脂肪间充质干细胞来源外泌体对脊髓损伤大鼠巨噬细胞极化及胶质瘢痕形成的影响

摘要

目的探讨脂肪间充质干细胞(ADMSC)来源外泌体对脊髓损伤大鼠巨噬细胞极化及胶质瘢痕形成的影响。方法提取ADMSC来源外泌体并鉴定。选取36只大鼠,分为假手术组(仅切除T9椎板+注射等量生理盐水)、脊髓损伤组(建模+注射等量生理盐水)、外泌体组(建模+注射100μg/kg外泌体),每组各12只,采用钳夹脊髓法建立脊髓损伤大鼠模型。使用BBB评分评估大鼠后肢运动功能,酶联免疫(ELISA)法检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-4、IL-6、IL-10水平,对脊髓组织行尼氏染色,Western Blot法检测脊髓组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶-1(Arg-1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、波形蛋白(vimentin)蛋白表达。结果经透射电镜观察及CD63、Alix蛋白检测鉴定,成功提取到ADMSC来源外泌体。与假手术组相比,脊髓损伤组大鼠BBB评分显著降低(P<0.05),血清IL-1β、IL-6、IL-4、IL-10水平及脊髓组织中iNOS、Arg-1、GFAP、vimentin蛋白水平均显著升高(P<0.05),脊髓组织中神经细胞严重损伤,可见大量胶质瘢痕组织堆积;与脊髓损伤组相比,外泌体组大鼠BBB评分、血清IL-4、IL-10水平及脊髓组织中Arg-1蛋白水平显著升高(P<0.05),血清IL-1β、IL-6水平及脊髓组织中iNOS、GFAP、vimentin蛋白水平显著降低(P<0.05),脊髓组织中神经细胞损伤及胶质瘢痕组织堆积减轻。结论ADMSC来源外泌体可改变脊髓损伤大鼠巨噬细胞极化方向,并抑制胶质瘢痕形成。