线粒体基因

摘要： 旨在利用分子遗传学方法检测东帕米尔高原地区极端环境对当地藏兔群体的遗传多样性、遗传结构及遗传分化的影响,为帕米尔高原物种多样性和遗传多样性的保护提供研究资料。本研究通过PCR扩增及测序技术测定东帕米尔高原地区藏兔的线粒体CO1与ND4基因序列,使用相关生物信息学软件进行数据分析。结果表明,东帕米尔高原地区4个采样点37例藏兔样本的线粒体基因串联序列共检测到17种单倍型,总核苷酸多样性为(0.012±0.006),单倍型多样性为(0.935±0.021),均低于世界其他兔属物种如塔里木兔、欧兔,且海拔相对较高的藏兔群体的遗传多样性低于海拔相对较低的藏兔群体。ML树及中介网络图将全部藏兔分成3个枝Clade A-C,A枝中的样本包含了全部采样地的混合单倍型,B枝仅包含红其拉甫口岸的样本,C枝的样本在世界兔属物种系统发育树中与塔里木兔聚在一起。遗传分化方面,采样点中海拔最高的红其拉甫口岸地区的藏兔种群与其他地理种群间的分化程度最大,乌恰县与阿克陶县两个地理种群间分化程度最小且基因流最大。结合前人的研究成果,本研究结果显示,生活在东帕米尔高原地区的藏兔遗传多样性较低,且未呈现出较强的系统地理分布格局;红其拉甫口岸的藏兔受高原极端环境影响,在线粒体基因水平上与其他藏兔存在一定程度的分化,可能形成了不同的生态型;并且在部分藏兔样本中发现了与塔里木兔线粒体基因渗透现象。

摘要： 研究旨在分析兰州大尾羊、小尾羊、滩羊和藏羊的系统发育关系,并与国内外其他绵羊品种进行比较。试验分别对甘肃地区兰州大尾羊、小尾羊、滩羊和藏羊等4种绵羊品种进行线粒体基因COX1与Cytb基因序列的扩增和产物的测序,并基于COX1与Cytb基因与国内外其他绵羊品种构建发育树,分析种群遗传现状和系统发育关系。结果显示,4种绵羊品种与国内外其他物种间存在基因流,且在Cytb基因中藏羊T10与外群盘羊亲缘关系较近。研究表明,对甘肃地区4种绵羊的种质资源保护需要避免与其他物种间的基因流。

摘要： 研究旨在探究安徽中华绒螯蟹种质资源状况以及资源混杂程度,以期为中华绒螯蟹资源的科学保护、合理利用以及相关产业政策的制定提供理论依据。采集了中华绒螯蟹4个养殖群体和长江野生群体共170尾样本,基于线粒体分子标记,进行种群遗传学分析。结果表明,长江野生中华绒螯蟹遗传多样性低,盲目捕捞可能造成野生资源衰退。野生群体与养殖群体间未出现显著遗传分化,存在严重的种质混杂。研究探明了长江中华绒螯蟹的资源现状,为其科学的保护提供理论依据。

摘要： 高原林蛙Rana kukunoris是中国特有的两栖动物,分布于青藏高原海拔2 000~4 400 m的湿润环境。为探究青藏高原的高原林蛙遗传多样性,将4个线粒体基因(COⅠ、cyt b、12S rRNA和16S rRNA)序列合并成联合数据集,对采自青海省4个海拔梯度(2 000 m、2 600 m、3 200 m和3 800 m)的100只高原林蛙个体进行测序分析。结果表明,2 000 m和2 600 m的高原林蛙群体的多态位点、单倍型多样性、核苷酸多样性和平均核苷酸差异数高于3 200 m和3 800 m群体;4个群体均出现了高单倍型多样性、低核苷酸多样性的结果。高原林蛙遗传分化主要发生在群体间,中性检验和错配分析表明,高原林蛙群体可能没有经历扩张事件。cyt b基因在2 600 m、3 200 m和3 800 m群体都检测到了正选择位点。综上所述,2 000 m和2 600 m的高原林蛙群体遗传多样性高于3 200 m和3 800 m群体,4个海拔群体的遗传分化程度较高;cyt b基因可能对高原林蛙适应高海拔环境起到了积极作用。本研究可为理解高原林蛙适应高原环境及其保护提供参考。

摘要： DNA分子鉴定技术是一种新兴的基于基因层面的中药材鉴别方式,具有特异性强、准确率高等优势。植物类中药材中常选用的DNA条形码片段为内转录间隔区(ITS)、RNA转录体II型内含子剪切酶基因(matK)、叶绿体psbA-trnH基因、叶绿体核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶大亚基(rbcL)等。动物类药材中常选用的DNA条形码片段为线粒体细胞色素C氧化酶亚基I(COI)、核糖体RNA(rRNA)、线粒体细胞色素b基因(Cytb)等。本文重点探讨DNA条形码等分子鉴定技术在动、植物类中药材鉴定中的应用,并分析其存在的局限性及应用前景,为中药材鉴定及质量控制提供新的参考。

摘要： 峨眉黑鸡(Gallus gallus)为原鸡属红原鸡种的一个地方亚种,肉蛋兼用型品种,不仅具有丰富的营养价值,还兼有药用价值和观赏价值,是四川峨眉山地区养殖数量较多的特有的黑鸡优秀品种。为了给峨眉黑鸡种质资源的科学保存和可持续性利用提供一定的理论依据,采集峨眉山地区三个地点的峨眉黑鸡各7只,以线粒体基因Cytb和COI作为分子标记,分析种群的遗传多样性特征与种群遗传结构。结果表明,不同采样点的峨眉黑鸡遗传多样性存在差异,峨眉山市鸿飞养鸡场的种群具有较高的单倍型多样性(Hd=0.905),峨眉山市远大林下放养鸡场的种群序列核苷酸平均配对差异最高(K=5.04762)。通过分析认为,峨眉黑鸡的遗传多样性并不丰富,建议加强对峨眉黑鸡种质资源的保护,保持这一品种的特征性不丢失。

摘要： 荻草谷网蚜Sitobion miscanthi(Takahashi)(在中国长时间学名误用为麦长管蚜Sitobion avenae Fabricius)是我国小麦的主要害虫,为小麦蚜虫优势种。该蚜虫因繁殖速度快、发育历期短、适应能力强且能随着气流远距离迁飞等特性,对小麦安全生产构成严重威胁。目前关于蚜虫种群遗传结构的研究主要基于线粒体基因开展。然而,初级共生菌布赫纳氏菌Buchnera aphidicola几乎存在于所有蚜虫中,其在研究蚜虫种群遗传结构多样性方面的潜在作用报道很少。本研究基于前期收集的荻草谷网蚜6个不同地理种群(苏州、武汉、昆明、廊坊、泰安、银川),对其线粒体COⅠ基因与初级共生菌B.aphidicola的两个单拷贝基因gnd与trpA进行PCR扩增、测序和群体遗传结构分析。根据对3个遗传标记基因聚类分析,荻草谷网蚜6个不同地理种群分为3组,分别为银川种群、苏州种群和其他种群(COⅠ:F_(CT)=0.3642,P<0.05;gnd:F_(CT)=0.4033,P<0.05;trpA:F_(CT)=0.2229,P<0.05),3组间存在显著的遗传差异。银川种群和泰安种群间有相同的稀有单倍型H8(trpA),苏州种群和武汉种群也有相同的稀有单倍型H2与H23(COⅠ),3组之间仍存在基因交流。因此我们推测在4、5月份东南季风盛行的情况下,银川种群迁入了外来虫源。蚜虫线粒体基因和初级共生菌基因的遗传结构分析结果基本一致,表明共生菌基因在研究蚜虫种群遗传结构和多样性具有潜在应用意义。综上所述,基于线粒体和共生菌基因序列的荻草谷网蚜不同地理种群的遗传结构解析可为蚜虫的迁飞提供分子证据。

摘要： 地长蝽科隶属于半翅目异翅亚目蝽次目长蝽总科,该科包括15个族,缢胸族是其中包含属最多的族,而目前该族物种尚无线粒体基因组报道.该族中的隆胸长蝽属昆虫是一个仅在东洋界分布的类群,其中大头隆胸长蝽Eucosmetus incisus(Walker,1872)在中国水稻种植地区广泛发生,是重要的水稻害虫.因此,对大头隆胸长蝽开展线粒体基因组研究具有重要意义.本研究测定了大头隆胸长蝽线粒体基因组编码区域的全部基因序列,并分析了其主要特征,结果如下:(1)共测得大头隆胸长蝽线粒体基因序列长度为14 562 bp,由一部分控制区和典型的37个基因组成,包括22个转运RNA基因,13个蛋白编码基因和2个核糖体RNA基因.其线粒体基因排列顺序同果蝇Drosophila yakuba和大多数蝽次目昆虫排列顺序相同.(2)除tRNA-His缺少TΨC环、不能正常折叠外,其它21个tRNA均能折叠成经典三叶草结构.16SrRNA的结构域IV和V比结构域Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ更保守,12S rRNA的结构域Ⅲ比结构域Ⅰ和Ⅱ更保守.在蝽次目昆虫中,存在两个较稳定的重叠区域,分别位于ATP8和ATP6,ND4和ND4L之间,并且这两段基因重叠区互为反向互补序列(ATGATAA).(3)核苷酸组成和密码子的使用都表现出了很高的AT偏向性,在13个蛋白编码基因和2个核糖体RNA中,由N链编码的基因都是TA偏移和GC偏移,而除C0I之外所有由J链编码的基因都刚好相反,都是AT偏移和CG偏移,COI为TA偏移和CG偏移.使用最频繁的密码子均由AT组成,且多数不与tRNA反密码子严格配对.本文为对缢胸族昆虫线粒体基因组序列的首次报道,为将来开展缢胸族昆虫相关的分子系统发育研究初步提供了基础数据.除对大头隆胸长蝽本身的分析外,我们还联合了蝽次目毛点类中其它物种的同源序列,针对红蝽总科、缘蝽总科和长蝽总科间的系统发育关系进行了研究,结果表明了长蝽总科的单系性,与其亲缘关系最近的是缘蝽总科.

摘要： 中药材鉴定是控制中药质量、确保用药安全与效果的首要环节.DNA分子鉴定是从基因层面上进行中药材鉴别的手段,准确率高.DNA分子鉴定包括电泳技术、免疫技术、随机扩增多态性DNA(RAPD)、限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)、扩增片段长度多态性(AFLP)、简单重复序列(ISSR)及DNA条形码等,以DNA条形码应用最为广泛.DNA条形码是基因组中相对较短的、可用于物种鉴定的特异性基因片段.植物类中药材的条形码多选用核基因和叶绿体基因DNA片段,如叶绿体psbA-trnH基因、内转录间隔区(ITS)、叶绿体核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶大亚基(rbcL)和RNA转录体Ⅱ型内含子剪切酶基因(matK)等;动物类中药材的条形码多来自核基因和线粒体基因DNA,主要有线粒体细胞色素C氧化酶亚基1(COⅠ)、核糖体RNA(rRNA)和线粒体细胞色素b基因(CytB)等.综述动植物类中药材DNA分子标记与鉴定技术应用进展,并探讨DNA条形码在药用动植物类中药材鉴定中存在的局限性及发展前景,为中药质量控制提供参考.

摘要： 目的 探讨NADH脱氢酶1(ND 1)基因m.3688 G>A变异导致线粒体脑肌病Leigh病的临床特征.方法 回顾分析1例由ND 1基因m.3688 G>A变异导致Leigh病患儿的临床资料.结果 1岁3个月男性患儿,以表情淡漠为首发症状,伴有精神运动发育迟滞.头颅MRI示双侧基底节、丘脑、大脑脚以及大脑皮质区多发异常信号影,病灶大致呈对称分布.基因检测在ND 1上发现一个意义未明的线粒体碱基变异m.3688 G>A.结合临床特征及文献复习,患儿确诊为新发基因变异的Leigh病.文献复习显示,mtDNA变异数量是决定临床表型的关键因素.结论 线粒体基因检测技术是诊断线粒体疾病的重要手段.

摘要： 本研究通过mt8794多态位点基因型与有氧运动能力表型指标的关联性分析，以及质粒构建、细胞转染、基因表达等方法探讨该多态位点的分子调控机理。结果表明，mt8794多态位点的不同基因型与优秀女长跑运动员有氧运动能力表型之间无显著关联性，说明该多态位点不能完全决定有氧运动能力，有氧运动能力相关蛋白是受核基因和线粒体基因共同编码和调控。此外，环境、训练、心理等因素共同作用确定有氧运动能力。mt8794多态位点在转录水平有差异，但对蛋白表达没有显著差异，推测可能通过编码蛋白的结构影响有氧运动能力，还需要进一步研究。

摘要： 目的：研究线粒体基因8794和12338位点变异与优秀运动员的有氧耐力表型的关联，以及是否会对其编码的蛋白含量产生影响。方法：(1)中国北方汉族优秀女长跑运动员79名，提取血液DNA进行微测序反应解析mt8794和mt12338位点的基因型；(2)并采用递增负荷跑台方案测试其最大摄氧量(V02max)等耐力指标；(3)中国北方汉族102名，女性，18-22岁，取静脉血3ml,EDTA抗凝，取300μl全血提取DNA对mt8794和mt12338位点进行基因分型，剩余血液用淋巴细胞分离液分离白细胞，提取白细胞的蛋白质。免疫印迹法测定所提蛋白质的NADH还原酶5和ATP酶6含量；(4)有氧运动表型和蛋白检测结果均采用平均值±标准差表示。结果：(1)经基因分型，79名优秀女子长跑运动员中mt8794C占88.61%(70人)，T型占11.39%(9人)，(2)mt8794和mt12338基因型与有氧耐力指标关联分析，(3)普通大学生基因分型结果，mt8794C占91%(93人)，T型占9%(9人)，mt12338的T型占96%(98人)，C型占4%(4人)，与运动员的分型结果基本没有差别。结论:经基因型和表型关联分析，以及位点所处基因编码的蛋白检测结果，mt8794C/T和mt12338T/C都没有显著差异。若要确认线粒体基因这两个位点与运动员基因选材有关，还需加大样本量，并做生物学功能分析表达蛋白的结构。

摘要： 目的：研究我国线粒体呼吸链复合物Ⅰ缺陷病临床、呼吸链酶学和分子遗传学特点.方法：利用分光光度计法测定133例患儿(男79例,女54例)外周血白细胞线粒体呼吸链酶活性.总结患儿临床及生化表现.对62例患儿进行线粒体基因全序列分析,并进行15个核心家系分析.结果：133例呼吸链复合物Ⅰ缺陷患儿中107例患儿表现为神经系统损害,26例主要表现肝病,肾脏损害和心肌病等非神经系统损害.呼吸链酶学分析显示:91例患儿为单纯复合物l缺陷,42例为联合缺陷.线粒体基因分析发现32例患儿(26例单纯缺陷和6例联合缺陷)携带线粒体基因突变.共发现15个线粒体基因的24种突变.其中m.12338T＞C和m.4833A＞G 2种突变发生频率最高,分别是12.9％和11.3％.7例患儿同时携带两种或以上的突变.同时发现4种新突变(ND1基因m.3713T＞C,ND4基因m.12113G＞A in,ATPase6基因m.8609C＞T和tRNA-Glu基因m.14693A＞G).结论：中国线粒体呼吸链复合物Ⅰ缺陷病的临床表型和基因型多样.单纯呼吸链复合物l缺陷是常见的酶缺陷类型.51.6％的呼吸链复合物Ⅰ缺陷病患儿携带线粒体基因突变.m.12338 T＞C和m.4833A＞G突变是我国呼吸链复合物Ⅰ缺陷病的常见突变类型.

摘要： 探讨江苏扬州一例母系家族遗传性高血压家系发病特点,为探讨高血压病的遗传机制与防治对策提供一定的理论依据.通过实地调查得到高血压病遗传家系,抽取家系成员外周静脉血,对序列3777～4679位置的mtDNA进行直接基因测序,然后进行线粒体基因分析.

摘要： 线粒体转录终止因子(mitochondrial transcription termination factor,MTERF)蛋白家族是一类高度保守的线粒体DNA结合蛋白,广泛存在于后生动物与植物中,该家族共有4个成员,分别是线粒体转录终止因子1-4(MTERF1-F4),已有研究表明,MTERF1-F3蛋白的功能都与线粒体基因组的复制和转录调控有关;MTERF4蛋白与线粒体核糖体RNA甲基转移酶NSUN4形成复合物,能直接控制线粒体核糖体的生物合成和翻译过程.人线粒体转录终止因子2(human mitochondrial transcription termination factor2,hMTERF2)基因最早是通过比较血清饥饿和血清培养细胞的基因表达谱差异发现,该基因定位于人类基因组12q24.1,编码的蛋白质由385个氨基酸组成,具有亮氨酸拉链结构,是一种典型的DNA结合蛋白.前期的研究显示,hMTERF2对细胞增殖有强烈的抑制作用,但具体的分子机制并不明确.本研究将探讨hMTERF2对人类细胞线粒体基因表达、氧化磷酸化活性及细胞周期增殖的影响,进而探讨hMTERF2的生物学功能.

摘要： 建立阿胶中马和驴成分高特异、高灵敏的实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法.选择马和驴线粒体基因tRNA-Thr及D-loop区为靶序列,设计合成特异引物,通过普通PCR和实时荧光PCR检测,结果表明,这两对引物能够准确检测阿胶或动物胶中马和驴成分.

摘要： 本研究拟探讨mtDNA多态性，与中国北方汉族优秀女子长跑运动员有氧耐力指标的关联性。研究阐明，没有找到mtDNA多态位点与长跑运动员有氧耐力指标的统计学差异，表明运动能力并非这些单个多态位点决定，可能是其它因素共同作用的结果。

摘要： 本研究利用克隆测序和PCR产物直接测序技术对塔河马鹿、天山马鹿、阿尔泰马鹿、东北马鹿和甘肃马鹿30个个体的线粒体DNA基因组全长进行测定，分析全序列并构建系统进化树。

摘要： Wolbachia是一种广泛存在于节肢动物体内的胞内共生菌,研究表明40％的物种感染Wolbachia,同时发现不少寄主感染多株系的Wolbachia,因此推断Wolbachia可能是目前分布最广、丰度最大的胞内共生微生物类群.Wolbachia能够调控昆虫寄主的生殖活动,如诱导胞质不容(cytoplasmic incompatibility)、孤雌生殖(parthenogenesis)、雌性化(feminization)、杀雄作用(male killing)等.此外,Wolbachia在物种形成过程中也起到重要作用.

摘要： Wolbachia是一种广泛存在于节肢动物体内的胞内共生菌,研究表明40％的物种感染Wolbachia,同时发现不少寄主感染多株系的Wolbachia,因此推断Wolbachia可能是目前分布最广、丰度最大的胞内共生微生物类群.Wolbachia能够调控昆虫寄主的生殖活动,如诱导胞质不容(cytoplasmic incompatibility)、孤雌生殖(parthenogenesis)、雌性化(feminization)、杀雄作用(male killing)等.此外,Wolbachia在物种形成过程中也起到重要作用.

摘要： 一种基于HRM法检测人线粒体ND3基因10191位点基因型的试剂盒，包括扩增线粒体ND3基因10191位点的PCR引物；所述PCR引物包括：上游引物F：5′‑AACTCAACGGCTACATAG‑3′；下游引物R：5′‑TTTATGGAGAAAGGGACG‑3′。本发明的HRM技术不会受到碱基的位点或者碱基的类型限制，也不需要合成价格较高的探针，只需要在反应结束后对反应产物进行一步溶解，再用仪器对溶解曲线进行分析，完成基因分型和突变位点的扫描。

摘要： 一种检测人线粒体ATP6基因8993位点基因型的试剂盒，包括用于扩增线粒体ATP6基因8993位点的PCR引物和Taqman‑MGB探针。荧光定量PCR法是分子诊断领域应用最广泛的一种检测手段，该方法灵敏度高、操作简便，适合大规模的临床应用，特别是ABI公司的MGB探针技术在单核苷酸分型方面更是具有广阔的市场。MGB探针上的小沟结合物能够提高探针的Tm值，设计的比普通Taqman探针短，无背景荧光，而且具有能分辨一个碱基差异的能力，非常适合用于SNP分型检测。

摘要： 本申请提供了使用RNAi技术，特别是用siRNA沉默细胞中线粒体基因表达，或清除细胞中线粒体基因表达产物的方法，应用和相应药物。实验结果表明，使用相应siRNA可以有效敲低线粒体中所有基因表达，并且恢复突变线粒体基因带来的功能缺失或损害。

摘要： 本发明公开了线粒体基因组9bp序列基因多态性在评价苯中毒风险中的应用。本发明公开了用于检测线粒体中具有“2个串联重复的9bp序列”还是“2个串联重复的9bp序列的缺失型”的物质在制备评价慢性苯中毒风险性的产品中的应用；“2个串联重复的9bp序列”如序列表的序列1所示；“2个串联重复的9bp序列的缺失型”为所述“2个串联重复的9bp序列”缺失了第1至9个核苷酸。实验证明，线粒体基因组DNA中具有“2个串联重复的9bp序列的缺失型”的个体发生慢性苯中毒的风险高于线粒体基因组DNA中具有“2个串联重复的9bp序列”的个体”。“2个串联重复的9bp序列的缺失型”可用于评价慢性苯中毒的风险性。

摘要： 本发明提供了一种线粒体靶向的基因编辑复合体、制备方法、应用及线粒体基因组编辑方法。所述基因编辑复合体包括：线粒体靶向的阳离子脂质体；和mtCRISPR/Cas9系统：线粒体TERT基因双链同源模板、特异性靶向TERT的crRNA、RNA同源重组修复模板以及Cas9蛋白。本发明通过将基于CRISPR/Cas9的基因编辑技术与线粒体靶向手段结合，提供了线粒体靶向的基因编辑复合体，实现导入正常的线粒体TERT基因功能片段代替错配的基因，通过上调线粒体TERT基因来改善氧化应激水平。

摘要： 本申请提供了使用RNAi技术，特别是用siRNA沉默细胞中线粒体基因表达，或清除细胞中线粒体基因表达产物的方法，应用和相应药物。实验结果表明，使用相应siRNA可以有效敲低线粒体中所有基因表达，并且恢复突变线粒体基因带来的功能缺失或损害。

摘要： 本发明公开一种营养组合物及在制备及在制备线粒体增殖、线粒体基因损伤修复药物中的应用的应用，是由赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、精氨酸、组氨酸、甘氨酸、天冬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、丝氨酸、谷氨酰胺、牛磺酸、乳清酸、核苷酸、维生素A、维生素D、维生素B2、维生素B6、维生素B12、烟酸、叶酸、维生素C、铁、锌、锰、铜、硒、铬、钾、钙、镁、肌醇及大豆磷脂按比例配制而成，具有促进造血干细胞增殖等作用且可对切除修复基因损伤、错配修复基因损伤、同源重组修复基因损伤及错误倾向修复基因损伤等均有恢复作用，可满足基因治疗的需要。

摘要： 本发明公开了一种基于三代全基因组测序数据的植物线粒体基因组多构型组装方法，属于生物信息技术领域。本发明利用NewBler组装软件可保留所有Contigs之间可能连接的特点，以及三代WGS数据中线粒体与叶绿体、细胞核序列的拷贝数差异，且三代测序reads可跨过重复序列的优势，构建一套适合三代全平台(PacBio/Nanopore/HiFi)测序数据的植物线粒体基因组多构型组装流程。该流程在组装线粒体基因组过程中遇到重复序列导致的多分支时能保留所有可能的连接并继续延伸，直至形成闭环，因此能够解析线粒体基因组的所有可能构型，相比现有植物线粒体基因组组装技术具有准确度更高的优点。

摘要： 一种荧光定量检测核基因组拷贝数及人线粒体基因组拷贝数的方法，通过分别选取人核基因组DNA和线粒体基因组中的一个单拷贝基因，设计引物和探针，然后将序列片段转入PMD‑18T载体中，经转化后提取质粒得到其拷贝数并作为参考标准品；在实际检测时，以参考标准品的Cq值制作标准曲线比较得到待测样品中的核基因组DNA的拷贝数和线粒体基因组DNA的拷贝数。本发明为定量分析人不同组织细胞中线粒体基因组拷贝数提供了方法，特异性高，操作简单，只需荧光定量PCR仪就能完成线粒体基因组拷贝数的快速检测。

摘要： 本发明涉及一种用于泡吻棘虫头线粒体基因组中三个基因片段核苷酸的扩增测序方法。操作步骤是：（1）依据《分子克隆实验指南》（Sambrook et al.,1989），提取泡吻棘虫的DNA，得到浓度为200 ng/μl的DNA溶液；（2）cox1上、下游引物分别为cox1F、cox1R；rrnL上、下游引物分别为rrnLF、rrnLR；cytb上、下游引物分别为cytbF、cytbR，用上述6个引物配制PCR反应体系，进行PCR反应，得到用于测序的含目的基因阳性克隆质粒溶液；（3）测序分别得到泡吻棘虫头线粒体基因组中cox1基因片段的核苷酸序列、cytb基因片段的核苷酸序列和rrnL基因片段的核苷酸序列。通过本发明的简并引物、PCR反应，实现在1.5小时内完成泡吻属线粒体基因组cox1、cytb、rrnL三个基因片段扩增反应。