心肌细胞凋亡

摘要： 背景:心肌细胞凋亡在心肌缺血再灌注损伤中扮演了重要角色。最新研究表明生殖系统调控分子PIWI相互作用RNA(PIWI-Interacting RNA,piRNA)参与了心脏病理过程调控,然而在心肌细胞凋亡中的作用尚未阐明,尤其涉及线粒体途径的机制尚不清楚。目的:探究piRNA-5938对心肌细胞凋亡和线粒体分裂的调节作用及分子机制。方法:深度测序检测正常和缺血再灌注模型小鼠及大鼠心脏中piRNA的表达丰度,实时荧光定量PCR法验证结果。分别用双氧水和缺氧再复氧条件构建心肌细胞凋亡模型,实时荧光定量PCR法检测piRNA-5938的表达水平。合成piPNA-5938特异性拮抗剂转染心肌细胞,再用双氧水处理,TUNEL法检测细胞凋亡情况,MitoTracker法检测线粒体分裂情况。RNAhybrid软件预测与piRNA-5938相互作用的microRNA。结果与结论:①与假手术组比,缺血再灌注小鼠心脏中422种piRNA表达水平改变,其中289条上调,133条下调;piRNA-5938的表达显著增加(P<0.01);②双氧水诱导心肌细胞凋亡后piRNA-5938的表达水平显著上调,且呈浓度依赖性(P<0.05);③缺氧再复氧诱导心肌细胞凋亡后piRNA-5938表达显著增加(P<0.01);④与阴性对照组比,敲低piRNA-5938后,双氧水诱导的心肌细胞凋亡率明显降低(P<0.05);⑤敲低piRNA-5938后,双氧水诱导的心肌细胞线粒体分裂明显得到改善(P<0.05);⑥piRNA-5938与线粒体分裂调控分子miR-324和miR-668序列能很好地互补配对,且具有高度保守性;⑦提示piRNA-5938调控了心肌细胞凋亡和线粒体分裂,并且可能通过miR-324或miR-668发挥作用。

摘要： 背景:近年来有研究发现,在心肌梗死小鼠的心肌组织中,硫氧还蛋白相互作用蛋白表达升高。硫氧还蛋白相互作用蛋白是核苷酸结合寡聚化域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor family pyrin domain-like receptor containing pyrin domain 3,NLRP3)炎性小体的内源性激活物,那么,其是否通过激活炎症小体参与心肌梗死的病理过程目前尚不清楚。目的:探讨硫氧还蛋白相互作用蛋白对心肌梗死后心肌细胞凋亡和NLRP3炎症小体的影响,为临床心肌梗死的预防和治疗提供新思路。方法:选取8周龄雄性硫氧还蛋白相互作用蛋白基因敲除纯合子小鼠30只和同窝野生C57BL/6J小鼠30只,2种小鼠均随机分为心肌梗死组和伪手术组(n=15),建立心肌梗死模型。术后4 d取部分小鼠(n=10)麻醉处死,取心脏组织,TUNEL法(n=5)检测心肌细胞凋亡水平,Western blot(n=5)检测硫氧还蛋白相互作用蛋白、NLRP3、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1、凋亡相关斑点样蛋白、活化白细胞介素1β和活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3蛋白的表达水平;其余小鼠(n=5)于术后1个月采用小动物超声仪检测心脏功能,随后麻醉处死留取心脏组织,用于其他指标检测。结果与结论:①与野生伪手术组相比,野生心梗组硫氧还蛋白相互作用蛋白的表达水平显著升高(P<0.05);②与各自伪手术组相比,野生心肌梗死小鼠和硫氧还蛋白相互作用蛋白基因敲除心肌梗死小鼠的心肌中NLRP3活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1、凋亡相关斑点样蛋白、活化白细胞介素1β和活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3等蛋白表达均明显上调(P<0.05);③与野生心肌梗死小鼠相比,硫氧还蛋白相互作用蛋白基因敲除心肌梗死小鼠的梗死心肌中上述5种蛋白表达均明显降低,心肌细胞凋亡减少,心功能明显改善(P<0.05);④证明硫氧还蛋白相互作用蛋白基因敲除可抑制心肌梗死后NLRP3、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1、凋亡相关斑点样蛋白、活化白细胞介素1β和活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3的表达,减少心肌细胞凋亡,最终改善缺血心脏功能,有望为临床心肌梗死的治疗提供靶点。

摘要： 目的探讨多核糖核苷酸核苷转移酶1(PNPT1)对氧糖剥夺(OGD)诱导心房肌细胞凋亡的影响和作用机制。方法体外培养HL-1心房肌细胞,PNPT1-siRNA转染HL-1细胞。实验分组为:正常组(Control)、OGD组、NC-siRNA组(转染乱码RNA)、PNPT1-siRNA组、OGD+NC-siRNA组和OGD+PNPT1-siRNA组。通过CCK-8检测细胞存活率,qPCR检测ACTB mRNA和TUBA mRNA的含量,Western blot检测PNPT1蛋白水平,流式细胞术检测HL-1细胞凋亡率,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,透射电镜观察线粒体形态。结果随OGD诱导时间延长,HL-1细胞质中PNPT1的蛋白表达水平呈上升趋势(P<0.05)。与NCsiRNA相比,PNPT1-siRNA明显减少细胞内PNPT1表达。OGD条件下,ACTB mRNA和TUBA mRNA降解增加(P<0.05),HL-1心房肌细胞凋亡率增加(P<0.05);相反地,PNPT1-siRNA则抑制ACTB mRNA和TUBA mRNA降解(P<0.05),同时降低HL-1心房肌细胞凋亡率(P<0.05),并且改善线粒体膜电位以及线粒体形态。结论抑制PNPT1可改善线粒体损伤并减少凋亡相关mRNA的降解,从而减轻OGD诱导的HL-1心房肌细胞凋亡损伤。

摘要： 目的研究黄芪多糖(APS)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌细胞能量代谢的影响,并探讨相关机制。方法取60只无特定病原体(SPF)级SD大鼠,随机选取10只仅做假手术,设为对照组,其余50只建立CHF模型。将建模成功的41只大鼠随机分为CHF组(10只)、挽回组(10只)、APS组(10只)、阳性药物组(11只)。APS组予APS 400 mg/kg灌胃;挽回组予APS 400 mg/kg灌胃,Compound C水溶液2 mL灌胃;阳性药物组予卡托普利10 mg/kg灌胃;对照组与CHF组予等量生理盐水灌胃。连续干预28 d。末次干预后4 h采用超声心动仪测定心功能指标;脱颈处死大鼠测定心肌三磷酸腺苷(ATP)含量;透射电镜观察心肌细胞线粒体结构;苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织病理变化;凋亡细胞原位末端转移标记法(TUNEL)染色观察心肌细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测心肌组织5-单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)、过氧化物酶体增殖物激活受体共激活因子-1(PGC-1α)蛋白相对表达量。结果与CHF组比较,挽回组、APS组、阳性药物组左心室射血分数(LVEF)、左心室缩短分数(LVFS)均升高(P<0.05),左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)均缩短(P<0.05),心肌组织ATP含量均升高(P<0.05);与挽回组比较,APS组、阳性药物组LVEF、LVFS均升高(P<0.05),LVEDD、LVESD均缩短(P<0.05),心肌组织ATP含量均升高(P<0.05)。挽回组、APS组、阳性药物组线粒体排列与大小变规则,数量逐渐增加,空泡变性及肿胀减轻,线粒体嵴增加,心肌横纹、润盘变清晰。挽回组、APS组、阳性药物组心肌细胞形态结构损伤有所减轻,心肌横纹较为清晰。与CHF组比较,挽回组、APS组、阳性药物组心肌细胞凋亡率均降低(P<0.001),PGC-1α蛋白、p-AMPK/AMPK均升高(P<0.05);与挽回组比较,APS组、阳性药物组心肌细胞凋亡率均降低(P<0.001),PGC-1α蛋白、p-AMPK/AMPK均升高(P<0.001)。结论APS可改善CHF大鼠心功能及心肌细胞能量代谢,减轻心肌细胞线粒体结构破坏及心肌组织病理变化,减少心肌细胞凋亡,推测其作用机制与激活AMPK/PGC-1α信号通路有关。

摘要： 目的:探究JAK/STAT信号通路在小鼠心肌梗死发病中的作用及对核因子kappaB(NF-κB)、TNF-α表达的影响。方法:选择30只SD健康雄性小鼠,10只为正常组,20只建立心肌梗死模型,并将心肌梗死模型小鼠随机分为心肌梗死组、阻断干预组,对阻断干预组模型小鼠使用AG490溶液进行灌胃处理,正常组与心肌梗死组小鼠使用等量生理盐水进行灌胃处理。对3组小鼠心功能指标以及心脏、左心室重量指数进行检测,Western blot法检测JAK/STAT通路相关蛋白表达,对心肌细胞凋亡情况进行检测,酶联免疫吸附试验检测NF-κB、TNF-α水平。结果:正常组小鼠各项心功能指标水平均低于心肌梗死组和阻断干预组,且阻断干预组小鼠各项心功能指标水平均低于心肌梗死组(P<0.05)。正常组小鼠心脏、左心室重量及心脏、左心室重量指数均低于心肌梗死组和阻断干预组,阻断干预组小鼠心脏、左心室重量及心脏、左心室重量指数均低于心肌梗死组(P<0.05)。正常组小鼠JAK/STAT通路相关蛋白相对表达量均低于心肌梗死组和阻断干预组,且阻断干预组小鼠JAK/STAT通路相关蛋白相对表达量均低于心肌梗死组(P<0.05)。心肌梗死组小鼠各时间点心肌细胞凋亡率均高于正常组,阻断干预组小鼠各时间点心肌细胞凋亡率均低于心肌梗死组,高于正常组(P<0.05)。正常组小鼠心肌组织NF-κB、TNF-α表达水平均低于心肌梗死组和阻断干预组,阻断干预组小鼠心肌组织NF-κB、TNF-α表达水平均低于心肌梗死组(P<0.05)。结论:小鼠心肌梗死发病后心功能及心脏、左心室重量指数出现异常,使用AG490溶液阻断JAK/STAT信号通路后,小鼠心功能及心肌细胞凋亡情况得到改善,心脏、左心室重量指数下降,抑制心肌组织炎症反应。

摘要： 目的观察沙库巴曲缬沙坦钠片(诺欣妥,Lcz696)对异丙肾上腺素(Iso)诱导的心肌梗死大鼠心肌纤维化及对细胞凋亡和神经纤维蛋白(NF)2/哺乳动物不育系20样激酶(Mst)1通路的影响。方法40只SD雄性大鼠随机分成4组:对照组(Control组)、模型组(Iso组)、Lcz696干预组(Iso+Lcz696组)和缬沙坦(Vdt)干预组(Iso+Vdt组)。采用腹腔注射Iso50 mg/(kg·d):2 d的方法建立急性心肌梗死大鼠模型,以心电图及血浆肌钙蛋白水平确定模型构建是否成功。Iso+Lcz696组给予Lcz69660 mg/(kg·d)溶解于蒸馏水后灌胃,Iso+Vdt组给予Vdt 30 mg/(kg·d)溶解于等量的蒸馏水后灌胃,Iso组和Control组则同时给予等量的蒸馏水灌胃。干预4 w后处死大鼠,以Masson染色检测心肌胶原沉积,以Western印迹法检测半胱天冬酶(Caspase)9、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、NF2、Mst1蛋白表达水平。结果与Control组相比,其余3组大鼠心电图Ⅱ导联T波高耸,ST段弓背向上抬高,血浆肌钙蛋白显著升高,提示急性心肌梗死模型构建成功。Masson染色检测显示Iso组心肌胶原沉积显著增加,而Iso+Lcz696组心肌胶原沉积显著减少,而Iso+Lcz696组与Iso+Vdt组相比,心肌胶原沉积亦显著减少。Iso组大鼠心肌Caspase9、NF2、Mst1蛋白表达显著增加而Bcl-2蛋白表达显著减少(均P<0.05);而与Iso组相比,Iso+Lcz696组Caspase9、NF2、Mst1蛋白表达显著降低而Bcl-2表达显著升高(均P<0.05),Iso+Vdt Caspase9、NF2、Mst1蛋白表达显著降低(均P<0.05),而Bcl-2蛋白表达不明显,但与Iso+Vdt组相比,Iso+Lcz696组NF2、Mst1蛋白减少更明显(均P<0.05)。结论与Vdt相比,Lcz696能更有效地通过抑制心肌细胞凋亡改善Iso诱导的心肌梗死大鼠心肌纤维化,其机制可能与抑制NF2/Mst1通路有关。

摘要： 目的:探讨丹参多酚酸盐辅助治疗对不稳定型心绞痛(UAP)患者血流动力学、炎症因子、心肌细胞凋亡的影响。方法:选取2019年3月-2021年3月佳木斯市妇幼保健院收治的104例UAP患者,按照随机数字表法分为观察组和对照组,每组52例。对照组给予常规抗心绞痛治疗,观察组在对照组的基础上加用丹参多酚酸盐治疗。比较两组疗效、心绞痛发作频率、每次发作时长、血脂代谢[总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)]、血流动力学[全血低切黏度(WBLSV)、全血高切黏度(WBHSV)、血浆黏度(PV)、血小板黏附率(PADT)]、炎症因子[白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、心肌细胞凋亡指标[可溶性凋亡相关因子(sFas)、可溶性凋亡相关因子配体(sFasL)、细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)]。结果:观察组总有效率为96.15%,高于对照组的80.77%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组心绞痛发作频率均低于治疗前,每次发作时长均短于治疗前,且观察组心绞痛发作频率低于对照组,每次发作时长短于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组TC、TG、LDL-C均低于治疗前,HDL-C均高于治疗前,且观察组TC、TG、LDL-C均低于对照组,HDL-C高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组WBLSV、WBHSV、PV、PADT均低于治疗前,且观察组均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组血清IL-1、IL-6、TNF-α水平均低于治疗前,且观察组均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组sFas、sFasL水平均低于治疗前,Bcl-2水平均高于治疗前,且观察组sFas、sFasL均低于对照组,Bcl-2高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:丹参多酚酸盐辅助治疗能够改善UAP患者血脂代谢、血流动力学指标,并可减轻炎症因子水平,减少心肌细胞凋亡,改善预后。

摘要： 目的探讨丹参-红花药对抗心肌缺血的机制。方法将60只SD雄性大鼠随机分为空白对照组(A组,等体积纯净水)、模型组(B组,等体积纯净水)、复方丹参滴丸组(C组,73 mg/kg)及丹参-红花低、中、高剂量组(D_(1)组、D_(2)组、D_(3)组,原药材4,8,16 g/kg),各10只,各组大鼠灌胃给予相应药物或纯净水,每天1次,连续7 d。于第6天、第7天灌胃给药1 h后,除A组外,其余各组均皮下注射盐酸异丙肾上腺素(85 mg/kg)以复制急性心肌缺血大鼠模型。观察大鼠心肌病理形态、心肌细胞凋亡情况,采用酶联免疫吸附法检测大鼠心肌酶水平;采用多指标综合指数法计算各组总效应值和偏最小二乘回归分析(PLS-DA)得分,筛选效果最佳的剂量组进行肠道菌群多样性分析。结果D_(3)组的综合指数最高(7.68),其次是D_(2)组(7.18),D_(3)组和D_(2)组PLS-DA得分差异较小,选用D_(2)组进行肠道菌群多样性分析;与B组比较,D_(2)组放线菌门、TM7菌门、厚壁菌门/拟杆菌门、乳杆菌属、棒状杆菌属、葡萄球菌属和SMB53菌属的相对丰度显著升高(P<0.05或P<0.01),拟杆菌门、软壁菌门、脱铁杆菌门、颤螺菌属和罗斯氏菌属的相对丰度显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论丹参-红花药对可能通过调节肠道菌群而发挥抗心肌缺血的作用。

摘要： 目的探讨血脂康预处理对SD大鼠在体心脏缺血/再灌注后心肌细胞凋亡的影响。方法40只SD大鼠随机分成假手术组、模型对照组、甲羟戊酸组、血脂康组及血脂康+甲羟戊酸组,各8只。假手术组:双蒸水,灌胃1周;模型对照组:双蒸水2 mL灌胃1周;甲羟戊酸组:甲羟戊酸150 mg·kg^(-1)·d^(-1)溶于2 mL双蒸水,灌胃1周;血脂康组:血脂康原粉2.8 g·kg^(-1)·d^(-1)溶于2 mL双蒸水,配成悬液灌胃1周:血脂康+甲羟戊酸组:血脂康原粉2.8 g·kg^(-1)·d^(-1)及甲羟戊酸150 mg·kg^(-1)·d^(-1)溶于2 mL双蒸水,灌胃1周。1周后结扎左冠状动脉前降支,结扎30 min后松开,恢复冠状动脉血流,复制在体心脏急性缺血/再灌注模型,假手术组仅穿线而不结扎前降支,其他手术步骤相同。再灌注120 min后,各组大鼠应用心脏原位末端转移标记技术(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测脂肪酸合成酶(Fas)和Fas配体(FasL)mRNA和蛋白表达。结果假手术组中的SD大鼠心肌细胞偶有凋亡,缺血-再灌注损伤引起大鼠心肌细胞凋亡增加。血脂康组与模型对照组、血脂康+甲羟戊酸组、甲羟戊酸组比较,大鼠心肌细胞凋亡均减少,差异有统计学意义(P0.05)。血脂康组与模型对照组比较,可减少Fas和FasL mRNA及蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.01),甲羟戊酸可以减弱血脂康的保护效应(P<0.05)。结论血脂康抑制缺血/再灌注大鼠心肌细胞Fas/FasL凋亡通路,进而抑制心肌细胞凋亡。

摘要： 目的探讨地佐辛对心肌缺血再灌注损伤大鼠β2肾上腺素受体(β2AR)/β-抑制蛋白2(β-arrestin2)/核转录因子-κB(NF-κB)通路及心肌凋亡的影响。方法60只大鼠随机分为假手术组(Sham组),心肌缺血再灌注模型组(MIRI组),地佐辛高、中、低剂量组(20、10、5 mg/kg),每组12只。地佐辛各剂量组在造模前30 min经股静脉注射相应剂量的地佐辛,Sham组和MIRI组给予等量生理盐水,采用手术结扎大鼠冠状动脉左前降支的方法复制大鼠MIRI模型。再灌注2 h后,检测各组大鼠心率(HR)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末(LVEDP),评价心脏功能;并检测血清中肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶MB(CKMB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平;HE染色观察左心室组织学变化;TUNEL染色观察心肌细胞凋亡情况,计算凋亡指数;免疫组织化学法检测心肌组织Bcl-2、Bax、Caspase-3的蛋白表达;Western blot检测心肌组织β2AR、β-arrestin2、IκBα、NF-κB p65蛋白表达。结果心肌组织病理学可见,Sham组心肌纤维完整、排列整齐,MIRI组心肌严重受损,局部肌纤维横纹消失,大量炎性细胞浸润;与Sham组相比,各治疗组明显好转。与Sham组相比,MIRI组大鼠HR、LVSP、Bcl-2/Bax比值、心肌组织β2AR、β-arrestin2、IκBα蛋白表达显著降低,各治疗组较MIRI组明显升高(均P<0.05);与Sham组相比,MIRI组LVEDP、血清CK、CK-MB、TNF-α、IL-6水平、心肌组织Bcl-2、Bax、Caspase-3、NF-κB p65蛋白表达、心肌细胞凋亡率显著升高,各治疗组较MIRI组明显降低(均P<0.05)。结论地佐辛可抑制炎症反应,减少心肌细胞凋亡,对MIRI大鼠具有保护作用;其作用机制可能与上调β2AR、β-arrestin2、IκBα的表达,降低NF-κB p65表达有关。

摘要： 目的：阿霉素是一种临床常用的化疗药物,其心脏毒性制约了它的临床使用,为了了解红黄煎剂在体外对阿霉素造成的心脏损伤降的作用,并探讨机制,做了如下体外实验. 方法：体外培养H9c2心肌细胞.用不同浓度红黄煎剂(HHD),阿霉素(DOX),红黄煎剂+阿霉素分别处理H9c2心肌细胞24h,MTT法检测细胞活力,TUNEL和DAPI双染法检测细胞凋亡率,western blot法检测细胞凋亡相关蛋白.然后Si-FoxO3a转染H9c2心肌细胞,免疫荧光及western blot法确定转染效果,western及MTT法检测红黄煎剂,阿霉素,红黄煎剂+可霉素对Si-FoxO3a转染的H9c2心肌细胞的作用. 结果：不同浓度(0-2mg·mL-1)的红黄煎剂作用与H9c2细胞,发现对细胞有一定的促进增值的作用(P＜0.05),阿霉素作用与H9c2细胞,其IC50为3.03±0.11μM,加用红黄煎剂以后发现其抑制曲线下移,其IC50为7.07±0.48μM,其差异有统计学意义(P＜0.01).TUNEL&DAPI双染法检测细胞凋亡,发现HHD+DOX将单用DOX组的凋亡率从43.23±5.22％下调到25.22±3.21％.其差异有统计学意义(P＜0.01).红黄煎剂能显著下调阿霉素引起的Caspase-3的激活(p＜0.05),同时能上调生存蛋白Bcl-2(p＜0.05).同时红黄煎剂能够提高H9c2细胞中的Akt/FoxO3a磷酸化的水平.转染si-FoxO3a后细胞增值率下降(P＜0.05),并且减弱了HHD促进细胞增值的作用(P＜0.05)Western blot检测也证明了HHD在转染细胞系中的保护作用降低(P＜0.05). 结论：红黄煎剂能降低阿霉素诱导的心肌细胞凋亡,其可能是通过调节AKT/FoxO3a产生的.

摘要： 目的：观察加参方对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的H9c2大鼠心肌细胞凋亡的干预作用,并探讨其作用机制. 方法：H9c2大鼠心肌细胞常规培养,用AngⅡ(1×10-6mol/L)建立心肌细胞凋亡模型,加参方0.3mg/mL干预24h,MTT法检测加参方对细胞活力的影响,DAPI染色镜下观察细胞核形态改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率.荧光定量PCR测定凋亡相关因子Caspase-3、Bax、Bcl-2、p53mRNA表达.蛋白免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关因子Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达. 结果：与模型组比较,加参方能干预AngⅡ诱导心肌细胞发生凋亡,提高心肌细胞活性,降低心肌细胞裯亡率(P<0.05);下调促凋亡因子Caspase-3、Bax、p53mRNA和蛋白的表达,上调抑凋亡因子Bcl-2mRNA和蛋白的表达(P<0.05). 结论：加参方可明显干预AngⅡ诱导H9c2大鼠心肌细胞发生凋亡,其机制可能与调节凋亡相关因子Caspase-3、Bax.Bcl-2mRNA和蛋白的表达有关.

摘要： 目的：探讨橙皮苷对大鼠心肌缺血/再灌注损伤诱导心肌细胞凋亡的可能机制. 方法：24只SD雄性大鼠随机均分为假手术组、缺血/再灌注(I/R)组及橙皮苷组,每组8只.予0.5％羧基纤维素钠或橙皮苷混悬液灌胃3天后,除假手术组外,其余2组大鼠均结扎冠状动脉左前降支30min后再灌注4h.术后,检测大鼠血清中肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)水平,心肌组织中高迁移率族蛋白1(HMGB1)、凋亡相关蛋白BCL-2及BAX的表达水平、BCL-2/BAX比值及心肌细胞凋亡指数. 结果：与假手术组相比,I/R组大鼠血清中CK及LDH水平均显著升高,心肌组织中BCL-2的表达及BCL-2/BAX比值下降,HMGB1和BAX表达及心肌细胞凋亡指数显著升高(P均＜0.05);与I/R组相比,橙皮苷组大鼠血清中心肌酶CK及LDH的水平明显降低,心肌组织中BCL-2的表达及BCL-2/BAX比值显著升高,HMGB1和BAX的表达及心肌细胞凋亡指数明显降低(P均＜0.05). 结论：橙皮苷通过抑制HMGB1的表达进而减轻心肌缺血/再灌注损伤诱导的心肌细胞凋亡.

摘要： 目的：观察益气活血中药对糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡的影响.方法：以高脂高糖饮食负荷腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病心肌病大鼠模型,造模4周后给予益气活血中药灌胃治疗,设空白对照、模型组为对照,4周后观察大鼠一般情况,计算心脏重量指数,采用HE染色光镜下观察心肌病理损害,流式细胞术测定心肌细胞凋亡率.结果：与模型组比较,给予益气活血中药各组血糖水平降低、体重增加,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);心肌病理损害减轻,心肌细胞凋亡率降低.结论：益气活血中药能改善糖尿病心肌病大鼠一般情况、血糖、体重及心肌组织结构,抑制糖尿病心肌病大鼠心肌细胞的凋亡.

摘要： 目的:观察红景天苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)心肌梗死面积及心肌细胞凋亡的影响,探讨大株红景天的抗MIRI的作用.rn 方法:将SD大鼠按随机分配的原则分为6组,每组6只:假手术组(Sham)、心肌缺血-再灌注模型组(I/R)、红景天苷预防组(红景天苷+缺血再灌注,S+I/R)、红景天苷治疗组(缺血再灌注+红景天苷,I/R+S)、红景天苷预防组+磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)特异性抑制剂LY294002组(S+I/R+ LY组)、红景天苷治疗组+PI3K特异性抑制剂LY294002组(I/R+ S+LY组).红景天苷预防组和预防组+LY组在造模前连续给药3天;红景天苷治疗组和治疗组+LY组在再灌注即刻加予红景天苷,Sham组和I/R组均给予等量的生理盐水腹腔注射.预防+LY纽和治疗+LY纽于冠脉左前降支(LAD)结扎前35min腹腔注射PI3K特异性抑制剂LY294002.rn 结果:与I/R组相比,红景天苷预防组和治疗组能显著缩小MIRI大鼠的梗死面积(P＜0.05),TUNEL法检测阳性细胞核显著减少(P＜0.05);与预防组和治疗组相比,预防+LY组,治疗+LY组心肌梗死面积显著扩大、细胞凋亡指数显著升高(P＜0.05).rn 结论:大株红景天能有效减少大鼠MIRI的心肌梗死面积和心肌细胞凋亡指数.

摘要： 目的:观察血府逐瘀口服液干预氧糖剥夺(OGD)及SIRT1转染H9c2大鼠心肌细胞模型,通过调节SIRT1观察细胞活性的变化.rn 方法:将H9c2大鼠心肌细胞分为6组:正常组,OGD组,SIRT1转染模型组,OGD+SIRT1转染模型组,OGD+血府逐淤口服液给药给药组,OGD+SIRT1转染模型+给药组.采用CCK-8试剂盒绘制细胞生长曲线,进行SIRT1细胞转染并对分组进行血府逐瘀口服液干预,通过吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双重荧光染色在光镜下观察细胞形态;荧光定量PCR检测SIRT1浓度与蛋白质表达情况,得出结论.rn 结果:RT-PCR测得SIRT1在OGD组、SIRT1转染组、OGD+SIRT1转染组、OGD+给药组与OGD+SIRT1转染模型+给药组中较正常组表达显著降低.SIRT1在OGD+给药组与正常组的表达差异是各组最小的,在OGD+SIRT1转染模型+给药组与正常组比较差异最为显著.rn 结论:本研究结果证明了SIRT1在体外氧糖剥夺心肌细胞中的抗凋亡作用,揭示SIRT1可能是血府逐瘀口服液抗心肌细胞凋亡功能的作用靶点之一.

摘要： 目的:乌头碱是一种来源于众多乌头属植物的具有生物活性的主要双萜类生物碱.本次研究的目的是评价给予乌头碱是否可以诱发大鼠体内外心肌细胞的凋亡,并且探索乌头碱诱发凋亡的可能机制.rn 方法:乌头碱的促凋亡作用通过在成年大鼠心脏组织中的透射式电子显微镜(TEM)观察及在新生大鼠心室肌细胞(NRVMs)中的细胞毒性测试进行直接评估,并通过测定成年大鼠心脏组织中的肌酸激酶(CK)、天冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)及无线遥测技术实时监测心电图进行间接评估.为了证明乌头碱的促凋亡效果,我们研究了包括Bcl-2、Bax、ERK、P-ERK、Caspase-9、Caspase-3及P53在内的凋亡相关蛋白的表达.此外,为了探索钙超载在乌头碱诱导凋亡中的作用及其作用靶点,使用IonWizard的肌节长度及钙瞬变模块进一步进行了肌节收缩及细胞内钙瞬变幅度的实时同步测定,探索了包括钙离子释放通道ryanodine受体(RyR)及钙离子ATP酶(SERCA)在内的肌浆网(SR)钙离子转运相关蛋白和细胞膜Na+/Ca2+交换体(NCX)等被认为是导致钙超载潜在靶点的蛋白表达情况.rn 结果:乌头碱治疗(O.OluM、0.04 uM、0.16 uM、0.64 uM)剂量依赖性的增加了原代NRVMs中LDH的水平并诱导了细胞的凋亡.在成年大鼠心脏组织中,乌头碱(1.46mg/kg,lOml/kg,每天给药一次,共10天)治疗也增加了CK、AST、LDH的水平及包括Bax、ERK、P-ERK、Caspase-9、Caspase-3及P53在内的促凋亡蛋白质的表达并减少了抗凋亡蛋白Bcl-2的表达.此外,通过透射式电子显微镜在乌头碱治疗大鼠的心脏组织中观察到了促凋亡效果的显著增加.在钙超载方面,对分离成年大鼠心室肌细胞进行乌头碱治疗(luM)在最初几分钟内时间依赖性的增加了肌节收缩及细胞内钙离子瞬变幅度,而在最后几分钭随着细胞内钙超载的产生,肌节收缩幅度降低,肌节收缩功能障碍.乌头碱(1.46mg/kg,lOml/kg,每天给药一次,共10天)治疗也时间依赖性的增加了RyR的表达,但没有明显影响SERCA和NCX的表达.rn 结论:以上结果提示乌头碱可通过上调RyR蛋白表达,促进RyR钙离子的释放进而诱导大鼠心肌细胞凋亡.

摘要： 目的:观察脓毒症状态下大鼠心肌细胞凋亡的变化并探讨糖皮质激素对心肌细胞凋亡的影响及其机制.方法:采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)制作脓毒症模型.体重为230～280g的Wistar大鼠被随机分为实验组(Ad、Bd、Cd)和对照组(A、B、C).每组大鼠均行CLP,对照组术后4小时开始给予舒普深200mg/kg,2次/天.实验组在以上基础上给予地塞米松.试验时间点(6、24、72小时)取出心脏,分离左心室,制备单细胞悬液,进行流式细胞仪检测.左心室行免疫病理检测抗细胞凋亡蛋白B淋巴细胞瘤/白血病—2 (B-cell lymphoma/leukemia-2,Bel-2)的表达.结果:Ad组、Bd组、Cd组大鼠心肌细胞凋亡分别较A组、B组、C组明显减少(p＜0.01);A组大鼠的心肌细胞凋亡率显著低于B组及C组大鼠;B组大鼠的心肌细胞凋亡率显著高于C组大鼠(p＜0.05);Ad、Bd、Cd组大鼠心肌细胞凋亡无显著差异(p＞0.05).结论:脓毒症时存在心肌细胞凋亡,以24小时最明显,脓毒症时应用糖皮质激素能够减少各个阶段心肌细胞凋亡.

摘要： 目的：本实验探讨SO2对ISO致大鼠心肌细胞凋亡的影响及其作用机制.方法：健康雄性Wistar大鼠共40只,随机分为对照组、ISO组、ISO+SO2组和SO2组,每组各10只.每组均为连续注射7天,最后一次给药后24小时处死大鼠.采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测大鼠心肌细胞凋亡,采用免疫组织化学法定量检测大鼠心肌组织中细胞色素c(cytc)、bcl-2、bax蛋白含量,采用比色法检测大鼠心肌组织Caspase-9和Caspase-3活性检测,采用SPSS13.0软件进行数据分析,结果用均数±标准差表示.组间比较用单因素方差分析,P＜0.05为差异有统计学意义.结果：1)与对照组相比,ISO组大鼠心肌凋亡显著增加(P＜0.01);给予SO2后,心肌凋亡明显好转(P＜0.01);而单纯给予SO2对心肌凋亡无明显影响.2)与对照组大鼠相比,ISO组大鼠心肌组织中的bax蛋白含量显著升高,bcl-2蛋白含量下降(P均＜0.01);给予SO2处理后,大鼠心肌组织中的bax蛋白含量下降,bcl-2蛋白含量升高(P均＜0.05);而单纯给予SO2对大鼠的bax和bcl-2蛋白含量均无显著影响(P均＞0.05).结论：SO2可显著改善iS0引起的大鼠心肌细胞凋亡，其作用机制与抑制bcl-2/bax/cytc/caspase-9这一信号通路激活有关。

摘要： 目的：本实验探讨外源性H2S对柯萨奇病毒B3引起的大鼠乳鼠心肌细胞凋亡的影响及其作用机制.方法：培养SD大鼠乳鼠原代心肌细胞,建立病毒性心肌炎(VMC)体外模型,随机分为正常组、模型组、模型组+50umol/l GYY4137、正常组+50umol/l GYY4137.Hoechst 33342对各组细胞进行染色,检测大鼠乳鼠心肌细胞凋亡,TBA法及酶标法分别检测各组细胞上清中丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)的表达,Western-blot法检测各组细胞bci-2/bax/cleved-caspase3蛋白盼表达.采用SPSS18.0软件进行数据分析,结果以均数士标准差表示.组间比较采用单因素方差分析,P＜0.05为差异有统计学意义.结果:1)与正常组比较，模型组心肌细胞凋亡明显增加(P0.05)。3)与正常组比较，模型组心肌细胞bcl-2蛋白含量降低、bax蛋白含量明显增加、(P0.05)。4)与正常组比较，模型组心肌细胞cleved-caspase3蛋白显著增高(P0.05)。结论:GYY4137可显著改善柯萨奇病毒日3引起的大鼠乳鼠心肌细胞凋亡，其作用机制与抑制bcl-2/bax/cleved-caspase3信号通路激活有关。

摘要： 本发明提供了一种β1-AA单克隆抗体，所述单克隆抗体利用以下两条多肽作为免疫原产生，多肽1：序列与HWWRAESDEARRCYNDPKCCDFVTNRC同一性为85％至100％的多肽；多肽2：序列与CHWWRAES DEARR同一性为85％至100％的多肽。本发明使用两条肽段进行免疫，其中多肽1段为β1肾上腺素受体细胞外第二环的氨基酸序列，但免疫原性较低；而多肽2段为针对多肽1段设计的免疫原性较高的肽段。因此，用这两条肽段分别免疫，在保证获得正确抗体的同时也提高了免疫原性。针对β1肾上腺素受体细胞外第二环、且与临床病人血清中存在的β1-AA具有相同的生物学效应的单克隆抗体首次制备成功，使用该单克隆抗体进行科学研究可以得到更可靠的实验结果。

摘要： 本发明公开了一种中药组合物在制备抗心肌细胞凋亡和/或抗心肌细胞凋亡相关疾病的药物中的应用，其中所述中药组合物是由按照下述重量配比的中药材制备而成：地黄1～10份，鸡血藤1～10份，麦冬1～7份，甘草1～7份，制何首乌1～7份，阿胶1～7份，五味子1～7份，党参1～7份，龟甲1～5份，大枣1～5份，桂枝0.1～2份。

摘要： 本发明属于生物医药技术领域，特别是指MYOG基因作为靶点在制备治疗心肌细胞凋亡相关的心血管疾病的药物中的应用。本发明通过体外构建血管紧张素II诱导的人诱导多能干细胞分化的心肌细胞凋亡模型，首次揭示了转录因子MYOG在抑制心肌细胞凋亡方面的作用，为心肌细胞凋亡相关的心血管疾病的药物研发提供了理论基础和科学依据，是心血管疾病药物研发的新靶点。

摘要： 本发明公开了一种中药组合物在制备抗心肌细胞凋亡和/或抗心肌细胞凋亡相关疾病的药物中的应用，其中所述中药组合物是由按照下述重量配比的中药材制备而成：地黄1～10份，鸡血藤1～10份，麦冬1～7份，甘草1～7份，制何首乌1～7份，阿胶1～7份，五味子1～7份，党参1～7份，龟甲1～5份，大枣1～5份，桂枝0.1～2份。

摘要： 本发明公开了附子灵在制备预防和/或治疗心肌细胞凋亡引起的疾病的药物中的应用。本发明首次发现，附子灵具有保护心肌细胞的作用，可以通过降低ROS生成来抑制心肌细胞内质网应激损伤来抑制ISO引起的心肌细胞凋亡，可用于制备预防和/或治疗心肌细胞凋亡引起的疾病的药物；还发现，人参皂苷Rb1和附子灵的组合物、丹参酮IIA和附子灵的组合物与附子灵单独作用相比较，可以显著提高心肌细胞存活率。本发明可广泛应用于医药领域，能够为心肌细胞凋亡引起的疾病治疗提供新的药物来源。

摘要： 本发明属于生物医药技术领域，特别是指MYOG基因作为靶点在制备治疗心肌细胞凋亡相关的心血管疾病的药物中的应用。本发明通过体外构建血管紧张素II诱导的人诱导多能干细胞分化的心肌细胞凋亡模型，首次揭示了转录因子MYOG在抑制心肌细胞凋亡方面的作用，为心肌细胞凋亡相关的心血管疾病的药物研发提供了理论基础和科学依据，是心血管疾病药物研发的新靶点。

摘要： 本发明公开了一种构建人心肌细胞凋亡模型的方法。发明人在研究过程中意外发现，一定浓度之上的血管紧张素Ⅱ处理hiPSC‑CM一定时间后，可以有效诱导hiPSC‑CM凋亡。本发明一些实例，使用血管紧张素Ⅱ诱导人心肌细胞的凋亡，构建与人体更加接近的心肌细胞凋亡模型，为后续的药理实验提供有力的工具和方法。

摘要： 本发明公开了一种miR‑125b 慢病毒在制备心肌细胞凋亡的保护药物中的应用。本发明具有明显的心肌细胞凋亡的保护作用，应用前景广阔。

摘要： 本发明公开了SCAD基因或SCAD蛋白在制备预防、缓解和/或治疗病理性心肌肥厚和/或心力衰竭的药物中的应用，以及在制备抑制心肌细胞凋亡的药物中的应用。本发明首次发现并证实SCAD的蛋白、mRNA表达及其酶活性在病理性心肌肥厚的体内外模型中均显著降低，而在生理性心肌肥厚的体内外模型中均显著增高。在心肌细胞凋亡模型中，SCAD的蛋白、mRNA表达及其酶活性也显著降低。采用RNA干扰技术，SCAD的siRNA能显著诱导心肌细胞出现病理性肥大和凋亡。因此，本发明提供了SCAD作为一个新的预防、缓解和/或治疗病理性心肌肥厚、心力衰竭和/或心肌细胞凋亡的药物作用靶点。

摘要： 本发明涉及一种抑制心肌细胞凋亡的药物，该药物由有效成分和药学上可以接受的辅料组成，其特征在于所述的有效成分由以下组分组成：黄芪总皂苷提取物91-226重量份，当归挥发油3-15重量份；其中，所述的黄芪总皂苷提取物由黄芪根经水提、大孔吸附树脂和乙醇结晶得到。本发明所述的药物上调抑凋亡蛋白Bcl-2、Hsp-70的表达和抑制促凋亡蛋白Bax及细胞凋亡蛋白Caspase-3的表达的能力都强于单一的黄芪总皂苷和单一的当归挥发油，具有抑制脂质过氧化或心肌缺血所致的心肌细胞凋亡效果显著的优点。