恶性转化

摘要： 成年人中有8%胰腺囊性病变(pancreatic cystic lesions, PCLs)。PCLs是一组无症状、异质性强的良性肿瘤,其中一部分导管内乳头状黏液性肿瘤(intraductal papillary mucinous neoplasm, IPMN)最终会演变为胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma, PDAC)。胰腺癌素有"癌症之王"的称号,确诊后5年生存率约为10%,预后极差。由于没有办法鉴别哪些PCLs可能发展为胰腺癌,保守监测还是手术干预是临床一大难题。因此,寻找此类囊肿发展为癌的分子机制,对于高危PCLs和PDAC的治疗极为重要。

摘要： 1病例患者女,48岁,因“体检发现肾血管瘤”入院,无腹痛腹胀等明显异常,患者入院前半月在外院就诊行腹部CT检查提示:左肾血管平滑肌瘤,故于2020年2月3日入我院行进一步治疗,入院行腹部增强CT检查示:左肾上方见一大小约10.2×14.7 cm的混杂密度团块影,其内见骨骼及脂肪成分,考虑畸胎瘤伴周围脏器受压变形,见图1。

摘要： 背景与目的:前列腺炎症是促进其癌变的一个重要因素,但关键的分子机制不明。Nemo样激酶(Nemo-like kinase,NLK)在前列腺癌组织中的表达水平较良性组织显著降低,并且在前列腺癌细胞中沉默NLK表达可增强核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的转录活性。本研究旨在探讨NLK调控前列腺炎-癌转化的作用及其机制,为应用抗炎新策略预防前列腺癌提供新的分子靶点和理论依据。方法:采用人前列腺上皮细胞RWPE-1与人急性单核细胞白血病细胞THP-1共培养的方法建立前列腺炎-癌转化细胞模型(RWPE-1/THP-1)。采用MTT实验及软琼脂集落形成实验检测NLK基因沉默或过表达对模型细胞增殖及恶性转化能力的影响。采用双荧光素酶报告基因实验检测NLK基因沉默或过表达对模型细胞NF-κB转录活性的影响。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测NLK基因沉默或过表达对模型细胞中核受体相关因子1(nuclear receptor-related factor 1,Nurr1)和鼠双微体基因2(murine double minute 2,MDM2)的mRNA表达和蛋白水平的影响。采用Western blot检测NLK基因沉默或过表达对模型细胞P53蛋白表达水平的影响。采用免疫荧光和免疫共沉淀技术分别检测Nurr1蛋白和P53蛋白在RWPE-1细胞中的定位分布及相互作用情况。结果:与RWPE-1/THP-1组相比,RWPE-1(NLK↑)/THP-1组的细胞增殖及转化能力显著降低,NF-κB转录活性显著减弱,Nurr1和MDM2的mRNA表达和蛋白水平显著下调,P53蛋白表达水平显著上升(P<0.05);与之相反,RWPE-1(NLK↓)/THP-1组的细胞增殖及转化能力显著升高,NF-κB转录活性显著增强,Nurr1和MDM2的mRNA表达和蛋白水平显著上调,P53蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。此外,Nurr1蛋白与P53蛋白在RWPE-1细胞的细胞核中存在共定位及相互作用。结论:NLK抑制前列腺炎-癌转化可能依赖于其对NF-κB/P53平衡的维护。

摘要： 微小RNA是一种内源性、高度保守的非编码RNA,参与机体多种生物活动,并且和多种癌症的发生和发展密切相关。近期的研究发现微小RNA具有作为口腔白斑病癌变风险预测的分子标记物和治疗靶点的潜力。本文就微小RNA在口腔白斑病临床应用的研究进展做一综述。

摘要： 朗格汉斯细胞组织细胞增多症(Langerhans cell histiocytosis,LCH)不是源自于Langerhans细胞(即皮肤和黏膜的正常树突状细胞)的恶性转化,而是一种前体细胞克隆性增殖性疾病.该病可发生于任何年龄,以儿童多见,儿童LCH最常累及骨组织[1]、皮肤、肺脏、口腔与中枢神经系统.本文对我院收治的1例以左肩胛骨损害起病的儿童LCH的诊疗经过进行回顾,以助于进一步认识骨LCH.

摘要： 目的探讨锚蛋白重复序列6(Diversin)对胃癌细胞恶性转化和侵袭转移等生物学行为的调控作用。方法通过转染Diversin过表达质粒Diversin-GV326和Diversin shRNA-GV248分别上调和下调胃癌细胞HGC27和MNK45细胞系中Diversin的表达水平。利用软琼脂克隆形成试验、Transwell和划痕试验分别检测Diversin对胃癌细胞的恶性转化、侵袭能力和迁移能力的调控作用。结果免疫印迹结果显示,HGC27上调组和MNK45上调组细胞中Diversin表达水平分别显著高于HGC27上调对照组和MNK45上调对照组(P<0.05),而HGC27下调组和MNK45下调组中Diversin表达水平分别显著低于HGC27下调对照组和MNK45下调对照组(P<0.05);克隆形成试验表明,HGC27上调组和MNK45上调组形成的克隆数分别显著高于HGC27上调对照组和MNK45上调对照组(P<0.05),而HGC27下调组和MNK45下调组形成的克隆数分别显著低于HGC27下调对照组和MNK45下调对照组(P<0.05);Transwell结果显示,HGC27上调组和MNK45上调组成功到达Transwell小室下室的细胞数分别显著高于HGC27上调对照组和MNK45上调对照组(P<0.05),而HGC27下调对照组和MNK45下调对照组成功到达Transwell小室下室的细胞数分别显著低于HGC27下调组和MNK45下调组(P<0.05);划痕试验显示,HGC27上调组和MNK45上调组划痕区域中的细胞数分别显著高于HGC27上调对照组和MNK45上调对照组(P<0.05),而HGC27下调组和MNK45下调组划痕区域中的细胞数分别显著低于HGC27下调对照组和MNK45下调对照组(P<0.05)。结论Diversin上调胃癌细胞的分化、侵袭和迁移能力。Diversin可能是调控胃癌细胞恶性转化、侵袭转移功能的关键分子。

摘要： 目的:探索丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)基因组3,非编码区(3'Untranslated Region,3'UTR)对肝细胞的恶性转化作用,在此基础上初步筛查"三棱-莪术"配伍单体成分对肝细胞恶性转化的影响.方法:(1)将HCV 3'UTR的cDNA克隆到pcDNA3.1(+)质粒中,构建表达HCV3'UTR的真核表达载体pcDNA-3'UTR;用pcDNA-3'UTR质粒转染L02细胞,构建稳定表达HCV 3'UTR的模型对照组L02-3'UTR细胞.(2)通过检测模型对照组的Eya1和Hk2基因的表达、细胞增殖速度、软琼脂克隆形成能力、糖代谢能力,判断模型对照组是否发生恶性转化.(3)以不同浓度(0、1、10、50、100和200 μg/mL)的"三棱-莪术"中药单体分别处理模型对照组L02-3'UTR,计算出药物的干预浓度;采用干预浓度的药物单体处理L02-3'UTR,检测Eya1和Hk2基因的表达、细胞增殖速度、糖代谢能力,判断药物对模型对照组恶性特征的影响.结果:(1)构建了 pcDNA-3'UTR质粒,并筛选出表达HCV 3'UTR的模型对照组L02-3'UTR.(2)与空白对照组L02-NC比较,模型对照组L02-3'UTR细胞在增殖速度、软琼脂克隆形成能力、糖代谢能力及基因Eya1和Hk2表达上均显著升高(P＜0.01).(3)与模型对照组L02-3'UTR相比,三棱-莪术的单体成分(10 μg/mL的姜黄素和50μg/mL的山柰酚)可明显降低模型对照细胞的增殖速度、糖代谢能力及Eya1和Hk2基因的表达(P＜0.05或P＜0.01).结论:正常肝细胞中HCV 3'UTR对应的lncRNA的高表达,使细胞中肝癌相关基因Eya1和Hk2表达增高,细胞过度增殖、接触抑制消失、糖代谢紊乱等典型的恶性转化特征;中药单体姜黄素和山柰酚能有效防止这些恶性特征的发展.该项工作揭示了 HCV 3'UTR导致肝细胞恶性转化的一种全新、清晰的途径,这种早期恶性转化细胞模型可用于大规模筛选中药成分用于阻止细胞恶性进展甚至逆转恶性特征,对三棱-莪术有效成份的筛选则为此类工作提供了范例.

摘要： 目的 探讨钆塞酸二钠增强MRI在慢性肝病合并肝脏结节患者恶性转化风险判断中的应用价值.方法 回顾性分析2018年2月至2020年6月平顶山市第一人民医院收治的94例慢性肝病合并肝脏结节患者的临床资料,所有患者经病理检查证实,并均接受钆塞酸二钠增强MRI扫描.根据病理检查结果将患者分为慢性肝病合并肝脏良性结节组及恶性结节组.比较钆塞酸二钠增强MRI扫描不同时间节点肝脏的对比增强率(CER),探析不同时间节点CER在慢性肝病合并肝脏结节患者恶性转化风险判断中的应用价值.结果 病理检查结果显示,94例慢性肝病合并肝脏结节患者中,50例为良性结节,其中19例脂肪瘤,31例血管瘤;44例为恶性结节,其中34例肝细胞癌,10例胆管细胞癌.慢性肝病合并肝脏恶性结节组在钆塞酸二钠增强MRI扫描延迟5min、10 min、20 min的CER均低于良性结节组(P＜0.05).由受试者工作曲线(ROC)可知,钆塞酸二钠增强MRI扫描延迟5min、10 min、20 min CER预测肝脏结节恶性风险的AUC分别为0.785、0.816、0.851.结论 慢性肝病合并肝脏恶性结节患者的CER较低,使用钆塞酸二钠增强MRI可预测慢性肝病合并肝脏结节患者恶性风险,为临床提供参考.

摘要： 目的观察亚砷酸钠(NaAsO_(2))长期作用于永生化人支气管上皮细胞(HBE细胞)致其恶性转化过程中,核因子-E2相关因子2(Nrf2)对细胞凋亡的调控作用。方法用含0.0和1.0μmol/L NaAsO_(2)的培养基培养HBE细胞,分别为对照组和染砷组。用含1.0μmol/L NaAsO_(2)处理HBE细胞至43代,建立恶性转化模型。检测细胞染砷后不同代数(0、1、8、15、22、29、36、43代)各指标的动态变化,包括用流式细胞仪检测细胞凋亡率,用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白和Nrf2蛋白的表达情况。用Nrf2小干扰RNA(siRNA)转染恶性转化的HBE细胞(T-HBE细胞)来沉默Nrf2,验证Nrf2蛋白的沉默效果,并检测凋亡率和凋亡相关蛋白的表达。结果随着染砷代数增加,HBE细胞凋亡率呈下降趋势(0、1、8、15、22、29、36、43代分别为0.370±0.029、0.443±0.069、0.357±0.046、0.330±0.016、0.273±0.050、0.160±0.024、0.110±0.022、0.097±0.012,F趋势=22.981,P0.05)。分别与0代和同代对照组细胞比较,8代及以后染砷组细胞Nrf2蛋白表达差异均有统计学意义(P均<0.05)。与Con siRNA(对照)转染组T-HBE细胞比较,Nrf2 siRNA转染组T-HBE细胞的凋亡率较高(P<0.05)。与Con siRNA转染组T-HBE细胞比较,Nrf2 siRNA转染组T-HBE细胞的Nrf2、Bcl-2、Mcl-1蛋白表达均较低(P均<0.05),cleaved-caspase-3/caspase-3、caspase-3、cleaved-caspase-3、CHOP、Bax蛋白表达均较高(P均<0.05)。结论Nrf2可能通过Bcl-2、Mcl-1和Bax调控线粒体凋亡途径、通过CHOP调节内质网凋亡途径,抑制HBE细胞的凋亡,参与NaAsO_(2)致HBE细胞恶性转化的过程。

摘要： 目的 观察亚砷酸钠(NaAsO2)长期作用于永生化人支气管上皮细胞(HBE细胞)致其恶性转化过程中,核因子-E2相关因子2(Nrf2)对细胞凋亡的调控作用.方法 用含0.0和1.0 μmol/LNaAsO2的培养基培养HBE细胞,分别为对照组和染砷组.用含1.0 μmol/LNaAsO2处理HBE细胞至43代,建立恶性转化模型.检测细胞染砷后不同代数(0、1、8、15、22、29、36、43代)各指标的动态变化,包括用流式细胞仪检测细胞凋亡率,用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白和Nrf2蛋白的表达情况.用Nrf2小干扰RNA(siRNA)转染恶性转化的HBE细胞(T-HBE细胞)来沉默Nrf2,验证Nrf2蛋白的沉默效果,并检测凋亡率和凋亡相关蛋白的表达.结果 随着染砷代数增加,HBE细胞凋亡率呈下降趋势(0、1、8、15、22、29、36、43代分别为0.370±0.029、0.443±0.069、0.357±0.046、0.330±0.016、0.273±0.050、0.160±0.024、0.110±0.022、0.097±0.012,F趋势=22.981,P＜0.05),与0代细胞比较,第22、29、36、43代细胞的凋亡率均较低,差异均有统计学意义(P均＜0.05).随着染砷代数增加,染砷组细胞促凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3、活化的caspase-3(cleaved-caspase-3)、转录因子C/EBP的同源蛋白(CHOP)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)的表达均呈下降的趋势(F趋势=22.356、3.738、6.130、8.061,P均＜0.05),抗凋亡蛋白髓样细胞白血病-1蛋白(Mcl-1)、Bcl-2蛋白表达呈上升趋势(F趋势=58.201、7.691,P均＜0.05).分别与0代和同代对照组细胞比较,22代及以后染砷组细胞caspase-3、cleaved-caspase-3蛋白表达,15代及以后染砷组细胞CHOP、Mcl-1、Bcl-2蛋白表达,29代及以后染砷组细胞Bax蛋白表达,差异均有统计学意义(P均＜0.05);而各代染砷组细胞caspase-8、cleaved-caspase-8、caspase-12和 cleaved-caspase-12蛋白表达比较,差异均无统计学意义(P 均＞0.05).分别与0代和同代对照组细胞比较,8代及以后染砷组细胞Nrf2蛋白表达差异均有统计学意义(P均＜0.05).与Con siRNA(对照)转染组T-HBE细胞比较,Nrf2 siRNA转染组T-HBE细胞的凋亡率较高(P＜0.05).与ConsiRNA转染组T-HBE细胞比较,Nrf2 siRNA转染组T-HBE细胞的Nrf2、Bcl-2、Mcl-1蛋白表达均较低(P 均＜0.05),cleaved-caspase-3/caspase-3、caspase-3、cleaved-caspase-3、CHOP、Bax 蛋白表达均较高(P 均＜0.05).结论 Nrf2可能通过Bcl-2、Mcl-1和Bax调控线粒体凋亡途径、通过CHOP调节内质网凋亡途径,抑制HBE细胞的凋亡,参与NaAsO2致HBE细胞恶性转化的过程.

摘要： 目的：探讨LINC00052在甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)诱导人支气管上皮细胞(16HBE)恶性转化过程中的表达特征和生物学意义. 方法：收集GMA处理组和DMSO对照组的第10代、第20代和第30代细胞,LncRNA芯片分析LINC00052在不同时期的表达量,并借助生物信息学数据库检索分析,实时荧光定量PCR(qPCR)检测LINC00052和预测靶基因的相对表达量. 结果：芯片结果显示,与对照组相比,LINC00052在转化的前期(P10)、中期(P20)和后期(P30)分别上调1.32倍、下调1.64倍和下调4.92倍.qPCR验证LINC00052的相对表达量与芯片结果一致,NTRK3在P10和P30相对表达量的差异具有统计学意义,P＜0.05. 结论：LINC00052的早期高表达,在转化中期、完成时低表达,并呈下降趋势;NTRK3在GMA诱导16HBE恶性转化的P10和P30的高表达,表明LINC00052可能通过影响靶基因NTRK3的表达发挥作用,其功能和作用方式还有待进一步研究.

摘要： 目的：探讨LncRNA RMST在甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)诱导人支气管上皮细胞(16HBE)恶性转化过程中的表达特征及生物学意义. 方法：收集GMA转化组和DMSO对照组的第10代、第20代和第30代细胞,高通量芯片分析LncRNA RMST在转化的不同时期的表达改变,对其进行生物信息学分析,通过实时荧光定量PCR(qPCR)检测LncRNA RMST和可能相互作用的miRNA的相对表达量. 结果：芯片结果显示,与对照组相比,LncRNA RMST在转化的前期(P10)、中期(P20)和后期(P30)分别上调4.75倍、上调1.90倍和下调2.53倍,且相对表达量呈下降趋势.LncRNA RMST的表达变化趋势的qPCR验证结果与芯片结果一致,而三个时期miR-135a-2相对表达量的差异均不具有统计学意义,P＞0.05. 结论：LncRNA RMST在GMA诱导16HBE恶性转化的早、中期高表达,在转化完成时低表达,并呈下降的趋势;LncRNA RMST可以作为GMA诱导16HBE细胞恶性转化的相关分子标志物,其功能和作用机制有待进一步研究.

摘要： 目的：探讨LncRNA CTBP1-AS1在甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)诱导的16HBE恶性转化细胞中的表达水平及意义. 方法：收获经8μg/mL GMA诱导的第30代16HBE恶性细胞及同代齢DMSO对照组细胞,应用高通量LncRNA芯片比较两组样本表达谱差异,通过差异倍数、邻近编码基因信息分析等策略初步筛选出16HBE恶性转化细胞LncRNA CTBP1-AS1及其最可能的蛋白质编码基因CTBP1,采用实时荧光定量PCR(qPCR)和全基因组表达谱芯片分析LncRNA CTBP1-AS1和CTBP1mRNA的表达量,并与同代龄DMSO对照组细胞比较. 结果：LncRNA芯片结果显示,与同代龄DMSO组相比,GMA诱导的16HBE恶性转化细胞中CTBP1-AS1上调2.20倍,CTBP1mRNA上调1.26倍;qPCR结果显示,与同代龄DMSO组[(26.74±0.23)310-5]相比,GMA诱导的16HBE恶性转化细胞[(91.70±0.70)310-5]中LncRNA CTBP1-AS1表达上调(P＜0.05);全基因组表达谱芯片显示,16HBE恶性转化细胞的CTBP1mRNA表达量(5176.8)比DMSO组(4312.5)明显上调,与LncRNA芯片结果一致. 结论：GMA可以诱导16HBE细胞LncRNA CTBP1-AS1表达上调,LncRNA CTBP1-AS1可作为GMA诱导的16HBE恶性转化细胞中相关特异分子标志.

摘要： 目的：煤焦沥青烟提取物(Coal tar pitch extracts,CTPE)导致的永生化人支气管上皮细胞(Immortalized human bronchial epithelial,BEAS-2B)恶性转化模型基础上,通过RNAi技术干扰lncRNA-ENST00000501520,探究其在细胞恶性转化过程中对细胞周期和细胞凋亡的影响. 方法：ENST00000501520干扰后,使用流式细胞仪测定细胞周期的变化和细胞凋亡情况. 结果：细胞染毒之后,检测ENST00000501520的相对表达量,确定100nM为最佳干扰浓度;结果显示CTPE30组的细胞中处于S期的比例为32.26％,高于siRNA组31.90％,siRNA组S期细胞百分率高于BEAS-2B组(P＜0.001),并且siRNA组G2期细胞百分率明显低于CTPE30组(P＜0.001);流式细胞仪结果显示细胞的凋亡情况：与CTPE30组的细胞比较,siRNA组细胞凋亡率明显增强(P＜0.05). 结论：lncRNA-ENST00000501520能够抑制BEAS-2B细胞的凋亡能力,促进其增殖能力,可以为LncRNA水平探讨恶性转化发生发展机制提供理论支撑.

摘要： 目的:石英和苯并芘已被列为致癌物质.本文旨在研究MAPK和AP-1信号转导通路在调节石英和苯并芘诱导的恶性转化的人胚肺成纤维细胞中cyclin D1和CDK4表达以及细胞周期改变方面的差异. 方法:采用Western blot(WB)法检测石英、苯并芘诱导的恶性转化人胚肺成纤维细胞中丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)各亚家族(ERK、p38和JNK)表达的变化情况;以及cyclinD1和CDK4(cyclin dependent kinase)表达变化情况. 结果:与空白对照组比较,石英诱导人胚肺成纤维细胞恶性转化组P-ERK、P-JNK表达均升高(P＜0.01);CDK4、P-p38表达下降(P＜0.01,P＜0.05).苯并芘诱导人胚肺成纤维细胞恶性转化组与空白对照组比较,P-ERK、P-JNK、CyclinD1表达均升高(P＜0.01,P＜0.01和P＜0.05).苯并芘诱导人胚肺成纤维细胞恶性转化组与石英诱导人胚肺成纤维细胞恶性转化组比较,P-ERK、P-JNK表达下降(P＜0.01);P-p38、CyclinD1、CDK4表达升高(P＜0.05,P＜0.05和P＜0.01).与空白对照组比较,石英诱导人胚肺成纤维细胞恶性转化组P-ERK、P-JNK表达均升高(P＜0.01);P-p38表达下降(P＜0.05).与空白对照组比较,苯并芘诱导人胚肺成纤维细胞恶性转化组P-ERK、P-JNK、CyclinD1表达均升高(P＜0.01,P＜0.01和P＜0.05);p38表达下降(P＜0.05).苯并芘诱导人胚肺成纤维细胞恶性转化组与石英诱导人胚肺成纤维细胞恶性转化组比较,P-ERK、P-JNK表达下降(P＜0.01);P-p38、CDK4、CyclinD1表达升高(P＜0.05). 结论:在石英和苯并芘诱导的恶性转化的人胚肺成纤维细胞中MAPK/AP-1通路存在差异.

摘要： 目的：探讨煤焦沥青烟提取物(Coal Tar Pitch Smoke Extracts,CTPE)诱导BEAS-2B细胞恶性转化过程中TRAF2mRNA表达的调控机制. 方法：构建THP-1细胞和BEAS-2B细胞的共培养模型,用CTPE处理共培养模型,细胞培养至第9代时加入TNF-α中和抗体和JNK激酶抑制剂SP600125,继续培养至第15代,设立共培养模型CC15组、TNF-α中和抗体组、JNK激酶抑制剂SP600125组,同代培养的BEAS-2B细胞为对照组,用Real-TimePCR方法检测各组细胞中TRAF2mRNA的相对表达水平. 结果：TNF-α中和抗体组和SP600125抑制剂组TRAF2mRNA相对表达水平(分别为1.73±0.04、1.88±0.05)均高于对照组(1.07±0.06),低于CC15组(2.23±0.09),差异具有统计学意义(P＜0.05). 结论：CTPE可能通过TNF-α上调了TRAF2mRNA的表达水平,TRAF2和AP-1之间可能存在反馈作用.

摘要： 目的：观察逆萎康对亚硝胺类化合物MNNG诱导的人胃黏膜上皮永生细胞系(GES1)恶性转化的抑制作用. 方法：(1)SRB法检测逆萎康对GES-1细胞的细胞毒.(2)Western Blotting方法观察逆萎康对MNNG诱导的GES-1细胞(MC)中癌变相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、P-STAT3的表达.(3)实时荧光定量PC-R观察MC细胞中Twist,Snail基因的表达. 结果：(1)高于12.5mg/ml浓度的逆萎康药物对GES-1细胞增殖具有一定的抑制作用,而12.5mg/ml以下的药物剂量则没有细胞毒性.(2)不同浓度的逆萎康(0.2、0.4、0.8、1.6mg/ml)对MC细胞中癌变相关蛋白表达结果显示,逆萎康增加了MC细胞中癌变相关蛋白E-cadherin的表达的;降低了癌变相关蛋白N-cadherin和P-STAT3的表达的,且具剂量依赖性;有效的抑制MC细胞中Twist的mRNA和Snail基因mRNA的表达(P＜0.05). 结论：研究结果提示中药复方逆萎康可以有效抑制正常的GES-1细胞发生恶性转化.此作用可能与增加GES-1细胞中癌变相关蛋白E-cadherin、降低N-cadherin、P-STAT3的表达,有效降低Twist基因的mRNA和Snail基因的mRNA的表达有关.

摘要： 目的：检测经长期氡暴露而发生恶性转化的人的永生化支气管上皮细胞(BEAS-2B)中甲基化转移酶(DNMT)基因的动态变化,从表观遗传学层面探索氡致肺癌的作用机制.rn 方法：应用流式细胞仪分析法,软琼脂集落形成及裸鼠成瘤实验鉴定长期氡暴露过程中BEAS-2B细胞的恶性转化程度,以QPCR方法检测DNMT1、DNMT3A的mRNA表达量.rn 结果：与对照组细胞相比,染氡30代传代至40代的细胞软琼脂克隆形成率已升高至27.27±1.10％(P＜0.05),转化细胞在裸鼠体内成瘤率达到30％(P＜0.05),呈低分化癌;QPCR结果显示各染氡组传至40代细胞DNMT1mRNA表达量均低于对照组,DNMT3AmRNA表达量均高于对照组.rn 结论：建立并确认了体外染氡诱发BEAS-2B细胞恶性转化模型,且细胞恶性程度随染氡代数和传代代数的增加呈现剂量效应关系,细胞出现移植成瘤.本试验条件下,DNMTs表达的改变导致细胞增殖失控,打破内环境平衡,这可能是在表观遗传学中,长期氡暴露致BEAS-2B细胞恶性转化的机制之一.

摘要： 本研究以煤焦沥青烟提取物(CTPE)为测试物,以B(a)P阳性对照组、DMSO阴性对照组、CTPE染毒组,结合体外构建的人支气管上皮细胞(BEAS-2B)恶性转化模型,观察其恶性转化过程中不同时期细胞表观遗传学的改变.DNMTs和HDAC1随传代次数增加,DNMT1在B(a)P组、CTPE组表达量逐渐升高,差异均有统计学意义(均P＜0.05).DNMT3a在B(a)P组和CTPE组表达量均逐渐增加(均P＜0.05).DNMT3b mRNA和蛋白在B(a)P组和CTPE组的表达量逐渐增加,B(a)P组差异有统计学意义(均P＜0.05),CTPE组mRNA无统计学意义(P＞0.05),蛋白差异有统计学意义(P＜0.001).HDAC1基因和蛋白随传代次数增加,HDAC1在B(a)P组和CTPE组表达量均逐渐增加,差异均有统计学意义(均P＜0.05),DMSO组表达量差异无统计学意义(P＞0.05).在此基础上,选择肺癌患者136例,肺良性疾病患者140例,正常人群145例为研究对象,收集其流行病学资料并采集血液做相应的处理.检测其血清中DNA甲基转移酶(DNMT)及HDAC1蛋白表达水平与外周血DNA抑癌基因甲基化水平及端粒相对长度.结果表明肺癌患者血清中DNMTs、HDAC1蛋白表达均高于对照组及肺良性疾病组,差异有统计学意义(P＜0.05),其表达水平与肺癌的组织学类型及临床分期无关(P＞0.05).端粒长度肺癌组短于肺良性组及正常人组(P＜0.001),且与性别、年龄和吸烟史之间有关(P＜0.001),随年龄增加缩短(P＜0.001).肺癌组MGMT、RASSF1A、FHIT基因启动子甲基化率均高于肺良性组和对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).将DNMTs、HDAC1、相关基因启动子甲基化水平及端粒相对长度等变量纳入模型,应用Logistic回归分析、决策树、人工神经网络和支持向量机等数据挖掘技术,对101例(Ⅰ期+Ⅱ期)早期肺癌进行分析预测,其ROC曲线下面积分别为0.923、0.946、0.877和0.851.对101例(Ⅰ期+Ⅱ期)早期肺癌的预测准确率决策树高于支持向量机、Logistic回归和神经网络.该研究表明,支气管上皮细胞恶变过程中表观遗传学异常分子改变可作为肺癌早期诊断及危险度评价的有效生物标志;血清中DNMTs及HDAC1蛋白高表达和端粒长短及相关基因启动子异常甲基化在肺癌早期诊断中亦可作为有效生物标志;应用数据挖掘技术,构建早期肺癌智能预测模型,作为早期肺癌诊断的优选方法,为高危人群的筛查和临床肺癌早期辅助诊断提供依据.

摘要： 口腔鳞状细胞癌是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤,相关的口腔潜在恶性病变,如口腔白斑、红斑和口腔扁平苔藓等,是临床常见的口腔黏膜病,其癌变机制有待研究.

摘要： 本发明涉及一种诱导细胞恶性转化培养模型的方法，该方法包括以下步骤：⑴将永生化人胃黏膜上皮GES‑1放入含有10%胎牛血清的DMEM培养液中培养，得到培养后的细胞；⑵将Cag A阳性的幽门螺杆菌J99放入含有10%的新生小牛血清的脑心浸液培养基中培养，经离心去上清液，得到培养后的细菌；⑶培养后的细菌采用DMEM稀释后，按隔日种菌方式加入到培养后的细胞中进行诱导，同时每日加入MNNG溶液，48周后得到诱导的幽门螺杆菌感染模型。本发明简便易行，不但可以观察细胞发生恶性转变的各项指标，而且可以建立幽门螺杆菌与MNNG长期共同作用胃黏膜发生恶性转变的细胞模型，为后续胃癌形成机制研究和治癌药物研制建立良好的实验基础。

摘要： 本发明属于肝干细胞恶性转化技术领域，公开了一种正常肝干细胞向肝癌干细胞恶性转化的诱导方法，所述诱导方法包括在正常肝干细胞中同时失调四种转录因子联合诱导出肝癌干细胞的步骤；所述四种转录因子分别为TG737、miR10b、miR200a和CD44。本发明通过沉默TG737、过表达MiR‑10b、沉默miR‑200a和过表达CD44，实现了将正常肝干细胞向肝癌干细胞的恶性转化，从而利用本发明的诱导方法可以为肝癌的研究提供实验模型，利于肝癌疾病的研究。

摘要： 本发明公开了种“转化态”纳米材料致哺乳动物细胞恶性转化的暴露方法，将正常小鼠胚胎成纤维细胞和含激活突变的小鼠胚胎成纤维细胞分别在培养基中培养后分别取至少三皿细胞分为至少三组，每组中包括一皿正常小鼠胚胎成纤维细胞和一皿含激活突变的小鼠胚胎成纤维细胞，并标记组别；待细胞生长至对数期后，弃去培养液，向第一组中加入含胎牛血清的DMEM培养基，向第二组中加入含有新鲜液和胎牛血清的DMEM培养基，向第三组中加入含有“转化态”纳米材料悬浊液且含胎牛血清的DMEM培养基；去除条件培养基后漂洗每组中的每皿细胞；循环培养；该方法具有简单、易于操作、成本低、结果可靠等优点，适合大规模推广。

摘要： 本发明公开了一种基于3D培养条件下温石棉诱导的小鼠胚胎成纤维细胞恶性转化株及其应用，属于生物学和肿瘤学技术领域。所述小鼠胚胎成纤维细胞恶性转化株分类命名为：小鼠胚胎成纤维细胞系NIH3T3/3As‑T，保藏号为：CCTCC NO：C2021138。本发明提供的小鼠胚胎成纤维细胞恶性转化株是在3D培养条件下由小鼠胚胎成纤维细胞经温石棉多阶段多次染毒处理后，发生恶性转化获得。3DCC模拟了体内肿瘤细胞生长的微环境，构建的小鼠胚胎成纤维细胞恶性转化株具有与体内肿瘤细胞相似的形态学和细胞生物学特性，在作为致癌物致癌机制研究的细胞模型等多个方面具有良好的应用前景。

摘要： 本发明提供了一种PIM1siRNA在制备治疗砷致细胞恶性转化的疾病药物中的应用。本发明研究发现，在化学致癌过程中(砷致HaCaT细胞恶变过程中)，癌基因PIM1的蛋白从细胞连续染毒14代开始持续高表达，PIM1siRNA可以通过抑制过氧化氢和超氧化物生成，进而延长细胞倍增时间，减少细胞迁移率和软琼脂克隆集落形成数而抑制砷致细胞恶性转化。

摘要： 本发明提供了一种siRNA在制备治疗由Nrf2活化导致细胞恶性转化的疾病的药物中的应用。本发明通过使用线粒体特异性基因编码的氧化还原荧光探针，观察到线粒体在细胞恶变过程中经历了还原应激。并利用siRNA干预实验(NRF2siRNA)发现线粒体还原应激促进砷致细胞恶变过程。NRF2靶向糖代谢重组诱导(线粒体)还原应激促进砷致细胞恶变，认为线粒体氧化能力的特异性增强可能是一种未来的癌症预防和治疗策略提供基础数据。

摘要： 本发明公开了人源性正常肝细胞体外三氯乙烯诱导恶性转化模型建立技术，包括以下步骤：首先是体外诱导人正常肝细胞体外恶性转化；然后是人正常肝细胞细胞体外恶性转化的鉴定。本发明技术方案，为更好地了解三氯乙烯诱导人正常肝细胞恶性转化的效应和生物学特征，及为深入研究三氯乙烯致病机制或干预肝细胞恶性转化药物的筛选提供了新的实验模型。

摘要： 本发明提供了一种G6PDsiRNA在制备由G6PD高表达导致细胞恶性转化的疾病药物中的应用。本发明发现NaAsO2致HaCaT细胞恶性转化前期，细胞呈现正常的代谢方式，即以三羧酸循环为主；而恶性转化后期，葡萄糖6磷酸水平，乳酸分泌水平，G6PD水平均显著升高。并利用siRNA干预实验(G6PDsiRNA)发现线粒体还原应激促进砷致细胞恶变过程。因此G6PDsiRNA为未来的癌症预防和治疗策略提供方向。

摘要： 本发明涉及一种铁死亡激活剂在制备治疗砷致细胞恶性转化的疾病药物中的应用。本发明所述疾病为皮肤基底细胞癌或皮肤鳞状细胞癌。本发明研究发现恶性转化的HaCaT细胞采用铁死亡激活剂RSL3处理后，细胞倍增时间明显加长，细胞迁移距离明显下降，并且软琼脂中有克隆集落形成数量下降且克隆形成率明显低于恶性转化的细胞，说明采用铁死亡激活剂RSL3处理后，已经恶性转化的细胞恶性表型显著降低，表现为细胞的恶性表型被逆转。

摘要： 一种口腔粘膜下纤维化恶性转化的生物标记，包含唾液微生物组的改变，其中改变的唾液微生物组中的特征菌种包含选自于由Porphyromonas catoniae、Prevotella multisaccharivorax、Prevotella sp.HMT‑300、Mitsuokella sp.HMT‑131及Treponema sp.HMT‑927所组成的群组中的至少一个或其组合。