HA基因
HA基因的相关文献在1993年到2022年内共计300篇,主要集中在畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂、分子生物学、基础医学
等领域,其中期刊论文223篇、会议论文56篇、专利文献87201篇;相关期刊90种,包括中华实验和临床病毒学杂志、动物医学进展、畜牧兽医学报等;
相关会议29种,包括2016第六届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会第五届全国会员代表大会暨2016学术年会、中国微生物学会兽医微生物学专业委员会、中国畜牧兽医学会生物制品学分会2016年联合学术大会)、第四届全国禽病分子生物技术青年工作者会议、第二届山东省畜禽健康养殖、动物福利学术研讨会暨中国肉、蛋鸭鹅等水禽产业高峰论坛等;HA基因的相关文献由1071位作者贡献,包括陈化兰、刘秀梵、姜永萍等。
HA基因—发文量
专利文献>
论文:87201篇
占比:99.68%
总计:87480篇
HA基因
-研究学者
- 陈化兰
- 刘秀梵
- 姜永萍
- 乔传玲
- 杨焕良
- 彭大新
- 谢青梅
- 辛晓光
- 陈艳
- 步志高
- 邓国华
- 刘明
- 刘春国
- 廖明
- 柳金雄
- 于康震
- 徐怀英
- 李明义
- 童光志
- 郭霄峰
- 韩庆功
- 丁选亚
- 何奇松
- 孙翔翔
- 曹永长
- 毕英佐
- 熊毅
- 陈素娟
- 马静云
- 冉多良
- 刘月焕
- 张伟
- 林健
- 潘洁
- 王友令
- 秦卓明
- 袁小远
- 金梅林
- 陈峰
- 马晶
- 何柳芬
- 刘红旗
- 刘金华
- 单虎
- 周庆丰
- 崔尚金
- 张如宽
- 张晓光
- 张玉霞
- 张芳芳
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刘佳;
李金鞠
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摘要:
目的了解克拉玛依市甲型H3N2流感病毒HA和NA基因特征,为防控提供科学依据。方法收集2018-2020年克拉玛依市甲型H3N2流感毒株进行HA和NA基因序列测定,运用Mega软件与疫苗株进行序列比对和分析。结果 18株毒株HA基因与A/Hong Kong/4801/2014同源性高于A/Kansas/14/2017,NA基因与A/Hong Kong/4801/2014同源性低于A/Kansas/14/2017。相对疫苗株,克拉玛依市毒株已出现氨基酸同时在2个及以上抗原决定簇发生替换;HA蛋白均发生了糖基化位点的改变;未发现与耐药相关位点突变。结论 2019-2020年克拉玛依市毒株与当年度疫苗推荐株匹配度降低且HA已发生抗原漂移,可能导致本地区H3N2毒株流行,神经氨酸酶抑制剂类药物依旧能够有效治疗流感,应加强对流感病毒HA和NA基因进行监测。
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崔栋;
肖娜;
杨晓华;
钟冠南;
顾嘉颖;
洪文腾;
曾凡竹
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摘要:
目的了解深圳市盐田区近年度A(H1N1)pdm09流感病毒HA基因特征。方法选取盐田区2016—2019年监测年度分离的34株A(H1N1)pdm09流感病毒毒株,PCR扩增HA基因并测序,构建进化树,进行糖基化位点、抗原变异位点和受体结合位点等变异分析。结果分析的34株毒株均分布在流感病毒的6B分支,2016年上半年5株分布在6B.2簇;2016年下半年及2017年度毒株分布在6B.1簇;2018—2019年度毒株分布在6B.1A簇,其中有5株为6B.1A.1型,3株为6B.1A.5a型。与同年疫苗株比较,盐田区A(H1N1)pdm09流感毒株3个受体结合部位的氨基酸均没有发生变异。D222和Q223没有出现变异。HA1与HA2的裂解点,R327和G328没有出现变异。所有毒株在潜在糖基化位点10NNST、11NTSD、23NVTV、87NGTC、276NTTC、287NTSL、481NGTY和540NGSL等保持稳定;有31个分离株多出1个位于Sa抗原决定簇内的糖基化位点162NQSY(与疫苗株A/Michigan/45/2015一致)或162NQTY(与疫苗株A/Brisbane/02/2018一致)。结论盐田区A(H1N1)pdm09流感病毒HA基因及其氨基酸持续变异,应持续监测流感病毒,为科学防控提供依据。
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葛菲菲;
吴杰;
李鑫;
刘健;
杨德全;
鞠厚斌;
周锦萍
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摘要:
为了解上海市活禽市场H9N2亚型禽流感病毒(AIV)分离株的遗传变异情况,本研究对2018年分离的6株H9N2 AIV的8个基因片段进行PCR扩增、克隆和测序,并对获得的HA和NA基因序列进行同源性和关键位点分析.结果 显示:6个分离株的HA裂解位点均为RSSR↓GLF,符合低致病性AIV的分子特征;并对6株分离株HA基因分析了糖基化位点;受体结合位点除198位、202位和203位有变异外,其他位点均保守;226位氨基酸均为L,因此具有与哺乳动物唾液酸α2-6受体结合的特征.此外也对NA基因红细胞结合位点,活性中心以及抗原决定簇进行了分析,在红细胞结合位点403位发生突变,在活性中心(同时为抗原决定簇)143位发生突变,这6株病毒其余位点均保守.HA基因进化树显示,上述6株分离株均属于近几年在中国鸡群中流行的Y280分支.从8个基因片段组成方式分析这6个毒株属于G57基因型.以上研究为H9N2亚型AIV的防控和疫苗研制提供了科学参考.
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李素丽
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摘要:
长期以来,甲型H3N2流感病毒一直是威胁人类健康的重要病原体之一,对其变异规律进行深入的分析研究在流感的防治工作中具有重要的意义,其中对血凝素(HA)基因变异的研究工作最为重要.对1990年~2013年全球甲型H3N2流感病毒血凝素的基因和进化特征进行研究.从NCBI的流感病毒数据库下载1990年~2013年人源甲型H3N2流感病毒HA基因样本,采用数值映射和PCA聚类的方法进行序列分析和进化研究,并用MATLAB绘制聚类图直观表示结果.PCA分析中前两个主成分占93.88%.聚类图中1990-1999年,2000-2005年,2006-2013年数据聚类成三部分,但是这三部分并没有特别明显的间隔.三维图中数据呈现为比较连续的曲线.结论 1990年~2013年期间甲型H3N2流感一直渐进的进化,但并未出现大的基因重组,并没有使血凝素基因特性发生明显改变.
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于海龙;
苑纯秀;
赵权;
李泽君;
许榜丰;
石晓娜;
马天馨;
闫婉婉;
李雪松;
杨健美;
滕巧泱;
刘芹防
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摘要:
细胞培养流感病毒生产疫苗过程中细胞系的选择至关重要,本研究建立了可控表达H9N2亚型禽流感病毒(AIV)HA蛋白的MDCK细胞系,能有效支持H9N2流感病毒的扩增.本研究应用插入四环素调控元件和H9N2亚型禽流感病毒HA基因的重组质粒V2-H9,与辅助质粒pMDSV、psPAX2共转染293T细胞包装慢病毒,将包装出的慢病毒感染MDCK细胞,通过添加嘌呤霉素筛选出阳性的单克隆细胞.再用PR8 SH441病毒感染筛选出来的MDCK单克隆细胞.结果显示,流感病毒在其中4株MDCK单克隆细胞的HA效价接近于8;生长曲线结果显示,流感病毒在第34株MDCK单克隆细胞中复制效果最好;间接免疫荧光(IFA)和Western blot检验结果显示,第34株MDCK单克隆细胞H9 HA的表达量最高;将第34株MDCK单克隆细胞驯化后进行悬浮培养,每隔24 h测定细胞密度,结果表明,第34株MDCK单克隆细胞可以悬浮培养,且流感病毒在第34株MDCK悬浮细胞中HA效价可达9log2.以上结果表明,本研究获得了一株可高效扩增H9亚型禽流感病毒的MDCK细胞株,为流感弱毒疫苗的研发提供了新的研究方法和实验基础.
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胡增垒;
黄雅;
石磊;
胡顺林;
甘军纪;
刘秀梵
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摘要:
为评价新城疫病毒(NDV)载体携带的外源基因大小对其免疫原性的影响,将2个拷贝的H7N9亚型禽流感病毒HA基因插入NDV的P与M基因之间非编码区最佳插入位点,构建重组NDV并评价其生物学特性及对鸡的免疫原性。结果显示,表达单、双拷贝HA基因的重组NDV与亲本株在鸡胚中的复制水平均相似,而携带双拷贝HA基因使重组NDV诱导鸡产生的NDV抗体显著下降;表达双拷贝HA基因的重组NDV的HA蛋白表达量明显提高,但其诱导鸡产生的H7N9血凝抑制、IgG抗体水平均与表达单拷贝HA基因的重组NDV相当。结果表明,在NDV的P和M基因之间插入双拷贝HA基因能够显著提高HA蛋白表达量,但却使重组NDV在鸡体内的复制能力下降,而不能提高NDV载体疫苗诱导机体产生的H7N9特异性抗体应答的水平。本研究对NDV疫苗载体的构建和优化具有重要参考意义。
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何敏;
石利民;
乔梦凯;
王璇;
雍玮;
杜雪飞
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摘要:
目的 对南京地区2014-2016年流行的甲型H3N2型流感病毒血凝素(hemagglutintin,HA)基因进行测序和分析,掌握HA基因的位点突变和遗传进化特征.方法 于2014-2016年流感监测样本H3N2型流感病毒阳性标本中,根据时间段随机选取27株,MDCK细胞进行病毒分离和纯化,吸取病毒培养液提取病毒RNA,反转录-聚合酶链反应(reverse transcritase polymerase chain reaction,RT-PCR)扩增病毒HA基因全长并测序,掌握HA序列特征,对其遗传进化特点、重要功能位点进行详细分析.结果 27株H3N2型流感毒株HA基因核苷酸长度为1 701 bp,编码566个氨基酸;与同年WHO推荐疫苗株序列同源性高达97.9-99.5%.进化分析表明,2014-2016年南京流行株在进化树上分属两个分支,实现了从3C.3a到3C.2a基因型的转变,目前以3C.2a基因型流行为主;不同年份的南京分离株多个抗原表位上的氨基酸发生了变异.结论 2014-2016年南京地区H3N2亚型流感病毒流行株与疫苗株同源性高,疫苗可以产生良好的保护作用;HA基因抗原位点变异快,分子遗传进化活跃,有必要对病毒HA基因的分子特征进行持续监测,为下一个流感病毒流行季H3N2型的防控做好准备.
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马玲;
姚贵哲;
王准;
孟庆峰;
李玥;
肖芳;
刘金华;
王伟利
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摘要:
H5N8亚型禽流感是传播性极强的人兽共患病,为了简便快速的检测H5N8亚型禽流感病毒,针对H5N8亚型禽流感病毒HA基因和NA基因序列分别设计合成特异性引物和探针,通过优化反应条件,建立了同一反应程序下同时扩增HA基因和NA基因的双重荧光RT-PCR检测方法.结果显示,该检测方法特异性强,不与其他亚型禽流感病毒和禽常见病原发生交叉反应,敏感性可达10 copies/μL;组内组间重复性好,平均变异系数均小于0.4%;用该方法对108份临床样品检测,结果与病毒分离鉴定方法检出率一致.综上所述,建立的H5N8亚型禽流感病毒双重荧光RT-PCR检测方法具有快速、特异、敏感、重复性好等优点,为H5N8亚型禽流感的快速诊断和疫情防控提供了一定的技术支持.
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杨承槐;
孙莹;
李俊平;
李岭;
曹明慧;
李启红;
李慧姣
- 《2016第六届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会第五届全国会员代表大会暨2016学术年会、中国微生物学会兽医微生物学专业委员会、中国畜牧兽医学会生物制品学分会2016年联合学术大会)》
| 2016年
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摘要:
鸭肠炎病毒(Duck enteritis virus,DEV),又名鸭瘟病毒,可感染鸭、鹅及其它雁形目禽类,引起血管损伤、组织出血、消化道粘膜损伤、淋巴器官受损和实质性器官退行性病变的一种急性、接触性、败血性传染病——鸭病毒性肠炎或称鸭瘟.疱疹病毒基因组很大,可表达外源基因作为活载体疫苗,如表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒(HVT)活疫苗,免疫效果良好.DEV基因组为158-162kb,宿主范围小,且具有良好的免疫原性,免疫成年鸭后第3天即可产生一定的免疫力,第4天就能抵抗强毒攻击(内部资料),因此是很有前景的水禽疫苗病毒载体.本研究以DEV细胞适应株DNA为模板,利用PCR扩增出UL2基因上下游序列并克隆入pMD-18T载体;以UL2基因作为外源基因插入靶点及同源重组臂,将CMV启动子控制的含有GFPPgpt基因表达盒克隆入DEV UL2基因中,构建含GFP基因的转移质粒载体pT-UL2-GFP-gpt;用脂质体将其与DEV细胞适应株共转染鸡胚成纤维细胞,经过8轮蚀斑筛选,获以鸭源的H9N2亚型禽流感病毒HA基因替换GFP-gpt基因表达盒,构建含有HA基因表达盒的转移载体pT-UL2-HA,将其与重组病毒rDEV-△UL2-GFP共转染CEF细胞,进行反向蚀斑筛选,获得表达HA基因的重组鸭肠炎病毒rDEV-△UL2-HA。通过测序、间接免疫荧光方法(IFA)证明rDEV-△UL2-HA在CEF上连续传代20代,HA基因在重组病毒中稳定表达。动物试验结果表明,以1000 TCID50的rDEV-△UL2-HA免疫4周龄SPF鸭,可以诱导产生与DEV亲本毒相当的中和抗体效价,并能够抵抗致死性DEV的攻击;在免疫后28天,H9 HI抗体为1:512,能完全阻止免疫鸭排毒。以1000 TCIDso免疫3周龄SPF鸡,免瘦后14天,HI抗体效价为1:128,免疫后21天,HI抗体效价达1:1024。综上所述,本研究构建的DEV-UL2-HA对鸡和鸭均有良好的免疫原性,是一株理想的H9亚型禽流感-鸭病毒性肠炎重组活载体疫苗候选毒株。
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杨承槐;
孙莹;
李俊平;
李岭;
曹明慧;
李启红;
李慧姣
- 《2016第六届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会第五届全国会员代表大会暨2016学术年会、中国微生物学会兽医微生物学专业委员会、中国畜牧兽医学会生物制品学分会2016年联合学术大会)》
| 2016年
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摘要:
鸭肠炎病毒(Duck enteritis virus,DEV),又名鸭瘟病毒,可感染鸭、鹅及其它雁形目禽类,引起血管损伤、组织出血、消化道粘膜损伤、淋巴器官受损和实质性器官退行性病变的一种急性、接触性、败血性传染病——鸭病毒性肠炎或称鸭瘟.疱疹病毒基因组很大,可表达外源基因作为活载体疫苗,如表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒(HVT)活疫苗,免疫效果良好.DEV基因组为158-162kb,宿主范围小,且具有良好的免疫原性,免疫成年鸭后第3天即可产生一定的免疫力,第4天就能抵抗强毒攻击(内部资料),因此是很有前景的水禽疫苗病毒载体.本研究以DEV细胞适应株DNA为模板,利用PCR扩增出UL2基因上下游序列并克隆入pMD-18T载体;以UL2基因作为外源基因插入靶点及同源重组臂,将CMV启动子控制的含有GFPPgpt基因表达盒克隆入DEV UL2基因中,构建含GFP基因的转移质粒载体pT-UL2-GFP-gpt;用脂质体将其与DEV细胞适应株共转染鸡胚成纤维细胞,经过8轮蚀斑筛选,获以鸭源的H9N2亚型禽流感病毒HA基因替换GFP-gpt基因表达盒,构建含有HA基因表达盒的转移载体pT-UL2-HA,将其与重组病毒rDEV-△UL2-GFP共转染CEF细胞,进行反向蚀斑筛选,获得表达HA基因的重组鸭肠炎病毒rDEV-△UL2-HA。通过测序、间接免疫荧光方法(IFA)证明rDEV-△UL2-HA在CEF上连续传代20代,HA基因在重组病毒中稳定表达。动物试验结果表明,以1000 TCID50的rDEV-△UL2-HA免疫4周龄SPF鸭,可以诱导产生与DEV亲本毒相当的中和抗体效价,并能够抵抗致死性DEV的攻击;在免疫后28天,H9 HI抗体为1:512,能完全阻止免疫鸭排毒。以1000 TCIDso免疫3周龄SPF鸡,免瘦后14天,HI抗体效价为1:128,免疫后21天,HI抗体效价达1:1024。综上所述,本研究构建的DEV-UL2-HA对鸡和鸭均有良好的免疫原性,是一株理想的H9亚型禽流感-鸭病毒性肠炎重组活载体疫苗候选毒株。
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杨承槐;
孙莹;
李俊平;
李岭;
曹明慧;
李启红;
李慧姣
- 《2016第六届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会第五届全国会员代表大会暨2016学术年会、中国微生物学会兽医微生物学专业委员会、中国畜牧兽医学会生物制品学分会2016年联合学术大会)》
| 2016年
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摘要:
鸭肠炎病毒(Duck enteritis virus,DEV),又名鸭瘟病毒,可感染鸭、鹅及其它雁形目禽类,引起血管损伤、组织出血、消化道粘膜损伤、淋巴器官受损和实质性器官退行性病变的一种急性、接触性、败血性传染病——鸭病毒性肠炎或称鸭瘟.疱疹病毒基因组很大,可表达外源基因作为活载体疫苗,如表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒(HVT)活疫苗,免疫效果良好.DEV基因组为158-162kb,宿主范围小,且具有良好的免疫原性,免疫成年鸭后第3天即可产生一定的免疫力,第4天就能抵抗强毒攻击(内部资料),因此是很有前景的水禽疫苗病毒载体.本研究以DEV细胞适应株DNA为模板,利用PCR扩增出UL2基因上下游序列并克隆入pMD-18T载体;以UL2基因作为外源基因插入靶点及同源重组臂,将CMV启动子控制的含有GFPPgpt基因表达盒克隆入DEV UL2基因中,构建含GFP基因的转移质粒载体pT-UL2-GFP-gpt;用脂质体将其与DEV细胞适应株共转染鸡胚成纤维细胞,经过8轮蚀斑筛选,获以鸭源的H9N2亚型禽流感病毒HA基因替换GFP-gpt基因表达盒,构建含有HA基因表达盒的转移载体pT-UL2-HA,将其与重组病毒rDEV-△UL2-GFP共转染CEF细胞,进行反向蚀斑筛选,获得表达HA基因的重组鸭肠炎病毒rDEV-△UL2-HA。通过测序、间接免疫荧光方法(IFA)证明rDEV-△UL2-HA在CEF上连续传代20代,HA基因在重组病毒中稳定表达。动物试验结果表明,以1000 TCID50的rDEV-△UL2-HA免疫4周龄SPF鸭,可以诱导产生与DEV亲本毒相当的中和抗体效价,并能够抵抗致死性DEV的攻击;在免疫后28天,H9 HI抗体为1:512,能完全阻止免疫鸭排毒。以1000 TCIDso免疫3周龄SPF鸡,免瘦后14天,HI抗体效价为1:128,免疫后21天,HI抗体效价达1:1024。综上所述,本研究构建的DEV-UL2-HA对鸡和鸭均有良好的免疫原性,是一株理想的H9亚型禽流感-鸭病毒性肠炎重组活载体疫苗候选毒株。
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杨承槐;
孙莹;
李俊平;
李岭;
曹明慧;
李启红;
李慧姣
- 《2016第六届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会第五届全国会员代表大会暨2016学术年会、中国微生物学会兽医微生物学专业委员会、中国畜牧兽医学会生物制品学分会2016年联合学术大会)》
| 2016年
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摘要:
鸭肠炎病毒(Duck enteritis virus,DEV),又名鸭瘟病毒,可感染鸭、鹅及其它雁形目禽类,引起血管损伤、组织出血、消化道粘膜损伤、淋巴器官受损和实质性器官退行性病变的一种急性、接触性、败血性传染病——鸭病毒性肠炎或称鸭瘟.疱疹病毒基因组很大,可表达外源基因作为活载体疫苗,如表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒(HVT)活疫苗,免疫效果良好.DEV基因组为158-162kb,宿主范围小,且具有良好的免疫原性,免疫成年鸭后第3天即可产生一定的免疫力,第4天就能抵抗强毒攻击(内部资料),因此是很有前景的水禽疫苗病毒载体.本研究以DEV细胞适应株DNA为模板,利用PCR扩增出UL2基因上下游序列并克隆入pMD-18T载体;以UL2基因作为外源基因插入靶点及同源重组臂,将CMV启动子控制的含有GFPPgpt基因表达盒克隆入DEV UL2基因中,构建含GFP基因的转移质粒载体pT-UL2-GFP-gpt;用脂质体将其与DEV细胞适应株共转染鸡胚成纤维细胞,经过8轮蚀斑筛选,获以鸭源的H9N2亚型禽流感病毒HA基因替换GFP-gpt基因表达盒,构建含有HA基因表达盒的转移载体pT-UL2-HA,将其与重组病毒rDEV-△UL2-GFP共转染CEF细胞,进行反向蚀斑筛选,获得表达HA基因的重组鸭肠炎病毒rDEV-△UL2-HA。通过测序、间接免疫荧光方法(IFA)证明rDEV-△UL2-HA在CEF上连续传代20代,HA基因在重组病毒中稳定表达。动物试验结果表明,以1000 TCID50的rDEV-△UL2-HA免疫4周龄SPF鸭,可以诱导产生与DEV亲本毒相当的中和抗体效价,并能够抵抗致死性DEV的攻击;在免疫后28天,H9 HI抗体为1:512,能完全阻止免疫鸭排毒。以1000 TCIDso免疫3周龄SPF鸡,免瘦后14天,HI抗体效价为1:128,免疫后21天,HI抗体效价达1:1024。综上所述,本研究构建的DEV-UL2-HA对鸡和鸭均有良好的免疫原性,是一株理想的H9亚型禽流感-鸭病毒性肠炎重组活载体疫苗候选毒株。
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杨承槐;
孙莹;
李俊平;
李岭;
曹明慧;
李启红;
李慧姣
- 《2016第六届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会第五届全国会员代表大会暨2016学术年会、中国微生物学会兽医微生物学专业委员会、中国畜牧兽医学会生物制品学分会2016年联合学术大会)》
| 2016年
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摘要:
鸭肠炎病毒(Duck enteritis virus,DEV),又名鸭瘟病毒,可感染鸭、鹅及其它雁形目禽类,引起血管损伤、组织出血、消化道粘膜损伤、淋巴器官受损和实质性器官退行性病变的一种急性、接触性、败血性传染病——鸭病毒性肠炎或称鸭瘟.疱疹病毒基因组很大,可表达外源基因作为活载体疫苗,如表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒(HVT)活疫苗,免疫效果良好.DEV基因组为158-162kb,宿主范围小,且具有良好的免疫原性,免疫成年鸭后第3天即可产生一定的免疫力,第4天就能抵抗强毒攻击(内部资料),因此是很有前景的水禽疫苗病毒载体.本研究以DEV细胞适应株DNA为模板,利用PCR扩增出UL2基因上下游序列并克隆入pMD-18T载体;以UL2基因作为外源基因插入靶点及同源重组臂,将CMV启动子控制的含有GFPPgpt基因表达盒克隆入DEV UL2基因中,构建含GFP基因的转移质粒载体pT-UL2-GFP-gpt;用脂质体将其与DEV细胞适应株共转染鸡胚成纤维细胞,经过8轮蚀斑筛选,获以鸭源的H9N2亚型禽流感病毒HA基因替换GFP-gpt基因表达盒,构建含有HA基因表达盒的转移载体pT-UL2-HA,将其与重组病毒rDEV-△UL2-GFP共转染CEF细胞,进行反向蚀斑筛选,获得表达HA基因的重组鸭肠炎病毒rDEV-△UL2-HA。通过测序、间接免疫荧光方法(IFA)证明rDEV-△UL2-HA在CEF上连续传代20代,HA基因在重组病毒中稳定表达。动物试验结果表明,以1000 TCID50的rDEV-△UL2-HA免疫4周龄SPF鸭,可以诱导产生与DEV亲本毒相当的中和抗体效价,并能够抵抗致死性DEV的攻击;在免疫后28天,H9 HI抗体为1:512,能完全阻止免疫鸭排毒。以1000 TCIDso免疫3周龄SPF鸡,免瘦后14天,HI抗体效价为1:128,免疫后21天,HI抗体效价达1:1024。综上所述,本研究构建的DEV-UL2-HA对鸡和鸭均有良好的免疫原性,是一株理想的H9亚型禽流感-鸭病毒性肠炎重组活载体疫苗候选毒株。
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杨承槐;
孙莹;
李俊平;
李岭;
曹明慧;
李启红;
李慧姣
- 《2016第六届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会第五届全国会员代表大会暨2016学术年会、中国微生物学会兽医微生物学专业委员会、中国畜牧兽医学会生物制品学分会2016年联合学术大会)》
| 2016年
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摘要:
鸭肠炎病毒(Duck enteritis virus,DEV),又名鸭瘟病毒,可感染鸭、鹅及其它雁形目禽类,引起血管损伤、组织出血、消化道粘膜损伤、淋巴器官受损和实质性器官退行性病变的一种急性、接触性、败血性传染病——鸭病毒性肠炎或称鸭瘟.疱疹病毒基因组很大,可表达外源基因作为活载体疫苗,如表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒(HVT)活疫苗,免疫效果良好.DEV基因组为158-162kb,宿主范围小,且具有良好的免疫原性,免疫成年鸭后第3天即可产生一定的免疫力,第4天就能抵抗强毒攻击(内部资料),因此是很有前景的水禽疫苗病毒载体.本研究以DEV细胞适应株DNA为模板,利用PCR扩增出UL2基因上下游序列并克隆入pMD-18T载体;以UL2基因作为外源基因插入靶点及同源重组臂,将CMV启动子控制的含有GFPPgpt基因表达盒克隆入DEV UL2基因中,构建含GFP基因的转移质粒载体pT-UL2-GFP-gpt;用脂质体将其与DEV细胞适应株共转染鸡胚成纤维细胞,经过8轮蚀斑筛选,获以鸭源的H9N2亚型禽流感病毒HA基因替换GFP-gpt基因表达盒,构建含有HA基因表达盒的转移载体pT-UL2-HA,将其与重组病毒rDEV-△UL2-GFP共转染CEF细胞,进行反向蚀斑筛选,获得表达HA基因的重组鸭肠炎病毒rDEV-△UL2-HA。通过测序、间接免疫荧光方法(IFA)证明rDEV-△UL2-HA在CEF上连续传代20代,HA基因在重组病毒中稳定表达。动物试验结果表明,以1000 TCID50的rDEV-△UL2-HA免疫4周龄SPF鸭,可以诱导产生与DEV亲本毒相当的中和抗体效价,并能够抵抗致死性DEV的攻击;在免疫后28天,H9 HI抗体为1:512,能完全阻止免疫鸭排毒。以1000 TCIDso免疫3周龄SPF鸡,免瘦后14天,HI抗体效价为1:128,免疫后21天,HI抗体效价达1:1024。综上所述,本研究构建的DEV-UL2-HA对鸡和鸭均有良好的免疫原性,是一株理想的H9亚型禽流感-鸭病毒性肠炎重组活载体疫苗候选毒株。
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Ting Qi;
戚亭;
Wei Guo;
郭巍;
Xiaojun Wang;
王晓钧
- 《2015中国(北京)国际马科技大会》
| 2015年
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摘要:
近几年来,我国一直受到马流感疫情的威胁.许多养马地区并未接种马流感疫苗,并且我国也没有自己的马流感疫苗可用.鉴于此,本研究拟用禽痘病毒载体表达系统来进行马流感疫苗的研制,以希望能够制备出适合在我国应用的马流感疫苗.表达H3N8亚型马流感病毒重组禽痘病毒采用同源重组方式将马流感HA基因重组到禽痘病毒非编码区中。小鼠免疫采用大腿外侧肌肉注射,马匹免疫采用颈部肌肉注射;小鼠攻毒采用滴鼻攻毒,马匹攻毒采用超声雾化攻毒。将重组疫苗以1×10^8PFU剂量免疫实验动物马,马匹在免疫后14天能够检测到HI抗体水平,在二免后抗体水平进一步提高,最高效价能够达到81og2,二免后第二周进行攻毒,免疫组马匹在攻毒后,免疫组马匹没有明显的临床症状,仅个别马匹在个别时间点鼻腔中能够分离到病毒,而对照组马匹在攻毒后1-lOd均分离到病毒,并出现马流感典型临床症状。以上结果表明,本研究构建的重组疫苗能够保护马匹抵御马流感病毒的攻击。
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Ting Qi;
戚亭;
Wei Guo;
郭巍;
Xiaojun Wang;
王晓钧
- 《2015中国(北京)国际马科技大会》
| 2015年
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摘要:
近几年来,我国一直受到马流感疫情的威胁.许多养马地区并未接种马流感疫苗,并且我国也没有自己的马流感疫苗可用.鉴于此,本研究拟用禽痘病毒载体表达系统来进行马流感疫苗的研制,以希望能够制备出适合在我国应用的马流感疫苗.表达H3N8亚型马流感病毒重组禽痘病毒采用同源重组方式将马流感HA基因重组到禽痘病毒非编码区中。小鼠免疫采用大腿外侧肌肉注射,马匹免疫采用颈部肌肉注射;小鼠攻毒采用滴鼻攻毒,马匹攻毒采用超声雾化攻毒。将重组疫苗以1×10^8PFU剂量免疫实验动物马,马匹在免疫后14天能够检测到HI抗体水平,在二免后抗体水平进一步提高,最高效价能够达到81og2,二免后第二周进行攻毒,免疫组马匹在攻毒后,免疫组马匹没有明显的临床症状,仅个别马匹在个别时间点鼻腔中能够分离到病毒,而对照组马匹在攻毒后1-lOd均分离到病毒,并出现马流感典型临床症状。以上结果表明,本研究构建的重组疫苗能够保护马匹抵御马流感病毒的攻击。
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Ting Qi;
戚亭;
Wei Guo;
郭巍;
Xiaojun Wang;
王晓钧
- 《2015中国(北京)国际马科技大会》
| 2015年
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摘要:
近几年来,我国一直受到马流感疫情的威胁.许多养马地区并未接种马流感疫苗,并且我国也没有自己的马流感疫苗可用.鉴于此,本研究拟用禽痘病毒载体表达系统来进行马流感疫苗的研制,以希望能够制备出适合在我国应用的马流感疫苗.表达H3N8亚型马流感病毒重组禽痘病毒采用同源重组方式将马流感HA基因重组到禽痘病毒非编码区中。小鼠免疫采用大腿外侧肌肉注射,马匹免疫采用颈部肌肉注射;小鼠攻毒采用滴鼻攻毒,马匹攻毒采用超声雾化攻毒。将重组疫苗以1×10^8PFU剂量免疫实验动物马,马匹在免疫后14天能够检测到HI抗体水平,在二免后抗体水平进一步提高,最高效价能够达到81og2,二免后第二周进行攻毒,免疫组马匹在攻毒后,免疫组马匹没有明显的临床症状,仅个别马匹在个别时间点鼻腔中能够分离到病毒,而对照组马匹在攻毒后1-lOd均分离到病毒,并出现马流感典型临床症状。以上结果表明,本研究构建的重组疫苗能够保护马匹抵御马流感病毒的攻击。
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王晨曦;
张谮霄;
孙洪磊;
孙怡朋;
刘金华;
蒲娟
- 《第四届全国禽病分子生物技术青年工作者会议》
| 2015年
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摘要:
本研究中,通过分析NCBI数据库中H7亚型禽流感病毒HA基因序列,根据该基因设计引物,建立了针对北美H7亚型禽流感病毒HA基因的一步法RT-PCR检测方法.该方法可特异地检出北美H7亚型禽流感病毒HA基因,而未检出欧亚分支H7亚型禽流感病毒H7N2和H7N9、其它亚型流感病毒(H1N1、H3N2、H5N1、H5N8和H9N2)、以及新城疫病毒和鸡传染性支气管炎病毒.检测方法的灵敏度可达0.1 pg/uL.该方法的建立为监测北美H7亚型禽流感病毒提供了良好的技术支撑,可用于外来禽流感病毒的检测.