反转录PCR

摘要： 目的探讨人胃癌细胞中β-内酰胺酶基因(LACTB)不同转录本的表达特点。方法取对数期生长的人正常胃黏膜细胞株(GES-1)、不同分化程度胃癌细胞株[AGS(高分化)、MKN-28(中分化)、MKN-45(低分化)]及HGC-27(未分化)提取RNA,采用反转录PCR(RT-PCR)、巢式PCR、original TA cloning kit(T-A)克隆方法及DNA测序确定各细胞中LACTB表达的转录本类型,采用荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LACTB不同转录本在胃癌细胞中的表达水平。结果在胃癌细胞株中检测到LACTB的3个转录本;以GES-1为对照,LACTB转录本1在AGS、MKN-28、MKN-45中高表达(P<0.05),在HGC-27中低表达(P<0.05);以GES-1为对照,转录本2在AGS、MKN-28、MKN-45、HGC-27中低表达(P<0.05),转录本3在MKN-28、MKN-45、HGC-27中低表达(P<0.05)。结论与正常胃黏膜细胞相比,胃癌细胞中LACTB转录本1表达水平增加、转录本2和3表达水平降低,转录本1可能是胃癌细胞分化的指标之一。

摘要： 为了解新疆部分地区双峰驼感染牛病毒性腹泻病毒、牛冠状病毒、牛轮状病毒情况。从新疆乌鲁木齐和阿勒泰等地区随机采集新鲜粪便和血液样本185份,提取总RNA,反转录成cDNA,使用反转录PCR技术检测BVDV、BCoV和BRV阳性率情况。结果发现,BVDV、BCoV和BRV阳性率分别为9.19%、4.86%和1.62%。表明新疆部分地区双峰驼虽然不表现相应的临床症状,但存在不同程度的BVDV、BCoV和BRV隐性感染。

摘要： 马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)是世界范围内影响马铃薯生产的主要病害之一.通过RT-PCR技术,针对吉林地区马铃薯主栽品种"春薯4号"等11个品种,18份材料,检测马铃薯纺锤决茎类病毒,为RT-PCR检测方法在本区域的广泛应用提供技术指导.结果 表明,18份试验材料中Y217-2和09-Y217-1带有马铃薯纺锤块茎类病毒,其余品种不合有马铃薯纺锤块茎类病毒,且扩增出来的片段长度与预期目的 片段大小相同,证明植株感染病毒与培养时期和培养条件不存在相关性.

摘要： Apostichopus japonicus Cu/Zn-superoxide dismutase (Aj-SOD1) with activity was successfully expressed in prokaryotic host E.coli BL21(DE3).Total RNA was extracted from the intestinal tissue of Apostichopus japonicus by Trizol.Cu/Zn-SOD1 gene was amplified by RT-PCR to obtain the coding gene sequence of Aj-SOD1 (GenBank:JX097096.1,459 bp) and pMD18-Aj-SOD1 was constructed.Cloning vector of pMD18-Aj-SOD1 with restriction sites of Nde Ⅰ /Xho Ⅰ was constructed.The recombinant expression vector of pET 30a-Aj-SOD1 was constructed with pET30a(+ ) double enzyme digested by Nde Ⅰ /Xho Ⅰ and Aj-SOD1.pET30a-Aj-SOD1 was transformed into E.coli BL21(DE3) competent cells and Kan+ resistance screening positive transformants were selected.Aj-SOD1 proteins with antioxidant activity were successfully obtained by inducing with 0.1 mmol/L IPTG after 8 h and detected by SDS-PAGE and pyrogallol autoxidation method.%采用原核宿主大肠杆菌BL21(DE3)成功表达了具有活性的仿刺参铜锌超氧化物歧化酶(A pos-tichopus japonicus Cu/Zn-superoxide dismutase,Aj-SOD1)蛋白.利用Trizol法从海参肠组织中提取总RNA,通过反转录PCR扩增获得Aj-SOD1基因的编码序列(GenBank:JX097096.1,459 bp),构建克隆载体pMD18-Aj-SOD1;在目的基因两端引入(XhoⅠ/N deⅠ)酶切位点,构建克隆载体pMD18-Aj-SOD1(XhoⅠ/N deⅠ).将此载体与表达质粒pET30a(+)分别双酶切后连接,构建重组表达载体pET30a-Aj-SOD1.转化至大肠杆菌BL21(DE3),Kan+抗性筛选阳性转化子,获得基因工程菌BL21(DE3)-pET30a-Aj-SOD1.SDS-PAGE和邻苯三酚自氧化法检测发现,经0.1mmol/L IPTG诱导8h后,成功获得具有抗氧化活性的Aj-SOD1蛋白.

摘要： 目的 建立反转录PCR(reverse transcription PCR, RT-PCR)快速检测克罗诺杆菌的方法, 解决常见方法中以 DNA 作为模板带来的假阳性问题.方法 根据克罗诺杆菌的 α-葡萄糖苷酶基因序列设计特异性引物和探针, 检测克罗诺杆菌, 做了特异性和灵敏度研究.结果 建立的RT-PCR法能有效扩增克罗诺杆菌的特异性片段, 在纯培养物中, 灵敏度可达10 CFU/mL, 在人工污染奶粉培养7 h 后的检测限为1×10 CFU/mL.结论 本方法能够快速检测奶粉中克罗诺杆菌活菌.%Objective To establish a method for rapid detection of viable Cronobacter by reverse transcription PCR (RT-PCR), in order to solve the false positive problem with DNA as template in common methods. Methods According to α-glucosidase gene sequence of the Cronobacter, specific primers and probes was designed for the determination of Cronobacter. The sensitivity and specificity of the RT-PCR method were compared with conventional methods.Results The RT-PCR method could effectively amplified specific fragment of Cronobacter. In the pure culture, the sensitivity was up to 10 CFU/mL. The limit of detection of the artificial milk powder after 7 h was 1×10 CFU/mL.Conclusion This method can rapidly detect the viable Cronobacter in the powdered milk.

摘要： 猪德尔塔冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)是一种新发的冠状病毒.本研究根据PDCoV的M基因序列分析结果设计特异性引物,建立了反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)检测方法,确定了其最佳反应条件并进行了特异性、灵敏性和重复性实验,同时应用该方法对四川省送检的226份临床仔猪(Sus scrofa)腹泻样品进行流行病学调查,并对人工感染PDCoV的7日龄仔猪组织器官进行了检测与分析.结果表明,建立的RT-PCR检测方法能够扩增出654 bp的M基因目的片段,其最佳退火温度为60 °C,上下游引物量为1.75 μL,且与猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(Porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)、日本乙型脑炎病毒(Japaneseencephalitis virus,JEV)、猪轮状病毒(Porcine rotavirus,RV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine respiratory and reproductive syndrome virus,PRRSV)、猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)等无交叉反应;该方法最低可检出8.82×109IU/mL的PDCoV核酸.四川226份临床样品检测结果显示,PDCoV阳性检出率为7.1％;选取阳性样品CHN-SC2015株测定M基因,与GenBank己收录的28株PDCoV的M基因进行比对,其核苷酸相似性为98％～ 100％,氨基酸相似性为99％～ 100％;PDCoV感染仔猪具有广泛的组织嗜性,在心、肝、脾、肺、肾、大肠、回肠、空肠中均有检出.本研究建立的RT-PCR法具有简单、快速和特异等优点,可用于PDCoV的临床快速检测.

摘要： 为建立快速检测临床1型鸭肝炎病毒(DHAV-1)感染的方法,根据DHAV-1的vp1基因序列设计1对引物,以DHAV-1及其他常见的感染鸭的病毒基因组为模板,建立了DHAV-1的特异性RT-PCR检测方法;以10倍梯度稀释的DHAV-1 RNA为模板,测定该方法的灵敏度;采集江苏多地的疑似DHAV-1感染病料,提取基因组进行RT-PCR扩增,产物经测序鉴定后判断所建立方法的检测率.结果显示,建立的方法可以特异性扩增DHAV-1 vp1基因保守区360 bp的序列,最低可检测1 fg基因组模板,对临床样品检测率为100%.表明,成功建立了特异性强、灵敏度高且可以用于临床快速诊断DHAV-1感染的方法.%In order to establish a rapid detection method for dicnical duck hepatitis virus type 1(DHAV-1) infection,a pair of primers based on vp1 gene sequence was designed. Using DHAV-1 or other common disease virus genome as template, a specificity RT-PCR method was established. The template was ten times diluted for sensitivity detection. Some suspected DHAV-1 infected epidemic materials were collected from Jiangsu province. Genome of the materials were extracted and detected followed with sequence determination. The results showed that the established method could specifically amplify vp1 conservative region 360 bp sequence. The sensitivity and specificity results showed that the detection limitation was 1 fg,and there was no cross reactions with other duch virused. The detection rate of clinical samples was 100%. The results showed that a high specificity and high sensitivity RT-PCR method for rapid clinical diagnosis of duck DHAV-1 infection was successfully established.

摘要： Objective To clone and analyze the Ara h7 cDNA sequences.Methods Total RNA was extracted from peanuts cotyledon by Trizol reagents.Ara h7 cDNA sequences were cloned through RT-PCR.The sequences were analyzed and protein properties were predicted using bioinformatics tools.Results The length of cDNA of Ara h7 was 482 bp and it coded 160 amino acids.The bioinformatical analysis showed that Ara h7 was a 18.881 kDa hydrophilic protein with 9 potential phosphorylation sites and 5 different B cell linear epitopes.Conclusion This study cloned the cDNA of Ara h7 successfully and analyzed the coded amino acid properties of Ara h7 with bioinformatics tools.%目的 克隆花生Ara h7基因cDNA序列,并对其序列进行分析.方法 采用Trizol法,从花生子叶中提取花生RNA,经反转录PCR,克隆花生Ara h7 cDNA序列;采用生物信息学软件对Ara h7序列进行分析,预测蛋白结构及功能.结果 Ara h7 cDNA序列有482 bp,编码160个氨基酸.生物信息学分析结果显示Arah7蛋白是一种亲水性蛋白,分子量为18.881 kDa,具有9个潜在的磷酸化位点,5个不同的B细胞线性表位.结论 本研究成功克隆了Arah7cDNA序列,并采用生物信息学软件分析了基因编码的蛋白的特征.

摘要： 猪流行性腹泻病毒（PEDV）是一种对热敏感的病毒，由于PEDV病毒具有热敏感性，我们推测用蒸汽和制粒机模仿传统商业化的饲料热处理过程或许可以减轻PEDV的传染性。本试验设计了两种热处理方法通过定量反转录PCR和生物测定分析来探究制粒机采用不同的处理时间和温度是否会影响PEDV的数量和传染性。

摘要： 为克隆米蛾[Corcyra cephalonica(Stainton)]β-actin基因cDNA片段,建立米蛾[β-actin基因实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法,并评估其在实时荧光定量研究中作为内参基因的可靠性,利用反转录PCR(RT-PCR)技术克隆获得米蛾β-actin基因cDNA片段,采用SYBR Green Ⅰ染料法建立qRT-PCR方法,检测在米蛾卵、幼虫、蛹和成虫4个虫态中β-actin基因的表达量.获得了长为822bp的米蛾β-actin基因片段(GenBank accession:KJ599569),编码273个氨基酸残基;荧光定量标准曲线的Ct值检测范围为13～28,扩增效率为90.1％,相关系数R2=0.992,溶解曲线分析结果显示产物为特异的单峰,其Tm值为(84±0.5)°C,符合定量要求;实时荧光定量结果表明,β-actin基因在米蛾不同发育历期中的表达水平无显著性差异(p＞0.05).成功建立了米蛾β-actin基因qRT-PCR方法,β-actin基因可以作为米蛾基因表达定量研究中的可靠内参基因.研究结果为β-actin作内参基因进行米蛾功能基因表达差异研究奠定了分子基础.

摘要： 根据已发表的查尔酮合成酶基因序列设计简并引物，利用RT-PCR、RACE的方法扩增得到紫叶李查尔酮合成酶(CHS)基因，该基因命名为chs，其DNA序列长1 405bp，含有一个347bp的内含子，去除内含子后，编码352个氨基酸。推导的氨基酸序列与报道的其他查尔酮合成酶氨基酸序列相比，具有较高同源性。该基因在GenBank中的登陆号为DQ856583。

摘要： 根据已发表的查尔酮合成酶基因序列设计简并引物，利用RT-PCR、RACE的方法扩增得到紫叶李查尔酮合成酶(CHS)基因，该基因命名为chs，其DNA序列长1 405bp，含有一个347bp的内含子，去除内含子后，编码352个氨基酸。推导的氨基酸序列与报道的其他查尔酮合成酶氨基酸序列相比，具有较高同源性。该基因在GenBank中的登陆号为DQ856583。

摘要： 根据已发表的查尔酮合成酶基因序列设计简并引物，利用RT-PCR、RACE的方法扩增得到紫叶李查尔酮合成酶(CHS)基因，该基因命名为chs，其DNA序列长1 405bp，含有一个347bp的内含子，去除内含子后，编码352个氨基酸。推导的氨基酸序列与报道的其他查尔酮合成酶氨基酸序列相比，具有较高同源性。该基因在GenBank中的登陆号为DQ856583。

摘要： 根据已发表的查尔酮合成酶基因序列设计简并引物，利用RT-PCR、RACE的方法扩增得到紫叶李查尔酮合成酶(CHS)基因，该基因命名为chs，其DNA序列长1 405bp，含有一个347bp的内含子，去除内含子后，编码352个氨基酸。推导的氨基酸序列与报道的其他查尔酮合成酶氨基酸序列相比，具有较高同源性。该基因在GenBank中的登陆号为DQ856583。

摘要： 从鸡骨髓细胞中分离提取总RNA,经过反转录PCR(RT-PCR)扩增出鸡β-防御素-1(Gal-1)cDNA.与载体pGEM-T Easy相连,经克隆测序表明扩增出的cDNA碱基数为198bp,与发表了的Gal-1cDNA编码区碱基序列完全相同.核苷酸序列比较表明Gal-1与THP-1具有最高的85.4﹪同源性.氨基酸序列比较Gal-1与THP-1同源性最高,为72.7﹪.将Gal-1基因成熟肽片断插入到酵母表达载体pPICZα-C,构建重组表达载体pPICZα-C-gal-1,电转入表达宿主菌X-33,Zeocin抗生筛选重组菌株.挑取阳性菌株经甲醇诱导表达,Tricine-SDS-PAGE电泳发现在约4.5kD位置出现预期条带.对其抗菌活性检测发现具有抗大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等细菌的活性.反相高效液相色谱表明阳性菌株表达产物与标准品在柱子中保留时间一致.

摘要： 从鸡骨髓细胞中分离提取总RNA,经过反转录PCR(RT-PCR)扩增出鸡β-防御素-1(Gal-1)cDNA.与载体pGEM-T Easy相连,经克隆测序表明扩增出的cDNA碱基数为198bp,与发表了的Gal-1cDNA编码区碱基序列完全相同.核苷酸序列比较表明Gal-1与THP-1具有最高的85.4﹪同源性.氨基酸序列比较Gal-1与THP-1同源性最高,为72.7﹪.将Gal-1基因成熟肽片断插入到酵母表达载体pPICZα-C,构建重组表达载体pPICZα-C-gal-1,电转入表达宿主菌X-33,Zeocin抗生筛选重组菌株.挑取阳性菌株经甲醇诱导表达,Tricine-SDS-PAGE电泳发现在约4.5kD位置出现预期条带.对其抗菌活性检测发现具有抗大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等细菌的活性.反相高效液相色谱表明阳性菌株表达产物与标准品在柱子中保留时间一致.

摘要： 从鸡骨髓细胞中分离提取总RNA,经过反转录PCR(RT-PCR)扩增出鸡β-防御素-1(Gal-1)cDNA.与载体pGEM-T Easy相连,经克隆测序表明扩增出的cDNA碱基数为198bp,与发表了的Gal-1cDNA编码区碱基序列完全相同.核苷酸序列比较表明Gal-1与THP-1具有最高的85.4﹪同源性.氨基酸序列比较Gal-1与THP-1同源性最高,为72.7﹪.将Gal-1基因成熟肽片断插入到酵母表达载体pPICZα-C,构建重组表达载体pPICZα-C-gal-1,电转入表达宿主菌X-33,Zeocin抗生筛选重组菌株.挑取阳性菌株经甲醇诱导表达,Tricine-SDS-PAGE电泳发现在约4.5kD位置出现预期条带.对其抗菌活性检测发现具有抗大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等细菌的活性.反相高效液相色谱表明阳性菌株表达产物与标准品在柱子中保留时间一致.

摘要： 从鸡骨髓细胞中分离提取总RNA,经过反转录PCR(RT-PCR)扩增出鸡β-防御素-1(Gal-1)cDNA.与载体pGEM-T Easy相连,经克隆测序表明扩增出的cDNA碱基数为198bp,与发表了的Gal-1cDNA编码区碱基序列完全相同.核苷酸序列比较表明Gal-1与THP-1具有最高的85.4﹪同源性.氨基酸序列比较Gal-1与THP-1同源性最高,为72.7﹪.将Gal-1基因成熟肽片断插入到酵母表达载体pPICZα-C,构建重组表达载体pPICZα-C-gal-1,电转入表达宿主菌X-33,Zeocin抗生筛选重组菌株.挑取阳性菌株经甲醇诱导表达,Tricine-SDS-PAGE电泳发现在约4.5kD位置出现预期条带.对其抗菌活性检测发现具有抗大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等细菌的活性.反相高效液相色谱表明阳性菌株表达产物与标准品在柱子中保留时间一致.

摘要： 从鸡骨髓细胞中分离提取总RNA,经过反转录PCR(RT-PCR)扩增出鸡β-防御素-1(Gal-1)cDNA.与载体pGEM-T Easy相连,经克隆测序表明扩增出的cDNA碱基数为198bp,与发表了的Gal-1cDNA编码区碱基序列完全相同.核苷酸序列比较表明Gal-1与THP-1具有最高的85.4﹪同源性.氨基酸序列比较Gal-1与THP-1同源性最高,为72.7﹪.将Gal-1基因成熟肽片断插入到酵母表达载体pPICZα-C,构建重组表达载体pPICZα-C-gal-1,电转入表达宿主菌X-33,Zeocin抗生筛选重组菌株.挑取阳性菌株经甲醇诱导表达,Tricine-SDS-PAGE电泳发现在约4.5kD位置出现预期条带.对其抗菌活性检测发现具有抗大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等细菌的活性.反相高效液相色谱表明阳性菌株表达产物与标准品在柱子中保留时间一致.

摘要： 从鸡骨髓细胞中分离提取总RNA,经过反转录PCR(RT-PCR)扩增出鸡β-防御素-1(Gal-1)cDNA.与载体pGEM-T Easy相连,经克隆测序表明扩增出的cDNA碱基数为198bp,与发表了的Gal-1cDNA编码区碱基序列完全相同.核苷酸序列比较表明Gal-1与THP-1具有最高的85.4﹪同源性.氨基酸序列比较Gal-1与THP-1同源性最高,为72.7﹪.将Gal-1基因成熟肽片断插入到酵母表达载体pPICZα-C,构建重组表达载体pPICZα-C-gal-1,电转入表达宿主菌X-33,Zeocin抗生筛选重组菌株.挑取阳性菌株经甲醇诱导表达,Tricine-SDS-PAGE电泳发现在约4.5kD位置出现预期条带.对其抗菌活性检测发现具有抗大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等细菌的活性.反相高效液相色谱表明阳性菌株表达产物与标准品在柱子中保留时间一致.

摘要： 本发明公开一种适用于高效反转录反应的反转录引物组合，所述反转录引物组合由带有oligo(dT)结构的引物和半随机引物组成。本发明还公开了所述反转录引物在反转录反应中的应用。本发明反转录引物组合在保留了锚定引物优势的同时，避免了普通随机引物所引起的碱基错配和非随机配对，消除传统反转录引物对于mRNA模板5’端、3’端的合成效率偏好性，使mRNA模板各位点能够均匀、无差错地合成到相对应的cDNA中，从而显著提升反转录效率与数据均一性、稳定性。

摘要： 本发明涉及合成的非天然存在的寡核苷酸化合物，该化合物含有其序列定义了一个保守催化区的核苷酸和其序列能够与RNA病毒包装序列内预定的靶序列杂交的核苷酸。优选的，病毒包装序列是反转录病毒包装序列，或是HIV-1Psi包装序列。RNA病毒可以是HIV-1，猫白血病病毒，猫免疫缺损病毒或表I中所列病毒之一。保守催化区可以得自锤头核酶，发夹核酶，肝炎δ核酶，RNAase P核酶，I组内含子，II组内含子。本发明还涉及以RNA病毒为靶的多核酶，含有或不含有反义链的核酶组合物和含有反义链和polyTAR，RRE或TAR引诱物的核酶组合物。本发明还描述了载体。此外，还描述了体内和间接体内的治疗方法和使用方法。

摘要： 本发明提出一种反转录PCR分析IVF单个植入前胚胎的基因表达中的反转录产物PCR体系。所述分析基因表达方法包括步骤：标本收集及纯化；反转录反应；反转录阴性对照和阳性对照；反转录产物进行实时定量PCR检测；使用组织细胞RNA进行优化PCR条件；在该条件下同时放大扩增阴性对照和阳性对照；采用相对定量的方法检测目的基因的表达量；以及进行统计学分析。本发明还提供了反转录产物进行实时定量PCR检测的PCR体系。这种改良的实时定量反转录PCR技术非常敏感，高度精确，同时能产生可观的资料。利用这种方法，可以弥补Microarray的不足，对分析单个关键基因在单个细胞的表达和在IVF科研与临床上有非常广泛的应用价值。此方法为确定新的IVF和体外胚胎培养培养液的条件提供了一个重要的监测手段。

摘要： 本发明提出一种利用实时定量反转录PCR监测IVF胚胎培养液质量的反转录反应体系。所述监测培养液质量的方法是利用实时定量反转录PCR分析IVF单个植入前胚胎的基因表达来进行IVF胚胎培养液的质量监测，所述反转录PCR分析IVF单个植入前胚胎的基因表达方法包括步骤：标本收集及纯化；反转录反应；反转录阴性对照和阳性对照；RT产物进行实时定量PCR检测；使用组织细胞RNA进行优化PCR条件；在该条件下同时放大扩增阴性对照和阳性对照；采用相对定量的方法检测目的基因的表达量；以及进行统计学分析。这种改良的实时定量反转录PCR技术非常敏感，高度精确，同时能产生可观的资料。利用这种方法，可以弥补Microarray的不足，对分析单个关键基因在单个细胞的表达和在IVF科研与临床上有非常广泛的应用价值。此方法为确定新的IVF和体外胚胎培养培养液的条件提供了一个重要的监测手段。

摘要： 本发明提出一种反转录PCR分析IVF单个植入前胚胎的基因表达方法的反转录反应体系，所述分析基因表达方法包括步骤：标本收集及纯化；反转录反应；反转录阴性对照和阳性对照；反转录产物进行实时定量PCR检测；使用组织细胞RNA进行优化PCR条件；在该条件下同时放大扩增阴性对照和阳性对照；采用相对定量的方法检测目的基因的表达量；以及进行统计学分析。这种改良的实时定量反转录PCR技术非常敏感，高度精确，同时能产生可观的资料。利用这种方法，可以弥补Microarray的不足，对分析单个关键基因在单个细胞的表达和在IVF科研与临床上有非常广泛的应用价值。此方法为确定新的IVF和体外胚胎培养培养液的条件提供了一个重要的监测手段。

摘要： 本发明涉及一种抗体、其片段或衍生物，用作针对属于人内源性反转录病毒W型(HERV‑W)的病毒的抗反转录病毒药物，其中所述抗体、其片段或衍生物针对HERV‑W包膜蛋白(HERV‑W Env)。本发明还涉及一种组合物，其包含所述抗体和反转录病毒的反转录酶抑制药物，用作靶向属于HERV‑W的病毒的抗反转录病毒药物。

摘要： 本发明涉及一种抗体、其片段或衍生物，用作针对属于人内源性反转录病毒W型(HERV‑W)的病毒的抗反转录病毒药物，其中所述抗体、其片段或衍生物针对HERV‑W包膜蛋白(HERV‑W Env)。本发明还涉及一种组合物，其包含所述抗体和反转录病毒的反转录酶抑制药物，用作靶向属于HERV‑W的病毒的抗反转录病毒药物。

摘要： 本发明公开一种适用于高效反转录反应的反转录引物组合，所述反转录引物组合由带有oligo(dT)结构的引物和半随机引物组成。本发明还公开了所述反转录引物在反转录反应中的应用。本发明反转录引物组合在保留了锚定引物优势的同时，避免了普通随机引物所引起的碱基错配和非随机配对，消除传统反转录引物对于mRNA模板5’端、3’端的合成效率偏好性，使mRNA模板各位点能够均匀、无差错地合成到相对应的cDNA中，从而显著提升反转录效率与数据均一性、稳定性。

摘要： 本发明涉及合成的非天然存在的寡核苷酸化合物，该化合物含有其序列定义了一个保守催化区的核苷酸和其序列能够与RNA病毒包装序列内预定的靶序列杂交的核苷酸。优选的，病毒包装序列是反转录病毒包装序列，或是HIV-1 Psi包装序列。RNA病毒可以是HIV-1，猫白血病病毒，猫免疫缺损病毒或表I中所列病毒之一。保守催化区可以得自锤头核酶，发夹核酶，肝炎δ核酶，RNAase P核酶，I组内含子，II组内含子。本发明还涉及以RNA病毒为靶的多核酶，含有或不含有反义链的核酶组合物和含有反义链和polyTAR，RRE或TAR引诱物的核酶组合物。本发明还描述了载体。此外，还描述了体内和间接体内的治疗方法和使用方法。

摘要： 本发明提供了一种制备青稞RPL11 cDNA基因的反转录PCR方法，同时本发明还提供了扩增该RPL11基因的PCR方法。进一步的，本发明提供了一种构建RPL11基因重组表达质粒的方法，并具体提供了该重组表达质粒的核苷酸序列。基于本发明提供的RPL11基因扩增和表达方法，可为下一步的品种培育和筛选提供有益选择。