拟南芥铜锌超氧化物歧化酶解聚的中间态性质

摘要

拟南芥铜锌超氧化物歧化酶(AtSOD1)是理想的研究植物SOD酶结构与功能关系的模式蛋白,对于理解植物抗逆性有着重要的意义.目前对该酶稳定性、活性等基本性质了解得不够充分,影响了相关研究的开展.研究在大肠杆菌中异源表达出具有生物活性的AtSOD1蛋白,通过电子顺磁共振波谱(EPR)检测,活性中心电子结构准确.对AtSOD1的稳定性进行研究,其中,AtSOD1的尿素解折叠实验的圆二色谱(CD)结果发现,在225 nm附近出现了一个α-螺旋和β-折叠比例变化的拐点,且当尿素浓度为4～5 mol/L时,天然态AtSOD1解折叠曲线出现了一个平台期.在利用差示扫描量热(DSC)检测天然态AtSOD1的物理稳定性时发现,该酶在单体重构为二聚体过程中,也存在两个Tm值,分别为102.2℃和100.5℃.根据上述结果,推测认为,AtSOD1从二聚体解聚为单体过程中存在一个中间态,与该酶结构稳定性有关.