核酸酶
核酸酶的相关文献在1974年到2023年内共计810篇,主要集中在生物化学、分子生物学、畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂
等领域,其中期刊论文130篇、会议论文13篇、专利文献87967篇;相关期刊103种,包括生物工程学报、生物技术进展、生物技术通报等;
相关会议13种,包括中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会、福建省科协第十四届学术年会农业分会暨华东地区农学会学术年会、第七次全国动物生物技术学术研讨会暨新疆畜牧科学院第六次学术年会等;核酸酶的相关文献由1748位作者贡献,包括肖磊、孙大鹏、朱振宇等。
核酸酶—发文量
专利文献>
论文:87967篇
占比:99.84%
总计:88110篇
核酸酶
-研究学者
- 肖磊
- 孙大鹏
- 朱振宇
- 徐双勇
- 管胜昔
- 陈少康
- 张磊
- 吴昭
- 应汉杰
- A·布兰查德
- 吴强
- 寿佳
- 张鹏华
- 李金环
- 赵金龙
- 陈晓春
- 魏华
- 赵美萍
- 陈勇
- J·A·莱德贝特
- K·艾肯
- M·海登-莱德贝特
- 孙锡章
- 王庆诚
- 费俭
- 汤亦文
- 沈如凌
- 肖先金
- 苏昕
- J·K·乔昂格
- 上森隆司
- 伊丽莎·莫卡尼
- 刘喜朋
- 崔大祥
- 庄庆刚
- 张雷
- 李伟
- 艾莉森·威尔彦·托德
- 西尔韦斯特·格里佐
- A·赫鲁贝克
- C·比斯根
- D.R.刘
- F·巴拉尼
- 加藤郁之进
- 吴菁岚
- 孔毅飞
- 张晨
- 王铸钢
- 约翰·万德奥斯特
- 蔡家栋
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王思媛;
杨慧然;
翁本锐;
冉家兵;
王慧敏;
杨昌英;
邓张双
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摘要:
恒温无蛋白酶的核酸扩增反应具有操作简单、条件温和、反应效率高,以及不需要温度循环和蛋白酶参与的特点,可以实现对生物分子的高灵敏检测,已经被广泛应用于生物分析和生物医学应用等领域.本文总结了近年来基于恒温无蛋白酶的核酸扩增反应的生物传感器在检测领域中的发展和应用,并对当前存在的问题进行了讨论.
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胡艳波;
高峰;
刘尚奇;
张慧明;
王敏杰
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摘要:
目的利用CRISPR/Cas9系统构建腺苷酸激活蛋白激酶α1(adenosine 5′-monophosphate-activated protein kinaseα1,AMPKα1)基因敲除的小鼠胚胎成纤维细胞3T3-L1细胞系,为研究AMPKα1在脂肪细胞中的生物学功能提供细胞模型。方法在NCBI上查找AMPKα1基因序列,利用张锋实验室网站设计sg RNA。利用lenti CRISPR质粒构建AMPKα1敲除质粒,构建好的质粒与辅助质粒共同转染293T细胞获得慢病毒。用病毒液感染目的细胞3T3-L1,嘌呤霉素筛选感染成功的细胞。将3T3-L1细胞诱导成成熟的脂肪细胞,与RAW264.7细胞共培养48h,检测RAW264.7细胞中核转录因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)表达情况。结果蛋白质印迹(Western blot,WB)法与Q-PCR法检测结果表明获得稳定敲除AMPKα1的3T3-L1细胞(P<0.01);与RAW264.7细胞共培养WB法检测RAW264.7细胞中NF-κB。结果表明,AMPKα1敲除的成熟脂肪细胞分泌因子增加巨噬细胞RAW264.7细胞中的NF-κB蛋白表达。结论本研究利用成簇的规律间隔的短回文重复序列/Cas9核酸酶(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/Cas9,CRISPR/Cas9)系统成功构建了AMPKα1敲除的细胞系,为后续深入研究AMPKα1基因在3T3-L1细胞系中的作用及其机制奠定了一定的基础。
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万茵;
余新金;
冯思麟;
王家槐;
肖辉;
雷宇;
皮潇文;
李文辉;
付桂明
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摘要:
为研究开发一种低嘌呤腐竹,将树脂吸附和核酸酶酶解核酸2种措施相结合,对豆浆中的嘌呤类物质进行吸附,通过正交试验,确定吸附效果最强的树脂结合核酸酶酶解吸附的最佳技术条件.实验结果表明,树脂NUF20是最佳嘌呤吸附树脂,对嘌呤核苷酸吸附率达98.40%,树脂NUF20结合核酸酶酶解吸附豆浆中嘌呤的最佳技术条件为核酸酶用量26.67 U/mL,树脂添加量0.2 g/mL,反应温度70°C下搅拌吸附1 h.与对照组相比,经过树脂NUF20结合核酸酶酶解技术处理后的豆浆加工的腐竹产品,第1~5张腐竹的嘌呤含量分别下降89.70%、88.28%、76.69%、72.03%和65.62%.研究将树脂吸附和核酸酶酶解2种措施结合,采用优化的工艺条件,有效降低了腐竹中的嘌呤含量.实验结果为开发针对高血尿酸症等特殊人群的低嘌呤腐竹提供了技术基础,同时也为其他降嘌呤豆制品的研究及加工提供了理论参考.
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王天乐;
刘喜朋
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摘要:
[目的]克隆表达嗜热古菌Archaeoglobus fulgidus(A.fulgidus)来源的RecJ核酸酶基因(ORF编号AF_0699,NCBI数据库基因登陆号为AF_RS03550),对该重组蛋白的核酸酶活性及酶学特征进行鉴定和分析.[方法]将A.fulgidus RecJ(AfuRecJ)核酸酶在大肠杆菌中进行重组表达,经亲和层析纯化得到电泳纯蛋白;利用人工合成的带有末端荧光标记的寡核苷酸作为底物,体外反应后,利用8mol/L尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定AfuRecJ核酸酶的水解产物.[结果]AfuRecJ核酸酶具有单链DNA特异性的3'-5'外切核酸酶活性,酶活性依赖于二价金属离子Mn2+或Mg2+,且Mn2+存在条件下的催化效率明显优于Mg2+;其最适反应温度范围为55-65°C;高于200 mmol/L的NaCl会显著抑制AfuRecJ的核酸酶活性.AfuRecJ还具有单链RNA3'-5'外切酶活性,且活性高于单链DNA底物.单链核酸3'末端的磷酸基团对水解活性有一定抑制作用.AfuRecJ对单链核酸的长度有一定的选择性,可以有效水解长度≥4个核苷酸长度的单链RNA、≥12个核苷酸长度的单链DNA,而且对双链DNA中的3'单链DNA结构(3'突出单链尾巴与末端分叉结构)具有类似单链DNA的水解活性.[结论]本研究证实AfuRecJ是一种单链核酸特异性的3'-5'外切核酸酶,且相比单链DNA,单链RNA为优势底物,推测其在胞内可能参与RNA降解与DNA修复.
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贾艳艳;
李琦;
王晓利;
牛俊辉;
毛静;
廖成水;
张昊恺;
张明亮
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摘要:
为确定引起水貂肺炎的病原菌,对从临床死亡病例中分离到的1株疑似肺炎克雷伯菌进行鉴定,采用琼脂糖凝胶电泳法检测肺炎克雷伯菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,并探究了温度、pH值、金属离子对核酸酶活性的影响.结果显示,通过病料涂片镜检及PCR鉴定,分离株为1株肺炎克雷伯菌,该肺炎克雷伯菌胞外分泌蛋白表现出降解 λDNA的核酸酶活性,最适温度为30~37°C,最适pH值为7.0,在高温和碱性条件的反应环境时核酸酶的活性较弱.一价金属离子(Na+、K+)和部分二价金属离子(Ca2+、Ba2+、Ni2+、Zn2+和Cu2+)对肺炎克雷伯菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性无明显影响,而5.00~10.00 mmol/L的Co2+和Fe3+以及10.00 mmol/L的Mg2+和Mn2+可以促进胞外核酸酶切割 λDNA的活性.综上,从临床水貂肺炎病例中分离到1株肺炎克雷伯菌,并证实该菌胞外分泌蛋白具有核酸酶活性.
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李琦;
牛俊辉;
王晓利;
毛静;
全映颖;
刘桂坤;
雷显前;
朱鹏瑶;
廖成水
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摘要:
旨在探究猪霍乱沙门菌胞外产物的核酸酶活性及其对巨噬细胞胞外诱捕网形成的影响.采用平板培养法、琼脂糖凝胶电泳法和琼脂扩散法观察猪霍乱沙门菌胞外产物降解λDNA的活性,同时,分析不同温度、pH和金属离子对胞外产物核酸酶活性的影响以及胞外产物对巨噬细胞胞外诱捕网形成的影响.猪霍乱沙门菌胞外产物具有降解λDNA的DNA酶活性,高温和酸性条件抑制DNA酶的活性,活性最适温度和pH分别为42°C和9.0,且胞外产物的核酸酶可被60°C以上的温度灭活.添加Na+、K+、Ca2+和Ni2+对胞外产物切割λDNA的活性没有影响;5.00和10.00 mmol·L-1的Ba2+、Mg2+和Mn2+可提高胞外产物的DNA酶活性;0.01~1.00 mmol·L-1的Zn2+、Cu2+和Fe3+对胞外产物的DNA酶活性具有促进作用,但Co2+则表现出抑制作用.荧光显微镜和定量分析均显示,猪霍乱沙门菌不能刺激巨噬细胞释放胞外诱捕网,而猪霍乱沙门菌胞外产物可显著降解白色念珠菌刺激巨噬细胞形成的胞外诱捕网.本研究证实了猪霍乱沙门菌胞外产物的DNA酶活性,为进一步探究胞外产物在猪霍乱沙门菌感染与宿主免疫互作中的作用提供参考.
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刘倩;
李金根;
张晨阳;
李芳雅;
田朝光
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摘要:
丝状真菌(filamentous fungi)是广泛存在于自然界中的一类多细胞真核微生物,是酶制剂、有机酸、抗生素的核心生产体系,在生物技术中发挥着非常重要的作用。由于丝状真菌的生长发育较为复杂,其遗传体系和基因组编辑技术发展相对较慢,妨碍了丝状真菌基础研究和开发利用的快速发展。近年来,核酸酶介导的基因组编辑技术已经发展成为一种功能强大的基因组编辑工具,在生物技术领域的应用得到广泛关注,其中RNA介导的CRISPR系统(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)已经成为新一代基因组编辑技术体系。文章将对目前使用最为广泛的3种基因编辑系统,包括CRISPR-Cas技术的发展历程进行概述,对CRISPR-Cas技术在丝状真菌基因组编辑中的研发进行系统介绍,包括在工业丝状真菌中的研发应用,例如鉴定次级代谢产物的关键基因并提高次级代谢物的生产能力、将外源基因定点整合到基因组上从而提高异源蛋白的表达、遗传重构蛋白分泌途径提高工业酶的产量等,最后对CRISPR-Cas基因组编辑技术及其衍生系统在丝状真菌的真菌基因功能研究、代谢途径重构、精确表达调控、蛋白定向进化以及高性能底盘构建等方面进行了展望。
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刘倩;
李金根;
张晨阳;
李芳雅;
田朝光
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摘要:
丝状真菌(filamentous fungi)是广泛存在于自然界中的一类多细胞真核微生物,是酶制剂、有机酸、抗生素的核心生产体系,在生物技术中发挥着非常重要的作用.由于丝状真菌的生长发育较为复杂,其遗传体系和基因组编辑技术发展相对较慢,妨碍了丝状真菌基础研究和开发利用的快速发展.近年来,核酸酶介导的基因组编辑技术已经发展成为一种功能强大的基因组编辑工具,在生物技术领域的应用得到广泛关注,其中RNA介导的CRISPR系统(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)已经成为新一代基因组编辑技术体系.文章将对目前使用最为广泛的3种基因编辑系统,包括CRISPR-Cas技术的发展历程进行概述,对CRISPR-Cas技术在丝状真菌基因组编辑中的研发进行系统介绍,包括在工业丝状真菌中的研发应用,例如鉴定次级代谢产物的关键基因并提高次级代谢物的生产能力、将外源基因定点整合到基因组上从而提高异源蛋白的表达、遗传重构蛋白分泌途径提高工业酶的产量等,最后对CRISPR-Cas基因组编辑技术及其衍生系统在丝状真菌的真菌基因功能研究、代谢途径重构、精确表达调控、蛋白定向进化以及高性能底盘构建等方面进行了展望.
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刘汉灵;
黄月桂;
陆燕宁
- 《第十二届中国国际食品添加剂和配料展览会暨第十八届全国食品添加剂生产应用技术展示会(FIC2008)学术报告会》
| 2008年
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摘要:
本核酸酶是专门针对目前国际市场上对于天然I+G含量越来越重视,对富含呈味核苷酸(I+G)的抽提物的需求越来越大而专门研制的酵母抽提物专用酶制剂.它是通过桔青霉培养发酵、膜分离技术提纯精制、真空冷冻干燥而得,可将核酸定向水解为5'-核苷酸的生物酶制剂,可催化RNA或寡核酸的分子上的3'-碳原子羟基与磷酸之间形成的二酯键,使断裂生成四种5'-核苷酸和5'-磷酸寡核苷酸.结合酵母水解工艺,本文研究了核酸酶在酵母抽提物的应用,得出了较优的水解工艺条件:酵母底物浓度为10%~15%,pH=5.0;水解温度T=60°C,水解时间为4h~8h,最后酵母抽提物的呈味核苷酸(I+G)含量由原来的1%~2%提高到8%~10%,达到国内领先水平.
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蒋伟;
韩迎春;
潘群慧;
沈涛;
张天乐;
刘长林
- 《中国化学会2005年中西部十五省(区)、市无机化学化工学术交流会》
| 2005年
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摘要:
铜锌超氧化物歧化酶(SOD)作为歧化超氧阴离子为氧气和过氧化氢的酶为人们熟知.在本工作中,通过测定SOD与小牛胸腺DNA(ctDNA)相互作用的紫外-可见吸收光谱,SOD断裂pBR322DNA及λDNA的核酸电泳等实验,首次验证了SOD在二价Mn2+、Zn2+、Co2+、Mg2+、Ni2+、Ca2+等金属离子存在下具有全新的类核酸酶性质.动力学实验表明SOD可通过连续反应的方式将超螺旋质粒DNA断裂为缺口和线性形式.
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陈思琪;
王亚芳;
陈倩倩;
顾莹;
彭继成;
邱亚铁
- 《福建省科协第十四届学术年会农业分会暨华东地区农学会学术年会》
| 2014年
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摘要:
由于CRISPR/Cas9系统具有改造基因组工程的潜能,现已受到广泛关注.研宄表明,由RNA指导的Cas9核酸酶可以被用于果蝇基因组工程改造,而且这些被修饰的基因可以通过种系有效的遗传.目标RNA链可以引导Cas9到特定的基因组序列,从而诱导双链断裂,但修复不完全可能会产生突变.不仅如此,两条目标RNA链还可使基因组发生大量的基因缺失并通过同源重组催化发生替换.锌指核酸酶(ZFN)和转录激活因子样效应物核酸酶(TALENS)在果蝇中也有类似的功能.在果蝇子代中,目标RNA可以越过独特的定向核酸序列调控特异性修饰位点,使得CRISPR/Cas9系统更容易进行基因编码.就目前的规划现状,在一个月内可以获得相应基因组改造的果蝇.CRISPR/Cas9系统可以沿着关键基因开始,进行特定的CRISPR基因改造工程,使多种基因组被修饰.
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李娜;
肖书奇;
张冲;
张昂克;
侯高鹏;
周恩民
- 《中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会》
| 2014年
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摘要:
猪繁殖与呼吸障碍综合征是由PRRSV引起的一种高度接触性传染病,是危害全世界生猪养殖业的重要疫病之一.PRRSV侵入宿主细胞,需要与细胞膜表面特异性受体结合,利用细胞内吞作用感染细胞,受体是病毒侵入的首要门户.rn 本研究利用两种系统分别设计了针对NMHCⅡ-A基因的TALEN载体和在杆状病毒表达系统表达的CRISPR-Cas9载体,测序结果表明工程核酸酶均构建正确。rn Western blot结果显示工程核酸酶可以在Sf9细胞系中有效表达。将靶标序列克隆至SSA检测载体上,利用双荧光素酶系统检测工程核酸酶的体外切割活性。通过对PRRSV感染基因编辑细胞系的感染力研究,并结合NMHCⅡ-A的基因功能鉴定NMHCⅡ-A基因编辑细胞系的基本特性,有助于了解PRRSV侵入过程,从而为阐明PRRSV和NMHCⅡ-A之间相互作用的依赖性方式提供依据。rn 利用Golden Gate的方法可以高效组装含有大量重复序列的TALEN的表达载体。AcMuttiBac杆状病毒表达系统能够使工程核酸酶得到高效的表达。双荧光素酶报告载体检测可以有效验证工程核酸酶的切割效率为进一步的基因编辑奠定基础。
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张今;
李爽;
姜大志;
盛永杰
- 《第五届中国酶工程学术研讨会》
| 2005年
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摘要:
目前工程酶的研发已由过去主要靠现有蛋白质骨架的修饰转向酶的活性中心的改进,并创建了几种方法,例如"活性中心模板"法,"活性中心嫁接"法,"活性中心进化"法,"活性中心模拟"法等.近年来,我们通过酶活性部位的进化、酶活性部位的进化构建、酶活性部位的设计对酶分子进行改造.本文主要介绍了蛋白质酶的活性部位工程,以及核酸酶的活性部位工程。
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庞春英;
邓廷贤;
王建;
杨炳壮;
梁贤威
- 《第七次全国动物生物技术学术研讨会暨新疆畜牧科学院第六次学术年会》
| 2013年
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摘要:
本文中构建了多位点基因打靶载体pBC1-DS2-Fatl-eGFP-DS1。利用lipofectamine LTX介导外源pBC1-DS2-Fatl-eGFP-DS1质粒转染水牛肾脏成纤维细胞,探讨了脂质体用量、质粒用量、质粒大小、转染时间、细胞初始接种密度对转染效率的影响。结果表明,4pg打靶载体质粒DNA与4μg,L脂质体转染6h,其细胞活性达98%,可获得较满意的转染效率。应用QRT-PCR技术、酶切和测序等手段检测和分析了外源基因Fatl的表达和定点整合情况。结果表明,Fatl基因己成功整合至水牛基因组,定点整合效率有所增加,但仍然较低。