分离培养

摘要： 背景:成纤维样滑膜细胞在类风湿关节炎病变过程中发挥着重要的作用,当炎症性关节炎发生时滑膜衬里层成纤维样滑膜细胞会大量增殖,释放炎症因子能引起关节炎症和软骨的损伤.目的:建立树鼩膝关节成纤维样滑膜细胞体外分离、培养纯化及鉴定的方法,并探讨其生物学特性;建立树鼩成纤维样滑膜细胞TLR8通路相关分子的检测方法,初探TLR8通路在细胞中的活化情况.方法:利用组织块贴壁法和连续传代法分离、纯化树鼩成纤维样滑膜细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖能力,苏木精-伊红染色观察细胞形态,免疫细胞化学染色法检测成纤维样滑膜细胞的标志性蛋白(波形蛋白)的表达.经人TLR8配体R848刺激前后,采用Western blot方法检测树鼩成纤维样滑膜细胞与人成纤维样滑膜细胞中TLR8及其信号通路蛋白的表达,采用RT-PCR和琼脂糖凝胶电泳检测树鼩成纤维样滑膜细胞中TLR8通路及其下游基因mRNA的表达.结果 与结论:①倒置显微镜下可见,经过3代的传代培养后,树鼩成纤维样滑膜细胞多为梭形,大小相近,纯度高,在体外生长增殖状况良好;苏木精-伊红染色显示细胞形态多呈梭形,大小相近;免疫细胞化学染色显示,成纤维样滑膜细胞胞浆波形蛋白表达阳性;CCK-8实验结果显示,树鼩成纤维样滑膜细胞生长曲线为"S"型;②Western blot检测显示,经R848刺激48 h后,树鼩成纤维样滑膜细胞中的核因子κB蛋白表达升高(P0.05);人成纤维样滑膜细胞中的p-P38蛋白表达降低(P0.05);③RT-PCR和琼脂糖凝胶电泳检测显示,经R848刺激48 h后,树鼩成纤维样滑膜细胞中肿瘤坏死因子ɑ、白细胞介素6、干扰素β、TLR9-2、TLR9-1、TLR8-2、TLR8-1、TLR7-2、TLR7-1 mRNA表达无明显变化(P>0.05);④结果表明,采用组织贴壁法可分离树鼩成纤维样滑膜细胞,利用人来源抗体可建立树鼩成纤维样滑膜细胞TLR8通路相关分子检测方法.

摘要： 【目的】进一步研究菌草“绿洲一号”根际土壤中的微生物群落组成情况,以期筛选出其根际土壤中的有重要生态价值的优势菌株。【方法】通过对种植了菌草“绿洲一号”和未种植菌草“绿洲一号”的盐碱地分别进行土壤取样,运用16sDNA高通量测序对其进行微生物种群测序,明确两者之间的微生物种群差异,从而筛选出菌草“绿洲一号”根际土壤中的优势菌株,对有重要生态价值的优势菌群进行分离培养及菌落PCR鉴定。【结果】实验地段中的土壤微生物种群丰度要远远高于空白地段,同时实验地段中的土壤微生物种群结构组成相较于空白地段也具有明显变化,菌草“绿洲一号”根际土壤中有重要生态价值的优势菌株为酸杆菌和鞘氨醇单胞菌。对其进行分离培养之后,菌落PCR鉴定表明优势菌株被成功分离培养。【结论】本文通过对菌草“绿洲一号”根际土壤中具有重要生态价值的优势菌株进行筛选培养,为利用菌草“绿洲一号”改良盐碱土壤提供理论依据具有重要的指导意义。

摘要： 近期山东省青岛市即墨区某蛋鸡场内350日龄的海兰褐蛋鸡出现了鸡只消瘦、精神沉郁、腹泻、便血等症状。根据其发病突然死亡快及刨检后肠管明显肿胀,肠壁变薄,肠道内容物为混有血液的褐色和黑色稀粪等特点确诊为鸡坏死性肠炎病。产气荚膜梭菌作为该病的主要病原菌,可导致蛋鸡死淘率增加,经济效益降低及产蛋率下降。为了探究产气荚膜梭菌的生物学特性,试验收集了该鸡场20只病鸡的肠道内容物。通过稀释培养、生理生化试验、16S rRNA测序及多重PCR等方法进行产气荚膜梭菌的分离鉴定。结果表明:试验中分离出的产气荚膜梭菌(H1~H7)同源性均在99.86%~100%之间,且均为A型,因此认为导致该鸡场发生的坏死性肠炎的产气荚膜梭菌可能是A型产气荚膜梭菌。研究可为蛋鸡坏死性肠炎的诊断及鸡场的免疫防治提供理论依据,促进蛋鸡养殖业的经济发展。

摘要： 2020年12月,贵州大学动物医院收到贵州省野生动物园送检的1例病死赤大袋鼠(Macropus rufus)。根据发病时的临床症状和剖检分析,初步判定为产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)感染。采集病死赤大袋鼠的心、肝、肺和肾脏等器官病变组织进行厌氧培养,分离出单个菌落纯化,对纯化菌株进行革兰氏染色、生化试验、药敏试验、16S rDNA基因序列测序和产气荚膜梭菌毒素分析测定。结果显示:该细菌为产气荚膜梭菌A型,对青霉素、四环素、多西环素和红霉素等药物极为敏感。

摘要： 分离鉴定羚牛骨髓间充质干细胞,为开展羚牛细胞治疗与体细胞核移植的深入研究提供有效载体。分离培养来源于羚牛骨髓的间充质干细胞;通过染色体G显带技术进行核型分析;利用流式细胞技术检测细胞表面标记物;通过定向诱导培养探究细胞的分化潜能。结果表明,羚牛骨髓间充质干细胞能够维持正常核型,对间充质干细胞特异性表面标记CD105、CD73、CD90、CD166、CD44呈阳性,对CD14(单核细胞和巨噬细胞标记物),CD19(b细胞标记物),CD34(造血干细胞标记物),CD45(泛白细胞标记物)和HLA-DR均呈阴性,具有成脂、成骨与成软骨多向分化潜能。表明成功分离羚牛骨髓间充质干细胞并对其表面抗原与分化潜能进行鉴定,为羚牛生物多样性保护与内源物种间充质干细胞的应用研究奠定基础。

摘要： 旨在建立牦牛胚胎心脏原代成纤维细胞系并对其进行鉴定.以牦牛胚胎心脏组织块为研究对象,运用组织块法对其进行分离培养获得原代细胞,使用胰酶消化法对原代细胞进行传代培养,通过MTT法检测细胞增殖活性,利用HE染色法及秋水仙素处理染色体鉴定细胞外形,选取4个成纤维标志性基因TGF-β、FSP-1、S100A4、Vimentin,通过RT-qPCR技术对基因的表达情况进行鉴定.结果显示成功将原代分离培养的成纤维细胞传代至11代;通过外型的一系列检测方法发现其符合成纤维细胞的外形,该细胞活力充足,生长规律符合“S”型生长曲线;荧光定量检测以上四种成纤维细胞特征性基因在不同代数中均表达且相对稳定,结果证实分离培养出的细胞符合成纤维细胞系的分子表达特征.本研究成功建立了牦牛胚胎心脏原代成纤维细胞系,集成了该细胞系的鉴定流程,为今后牦牛进一步研究提供相关的细胞系平台.

摘要： 煤污病又称煤烟病,在各种园林植物上普遍发生。紫薇是我国重要的观赏性园林树木,煤污病发生较为严重。目前紫薇煤污病研究较少,病原还未被完全确定。紫薇煤污病可能由小煤炱属真菌引起,或者枝孢霉、散播烟霉、多绺孢属、煤炱菌等多种病原菌混生。该研究主要是根据当地环境条件确定并分离鉴定该地的紫薇煤污病病原,通过形态学观察初步判定紫薇煤污病病原菌主要包括链格孢菌(Alternaria sp.)、枝状枝孢菌(Cladosporium cladosporioides)、黑附球菌(Epicoccum nigrum)、聚生小穴壳菌(Dothiorella gregaria)等。为后续病原菌的分子生物学鉴定,综合防治及抗病品种筛选工作提供理论基础。

摘要： 葡萄球菌感染是鸡养殖过程中一种常见的细菌传染性疾病,给鸡养殖的生产性能和机体健康状况造成极大的负面影响。葡萄球菌疾病感染的预防和治疗离不开科学准确的诊断措施,通常实验室诊断是疾病诊断中较为准确的一种。实验室诊断主要可以通过患病鸡只病理组织的染色镜检,病理组织分离细菌培养,分离细菌的生化试验及动物试验等方法进行。文中对鸡葡萄球菌感染的实验室诊断及疾病防治措施进行介绍,旨在为鸡的健康养殖带来帮助。

摘要： 目的对广东地区近海浅海海水弗朗西斯菌进行分离培养,以了解弗朗西斯菌在近海浅海海水中的分布情况。方法在广东近海浅海地区水域内,选取茂名市电白区水东湾(2019年10月4日)以及惠州市两大湾(巽寮湾、双月湾,2019年8月12日)进行多点采集水样,分别19份和29份。利用前期探索出针对分离弗朗西斯菌的有效海水前处理手段(浓缩、酸处理)以及分离培养基(BHI-2216E-GVPC和BCYEα-2216E-GVPC)进行分离培养,依据弗朗西斯菌的菌落特征,初步将可疑菌株进行分纯培养,并对纯培养后的可疑菌株进行传统形态特征、生理生化特征、16S rRNA分子特征等鉴定。结果19份水东湾水样中有14份(阳性率为73.7%)成功分离到共60株目标菌(含邻近兼性胞内寄生菌);29份惠州地区水样中有17份(阳性率为58.6%)成功分离到共79株目标菌(含邻近兼性胞内寄生菌)。经菌落特征、细菌形态学检查、生化反应以及测序结果比对后,水东地区60株目标菌分离出弗朗西斯菌属(含潜在新种)12株(20.0%),潜在新科2株(2.9%),惠州地区79株目标菌分离出弗朗西斯菌属(含潜在新种)22株(27.8%),潜在新科18株(22.8%)。结论广东地区近海浅海海水中弗朗西斯菌菌种资源丰富,且存在不同的该菌属内新种以及可能存在邻近新属。

摘要： 目的 建立非人灵长类动物冠状动脉原代内皮细胞的分离和培养方法,为研究人冠状动脉内皮细胞提供细胞模型。方法 无菌分离猕猴冠状动脉,胶原酶短暂消化后采用组织黏附法分离猕猴冠状动脉原代内皮细胞,利用流式细胞术检测并分选CD31阳性细胞,确定内皮细胞纯度;经前列腺素E_(2)(PGE_(2))刺激后,以CCK-8法和高内涵细胞成像法分别检测猕猴冠状动脉原代内皮细胞活力和增殖能力、以Transwell法和Matrigel胶法分别检测猕猴冠状动脉原代内皮细胞迁移能力和体外成管功能。结果 猕猴冠状动脉原代细胞在10~14 d细胞覆盖培养瓶面积的80%左右,细胞呈不规则多边形和铺路石状。流式检测其纯度为31.7%左右,分选后利用流式细胞术再次检测内皮细胞纯度,达95%以上;PGE_(2)能显著上调猕猴冠状动脉原代内皮细胞的增殖、迁移和成管能力。结论 该研究成功建立猕猴冠状动脉原代内皮细胞分离培养方法,通过功能研究表明猕猴冠状动脉原代内皮细胞可以作为模拟人冠状动脉内皮细胞的体外细胞模型。

摘要： 目的:用两种培养基分别分离培养BALB/c小鼠原代神经细胞,寻求一种简单、廉价的神经细胞培养方法.方法:用胰酶消化法将小鼠脑组织制成单细胞悬液,分别采用含10％马血清的DMEM以及添加2％神经细胞生长剂B27的Neurobasal培养基分离培养BALB/c小鼠原代脑神经细胞,并对其进行形态学观察.结果:两种培养基均能成功培养小鼠原代神经细胞,但含10％马血清的DMEM培养基更节省成本,方便廉价.

摘要： 目的：本文旨在研究不同白血病患儿骨髓上清的IL-6含量研究其在白血病患儿中的分布特点,研究不同患儿MSCs培养液上清IL-6的含量研究不同患儿MSCs上清的分泌特点.rn 方法：白血病患儿骨髓中分离单个核细胞，体外培养间充质干细胞，用流式细胞仪鉴定MSC表面CDI05、CD73、CD90、CD45、CD34、CDI4、CD19、HLA-DR抗原鉴定，酶联免疫法检测非白血病和自血病儿童骨髓上清及骨髓分离培养的MSC上清中IL-6的含量。rn 结果：MSC阳性表达CD90,CDlO,CD73,而(CD34.CD45,HLA-DR,CD14,CD19.CD79a,CD11b则呈阴性。不同性别、年龄儿童骨髓上清IL-6水平的差异无统计学意义;非白血病患儿与处于完全缓解期的自血病患儿骨髓1L-6水平的差异无统计学意义。rn 结论：急性白血病患儿的骨髓IL-6异常升高，可能与其白血病类型及肿瘤负荷有关。

摘要： 产甲烷古菌是一类能利用简单化合物产生甲烷气体的厌氧菌.近年来,随着测序技术的不断发展,科学家结合宏基因组学和其他技术先后发现了众多之前未被报道的新型产甲烷古菌.基因组分析等研究发现这几类新型产甲烷古菌具有独特的甲烷代谢通路以及广泛的生态分布,科学家推测它们在全球生态调节以及碳循环中可能起到了不可忽视的作用.然而,这些新型产甲烷古菌大部分尚未通过传统培养方法获得纯培养菌株,其确切的生理代谢机制和生态功能还有待深入研究.为了更加系统地了解这些新型产甲烷古菌,本文从它们的分类、系统发育地位、代谢机制、生态分布以及分离培养等方面进行了综述,并对新型产甲烷古菌未来的研究方向进行了展望.

摘要： 从贵州六盘水烟区采集感病烟株,采用组织分离法进行了病原菌分离纯化,并将培养条件进行优化,以南江3号烟草品种为试材,进行了病原菌致病性测定.结果表明,该菌培养最适盐浓度4％,糖浓度10％左右,pH5～7,培养温度25～30°C,最佳侵染温度20～25°C,相对湿度70％以上,该病害应属于中温高湿侵染病害.

摘要： 目的：本研究旨在建立一种简单易行、获得细胞纯度较高的体外分离、培养大鼠肺微血管内皮细胞的方法. 方法：取5～7日龄SD大鼠分离外周肺组织,组织植块法获得原代大鼠肺微血管内皮细胞,37°C、5％CO2培养箱中传代培养,采用免疫磁珠法对其进行分离纯化,并对分离纯化后的细胞进行免疫荧光及流式细胞鉴定,通过MTT比色分析法准确、安全、可靠地检测纯化后传代肺微血管内皮细胞的增殖情况. 结果：倒置显微镜下观察单个细胞呈短梭形或多角形,汇合后呈铺路石样,单层贴壁生长,细胞分离纯化后经免疫荧光检测CD31呈阳性,流式细胞仪检测淋巴管内皮细胞表面特有标记VEGFR-3呈阴性(P=0.1,且P＜0.5),且复苏后经MTT测得传代细胞的增殖情况良好. 结论：试验成功建立了一种分离高纯度大鼠肺微血管内皮细胞的体外培养方法.

摘要： 为了探究从何种类型的自然生境中更易分离得到溶藻微生物,采用高氏培养基分别从水库底泥、湖库底泥、农田土壤、林地土壤四种来源共36份样品中分离了7600株菌,进一步,从中筛选得到了5株溶铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)的溶藻菌,其中4株为假单胞菌,1株为黄杆菌,5株菌的溶藻效率的变化范围为62.3～95％.上述结果说明:当采用高氏一号培养基作为分离培养基时,湖库泊底泥中的成功筛选概率最高,农田土壤次之,而林地土壤中则难以筛选得到,假单胞菌是较容易筛选得到的溶藻菌.

摘要： 为寻找一种经济、可重复的鸭心肌细胞最适培养技术,利用胰蛋白酶消化法和差速贴壁法分离樱桃谷鸭心肌细胞,并对培养条件和生长特性进行摸索.用台盼蓝染色法检测培养细胞的活性,用HE染色法检测培养细胞的形态,并用抗α-actin蛋白免疫组织化学染色法鉴定培养的心肌细胞.结果表明,通过差速贴壁法分离的心肌细胞在前3代可观察到节律性搏动.α-actin染色阳性,心肌细胞数量较大,活力高,形态呈梭形、星形和多角形.证实,通过酶消化法和差速贴壁法分离到的鸭心肌细胞,可连续传代至12代,细胞纯度及数量能满足心肌细胞研究的需要,为一种可行的鸭心肌细胞培养方法.

摘要： 本研究选取吉林省松原地区的8个候鸟品种(白骨顶鸡、凤头浅鸭、螺纹鸭、绿头鸭、雀鸭、针尾鸭、花脸鸭和红头浅鸭)和留鸟共326份肠道内容物为研究对象，采用含头孢噻肪(4μg/mL)的科玛嘉显色培养基分离培养肠道β-内酸胺耐药细菌，并对所有分离菌株进行16SrRNA基因和rpoB基因PCR扩增测序鉴定，共分离鉴定273株细菌，其中假单胞菌属82株(30%)，肉杆菌属72株(26%)，哈夫尼亚菌属25株(9%)，水拉恩菌属21株(7%)，大肠杆菌18株(6%),肠球菌属10株(4%)，其它菌属45株(16%)。为了阐明耐头抱味肪分离菌株的耐药机制，本研究设计合成TEM,SHV,CTX,AmpC等耐药基因检测引物，对所有革兰氏阴性耐药菌株进行了PCR扩增，并对产物进行测序。结果表明，14株大肠杆菌同时携带TEM,SHV,CTX-M 9基因，23株哈夫尼亚菌均携带ACC基因，1株水拉恩菌携带CTX-M 9基因。研究结果表明，从本次收集的候鸟肠道内容物样品中分离的细菌为肠道常在菌群，与家畜家禽肠道常在菌群相比，候鸟肠道样品中哈夫尼亚菌和水拉恩菌比例较大，大肠杆菌比例偏小。造成该现象的原因可能与本次采样候鸟多为水禽，生活环境和食物来源与家畜家禽有较大差别，这些鸟类的采食地为远离人群的环境，其食物来源相对清洁，受到耐药菌污染的机会较少，这与家畜中携带大量ESBL表型菌有着明显的不同。耐药基因检测结果表明，分离到的假单胞菌属没有发现ESBL耐药基因，导致其产生耐头袍咪肪表型的机制可能与细菌固有耐药或其他耐药机制如外排泵或膜蛋白变异等有关。耐头袍咪肪的大肠杆菌携带多个耐药基因，是导致其耐药特性的主要原因，也表明候鸟的食物链也受到了一定的污染。本实验进一步证明所有哈夫尼亚菌属分离株均携带ACC基因，且所有ACC基因与gdha基因相连，人们已经发现哈夫尼亚菌的ACC基因为目前存在于在多种肠杆菌科中的 ACC基因的祖先，该基因在一定条件下，被插入序列切割后成为可移动的耐药基因水平传播;本实验还发现了携带耐药基因的水拉恩菌。

摘要： 猪流行性腹泻是严重危害养猪业的主要传染病之一.本文概述了猪流行性腹泻病毒实验室检测方法的研究进展.在细胞生物学方面,主要依靠病毒分离培养、病毒电镜形态检查、病毒特异性抗原及其抗体的检查等.在分子生物学方面,主要依靠国内外相继建立起核酸杂交技术、RT-PCR法和实时荧光定量RT-PCR法等.介绍和比较了各种方法的优缺点和实用性,为临床兽医科技工作者建立快速、简便、准确、实用的检测方法提供参考.

摘要： 利用不同倍性西瓜不同的耐盐特性,选取生长一致的不同倍性西瓜子叶再生的不定芽丛,接于含不同浓度NaCl的芽诱导培养基中,盐处理30d后,统计盐害情况和生长状况,并对四倍体西瓜子叶不定芽丛进行分离和筛选.结果表明:分离二倍体和四倍体从而最终筛选出大量的能够正常生长发育的四倍体不定芽丛的最适盐浓度范围在14-16g/L.本研究为西瓜多倍体育种提供了科学依据.

摘要： 本发明涉及用于人心肌细胞分离的试剂、培养基及分离和培养方法。本发明的人心肌细胞分离试剂含有(‑)‑Blebbistatin，人心肌细胞培养基含有(‑)‑Blebbistatin或para‑aminoblebbistatin。通过采用本发明试剂、培养基及分离和培养方法，能够在分离和培养中将细胞维持在最佳状态、保持细胞形态、存活率和纯度。

摘要： 本发明公开了一种大型蚤的培养分离装置，它包括藻类生长促进装置，置于藻类生长促进装置中的大型蚤培养容器，置于大型蚤培养容器内的循环水装置，以及蚤分离装置。本发明还公开了利用上述装置进行大型蚤的培养分离方法。本发明简便易行，可操作性强，所用材料易于获取，结构简单、制造和维护方便。本发明所采用培养容器一次成形且体积小，避免了其它物质的污染且易于更换，方便继代培养；蚤类食物生长促进装置，利于蚤类食物藻的生长繁殖，省去每天饲喂工作；循环水装置减少了蚤类培养过程中所需的曝气步骤；分离装置避免了蚤类在分离过程中离开水面，保证了蚤类的大量快速分离。本发明的应用将使蚤类毒性实验质量得以保证。

摘要： 本文描述的是分离的细胞培养物组分，例如生物制品和/或脂质，以及用于从液体细胞培养基中分离细胞培养物组分的方法。本发明的方法可以包括使脱水组合物和包含靶组分的液体细胞培养基接触，以形成混合物；在混合物中形成至少部分脱水的组分；并且从混合物中分离至少部分脱水的组分，从而提供分离的组分。在一些实施方案中，分离的组分包含至少部分脱水的组分。在一些实施方案中，分离的组分存在于与至少部分脱水的组分分开的组合物(例如，液相)中。

摘要： 本发明涉及用于人心肌细胞分离的试剂、培养基及分离和培养方法。本发明的人心肌细胞分离试剂含有(‑)‑Blebbistatin，人心肌细胞培养基含有(‑)‑Blebbistatin或para‑aminoblebbistatin。通过采用本发明试剂、培养基及分离和培养方法，能够在分离和培养中将细胞维持在最佳状态、保持细胞形态、存活率和纯度。

摘要： 本发明公开了一种大型蚤的培养分离装置，它包括藻类生长促进装置，置于藻类生长促进装置中的大型蚤培养容器，置于大型蚤培养容器内的循环水装置，以及蚤分离装置。本发明还公开了利用上述装置进行大型蚤的培养分离方法。本发明简便易行，可操作性强，所用材料易于获取，结构简单、制造和维护方便。本发明所采用培养容器一次成形且体积小，避免了其它物质的污染且易于更换，方便继代培养；蚤类食物生长促进装置，利于蚤类食物藻的生长繁殖，省去每天饲喂工作；循环水装置减少了蚤类培养过程中所需的曝气步骤；分离装置避免了蚤类在分离过程中离开水面，保证了蚤类的大量快速分离。本发明的应用将使蚤类毒性实验质量得以保证。

摘要： 本说明书提供：一种分离血管内皮细胞的纯培养物的方法，该方法能够在从由人多能干细胞分化的内皮细胞谱系的细胞系中分离在特定时间粘附在基质上的同质内皮细胞；一种维持血管内皮细胞特性的培养基，其包括通过该方法分离的高纯度血管内皮细胞，4ng/ml至6ng/ml的FGF2、5ng/ml至10ng/ml的EGF、10ng/ml至30ng/ml的VEGF‑A、20ng/ml至50ng/ml的抗坏血酸和DMEM/F‑12作为活性成分；以及包括它们的培养方法。

摘要： 本发明涉及细胞培养技术领域，尤其涉及一种细胞分离培养液和T细胞分离培养的方法。本发明公开了一种细胞分离培养液。本发明中，培养液A、培养液B和培养液C，三种培养液协同配合，共同作用，有利于刺激单核细胞向CIK细胞进行转化。通过向血细胞中加入中性粒细胞分离液，从而减少细胞中中性粒细胞的含量。使用中性粒细胞分离液提取单个核细胞后，使用红细胞裂解液去除单个核细胞层中大部分红细胞，明显减少单个核细胞中的红细胞含量，提高淋巴细胞数量。最终培养后细胞中有效细胞比例增加，增加细胞群的杀瘤活性。

摘要： 本发明公开了刺激Th1细胞增殖活化的肠道微生物的分离培养基及分离培养方法，所述培养基包括以下原料：9g‑19g琼脂、34g‑36g脑心浸液培养基、4g‑5.5g酵母提取物、0.3g‑0.5g半胱氨酸盐酸盐、8g‑10g胆汁盐、7g‑13g葡萄糖、0.3g‑0.6g柠檬酸铁铵、0.1mL‑1.2mL盐酸、0.02g‑1.0g维生素K、0.1g‑1.2g血红素、1mg‑7mg庆大霉素、40mg‑135mg卡那霉素、8mg‑42mg新生霉素、蒸馏水1000mL。本发明还提供了刺激Th1细胞增殖活化的肠道微生物的分离培养方法，使其分离菌种纯度高，提高免疫力效果显著。

摘要： 本发明涉及一种猪肌源性间充质干细胞分离培养基及分离培养方法，属于干细胞技术领域，所述培养基以含胎牛血清的α‑MEM培养基为基础培养基，所述基础培养基中还含有成纤维生长因子4、烟酰胺和血小板源性生长因子。进行细胞分离培养时，首先通过胶原酶消化法，在无菌条件下从猪肌组织中进行间充质干细胞分离，然后利用所述的猪肌源性间充质干细胞分离培养基进行连续纯化培养。本发明通过在培养基中添加活性成分，使其在较低成本和较为简单易行的基础上获得猪肌源性间充质干细胞，同时提高其分裂增殖能力和传代培养的能力。

摘要： 本发明公开了一种从天然冬虫夏草中分离培养的新菌株及其人工分离培养方法和用途。菌种保藏号为CGMCC NO.0706，其形态特征为：在PDA培养基上25°C培养10天，菌落圆形，平铺，局限，有环纹及皱折，最初白色，后灰白色，直径1.5～2.2cm，背面灰褐色至紫褐色；菌丝无色，分枝，具隔膜，宽1～2.5μm；孢梗束白色，分枝，高0.5～3.5cm,直径0.2－1.5mm。本发明的干燥物品具有抑制肿瘤的作用，因此可用于制备抗肿瘤药物。本发明为人们提供了一个新的可工业化生产的菌株，其菌株稳定，具有抗肿瘤活性，同时具有与天然冬虫夏草相近的活性成分。它为人们提供了一种可选用的新品种，也为抗癌药物提供了一种新原料。