局灶性脑缺血

摘要： 目的研究意向性运动干预治疗对大脑局部缺血大鼠行为学及梗死灶周围组织中GluA2和Ncadherin表达的影响。方法利用鱼线栓堵法将大鼠制成大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型共144只,随机分成模型(MCAO)组、生活环境变化(environment modification,EM)组、普通康复训练(control rehabilitstion,CR)组和意向性运动干预(willed movement,WM)组,每组根据术后时间划分为7 d、15 d、30 d 3个亚组。对各组研究对象的行为变化进行观察分析,通过免疫组化技术研究脑梗死灶周围组织中GluA2和N-cadherin蛋白水平。结果再灌7 d、15 d、30 d,意向性运动干预组的攀爬频率显著高于EM及CR组(P<0.01);再灌30 d,和MCAO组相比,意向性运动干预组的神经功能缺损评分更低(P<0.05);而其缺血半暗带区域GLUA2、N-cadherin蛋白表达量都更高(P<0.05)。结论对于大脑局部缺血所导致的神经功能障碍,意向性运动干预治疗可促进其恢复,这可能是因为该运动可激活缺血半暗带中GLUA2和N-cadherin的表达,提高突触可塑性。

摘要： 目的 观察牡荆素对局灶性脑缺血(MCAO)模型大鼠脑组织炎症及神经损伤的保护作用,并通过核转录因子-κB(NF-κB)信号通路探讨其作用机制。方法 120只雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、阳性对照组、牡荆素低剂量组(5 mg/kg)、牡荆素高剂量组(10 mg/kg),以尼莫地平为阳性对照药物(12 mg/kg)。除正常组外,其余各组大鼠采用大脑中动脉线栓法建立MCAO模型。连续灌胃治疗14 d后,采用Longa评分法评价各组大鼠神经功能缺损情况;干/湿重法测定脑组织含水量;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法观察脑梗死体积;苏木精-伊红(HE)染色观察海马组织神经元损伤程度;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中炎性因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;蛋白质印迹法(Western Blot)及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测海马组织中NF-κB p65、NF-κB抑制蛋白(IκB-α)α、NF-κB抑制蛋白激酶β(IκK-β)的蛋白及mRNA表达。结果 与正常组相比,模型组大鼠出现明显神经功能缺陷,脑梗死体积及脑组织含水量明显增加,海马区可见神经元损伤明显,血清中IL-6、IL-1β及TNF-α水平明显升高,海马组织中NF-κB p65、IκK-β的蛋白及mRNA表达明显增加,IκB-α的蛋白及mRNA表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。牡荆素能明显改善MCAO大鼠的神经功能评分,降低脑组织含水量及脑梗死体积,改善海马区神经元损伤,降低血清IL-6、IL-1β及TNF-α水平,减少海马组织中NF-κB p65、IκK-β的蛋白及mRNA表达,增加IκB-α的蛋白及mRNA表达,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 牡荆素能够明显改善MCAO大鼠的神经功能,抑制炎症反应,减轻神经元损伤,其作用可能与抑制NF-κB信号通路的激活相关。

摘要： 目的探究长链非编码RNA(LncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)调控微小RNA(miR)-137参与局灶性脑缺血大鼠神经损伤的作用。方法双荧光素酶鉴定miR-137与TUG1的靶向位点;Longa线栓法建立局灶性脑缺血大鼠模型,模型成功大鼠随机分为模型组、si-NC组(10μL si-NC)、si-TUG1组(10μL si-TUG1)、si-TUG1+anti-miR-NC组(si-TUG1和anti-miR-NC各10μL)、si-TUG1+anti-miR-137组(si-TUG1和anti-miR-137各10μL),每组12只。另取12只设为假手术组。5 d 1次,注射3次,第16天检测。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测海马区TUG1、miR-137水平情况;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测脑梗死情况;苏木精-伊红(HE)、尼氏染色观察海马神经元形态;蛋白质免疫印迹(Western blot)实验检测海马区蛋白酪氨酸激酶1(JAK1)、信号转导子和转录激活子1(STAT1)、B淋巴细胞瘤-2基因(BCL2)、BCL2相关X蛋白(BAX)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase3)蛋白水平。结果Starbase分析发现miR-137与TUG1存在互补的结合位点,并经双荧光素酶验证。模型组海马区神经元层次紊乱,神经元数量减少、间隙变大、部分出现神经元胞核固缩或溶解、核仁消失等现象,尼氏体数量减少;si-TUG1组神经元数量有所增加、神经元形态有所恢复,尼氏体数量增多;si-TUG1+anti-miR-137组相较于si-TUG1组神经元形态破坏严重,间隙变大、数量减少。与假手术组相比,模型组、si-NC组海马区TUG1水平、JAK1、STAT1、BAX、caspase3蛋白水平,脑梗死体积升高(P<0.05),海马区miR-137水平、BCL2蛋白水平降低(P<0.05);分别与模型组、si-NC组相比,si-TUG1组、si-TUG1+anti-miR-NC组海马区TUG1水平、JAK1、STAT1、BAX、caspase3蛋白水平,脑梗死体积降低(P<0.05),海马区miR-137水平、BCL2蛋白水平升高(P<0.05);分别与si-TUG1组、si-TUG1+anti-miR-NC组相比,si-TUG1+anti-miR-137组海马区TUG1水平、JAK1、STAT1、BAX、caspase3蛋白水平,脑梗死体积升高(P<0.05),海马区miR-137水平、BCL2蛋白水平降低(P<0.05)。结论干扰TUG1可上调miR-137实现对局灶性脑缺血大鼠神经元形态及凋亡的缓解,从而实现对神经损伤的保护。

摘要： 目的 观察磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路在槐定碱发挥抗炎保护大鼠脑缺血损伤中的作用.方法 将70只SD大鼠随机分成假手术组、模型组和低、中、高剂量实验组,每组14只.低、中、高剂量实验组均按1.0 mL·kg-1的剂量腹腔注射浓度分别为2.5,5.0和10.0 mg·mL-1的槐定碱溶液;假手术组和模型组均给予腹腔注射等体积0.9％NaCl.5组大鼠每天给药1次,连续给药5d.模型组和实验组在第5天给药后立即构建永久性大脑中动脉栓塞(pMCAO)模型.用比色法检测大鼠脑组织髓过氧化物酶(MPO)的含量,用酶联免疫吸附法检测脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6的含量,用蛋白质印迹法检测缺血皮质磷酸化PI3 K(p-PI3 K)和磷酸化Akt(p-Akt)的表达水平.结果 假手术组、模型组和低、高剂量实验组的MPO含量分别为(0.15±0.03),(0.45±0.09),(0.37±0.12)和(0.21±0.09)U·g-1 Pro,TNF-α分别为(131.92±19.83),(246.95±41.42),(212.07±33.90)和(157.53±34.11)pg·mL-1,IL-1β分别为(87.91±13.91),(145.33±16.88),(126.01±23.36)和(103.57±17.78)pg·mL-1,IL-6分别为(65.40±9.80),(137.11±19.48),(126.87±19.03)和(81.46±19.19)pg·mL-1,p-PI3K蛋白表达水平分别为0.50±0.08,0.26±0.12,0.46±0.06和0.55±0.09,p-Akt蛋白表达水平分别为0.92±0.09,0.49±0.13,0.63±0.13和0.90±0.16.高剂量实验组的MPO、IL-6、TNF-α、IL-1β、p-PI3K和p-Akt与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 槐定碱可能通过PI3 K/Akt信号通路抑制炎症反应,进而对大鼠局灶性脑缺血发挥神经保护作用.

摘要： 缺血性脑血管疾病是我国甚至世界范围内危害生命健康的重大疾病,目前治疗手段单一并且无法有效治疗病患.缺血性脑血管疾病中局灶性脑缺血最为多见,其治疗窗口相对较短,因此预防和治疗局灶性脑缺血需要充分了解脑缺血发病机制.局灶性脑缺血动物模型是脑缺血发病机制研究及新药开发的必备工具,方便后人在解决脑缺血相关研究问题时,可以更具有针对性的设计实验内容,选择适合的实验动物以及造模方法.本文分析总结了目前实验研究中应用的常用实验动物以及其品系的选择,详细阐述了常用制备局灶性脑缺血模型方法的优缺点;明确了大鼠是制作局灶性脑缺血模型的最为常用的实验动物,制作模型一般采用健康、雄性、体重在250～300 g之间的大鼠;在各种方法中,线栓法是最常用的复制局灶性脑缺血模型的方法,并指出了制作模型时需关注的问题.

摘要： 目的:探讨柚子皮挥发油(PPVO)对于局灶性脑缺血再灌注损伤的影响.方法:40只健康雄性大鼠按随机分为假手术(SH)组、模型(NS)组、甘油溶剂组(GL)组、低剂量(LP)组(10 mg/kg)和高剂量(HP)组(30 mg/kg),n=8/组.SH组仅行手术操作,余各组均建立短暂性大脑中动脉堵塞/再灌注(tMCAO/R)模型,并于再灌注时立即腹腔注射药物.观察再灌注24 h后神经功能学评分,通过2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测梗死面积,HE染色、尼氏染色观察病理形态学变化,免疫荧光染色观察星形胶质细胞标志物酸性胶质纤维蛋白(GFAP)和小胶质细胞标志物离子钙接头蛋白1(Iba 1)的表达情况.结果:再灌注24 h后,与NS组相比,HP组大鼠NDS明显下降,梗死面积显著减小,病理损伤改善,正常神经元明显增多,胶质细胞激活减少(P<0.05).结论:PPVO(30mg/kg)可减轻局灶性脑缺血后病理损伤,减少梗死面积,并抑制星形和小胶质细胞的激活.

摘要： 目的 研究银杏二萜内酯葡胺注射液对局灶性脑缺血大鼠沉默信息调节因子2相关酶1/缺氧诱导因子-1α/血管内皮生长因子(SIRT1/HIF-1α/VEGF)信号通路及突触可塑性的影响.方法 SD大鼠随机分为假手术组(等量生理盐水)、模型组(等量生理盐水)、尼莫地平组(16.2 mg·kg-1)、银杏二萜内酯葡胺注射液低(1.3 mg·kg-1)、中(2.6 mg·kg-1)、高(5.2 mg·kg-1)组,模型组、尼莫地平组、银杏二萜内酯葡胺注射液低、中、高组采用大脑中动脉栓塞(MCAO)建立局灶性脑缺血大鼠模型,假手术组只分离颈总动脉及颈内、颈外动脉.术后24 h用药干预,每天1次,连续7 d.评估术后24 h、7 d各组大鼠神经功能缺损评分,检测脑含水量及脑梗死率,采用免疫印迹(WB)法检测缺血侧脑组织突触后密度蛋白-95(PSD-95)、突触素(SYN)及SIRT1、HIF-1α、VEGF蛋白表达量.结果 术后7 d,与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、脑梗死率显著增加(P<0.05),脑组织SIRT1、HIF-1α、VEGF、PSD-95、SYN蛋白表达量显著降低(P<0.05);与模型组比较,尼莫地平组、银杏二萜内酯葡胺注射液低、中、高组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、脑梗死率显著降低(P<0.05),脑组织SIRT1、HIF-1α、VEGF、PSD-95、SYN蛋白表达量显著升高(P<0.05),其中银杏二萜内酯葡胺注射液中、高组依次优于尼莫地平组(P<0.05).结论 银杏二萜内酯葡胺注射液可对抗局灶性脑缺血,改善大鼠神经功能,可能与促进SIRT1/HIF-1α/VEGF信号通路激活及脑缺血后突触可塑性形成有关.

摘要： 目的 探讨同型半胱氨酸(Hcy)干预通过DNA甲基化途径对于局灶性脑缺血大鼠大脑皮质区神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响.方法 将36只健康雄性成年清洁级Sprague Dawley(SD)大鼠完全随机分为假手术组、大脑中动脉闭塞(MCAO)模型组(MCAO组)、Hcy+MCAO组,每组12只.在MCAO建模手术之前的7 d内,假手术组与MCAO组腹腔注射等渗盐水[5 ml/(kg·d)],Hcy+MCAO组注射2％Hcy溶液[5 ml/(kg·d)].采用改良Longa法构建MCAO模型.在MCAO模型建立后第5天开始,连续3 d注射5-溴-2-脱氧尿嘧啶[BrdU,50 mg/(kg·d)]标记新生成的神经细胞.MCAO手术后7 d,苏木素-伊红染色观察大脑皮质区的病理变化.分别在手术后7 d和14 d采用免疫荧光双标双皮质素(DCX)/BrdU、神经元核蛋白(NeuN)/BrdU检测内源性NSCs的增殖和分化情况,采用免疫荧光双标DCX/5-甲基胞嘧啶(5mC)和NeuN/5mC检测大脑皮质DNA甲基化水平.结果 3组大鼠大脑皮质区正常神经细胞数量差异有统计学意义(F=49.55,P<0.01),MCAO组正常神经细胞数量[(54±10)个/视野]明显少于假手术组[(99±13)个/视野],Hcy+MCAO组正常神经细胞数量[(32±8)个/视野]明显少于MCAO组,差异均有统计学意义(均P<0.05).MCAO组皮质区DCX+/BrdU+、NeuN+/BrdU+、DCX+/5mC+和NeuN+/5mC+数量[分别为(7.8±1.1)、(9.3±0.9)、(8.3±0.5)和(9.7±1.8)个/mm2]较假手术组均增多[分别为(0.5±0.5)、(0.5±0.5)、(1.8±0.7)、(2.2±0.7)个/mm2;均P<0.05],Hcy+MCAO组上述阳性细胞数量[分别为(3.7±0.8)、(2.8±0.7)、(2.5±0.5)和(2.5±1.0)个/mm2]均较MCAO组少(均P<0.05).结论 Hcy水平升高可能降低MCAO大鼠大脑皮质区DNA甲基化水平并抑制其神经发生.

摘要： 目的 探讨长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(Long non-coding RNA taurine upregulation gene 1,LncRNA TUG1)调控微小RNA(MicroRNA,miR)-137参与局灶性脑缺血大鼠神经损伤的作用机制.方法 将大鼠分为假手术组、模型组、过表达LncRNA TUG1组、敲低LncRNA TUG1组、空质粒(NC)组;Longa法评估大鼠神经功能;大鼠脑组织称重,计算脑组织含水量;脑组织2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色观察脑梗死情况;脑组织尼氏染色观察海马CA1区神经细胞受损情况;比色法检测脑组织中半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Cysteing aspartate-spe-cific protease,Caspase)-3和Caspase-9活性;实时定量聚合酶链反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测脑组织中LncRNA TUG1和miR-137的表达水平;双荧光素酶法检测TUG1和miR-137靶向关系;蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)检测脑组织中丝裂原活化蛋白激酶激活蛋白激酶2(Mitogen-activated protein kinase activated protein kinase 2,MK2)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleu-kin-6,IL-6)的表达水平.结果 与假手术组比较,模型组、NC组神经功能损伤评分、脑梗死占比、Caspase-3和Caspase-9活性、LncRNA TUG1以及MK2,TNF-α,IL-6表达水平均显著升高,miR-137表达水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,过表达LncRNA TUG1组神经功能损伤评分、脑梗死占比、Caspase-3和Caspase-9活性、LncRNA TUG1以及MK2,TNF-α,IL-6表达水平均显著升高,miR-137表达水平显著降低(P<0.05),敲低LncRNA TUG1组神经功能损伤评分、脑梗死占比、Caspase-3和Caspase-9活性、LncRNA TUG1以及MK2,TNF-α,IL-6表达水平均显著降低,miR-137表达水平显著升高(P<0.05).结论 Ln-cRNA TUG1通过抑制miR-137表达来调控MK2介导的炎症反应,从而促进局灶性脑缺血大鼠神经损伤.

摘要： 目的 探究电针对局灶性脑缺血大鼠突触可塑性及小胶质细胞极化,并检测miR-21/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路表达情况.方法 颈外动脉远端用细线双重结扎60 min构建局灶性脑缺血大鼠模型,神经功能缺损评分评价模型制备情况,模型成功大鼠分为模型组、电针组、尼莫地平组,同时假手术组对照处理.治疗3周结束后神经功能缺损评分评估各组大鼠脑损伤程度;2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色测定各组大鼠脑梗死体积;电镜观察脑皮层突触超微结构并行形态计量学分析;免疫荧光染色观察脑皮层小胶质细胞极化情况;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定各组大鼠脑皮层中miR-21水平;蛋白印迹法测定各组大鼠脑皮层中Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)、p-JAK2、STAT3、p-STAT3水平.结果 与假手术组相比,模型组大鼠神经功能缺损评分、梗死体积、脑皮层区M1型小胶质细胞数量、miR-21、p-STAT3、p-JAK2水平显著升高(P<0.05),脑皮层区M2型小胶质细胞数量、突触面数密度(Nv)、突触体密度(Vv)、突触连接带面密度(Sv)、突触后致密物质(PSD)、突触界面曲面率、突触间隙宽度明显降低(P<0.05);与模型组相比,电针组和尼莫地平组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积、M1型小胶质细胞数量、miR-21、p-STAT3、p-JAK2水平显著降低(P<0.05),M2型小胶质细胞数量、Nv、Vv、Sv、PSD、突触界面曲面率、突触间隙宽度显著升高(P<0.05).结论 电针可促进局灶性脑缺血大鼠突触重建,诱导小胶质细胞由M1向M2型极化.

摘要： 目的：探讨仙茅提取物对局灶性脑缺血模型大鼠脑组织损伤的保护作用. 方法：32只雄性Wistar大鼠分为假手术组、模型组和仙茅提取物高、低剂量组,用线栓法复制大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,观察各组大鼠脑组织缺血后组织学改变,检测各组大鼠脑组织超氧化物岐化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量. 结果：MCAO模型组大鼠顶颞皮层及基底节外侧部分脑组织可见明显坏死灶,行为学障碍明显,给药组大鼠组织学及行为学改变明显减轻;与假手术组比较,模型组大鼠脑组织SOD活力下降,MDA含量明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05);仙茅提取物低剂量组大鼠脑组织SOD活力明显增加,MDA含量明显降低,与模型组大鼠比较,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论：仙茅提取物通过提高大鼠脑缺血区脑组织损伤SOD活力进而降低其自由基含量实现其保护脑组织作用.

摘要： 目的：探讨高压氧联合粒集落细胞刺激因子(G-CSF)干预对于永久性局灶性脑缺血(PMCAO)大鼠的神经保护作用,并对其机制进行初步探讨. 方法：将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、高压氧干预组(HBO组)、粒集落细胞刺激因子干预组(G-CSF组)和高压氧联合G-CSF干预组(HBO+G-CSF组).制作大鼠PMCAO模型,分别给予高压氧和G-CSF干预.使用神经功能评分、HE染色对高压氧和G-CSF以及二者联合使用在永久性局灶性脑缺血损伤中的作用进行评价,免疫组化检测Bax、Bcl-2和PCNA表达情况. 结果：与假手术组相比,PMCAO模型大鼠出现神经功能缺损症状,与模型组比较HBO+G-CSF组大鼠神经功能评分在48小时和7天有明显改善,皮质坏死深度明显降低,具有统计学差异;Bcl-2/Bax比值明显增加,血管内皮细胞PCNA阳性表达增加. 结论：高压氧联合G-CSF干预对于永久性局灶性脑缺血大鼠具有神经保护作用,其机制可能与抑制神经元凋亡,促进血管再生有关.

摘要： 目的：局灶性脑缺血,在世界各地仍然是导致死亡和残疾的首要原因.骨髓间充质干细胞(bone marrw-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)是已被广泛用于脑梗死治疗研究的一种间充质干细胞,而近几年才受关注的脂肪间充质干细胞(adipose tissue-derivedstem cells,ADMSC)与BMSC相比,在多个方面具备明显的优势,很有希望成为脑梗死治疗的更优选择.尽管目前已有多项研究直接比较了异体BMSC、自体BMSC对心肌缺血动物模型的治疗效果,但迄今未见直接的比较研究探讨脂肪源自体、异体ADMSC在脑梗死治疗中的疗效差别. 方法：本研究中我们比较了自体(Lewis源自体)、异体(BN源异体)ADMSC移植入大脑中动脉缺血再灌注Lewis大鼠模型(MCAO)后,在迁移、存活、凋亡、分化、神经功能改善等方面有何不同,并探讨相关机制. 结果：(1)表达EGFP的慢病毒追踪移植细胞,TUNEL检测结果显示,移植1天后梗死区附近的脑组织中发生凋亡的异体ADMSC的数量约为自体ADMSC的3.19倍(P＜0.01);(2)移植1、7天后,自体ADMSC的存活率显著高于异体ADMSC(P＜0.01),且迁移范围较广;移植28天后仍可见自体ADMSC存活(3.35±0.16％),多分布于海马区,而皮质损伤区较少,并且免疫组化实验显示存活的自体ADMSC中有8.73±0.92％分化为星形胶质细胞(GFAP+),2.14±0.69％分化为神经元.然而此时并未见存活的异体ADMSC;(3)移植后14天、28天的行为学测评结果显示：自体ADMSC治疗组比异体ADMSC治疗组神经功能恢复效果更明显,且差异有统计学意义(P＜0.01),表现为mNSS评分下降更多以及转子杆测试中保持在转轴上运动的时间更长.(4)TTC染色结果显示,移植后28天与MCAO模型对照组(34.69±1.84％)比较,自体ADMSC治疗(24.35±2.14％)比异体ADMSC治疗(28.22±2.38％)更能显著减少相对梗死体积,且这三组间的差异均有统计学意义(P＜0.01). 结论：本研究首次证实了自体ADMSC对MCAO模型大鼠的治疗效果显著优于异体ADMSC.这很可能与免疫排斥反应不利于异体ADMSC存活有关.此外,移植的自体ADMSC除了像异体ADMSC发挥旁分泌生长因子的作用外还发挥了一定的细胞替代效应.明确了自体ADMSC治疗MCAO模型大鼠的优越性并分析其机制,可为确立一种方便且更安全有效的移植治疗脑梗死的方法,及脑梗死的临床治疗提供一定的理论基础.

摘要： 目的:观察脑必通胶囊(Braintone)对局灶性脑缺血大鼠脑血流量及内皮细胞iNOS表达的影响。方法:采用大鼠永久性大脑中动脉阻塞(permanent middle cerebral artery occlusion,pMCAO)模型观察脑必通胶囊350mg/kg、175mg/kg、87.5mg/kg对大鼠局部脑血流量的影响.建立人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)缺氧缺糖模型(oxygen-glucose deprivation OGD).采用Real time PCR技术检测HUVEC iNOS mRNA的表达;应用免疫组织化学法及Western-blotting法检测HUVEC缺氧后 iNOS蛋白水平的变化及脑必通胶囊含药血清对HUVEC iNOS蛋白水平的影响.结果:缺血模型组动物脑血流量较假手术组动物及pMCAO前明显减少.脑必通胶囊可显著增加大鼠的基础脑血流量及pMCAO后大鼠缺血部位的脑血流量.Real time PCR结果表明:HUVEC细胞缺氧3h后,iNOS mRNA出现表达高峰。免疫荧光法证明:对照组HUVEC细胞iNOS主要表达在胞浆中,HUVEC细胞缺氧后12h,iNOS阳性细胞显著增多,且主要表达在细胞核.Western-blotting亦显示:HUVEC细胞缺氧后,iNOS蛋白水平明显增加,12h达高峰.结论:脑必通胶囊对大鼠局灶性脑缺血脑血流量有明显增加作用,其作用机制可能与上调血管内皮细胞iNOS表达有关.

摘要： 目的：研究山茱萸有效成分莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠神经再生的影响.方法：SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、莫诺苷小剂量组(30mg/kg)、莫诺苷中剂量组(90mg/kg)、莫诺苷大剂量组(270mg/kg)、维生素E(VE)(35mg/kg),用线栓阻塞大鼠大脑中动脉制备局灶性脑缺血再灌注模型(middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R),缺血30min后再灌注,给药3d、7d,通过western blot分析跨膜受体卷曲蛋白(Frizzled)、散乱蛋白(Dsh)、腺瘤性结肠息肉病(又结肠腺瘤样息肉)(adenomatous polyposis coli,APC)的表达,研究莫诺苷对神经再生的影响.通过Brdu 50mg/kg,皮下注射,每天两次,连续3天,末次注射后24小时灌流取材.免疫荧光检测法研究神经细胞粘附分子聚唾液酸糖链(PSA-NCAM)以及微管相关蛋白(Microtubule-associated protein-2(MAP-2)两个亚基MAP2a、MAP2b的表达,分析莫诺苷对神经再生是否有促进作用.结果：与模型组比较,莫诺苷大剂量组差异极显著﹙P＜0.001),中剂量组差异极显著﹙P＜0.01).结论：莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠神经再生有促进作用.

摘要： 脑心通胶囊治疗气虚血滞、脉络瘀阻所致脑卒中有良好的效果,但有关其对急性脑缺血损伤后的确切保护作用及机制的动物研究少有报道.现拟采用局灶性大脑中动脉阻断(MCAO)致大鼠局灶性脑缺血的模型,进一步从神经行为学、脑含水量、脑组织病理学、脑内补体C3的表达来研究对脑心通急性缺血损伤后脑组织的保护作用的可能机制,为临床治疗提供理论依据.

摘要： 脑心通胶囊是临床上常用药物,主要治疗气虚血滞、脉络瘀阻所致脑血管病,但其对脑缺血损伤后的确切保护作用及机制的研究较少.本研究采用大鼠局灶性脑缺血模型,探讨核因子-κB(NF-κB)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、补体C3的在局灶性缺血性脑组织的表达及可能机制,并探讨脑心通对上述炎症因子表达的影响,为临床治疗提供理论依据.

摘要： 肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是具有广泛生物学功能的多效细胞因子,主要与炎症及免疫反应有关,在脑缺血后诱发的白细胞浸润和组织损伤中起重要作用.本实验拟采用局灶性大脑中动脉阻断(MCAO)致大鼠局灶性脑缺血的模型,进一步从神经行为学、脑含水量、脑组织病理学、脑内TNF-α的表达来研究脑心通对急性缺血损伤后脑组织的保护作用的可能机制,为临床治疗提供理论依据.

摘要： 缺血性脑梗死严重威胁现代人类的健康和生活,对其防治一直是神经科学领域的研究热点.建立接近临床的实验动物模型对探究脑缺血的病理机制及研发新的治疗药物至关重要.目前脑缺血动物模型分为全脑性和局灶性两种,以后者最常用,并包含血栓法、线栓法、光化学法、开颅机械闭塞法等多种方法.文章总结了不同模型近年来的研究进展以及各自的特点,从而为该疾病模型的制作与研究提供参考.

摘要： 目的:初步探讨"脑心综合征"可能的发生机制,并阐释心安颗粒治疗脑心综合征的可能机制.rn 方法:采用Zea longa法制作大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,以心电图及心肌细胞动作电位APD50、APD90、ERP、APA、VMax为观察指标,以心安颗粒及稳心颗粒作为干预药物,观察治疗前后MCAO大鼠心电图、心肌细胞动作电位的改变.rn 结果:(1)各组大鼠心电图术前:各组大鼠心电图均无明显异常.术后:假手术组大鼠在各时间点心电图均未出现明显异常改变;与假手术组比较,模型组、各组给药大鼠心电图改变所占比例明显升高,差异有显著性(P＜0.01,或P＜0.05).与模型组比较,心安颗粒高、中、低剂量组及对照组出现异常心电图所占比例明显降低,差异有显著性(P＜0.01,或P＜0.05).与低剂量组比较,高剂量组、中剂量组及对照组心电图改变所占比例均降低,差异有统计学意义(P＜0.05);两两比较,中剂量组、高剂量组、对照组心电图改变所占比例组间均无显著性差异(P＞0.05).(2)各组大鼠动作电位:与假手术组比较,模型组大鼠和各给药大鼠APD50、APD90均缩短(p＜0.05),APA减小(p＜0.05),MAP的VMax减小(p＜0.05),差异具有统计学意义.与模型组比较,高剂量组、中剂量组及对照组大鼠APD50、APD90、ERP延长,差异有统计学意义(P＜0.01,或P＜0.05);低剂量组大鼠心室肌APD50、APD90、ERP有一定的延长,但与模型组差异无统计学意义(P＞0.05);与低剂量组比较,高、中剂量组、对照组APD50、APD90、ERP显著延长,差异有统计学意义(P＜0.05);高剂量组、中剂量组、对照组APD50、APD90、ERP组间两两比较,均无显著性差异(P＞0.05).与假手术组比较,模型组及各给药组大鼠APA有一定程度增加(P＜0.05),但组间差异无显著性(P＞0.05).与假手术组比较,模型组、各给药组大鼠VMAx显著增加,且各组间比较差异有显著性(p＜0.05).rn 结论:(1)脑梗死大鼠并发脑心综合征主要表现为心电图的异常,且多种异常心电图表现可并存.以术后24h-48h时间段发生为主.模型大鼠心室肌动作电位APD50、APD90缩短(p＜0.05),APA减小(p＜0.05),MAP的VMAx减小.(2)心安颗粒对模型大鼠心室肌的APD50、APD90有延长作用,对心室肌的APA、MAP的VMAX显著增加.(3)心安颗粒可减轻脑心综合征大鼠心电图的异常发生率,对心肌细胞其保护作用;存在一定的量效关系.

摘要： 本发明涉及一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件，包括手术固定板、四肢固定柱、扩张器固定柱、颈部垫高枕、手术窗扩张器、分离穿线器、颈动脉两端阻断器、穿刺器、栓线。其优点表现在：精简并规范化造模实验用具，保障实验操作更具规范性与可重复性；实验中将鼠颈部置于颈部垫高柱，利于鼠的颈动脉的曝露；手术窗扩张器可以代替弯头细镊，起到固定作用；分离穿线器可以简化上述操作，达到分离、穿线、引线同时进行；穿刺器与栓线形成“套管”结构，针线一体化，伤口小，对外渗血少，且不易误剪血管外膜及神经；不需要使用更多的手术线进行血管结扎操作，不会干扰手术视野；栓线头是类球形，利于栓线在血管中通行，并防止损伤血管壁。

摘要： 本发明公开一种

摘要： 本实用新型涉及一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件，包括手术固定板、四肢固定柱、扩张器固定柱、颈部垫高枕、手术窗扩张器、分离穿线器、颈动脉两端阻断器、穿刺器、栓线。其优点表现在：精简并规范化造模实验用具，保障实验操作更具规范性与可重复性；实验中将鼠颈部置于颈部垫高柱，利于鼠的颈动脉的曝露；手术窗扩张器可以代替弯头细镊，起到固定作用；分离穿线器可以简化上述操作，达到分离、穿线、引线同时进行；穿刺器与栓线形成“套管”结构，针线一体化，伤口小，对外渗血少，且不易误剪血管外膜及神经；不需要使用更多的手术线进行血管结扎操作，不会干扰手术视野；栓线头是类球形，利于栓线在血管中通行，并防止损伤血管壁。

摘要： 本发明涉及毕赤酵母（Pichiapastoris）所表达的重组灵芝免疫调节蛋白（rLZ-8）在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用。rLZ-8能够治疗神经功能损伤，降低脑损伤引起的神经功能评分，减少ED-1阳性细胞数，从而降低炎性反应，并可抑制细胞凋亡。

摘要： 本发明涉及化合物冰片在制药领域的新用途，公开了冰片作为减轻超声靶向微泡破裂技术(UTMD)诱导局灶性脑缺血血脑屏障开放的药物中活性成分的应用。冰片能够减轻UTMD对脑缺血血脑屏障的进一步开放，从而为UTMD作为卒中后辅助性神经保护治疗提供了更安全的策略。

摘要： 本发明涉及败酱草总黄酮在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用，可有效解决从败酱草中提取败酱草总黄酮，实现败酱草总黄酮作为唯一活性成分在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用问题，所述的败酱草总黄酮是，将败酱草粉碎成粗粉，乙醚回流提取脱脂，败酱草药渣挥干乙醚，加质量浓度80%乙醇浸泡，回流提取，过滤，滤液减压回收乙醇至无醇味，加蒸馏水分散至相当于含生药量0.3g/mL的分散液，分散液上AB‑8型大孔吸附树脂，依次用蒸馏水、质量浓度10%乙醇、质量浓度80%乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱液，减压回收乙醇至无醇味，冷冻干燥，粉碎，得败酱草总黄酮，本发明败酱草总黄酮有效用于治疗局灶性脑缺血，开拓了败酱草的新用途和药用价值，是药物上的一大创新。

摘要： 本发明公开了一种治疗局灶性脑缺血再灌注炎症反应的冻干粉剂及其制备方法，该冻干粉剂由Apelin-13、人血清白蛋白、甘露醇、右旋糖酐和精氨酸组成，经过原料混合、活性炭吸附、过滤、微过滤和冻干等步骤制备得到；本发明所述的冻干粉剂及采用本发明制备方法所得的冻干粉剂能明显减少脑梗死体积，对于治疗局灶性脑缺血再灌注损伤具有良好的治疗效果；本发明所述的冻干粉剂及采用本发明制备方法所得的冻干粉剂能降低海马组织内MPO活性，上调APJ蛋白的表达水平，下降Iba1，GFAP及HMGB1蛋白表达水平；抑制中性粒细胞在脑缺血区的激活、黏附、聚集，减少细胞毒性物质的释放，减轻缺血区的炎症反应，发挥神经保护作用。

摘要： 本发明提供了一种受体拮抗剂在治疗局灶性脑缺血损伤中的用途，属于生物医药技术领域，具体包括在大鼠局灶性脑缺血模型中，HAMI 3379侧脑室给药对该脑缺血模型的急性损伤具有保护作用；HAMI 3379腹腔注射给药对急性、亚急性损伤亦有保护作用，并可减轻炎症反应，尤其能抑制小胶质细胞激活；HAMI 3379腹腔注射给药对脑缺血慢性损伤仍具有保护作用，可促进神经功能恢复。

摘要： 本发明涉及槲皮素的新用途，特别是槲皮素涉及用于制备治疗局灶性脑缺血再灌注损伤的药物的用途。本发明还提供了用于制备治疗局灶性脑缺血再灌注损伤的药物优选的槲皮素药物制剂，即槲皮素的DMSO制剂。本发明为有效治疗局灶性脑缺血再灌注损伤、改善患者的认知与运动功能提供了新的途径。

摘要： 本发明涉及毕赤酵母（Pichiapastoris）所表达的重组灵芝免疫调节蛋白（rLZ-8）在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用。rLZ-8能够治疗神经功能损伤，降低脑损伤引起的神经功能评分，减少ED-1阳性细胞数，从而降低炎性反应，并可抑制细胞凋亡。