脂肪间充质干细胞

摘要： 背景:人脂肪间充质干细胞成软骨分化过程受多种因素影响。研究证实,长链非编码RNAs在表观遗传调控、转录以及转录后水平调控等过程中扮演着重要角色,而目前其在人脂肪间充质干细胞成软骨分化过程中表达谱的改变以及调控作用鲜有报道。目的:探讨人脂肪间充质干细胞成软骨诱导分化过程中差异表达长链非编码RNAs及其功能。方法:以人脂肪间充质干细胞成软骨诱导分化0 d(未诱导组)、14 d(诱导组)细胞为研究对象,利用转录组测序技术筛选成软骨诱导分化前后差异表达倍数变化2倍及以上的长链非编码RNAs和mRNAs,并通过qRT-PCR对测序结果进行验证。采用生物信息学分析对差异表达基因行GO功能分析和KEGG通路富集分析,并筛选长链非编码RNAs邻近基因以及共表达基因。结果与结论:①与未诱导组相比,诱导组中显著差异表达的长链非编码RNAs共有816条,mRNAs共有5138条;②GO功能和KEGG信号通路分析发现,差异表达基因富集的主要生物学过程包括细胞进程、生物调节和代谢过程等;主要通路包括黏附斑激酶、胰岛素信号通路、Wnt信号通路等;③对差异表达长链非编码RNAs行邻近基因和共表达基因分析发现,部分长链非编码RNAs如SNHG16、XLOC_003886可能在脂肪间充质干细胞成软骨分化和软骨退变中发挥重要作用;④结果表明,长链非编码RNA的表达谱在脂肪间充质干细胞诱导成软骨分化过程中发生了明显改变;差异表达长链非编码RNAs的生物学功能可能与邻近基因和共表达基因功能密切相关,从而调控脂肪间充质干细胞成软骨分化。然而,其具体调控作用和分子机制有待实验进一步证实。

摘要： 背景:研究表明miR-889-3p可参与调控多种细胞的增殖分化过程,但是其对脂肪间充质干细胞成骨分化的影响尚不明确。目的:探讨miR-889-3p对脂肪间充质干细胞成骨分化的调节作用。方法:体外分离、培养SD大鼠脂肪间充质干细胞,转染miR-889-3p模拟物(miR-889-3p mimic)、miR-889-3p抑制剂(miR-889-3p inhibitor)和阴性对照(miR-NC)并诱导成骨分化。RT-PCR和Western blot检测成骨诱导14 d后的碱性磷酸酶活性、Runx2、骨钙素、骨桥素、Osterix等成骨相关mRNA和蛋白的表达。将野生型Runx2、突变型Runx2分别与miR-889-3p模拟物和miR-NC共转染脂肪间充质干细胞,通过双荧光素酶报告基因检测miR-889-3p与Runx2的靶向关系。结果与结论:①miR-889-3p表达水平随成骨诱导时间延长而逐渐减低;②成骨诱导第7天和第14天miR-889-3p inhibitor组的矿化结节数目、大小、颜色深浅明显超过miR-889-3p mimic组和miR-NC组(P<0.05);③miR-889-3p过表达后,碱性磷酸酶活性、Runx2、骨钙素、骨桥素、Osterix mRNA及蛋白表达量显著降低,而miR-889-3p敲除后成骨相关mRNA和蛋白表达量明显提高;④双荧光素酶报告基因检测结果显示miR-889-3p过表达显著降低了野生型Runx2的荧光素酶活性;⑤上述结果表明,miR-889-3p通过靶向Runx2负向调控脂肪间充质干细胞成骨分化。

摘要： 背景:既往研究表明,miR-146a能影响骨髓间充质干细胞成骨分化,但其在脂肪间充质干细胞成骨分化中的调节功能尚未阐明。目的:探究miR-146a对小鼠脂肪间充质干细胞成骨分化的调控作用。方法:获取雄性C57BL/6小鼠脂肪间充质干细胞,采用倒置显微镜观察细胞形态,流式细胞学方法检测第3代细胞CD29、CD44、CD45的表达,然后用miR-NC、miR-146a mimics和miR-146a inhibitor转染脂肪间充质干细胞并进行成骨诱导分化,成骨诱导第6天,采用碱性磷酸酶染色观察钙化程度,RT-PCR和Western blot检测成骨表型标志物的表达;成骨诱导第12天,采用茜素红染色鉴定细胞表面矿化基质的产生。结果与结论:①培养的细胞为长梭形,呈成纤维样生长,第3代细胞CD29、CD44高表达,CD45低表达;②随着成骨诱导时间的延长,小鼠脂肪间充质干细胞miR-146a的表达逐渐降低(P<0.05);③与miR-NC组相比,碱性磷酸酶显色及其活性在miR-146a mimic组显著减弱,而在miR-146a inhibitor组显著增强(P<0.05);④与miR-NC组相比,ALP、Runx2、Akt、PI3K的mRNA和蛋白表达及p-Akt与p-PI3K的蛋白表达在miR-146a mimic组显著降低,而在miR-146a inhibitor组显著升高(P<0.05);⑤与miR-NC组相比,茜素红染色发现miR-146a mimic组细胞的钙化程度显著降低(P<0.05),而miR-146a inhibitor组的钙化程度显著升高(P<0.05);⑥上述结果表明,miR-146a能够通过PI3K/AKT信号通路负向调控脂肪间充质干细胞向成骨细胞分化。

摘要： 背景:根据目前临床上外用红色诺卡氏菌细胞壁骨架对宫颈糜烂的治疗应用及其免疫作用,考虑到其对慢性创面治疗的可能性.目的:探讨外用红色诺卡氏菌细胞壁骨架对脂肪间充质干细胞体外增殖、凋亡的影响,以及对脂肪间充质干细胞体内移植存活率和皮肤愈合的影响.方法:以质量浓度为10 mg/L外用红色诺卡氏菌细胞壁骨架作用于脂肪间充质干细胞,采用CCK-8法检测细胞活力,EDU试剂盒检测细胞增殖能力;在脂肪间充质干细胞中加入50％蔗糖诱导细胞凋亡,给予外用红色诺卡氏菌细胞壁骨架干预后采用FITC-PI流式细胞凋亡试剂盒、TUNEL凋亡试剂盒检测细胞凋亡情况.第3代脂肪间充质干细胞中加入10 mg/L外用红色诺卡氏菌细胞壁骨架5 mL,共培养48 h,用荧光染料CM-Dil标记后以皮内注射方式注入糖尿病小鼠创缘皮肤,LB983活体成像系统检测细胞存活率,苏木精-伊红染色、Masson染色和免疫荧光染色验证慢性创面第14天愈合情况.结果 与结论:外用红色诺卡氏菌细胞壁骨架可提高脂肪间充质干细胞的活力及增殖能力,并抑制其凋亡;在体内条件下外用红色诺卡氏菌细胞壁骨架可以增加脂肪间充质干细胞的存活率,糖尿病小鼠创面愈合速度更快.

摘要： 背景:根据目前临床上外用红色诺卡氏菌细胞壁骨架对宫颈糜烂的治疗应用及其免疫作用,考虑到其对慢性创面治疗的可能性。目的:探讨外用红色诺卡氏菌细胞壁骨架对脂肪间充质干细胞体外增殖、凋亡的影响,以及对脂肪间充质干细胞体内移植存活率和皮肤愈合的影响。方法:以质量浓度为10 mg/L外用红色诺卡氏菌细胞壁骨架作用于脂肪间充质干细胞,采用CCK-8法检测细胞活力,EDU试剂盒检测细胞增殖能力;在脂肪间充质干细胞中加入50%蔗糖诱导细胞凋亡,给予外用红色诺卡氏菌细胞壁骨架干预后采用FITC-PI流式细胞凋亡试剂盒、TUNEL凋亡试剂盒检测细胞凋亡情况。第3代脂肪间充质干细胞中加入10 mg/L外用红色诺卡氏菌细胞壁骨架5 mL,共培养48 h,用荧光染料CM-Dil标记后以皮内注射方式注入糖尿病小鼠创缘皮肤,LB983活体成像系统检测细胞存活率,苏木精-伊红染色、Masson染色和免疫荧光染色验证慢性创面第14天愈合情况。结果与结论:外用红色诺卡氏菌细胞壁骨架可提高脂肪间充质干细胞的活力及增殖能力,并抑制其凋亡;在体内条件下外用红色诺卡氏菌细胞壁骨架可以增加脂肪间充质干细胞的存活率,糖尿病小鼠创面愈合速度更快。

摘要： 背景:脂肪间充质干细胞具有调控内分泌代谢、维持脂肪细胞周围微环境稳态、参与脂肪细胞发育等功能,在脂质代谢和肥胖症发生发展中起着重要作用.目前脂肪间充质干细胞的体外培养主要采用Ⅰ型胶原酶消化法,但其存在消化时间较长、效率低的缺点,故如何选择合适消化酶,以缩短消化时间、提高实验效率,值得关注和探索.目的:建立简单、高效的体外大鼠脂肪间充质干细胞原代培养方法,为临床开展干细胞治疗和基因治疗提供重要的细胞载体.方法:无菌条件下取出大鼠双侧腹股沟和附睾处的脂肪垫组织,用虹膜剪剪碎成糊状,加入2 mL 0.1％ Ⅱ型胶原酶消化45 min,洗涤离心后接种于含体积分数为10％胎牛血清的低糖型DMEM完全培养基中,置于CO2培养箱内进行原代培养.待细胞达80％-90％融合时,以1:3的比例进行传代培养.倒置显微镜下连续观察细胞形态变化,并对第4代目的细胞进行细胞表面标志物特异CD分子检测及成脂、成骨诱导分化实验.结果 与结论:①原代培养3 d后,少量短梭形细胞爬出;5 d后,细胞呈集落或团簇样生长,形态为长梭形;6-8 d时,细胞集落相互融合,密度达80％-90％,呈漩涡状排列;传至第3代时,细胞增殖迅速,接种48 h后即可再次传代,且细胞形态均一,呈现明显的鱼群样生长;②流式细胞仪检测结果显示CD90、CD73和CD29表达阳性,CD34、CD45和CD11b/c呈阴性表达;③第4代脂肪间充质干细胞成脂诱导7-10 d后,细胞形态逐渐由长梭形变为多边形或圆形,胞浆内积聚了大小不等的脂肪滴,经油红O染色后脂肪滴呈鲜艳深红色;而成骨诱导21 d后,细胞逐渐由长梭形变为多边形,呈聚集样生长,表面有大小不等的黑色小颗粒,局部有矿化样的结晶物;经茜素红染色后可见散在分布、大小不等的"蘑菇样"深红色球形结节;④由结果可见,该实验成功建立了一种简单、高效的大鼠脂肪间充质干细胞原代培养方法.

摘要： 背景:针对糖尿病患者脂肪间充质干细胞活性不足的机制进行干预,是有效促进糖尿病创面愈合的重要前提.目的:观察糖尿病患者来源脂肪间充质干细胞的生物学特性及促进糖尿病创面愈合的效果.方法:选用相同年龄、性别的正常人与糖尿病患者腹部脂肪获取脂肪间充质干细胞,采用流式细胞术、细胞划痕实验分析两组细胞凋亡、迁移情况,ELISA检测两组细胞培养上清中肝细胞生长因子、碱性成纤维生长因子、血管内皮生长因子水平.制备糖尿病裸鼠创面模型,以皮内注射的方式将不同来源脂肪间充质干细胞混悬液移植到糖尿病裸鼠创面皮肤边缘,移植后0,12,24 h通过LB983活体成像系统检测细胞存活情况,移植后7,14 d观察裸鼠背部愈合情况.结果 与结论:①与正常组比较,糖尿病组细胞凋亡率显著升高(P<0.05),24 h迁移距离显著减小(P<0.05);肝细胞生长因子、碱性成纤维生长因子、血管内皮生长因子分泌水平显著降低(P<0.05);②移植后24 h观察到糖尿病来源脂肪间充质干细胞注射组活细胞数量较正常来源脂肪间充质干细胞注射组显著减少(P<0.05),14 d后正常来源脂肪间充质干细胞注射组裸鼠背部皮肤愈合情况优于糖尿病来源脂肪间充质干细胞注射组;③结果 表明,糖尿病患者来源脂肪间充质干细胞的生物学活性下降,促进创面愈合效果较差.

摘要： 背景:已有证据表明,LncRNA-HOTAIR能调节骨髓间充质干细胞中成骨相关基因的表达,但其对脂肪间充质干细胞成骨分化的影响尚未见报道.目的:探讨LncRNA-HOTAIR对脂肪间充质干细胞成骨分化的影响.方法:体外培养Lewis大鼠脂肪间充质干细胞,转染lncRNA-NC、lncRNA-HOTAIR mimics、lncRNA-HOTAIR inhibitor并进行成骨诱导,成骨诱导第7天检测碱性磷酸酶活性,成骨诱导第14天进行茜素红染色.成骨诱导第6天,通过RT-PCR及Western blot检测成骨相关基因碱性磷酸酶、Runt相关转录因子2、骨钙素、骨桥蛋白mRNA和蛋白的表达.结果 与结论:①转染LncRNA-HOTAIR mimic后,脂肪间充质干细胞中碱性磷酸酶活性及钙化程度显著降低,而转染LncRNA-HOTAIR inhibitor后则显著增加(P<0.05);②转染LncRNA-HOTAIR mimic后,脂肪间充质干细胞中碱性磷酸酶、Runt相关转录因子2、骨钙素和骨桥蛋白的表达显著降低(P<0.05),而转染LncRNA-HOTAIR inhibitor后则显著增加(P<0.05);③上述结果表明,LncRNA-HOTAIR能负向调控脂肪间充质干细胞的成骨分化.

摘要： 背景:既往研究表明,miR-146a能影响骨髓间充质干细胞成骨分化,但其在脂肪间充质干细胞成骨分化中的调节功能尚未阐明.目的:探究miR-146a对小鼠脂肪间充质干细胞成骨分化的调控作用.方法:获取雄性C57BL/6小鼠脂肪间充质干细胞,采用倒置显微镜观察细胞形态,流式细胞学方法检测第3代细胞CD29、CD44、CD45的表达,然后用miR-NC、miR-146a mimics和miR-146a inhibitor转染脂肪间充质干细胞并进行成骨诱导分化,成骨诱导第6天,采用碱性磷酸酶染色观察钙化程度,RT-PCR和Western blot检测成骨表型标志物的表达;成骨诱导第12天,采用茜素红染色鉴定细胞表面矿化基质的产生.结果与结论:①培养的细胞为长梭形,呈成纤维样生长,第3代细胞CD29、CD44高表达,CD45低表达;②随着成骨诱导时间的延长,小鼠脂肪间充质干细胞miR-146a的表达逐渐降低(P ＜ 0.05);③与miR-NC组相比,碱性磷酸酶显色及其活性在miR-146a mimic组显著减弱,而在miR-146a inhibitor组显著增强(P ＜ 0.05);④与miR-NC组相比,ALP、Runx2、Akt、PI3K的mRNA和蛋白表达及p-Akt与p-PI3K的蛋白表达在miR-146a mimic组显著降低,而在miR-146a inhibitor组显著升高(P ＜ 0.05);⑤与miR-NC组相比,茜素红染色发现miR-146a mimic组细胞的钙化程度显著降低(P ＜ 0.05),而miR-146a inhibitor组的钙化程度显著升高(P ＜ 0.05);⑥上述结果表明,miR-146a能够通过PI3K/AKT信号通路负向调控脂肪间充质干细胞向成骨细胞分化.

摘要： 目的探讨脂肪间充质干细胞(ADMSC)来源外泌体对脊髓损伤大鼠巨噬细胞极化及胶质瘢痕形成的影响。方法提取ADMSC来源外泌体并鉴定。选取36只大鼠,分为假手术组(仅切除T9椎板+注射等量生理盐水)、脊髓损伤组(建模+注射等量生理盐水)、外泌体组(建模+注射100μg/kg外泌体),每组各12只,采用钳夹脊髓法建立脊髓损伤大鼠模型。使用BBB评分评估大鼠后肢运动功能,酶联免疫(ELISA)法检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-4、IL-6、IL-10水平,对脊髓组织行尼氏染色,Western Blot法检测脊髓组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶-1(Arg-1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、波形蛋白(vimentin)蛋白表达。结果经透射电镜观察及CD63、Alix蛋白检测鉴定,成功提取到ADMSC来源外泌体。与假手术组相比,脊髓损伤组大鼠BBB评分显著降低(P<0.05),血清IL-1β、IL-6、IL-4、IL-10水平及脊髓组织中iNOS、Arg-1、GFAP、vimentin蛋白水平均显著升高(P<0.05),脊髓组织中神经细胞严重损伤,可见大量胶质瘢痕组织堆积;与脊髓损伤组相比,外泌体组大鼠BBB评分、血清IL-4、IL-10水平及脊髓组织中Arg-1蛋白水平显著升高(P<0.05),血清IL-1β、IL-6水平及脊髓组织中iNOS、GFAP、vimentin蛋白水平显著降低(P<0.05),脊髓组织中神经细胞损伤及胶质瘢痕组织堆积减轻。结论ADMSC来源外泌体可改变脊髓损伤大鼠巨噬细胞极化方向,并抑制胶质瘢痕形成。

摘要： 间充质干细胞移植为治疗心肌梗死后心功能不全提供了一种潜在可行的手段,然而定植在梗死区的干细胞往往因心梗区缺氧、炎症、应激等因素发生大量的凋亡和坏死.褪黑素为一种内源性氧自由基清除剂,多项研究证实褪黑素具有明显的抗氧化应激作用,但其发挥抗氧化应激的保护作用机制仍有待进一步研究.同时褪黑素在体内极易被分解、半衰期短,造成其应用受限.纳米药物载体能够保护药物免受机体快速降解,并控制药物的释放,延长药物的作用时间,降低药物的毒副作用.因此,使用聚乳酸乙醇酸聚乙二醇(PLGA-mPEG)作为纳米药物载体包载褪黑素,在体内和体外水平观察褪黑素纳米药物载体对脂肪间充质干细胞(ADSCs)的保护作用,并着重从线粒体p53-CypD信号通路探究褪黑素减少缺氧复氧诱导的ADSCs凋亡和坏死的机制.结果表明褪黑素纳米微粒较单纯褪黑素具有更有效的保护脂肪间充质干细胞氧化应激损伤作用；褪黑素通过线粒体p53-CypD通路抑制线粒体通透性转移孔的开放，发挥减少缺氧复氧诱导的ADSCs凋亡和坏死作用；经过褪黑素纳米微粒预干预的ADSCs具有更强的心梗微环境存活能力。

摘要： 目的：局灶性脑缺血,在世界各地仍然是导致死亡和残疾的首要原因.骨髓间充质干细胞(bone marrw-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)是已被广泛用于脑梗死治疗研究的一种间充质干细胞,而近几年才受关注的脂肪间充质干细胞(adipose tissue-derivedstem cells,ADMSC)与BMSC相比,在多个方面具备明显的优势,很有希望成为脑梗死治疗的更优选择.尽管目前已有多项研究直接比较了异体BMSC、自体BMSC对心肌缺血动物模型的治疗效果,但迄今未见直接的比较研究探讨脂肪源自体、异体ADMSC在脑梗死治疗中的疗效差别. 方法：本研究中我们比较了自体(Lewis源自体)、异体(BN源异体)ADMSC移植入大脑中动脉缺血再灌注Lewis大鼠模型(MCAO)后,在迁移、存活、凋亡、分化、神经功能改善等方面有何不同,并探讨相关机制. 结果：(1)表达EGFP的慢病毒追踪移植细胞,TUNEL检测结果显示,移植1天后梗死区附近的脑组织中发生凋亡的异体ADMSC的数量约为自体ADMSC的3.19倍(P＜0.01);(2)移植1、7天后,自体ADMSC的存活率显著高于异体ADMSC(P＜0.01),且迁移范围较广;移植28天后仍可见自体ADMSC存活(3.35±0.16％),多分布于海马区,而皮质损伤区较少,并且免疫组化实验显示存活的自体ADMSC中有8.73±0.92％分化为星形胶质细胞(GFAP+),2.14±0.69％分化为神经元.然而此时并未见存活的异体ADMSC;(3)移植后14天、28天的行为学测评结果显示：自体ADMSC治疗组比异体ADMSC治疗组神经功能恢复效果更明显,且差异有统计学意义(P＜0.01),表现为mNSS评分下降更多以及转子杆测试中保持在转轴上运动的时间更长.(4)TTC染色结果显示,移植后28天与MCAO模型对照组(34.69±1.84％)比较,自体ADMSC治疗(24.35±2.14％)比异体ADMSC治疗(28.22±2.38％)更能显著减少相对梗死体积,且这三组间的差异均有统计学意义(P＜0.01). 结论：本研究首次证实了自体ADMSC对MCAO模型大鼠的治疗效果显著优于异体ADMSC.这很可能与免疫排斥反应不利于异体ADMSC存活有关.此外,移植的自体ADMSC除了像异体ADMSC发挥旁分泌生长因子的作用外还发挥了一定的细胞替代效应.明确了自体ADMSC治疗MCAO模型大鼠的优越性并分析其机制,可为确立一种方便且更安全有效的移植治疗脑梗死的方法,及脑梗死的临床治疗提供一定的理论基础.

摘要： 目的：将自体脂肪间充质干细胞进行体外成软骨方向诱导,应用于软骨损伤修复,为其后续的研究和应用提供基础;方法：本文以兔为研究对象,分离培养其脂肪间充质干细胞和软骨细胞之后进行体外transwell共培养诱导,通过软骨相关基因表达评价其成软骨特性,之后进行自体软骨损伤修复,以不做任何处理作为空白对照组,于术后1月、3月及6月分别进行取材,评价其大体修复情况和组织学切片结果.结果：显示经过体外诱导的脂肪间充质干细胞可以实现软骨缺损修复的光滑平整,且随着修复时间的延长,逐渐形成透明软骨.结论：脂肪间充质干细胞经过体外成软骨诱导之后可以应用于软骨损伤修复.

摘要： 目的：探讨大鼠经静脉输注异体脂肪间充质干细胞(ADSCs)后的安全性.方法：SPF级雄性SD大鼠45只,随机分为空白对照组,照射对照组,照射移植组,每组15只.体外分离培养大鼠脂肪间充质干细胞,照射移植组大鼠尾静脉注射脂肪间充质于细胞,注射体积为10mL/Kg,细胞浓度为1×106/mL;空白对照组和照射对照组注射等体积的无菌生理盐水.分别于照射后16d和34d进行血液学、血液生化学和组织病理学检查.结果与结论：移植组大鼠血常规、血液生化与照射对照组相比差异没有统计学意义(P＞0.05);移植组大鼠脏器病理学观察与照射组、空白对照组相比无明显差别;未见移植组大鼠出现急慢性移植物抗宿主病(GVHD)反应.结果提示一次性静脉注射异体脂肪间充质干细胞是安全可行的,不会引起受者免疫排斥反应.

摘要： 间充质干细胞由于其良好的免疫抑制功能和多向分化潜能,成为组织工程领域内广受欢迎的种子细胞.但现在使用较多的骨髓来源的间充质干细(BMSCs)由于来源较少、提取和分离过程复杂等原因,使其发展和应用受到限制.

摘要： 筛选成骨和成血管方向诱导的大鼠脂肪间充质干细胞(ADSCs)较合适的共培养比例,探究两种细胞的相互作用机制.探究双向诱导分化的ADSCs共培养及其在多肽纳米纤维水凝胶RADA16-I中的成骨成血管能力变化.

摘要： 观察在MCT诱发大鼠PAH进程中,进行ADMSCs延迟干预对其肺中动脉(MPA)和肺小动脉(SPA)的内皮依赖性舒张(EDdR)和非内皮依赖性舒张功能(EDiR)以及收缩功能(ConF)的影响。

摘要： 目的：观察在MCT诱发大鼠PAH进程中,进行ADMSCs早期干预对其肺中动脉(MPA)和肺小动脉(SPA)的内皮依赖性舒张(EDdR)和非内皮依赖性舒张功能(EDiR)以及收缩功能(ConF)的影响。rn 结论：MCT所致大鼠肺中、小动脉的内皮依赖性舒张功能受损先于肺动脉压力的增高，MCT所致大鼠肺动脉压力升高与肺动脉舒张功能受损关系密切;ADMSC，早期干预第1,2,3周均可以改善受损的肺动脉内皮依赖性及非内皮依赖性舒张功能，有效地降低MCT诱导的肺动脉高压。

摘要： 脂肪间充质干细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化能力的特异化了的前体细胞是多种疾病试验研究的基础，也是进行组织修复的理想种子细胞，同时也是作为核移植研究和动物遗传资源保存的重要材料。目前，由于脂肪间充质干细胞取材时侵害性小、易于培养以及低衰老性已经成为目前研究的热点。本实验建立羊脂肪问充质干细胞培养体系，并诱导其向肌细胞和脂肪分化，对研究肉羊脂肪沉积与肌肉发育等相关机理具有重要意义。

摘要： 本研究借鉴大鼠体外分离培养ADSCs的方法分离山羊ADSCs,并对其进行定向诱导,建立山羊ADSCs细胞系,并与大鼠ADSCs进行比较,观察其相似和差异性,为今后ADSCs在家畜繁育和再生医学等相关方面的研究和应用提供实验依据.

摘要： 本发明涉及从脐带血中分离和培养间充质干细胞/祖细胞的方法，还涉及将脐带血来源的间充质干细胞/祖细胞分化成各种间充质组织的方法。所述方法包括如下步骤：将脐带血覆盖在Ficoll-Hypaque溶液上；将Ficoll-Hypaque溶液上的脐带血离心，获得单核细胞层；使通过单核细胞单层培养获得的细胞与针对间充质干细胞/祖细胞特异性抗原的抗体反应预定的孵育期；使用细胞分选仪仅分离与其相应抗体相结合的细胞；将分离的细胞培养，从而获得具有高纯度和极好生存能力的间充质干细胞/祖细胞。本发明的间充质干细胞/祖细胞能够分化成包括软骨细胞和成骨细胞在内的各种间充质组织。因此，根据本发明的细胞分离和培养方法能够实现间充质干细胞/祖细胞的大规模生产，本发明获得的细胞在受损间充质组织的再生和治疗上是有用的。

摘要： 本发明涉及一种用于直接分化胚胎干细胞来源间充质干细胞的培养基、用其制备间充质干细胞的方法、由此制备的间充质干细胞以及包括其的细胞治疗剂，根据一方面的培养基组合物和方法，不仅可以在短时间内以高产率制备间充质干细胞，而且由于没有胚状体形状的步骤，因此制备工艺简单，并且可以获得具有均质性的细胞，从而具有可以在比现有方法更短的时间内提供细胞治疗剂的效果。

摘要： 本发明的目的在于，提供包含治疗效果好的MSC的细胞制剂。提供一种活化的MSC的制造方法，包括使用具有由纤维构成的三维结构的细胞培养载体在含有哺乳动物胎儿附属物来源的活化剂的培养基中培养MSC的工序。此外，还提供选自由p16

摘要： 本发明涉及评估间充质干细胞(MSC)群体的伤口愈合效力的方法。此外，本发明涉及选择用于在cGMP条件下产生干细胞群体的MSC的方法，选择用于产生用于后续药物施用的干细胞群体的MSC群体的方法。此外，本发明涉及选择用于生成主细胞库的MSC群体的方法，以及鉴定适合作为用于产生用于药物用途的MSC群体的起始材料的组织的方法。所述方法包括测定培养基中由MSC分泌至培养基中的选自血管生成素1(Ang‑1)、转化生长因子β(TGF‑β)、血管内皮生长因子(VEGF)和肝细胞生长因子(HGF)的至少两种蛋白质的水平。

摘要： 本发明的目的在于，提供一种对各种疾病发挥优异的治疗效果的新的间充质干细胞及含有该间充质干细胞的新的药物组合物、以及它们的制备方法。本发明为一种ROR1阳性的间充质干细胞。上述ROR1阳性的间充质干细胞优选为CD29、CD73、CD90、CD105及CD166阳性，优选源自脐带或脂肪。

摘要： 本发明属于干细胞技术领域，具体涉及一种脂肪间充质干细胞冻存液以及脂肪间充质干细胞冻存方法。本发明提供的脂肪间充质干细胞冻存液，包括如下组分及其重量份数组成：基础培养基80～120份、低温保护剂5～10份，L‑岩藻糖2～6份，硫辛酸1～5份，还原型谷胱甘肽0.1～2份。本发明提供的脂肪间充质干细胞冻存液不含有动物血清，安全性高，成本低，且制备方法简单，与常规的冻存方法相比，采用本发明脂肪间充质干细胞的冻存方法冻存的细胞可明显减少冻存液对细胞的损伤，复苏后细胞回收率高。

摘要： 本发明公开了一种脂肪间充质干细胞冻存液以及脂肪间充质干细胞冻存方法，其中，脂肪间充质干细胞冻存液，包括如下重量份数的组分：RPMI‑1640培养基80‑88份；FBS为2‑5份；环丁砜1‑2份；5 wt%乙醇1.5‑2.5份；10 wt%乙二醇0.8‑1.2份；10 wt%1,2‑丙二醇0.8‑1.2份；吐温80为0.3‑0.7份，甘油0.5‑1.5份，50U/mL青霉素0.01‑0.05份；海藻糖0.5‑1份；聚乙烯吡咯烷酮0.5‑0.8份；琼脂粉0.2‑0.6份。本发明对脂肪间充质干细胞具有不含毒性且冻存效果好的优点。

摘要： 本发明提供了一种虎脂肪间充质干细胞培养液和虎脂肪间充质干细胞的培养方法。每100mL所述虎脂肪间充质干细胞培养液包含5mL～15mL胎牛血清、0.5mL～1.5mL双抗、0.5mL～1.5mL谷氨酰胺、400ng～600ng TGF‑a和400ng～600ng PGE1，以及细胞基础培养液。与传统技术相比，本发明具备如下有益效果：本发明提供的培养液配方，适用于虎脂肪间充质干细胞的原代培养，填补了脂肪间充质干细胞在虎这一物种上的研究空白，为虎脂肪间充质干细胞体外培养、建系和应用奠定了基础，为后续临床疾病研究提供了新思路。

摘要： 本发明属于干细胞技术领域，具体涉及一种脂肪间充质干细胞冻存液以及脂肪间充质干细胞冻存方法。本发明提供的脂肪间充质干细胞冻存液，包括如下组分及其重量份数组成：基础培养基80～120份、低温保护剂5～10份，L‑岩藻糖2～6份，硫辛酸1～5份，还原型谷胱甘肽0.1～2份。本发明提供的脂肪间充质干细胞冻存液不含有动物血清，安全性高，成本低，且制备方法简单，与常规的冻存方法相比，采用本发明脂肪间充质干细胞的冻存方法冻存的细胞可明显减少冻存液对细胞的损伤，复苏后细胞回收率高。

摘要： 本发明公开了一种脂肪间充质干细胞冻存液以及脂肪间充质干细胞冻存方法，其中，脂肪间充质干细胞冻存液，包括如下重量份数的组分：RPMI‑1640培养基80‑88份；FBS为2‑5份；环丁砜1‑2份；5 wt%乙醇1.5‑2.5份；10 wt%乙二醇0.8‑1.2份；10 wt%1,2‑丙二醇0.8‑1.2份；吐温80为0.3‑0.7份，甘油0.5‑1.5份，50U/mL青霉素0.01‑0.05份；海藻糖0.5‑1份；聚乙烯吡咯烷酮0.5‑0.8份；琼脂粉0.2‑0.6份。本发明对脂肪间充质干细胞具有不含毒性且冻存效果好的优点。