磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路

摘要： 目的探讨枇杷叶提取物对脂多糖(LPS)诱导的人Ⅱ型肺泡上皮细胞A549增殖、凋亡及氧化应激的影响及其可能作用机制。方法2019年6月至2020年7月,采用LPS诱导的A549细胞建立肺损伤模型(LPS组),同时将正常培养的细胞作为对照组。不同剂量(1 mg/L、2 mg/L、4 mg/L)的枇杷叶提取物处理细胞(LPS+枇杷叶-L组、LPS+枇杷叶-M组、LPS+枇杷叶-H组),添加磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路抑制剂LY294002与枇杷叶提取物处理细胞(LPS+枇杷叶-H+LY294002组);采用MTT法检测细胞增殖;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用2,4-二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(LDH)的含量;采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)的含量;采用硫代巴比妥酸法检测丙二醛的含量;蛋白质印迹法(Westernblotting)检测磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bax)蛋白蛋白表达量。结果与对照组比较,LPS组吸光度[(1.38±0.06)比(0.55±0.02)]及SOD的含量[(81.66±5.36)U/L比(14.65±1.06)U/L]降低,凋亡率[(6.41±0.25)%比(27.43±1.00)%]、Bax蛋白水平及LDH[(242.86±6.09)U/L比(875.92±15.01)U/L]、丙二醛[(121.55±3.17)μmol/g比(424.46±6.48)μmol/g]的含量升高,Bcl-2、p-PI3K[(0.60±0.04)比(0.13±0.01)]、p-Akt[(0.51±0.04)比(0.09±0.01)]蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与LPS组比较,LPS+枇杷叶-M组、LPS+枇杷叶-H组吸光度[(0.55±0.02)比(0.86±0.03)、(1.18±0.05)]及SOD[(14.65±1.06)U/L比(36.84±2.08)U/L、(70.97±3.03)U/L]的含量升高,凋亡率[(27.43±1.00)%比(22.24±0.81)%、(14.78±0.49)%]、Bax蛋白水平及LDH[(875.92±15.01)U/L比(641.95±9.81)U/L、(365.47±7.02)U/L]、丙二醛[(424.46±6.48)μmol/g比(277.94±6.90)μmol/g、(156.30±3.26)μmol/g]的含量降低,Bcl-2、p-PI3K[(0.13±0.01)比(0.32±0.01)、(0.54±0.03)]、p-Akt[(0.09±0.01)比(0.25±0.02)、(0.42±0.03)]蛋白水平升高,均差异有统计学意义(P<0.05);添加LY294002可明显逆转枇杷叶提取物对LPS诱导的A549细胞增殖、凋亡及氧化应激的作用。结论枇杷叶提取物可通过激活PI3K/Akt信号通路减轻LPS诱导的A549细胞增殖抑制、凋亡和氧化应激效应,为探究枇杷叶治疗细菌感染引起的急性肺损伤提供依据。

摘要： 原发性肝癌是常见的影响人类健康的消化系统肿瘤之一,并且磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路与肝癌发生发展紧密相关,阻断该信号通路的中药可能具有潜在的治疗作用。本文从中药复方、单味药、提取物和单体调控PI3K/AKT信号通路在诊治肝癌时发挥的潜在治疗作用出发,对近十年的相关文献进行归纳总结。结果表明,多种中药复方(真武汤、抗癌扶正方等)、单味中药(白花蛇舌草、花蕊石等)、中药提取物(皂荚提取物)和中药单体(党参多糖、佛手柑内酯等)均能够通过调节PI3K/AKT信号通路,减少肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,促进凋亡发生和引起细胞周期阻滞,为中医药治疗本病提供基础和参考。参考文献53篇。

摘要： 目的研究沙利度胺对阿尔茨海默病(AD)线虫模型的改善作用及机制。方法以BR5270品系秀丽隐杆线虫(以下简称“线虫”)为AD模型动物,BR5271品系线虫为对照。利用基础慢反应实验研究沙利度胺(0.5、2.0、6.0、15.0 mg/mL)对BR5270品系线虫运动能力的影响;利用寿命实验研究沙利度胺(0.5、2.0、6.0、15.0 mg/mL)对BR5270品系线虫寿命的影响;利用短期、长期学习记忆实验研究沙利度胺(0.5、2.0、6.0 mg/mL)对BR5270品系线虫学习记忆能力的影响;采用实时荧光定量聚合酶链式反应技术研究沙利度胺(0.5、2.0、6.0 mg/mL)对BR5270品系线虫体内磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路相关基因(Age-1、Akt-1、Gsk-3)和钙蛋白酶同源基因(Clp-1)的mRNA表达的影响。结果经沙利度胺干预后,BR5270品系线虫30 s内的摆动次数显著增加(0.5 mg/mL组除外),10%最大寿命显著延长(仅0.5 mg/mL组),短期、长期学习指数均显著升高(仅6.0 mg/mL组),体内Age-1、Akt-1基因(0.5、2.0 mg/mL组除外)mRNA表达水平均显著升高,Gsk-3(0.5 mg/mL组除外)、Clp-1基因mRNA表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论沙利度胺可改善AD线虫模型的运动障碍,并延长其寿命,增强其学习记忆能力;具体作用机制可能与激活PI3K/Akt信号通路和抑制钙蛋白酶有关。

摘要： 目的分析微小RNA-22(miR-22)对髓母细胞瘤细胞恶性生物学行为的影响,并探讨其可能作用机制。方法采用实时荧光定量PCR法检测正常人神经细胞RGC-5细胞和髓母细胞瘤细胞系UW402、UW473、DAOY和ONS-76细胞中miR-22的表达水平。将DAOY细胞分为对照组、miR-22 NC组、miR-22 mimics组、miR-22 mimics+740Y-P组,分别转染Lipofectamine^(TM) 2000试剂、miR-22 NC、miR-22 mimics、miR-22 mimics,同时,转染24 h后,miR-22 mimics+740Y-P组加入10μmol/L的740Y-P 200μL。采用CCK-8法和Transwell实验分别检测各组细胞的增殖和侵袭能力,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹法检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt蛋白相对表达水平。将20只裸鼠随机分为对照组、miR-22 NC组、miR-22 mimics组、miR-22 mimics+740Y-P组,各5只,分别移植相应组别的细胞后,观察皮下移植瘤体积。结果与正常人神经细胞RGC-5细胞相比,miR-22在髓母细胞瘤细胞系中均呈低表达状态,且在DAOY细胞中的表达水平最低(均P<0.05)。与对照组和miR-22 NC组比较,miR-22 mimics组DAOY细胞的增殖和侵袭能力下降,凋亡率增高,PI3K和Akt磷酸化水平降低,且裸鼠的皮下移植瘤体积减小(均P<0.05);与miR-22 mimics组相比,miR-22 mimics+740Y-P组细胞的增殖和侵袭能力增强,凋亡率降低,PI3K和Akt磷酸化水平升高,且裸鼠的皮下移植瘤体积增大(均P<0.05)。结论上调miR-22表达可抑制髓母细胞瘤细胞恶性生物学行为,其机制可能与调控PI3K/Akt信号通路有关。

摘要： 目的探讨黄芩素通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(BPI3K/Akt)通路对高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞(HK-2)氧化应激和炎症反应的调控作用。方法实验分为5组:正常组HK-2细胞只加入DMEM低糖培养基培养48 h;高糖模型组HK-2细胞在DMEM低糖培养基中加入4×10^(-2)mol/L浓度高糖培养48 h;黄芩素低、中、高剂量组HK-2细胞先分别加入1×10^(-7)mol/L、1×10^(-6)mol/L、1×10^(-5)mol/L黄芩素培养24 h后,再加入4×10^(-2)mol/L浓度高糖继续培养24 h。采用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖率,按照试剂盒说明检测各组细胞中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达量,采用Western blot法检测各组细胞中磷酸化磷酸肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、TNF-α蛋白表达量。结果与正常组比较,高糖模型组细胞存活率明显降低(P<0.05),细胞中ROS、MDA含量及TNF-αmRNA表达量和p-PI3K、p-Akt、TNF-α蛋白表达量均明显升高(P均<0.05);与高糖模型组比较,黄芩素各组细胞存活率均明显升高(P均<0.05),细胞中ROS、MDA含量及TNF-αmRNA表达量和p-PI3K、p-Akt、TNF-α蛋白表达量均明显降低(P均<0.05)。结论黄芩素可能通过抑制高糖诱导的氧化应激反应及PI3K/Akt通路活化来减少炎症因子产生,从而发挥保护HK-2细胞作用。

摘要： 目的观察丹参酮ⅡA对心力衰竭大鼠心室重构和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路的影响,阐明丹参酮ⅡA对心力衰竭的可能作用机制。方法将48只Wistar大鼠采用随机数字表法分为正常对照组(A组)、模型组(B组)和丹参酮ⅡA治疗组(C组),各16只大鼠。采用皮下注射异丙肾上腺素建立心力衰竭大鼠模型。建模后C组大鼠腹腔注射丹参酮ⅡA干预28 d。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、脑钠肽(BNP)水平。测量左心室质量(LVM),计算左室质量指数(LVMI)、球型指数(SI)。苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察心脏组织形态学变化和纤维化情况。蛋白免疫印迹法测定心肌组织Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)、PI3K、磷酸化PI3K(p-PI3K)、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白水平。结果与A组比较,B组大鼠血清AngⅡ、BNP水平、LVMI、LVM、心肌组织ColⅠ、ColⅢ、p-PI3K、p-Akt蛋白含量升高(P<0.05),心肌胶原容积比增加(P<0.05),SI降低(P<0.05);与B组比较,C组大鼠血清AngⅡ、BNP水平、LVMI、LVM、心肌组织ColⅠ、ColⅢ、p-PI3K、p-Akt蛋白含量、心肌胶原容积比降低(P<0.05),SI升高(P<0.05)。HE染色和Masson染色显示:A组心肌组织形态结构正常,B组心肌纤维化和心室重构明显,C组心肌纤维化和心室重构较B组减轻。结论丹参酮ⅡA对心力衰竭大鼠心室重构具有保护作用,可抑制PI3K/Akt信号通路激活。

摘要： 目的探讨Aβ_(1~42)对阿尔茨海默病(AD)小鼠磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/PKB)信号通路的影响。方法雄性小鼠侧脑室注射链脲佐菌素制备AD模型,随机分为:假手术组、模型组、Aβ_(1~42)低剂量(0.015 mg/kg)组、Aβ_(1~42)中剂量(0.050 mg/kg)组、Aβ_(1~42)高剂量(0.150 mg/kg)组、胰岛素组。跳台实验检测小鼠认知功能;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠海马胰岛素受体(InR)的含量;Western印迹法检测小鼠磷酸化蛋白激酶B(p-PKB)、磷酸化糖原合成酶激酶(p-GSK)-3β和磷酸化Tau蛋白(p-Tau)的表达量。结果与假手术组比较,模型组练习错误和记忆错误次数增多、潜伏期缩短(P<0.05);与模型组比较,Aβ_(1~42)不同剂量组练习和记忆错误次数增加、潜伏期缩短(P<0.05),胰岛素组练习和记忆错误次数减少、潜伏期增加(P<0.05)。与假手术组比较,模型组InR表达量降低(P<0.05)。与模型组比较,Aβ_(1~42)不同剂量组InR表达量降低(P<0.05);胰岛素组InR表达量升高(P<0.05)。与假手术组比较,模型组p-PKB、p-GSK-3β蛋白表达量降低,p-Tau表达量升高(P<0.05)。与模型组比较,Aβ_(1~42)不同剂量组p-PKB、p-GSK-3β蛋白表达量降低,p-Tau表达量升高(P<0.05);胰岛素组p-PKB、p-GSK-3β的表达量升高,p-Tau表达水平降低(P<0.05)。结论Aβ_(1~42)能够产生神经毒性,诱导小鼠认知功能障碍,其机制可能为干扰PI3K/PKB信号通路传导,下调InR表达,抑制PKB和GSK-3β磷酸化,使AD小鼠Tau蛋白磷酸化水平增加,导致认知功能障碍。

摘要： 目的探讨丙泊酚对过氧化氢诱导的大鼠肝Kupffer细胞氧化应激损伤及磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响。方法从SD大鼠肝组织中分离出Kupffer细胞。用100μmol/L过氧化氢诱导Kupffer细胞建立氧化应激损伤细胞模型,并随机分为模型组、丙泊酚低浓度组、丙泊酚中浓度组、丙泊酚高浓度组和阳性对照组,另取正常Kupffer细胞作为对照组。对照组和模型组均以不含丙泊酚的细胞培养液培养,丙泊酚低、中、高浓度组分别以含5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L丙泊酚的细胞培养液培养,阳性对照组以含0.1μmol/L盐酸右美托咪定的细胞培养液培养。培养12 h后,检测细胞活性、细胞凋亡率,细胞中乳酸脱氢酶(LDH)释放量、活性氧簇含量、过氧化氢酶(CAT)活性、PI3K和Akt磷酸化水平。结果与对照组相比,模型组Kupffer细胞活性、CAT活性、PI3K和Akt的磷酸化水平均降低,凋亡率、LDH释放量、活性氧簇含量均升高(均P<0.05);与模型组相比,阳性对照组、丙泊酚低、中浓度组Kupffer细胞活性、CAT活性、PI3K和Akt的磷酸化水平均升高,凋亡率、LDH释放量、活性氧簇含量均降低(均P<0.05),而丙泊酚高浓度组Kupffer细胞CAT活性、PI3K和Akt的磷酸化水平均降低,凋亡率、LDH释放量、活性氧簇含量均升高(均P<0.05)。结论低、中浓度(5μmol/L、25μmol/L)的丙泊酚能够减轻过氧化氢诱导的Kupffer细胞氧化应激损伤,提高细胞活性,抑制细胞凋亡,其机制可能与激活PI3K/Akt通路有关。

摘要： 目的 基于磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路研究葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)诱导肝癌细胞索拉非尼耐药的机制。方法 以肝癌细胞Huh7、索拉非尼耐药肝癌细胞Huh7-SR、G6PD稳定过表达的肝癌细胞Huh7-G6PD及其对照细胞Huh7-CT为研究对象,以索拉非尼或G6PD抑制剂(6-氨基烟酰胺)为干预药物,采用CCK-8法检测细胞活力,采用Western blot法检测G6PD蛋白表达水平及PI3K/Akt信号通路相关蛋白的磷酸化水平,采用流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果 与Huh7细胞比较,Huh7-SR细胞中G6PD的表达水平显著升高(P<0.05)。经6-氨基烟酰胺和索拉非尼联合干预后,Huh7-SR细胞存活率显著降低(P<0.01)。经索拉非尼干预后,与Huh7-CT细胞比较,Huh7-G6PD细胞存活率显著升高(P<0.01),凋亡率显著降低(P<0.01)。经6-氨基烟酰胺干预后,Huh7-SR细胞中PI3K、Akt蛋白的磷酸化水平均显著降低(P<0.05)。不加药物干预时,与Huh7-CT细胞比较,Huh7-G6PD细胞中PI3K、Akt蛋白的磷酸化水平均显著升高(P<0.01)。结论 G6PD可通过激活PI3K/Akt信号通路诱导肝癌细胞索拉非尼耐药。

摘要： 目的:研究过表达NLRC3对脂多糖(LPS)诱导的小鼠小胶质细胞BV2炎症反应的影响,并探究其相关分子机制。方法:采用不同浓度LPS(0.1、1、2、5 g/ml)处理BV2细胞24 h,CCK-8法检测其细胞活力。以0.1 g/ml LPS诱导的BV2细胞作为帕金森病细胞炎症模型。实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot分别检测细胞中NLRC3的mRNA和蛋白质表达水平。用过表达NLRC3的腺病毒转染BV2细胞,然后用0.1 g/ml LPS处理24 h,用qRT-PCR和Western blot检测转染效率,利用比色法和酶联免疫吸附测定法(ELISA)分别检测一氧化氮(NO)含量和炎症因子浓度。Western blot检测磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)和核因子κB(NF-κB)信号通路蛋白的相对表达量。结果:与未处理组相比,0.1 g/ml LPS对BV2的细胞活力无明显影响,说明0.1 g/ml LPS对BV2细胞没有细胞毒性作用。然而,LPS处理显著降低BV2细胞中NLRC3的表达水平(P<0.05)。过表达NLRC3后,NLRC3的mRNA与蛋白表达量显著上调(P<0.05),而LPS诱导的NO含量与炎症因子水平均显著降低(P<0.05),同时,PI3K/AKT和NF-κB信号通路蛋白的磷酸化水平也显著降低(P<0.05)。结论:NLRC3通过抑制NF-κB和PI3K/AKT通路的激活,从而抑制LPS诱导的BV2细胞的炎症反应。

摘要： 一种用于磷脂酰肌醇蛋白激酶类及其亚类的活性快速测定的试剂盒，其特征在于该测定试剂盒有如下组成：一块由待测的磷脂酰肌醇蛋白激酶相对应的底物和磷脂预先包埋好的96孔板；酶活性测定Tris-HCl溶液；酶反应终止与洗涤HCl液以及簿层滴样用氯仿-HCl专用液所组成。

摘要： 本发明公开了棉花磷脂酰肌醇4-激酶基因(GbPI4K)、其编码蛋白以及利用该基因改良棉花品种的方法。由于磷脂酰肌醇4-激酶(PI4K)是催化磷脂酰肌醇生成细胞内重要的双信使分子三磷酸肌醇和二酯酰甘油的一个关键酶，且有证据表明GbPI4K基因在控制细胞壁发育和组织强度中起重要作用，因此本发明获得的GbPI4K基因可用于棉花遗传改良以改善棉纤维品质，具有潜在的经济效益和应用价值。

摘要： 提供具有结构式I的化合物，该化合物的各种具有本文所述的价值。药物制剂包含所述化合物或其医学上可接受的盐和药学上可接受的运载体和其他药物的组合。治疗患者的方法包括给予有这种需要的患者本发明的药物制剂。

摘要： 本发明涉及一种人的磷脂酰肌醇激酶3相关蛋白激酶突变蛋白及应用，通过将大量癌症患者作为研究病例，对病例进行基因检测并分析，确定出人的磷脂酰肌醇激酶3相关蛋白激酶的突变蛋白，根据该人的磷脂酰肌醇激酶3相关蛋白激酶的突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒，为癌症的基因诊断提供指引作用，并为相关疾病的诊断和治疗提供一定的理论基础。

摘要： 一种用于磷脂酰肌醇蛋白激酶类及其亚类的活性快速测定的试剂盒，其特征在于该测定试剂盒有如下组成：一块由待测的磷脂酰肌醇蛋白激酶相对应的底物和磷脂预先包埋好的96孔板；酶活性测定Tris－HCl溶液；酶反应终止与洗涤HCl液以及簿层滴样用氯仿－HCl专用液所组成。

摘要： 本发明公开了棉花磷脂酰肌醇4-激酶基因(GbPI4K)、其编码蛋白以及利用该基因改良棉花品种的方法。由于磷脂酰肌醇4-激酶(PI4K)是催化磷脂酰肌醇生成细胞内重要的双信使分子三磷酸肌醇和二酯酰甘油的一个关键酶，且有证据表明GbPI4K基因在控制细胞壁发育和组织强度中起重要作用，因此本发明获得的GbPI4K基因可用于棉花遗传改良以改善棉纤维品质，具有潜在的经济效益和应用价值。

摘要： 本发明涉及式(I)嘧啶衍生物、其制备方法、包含式(I)嘧啶衍生物的药物组合物及其在制备用于在温血动物例如人体内产生抗增殖作用的药物中的用途，其中p、R

摘要： 本发明涉及式(I)嘧啶衍生物、其制备方法、包含式(I)嘧啶衍生物的药物组合物及其在制备用于在温血动物例如人体内产生抗增殖作用的药物中的用途，其中Qa、G1、G2、q、R3、r、R4、X1和Qb各自具有本发明说明书中定义的任何含义。

摘要： 本发明涉及式(I)嘧啶衍生物、其制备方法、包含式(I)嘧啶衍生物的药物组合物及其在制备用于在温血动物例如人体内产生抗增殖作用的药物中的用途，其中p、R1、R2、q、R3、r、R4、X1和Q1各自具有本发明说明书中定义的任何含义。

摘要： 提供具有结构式I的化合物，该化合物的各种具有本文所述的价值。药物制剂包含所述化合物或其医学上可接受的盐和药学上可接受的运载体和其他药物的组合。治疗患者的方法包括给予有这种需要的患者本发明的药物制剂。