细胞实验

摘要： 背景:靶向铁过载基因调节铁死亡或许是一种较快且有效延缓骨关节炎退变的方法,但目前对骨关节炎铁死亡相关分子机制及基因靶点尚不清楚。目的:通过生物信息学分析铁死亡在骨关节炎中的关键基因和途径,结合体外实验验证骨关节炎中铁死亡标记基因,探讨铁死亡在骨关节炎中的潜在作用。方法:以“Osteoarthritis”为检索词,通过GEO数据库检索2010-01-01/2021-01-01的公开数据,筛选得到基因微阵列数据集GSE55235,对GSE55235数据集进行数据矫正后分析获得差异表达基因;利用FerrDb数据库检索得到铁死亡相关基因与GSE55235数据集差异表达基因作交集,对交集基因作基因本体(Gene Ontology,GO)与京都基因和基因组数据库富集分析(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)并绘制蛋白质-蛋白质相互作用网络,获得骨关节炎铁死亡HUB基因,筛选出铁死亡标记基因;将正常人软骨细胞设为对照组、人软骨细胞骨关节炎模型设为实验组,采用实时荧光定量PCR对两组铁死亡标记基因的mRNA表达进行验证。结果与结论:①共获得36个骨关节炎铁死亡基因,GO富集分析表明其主要参与氧化应激反应、皮质类固醇反应、类固醇激素反应、对糖皮质激素的反应和活性氧的代谢等过程;②针对产生超氧化物的NAD(P)H氧化酶及氧化还原酶活性、血红素结合、四吡咯结合中发挥作用;③KEGG富集分析表明骨关节炎铁死亡基因主要参与NOD样受体、白细胞介素17、缺氧诱导因子1、肿瘤坏死因子及叉头盒O类(FoxO)等信号通路;④构建蛋白质-蛋白质相互作用网络,进一步分析获得血管内皮生长因子A、白细胞介素6、JUN、PTGS2和DUSP1等5个骨关节炎铁死亡HUB基因,筛选出血管内皮生长因子A、白细胞介素6、PTGS2和DUSP1等4个铁死亡标记基因,体外实验证实其在对照组(正常人软骨细胞)与实验组(细胞骨关节炎模型)中有显著差异(P<0.05);⑤上述数据显示,铁死亡可能通过氧化应激、氧化还原及诱导炎症等作用于骨关节炎,机制上可能与缺氧诱导因子1等信号通路刺激NAD(P)H有关;血管内皮生长因子A、白细胞介素6、PTGS2和DUSP1可作为骨关节炎铁死亡的生物标志物。

摘要： 背景:肌腱断裂是骨科常见的棘手问题,而肌腱细胞中胶原分泌影响到肌腱断裂的修复过程,结缔组织生长因子影响组织器官的纤维化过程,对细胞胶原的分泌有重要的作用,但其对肌腱细胞胶原分泌的作用却鲜有报道.目的:通过不同质量浓度的结缔组织生长因子刺激体外培养的原代鸡肌腱细胞,观察细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达情况.方法:选取8周来亨鸡6只,麻醉处死后取屈趾深肌腱行肌腱细胞原代培养,行Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫荧光鉴定;取4代的原代肌腱细胞,通过不同质量浓度(0,5,10,20,50,100,200,500 μg/L)的结缔组织生长因子刺激4d,分别行实时荧光定量PCR及酶联免疫吸附测定法检测不同组别肌腱细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白的表达情况.结果 与结论:①Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫荧光鉴定原代培养的细胞为肌腱细胞;②实时荧光定量PCR检测提示结缔组织生长因子刺激后肌腱细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达量均增加;③酶联免疫吸附测定法检测提示结缔组织生长因子刺激后肌腱细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达量均增加(P＜0.01),且两者均随结缔组织生长因子质量浓度的升高而逐渐增高,20 μ g/L及50μg/L的结缔组织生长因子可能是体外刺激肌腱细胞分别生成Ⅰ、Ⅲ型胶原的最佳作用浓度;④在一定范围内,结缔组织生长因子能够促进鸡原代肌腱细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原的分泌.

摘要： 目的探讨原儿茶酸对脂多糖诱导的人牙周膜成纤维细胞(HPDLF)炎症反应的保护作用及其可能机制。方法(1)将HPDLF分为空白对照组、脂多糖组、脂多糖+5.00μmol/L原儿茶酸组和脂多糖+10.00μmol/L原儿茶酸组。除空白对照组外,其他3组均加入脂多糖(10μg/mL)及不同浓度的原儿茶酸(0μmol/L、5.00μmol/L、10.00μmol/L),均培养24 h后检测相关指标。(2)将HPDLF分为si-NC组、脂多糖+si-NC组、脂多糖+原儿茶酸+si-NC组、脂多糖+原儿茶酸+si-SIRT1组。先将si-NC和si-SIRT1转染至HPDLF,除si-NC组外,其他3组均加入脂多糖(10μg/mL),在此基础上,脂多糖+原儿茶酸+si-NC组、脂多糖+原儿茶酸+si-SIRT1组同时加入原儿茶酸(10μmol/L)。干预24 h后检测相关指标。采用细胞计数检测法检测HPDLF活力情况,采用流式细胞术检测HPDLF活性氧簇水平,采用蛋白质印迹法检测HPDLF中NOD样受体蛋白3(NLRP3)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)、激活型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(Caspase1)和SIRT1蛋白的表达,采用酶联免疫吸附测定法检测HPDLF中白细胞介素(IL)-1β和IL-18的水平,采用实时荧光定量PCR检测SIRT1 mRNA表达水平。结果(1)与空白对照组相比,脂多糖+5.00μmol/L原儿茶酸组和脂多糖+10.00μmol/L原儿茶酸组细胞活力降低(均P0.05)。与空白对照组相比,脂多糖组SIRT1 mRNA和蛋白表达水平降低,而活性氧簇、IL-1β和IL-18水平,TXNIP、NLRP3和激活型Caspase1蛋白表达水平升高(均P<0.05);与脂多糖组相比,脂多糖+5.00μmol/L原儿茶酸组和脂多糖+10.00μmol/L原儿茶酸组SIRT1 mRNA和蛋白表达水平升高,而活性氧簇、IL-1β和IL-18水平,TXNIP和激活型Caspase1蛋白表达水平降低,且脂多糖+10.00μmol/L原儿茶酸组细胞NLRP3蛋白表达水平低于脂多糖组(均P<0.05)。(2)与si-NC组相比,脂多糖+si-NC组细胞SIRT1蛋白表达水平降低,而活性氧簇、IL-1β和IL-18水平、TXNIP和NLRP3蛋白表达水平升高(均P<0.05);与脂多糖+si-NC组相比,脂多糖+原儿茶酸+si-NC组细胞SIRT1蛋白表达水平升高,而活性氧簇、IL-1β和IL-18水平、TXNIP和NLRP3蛋白表达水平降低(均P<0.05);与脂多糖+原儿茶酸+si-NC组相比,脂多糖+原儿茶酸+si-SIRT1组细胞SIRT1蛋白表达水平降低,而活性氧簇、IL-1β和IL-18水平、TXNIP和NLRP3蛋白表达水平升高(均P<0.05)。结论原儿茶酸可通过上调HPDLF中SIRT1的表达,抑制TXNIP-NLRP3轴的表达,在脂多糖诱导的HPDLF炎症损伤中发挥保护作用。

摘要： 目的探讨上调微小RNA-520a(miR-520a)对胃癌细胞恶性生物学行为和放射增敏性的影响及相关机制。方法将胃癌MGC-803细胞分为空白组、上调组、下调组,空白组加入常规细胞培养液,下调组给予转染p-Genesil,上调组给予转染p-Genesil-miR-520a。鉴定各组细胞转染情况,并检测细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭能力以及Janus激酶3(JAK3)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路蛋白表达量。各组细胞在转染结束后,接受一定剂量的X线照射,观察细胞集落形成情况,并计算平均致死量(D0)、2 Gy剂量X线照射下的细胞存活分数(SF2)和放射增敏比(SER)。结果转染48 h后,上调组miR-520a表达量高于空白组,下调组miR-520a表达量低于空白组及上调组(均P<0.05)。稳定转染后24 h、48 h、72 h,上调组细胞增殖率低于空白组及下调组,下调组细胞增殖率高于空白组;72 h后,上调组及下调组细胞凋亡率均高于空白组,且上调组高于下调组(均P<0.05)。上调组细胞迁移、侵袭数少于空白组及下调组,但下调组细胞迁移、侵袭数多于空白组(均P<0.05)。上调组SF2值、D0值和SER大于空白组及下调组,下调组SF2值、D0值和SER小于空白组(均P<0.05)。上调组JAK3、STAT3、磷酸化JAK3、磷酸化STAT3蛋白表达量均低于空白组及下调组,下调组JAK3、STAT3、磷酸化JAK3、磷酸化STAT3蛋白表达量均高于空白组(均P<0.05)。结论上调miR-520a表达水平可以抑制胃癌细胞增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡,并可增强细胞的放射增敏性,其可能通过影响JAK3/STAT3信号通路的表达发挥作用。

摘要： 补肾生精法治疗少弱精子症在中医药领域中应用广泛。然而,阐述其作用机制和意义的相关综述较少。本文回顾了近年来关于少弱精子症的动物实验和细胞实验研究,为进一步探索补肾生精法治疗少弱精子症提供参考。动物实验造模以化学手段为主,如使用雷公藤多苷和腺嘌呤等药物进行灌胃。相关体内实验研究表明,五子衍宗丸、补肾生精经典名方和临床验方对少弱精子症都起到了显著的治疗作用。体外实验研究发现,补肾生精法能够使造模后的睾丸支持细胞、睾丸间质细胞、精原细胞得到明显改善。

摘要： 目的分析微小RNA-22(miR-22)对髓母细胞瘤细胞恶性生物学行为的影响,并探讨其可能作用机制。方法采用实时荧光定量PCR法检测正常人神经细胞RGC-5细胞和髓母细胞瘤细胞系UW402、UW473、DAOY和ONS-76细胞中miR-22的表达水平。将DAOY细胞分为对照组、miR-22 NC组、miR-22 mimics组、miR-22 mimics+740Y-P组,分别转染Lipofectamine^(TM) 2000试剂、miR-22 NC、miR-22 mimics、miR-22 mimics,同时,转染24 h后,miR-22 mimics+740Y-P组加入10μmol/L的740Y-P 200μL。采用CCK-8法和Transwell实验分别检测各组细胞的增殖和侵袭能力,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹法检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt蛋白相对表达水平。将20只裸鼠随机分为对照组、miR-22 NC组、miR-22 mimics组、miR-22 mimics+740Y-P组,各5只,分别移植相应组别的细胞后,观察皮下移植瘤体积。结果与正常人神经细胞RGC-5细胞相比,miR-22在髓母细胞瘤细胞系中均呈低表达状态,且在DAOY细胞中的表达水平最低(均P<0.05)。与对照组和miR-22 NC组比较,miR-22 mimics组DAOY细胞的增殖和侵袭能力下降,凋亡率增高,PI3K和Akt磷酸化水平降低,且裸鼠的皮下移植瘤体积减小(均P<0.05);与miR-22 mimics组相比,miR-22 mimics+740Y-P组细胞的增殖和侵袭能力增强,凋亡率降低,PI3K和Akt磷酸化水平升高,且裸鼠的皮下移植瘤体积增大(均P<0.05)。结论上调miR-22表达可抑制髓母细胞瘤细胞恶性生物学行为,其机制可能与调控PI3K/Akt信号通路有关。

摘要： 目的 构建大鼠Wnt5a基因慢病毒并感染RSC96雪旺细胞,观察慢病毒感染情况及Wnt5a表达情况。方法 设计大鼠Wnt5a基因特异性RNAi序列,构建并包装成可感染细胞的慢病毒,感染RSC96雪旺细胞后通过Celigo观察细胞中荧光表达,并通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测细胞中Wnt5am RNA的表达情况。结果 构建的Wnt5a基因慢病毒在感染RSC96雪旺细胞后可表达绿色荧光,细胞中Wnt5am RNA的平均表达量为0.206±0.056。结论 Wnt5a基因慢病毒构建成功,可为研究Wnt5a调控的周围神经损伤修复时雪旺细胞功能的相关研究提供便利。

摘要： 目的探讨蜂斗菜总内酯(PTB)对提高动物耐缺氧能力的作用。方法建立小鼠常压缺氧模型和PC12细胞氧糖剥夺模型(OGD),观察PTB对小鼠常压密闭空间下存活时间、血清乳酸脱氢酶(LDH)活性和丙二醛(MDA)含量,对脑组织与心脏超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)的活性,以及对脑组织病理变化和细胞存活率的影响。结果PTB可以显著提高常压缺氧小鼠在密闭空间下的存活时间,提高机体SOD、GSH的活性,减少脂质过氧化物的产生,降低无氧酵解的程度,保护神经细胞的结构和功能,提高OGD处理后的细胞的存活率。结论PTB具有明显的提高小鼠耐缺氧能力的作用,其作用机制可能与清除氧自由基、抑制脂质过氧化反应、保护神经细胞结构和功能有关。

摘要： 目的 基于网络药理学、分子对接和细胞实验探讨枸杞子防治老年性痴呆的作用机制。方法 通过化学成分数据库联合检索,结合药动学参数筛选枸杞子的候选活性成分,采用PharmMapper反向药效团匹配的靶标识别平台预测其靶点,TTD等数据库筛选与老年性痴呆相关的潜在靶点,DAVID数据库对靶点基因进行GO功能富集及KEGG通路富集分析,String数据库和Cytoscape软件构建蛋白相互作用(PPI)网络和“成分-靶点-通路”网络,SYBYL软件对关键活性成分与靶点进行分子对接,RT-qPCR检测枸杞子水提物对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞GSK3B、MAPK14、ESR1、NOS2、CASP3 mRNA表达的影响,Western blot检测枸杞子水提物对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞CASP3蛋白表达的影响。结果 枸杞子中50种活性成分通过调控HSD11B1、RARB、NR3C1、RARA、IGF1、MAPK14、CASP3、ESR2、GSK3B等31个潜在靶点,参与多种癌症通路、Rap1信号通路、Ras信号通路、PI3K-Akt信号通路、神经营养因子信号通路、多巴胺能突触等信号通路,起到防治老年性痴呆作用。新黄质、花色素苷、胡萝卜素、隐黄素、玉米黄质等成分与关键靶点HSD11B1、INSR、NR3C1、RARA、CASP3、MAPK14、GSK3B、NOS2具有良好的结合能力。枸杞子水提物可抑制Aβ_(25-35)诱导PC12细胞GSK3B、MAPK14、NOS2、CASP3 mRNA表达,上调ESR1 mRNA表达,下调CASP3蛋白表达。结论 本研究揭示了枸杞子防治老年性痴呆“活性成分-靶点-通路”的关系,可为该药材临床应用提供依据。

摘要： 目的探讨乳腺癌细胞外泌体对肿瘤相关成纤维细胞激活的诱导作用及机制。方法(1)将乳腺上皮细胞MCF10A、乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231、PBS分别与成纤维细胞MRC-5共培养;另取上述细胞和PBS,在与MRC-5共培养的同时加入外泌体摄取抑制剂GW4869。检测共培养后MRC-5细胞的迁移能力,细胞中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β(TGF-β)、CXC基序趋化因子配体12(CXCL12)、Ⅰ型胶原蛋白α1链(COL1A1)、Ⅲ型胶原蛋白α1链(COL3A1)、Ⅳ型胶原蛋白α1链(COL4A1)的mRNA表达水平。(2)提取MCF10A、MCF-7和MDA-MB-231细胞的外泌体并鉴定,然后将上述细胞外泌体、PBS分别与MRC-5细胞共培养。检测MRC-5细胞的迁移能力,细胞中IL-1β、IL-6、IL-8、TGF-β、CXCL12、COL1A1、COL3A1、COL4A1的mRNA表达水平,以及细胞中核因子κB(NF-κB)信号通路相关蛋白的表达水平。结果(1)相较于与PBS或MCF10A细胞共培养的MRC-5细胞,与MCF-7、MDA-MB-231细胞共培养的MRC-5细胞迁移能力提高,IL-1β、IL-6、IL-8、α-SMA、TGF-β、CXCL12、COL1A1、COL3A1、COL4A1的mRNA表达上调(均P0.05)。(2)相较于与PBS或MCF10A细胞外泌体共培养的MRC-5细胞,与MCF-7、MDA-MB-231细胞外泌体共培养的MRC-5细胞迁移能力提高,IL-1β、IL-6、IL-8、α-SMA、TGF-β、CXCL12、COL1A1、COL3A1、COL4A1的mRNA表达上调,且NF-κB磷酸化水平及NF-κB抑制因子α的蛋白表达水平均增加(均P<0.05)。结论乳腺癌细胞外泌体可能通过激活NF-κB信号通路促进成纤维细胞向肿瘤相关成纤维细胞转化。

摘要： 中药葛根是一种古老而传统的常用中药,张仲景以葛根汤治"项背强".葛根素是豆科植物野葛或甘葛藤干燥根中提取的异黄酮类物质,已广泛应用于多种心血管疾病的防治.国内外研究表明,葛根素的心血管药理作用主要有抑制细胞增殖、扩张血管、改善血液流变性及抗血栓形成等,深入了解葛根素的心血管药理作用机制,不仅可为抗动脉粥样硬化、抗高血压、逆转血管及心室重构等心血管疾病的治疗提供理论依据.对近年来葛根素对心血管病作用的细胞实验研究作一介绍，随着现代药理研究的发展，葛根素的药理作用和临床疗效己经得到明确证实，其对于严重威胁人类生命健康的心血管疾病的治疗更是有独到的成效。在心脑血管系统疾病高发的今天，葛根素将会更加引人注目。因此开展葛根素在治疗心脑血管疾病的应用研究具有重要的社会意义。

摘要： 目的:对bFGF、CTGF和TGF-β1mRNA及其蛋白表达量在肥厚与非肥厚腰椎黄韧带中的表达进行检测,探讨其在腰椎黄韧带肥厚中的作用。背景:黄韧带肥厚的分子机制还不清楚,有研究发现,腰椎黄韧带细胞进行培养后牵拉后TGF-β1分泌增加,然而多因子在黄韧带肥厚中的作用还未见相关报道。方法:组织实验:对照组6例、腰椎黄韧带肥厚组6例、突出组6例,对各组黄韧带中bFGF、TGF-β1、CTGF及胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ的mRNA含量用RT-PCR的方法进行检测,用Western Blot法检测bFGF、TGF-β1、CTGF产物在各组黄韧带中的表达。细胞实验对黄韧带进行培养，加入不同浓度的bFGF,TGF-β1干预后对细胞检测胶原蛋自Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ的mRNA含量，用培养液以Elisa法检测胶原蛋自Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ产物的表达。结果:组织学研究发现，bFGF,TGF-β1mRNA在肥厚组中的表达均明显高于突出组和对照组(P0.05);CTGFmRNA在三组之间表达无统计学差异(P>0.05);Western blot检测发现bFGF、TGF-β1在肥厚组中均有明显表达，且多于对照组。COLⅠmRNA在肥厚组中的表达均明显高于对照组和突出组(P0.05); COLⅢ,ⅤmRNA在三组中的表达无统计学差异(P>0.05)。细胞实验发现:TGF-β1、bFGF对COLⅠ、CoIAⅢmRNA表达有显著意义(p0.05)。结论:bFGF,TGF-β1在腰椎黄韧带肥厚形成过程中有重要作用，引起黄韧带肥厚的主要胶原产物为COLⅠ、Ⅲ，前者主要引起COLⅢ的增多，而后者主要影响COLⅠ的增多。

摘要： 目的:探讨葛根素对HepG2细胞胰岛素抵抗的改善作用.方法:用MTT法检测葛根素对细胞增殖的影响;将HepG2细胞置于10μg/mL胰岛素培养液中24h复制胰岛素抵抗模型,用葡萄糖氧化酶法检测葛根素对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响;采用蒽酮法检测细胞内糖原含量.结果:葛根素对HepG2细胞增殖无显著影响,并可促进胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗,增加肝细胞糖元含量.结论:葛根素可调节HepG2肝细胞糖代谢,明显改善肝细胞胰岛素抵抗.

摘要： 目的:探讨葛根素对HepG2细胞胰岛素抵抗的改善作用.方法:用MTT法检测葛根素对细胞增殖的影响;将HepG2细胞置于10μg/mL胰岛素培养液中24h复制胰岛素抵抗模型,用葡萄糖氧化酶法检测葛根素对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响;采用蒽酮法检测细胞内糖原含量.结果:葛根素对HepG2细胞增殖无显著影响,并可促进胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗,增加肝细胞糖元含量.结论:葛根素可调节HepG2肝细胞糖代谢,明显改善肝细胞胰岛素抵抗.

摘要： 目的:探讨葛根素对HepG2细胞胰岛素抵抗的改善作用.方法:用MTT法检测葛根素对细胞增殖的影响;将HepG2细胞置于10μg/mL胰岛素培养液中24h复制胰岛素抵抗模型,用葡萄糖氧化酶法检测葛根素对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响;采用蒽酮法检测细胞内糖原含量.结果:葛根素对HepG2细胞增殖无显著影响,并可促进胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗,增加肝细胞糖元含量.结论:葛根素可调节HepG2肝细胞糖代谢,明显改善肝细胞胰岛素抵抗.

摘要： 目的:探讨葛根素对HepG2细胞胰岛素抵抗的改善作用.方法:用MTT法检测葛根素对细胞增殖的影响;将HepG2细胞置于10μg/mL胰岛素培养液中24h复制胰岛素抵抗模型,用葡萄糖氧化酶法检测葛根素对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响;采用蒽酮法检测细胞内糖原含量.结果:葛根素对HepG2细胞增殖无显著影响,并可促进胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗,增加肝细胞糖元含量.结论:葛根素可调节HepG2肝细胞糖代谢,明显改善肝细胞胰岛素抵抗.

摘要： 本文构建A20重组慢病毒载体,采用基因感染的方法分别沉默和过表达HT-29细胞中的A20基因;根据干预方式的不同,将细胞株分为三组,即HT-29细胞组,A20基因过表达组,A20基因沉默组.采用免疫荧光和western-blot的方法研究在肠上皮细胞遭受LPS刺激后增加和降低A20表达对NF-κB核转位的影响,其次采用ELISA的方法检测增加和降低A20表达对NF-KB信号通路下游促炎细胞因子TNF-a、IL-1β表达水平的影响.结果表明锌指蛋白A20对肠上皮细胞炎症反应中起着重要的负性调控作用。

摘要： 本文构建A20重组慢病毒载体,采用基因感染的方法分别沉默和过表达HT-29细胞中的A20基因;根据干预方式的不同,将细胞株分为三组,即HT-29细胞组,A20基因过表达组,A20基因沉默组.采用免疫荧光和western-blot的方法研究在肠上皮细胞遭受LPS刺激后增加和降低A20表达对NF-κB核转位的影响,其次采用ELISA的方法检测增加和降低A20表达对NF-KB信号通路下游促炎细胞因子TNF-a、IL-1β表达水平的影响.结果表明锌指蛋白A20对肠上皮细胞炎症反应中起着重要的负性调控作用。

摘要： 本文构建A20重组慢病毒载体,采用基因感染的方法分别沉默和过表达HT-29细胞中的A20基因;根据干预方式的不同,将细胞株分为三组,即HT-29细胞组,A20基因过表达组,A20基因沉默组.采用免疫荧光和western-blot的方法研究在肠上皮细胞遭受LPS刺激后增加和降低A20表达对NF-κB核转位的影响,其次采用ELISA的方法检测增加和降低A20表达对NF-KB信号通路下游促炎细胞因子TNF-a、IL-1β表达水平的影响.结果表明锌指蛋白A20对肠上皮细胞炎症反应中起着重要的负性调控作用。

摘要： 本文构建A20重组慢病毒载体,采用基因感染的方法分别沉默和过表达HT-29细胞中的A20基因;根据干预方式的不同,将细胞株分为三组,即HT-29细胞组,A20基因过表达组,A20基因沉默组.采用免疫荧光和western-blot的方法研究在肠上皮细胞遭受LPS刺激后增加和降低A20表达对NF-κB核转位的影响,其次采用ELISA的方法检测增加和降低A20表达对NF-KB信号通路下游促炎细胞因子TNF-a、IL-1β表达水平的影响.结果表明锌指蛋白A20对肠上皮细胞炎症反应中起着重要的负性调控作用。

摘要： 本发明公开了一种用于大剂量电磁辐照细胞非热效应实验的指数型细胞温度调控方法及系统，涉及生物电磁学实验技术领域，解决了传统的自适应温控所需的复杂气流温度变化曲线难以用现有温控装置实现的问题。本方法包括：电磁建模仿真；温度建模仿真；平均比吸收率(SAR)的上限的计算；指数型温控的气流温度变化曲线的冗余范围的计算；指数型温控的实现。本发明应用于大剂量电磁辐照细胞非热效应实验，用指数型温控的气流温度变化曲线取代自适应温控的气流温度变化曲线，降低了曲线复杂度，参考温度利用系数和温变时间常数，获得一定的气流温度变化曲线的冗余范围，显著提高了温控的可行性。

摘要： 本发明公开一种细胞生物学实验用细胞培养装置，涉及细胞培养设备技术领域，包括培养箱外壳，所述培养箱外壳上设置有培养箱拉门和换气组件，所述培养箱外壳内设置有培养腔且位于培养箱拉门下侧，培养箱外壳上设置有输入筒，输入筒顶端设置有输入控制组件，输入筒底端与回收盒连接，回收盒设置在培养箱外壳下侧，输入筒内设置有输入组件，培养箱外壳内设置有吸取组件，吸取组件输入端设置在输入筒内，培养腔上设置有入料口，吸取组件输出端设置在入料口上侧，培养腔上设置有培养控制组件。本发明设置的培养控制组件，能在打开滑门的同时使放置台伸出，并且能够在放置台收回的时候自动进行换位。

摘要： 本实用新型提供淋巴细胞微核实验用的微量培养装置和淋巴细胞微核实验用试剂盒。所述微量培养装置(1)的特征在于，包含透明瓶体(2)、弹性密封塞、位于弹性密封塞外侧并与瓶口锁扣的硬质外盖(3)、以及装在透明瓶体内的2～4ml的微核实验用培养基(5)，所述透明瓶体(2)为长圆柱状且瓶体高度与底面直径比为4～8∶1，所述硬质外盖(3)的上表面中心处具有能够去除的脱离部(4)，所述培养基填充至瓶体高度的3/4以下；所述淋巴细胞微核实验用试剂盒包含所述微量培养装置。

摘要： 本实用新型公开了一种细胞学实验用细胞培养装置，包括培养箱体、密封箱门、透明观察窗口和固定支腿，所述培养箱体前端铰接有密封箱门，所述密封箱门上设有透明观察窗口，所述密封箱门上安装有固定把手，所述培养箱体内部中心处安装有固定分隔板，所述培养箱体底部安装有固定支腿，且固定支腿位于培养箱体底部四角处。本实用新型的有益效果是，通过密封箱门提高了培养箱体的密封性，防止灰尘进入培养箱体内部，防止对内部细胞造成污染，通过透明观察窗口方便观察细胞的培养情况，通过减震缓冲杆与减震弹簧减轻放置底座与放置盘的抖动，提高了稳定性，方便对放置盘进行拿取，方便将培养皿放置到限位圆座内，操作简单使用方便。

摘要： 本实用新型公开了一种细胞侵袭实验用细胞侵袭小室，包括小室本体，小室本体上具有一上开口的培养液盛载室，小室本体底部开设有与培养液盛载室相通的通孔，通孔上封固有半透膜；还包括切膜部，适配封盖于小室本体底部的通孔上，切膜部上具有切割半透膜的切割刃；清洗部，其具有一上盖板、一连接杆、一刮板及一冲洗通道。本实用新型优点在于能够快速的冲洗搔刮小室本体内的培养液，并快速的切割掉半透膜，以便于后续的观察和实验操作，搔刮和切膜均非常的方便且准确，有效避免了切割过程中利器划伤操作人员，大大减少切割下来的半透膜上表面附着的细胞，减轻半透膜上、下表面的细胞混合所造成的观察困难，提高后续的实验精度。

摘要： 一种具备抽吸细胞培养时废液的细胞生物学实验设备,主体通过连接器与废液缸连接；所述的主体内设有自吸泵，自吸泵下部连接吸液孔和排液管，排液管下端连接排液孔；主体外部设有胶管，胶管一端穿入主体并与吸液孔连接，胶管另一端与吸液枪枪头连接；所述的排液管下部设有螺纹结构排液孔，通过排液孔与连接器上部螺纹连接；所述的吸液枪枪头上设有手柄，手柄上设有启动键和停止键。本产品成本低且噪声小，为细胞培养实验提供了更多便利性。

摘要： 本发明涉及一种聚焦超声细胞实验装置，其用于对聚焦超声设备的治疗头进行细胞实验，所述治疗头能够发射聚焦超声能量，其特征在于，该聚焦超声细胞实验装置包括承载单元，该承载单元具有筒状的体部和在体部内部连接于体部的内部连接环，并且该承载单元还具有用于容纳耦合介质的容纳腔，该容纳腔由体部的内周面和内部连接环的顶面包围。本发明还涉及一种聚焦超声细胞实验方法。

摘要： 本实用新型公开了一种体外细胞实验研究黄芪实验用对比实验装置，包括对比箱，所述对比箱为矩形结构，所述对比箱内部为空腔且顶部设有开口，所述对比箱内部设置第一隔板，所述第一隔板将所述对比箱内部分为试剂槽和器皿放置槽，所述试剂槽内设置有放置板，所述器皿放置槽内垂直于第一隔板设置有第二隔板。有益效果在于：该装置通过设置器皿放置组件，将器皿放置在内，能够避免误触器皿导致器皿移动，从而影响实验效果，并且通过在对比箱底部设置用于增加摩擦力的垫片能够增大对比箱与台面之间的摩擦力从而避免对比箱移动，并且在对比箱内设置试剂槽，能够将实验用的试剂放置在其中，从而试剂与器皿分离设置而导致在拿取试剂的过程中将试剂打翻。

摘要： 本实用新型公开了一种基于活体细胞实验的细胞持续灌流装置，包括底板和固定安装在底板上表面的操作台，所述操作台的上表面固定连接有底座，所述底座的内部设置有灌流瓶，所述操作台的上表面安装有蠕动泵，所述操作台的上表面开设有放置槽，所述放置槽的一侧安装有恒温装置，所述放置槽的内部设置有放置架，所述放置架的顶部设置有培养壳体，所述灌流瓶与蠕动泵和蠕动泵与培养壳体之间均安装有输送管。本实用新型通过蠕动泵将灌流瓶的内部培养液从培养槽的底部泵入至培养槽的内部，然后通过溢流的方式将细胞废液从溢流槽沿着三通管排至废液收集瓶的内部，实现了对细胞的持续灌流，有效地解决了灌流槽过满溢出或者灌流槽抽空的问题。

摘要： 本实用新型公开了一种用于细胞实验的细胞提取装置，属于细胞实验技术领域，包括粉碎箱，所述粉碎箱的内腔设置有粉碎机构，所述粉碎箱的一侧连通有进料口，所述粉碎箱的底部栓接有固定箱，所述固定箱的背面栓接有设备箱，所述固定箱的两侧均栓接有固定板，所述固定板底部的正面和背面均栓接有支撑块，所述支撑块的底部均栓接有操作台，所述粉碎箱的正面通过合页铰接有箱门，所述粉碎箱内腔上半部的一侧装配有电动推杆，所述电动推杆的伸缩杆栓接有齿条板。通过粉碎机构对胎盘进行彻底粉碎，大大提高了粉碎效率，通过加热板使胎盘组织处于恒温状态，有利于提高胎盘细胞提取的成功率。