黄芩素

摘要： 铁死亡是由铁积累和随后的脂质过氧化引起的非凋亡调节细胞死亡。目前,铁死亡对癌症的治疗作用越来越受到关注。黄芩苷是黄芩中的一种活性成分,对各种癌症类型具有抗癌潜力。然而,黄芩素对膀胱癌的影响及其潜在的分子机制仍然很大程度上未知。

摘要： 溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)作为一种慢性非特异性的炎症性疾病,病变多波及直肠及乙状结肠,临床症状主要表现为腹痛、腹泻和黏液脓血便,多伴里急后重。目前尚未明确病因及疾病机制,多认为与遗传易感性、精神心理、自身免疫及环境因素等相关。随着现代生活方式的改善,饮食结构西方化,我国居民生活习惯逐渐改变.

摘要： 目的:探讨黄芩素对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞(H9C2)损伤和凋亡的影响,并分析其机制是否与调控miR-378a-5p表达有关。方法:将H9C2细胞分为对照组、LPS组、LPS+10μmol/L黄芩素组、LPS+20μmol/L黄芩素组、LPS+40μmol/L黄芩素组、LPS+20μmol/L黄芩素+miR-con组、LPS+20μmol/L黄芩素+miR-378a-5p组。细胞计数法、流式细胞术分析细胞活力和凋亡。试剂盒检测丙二醛(MDA)水平、乳酸盐脱氢酶(LDH)释放量、TNF-α和IL-6分泌量以及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。实时定量PCR分析miR-378a-5p表达量。结果:LPS处理显著降低H9C2细胞存活率、促进细胞凋亡,增加MDA水平、LDH释放量、TNF-α和IL-6分泌量、miR-378a-5p表达量,降低SOD和GSH-Px活性(P<0.05)。黄芩素显著提高LPS处理的H9C2细胞存活率,抑制细胞凋亡,降低MDA水平、LDH释放量、TNF-α和IL-6分泌量、miR-378a-5p表达量,并增加SOD和GSH-Px活性(P<0.05)。过表达miR-378a-5p显著减弱黄芩素对LPS处理的H9C2细胞存活率、凋亡、MDA水平、LDH释放量、TNF-α和IL-6分泌量以及SOD和GSH-Px活性的影响(P<0.05)。结论:黄芩素可减轻LPS诱导的心肌细胞损伤和凋亡,其机制可能与下调受损心肌细胞miR-378a-5p表达有关。

摘要： 目的建立茵芩合剂的质量控制方法。方法采用微乳薄层色谱法对制剂中的茵陈、黄芩和大黄进行鉴别;采用高效液相色谱法同时测定绿原酸、咖啡酸、黄芩苷和黄芩素的含量,色谱柱为Diamonsil C_(18)(2)(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.25%磷酸溶液,梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长为310 nm,柱温为30°C。结果微乳薄层色谱显色清晰且阴性对照无干扰;绿原酸、咖啡酸、黄芩苷和黄芩素分别在5.96~59.60μg/ml(r=0.9991)、0.60~6.00μg/ml(r=0.9992)、40.80~408.00μg/ml(r=0.9993)、1.98~19.84μg/ml(r=0.9994)范围内线性关系良好;平均加样回收率分别为96.56%、101.84%、98.77%和98.98%。结论本法操作简便、结果准确,重复性好,可用于茵芩合剂的质量控制。

摘要： 目的:研究黄芩素等9种中药单体对艰难梭菌的体外抑菌活性。方法:采用滤纸片法测定9种中药单体对艰难梭菌的抑菌活性,筛选出其中活性较好的中药单体;采用琼脂稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC);微量肉汤稀释法测定最低杀菌浓度(MBC);滤纸片法测定pH稳定性以及棋盘法测定与万古霉素联合的抑菌作用。结果:黄芩素、槲皮素对艰难梭菌抑菌活性较好,MIC值分别为1.25、2.5 mg·mL^(-1),MBC值分别为1.25、5 mg·mL^(-1),在pH 3~8范围内具有良好稳定性,与万古霉素有协同抑菌作用。结论:黄芩素、槲皮素在体外对艰难梭菌有良好的抑菌活性,为治疗艰难梭菌感染提供了一种新思路。

摘要： 目的探究黄芩素和汉黄芩素抑制肝癌细胞能量代谢的作用机制差异。方法将人肝癌HepG2细胞分为空白对照组(不给药)、黄芩素和汉黄芩素不同剂量组(均为1.25、2.5、5、10、20μmol/L),采用MTT法检测黄芩素和汉黄芩素对细胞活力的影响。将HepG2细胞分为空白对照组(不给药)、黄芩素组、汉黄芩素组,给药培养后,采用增强型ATP试剂盒检测细胞ATP浓度,采用糖酵解和线粒体压力测试试剂盒评价糖酵解及线粒体能量代谢水平;采用分子对接预测黄芩素和汉黄芩素与能量代谢关键酶的亲和力大小,筛选亲和力较高的能量代谢关键酶;采用Western blot法检测能量代谢关键酶的表达情况。结果在2.5~20μmol/L剂量范围内,黄芩素和汉黄芩素的半数抑制浓度分别为12.84、24.09μmol/L,且黄芩素1.25μmol/L、汉黄芩素2.5μmol/L对细胞活力基本无影响,筛选其为后续实验的给药剂量。与空白对照组比较,黄芩素组、汉黄芩素组HepG2细胞ATP浓度显著降低(P0.05);黄芩素与丙酮酸激酶M2、线粒体酶复合物Ⅰ(CⅠ)、CⅡ、CⅣ结合力较强,而汉黄芩素只与丙酮酸激酶M2的结合力较强;汉黄芩素能显著下调己糖激酶、磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶M2、CⅠ、CⅡ、CⅣ蛋白的表达水平(P0.05)。结论黄芩素和汉黄芩素均能抑制肝癌HepG2细胞能量代谢,但作用机制不同:黄芩素的作用与影响关键酶活性有关,而汉黄芩素的作用与抑制能量代谢关键酶表达有关。

摘要： 目的探索核因子E2相关因子(Nrf2)在黄芩素抑制氧化应激诱导心肌细胞凋亡中的作用。方法采用MTS、TUNEL细胞凋亡染色观察黄芩素对叔丁基过氧化氢(TBHP)诱导H9c2心肌细胞凋亡的影响,分子对接、分子动力学及表面等离子体共振技术(SPR)探索黄芩素与Nrf2的相互作用,Western blot法检测Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达,试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,Nrf2抑制剂ML385验证Nrf2在黄芩素抑制氧化应激诱导心肌细胞凋亡中的作用。结果黄芩素能剂量依赖性地抑制TBHP诱导的心肌细胞活力降低和凋亡率升高(P<0.01),抑制TBHP诱导的SOD、GSH-Px活性降低(P<0.01)。分子对接发现,黄芩素与Keap1的Kelch位点结合,结合力为-9.0 kcal/mol,与Keap1的氨基酸残基形成氢键。分子动力学与SPR研究发现,黄芩素与Keap1结合的平衡解离常数(K_(D))为6.54×10^(-7)mol/L,具有很强的结合能力,黄芩素剂量依赖性地上调Nrf2、HO-1、NQO1的表达(P<0.05),ML385抑制了黄芩素对TBHP诱导心肌细胞凋亡的保护作用。结论黄芩素能抑制氧化应激导致的心肌细胞凋亡,其机制与激活Nrf-2信号通路有关。

摘要： 目的:基于Wnt/β-catenin信号通路探讨黄芩素(BA)对帕金森(PD)大鼠旋转行为及对脑黑质多巴胺能神经元凋亡的影响。方法:60只雄性SD大鼠,随机选取10只仅做假手术,设为伪手术组,其余50只建立PD模型,将建模成功的42只大鼠随机分为PD组(10只)、BA低剂量组(10只)、BA高剂量组(11只)、多巴丝肼组(11只)。确定造模成功后第2天BA低剂量组、BA高剂量组分别采用80 mg/(kg·d)、160 mg/(kg·d)BA灌胃,多巴丝肼组采用多巴丝肼片6.5 mg/(kg·d)灌胃,伪手术组与PD组均给予等量0.1 ml 2%DMSO溶液灌胃,1次/d,连续干预4周。末次给药后4 h观察大鼠旋转行为;脱颈处死大鼠后测定各组脑黑质IL-1β、TNF-α、IL-6、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;TH染色观察各组脑黑质多巴胺能损伤情况;Tunel染色测定各组脑黑质多巴胺能神经元凋亡率;Western blot测定各组脑黑质p-β-catenin、β-catenin、cyclin-D1、c-myc蛋白相对表达量。结果:与伪手术组相比,PD组、BA低剂量组、BA高剂量组、多巴丝肼组30 min旋转次数增加,脑黑质IL-1β、TNF-α、IL-6、MDA水平、脑黑质多巴胺能神经元凋亡率均升高,脑黑质SOD水平均降低(P<0.05);与PD组相比,BA低剂量组、BA高剂量组、多巴丝肼组30 min旋转次数减少,脑黑质IL-1β、TNF-α、IL-6、MDA水平,脑黑质多巴胺能神经元凋亡率均降低,脑黑质SOD水平均升高(P<0.05);与BA低剂量组相比,BA高剂量组、多巴丝肼组30 min旋转次数减少,脑黑质IL-1β、TNF-α、IL-6、MDA水平,脑黑质多巴胺能神经元凋亡率均降低,脑黑质SOD水平均升高(P<0.05);与BA高剂量组相比,多巴丝肼组30 min旋转次数减少,脑黑质IL-1β、TNF-α、IL-6、MDA水平,脑黑质多巴胺能神经元凋亡率均降低,脑黑质SOD水平升高(P<0.05);伪手术组脑黑质TH染色结果可观察到细胞丰富,胞体均匀着色,具有丰富突起;PD组脑黑质多巴胺能神经元细胞数量、残存神经细胞突起显著减少;BA低剂量组、BA高剂量组、多巴丝肼组经干预后上述变化均改善;与伪手术组相比,PD组、BA低剂量组、BA高剂量组、多巴丝肼组p-β-catenin/β-catenin、cyclin-D1、c-myc蛋白相对表达量均降低(P<0.05);与PD组相比,BA低剂量组、BA高剂量组、多巴丝肼组p-β-catenin/β-catenin、cyclin-D1、c-myc蛋白相对表达量均升高(P<0.05);与BA低剂量组相比,BA高剂量组、多巴丝肼组p-β-catenin/β-catenin、cyclin-D1、c-myc蛋白相对表达量均升高(P<0.05);与BA高剂量组相比,多巴丝肼组p-β-catenin/β-catenin、cyclin-D1、c-myc蛋白相对表达量均升高(P<0.05)。结论:BA可改善PD大鼠旋转行为,减轻脑黑质炎症反应及氧化损伤,减少脑黑质多巴胺能损伤及神经元凋亡,推测其作用机制与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。

摘要： 目的:观察黄芩素对大鼠坐骨神经慢性压迫引起痛行为的抑制作用及初级感觉神经元中胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的调控作用,阐明黄芩素对神经病理痛的镇痛机制。方法:48只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和黄芩素组,每组16只。各组大鼠麻醉后,假手术组大鼠仅暴露坐骨神经,模型组和黄芩素组大鼠行坐骨神经慢性缩窄手术建立大鼠慢性缩窄性神经损伤(CCI)模型。造模成功后黄芩素组大鼠腹腔连续注射黄芩素7 d。手术前后不同时间点分别检测各组大鼠患侧机械缩足反射阈值(MWT)和热缩足反射潜伏期(TWL)以评价神经损伤引起的痛行为。第11天,每组选取6只大鼠,免疫荧光染色检测各组大鼠脊髓背角组织中c-Fos阳性细胞数;第28天检测各组其余大鼠背根神经节(DRG)中GDNF荧光强度。结果:手术前各组大鼠MWT和TWL比较差异无统计学意义(P>0.05);与假手术组比较,术后1 d模型组和黄芩素组大鼠MWT和TWL明显降低(P0.05);与假手术组比较,模型组大鼠脊髓背角组织中c-Fos阳性细胞数升高(P<0.05);与模型组比较,黄芩素组大鼠脊髓背角组织中c-Fos阳性细胞数降低(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠DRG中GDNF荧光强度降低(P<0.05);与模型组比较,黄芩素组大鼠DRG中GDNF荧光强度升高(P<0.05)。结论:黄芩素对大鼠神经病理痛具有镇痛作用。初级感觉神经元中GDNF参与坐骨神经损伤引起的神经病理痛,黄芩素对神经病理痛的镇痛作用可能与其调控GDNF的表达有关。

摘要： 目的探讨黄芩素在七氟醚诱导的多巴胺神经元损伤中的作用及机制。方法使用黄芩素预处理SN4741细胞1 h,再使用0%、1%、3%、5%的七氟醚分别处理12 h,采用相应方法检测SN4741细胞活性及Fe^(2+)、ROS、GSH、GPX4蛋白水平。结果与0%七氟醚处理12 h比较,1%七氟醚处理12 h SN4741细胞活性无明显变化(P>0.05),3%、5%七氟醚处理12 h SN4741细胞活性显著降低(P<0.05)。与对照组比较,七氟醚组SN4741细胞Fe^(2+)、ROS水平显著升高,SN4741细胞GSH水平显著降低(P<0.05);与七氟醚组比较,七氟醚+黄芩素组SN4741细胞Fe^(2+)、ROS水平显著降低,SN4741细胞GSH水平显著升高(P<0.05)。与七氟醚组比较,七氟醚+黄芩素10μM组、七氟醚+黄芩素20μM组SN4741细胞活性显著升高(P<0.05)。与对照组比较,七氟醚组SN4741细胞GPX4蛋白水平显著降低(P<0.05);与七氟醚组比较,七氟醚+黄芩素组SN4741细胞GPX4蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论随着七氟醚浓度的升高,SN4741细胞活性逐渐降低。七氟醚处理可导致SN4741细胞Fe^(2+)、ROS水平升高,GSH水平降低,而黄芩素预处理可以逆转Fe^(2+)、ROS及GSH水平的变化,减少七氟醚引起的铁死亡。黄芩素还可通过升高GPX4蛋白水平来减轻七氟醚诱导的SN4741细胞铁死亡。

摘要： 本实验研究黄芩素对镉致大鼠生长性能和血液生理指标的影响.将24只SD大鼠随机平均分为4组,分别为对照组、镉组、黄芩素组和黄芩素+镉组,每组6只.每天固定时间按照如下方法处理大鼠:对照组用生理盐水灌喂;镉处理组按2mg/kg·bw的Cd2+腹腔注射氯化镉溶液;黄芩素组每天灌服黄芩素溶液(100mg/kg·bw);黄芩素+镉组大鼠腹腔注射2mg/kg·bw的Cd2+氯化镉溶液,再灌服黄芩素(100mg/kg·bw)溶液.每周称量大鼠体重,4周后,采集大鼠血液,用血细胞分析仪测定大鼠血液生理指标,并处死大鼠,收集肝脏、肾脏、睾丸,计算器官系数.结果表明,镉组与对照组相比,采食量减少,体重下降,肝脏器官系数显著增大(P＜0.05),睾丸器官系数显著降低(P＜0.05);白细胞(WBC)数目极显著升高(P＜0.01),红细胞数目(RBC)和平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)显著降低(P＜0.05),血红蛋白(HGB)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)和红细胞压积(HCT)极显著降低(P＜0.01),其他指标差异不显著(P＞0.05).黄芩素能够显著或极显著降低镉引起的毒性损伤.本研究结果说明镉对大鼠的生长性能、肝和心器官系数、血液指标有影响,黄芩素对镉致大鼠的损伤有一定的保护作用.

摘要： 本文采用Caco-2细胞模型评价黄芩主要活性成分,黄芩苷和黄芩素,对P-gp活性和表达的影响.本文以维拉帕米为阳性对照,荧光素为阴性对照,考察药物是否能够抑制细胞对P-gp底物Rh-123的外排;药物作用后,采用免疫细胞化学法,流式细胞仪分析Caco-2细胞膜上P-gp表达量的变化.结果显示,黄芩苷能够减少Rh-123的外排但对P-gp的表达无作用,黄芩素能够显著增加Rh-123的外排并降低P-gp的表达.这一结果说明黄芩素为P-gp抑制剂,将为探索高效低毒的P-gp抑制剂提供理论依据.

摘要： 目的：建立高效液相色谱法同时测定枇芩口服液中黄芩甙、黄芩素和汉黄芩素的含量.rn 方法：采用Kromasil-C18柱(5μm,4.6×250mm);流动相为甲醇-0.2％磷酸溶液,梯度洗脱;流速为1.0ml/min,进样量为10μl,检测波长280nm,柱温35°C,测定枇芩口服液中黄芩甙、黄芩素和汉黄芩素的含量.rn 结果：枇芩口服液中的黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素达到了完全分离,且峰面积与进样量线性关系良好.黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的线性范围分别为34.20～171.0μg(r=0.9998)、1.44～7.20μg(r=0.9996)、1.36～6.80μg(r=0.9977);高中低浓度样品的平均回收率分别为黄芩甙99.09％、99.56％、99.61％;黄芩素98.46％、97.95％、98.31％;汉黄芩素98.44、98.51、98.10％;rn 结论：该方法操作简单,准确、重复性好,可用于枇芩口服液的质量控制.

摘要： 目的:制备黄芩素分子印迹整体柱并研究其特异识别能力.方法:以黄芩素分子为模板,甲基丙烯酸(MAA)为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂,DMF和十二醇为混合致孔剂,偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂,采用原位聚合法合成黄芩素分子印迹整体柱,并考察了印迹整体柱在不同有机相中对黄芩素与汉黄芩素的识别能力,以及流速、柱温对保留因子与分离因子的影响.结果:模板分子与功能单体之间的比例以1∶6为最佳,得到的分子印迹整体柱对模板分子具有特异的识别能力,黄芩素和其结构类似物汉黄芩素达到较好的分离.结论:合成的印迹整体柱对模板分子具有很强的亲和力和良好的识别能力,可以用做黄芩素的分离材料.

摘要： 目的:建立同时测定甘地胶囊中黄苓苷和黄芩素含量的方法.方法:HPLC,C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相0～40min,90％～70％(A);40～65min,70％～40％(A);65～70min,40％～0％(A);70～75min,0％～90％(A);75～80 min,90％(A),流速1.0mL·min-1,检测波长215nm,柱温为室温.结果:黄芩苷和黄芩素进样量分别在3.125～200.000μg·mL-1,3.25～208.00μg·mL-1,线性关系良好,平均回收率分别为99.7％,100.1％,RSD分别为2.21％,0.30％.结论:该方法简便、准确,重复性好,可用于同时测定甘地胶囊中黄芩苷和黄芩素含量.

摘要： 目的:研究黄芩素在不同种属肝微粒体中的UGT代谢特性.方法:使用肝微粒体体外代谢孵育法,HPLC分析方法,选不同种属的肝微粒体进行黄芩素UGT代谢研究.结果:黄芩素在人肝微粒体及不同种属的肝微粒中,加入UDPGA进行孵育后,并经HPLC分离检测到3个代谢产物,分别是:黄芩苷、黄芩素-6-O葡萄糖醛酸苷、5,6,7-三羟基黄酮-6-O-葡萄糖-7-O-葡萄糖醛酸苷.同时,不同种属间UGT代谢物的活性表现出较大差异.结论:黄芩素在人及不同种属肝微粒体UGT代谢中均生成三个葡萄糖醛酸化代谢产物，但是不同种属间的代谢表现出酶动力学的差异。

摘要： 在大鼠灌胃给予黄芩素200mg／kg连续7天后，取肝脏制备肝微粒体，将微粒体与CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A4特异性探针底物共同孵育，通过检测各探针药物的代谢速率来评价各亚型活性的变化。结果表明，与对照组相比，给药组对CYP2C9和CYP2E1有显著的抑制作用。对CYF2C9的抑制率为26.76％(P<0.05)，对CYP2El的抑制率为29.12％(P<0.01)．黄芩素在同与这两种酶代谢相关的药物合用时，需考虑避免可能出现的不良反应。

摘要： 目的:研究不同偶联法制备黄芩素全抗原。方法:利用重氮化对氨基苯甲酸法和琥珀酸酐法两种方法合成黄芩素全抗原，并经紫外光谱、SDS-PAGE电泳鉴定。结果：黄芩素全抗原合成成功，两种方法的偶联比分别为8:1和4:1。结论：重氮化对氨基苯甲酸偶联法合成黄芩素抗原比琥珀酸酐法合成抗原的结合率高，黄芩素与牛血清蛋白交联抗原的合成成功，为制备黄芩素的单克隆抗体及建立快速检测黄芩素ELISA 分析方法提供了依据。

摘要： 多药耐药(Multidrug Resistence，MDR)是肿瘤药物治疗失败的重要原因。随着对MDR研究与认识的深入，已有多种针对逆转MDR的探索。然而目前使用的肿瘤MDR逆转化剂大多毒副作用较大，限制了其临床应用。因此，寻找新的肿瘤MDR逆转剂仍然是肿瘤治疗研究的热点及难点。文章综述了体外研究不同浓度黄芩素对人肝癌耐氟尿嘧啶细胞株BEL-7402／5-FU MDR的逆转效果并探讨了其可能的作用机制，为临床筛选新的肿瘤MDR逆转剂提供实验依据，概述了研究的方法及结果，并认为黄芩素对人肝癌耐氟尿嘧啶细胞株BEL-7402/5-FU MDR有部分逆转作用，其可能通过抑制Ras/Raf/MEK/ERK信号通路中ERK1/2蛋白的磷酸化而抑制P-gp及Bcl-xl的表达最终逆转BEL-7402/5-FU MDR。

摘要： 本研究通过对黄芩药材进行性状鉴别，黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量测定，以及含水量测定，发现北京地区黄芩药材与河北承德道地产区黄芩药材基本具有一致性，说明北京地区与河北承德道地产区所产黄芩药材的质量无明显差异。通过本研究，可以初步得出以下结论：l、对比北京地区与河北承德道地产区的黄芩药材，可见两地黄芩药材中的黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量范围均较大，且无明显差异，说明北京地区与河北承德道地产区所产黄芩的质量无明显差异，此外，两地药材的含水量也无明显差异；2、对比黄芩栽培品和非栽培品，以黄芩苷为评价指标，北京地区和河北承德道地产区的黄芩栽培品质量均优于非栽培品，且质量均高于药典标准，此外，黄芩栽培品和非栽培品的含水量无明显差异；3、对比枯芩和子芩药材，其中的黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的含量无差异，且含水量无明显差异，因此，不可通过黄芩中主要成分的含量来判定枯芩和子芩质量的优劣情况。

摘要： 本发明公开了一种从黄芩中同时提取黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的方法，包括：将黄芩水提、浓缩，得浓缩液；将浓缩液上大孔吸附树脂柱，水洗至无色，然后依次用体积分数60‑70%的乙醇、75‑80%的乙醇进行洗脱，分别收集洗脱液；将含黄芩苷的洗脱液减压浓缩，调pH、保温、静置、过滤，得黄芩苷纯品；将含黄芩素和汉黄芩素的洗脱液蒸干，上凝胶柱，以甲醇洗脱，收集黄芩素流份和汉黄芩素流份，将流份中的甲醇除去，得黄芩素纯品、汉黄芩素纯品。本发明提取率高，减少了有效成分的损失，提高了黄芩资源利用率。

摘要： 本发明公开了一种自身酶解法测定黄芩中黄芩素与汉黄芩素的方法。本发明测定方法在适宜温度下，利用黄芩本身所含的酶，在水溶液中酶解黄芩苷、汉黄芩苷等苷类化合物，酶解完成后，加酸性甲醇，杀灭黄芩酶的同时保持黄芩素的稳定性，并使酶解的黄芩苷元类充分溶解，滤过，续滤液作为样品溶液。用HPLC法，以甲醇-0.1％磷酸溶液，体积比为51～54∶49～46为流动相，275nm为检测波长，同时测定黄芩中的黄芩素与汉黄芩素，方法简便、快捷、待测成分酶解完全、波峰分离良好。自身酶解法测定黄芩中黄芩素与汉黄芩素的方法为首次报道，为该成分的充分提取、分离，提供了真实的基础含量数据。黄芩素的含量实测值大于以黄芩苷和黄芩素分子量推算的理论值。

摘要： 本发明提供了一种黄酮‑O‑甲基转移酶，其包括如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5所示氨基酸序列的黄酮‑8‑甲基转移酶以及如SEQ ID No.6、SEQ ID No.7所示氨基酸序列的黄酮‑7‑甲基转移酶中的一种或多种，并提供了编码该氨基酸序列的核苷酸序列、以及含有编码上述氨基酸的多核苷酸序列的重组载体、重组宿主细胞及其应用。本发明中上述黄酮‑O‑甲基转移酶能够用于黄酮如汉黄芩素、异汉黄芩素和苏荠苧黄酮等的合成以及，能够催化具有相似结构的黄酮类物质的合成和甲基化反应，为工业化大规模发酵生产或酶转化方法生产甲基化黄酮类化合物奠定基础。

摘要： 本发明涉及一种由内源酶水解黄芩中黄芩苷和汉黄芩苷制备并分离纯化黄芩素和汉黄芩素的方法，目的是提供一种简便、安全、经济、高效地从黄芩中提取、分离和纯化高纯度黄芩素和汉黄芩素的方法。所采取的技术方案是：以中药黄芩为原料，采用独创性的内源酶诱导生物转化技术、负压空化提取技术、液液萃取技术、正相硅胶中低压制备液相色谱技术以及低温析晶和重结晶技术等一系列高效转化、提取、分离和纯化技术手段，最终得到高纯度的黄芩素和汉黄芩素，黄芩苷和汉黄芩苷的转化率分别可达98.39％和98.16％，目标产物黄芩素和汉黄芩素的含量提高了4.47倍和2.85倍，纯度均可达98％以上。本发明克服了现有技术所存在的对黄芩苷和汉黄芩苷的破坏作用大，转化率低，污染严重等缺点，具有生产工艺简单易行、安全环保，转化率高、目标化合物纯度高的优点，对医药、保健产品的开发，以及工业化生产和应用有很重要的意义。

摘要： 本发明公开了一种从黄芩中同时提取黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的方法，包括：将黄芩水提、浓缩，得浓缩液；将浓缩液上大孔吸附树脂柱，水洗至无色，然后依次用体积分数60-70%的乙醇、75-80%的乙醇进行洗脱，分别收集洗脱液；将含黄芩苷的洗脱液减压浓缩，调pH、保温、静置、过滤，得黄芩苷纯品；将含黄芩素和汉黄芩素的洗脱液蒸干，上凝胶柱，以甲醇洗脱，收集黄芩素流份和汉黄芩素流份，将流份中的甲醇除去，得黄芩素纯品、汉黄芩素纯品。本发明提取率高，减少了有效成分的损失，提高了黄芩资源利用率。

摘要： 本发明提供了一种测定感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法，旨在提供一种测定准确、操作简单的测定感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法；该方法是：量取本品1ml置20ml容量瓶中，加体积比1：1的甲醇和乙腈其溶解，蒸干溶剂，用乙腈定容至20ml刻度线，混匀过滤膜，取滤液入超高效液相色谱仪进行检测；属于化学检测技术领域。

摘要： 本发明提供了一种测定感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法，旨在提供一种检测灵敏度高，重复性好的测定感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法；该方法是量取本品1ml置20ml容量瓶中，加体积比1：1的甲醇和乙腈其溶解，并体积比1：1的甲醇和乙腈稀释至刻度，混匀过0.22微米的滤膜，取滤液注入液相色谱仪进行检测；属于化学检测技术领域。

摘要： 本发明提供了一种从黄芩中同时分离汉黄芩素与黄芩素单体的方法，通过将黄芩药材粉碎，加入适量水以及食用酶进行酶解，将酶解后的药材进行超临界萃取，使用夹带剂分段收集，进行重结晶后可分别得到黄芩素与汉黄芩素；所述方法从黄芩药材中同时提取出黄芩苷元类化合物单体，且收率比直接分离法高出3倍以上，制备的汉黄芩素和黄芩素单体纯度均在98%以上，且流程简便、绿色环保，具有非常重要的生产实践意义，适合规模化工业生产的需要。

摘要： 本发明公开了一种黄芩中黄芩素与汉黄芩素同时定量测定方法。本发明测定方法在适宜温度下，利用黄芩本身所含的酶，在水溶液中酶解黄芩苷、汉黄芩苷等苷类化合物，酶解完成后，加酸性甲醇，杀灭黄芩酶的同时保持黄芩素的稳定性，并使酶解的黄芩苷元类充分溶解，滤过，续滤液作为样品溶液。用HPLC法，以甲醇-0.1％磷酸溶液，体积比为51～54∶49～46为流动相，275nm为检测波长，同时测定黄芩中的黄芩素与汉黄芩素，方法简便、快捷、待测成分酶解完全、波峰分离良好。黄芩中黄芩素与汉黄芩素同时定量测定方法为首次报道，为该成分的充分提取、分离，提供了真实的基础含量数据。黄芩素的含量实测值大于以黄芩苷和黄芩素分子量推算的理论值。

摘要： 本发明公开了一种汉黄芩素与黄芩素组合物及其在制备抗结直肠癌药物中的应用。本发明发现，汉黄芩素与黄芩素具有明显的协同抑制结直肠癌细胞增殖的活性，产生了让人意料不到的1+1＞2的技术效果，汉黄芩素与黄芩素组合物具有开发成抗结直肠癌药物的前景。