细胞病变

摘要： 目的探讨金莲清热颗粒体外抗流感病毒的活性。方法以MDCK细胞为体外筛选细胞模型,以Oseltamivir acid作为阳性对照化合物,采用MTT法并结合CPE法检测细胞成活率和病毒抑制率,检测金莲清热颗粒对甲型流感病毒(A/PR/8/34 H1N1株)细胞活性的抑制作用。结果金莲清热颗粒对甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)株感染MDCK细胞的半数有效浓度(EC_(50))为0.564 mg/mL。在0.625、1.25、2.5、5 mg/mL浓度范围内,细胞活率平均值分别为102.57%、97.26%、88.29%、78.62%,抑制率平均值分别为50.34%、103.78%、82.31%、64.47%。结论金莲清热颗粒对所测试的甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)株在细胞水平上具有一定的体外抑制活性,有进一步研究其抗病毒有效成分与抗病毒活性关系的价值。

摘要： 【目的】明确山羊痘病毒(GTPV)AV41弱毒疫苗株在不同日龄山羊原代睾丸细胞中的增殖效率,为选择病毒或疫苗株的培养细胞提供数据支撑。【方法】通过传统方式对7日龄和60日龄山羊睾丸细胞分离培养,利用长时间动态细胞成像及数据分析系统比较2个日龄细胞的生长效率;接种GTPV,观察2个日龄细胞在感染病毒后的形态特征;通过间接免疫荧光和荧光定量PCR比较GTPV的增殖效率。【结果】7日龄和60日龄山羊睾丸细胞的形态特征和生长速率无明显差异;接种GTPV后,2个日龄的原代山羊睾丸细胞均能产生细胞病变,但是出现细胞病变的时间以及病变特征存在差别。间接免疫荧光和荧光定量PCR结果表明:GPTV在60日龄山羊睾丸细胞中的增殖效率高于7日龄。【结论】GTPV在7日龄和60日龄山羊原代睾丸细胞中均能发生病毒增殖,且2种细胞均能发生明显的细胞病变,但60日龄细胞的增殖效率高于7日龄细胞。研究结果对采用山羊睾丸细胞培养GTPV弱毒株有一定的指导作用。

摘要： 番茄红素是植物中所含的一种天然色素。主要存在于茄科植物西红柿的成熟果实中。番茄红素(Lycopene)是类胡萝卜素的一种,是一种很强的抗氧化剂,具有极强的清除自由基的能力,对防治前列腺癌、肺癌、乳腺癌、子宫癌等有显著效果,有效抑制癌细胞的扩散和复制,还有预防心脑血管疾病、提高免疫力、保护细胞DNA免受自由基损害,防止细胞病变、突变、癌变;含强力抗氧化生物活物质,能促使袪细胞的生长和再生,美容皱,维持皮肤健康,延缓衰老等功效,有“植物黄金”之称,被誉为“21世纪保健品的新宠”。它是自然界中最强的抗氧化剂,其抗氧化作用是茁-胡萝卜素的2倍,VE的100倍。

摘要： 猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)是养猪业常见的猪腹泻病毒,对仔猪具有高死亡率.将黑龙江地区某猪场腹泻样本鉴定为TGEV阳性后,无菌接种于猪肾细胞(PK-15)连续传代培养成功获得一株TGEV分离株,通过CPE观察、RT-PCR鉴定、间接免疫荧光试验以及电镜观察等方法对分离株成功鉴定.测定第15代分离TCID50为10-5.25/0.1 mL,为后续TGEV的致病性研究及疫苗开发提供前期基础.

摘要： 为研究蜘蛛香提取物体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的作用,建立Marc-145细胞模型,以利巴韦林作为阳性对照药物,采用观察细胞病变法及MTT比色法,在研究蜘蛛香提取物对Marc-145细胞最大安全质量浓度的基础上,设立蜘蛛香水提物及醇提物组、利巴韦林阳性对照组、PRRSV对照组和细胞对照组,对PRRSV进行阻断、抑制和直接灭活的测定.结果显示,蜘蛛香水提取物对PRRSV的阻断、抑制作用的最高抑制率分别为44.6％、37.9％,均极显著(P<0.01)低于利巴韦林阳性对照组,且细胞出现了较明显的病变.蜘蛛香醇提取物对PRRSV的阻断、抑制作用的最高抑制率分别为107.1％、102.6％,极显著(P<0.01)高于利巴韦林阳性对照组,细胞形态基本完好.蜘蛛香水提物和醇提物对病毒直接灭活作用的最高抑制率分别为83.5％和120.9％,均极显著(P<0.01)高于利巴韦林阳性对照组.可见,蜘蛛香醇提物抗PRRSV的作用较强.

摘要： 为研究半边莲水提取物、半边莲总黄酮、半边莲总生物碱体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的作用,本试验建立了Marc-145细胞模型,在研究其对Marc-145细胞最大安全质量浓度的基础上,结合细胞病变形态观察和MTT法,设立药物组、利巴韦林阳性对照组、病毒对照组和细胞对照组,对病毒进行阻断、抑制和直接杀灭3种作用方式的测定.结果显示,半边莲水提取物、半边莲总黄酮、半边莲总生物碱和利巴韦林的最大安全质量浓度分别为2.5、1.25、0.63和0.016 mg·mL-1.在体外抗PRRSV作用的试验中,半边莲水提取物对病毒的阻断、抑制和直接灭活作用的最高抑制率分别为52.1％、60.2％、52.6％,极显著低于阳性对照利巴韦林(P<0.01),且各作用方式下均出现明显的细胞病变.半边莲总黄酮对病毒的阻断、抑制和直接灭活作用的最高抑制率分别为51.1％、85.0％、93.9％,其抑制和直接灭活作用较强,极显著高于阳性对照利巴韦林(P<0.01),且在这两种作用方式下细胞基本保持单层完好.半边莲总生物碱对病毒的阻断、抑制和直接灭活作用的最高抑制率分别为91.2％、57.8％、58.1％,其对PRRSV在抑制作用和直接灭活作用下的抑制率显著低于阳性对照利巴韦林(P<0.05),对PRRSV阻断作用极显著强于阳性对照利巴韦林(P<0.01),且在阻断作用下细胞轻微病变.综合3种作用方式,3种半边莲提取物均具有体外抗PRRSV的作用,其中,半边莲总黄酮抗PRRSV的效果最好,其次是半边莲总生物碱,半边莲水提取物抗PRRSV效果最弱.

摘要： 利用MDBK细胞从奶牛卵巢中分离到一株牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)毒株.设计扩增IBRV的通用引物,对卵巢组织中的病毒进行PCR扩增及测序;对卵巢组织感染MDBK细胞,进行IBRV的分离培养;测定IBRV的TCID50,同时利用IBRV FA进行鉴定.结果 表明,分离到的病毒在MDBK细胞上产生了明显的病变;用特异性引物可扩增出特异性目的条带,目的序列与IBRV基因序列一致;该毒株的病毒滴度为106.75 TCID50/mL.

摘要： 牛流行热病毒(BFFV)是引发世界范围内牛流行热最主要病原之一,给奶牛业的发展造成严重危害.本研究通过RT-PCR对疑似牛流行热奶牛抗凝血样品进行检测,选取阳性样品颅内接种3日龄乳鼠,7日后乳鼠死亡,鼠脑组织通过PCR扩增出BFFV目的条带,乳鼠颅内重复接种3次,乳鼠发病死亡时间明显提前.选取阳性脑组织接种BHK-21细胞,盲传3代后出现明显细胞病变,特异性引物扩增获得目的条带,测序结果与牛流行热病毒序列一致,表明成功分离到一株牛流行热病毒.

摘要： 目的：探讨"清肝化瘀方"含药血清对人巨细胞病毒(HCMV)感染后人胚肺成纤维细胞(HELF)细胞病变及增殖活性的影响. 方法：以体外培养的HELF为靶细胞,将"清肝化瘀方"含药血清和更昔洛韦含药(GCV)血清分别作用于HCMV AD169株感染的HELF,采用倒置相差显微镜动态观察细胞病变,MTT检测细胞增殖活性. 结果："清肝化瘀方"含药血清、更昔洛韦含药血清最大无毒浓度均为血清稀释度10-3.HCMV感染后24h～72h、168h细胞病变(+);24h～72h、144h增殖活性减低."清肝化瘀方"含药血清、更昔洛韦含药血清干预后,细胞病变均消失;干预24～96h增殖活性均逐渐升高,与病毒组比较,均以72h时显著升高为主(P＜0.05).但两组间细胞病变及增殖活性比较均无统计学差异(P＞0.05). 结论："清肝化瘀方"、更昔洛韦含药血清均可通过遏制HCMV感染后细胞病变,调节HELF增殖而发挥抗病毒作用,但两者无显著性差异.

摘要： 建立呼吸道合胞病毒A型(RSV-A型)感染Hep-2细胞模型,通过预防、治疗及直接灭活给药方式三种不同给药方式,观察中药雄黄对RSV-A型感染Hep-2细胞病变(CPE)的抑制作用.用高能球磨机研磨双蒸水水飞处理制备雄黄纳米微粒,应用砷钼蓝染色法测定雄黄纳米微粒浓度并在Nano Series粒度测定仪上测定其粒度.以MTT法计算药物的半数中毒剂量(TC50).通过三种不同给药方式即预防给药、治疗给药及直接灭活给药方式进行体外实验,以利巴韦林为阳性对照药,观察雄黄纳米微粒对RSV-A型感染Hep-2细胞病变所起的作用,并对药物的量效关系进行分析.雄黄纳米微粒TC50值为0.649 g/mL.预防、治疗及直接灭活给药方式均可减轻RSV-A感染Hep-2细胞的CPE程度,其抑制RSV-A型感染Hep-2细胞病变的半数有效浓度(IC50)分别为0.20 g/nL、0.13 g/mL、0.16 g/mL,治疗指数(TI)分别为3.18、4.99和4.11,雄黄纳米微粒对RSV-A型感染Hep-2细胞病变的抑制作用存在着明显的量效关系.雄黄纳米微粒按预防、治疗及直接灭活给药方式给药时,其中治疗给药方式更有利于减轻RSV-A感染Hep-2细胞引起的病变.

摘要： 目的：观察痰热清注射液在体外抗甲型流感病毒的作用.方法：以MDCK细胞为病毒宿主,测定痰热清注射液对甲型流感病毒引起MDCK细胞的病变程度抑制作用,并设病毒唑对照组.结果：在甲型A/粤防/243/72(H3N2)中痰热清注射液和对照组利巴韦林的TD50、TD0、IC50、SI分别是1:19.3、1:36.4、1:90.8、4.07.在甲型A/粤防/243/72(H1N1)中痰热清注射液和对照组利巴韦林的TD50、TD0、IC50、SI分别是1:20.1、1:38.9、1:74.1、3.69.结论：痰热清注射液对甲型流感病毒所致的细胞病变有较好的抑制作用,效果与对照组病毒唑相近.

摘要： 目的：研究防感煎剂对H1N1流感病毒的体外抑制作用.方法：MDCK细胞培养后接种H1N1流感病毒液100TCID50,再给予防感煎剂40mg/ml、20mg/ml、10mg/ml三个浓度观察细胞病变效应.防感煎剂不同浓度药物与病毒等量混合作用1-2h后,再加至MDCK细胞,加入MTT观察酶标仪490nm测吸光度值,计算病毒抑制率.结果：三种不同浓度的防感煎剂对H1N1侵染MDCK细胞都有一定的增殖抑制作用和直接灭杀作用.结论：防感煎剂对H1N1流感病毒侵染MDCK细胞具有一定的病毒抑制作用.

摘要： 目的：建立腺病毒3型(HAdV-3)感染HEp-2细胞模型,评价六神丸混悬液对腺病毒感染HEp-2细胞病变的抑制作用,并进一步探讨六神丸在体外抗腺病毒的量效关系.方法：用乙醇回流法处理制备六神丸液.以MTT法计算药物的半数中毒剂量(TC50).通过三种不同给药方式即预防给药、治疗给药及直接灭活给药方式进行体外实验,观察六神丸液对HAdV-3感染HEp-2细胞病变所起的作用,并对药物的量效关系进行分析.结果：六神丸液TC50值为40.48μg/ml.预防、治疗及直接灭活给药方式均可减轻HAdV-3感染HEp-2细胞的CPE程度,其抗HAdV-3的半数有效浓度(IC50)分别为28.91μg/ml、19.28μg/ml、8.61μg/ml,治疗指数(TI)分别为1.4、2.1和4.7,六神丸液对HAdV-3感染HEp-2细胞CPE的抑制作用存在着一定的量效关系.结论：在预防、治疗及直接灭活给药方式下,六神丸均有一定的抗HAdv-3的作用,但直接灭活效果更明显.

摘要： 本试验将靶向猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的shRNA表达盒插入pEGFP-N1的EcoO109I酶切位点构建重组转基因载体pEGFP-G1,并在转基因Marc-145细胞验证其抑制PRRSV复制的功能.用pEGFP-G1转染Marc-145细胞24h后感染欧洲型PRRSV,病毒感染后每天观察细胞病变(CPE)情况.结果表明本试验所获pEGFP-G1可明显抑制PRRSV复制.

摘要： 本研究利用Marc-145细胞在临床上分离到一株PRRS病毒，命名为J株，并将其与另外两株疫苗株A和B进行细胞培养特性和对细胞的致病性进行比较，发现其相对于疫苗毒来讲，出现细胞病变的时间长，细胞病变各异，细胞液浑浊，并且其半数细胞感染量比疫苗毒要高1000倍左右。研究表明该临床野毒对Marc-145细胞的感染力较强，培养的毒力也较高，同时两株疫苗株的TCID50明显低于J株，因此笔者建议应当在PRRSV疫苗生产过程中时刻监控疫苗的毒力和病毒含量，一方面防止病毒毒力返强，造成人为的散毒，另一方面要保证疫苗中病毒的含量，防止生产的疫苗的病毒量达不到免疫要求，从而导致免疫失败。

摘要： 采用MA104细胞从广东省某猪场患有明显腹泻症状的仔猪粪便中分离了1株产生明显细胞病变(CPE)的病毒。电镜观察显示，病毒粒子呈现较为典型的轮状病毒的形态特征;对其VP6摹因进行序列分析，结果表明该分离株与A群猪轮状病毒代表株OSU和Cottfried的核苷酸同源分别为86.3％和80.8％，氨基酸序列同源性分别为97.7％和93.2％。综合所见，所分离的毒株为A群猪轮状病毒。

摘要： 目的：构建包含有B型流感病毒B/Guangzhou/01/2007株血凝素(HA)基因的重组3型腺病毒。 方法：用PCR方法扩增得到HA基因，酶切后克隆至3型腺病毒穿梭质粒pSK-CMV，构建重组穿梭质粒pSK-CMV-HA，然后在大肠杆菌BJ5183内进行经Not Ⅰ和EcoR Ⅴ线性化的pSK-CMV-HA和经Rsr Ⅱ线性化的骨架质粒pBRAdV3△E3的同源重组， AsiS Ⅰ酶切线性化重组腺病毒质粒pBRAdV3△E3-HA后脂质体法转染HEp-2细胞，进行病毒包装和增殖后得到重组腺病毒rAdV3△E3-HA，并且通过病变观察、扫描电镜、RT-PCR、免疫细胞化学方法对基因组的包装和HA基因的表达进行检测。 结果：将HA基因克隆入pSK-CMV获得重组穿梭质粒pSK-CMV-HA，线性化的pSK-CMV-HA与pBRAdV3△E3同源重组后获得pBRAdV3△E3-HA，线性化的pBRAdV3△E3-HA转染HEp-2细胞观察到细胞病变和HA基因的表达。 结论：成功构建了带有HA基因的重组腺病毒rAdV3△E3-HA，为B型流感病毒-3型腺病毒二联活苗的研究提供了依据。

摘要： 2007年6月份,某猪场爆发一起以高热、高发病率和高死亡率为特征的传染性疾病,临诊症状主要表现为高烧、皮肤发红、怀孕母猪流产,剖检主要特征是间质性肺炎。经过病原分离,获得一株能够引起Marc-145细胞发生病变的病毒。进一步通过血清中和试验、血凝试验、RT-PCR,确定此次分离的病毒为高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒。综合该病的流行病学特征、临床症状、剖检病理变化以及实验室检验,确诊该病为高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的猪繁殖与呼吸综合征。

摘要： 本发明公开了一种基于细胞团的宫颈细胞病理切片图像病变细胞识别方法及系统，包括如下步骤：在宫颈病理切片图像上提取单个的细胞团区域；统计细胞团区域的尺寸，将尺寸超过预定阈值的细胞团视作超大细胞团；将超大细胞团拆分为子细胞团；将超大细胞团以外的细胞团区域和拆分得到的子细胞团作边界填充处理，得到待识别区域；在待识别区域中识别出病变细胞。本发明针对海量像素的全切片图像，以细胞团为处理和识别单位，而不是常规的图像分块融合框架，更加适合宫颈细胞病理切片图像的特点，同时提高了效率和精准度。

摘要： 本发明人发现了一群在胃低级别异型增生阶段开始出现、具有特定分子特征、且具有高度癌变风险的细胞群(命名为“胃癌极早期细胞”)，可作为极早期诊断胃癌的标志。胃癌极早期细胞的分子标志被应用到制备基于胃组织或血液样本实现胃癌或其他消化系统肿瘤早期诊断的试剂盒中。该胃癌极早期细胞标志还可区分胃癌术后复发风险，以及肠、胰腺以及食管等消化系统器官肿瘤发生的风险。另外，本发明人还发现一群在胃癌前病变早期出现、具有特定分子特征的细胞群，可作为早期诊断胃癌前病变的标志，也被集成到试剂盒中。本发明可用于临床上早期诊断胃癌及其他消化道肿瘤的发生，也可作为上述消化道肿瘤防治的干预靶点，应用前景良好。

摘要： 本发明公开了一种宫颈细胞病理切片病变细胞分割方法及系统，具体为:离线建立宫颈细胞病理切片病变细胞的训练样本集，在深度残差网络的基础上引入多尺度空洞卷积构造的语义分割网络并训练该语义分割模型；在宫颈病理切片图像上提取待识别单元，应用训练好的语义分割模型在待识别单元中分割出不同类型的病变细胞；结合病理细胞形态特征，建立轮廓形变模型，进一步优化语义分割结果；根据切片中分割出的不同病变类型的细胞数量和置信程度，对整张切片的病变类别进行预测。本发明在细胞病理切片图像上利用语义分割网络模型和形变变分模型精确地分割出不同类型的病变细胞，同时提高了识别精度和识别效率。

摘要： 本发明公开了一种基于细胞团的宫颈细胞病理切片图像病变细胞识别方法及系统，包括如下步骤：在宫颈病理切片图像上提取单个的细胞团区域；统计细胞团区域的尺寸，将尺寸超过预定阈值的细胞团视作超大细胞团；将超大细胞团拆分为子细胞团；将超大细胞团以外的细胞团区域和拆分得到的子细胞团作边界填充处理，得到待识别区域；在待识别区域中识别出病变细胞。本发明针对海量像素的全切片图像，以细胞团为处理和识别单位，而不是常规的图像分块融合框架，更加适合宫颈细胞病理切片图像的特点，同时提高了效率和精准度。

摘要： 本发明涉及细胞模型构建方法技术领域，尤其是一种食管上皮细胞癌前病变细胞模型的构建方法，现提出如下方案，其包括使用1μmol/LAFB1溶液长期连续干预HEEC至第30代，采用CCK8法来检测AFB1染毒不同代数的HEEC活力的影响，采用流式细胞仪检测不同代数细胞的细胞凋亡、细胞周期，采用Transwell法检测染毒30代细胞的侵袭、迁移能力。本发明进一步探索AFB1在食管癌发生过程的相关分子机制，为食管癌的病因学研究奠定基础，为防止食品中AFB1对食管的毒性提供一定的理论依据。

摘要： 本公开内容提供了用于在无细胞核酸样品中进行准确且灵敏的体细胞单核苷酸变体(SNV)检测的概率模型，所述样品包含序列数据集。可对于序列数据集中的每个基因座确定联合基因型，并且可固有地去除种系突变。可应用一组过滤来消除低质量的体细胞变体调用。此外，可考虑总体肿瘤无细胞脱氧核糖核酸(cfDNA)分数和重叠读取伴侣，从而能够从具有低肿瘤cfDNA分数的样品中进行准确的SNV检测和变体等位基因频率估计。通过使用概率模型和机器学习模型以区分真实变体与测序误差，从而设计出微小残留病变(MRD)的灵敏早期检测。

摘要： 本发明人发现了一群在胃低级别异型增生阶段开始出现、具有特定分子特征、且具有高度癌变风险的细胞群(命名为“胃癌极早期细胞”)，可作为极早期诊断胃癌的标志。胃癌极早期细胞的分子标志被应用到制备基于胃组织或血液样本实现胃癌或其他消化系统肿瘤早期诊断的试剂盒中。该胃癌极早期细胞标志还可区分胃癌术后复发风险，以及肠、胰腺以及食管等消化系统器官肿瘤发生的风险。另外，本发明人还发现一群在胃癌前病变早期出现、具有特定分子特征的细胞群，可作为早期诊断胃癌前病变的标志，也被集成到试剂盒中。本发明可用于临床上早期诊断胃癌及其他消化道肿瘤的发生，也可作为上述消化道肿瘤防治的干预靶点，应用前景良好。

摘要： 本发明人发现了一群在胃低级别异型增生阶段开始出现、具有特定分子特征、且具有高度癌变风险的细胞群(命名为“胃癌极早期细胞”)，可作为极早期诊断胃癌的标志。胃癌极早期细胞的分子标志被应用到制备基于胃组织或血液样本实现胃癌或其他消化系统肿瘤早期诊断的试剂盒中。该胃癌极早期细胞标志还可区分胃癌术后复发风险，以及肠、胰腺以及食管等消化系统器官肿瘤发生的风险。另外，本发明人还发现一群在胃癌前病变早期出现、具有特定分子特征的细胞群，可作为早期诊断胃癌前病变的标志，也被集成到试剂盒中。本发明可用于临床上早期诊断胃癌及其他消化道肿瘤的发生，也可作为上述消化道肿瘤防治的干预靶点，应用前景良好。

摘要： 本发明的课题在于提供一种新型的末梢神经病变的预防或治疗方法、以及由确认到末梢神经病变或星形胶质细胞病变的疾病导致的疼痛症状的预防或治疗方法。本发明提供一种末梢神经病变或者由确认到末梢神经病变或星形胶质细胞病变的疾病导致的疼痛症状的预防或治疗剂。

摘要： 本实用新型公开了一种用于观察96孔细胞板细胞病变的电子显微镜，包括有第一支撑板和第二支撑板，所述第一支撑板和第二支撑板相对的一侧均开设有连接槽，两个所述连接槽的内部均固定连接有滑杆，两个所述滑杆的外表面均滑动连接有滑套，所述滑套的一侧固定连接有L形件，两个所述L形件的内部之间通过转动套转动连接有螺纹杆，所述螺纹杆的外表面螺纹连接有螺纹套，所述螺纹套的底部固定连接有显微镜本体，两个所述L形件相对的一侧之间通过连接杆固定连接，本实用新型通过驱动轮可以带动螺纹杆进行转动，再配合螺纹套可以带动显微镜本体进行左右移动，方便对96孔细胞板进行观测，使用方便，提高了检测效率。