含药血清

摘要： 目的:观察补骨颗粒含药血清对内皮祖细胞(EPCs)的成管实验及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,从而探讨补骨颗粒对血管生成的影响机制。方法:取成年SD大鼠按照随机对照表分为空白对照组和实验组,空白对照组予生理盐水2 ml/kg灌胃,实验组予补骨颗粒水溶液3.08 g/kg灌胃,制备空白血清及补骨颗粒含药血清。取10周龄的雄性SD大鼠四肢股骨,在体外分离培养大鼠EPCs,并进行传代培养,应用流式细胞仪检测鉴定细胞表面抗原。收集传代培养3代的EPCs,分为补骨颗粒含药血清组及空白血清组,分别予以补骨颗粒含药血清及空白血清干预。于体外基质胶中培养EPCs并观察其成管情况。同时应用Elisa检测方法检测VEGF表达情况。采用SPSS 18.0软件进行数据统计分析。结果:骨髓中分离出的细胞培养14 d后使用流式细胞仪检测结果显示CD34^(+)细胞比例为70.03%,CD133^(+)细胞比例为67.99%,血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2^(+))细胞比例为63.96%。成管实验显示补骨颗粒含药血清组于干预72 h后,细胞形态趋于典型,呈毛细血管腔样结构;空白血清组未形成典型的毛细血管腔样结构。Elisa检测结果显示补骨颗粒含药血清组在干预24、48 h时的VEGF表达量明显高于空白血清组(t=3.069、2.939,P=0.037、0.042);但是在干预72 h时补骨颗粒含药血清组与空白血清组VEGF表达量比较,差异无统计学意义(t=2.541,P=0.064)。补骨颗粒含药血清组在干预24、48、72 h时的VEGF表达量无明显变化(F=0.684,P=0.523),而空白血清组在干预24、48、72 h时的VEGF表达量明显升高(F=5.656,P=0.019)。结论:补骨颗粒含药血清可以激活EPCs的活性,促进VEGF表达,从而增强EPCs的血管生成作用。

摘要： 目的探讨益脉降脂汤大鼠含药血清对THP-1源性泡沫细胞增殖活性和细胞内胆固醇含量的影响。方法采用THP-1细胞为泡沫细胞建模来源,使用佛波酯(PMA)诱导分化成巨噬细胞,采用80 mg/L氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导建立泡沫细胞模型;将细胞分为巨噬细胞组、模型组、阿托伐他汀(西药)组及益脉降脂汤(中药)低、中、高剂量组,其中巨噬细胞组和模型组使用10%大鼠正常空白血清干预,其余各组使用相应含药血清干预,干预12、24、48 h后用噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖活性,同时检测各组含药血清干预泡沫细胞后细胞内总胆固醇(TC)含量;油红O染色观察各组细胞脂质蓄积情况。结果巨噬细胞诱导及泡沫细胞模型建立成功;MTT法检测细胞增殖活性结果显示,益脉降脂汤含药血清干预12、24、48 h后,与巨噬细胞组相比,模型组OD值显著减少(P<0.05);与模型组相比,西药组与中药各剂量组的OD值均显著升高(P<0.05)。与巨噬细胞组相比,模型组干预不同时间点细胞内TC含量显著增高(P<0.05);与模型组相比,西药组与中药各剂量组细胞内TC含量明显降低(P<0.05);与模型组相比,西药组及中药各剂量组泡沫细胞的脂质蓄积明显减少(P<0.05)。结论益脉降脂汤含药血清可能有提高泡沫细胞生存活性,减少泡沫细胞凋亡、改善泡沫细胞胆固醇蓄积的作用。

摘要： 目的观察大鼠交泰丸含药血清预处理对人脑胶质细胞(HEB)氧化损伤的改善作用并探讨其分子机制。方法SD大鼠随机分为两部分,分别通过肉桂及黄连水提物灌胃、同体积蒸馏水灌胃制备交泰丸含药血清及空白血清,将DMEM培养基与血清配制成10%完全培养基。将HEB分为对照组、模型组及交泰丸组,对照组及模型组加入空白血清培养基、交泰丸组加入含药血清培养基。培养24 h后,交泰丸组及模型组使用过氧化氢处理建立HEB氧化损伤模型,对照组使用等体积PBS处理。采用β-半乳糖苷酶染色法观察各组细胞氧化损伤比例,CCK-8法观察细胞活力,流式细胞术观察细胞凋亡率,活性氧荧光染色法观察细胞氧化应激水平,qRT-PCR法检测细胞衰老相关基因沉默信息调节因子1(SIRT1)、趋化因子联接因子1(CXCL1)、叉头框转录因子O亚族1(FOXO1)、P16、白细胞介素1α(IL-1α)、胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)、IL-6 mRNA表达。结果细胞氧化损伤比例模型组>交泰丸组>对照组,细胞活力对照组>交泰丸组>模型组,细胞凋亡率模型组>交泰丸组>对照组(P均<0.05)。对照组细胞核膜边界清晰,ROS荧光强度低;模型组细胞核膜发生部分裂解,ROS荧光强度增强;交泰丸组细胞膜及核膜结构较模型组更加完整,ROS荧光强度降低。与对照组比较,模型组SIRT1、FOXO1 mRNA表达下降,CXCL1 mRNA表达上升;与模型组比较,交泰丸组SIRT1、FOXO1 mRNA表达下降(P均<0.05),三组其他基因比较差异均无统计学意义。结论大鼠交泰丸含药血清预处理可抑制过氧化氢诱导的HEB氧化损伤,其机制可能与增强细胞活力、抗细胞凋亡、减少细胞氧化应激水平以及抗炎症有关。

摘要： 目的探讨复方扶芳藤合剂含药血清对骨髓间充质干细胞(BMSC)增殖的影响及其机制。方法通过直接贴壁法体外分离、培养、纯化大鼠BMSC,对其进行细胞形态学观察,采用流式细胞仪对其表面标志物进行鉴定。复方扶芳藤合剂按3 mL/(kg•d)给予大鼠灌胃14 d后取含药血清。将BMSC分为空白对照组、含药血清组、Notch1小干扰核糖核酸(siRNA)组和Notch1 siRNA+含药血清组,检测各组BMSC的增殖率以及Notch1信号通路相关信使核糖核酸(mRNA)和蛋白的相对表达量。结果镜下观察可见第1代BMSC呈长梭形,以平行排列生长为主或呈漩涡状生长。第3代BMSC阳性表达CD90、CD44,而CD45呈阴性表达。与空白对照组比较,含药血清组和Notch1 siRNA+含药血清组BMSC的增殖率均升高,Notch1 siRNA组BMSC的增殖率下降(均为P<0.05);与Notch1 siRNA组比较,Notch1 siRNA+含药血清组BMSC的增殖率升高(P<0.05)。与空白对照组比较,含药血清组Hey1、Delta样配体(DLL)1的mRNA和蛋白相对表达量均升高,Notch1 siRNA组和Notch1 siRNA+含药血清组Hey1、DLL1的mRNA和蛋白相对表达量均下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与Notch1 siRNA组比较,Notch1 siRNA+含药血清组Hey1、DLL1的mRNA和蛋白相对表达量均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论复方扶芳藤合剂含药血清可促进大鼠BMSC的增殖,其作用机制可能与Notch1信号通路激活有关。

摘要： 目的 观察当归补血汤含药血清对TNF-α诱导人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)增殖的影响。方法 体外培养HFLS-RA细胞,采用TNF-α及不同浓度含药血清对细胞的生长进行干预,通过MTT法检测含药血清对TNF-α诱导HFLS-RA增殖的影响,ELISA法检测细胞上清液中IL-6、IL-10、IL-17、TGF-β表达,PCR检测细胞中Foxp3、ROR-γt、STAT3 mRNA表达,Western blot法检测细胞中Foxp3、ROR-γt、STAT3蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组HFLS-RA细胞增殖活力上升(P<0.01),IL-6、IL-17水平升高(P<0.01),TGF-β、IL-10水平降低(P<0.01),ROR-γt、STAT3 mRNA及蛋白表达升高(P<0.01),Foxp3 mRNA及蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,当归补血汤高剂量组HFLS-RA细胞增殖活力受到抑制(P<0.01),IL-6、IL-17水平降低(P<0.01),TGF-β、IL-10水平升高(P<0.01),ROR-γt、STAT3 mRNA及蛋白表达降低(P<0.01),Foxp3 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论 当归补血汤含药血清具有抑制TNF-α诱导的HFLS-RA细胞增殖的作用,可能与其调控Th17/Treg平衡、抑制炎症反应相关。

摘要： 目的:研究加味阳和汤对破骨细胞活性的影响,并基于NF-κB信号通路探讨其作用机制。方法:制备加味阳和汤含药血清,用RAW264.7细胞诱导培养破骨细胞,CCK8法筛选出实验给药浓度,干预破骨细胞,收集细胞培养上清,检测并计算各组TRAP酶活力值,Western Blot法检测破骨细胞细胞质IκB-α和细胞核p65蛋白表达,计算各组蛋白灰度值,分析各组数值差异有无统计学意义。结果:CCK8结果显示5%、10%、20%浓度的加味阳和汤血清对RAW264.7细胞活性无明显影响(P>0.05)。细胞上清TRAP酶活力值显示:与诱导组比,加味阳和汤血清组酶活力值下降,20%浓度组下降更为显著,差异有统计学意义(P<0.01)。WB结果显示:与生理盐水组比,诱导组细胞核p65蛋白表达量明显增加;与诱导组比,含药血清组p65蛋白表达量下降,且含药血清浓度越高,p65蛋白表达量越低,差异有统计学意义(P<0.01);与生理盐水组相比,诱导组细胞质IκB-α蛋白表达量下降,与诱导组相比,含药血清组IκB-α蛋白表达量增高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:加味阳和汤可以抑制破骨细胞的活性,降低破骨细胞分泌的抗酒石酸酸性磷酸酶活性,其作用可能与其抑制NF-κB信号通路有关。

摘要： 目的研究温阳化浊通络方含药血清对维甲酸相关孤核受体(RORγt)表达及甲基化的影响,探讨其调控辅助性T细胞17(Th17)增殖从而治疗硬皮病的作用机制。方法分别灌胃Wistar大鼠15、30、60 g/(kg·d)温阳化浊通络方药液后制备不同剂量的含药血清,同时收集硬皮病患者外周血分选Th17细胞。以空白血清作为空白对照,甲基化转移酶抑制剂地西他滨(DCA)作为阳性对照,用不同剂量含药血清处理Th17细胞后,采用CCK-8法检测Th17细胞的增殖,采用qRT-PCR法检测细胞中RORγt、白细胞介素17(IL-17)mRNA的表达,采用Western blot法检测细胞中RORγt蛋白表达,采用酶联免疫吸附测定法检测细胞上清液中IL-17蛋白表达,采用甲基化特异性PCR法检测细胞中RORγt基因启动子甲基化水平,并采用双荧光素酶法检测细胞中RORγt基因启动子的转录活性。结果与空白对照比较,各剂量温阳化浊通络方含药血清和DCA均可抑制Th17细胞的增殖(P<0.05),降低RORγt、IL-17 mRNA及其蛋白的表达水平,提高RORγt基因启动子甲基化水平,减弱RORγt基因启动子转录活性;其中除含药血清低剂量组Th17 mRNA表达水平和RORγt基因启动子甲基化水平外,其余各组上述指标差异均有统计学意义(P<0.05)。结论温阳化浊通络方可通过促进RORγt基因甲基化,抑制RORγt表达及IL-17分泌,进而抑制Th17细胞的增殖。

摘要： 目的 探究四君子汤含药血清对IEC-6细胞增殖及Rho GTP酶(RhoA)、p21、细胞周期蛋白依赖性激酶2(Cdk2)表达的影响。方法 分别制备大鼠空白血清及四君子汤含药血清,MTT法检测IEC-6细胞增殖,RT-qPCR法检测p21、Cdk2 mRNA表达,Western blot法检测RhoA、p21、Cdk2及磷酸化Cdk2(p-Cdk2)蛋白表达。结果 与对照组比较,10%、20%四君子汤含药血清可促进给药24 h后细胞增殖(P<0.01),提高RhoA蛋白表达,Cdk2 mRNA和蛋白表达(P<0.05,P<0.01);各剂量四君子汤含药血清可促进给药48、72 h后细胞增殖(P<0.01),降低p21 mRNA和蛋白表达(P<0.01),升高p-Cdk2蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。与DFMO组比较,各剂量四君子汤含药血清可促进给药48 h后细胞增殖(P<0.01),提高RhoA及p-Cdk2蛋白表达(P<0.01);10%、20%四君子汤含药血清可促进给药72 h后细胞增殖(P<0.01),降低p21 mRNA和蛋白表达(P<0.05,P<0.01),提高Cdk2 mRNA和蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论 四君子汤含药血清可促进正常小肠上皮细胞增殖,其机制与影响多胺调控RhoA、p21、Cdk2表达有关。

摘要： 目的:基于网络药理学预测心律康宁方治疗缓慢性心律失常的作用机制并初步进行细胞生物学验证。方法:通过中药分子机制的生物信息学分析工具(Bioinformatics Analysis Tool for Molecular Mechanism of Traditional Chinese Medicine,BATMAN-TCM)、人类基因的综合数据库(GeneCards)、在线人类孟德尔遗传数据库(Online Mendelian Inheritance in Man,OMIM)等数据库分别对心律康宁方和BA进行分析靶点预测,并将二者获得的靶点基因取交集,获取心律康宁方治疗缓慢性心律失常(Bradyarrhythmia,BA)的靶点基因,通过蛋白互作分析,获取核心靶点基因,通过基因本体论(The Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析,获取关键基因和靶点通路;制备含有不同浓度的心律康宁含药血清,利用Langendorff灌流系统急性分离单个大鼠的心肌细胞,加入含药血清,初步验证预测结果。结果:药物靶点1591个,疾病靶点1886个,交集靶点467个,KEGG通路主要通过钙信号通路、心肌中环磷酸腺苷(Cyclic Adenosine Monophosphate,cAMP)信号通路、丝裂原活化的蛋白激酶(Mitogen-activated Protein Kinase,MAPK)、神经活性配体-受体相互作用传导,GO主要涉及分子功能、细胞成分、生物过程三方面。动物实验验证表明,与正常血清对照组相比,心律康宁低、中、高剂量含药血清对静息细胞胞浆Ca^(2+)平均荧光强度有显著的增强作用(P<0.05),前后差值两两比较(P<0.05),有剂量依赖性。结论:网络药理学预测结果较为可靠,心律康宁能促进心肌细胞自发的外钙内流,具有治疗BA的潜在作用。

摘要： 目的:探讨壮药扶正方含药血清对肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)与肺癌A549细胞共培养体系肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭等生物学行为影响及可能的作用机制。方法:采用氟波酯(PMA)联合白细胞介素-4、白细胞介素-13诱导人急性白血病单核细胞株(THP-1)建立TAMs体外模型,实时定量PCR及酶联免疫吸附试验法分析含药血清(低、中、高剂量组)及药物处理后24、48、72 h对TAMs表型调节;采用共培养体系,以肺癌A549细胞为研究对象,分别采用MTT法、实时细胞分析技术(RTCA)、Transwell法检测不同条件下A549细胞增殖、迁移及侵袭情况。结果:壮药扶正方含药血清能显著上调TMAs中M1型标志物白细胞介素-12、诱导型一氧化氮合酶表达水平,下调M2型标志物白细胞介素-10、CD206表达水平;与空白对照组比较,共培养组A549细胞增殖明显增加,细胞迁移及侵袭能力均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与共培养组比较,壮药扶正方含药血清低、中、高剂量组A549细胞增殖、迁移和侵袭作用受抑制,且呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:壮药扶正方含药血清在共培养体系中能够抑制肺癌A549细胞的增殖、迁移及侵袭作用,机制可能与其调节肿瘤微环境TAMs表型有关。

摘要： 目的:研究调肾祛斑颗粒(TSQBG)含药人血清对长波紫外线(UVA)辐照后人皮人皮黑素细胞(MC)增殖的影响. 方法:含药黄褐斑血清分8组:空白组、无药组、低浓度TSQBG组、中浓度TSQBG组、高浓度TSQBG组、低浓度沙棘冲剂(SJG)组、中浓度SJG组、高浓度SJG组.采用细胞学和血清药理学方法,观察TSQBG含药人血清对长波紫外线(UVA)照射后的体外原代培养的人皮黑素细胞(MC)的细胞增殖的影响. 结果:0.2J/cm2剂量UVA照射的增殖效果优于各剂量组(P＜0.01).各浓度TSQBG组间比较,中、高浓度TSQBG组含药血清对MC增殖的抑制作用均较低浓度组强(P＜0.01),高浓度TSQBG组含药血清对MC增殖的抑制作用又较中浓度组强(P＜0.01).各浓度SJG组间比较,中、高浓度SJG组含药血清对MC增殖的抑制作用均较低浓度组强(P＜0.01),高浓度SJG组含药血清对MC增殖的抑制作用又较中浓度组强(P＜0.01);表明不同浓度TSQBG含药人血清对UVA诱导的人皮MC的增殖均有抑制作用,且浓度越高抑制作用越强,并随作用时间的延长细胞增殖率不断降低,呈现量效和时效关系. 结论：调肾祛斑颗粒能下调UVA诱导的人皮MC的细胞增殖率的上调,这可能是调肾祛斑颗粒治疗黄褐斑的重要作用机理之一.

摘要： 目的：观察益肾胶囊含药血清对高糖环境下小鼠肾小球足细胞自噬的影响. 方法：制备不同浓度益肾胶囊含药血清,对体外培养的小鼠肾小球足细胞进行分组干预,细胞分为：正常组(NG)、高糖组(HG)、低浓度益肾胶囊含药血清组(LY)、中浓度益肾胶囊含药血清组(MY)、高浓度益肾胶囊含药血清组(HY)、贝那普利含药血清组(BP).Western Blot检测自噬相关LC3蛋白及泛素结合蛋白p62(p62/SQSTMl)蛋白的表达变化.透射电镜下观察各组足细胞内自噬体的变化. 结果：与NG组相比，HG组足细胞自噬相关蛋白LC3II表达减少，泛素结合蛋白p62(p62/SQSTMl)表达增多(p<0.05);与HG组相比，HY组足细胞自噬相关蛋白LC3II表达增多，泛素结合蛋白p62(p62/SQSTMl)表达减少(p<0.05)。透射电镜提示，与HG组相比，HY组足细胞自噬体增多(p<0.05). 结论：高糖可导致足细胞自噬障碍，而益肾胶囊可通过改善其自噬障碍，进而发挥足细胞保护的作用。

摘要： 目的:观察降压宝蓝片含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导的成纤维细胞增殖及转化的影响. 方法:原代培养大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞,分为空白对照组、模型对照组、降压宝蓝片含药血清低、中、高浓度组(体积分数为5％、10％、15％).用噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖活性,羟脯氨酸法检测胶原含量,酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测转化生长因子β1(transforming growthfactor-β1,TGF-β1)含量,免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth muscle actin,α-SMA)表达情况. 结果:与模型组相比,降压宝蓝片含药血清高浓度组细胞增殖、胶原、TGF-β1分泌、α-SMA表达显著降低(P＜0.05或P＜0.01),中浓度组细胞增殖、TGF-β含量显著降低(P＜0.05). 结论:降压宝蓝片含药血清可抑制成纤维细胞增殖和表型转化.

摘要： 目的：制备桂枝甘草汤及各组分含药血清,观察桂枝甘草汤及不同组分含药血清对单个豚鼠心室肌细胞钠离子通道电流及其动力学参数的影响. 方法：急性分离豚鼠心室肌细胞,细胞复钙后随机分为空白组、甘草组、桂枝组、甘草加桂枝组和桂枝甘草汤组,各组分别加入各含药血清,实验分为10％和15％两个浓度组,加药完成后细胞放于37°C,5％CO2的孵育箱中孵育24h后进行膜片钳实验. 结果：各组与空白组比较均不同程度抑制Na+电流(n=8,P＜0.05),15％浓度炙甘草组、桂枝组和桂枝甘草汤组与空白组比较使INa激活时间延长(n=8,P＜0.05). 结论：桂枝甘草汤及各组分含药血清对Na+通道有不同程度的抑制作用,与Ⅰ类抗心律失常药物作用机制相同,这可能是桂枝甘草汤抗心律失常的作用机理.

摘要： 目的:探索葛根芩连汤含药血清调节胰岛素抵抗(IR)的HepG2(IR-HepG2)细胞糖耗量的代谢机制. 方法:将正常的HepG2细胞作为空白对照组,IR-HepG2细胞分为模型组,非诺贝特组,葛根芩连汤低、中、高剂量组,以葡萄糖消耗量为药效指标,采用色谱-质谱联用技术,对IR-HepG2细胞及给药后的IR-HepG2细胞内代谢产物进行分析,经过Mass Profiler Professional(MPP)软件对数据进行分析,得出生物标志物,通过验证之后,比较其剂量依赖关系. 结果:筛选出了7个生物标记物,未鉴定出化合物名称的有3个,其余4个化合物中有3个是存在剂量依赖性. 结论:葛根芩连汤含药血清可能通过调节IR-HepG2细胞色氨酸,泛酸和腺嘌呤的量达到降低糖耗量的作用.

摘要： 目的：观察加味独活寄生合剂含药血清对兔退变软骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响. 方法：①将体外培养的兔关节软骨细胞按随机数表分为6组：空白对照组,模型组,加味独活寄生合剂含药血清低、中、高剂量组及Wnt信号通路阻断剂组,后五组予白介素-1β诱导为退变软骨模型,然后予不同剂量的含药血清及sFRP-3干预.②采用流式细胞仪检测细胞生长及周期情况,实时荧光定量PCR检测Wnt/β-catenin mRNA的表达. 结果：①流式细胞仪检测结果显示：与空白对照组比较,模型组及加味独活寄生合剂含药血清低、中、高剂量组细胞生长情况明显减慢.②实时荧光定量PCR检测结果显示：与模型组相比,加味独活寄生合剂含药血清低、中、高剂量组β-catenin mRNA均有降低. 结论：加味独活寄生合剂含药血清对白介素-1β诱导为退变软骨模型有一定的保护作用,其作用机制可能与调控Wnt信号通路有关.

摘要： 目的:观察消癌解毒方含药血清对人肝癌细胞SMMC-7721细胞中蛋白表达变化的影响.rn 方法:选择人肝癌SMMC-7721细胞作为实验对象,消癌解毒方含药血清作用人肝癌SMMC-7721细胞24h后,采用TMT肽段标记,质谱鉴定分析,运用IPA软件对结果进行生物信息学分析,观察用药前后各组蛋白质表达的差异,应用Western blot法检测Cytochrome C、Caspase-3、Cleaved-Caspase-3蛋白的表达.rn 结果:共鉴定出3 025个蛋白点,消癌解毒方各剂量组与模型组相比差异表达明显的蛋白423个,其中消癌解毒方高剂量组负调控蛋白55个,正调控蛋白85个;消癌解毒方中剂量组负调控蛋白33个,正调控蛋白50个;消癌解毒方低剂量组负调控蛋白36个,正调控蛋白49个;顺铂组负调控蛋白38个,正调控蛋白77个.这些差异表达蛋白涉及脂质代谢、凋亡、氧化应激等方面.信号通路分析涉及Granzyme A Signaling、TR/RXR Activation等通路.Western blot结果显示消癌解毒方处理人肝癌SMMC-7721细胞24h后可引起Cytochrome C蛋白被释放,Cleaved-Caspase-3蛋白表达量上调,Caspase-3蛋白表达量下调.rn 结论:消癌解毒方作用于人肝癌SMMC-7721细胞有多靶点,多中心的调控作用,其中激活线粒体凋亡相关蛋白可能是其抑制肿瘤生长,诱导肿瘤凋亡的途径之一.

摘要： 目的:观察补中益气汤含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)介导的人肺腺癌A549细胞上皮间质转化过程中波形蛋白(Vimentin)及谷胱甘肽-S-转移酶π(GST-π)表达的影响.rn 方法:制备不同浓度的补中益气汤含药血清作用于TGF-β1诱导的A549细胞,实验分组为空白血清组,空白血清+TGF-β1组以及高、中、低剂量补中益气汤含药血清+TGF-β1组.采用免疫组化、Western blot和Real-time PCR法分别检测Vimentin及GST-π的蛋白和mRNA变化.rn 结果:高、中、低剂量的补中益气汤含药血清均能使TGF-β1诱导的上皮间质化的A549细胞中Vimentin和GST-π蛋白表达下降,mRNA表达水平降低,其中高、中剂量组与空白血清组比,差异亦有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).rn 结论:补中益气汤含药血清能抑制TGF-β1介导的A549细胞上皮间质化中Vimentin及GST-霄的表达,改善其耐药性.

摘要： 目的：观察蓬子菜含药血清对H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤模型细胞增殖与凋亡的影响,从分子生物学水平阐明蓬子菜保护血管内皮细胞的部分机制.rn 方法：用不同浓度(0,2,5,10％)的蓬子菜含药血清及通塞脉片含药血清与体外培养的经H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞损伤模型共同孵育,以CCK-8法检测细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞内活性氧(ROS)含量.rn 结果：与对照组相比,蓬子菜含药血清能够明显减轻H2O2对的人脐静脉内皮细胞的增殖抑制作用,促进HUVECs的增殖,并与浓度呈正相关;能显著降低细胞内活性氧的含量,减少H2O2诱导的HUVECs凋亡;且优于正常血清组及通塞脉片血清组(P＜0.05).rn 结论：蓬子菜能促进内皮细胞增殖,降低细胞内活性氧的含量,减少细胞凋亡,从而阻止ASO的发生,达到预防和治疗ASO的作用.

摘要： 目的:研究活血定眩胶囊含药血清对抗缺氧致小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3损伤的作用.rn 方法:将30只大鼠随机分为空白对照组1 5只、活血定眩胶囊组15只,采集2组大鼠血清.将bEnd.3细胞分为空白血清正常组、缺氧模型组、阳性对照组、低剂量、中剂量、高剂量活血定眩胶囊血清组,给药后,bEnd.3细胞缺氧6h.显微镜下观察细胞形态,流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期,按试剂盒方法检测细胞上清液超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)的含量.rn 结果:中剂量活血定眩胶囊组可显著对抗缺氧造成的损伤,明显改善bEnd.3细胞的形态,使缺氧所致细胞凋亡数明显减少,有效抑制缺氧诱导的bEnd.3细胞发生G1/S期阻滞,抑制MDA生成,增强SOD活性.rn 结论:活血定眩胶囊对缺氧所致bEnd.3细胞的损伤具有明显的对抗作用,其机制与增强细胞抗氧化能力、抑制细胞凋亡有关.

摘要： 本发明公开了一种用于体外细胞培养的中药含药血清制备及鉴定方法。所述方法详细阐述了如何制备中药动物含药血清和如何鉴定，该方法证实了实验所取动物血清中含有中药成分，解决了动物血清含有中药成分的正确灌胃方法，动物何时取血血清中含有中药成分且药物浓度相对较高，对血清中的药物如何鉴定等一系列问题，为体外细胞培养的中药含药血清的制备及相关中医药实验研究提供可靠资料。

摘要： 本发明通过制备葛花解酲方含药血清，观察不同浓度的含药血清对HepG2肝癌细胞侵袭、转移及上皮间质转化的影响以及观察不同浓度的含药血清对HepG2肝癌细胞增殖和凋亡的影响，证实了葛花解酲方含药血清能够抑制HepG2肝癌细胞的增殖并促进其凋亡等作用，为该方的临床抗肝癌转移应用提供理论和数据支撑。

摘要： 本发明涉及一种南蛇藤提取物含药血清对HBV和MIF作用的研究方法。该南蛇藤提取物含药血清对HBV和MIF作用的研究方法按顺序包括：南蛇藤提取物含药血清的制备过程，人骨髓间充质干细胞分离、培养、纯化过程，乙肝病毒体外自然感染人骨髓间充质干细胞的过程，南蛇藤提取物含药血清处理感染了HBV的人骨髓间充质干细胞的过程，结果检测过程，统计学分析过程。本发明明确南蛇藤素对人类乙型肝炎的药用价值，为突破乙型肝炎奠定基础。明确给药后人BMSCs中HBsAg、HBeAg、HBcAg、MIF的量的变化趋势、HBVcccDNA的表达水平及MIF基因表达情况，为下一步探究南蛇藤素的作用机制提供数据支持。

摘要： 本申请涉及一种采用Thermo UPLC‑ITQ‑Orbitrap高分辨质谱分析姜黄含药血清的方法。本申请采用Thermo UPLC‑ITQ‑Orbitrap高分辨质谱分析手了姜黄含药血清中的化学成分为下一步研究药代动力学打下基础。

摘要： 本申请涉及一种采用Thermo UPLC‑ITQ‑Orbitrap高分辨质谱分析郁金水煎液含药血清的方法。本申请采用Thermo UPLC‑ITQ‑Orbitrap高分辨质谱分析手了郁金含药血清中的化学成分为下一步研究药代动力学打下基础。

摘要： 本发明公开一种由川芎嗪制备的含药血清及其制备方法和应用，该川芎嗪制备的含药血清为将川芎嗪对大鼠进行灌胃后，采血得到。本发明制备的含药血清可有效抑制MG‑63骨肉瘤细胞的增殖、促进其凋亡、抑制其转移，其效果明显优于川芎嗪以及现有治疗骨肉瘤的药物；具有抑制骨肉瘤的良好效果，该川芎嗪制备的含药血清制备的药物在治疗骨肉瘤时也具有显著的效果；同时本发明的制备方法安全可控，并且便于操作、保管、贮存和运输。

摘要： 本发明公开一种由川芎醇提物制备的含药血清及其制备方法和应用，该川芎醇提物制备的含药血清为将川芎醇提物对大鼠进行灌胃后，采血得到。本发明制备的含药血清可有效抑制MG‑63骨肉瘤细胞的增殖、促进其凋亡、抑制其转移，其效果明显优于川芎提取物以及现有治疗骨肉瘤的药物；具有抑制骨肉瘤的良好效果，该川芎醇提物制备的含药血清制备的药物在治疗骨肉瘤时也具有显著的效果；同时本发明的制备方法安全可控，并且便于操作、保管、贮存和运输。

摘要： 本发明公开一种由四神丸制备的含药血清及其制备方法和应用，该四神丸制备的含药血清为将四神丸对大鼠进行灌胃后，采血得到。本发明制备的含药血清可有效抑制LS174T结肠癌细胞的增殖、促进其凋亡、抑制其转移，其效果明显优于四神丸以及现有治疗结肠癌的药物；具有抑制结肠癌的良好效果，该四神丸制备的含药血清制备的药物在治疗结肠癌时也具有显著的效果；同时本发明的制备方法安全可控，并且便于操作、保管、贮存和运输。

摘要： 本发明公开一种由脏毒清制备的含药血清及其制备方法和应用，该脏毒清制备的含药血清为将脏毒清对大鼠进行灌胃后，采血得到。本发明制备的含药血清可有效抑制LS174T结肠癌细胞的增殖、促进其凋亡、抑制其转移，其效果明显优于脏毒清以及现有治疗结肠癌的药物；具有抑制结肠癌的良好效果，该脏毒清制备的含药血清制备的药物在治疗结肠癌时也具有显著的效果；同时本发明的制备方法安全可控，并且便于操作、保管、贮存和运输。

摘要： 本发明公开了固本抑瘤II号含药血清诱导肿瘤细胞自噬的用途。所述的固本抑瘤II号含药血清可用作自噬诱导物，应用于抗肿瘤药物的研发，开拓了固本抑瘤II号的新用途，为制备通过调控自噬抗肿瘤的药物提供了新选择。