA的阳性检出率为(23/36)63.9％,明显高于PLC(9/36)25.0％ (P＜ 0.01),PLC检查阳性的9例患者CK19 mRNA检测结果均为阳性;且CK19mRNA的检测阳性率与浆膜浸润与否、胃癌浸润深度、组织学分化程度、淋巴结转移情况及病期进展有关(P＜0.05).胃良性病变两项检查结果均为阴性.结论:FQ-RT-PCR检测胃癌腹腔冲洗液沉渣中CK19mRNA,可提高检测腹腔游离癌细胞的灵敏性,适用于预测胃癌患者腹膜微转移,有助于指导术后治疗及判断预后.

摘要： 本研究根据GenBank上登录的家兔H-FABP基因CDS序列设计保守引物,建立了基于SYBR GreenⅠ染料技术的实时荧光定量PCR方法。结果表明：所构建的标准曲线回归方程为CtH-FABP=-3.151x+39.647，相关系数(r2)为0.999,批内、批间重复性测定的变异系数分别为小于5.13％和7.64％；说明该方法具有快速、灵敏、特异性高、重复性好等优点,为进一步研究H-FABP基因在不同品种家兔表达奠定了基础。

摘要： 克拉玛依油田七中区为稀油油藏,油藏中内源微生物含量较为丰富,具有较好的内源微生物驱油潜力.本文利用实时荧光定量PCR检测技术,对七中区微生物驱过程中采油功能菌如烃氧化菌、硫酸盐还原菌的功能基因进行了动态跟踪监测.结果表明:七中区各试验井有益的烃氧化菌在试验后增长变化幅度较大,其丰度和含量与增油量存在一定的对应关系,同时有害的硫酸盐还原菌得到有效抑制.实验证明,该技术可替代测试瓶分析技术,实现采油功能菌的快速跟踪监测.

摘要： 利用低强度氮氖激光对体外培养的正常人胚肺二倍体成纤维细胞(2Bs)按疗程进行照射,用四甲基偶氮唑盐微量酶反映比色法和实时荧光定量聚合酶链式反应,分别检测激光照射处理对细胞生长和增殖的影响以及对细胞端粒DNA长度的影响。结果提示,经适当激光照射后,细胞端粒DNA因衰老而变短的趋势得到减缓。本研究从基因水平上为探讨低强度激光延缓细胞衰老的激光生物效应提供实验依据。rn 研究表明，适当的低功率激光照射，可以延缓细胞端粒DNA的缩短，即细胞端粒DNA因衰老而变短的趋势得到减缓。这一结论将有可能在基因水平上为探讨低强度激光延缓细胞衰老的激光生物效应提供实验依据。

摘要： 钙蛋白酶1基因参与肌肉生长过程中蛋白质的更新，并且与动物肌肉的增长和嫩度有密切的相关。本次试验以地方品种四川山地乌骨鸡和优质鸡“大恒”S01系为试验材料,采用实时荧光定量PCR分析CAPN1基因在四川山地乌骨鸡出生后1d、14d、28d、42d、56d、70d和84日龄等7个时间点的组织和时空表达差异,同时分析了CAPN1基因在10周龄两个品种间的组织表达差异。试验结果显示：CAPN1基因在四川山地乌骨鸡出生后的各个阶段和各种组织中都有表达。CAPN1基因在胸肌组织中的表达量显著高于其它组织(P＜0.05)。CAPN1基因在胸肌组织中表达规律在不同时间点总体呈“上升-下降-上升”的趋势。70日龄S01系各组织中CAPN1基因的表达量均高于70日龄山地乌骨鸡各组织中CAPN1基因的表达量。本次试验结果可能为CAPN1基因在鸡生长发育过程中组织和时空表达研究提供重要依据。

摘要： 苹果酸脱氢酶1和2(MDH1和MDH2)以及苹果酸酶1(ME1)在能量代谢的三羧酸循环中具有重要作用。本实验采用实时荧光定量PCR技术(q-PCR)检测了瘦肉型长白猪和脂肪型荣昌猪六个不同部位脂肪组织中MDH1、MDH2和ME1基因mRNA的表达量。结果表明，脂肪型的荣昌猪中三个基因的mRNA表达量均高于瘦肉型的长白猪。同一品种内，母猪的脂肪细胞体积及三个基因的表达量均高于公猪。三个基因在皮下脂肪中的表达量高于内脏脂肪中的表达量。并且，MDH1、MDH2和ME1基因的mRNA的表达量与六个不同部位脂肪细胞的体积成正相关。本实验研究了MDH1、MDH2和ME1基因在品种间、性别间及组织间的表达模式，提示三个基因可作为研究猪脂肪沉积特性的候选基因。

摘要： 为阐明不同繁殖阶段鹅HPG轴褪黑素受体mRNA表达的变化规律,应用实时荧光定量PCR技术检测产蛋前期和产蛋期四川白鹅下丘脑、垂体、卵巢组织中3种褪黑素受体亚型(Me1-1a、Me1-1b和Me1-1c)mRNA相对表达量。结果表明：产蛋前期鹅下丘脑Me1-1a、Me1-1b和Me1-1c的相对表达量分别是产蛋期的5.25倍(P＜0.01)、0.43倍(P＜0.01)和1.20倍；产蛋前期鹅垂体Me1-1a、Me1-1b和Me1-1c的相对表达量分别是产蛋期的3.01倍(P＜0.01)、7.51倍(P＜0.01)、7.25倍(P＜0.01)；产蛋前期鹅卵巢组织中Me1-1a、Me1-1b和Me1-1c的相对表达量分别是产蛋期的1.55倍(P＜0.05)、0.55倍(P＜0.01)、2.86倍(P＜0.01)。以上结果提示，褪黑素可通过其特异性受体的介导在HPG轴的各级水平发挥其调节作用,并且下丘脑褪黑素主要通过Mel-1a介导、垂体褪黑素主要通过Me1-1b和Me1-1c,卵巢褪黑素主要通过Me1-1a和Me1-1c介导来发挥其调控作用。

摘要： 目的:探讨TCF7L2基因多态性与移植后糖尿病(PTDM)的相关性。方法:采用Real-Time PCR法检测97例PTDM患者(PTDM组)和301例未发生PTDM的肾移植患者(对照组)的TCF7L2 rs290487的基因型,采用logistic回归分析该基因多态性与PTDM的相关性。结果:PTDM组患者rs290487的C等位基因频率(50.5％)明显高于对照组患者(39.5％),CC基因型(27.8％)也明显高于对照组(18.3％)(P＜0.05).用性别、移植时年龄、体重和BMI等危险因素进行校正后,rs290487的CC基因型患者肾移植术后发生PTDM的风险是TT基因型患者的2.3倍(OR=2.300,p =0.013);CC+CT基因型患者肾移植术后发生PTDM的风险是TT基因型患者的1.935倍(OR=1.935,p=0.014).结论:TCF7L2基因rs290487的C等位基因是肾移植后发生PTDM的独立危险因素。

摘要： 目的:探讨TCF7L2基因多态性与移植后糖尿病(PTDM)的相关性。方法:采用Real-Time PCR法检测97例PTDM患者(PTDM组)和301例未发生PTDM的肾移植患者(对照组)的TCF7L2 rs290487的基因型,采用logistic回归分析该基因多态性与PTDM的相关性。结果:PTDM组患者rs290487的C等位基因频率(50.5％)明显高于对照组患者(39.5％),CC基因型(27.8％)也明显高于对照组(18.3％)(P＜0.05).用性别、移植时年龄、体重和BMI等危险因素进行校正后,rs290487的CC基因型患者肾移植术后发生PTDM的风险是TT基因型患者的2.3倍(OR=2.300,p =0.013);CC+CT基因型患者肾移植术后发生PTDM的风险是TT基因型患者的1.935倍(OR=1.935,p=0.014).结论:TCF7L2基因rs290487的C等位基因是肾移植后发生PTDM的独立危险因素。

摘要： 本发明公开了一种荧光检测光学系统、实时荧光定量PCR仪；属于分子诊断检测仪器领域；其技术要点：M通道组件包括：M个单通道组件；所述单通道组件包括：单色LED灯、准直透镜、激发光系统滤光片、聚焦透镜、发射光纤；所述N试剂孔检测组件包括：N个单试剂孔检测组件；所述每个单试剂孔检测组件包括：发射光纤、反应池、接收光纤组件、接收端滤光片组件、锥形导光棒、光电传感器；所述M通道组件的每个单通道组件的发射光纤均连接到塑料导光棒的第一端；N试剂孔检测组件的每个单试剂孔检测组件包括发射光纤均连接到塑料导光棒的第二端。本发明旨在提供一种荧光检测光学系统、实时荧光定量PCR仪，大幅提高检测效率。

摘要： 本发明提供了一种定量检测机体中mRNA含量的实时荧光定量PCR试剂盒及检测方法和应用，涉及mRNA检测技术领域。本发明所述试剂盒建立在RT‑PCR基础上，以mRNA作为标准品构建标准曲线，稀释的系列标准品溶液通过与待测样本同样的反转录、qPCR过程，更好的模拟样本检测过程，直观展示mRNA药物含量，减少质粒的构建工作，实现了生物样本中mRNA药物的快速、准确的定量检测，具有操作简单、灵敏度高、检测范围宽，特异性强等优点，可用于mRNA类药物临床前药物生物分布研究、临床研究生物样品检测和临床治疗患者的药物分布监测。

摘要： 本发明公开了一组定量检测柑橘半穿刺线虫的实时荧光定量PCR引物和探针及其应用。所述引物包括上游引物TsF1和下游引物TsR2，序列分别如SEQ ID NO.1～2所示；所述探针为Tspro1，探针Tspro1的序列如SEQ ID NO.3所示。利用上述引物和探针建立的实时荧光定量PCR方法不仅能够特异的从混合线虫样品或基质中检测并定量柑橘半穿刺线虫，而且检测灵敏性可达到单条线虫的灵敏度，对实际应用工作，如检验检疫工作，有着重要的推广应用价值。

摘要： 本发明公开了一种荧光检测光学系统、实时荧光定量PCR仪；属于分子诊断检测仪器领域；其技术要点：M通道组件包括：M个单通道组件；所述单通道组件包括：单色LED灯、准直透镜、激发光系统滤光片、聚焦透镜、发射光纤；所述N试剂孔检测组件包括：N个单试剂孔检测组件；所述每个单试剂孔检测组件包括：发射光纤、反应池、接收光纤组件、接收端滤光片组件、锥形导光棒、光电传感器；所述M通道组件的每个单通道组件的发射光纤均连接到塑料导光棒的第一端；N试剂孔检测组件的每个单试剂孔检测组件包括发射光纤均连接到塑料导光棒的第二端。本发明旨在提供一种荧光检测光学系统、实时荧光定量PCR仪，大幅提高检测效率。

摘要： 本发明提供了一种定量检测机体中mRNA含量的实时荧光定量PCR试剂盒及检测方法和应用，涉及mRNA检测技术领域。本发明所述试剂盒建立在RT‑PCR基础上，以mRNA作为标准品构建标准曲线，稀释的系列标准品溶液通过与待测样本同样的反转录、qPCR过程，更好的模拟样本检测过程，直观展示mRNA药物含量，减少质粒的构建工作，实现了生物样本中mRNA药物的快速、准确的定量检测，具有操作简单、灵敏度高、检测范围宽，特异性强等优点，可用于mRNA类药物临床前药物生物分布研究、临床研究生物样品检测和临床治疗患者的药物分布监测。

摘要： 本发明涉及采用实时荧光定量PCR技术定量检测人类血液中布鲁氏菌的引物、探针和方法，可有效解决人类血液中布鲁氏菌定量检测的问题，其解决的技术方案是，采用实时荧光定量PCR技术定量检测人类血液中布鲁氏菌的引物和探针，引物和探针序列是：上游引物:5’‑GGAAGGTTCAGAAACAACCAC‑3’，下游引物：5’‑GTTGTAACCGGCCTGAACAC‑3’，探针：5’‑FAM‑TGCTGCTCCAGTTGACACCTTCTCG‑BHQ1‑3’，本发明稳定性良好、灵敏度高、特异性强，采用实时荧光定量PCR技术，可准确检测出人类血液中布鲁氏菌含量，对布病的准确诊断及防控策略的制定有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种HIV‑1RNA定量检测的实时荧光定量PCR引物和探针，所述引物包括上游引物HIV F1和下游引物HIV R1，所述上游引物HIV F1的序列如SEQ ID NO.1所示，所述下游引物HIV R1的序列如SEQ ID NO.2所示；所述探针为HIV probe1，所述HIV probe的序列如SEQ ID NO.3所示。该引物组和探针对HIV‑1具有高特异性，可用于实时荧光定量RT‑qPCR技术检测HIV‑1。还公开了一种HIV‑1病毒载量的实时荧光定量PCR检测方法，以及上述引物和探针、试剂盒在定量检测HIV‑1病毒载量方面的应用。

摘要： 本发明公开了一种血液乙型肝炎病毒(HBV)DNA和RNA双通道实时荧光定量PCR检测体系，以及利用该检测体系对HBV DNA和RNA进行同时检测的方法。所述检测体系包括扩增DNA和RNA的寡核苷酸组引物、反向锚定引物和探针。采用本发明的检测体系和方法，可用于制备HBV诊断试剂或试剂盒。本发明可在一次检测中同时检测HBV DNA和RNA，方法简便、快捷。

摘要： 本发明涉及一种用于定量检测KRECs基因实时荧光定量PCR检测试剂盒及其应用。本发明包括一个以实时荧光PCR技术为基础的实时荧光定量PCR反应体系。荧光PCR反应体系包括针对KRECs和β-actin基因的正、反向引物和特异性荧光探针。该试剂盒可以快速地筛查新生儿免疫系统B细胞水平，具有高灵敏度和稳定性，以及非常好的重现性，此方法适用于KRECs的定量检测，能应用于新生儿免疫系统功能筛查，具有实际的临床应用价值。

摘要： 本发明涉及一种用于定量检测TRECs和KRECs基因实时荧光定量PCR检测试剂盒及其应用。本发明包括一个以实时荧光PCR技术为基础的实时荧光定量(Real？time)PCR反应体系。荧光PCR反应体系包括针对TRECs、KRECs和β-actin基因的正、反向引物和特异性荧光探针。该试剂盒可以快速地联合筛查新生儿免疫系统T细胞水平和B细胞水平，具有高灵敏度和稳定性，以及非常好的重现性，此方法适用于TRECs和KRECs的联合定量检测，能应用于新生儿免疫系统功能筛查，具有实际的临床应用价值。