体细胞克隆

摘要： 目前我国生猪养殖环节超过97％的优良种猪依赖进口,并且因育种水平低,导致我国种猪业长期处于"引种—扩繁—退化—再引种"的恶性循环模式.打破发达国家对顶级种猪市场的垄断,让我国从养猪大国变成养猪强国,是我国养猪业的大难题.为此南宁壮博联合中国农业科学院北京畜牧兽医研究所团队,提出了利用体细胞克隆及胚胎移植技术对优秀基因种猪进行复制和扩群的解决方案.此试验总共利用移植受体母猪13头,45d均未见返情,共产仔猪21头,死亡1头.其中1头44d流产.有5头母猪妊娠分娩,产仔最高的1窝为8头仔猪,成活7头;产仔最低的1窝为1头仔猪,成活1头.在28～30d断奶时,断奶体重和大群母猪所产仔猪无显著差异.但克隆出的仔猪舌头比普通的仔猪大,为器官畸形的情况,具体原因还有待研究.

摘要： 细胞重编程可使分化的体细胞逆转回到全能性状态,或形成胚胎干细胞系,或进一步发育成一个新个体,开启了生物学中细胞可塑性研究的新领域。目前细胞重编程技术已逐渐成熟,但对于细胞重编程中的内部变化的具体机理仍然知之甚少。本文特别综述了印记基因在胚胎发育中的变化及作用,探讨了细胞重编程过程中印记基因的意义及在重编程过程中的变化规律,以期人们从细胞内部变化的角度更加准确和充分地认识与理解细胞重编程过程,使之更加安全的应用于畜牧兽医研究领域,为家畜育种以及动物疾病防控提供新的思路。

摘要： 体细胞核移植(somaticcell nucleartransfer,SCNT)是一种将已分化的细胞重编程恢复其全能性,进而生产与供体细胞基因型完全相同后代的无性繁殖技术。包括收集并成熟卵母细胞,供体细胞核处理,重构胚的体外激活,胚胎的培养和移植等过程。猪的SCNT技术的建立在农业和医学有广泛的应用。

摘要： 农科城杨凌,是我国首个国家级农业高新技术产业示范区,在我国农作物育种的历史进程中占据着重要地位。从1997年7月29日成立至今,杨凌通过审(认)定的动植物新品种达768个,为国家粮食安全和现代农业发展贡献了众多“杨凌良种”。农科资源雄厚,农业科技领先全国。如今的杨凌农科城,聚集了农林水等70多个学科、7000多名农业科教人员,是我国重要的农科教基地。目前,世界小麦累计推广面积最大的“碧蚂一号”、长期主导我国小麦品种换代的“小偃6号”、第一例成年体细胞克隆山羊等数以千计的重大农业科技成果均诞生在杨凌。

摘要： 朗格汉斯细胞组织细胞增多症(Langerhans cell histiocytosis,LCH)不是源自于Langerhans细胞(即皮肤和黏膜的正常树突状细胞)的恶性转化,而是一种前体细胞克隆性增殖性疾病.该病可发生于任何年龄,以儿童多见,儿童LCH最常累及骨组织[1]、皮肤、肺脏、口腔与中枢神经系统.本文对我院收治的1例以左肩胛骨损害起病的儿童LCH的诊疗经过进行回顾,以助于进一步认识骨LCH.

摘要： 牧医所发现猪克隆胚胎发育关键候选基因近日,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物基因工程与种质创新团队研究发现与猪体细胞克隆胚胎初次分裂时间相关的关键候选基因,为提高猪克隆胚胎的发育效率、解析体细胞克隆机制提供了理论基础。相关研究成果在线发表在《基因(Genes)》上。

摘要： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物基因工程与种质创新团队研究发现与猪体细胞克隆胚胎初次分裂时间相关的关键候选基因,为提高猪克隆胚胎的发育效率、解析体细胞克隆机制提供了理论基础。相关研究成果在线发表在《基因(Genes)》上。

摘要： 非洲猪瘟疫情的爆发使得我国地方猪品种资源受到了前所未有的灭种威胁.本研究旨在评估体细胞克隆技术在地方猪资源保护中的运用效果.通过对4头青峪猪供体细胞的混合胚胎移植研究发现,本次实验代孕地方母猪的妊娠率达100％,重组胚胎发育率最高达3.78％;混合胚胎移植实验表明重组胚胎无明显的个体和母体效应;克隆猪及后代在出生至180日龄阶段的体重和体尺与非克隆猪间无显著差异;克隆公猪的精液品质和克隆母猪的繁殖性能与非克隆猪相比也无显著差异;克隆猪及其后代的端粒长度并无明显缩短现象.本研究为体细胞克隆技术应用于地方猪资源保护提供了可靠的理论支撑和实践指导.

摘要： 国产第一支青霉素,中国首颗新一代北斗导航卫星,国产第一架大型客机C919,世界首例体细胞克隆猴……上海科技之窗展厅里,一个个“世界首次”“中国首创”显示着新中国成立以来上海科技创新的辉煌足迹。国产第一支青霉素,世界首次提取新颖结构抗拒新药青蒿素,中国首颗新一代北斗导航卫星,国产第一架大型客机C919,世界首例体细胞克隆猴,阿尔兹海默病世界级新药GV-971……

摘要： 作为当时神经科学研究所最年轻的课题组组长,"土博士后"刘真证明了国内青年科学家有能力实现关键技术的自主可控。"父母希望我做事认真,这便是我名字里‘真’字的寓意。"今年33岁的刘真出生于山东潍坊一个农村家庭。11年前从山东师范大学生物技术专业毕业后,他考入中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心(神经科学研究所),师从非人灵长类研究平台主任孙强,"从未想到考研的决定会开启我在非人灵长类遗传修饰模型构建及技术研发领域的漫长探索之路"。刘真说。

摘要： 2005年韩国科学家报道首例体细胞克隆犬出生,随后体细胞克隆技术在宠物犬及工作犬的克隆领域得到了广泛的应用.由于犬胚胎质量较差、发育能力较低、生殖结构特殊及卵母细胞在输卵管内成熟的特点,因此目前全世界只有韩国科学家可以独立完成体细胞克隆犬的制备.本研究通过不断探索,建立了一套具有我国自主知识产权、稳定且高效的犬体细胞克隆技术体系.以体内成熟卵母细胞为胞质受体,实验用比格犬皮肤成纤维细胞为核供体,进行体细胞核移植,共移植44枚胚胎至4只代孕母犬体内,最终获得3只健康存活的体细胞克隆比格犬,使我国成为继韩国之后,世界第二个掌握犬体细胞克隆技术的国家,为该技术在宠物犬克隆、工作犬复制及医学模型创建中的应用奠定了良好基础.

摘要： 目的：探讨体细胞克隆巴马小型猪的生理生化指标特性。方法：采用全自动血球计数仪和全自动生化仪,对体细胞克隆巴马小型猪血液的部分生理和生化指标进行测定和分析。结果：体细胞克隆巴马小型猪生理生化指标和同期普通巴马小型猪没有显著差异,与人类大部分指标接近。结论：体细胞克隆巴马小型猪和人类的生理生化特性有一定的相似性。

摘要： 本文应用石蜡切片及HE染色技术对体细胞克隆水牛的肺脏及脾脏形态进行了详细的观察。结果表明：体细胞克隆水牛的肺脏结构不清楚，细支气管管壁内的皱壁消失，肺泡相互挤压在一起，肺内含有大量胶原纤维和弹性纤维;脾脏白髓的脾小结结构不清晰，淋巴组织以弥散性为主，脾窦内填充有大量粘液，血液含量少，整体染色偏蓝，表明淋巴组织没有得到正常发育。

摘要： 动物体细胞克隆技术近年来发展迅速，为实验动物的研究和开发提供了新的方法和思路。但用于实验研究的动物质量要求较高，以目前克隆技术水平生产的克隆动物难以满足其基本要求。其中克隆效率低下、克隆动物体质较差等是阻碍该技术应用于实验动物生产的主要原因，这与克隆技术各个环节的完善程度有关。本文对实验动物克隆中存在的问题及可能的机制进行讨论，以期为该领域的科研工作者提供参考。

摘要： 随着科学技术不断的创新发展,动物转基因技术的发展日渐成熟,逐渐进入一个新的发展阶段.本文综述了动物转基因技术的发展历程,以及原核显微注射法、锌指核酸酶-基因打靶技术、转座子介导的基因转移法、胚胎干细胞介导法、体细胞克隆技术、慢病毒载体法、RNAi介导的基因敲除法等方法,对动物转基因技术进行综述和探讨.转基因动物的生物安全性一直是人们普遍关注的问题。相关研究表明，利用转基因动物、克隆动物制备的食物、药物并不一定会对人体带来危害。随着动物转基因技术日趋完善，转基因动物将被更多的人们认可和接受。而这些动物转基因新技术也将推动生物制药、动物疾病模型、动物遗传育种、环境保护、器官移植和基因治疗、以及生物材料等诸多领域的研究。

摘要： 体细胞克隆技术用于性状优良家畜的快速扩繁，能极大地缩短传统育种方式改良家畜品种的进程。本研究旨在运用一种改进的核移植技术扩繁引进的、优秀的后测荷斯坦种公牛。

摘要： 体细胞克隆动物的成功和人类胚胎干细胞的建立是二十世纪生命科学研究领域的重大突破,使生殖与发育生物学成为二十一世纪生命科学的“新主角”。随着人口增加和环境的恶化,人类各种疑难病症越来越多,体细胞克隆技术与干细胞定向分化技术的完善与发展,有望使人类获得用于治疗帕金森氏症、心肌梗死、糖尿病和白血病等重要疾病的替代细胞、工程组织和器官。干细胞技术在我国的疾病治疗、动物育种和生物医药等领域具有广阔的前景,也是我国未来生物产业的主要生长点。作为一项高度集成的系统工程,干细胞与治疗性克隆需要不同学科、领域和部门的通力合作。干细胞研究是当前重要的科学研究前沿。干细胞具有全能性,有自我更新、分化为各种有功能的组织细胞器官的潜力,其中的奥秘是生命科学界乃至整个科学界关注的焦点。国内外的科学家们在干细胞研究中都投入了大量的精力和财力，而成功地应用于临床方面的例子也越来越多，这的确是一个令人激动的年代;也正因为如此，目前在干细胞研究中出现了一些令人堪忧的现象，这不能不引起我们的重视。本文谈一谈近几年在自体干细胞移植临床方面取得的成绩和面临的问题。

摘要： 由于猪在解剖、生理和营养代谢等方面与人类很接近,又是一种重要家畜,所以转基因猪的研究越来越受重视。我国转基因猪的研究效果比较显著的进展主要集中在以下三个方面：通过转基因技术提高猪肉品质，培育优质猪新品种；利用转基因猪生产人体器官，为人体器官移植提供供体；建立人类疾病的转基因猪动物模型，揭示人类疾病的发病过程、机理及探索治疗途径。

摘要： 由于猪在解剖、生理和营养代谢等方面与人类很接近,又是一种重要家畜,所以转基因猪的研究越来越受重视。我国转基因猪的研究效果比较显著的进展主要集中在以下三个方面：通过转基因技术提高猪肉品质，培育优质猪新品种；利用转基因猪生产人体器官，为人体器官移植提供供体；建立人类疾病的转基因猪动物模型，揭示人类疾病的发病过程、机理及探索治疗途径。

摘要： 由于猪在解剖、生理和营养代谢等方面与人类很接近,又是一种重要家畜,所以转基因猪的研究越来越受重视。我国转基因猪的研究效果比较显著的进展主要集中在以下三个方面：通过转基因技术提高猪肉品质，培育优质猪新品种；利用转基因猪生产人体器官，为人体器官移植提供供体；建立人类疾病的转基因猪动物模型，揭示人类疾病的发病过程、机理及探索治疗途径。

摘要： 一种改进的核移植方法，采用长期培养的体细胞作为供体细胞并采用去核卵母细胞作为受体细胞得到可分裂胞质杂合体。所述胞质杂合体在合适的宿主环境中培养时中可用于培养活体动物克隆。

摘要： 本发明提供了一种鸡传染性支气管炎病毒IBV‑K136、利用其制备的单克隆抗体细胞株3D5、单克隆抗体及其应用。其中IBV‑K136毒株为地方流行的肾型传染性支气管炎病毒毒株、是通过筛选获得，以该毒株为抗原扩增后进行动物免疫，将免疫血清与骨髓瘤细胞融合筛选出杂交瘤细胞，利用该方法筛选出性能优异的鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体细胞株3D5，再对细胞株3D5进行培养以大量表达单克隆抗体。利用上述流程制备的单抗效价高、抗原抗体反应速度快、特异性强，尤其适用于进一步制备鸡传染性支气管炎病毒抗原诊断试剂盒，相应的检测方法可以是双抗夹心ELISA法或胶体金法等。

摘要： 一种改进的核移植方法，采用长期培养的体细胞作为供体细胞并采用去核卵母细胞作为受体细胞得到可分裂胞质杂合体。所述胞质杂合体在合适的宿主环境中培养时中可用于培养活体动物克隆。

摘要： 本发明提供了用于核移植的改进方法,包括将供体分化猪细胞核移植到去核猪卵母细胞中。产生的核移植单位可用于通过生成胎儿和子代来增殖基因型和转基因基因型。本发明有助于生成遗传工程或转基因的猪胚胎、胎儿、和子代,因为可遗传修饰并克隆增殖供体细胞核的分化细胞来源。

摘要： 本发明公开了一种抗牛早孕因子单克隆抗体细胞株单克隆抗体的制备方法，包括以下步骤：合成抗体位点序列多肽，并偶联载体蛋白，采用B细胞杂交瘤技术建立一种抗牛早孕因子单克隆抗体细胞株，偶联产物免疫的BALB/C小鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合，经阳性杂交瘤细胞筛选、细胞克隆获得能稳定传代并分泌抗牛早孕单克隆抗体的杂交瘤细胞；用构建的杂交瘤细胞对BALB/C小鼠进行腹腔注射，制备腹水单克隆抗体。本发明提供的抗牛早孕因子单克隆抗体细胞株及抗牛早孕因子单克隆抗体，为牛早期妊娠的快速检测提供服务。

摘要： 本发明提供了一种鸡传染性支气管炎病毒IBV-K136、利用其制备的单克隆抗体细胞株3D5、单克隆抗体及其应用。其中IBV-K136毒株为地方流行的肾型传染性支气管炎病毒毒株、是通过筛选获得，以该毒株为抗原扩增后进行动物免疫，将免疫血清与骨髓瘤细胞融合筛选出杂交瘤细胞，利用该方法筛选出性能优异的鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体细胞株3D5，再对细胞株3D5进行培养以大量表达单克隆抗体。利用上述流程制备的单抗效价高、抗原抗体反应速度快、特异性强，尤其适用于进一步制备鸡传染性支气管炎病毒抗原诊断试剂盒，相应的检测方法可以是双抗夹心ELISA法或胶体金法等。

摘要： 本发明公开了一种基于体细胞核移植构建的牛体细胞克隆胚的处理方法，将待移植的牛体细胞注入到去核后的卵母细胞并进行电融合，在电融合之后1h，挑选成功融合的牛体细胞克隆胚用1μM的Oxamflatin处理牛体细胞克隆胚胎12h，可以显著提高牛体细胞克隆囊胚的发育率和质量，可高效体外生产牛体细胞克隆胚胎。

摘要： 本发明公开了一种基于体细胞核移植构建的牛体细胞克隆胚的处理方法，将待移植的牛体细胞注入到去核后的卵母细胞并进行电融合，在电融合之后1h，挑选成功融合的牛体细胞克隆胚用1μM的Oxamflatin处理牛体细胞克隆胚胎12h，可以显著提高牛体细胞克隆囊胚的发育率和质量，可高效体外生产牛体细胞克隆胚胎。

摘要： 本发明涉及一种利用体细胞克隆制备克隆马胚胎的方法，所述方法包括：体细胞的分离培养；马卵母细胞成熟培养；制备去核的卵母细胞；脱去卵母细胞的透明带，将供体细胞和无透明带的胞质体粘在一起；将供体细胞核导入去核卵母细胞的细胞质中；激活融合的重构胚；将克隆胚胎体外培养至囊胚；将囊胚冷冻保存。本发明提供的方法可以构建稳定成熟的克隆马胚胎生产和保存技术平台，为克隆马商业化生产奠定基础。

摘要： 本发明涉及体细胞克隆猫的方法，其中利用马绒毛膜促性腺激素(PMSG)联合人绒毛膜促性腺激素(HCG)，经物理刺激实现家猫的同期发情并超数排卵，通过冲卵(单侧输卵管冲卵或者双侧输卵管冲卵)获得了体内成熟的家猫卵母细胞。