P-糖蛋白

摘要： 目的研究没药甾酮(guggulsterone,GS)能否通过调控孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)/P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)通路增强化疗药物对人肝癌细胞增殖抑制和凋亡诱导作用。方法以人肝癌细胞HepG2为研究对象,检测GS、化疗药物顺铂(cis-platinum,DDP)和5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)单独或联合使用对HepG2细胞增殖、凋亡、MDR1 mRNA转录,及PXR/P-gp通路的调控作用。结果与DDP、5-FU单药组相比,联用GS(30μmol·L^(-1))24 h明显增强DDP、5-FU对HepG2细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用。与5-FU单药组相比,联用GS(30μmol·L^(-1))24 h明显下调PXR、P-gp表达和MDR1 mRNA转录水平。进一步研究发现,PXR激动剂利福平能够诱导PXR和P-gp表达,与GS联用后,PXR和P-gp明显下调;PXR抑制剂酮康唑能够抑制PXR/P-gp表达,与GS联用后,PXR和P-gp进一步下调。结论GS可通过下调PXR/P-gp通路降低肿瘤细胞对化疗药物耐药性,增强化疗药物对人肝癌细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用。

摘要： 钙调神经磷酸酶抑制剂(calcineurin inhibitor,CNI)他克莫司和环孢素是广泛使用的免疫抑制药物,具有个体内和个体间的药动学和药效学变异性大的特性。CNI的亲脂性高,经历广泛的首过代谢,是肠道和肝脏中细胞色素P450(cytochrome P450,CYP)3A4、CYP3A5以及P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)转运体的底物。该酶和转运体的功能是由基因多态性、药物和内源性物质(如炎症因子)的诱导或抑制导致的复杂相互作用决定。该文系统总结CNI体内处置变异性的常见临床决定因素,包括腹泻和其他肠道疾病、贫血、低蛋白血症、高脂血症、肝和肾脏疾病、联合用药等,并讨论潜在的影响机制。

摘要： 目的:研究类风湿性关节炎状态下大鼠滑膜细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达及功能的变化,并探讨其与炎症的关系。方法:(1)在体实验采用雌性Wistar大鼠,随机分为对照组和造模组(n=12),造模组建立II型胶原诱导的关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型,Western blot检测大鼠滑膜细胞P-gp的表达。(2)动物细胞体外培养实验采用II型胶原酶法分离培养正常大鼠原代滑膜细胞,分为正常培养液(DMEM)组和巨噬细胞条件培养液(macrophage-conditioned medium,MCM)组,源于RAW 264.7细胞的MCM模拟体内炎症状态,Western blot法检测大鼠滑膜细胞P-gp蛋白表达水平,RT-qPCR法检测大鼠滑膜细胞多药耐药基因1a(multidrug re⁃sistance gene 1a,Mdr1a)和Mdr1b的mRNA表达水平,以罗丹明123(rhodamine 123,Rho123)及氨甲蝶呤(metho⁃trexate,MTX)为探针评价细胞中P-gp的功能。结果:与对照组大鼠相比,CIA造模组大鼠滑膜细胞P-gp表达显著降低(P<0.01);II型胶原酶消化法可以成功获得大鼠原代滑膜细胞,免疫荧光显示第3代滑膜细胞98%以上表达vimentin蛋白;维拉帕米(50和100μmol/L)能显著增加大鼠滑膜细胞中Rho123的浓度(P<0.01);与DMEM组相比,MCM组滑膜细胞Rho123摄取量显著升高(P<0.01),MTX摄取量亦显著升高(P<0.05),分别增加了40%和37%,P-gp蛋白表达水平显著降低(P<0.01),Mdr1a的mRNA表达水平显著降低(P<0.01),Mdr1b的mRNA表达水平无显著差异。结论:类风湿性关节炎状态下大鼠滑膜细胞P-gp表达及功能显著降低,可能与局部炎症微环境有关。

摘要： 目的探讨肺鳞癌患者行新辅助化疗且术后血浆多药耐药基因1(MDR1)相关P糖蛋白(P-gp)变化与3年存活率的关系,为临床治疗提供参考依据.方法收集60例肺鳞癌患者血样,采用生化反应方法,将血浆与化学试剂混匀,根据反应前后透光率的不同,计算每个样本P-gp活性的改变以及对长春新碱的相对活性,相对活性>30%判定为P-gp阳性.结果新辅助化疗后P-gp阳性与阴性的肺鳞癌患者化疗有效率分别为28.6%(4/14)和58.7%(27/46),两者比较的差异有统计学意义(χ^(2)=3.900,P<0.05);行新辅助化疗且术后P-gp阳性与阴性的肺鳞癌患者3年存活率分别为18.5%(5/27)和47.4%(9/19),两者比较的差异有统计学意义(χ^(2)=3.940,P<0.05).结论肺鳞癌新辅助化疗患者血浆P-gp活性测定,对肺鳞癌化疗效果及其预后判断具有参考价值.

摘要： 目的分析急性淋巴细胞白血病(ALL)患者P-糖蛋白(P-gp)、CD31及乳酸脱氢酶(LDH)水平变化及临床意义。方法收集2016年1月—2020年7月收治的76例ALL纳入ALL组,另选取同期在本院进行健康体检的56例健康者作为对照组。比较2组P-gp、CD31及LDH表达情况。对患者进行1年随访,统计预后复发情况,比较不同预后患者P-gp、CD31及LDH表达水平,多因素Logistic回归分析ALL预后复发的影响因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析P-gp、CD31及LDH对ALL预后复发的预测价值。结果ALL组P-gp、CD31、LDH阳性表达率高于对照组(P<0.01)。76例ALL中,预后复发31例(复发组),未复发45例(未复发组)。复发组P-gp、CD31、LDH阳性表达率高于未复发组(P<0.05)。年龄≥35岁及Ph染色体、P-gp、CD31、LDH阳性为ALL预后复发的独立危险因素(P<0.01)。P-gp、CD31、LDH单独检测预测预后复发曲线下面积均低于三者联合检测(P<0.01)。结论P-gp、CD31及LDH异常表达是ALL发生、发展的重要机制,可作为判断ALL患者预后复发的参考指标。

摘要： 目的探讨烷基化修复蛋白B同源物5(ALKBH5)对K562/阿霉素(ADM)细胞耐药的影响及其作用机制。方法以人白血病细胞系K562和ADM抗性细胞K562/ADM细胞为研究对象,利用Lipofectamine;2000将K562/ADM细胞分为对照组、si-NC组、si-ALKBH5-1组、si-ALKBH5-2组、空载体组(转染pcDNA3.1)、ALKBH5-WT组(转染pcDNA3.1-ALKBH5-WT)、ALKBH5-MUT组(转染pcDNA3.1-ALKBH5-MUT)、si-ALKBH5-2+空载体组、si-ALKBH5-2+pcDNA3.1-EZH2组。采用比色法检测细胞中N6-甲基腺苷(m6A)含量;采用CCK-8法检测细胞的半数抑制浓度(IC_(50));采用荧光光度计法检测ADM外排;采用Western blot检测细胞中ALKBH5、果蝇Zeste基因增强子人类同源物2(EZH2)、P糖蛋白(P-gp)、多药耐药基因1(MDR1)的蛋白表达;采用RNA免疫共沉淀(RIP)实验验证ALKBH5与EZH2 mRNA的相互作用;采用甲基化RNA免疫共沉淀(MeRIP)检测EZH2 m6A水平。结果与K562细胞比较,K562/ADM细胞对ADM的耐药性及细胞中ALKBH5蛋白表达水平升高,m6A含量降低,差异有统计学意义(P<0.01);沉默ALKBH5可增加K562/ADM细胞中m6A含量,过表达野生型ALKBH5可减少m6A含量,而过表达突变型ALKBH5(H204A)对m6A含量无明显影响。与对照组、si-NC组比较,si-ALKBH5-1组、si-ALKBH5-2组细胞在450 nm处的光密度值(OD_(450nm)值)、P-gp、MDR1蛋白表达水平降低,细胞内荧光强度升高,差异有统计学意义(P<0.05)。在K562/ADM细胞中,ALKBH5蛋白能与EZH2 mRNA相互作用;沉默ALKBH5可上调K562/ADM细胞中EZH2 m6A水平,下调EZH2蛋白表达水平,过表达野生型ALKBH5则呈相反趋势;EZH2过表达逆转了沉默ALKBH5对K562/ADM细胞活力及耐药性的影响。结论沉默ALKBH5通过促进EZH2的甲基化来下调EZH2的表达,进而降低K562/ADM的耐药性。

摘要： 目的:建立人胎盘滋养层细胞(以下简称"滋养层细胞")转运模型,应用该模型考察氟西汀(fluoxetine,FXT)暴露下外排转运蛋白P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的功能变化,探讨FXT对胎盘转运能力的影响。方法:从足月胎盘中分离、消化、培养得到合胞体滋养层细胞,并从形态学和免疫组织化学等方面对细胞进行鉴定,应用P-gp蛋白的特异性底物罗丹明123及抑制剂维拉帕米对其功能进行评估,确定最适底物浓度及抑制剂浓度,随后采用低、中、高浓度的FXT分别干预滋养层细胞0.5 h、48 h和72 h,应用特异性底物开展细胞摄取实验,考查FXT对P-gp功能、蛋白表达、转录水平的影响。结果:基于人胎盘滋养层摄取转运模型,P-gp底物罗丹明123的最适浓度为1μmol/L,抑制剂维拉帕米的最适浓度为10μmol/L;低、中、高浓度FXT分别干预滋养层细胞0.5 h、48 h和72 h后,P-gp的底物罗丹明123在细胞内蓄积水平升高(P0.05)。结论:FXT可能通过下调P-gp的蛋白表达而抑制其外排转运功能。

摘要： 目的探讨癫痫大鼠颞叶、海马区多药耐药基因1(MDR1)及P-糖蛋白(Pgp)的表达及其相互关系。方法选择健康清洁级雄性SD大鼠50只。采用随机数字表法将大鼠分为观察组和对照组。观察组大鼠海马区注射海人酸(KA)2μl(含KA 1μg),制作颞叶耐药性癫痫(RE)模型(成功22只),对照组同法注射0.9%氯化钠注射液2μl。两组大鼠饲养、观察1个月后,分别取颞叶、海马区组织,采用免疫组化及实时荧光定量PCR法检测MDR1 mRNA和Pgp表达水平,并分析其相互关系。结果观察组颞叶、海马区的MDR1 mRNA、Pgp表达水平均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。观察组颞叶、海马区MDR1 mRNA表达水平与Pgp表达水平呈正相关(r=0.55,P<0.05)。结论MDR1、Pgp可能参与RE的发病机制,可为开发相关新的治疗方法或药物提供依据。

摘要： 研究川续断皂苷乙对氟苯尼考在大鼠体内药动学影响。将24只大鼠(200±10)g随机分成两组,每组12只。试验组连续7 d灌胃川续断皂苷乙(60 mg/kg,1次/d),对照组给予相同体积的生理盐水,第8天两组各6只大鼠灌服氟苯尼考(30 mg/kg)后按时间点连续采血,采用高效液相色谱法检测氟苯尼考血药浓度,数据采用DAS2.0进行分析。处死各组剩下的6只,解剖取肝脏和空肠,荧光定量PCR法和免疫印迹法分别检测组织中CYP1A2、CYP2C11、CYP3A1、MDR1的mRNA表达水平和蛋白表达水平。结果表明,试验组AUC_(0-∞)、MRT_(0-∞)、T_(1/2)和C_(max)与对照组相比显著增加(P<0.05),CL与对照组相比显著降低(P<0.05);试验组CYP1A2、CYP2C11在肝脏的mRNA表达水平和MDR1在空肠的mRNA表达水平与对照组相比显著降低(P<0.05);试验组大鼠肝脏中CYP1A2和CYP2C11酶表达量以及空肠中P-糖蛋白表达量与对照组相比显著降低(P<0.05)。川续断皂苷乙连续给药7 d,增加了氟苯尼考在大鼠体内的吸收程度,同时延缓了代谢,可能与川续断皂苷抑制了CYP1A2酶和CYP2C11酶在肝脏的表达和P-糖蛋白在空肠的表达有关。

摘要： 目的检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织间质细胞衍生因子-1α(stromal derived factor 1α,SDF-1α)/趋化因子CXC受体7(chemokine CXC receptor 7,CXCR7)通路蛋白表达,并分析其与术后复发的关系。方法选取我院2018年3月至2020年6月收治的102例拟行切除术的NSCLC患者进行前瞻性试验,手术后取癌组织和切缘正常组织,采用免疫组化法检测SDF-1α、CXCR7、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)蛋白表达。比较癌组织和切缘正常组织上述蛋白阳性表达率;比较不同临床病理特征患者癌组织上述蛋白阳性表达率;分析NSCLC患者术后1年内复发的危险因素。结果癌组织SDF-1α、CXCR7、P-gp蛋白阳性表达率均高于切缘正常组织(P<0.001);Ⅱb期及以上、未/低分化、有淋巴结转移患者癌组织SDF-1α、CXCR7、P-gp蛋白阳性表达率均高于Ⅱa期及以下、中/高分化、无淋巴结转移患者(P<0.05);术后1年内患者的复发率为29.17%(28/96),Ⅱb期及以上、未/低分化、有淋巴结转移、癌组织SDF-1α、CXCR7、P-gp蛋白阳性表达、未遵医嘱治疗均是术后1年内复发的危险因素(OR=4.354、7.411、6.349、11.382、8.538、9.766、5.427,均为P<0.05)。结论NSCLC组织中SDF-1α/CXCR7通路被激活,SDF-1α、CXCR7、P-gp表达增强,且与分化程度、临床分期、淋巴结转移有关,均可增加术后复发的风险。

摘要： 目的：观察不同频率电针对脑缺血再灌注恢复期大鼠血脑屏障(BBB)开放效应,探讨电针促血脑屏障开放调控机制. 方法：频率研究：150只健康雄性SD大鼠建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,饲养3周后,按随机原则分为模型组、假手术组及2、15、30、50、100Hz组.检测大鼠脑含水量以及伊文思蓝(EB)透过量.机制研究：180只SD大鼠建立MCAO模型,饲养3周后,随机分为模型组、假手术组、电针组、假电针组、电针+PKC抑制剂组;检测大鼠大脑皮层蛋白激酶C亚型β1(PKCβ1)的磷酸化水平、p-糖蛋白(P-gp)以及mdr1a、mdr1b mRNA的表达. 结果：2Hz组、100Hz组大鼠脑组织EB含量明显升高(P＜0.05);模型组与其余4组比较,大鼠脑组织含水量差异无统计学意义.与模型组比较,2Hz组大鼠大脑皮层的PKCβ1、p-PKCβ1/PKCβ1均显著提高(P＜0.05),电针组P-gp的IHS评分显著降低(P＜0.05),电针组mdr1、mdr1b mRNA的表达均明显降低(P＜0.05);电针+PKC抑制剂组mdr1amRNA表达高于电针组(P＜0.05). 结论：2Hz、100Hz电针刺激对脑缺血再灌注恢复期大鼠BBB均具有一定开放效应,且无明显脑水肿出现;电针诱导大鼠BBB开放可能是通过促使PKCβ1磷酸化,下调药物外排系统P-gp、mdr1a mRNA,抑制P-gp在大脑皮层毛细血管内皮细胞的表达实现.

摘要： 目的：观察不同频率电针对脑缺血再灌注恢复期大鼠血脑屏障(BBB)开放效应,探讨电针促血脑屏障开放调控机制. 方法：频率研究：150只健康雄性SD大鼠建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,饲养3周后,按随机原则分为模型组、假手术组及2、15、30、50、100Hz组.检测大鼠脑含水量以及伊文思蓝(EB)透过量.机制研究：180只SD大鼠建立MCAO模型,饲养3周后,随机分为模型组、假手术组、电针组、假电针组、电针+PKC抑制剂组;检测大鼠大脑皮层蛋白激酶C亚型β1(PKCβ1)的磷酸化水平、p-糖蛋白(P-gp)以及mdr1a、mdr1b mRNA的表达. 结果：2Hz组、100Hz组大鼠脑组织EB含量明显升高(P＜0.05);模型组与其余4组比较,大鼠脑组织含水量差异无统计学意义.与模型组比较,2Hz组大鼠大脑皮层的PKCβ1、p-PKCβ1/PKCβ1均显著提高(P＜0.05),电针组P-gp的IHS评分显著降低(P＜0.05),电针组mdr1、mdr1b mRNA的表达均明显降低(P＜0.05);电针+PKC抑制剂组mdr1amRNA表达高于电针组(P＜0.05). 结论：2Hz、100Hz电针刺激对脑缺血再灌注恢复期大鼠BBB均具有一定开放效应,且无明显脑水肿出现;电针诱导大鼠BBB开放可能是通过促使PKCβ1磷酸化,下调药物外排系统P-gp、mdr1a mRNA,抑制P-gp在大脑皮层毛细血管内皮细胞的表达实现.

摘要： 目的：观察不同频率电针对脑缺血再灌注恢复期大鼠血脑屏障(BBB)开放效应,探讨电针促血脑屏障开放调控机制. 方法：频率研究：150只健康雄性SD大鼠建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,饲养3周后,按随机原则分为模型组、假手术组及2、15、30、50、100Hz组.检测大鼠脑含水量以及伊文思蓝(EB)透过量.机制研究：180只SD大鼠建立MCAO模型,饲养3周后,随机分为模型组、假手术组、电针组、假电针组、电针+PKC抑制剂组;检测大鼠大脑皮层蛋白激酶C亚型β1(PKCβ1)的磷酸化水平、p-糖蛋白(P-gp)以及mdr1a、mdr1b mRNA的表达. 结果：2Hz组、100Hz组大鼠脑组织EB含量明显升高(P＜0.05);模型组与其余4组比较,大鼠脑组织含水量差异无统计学意义.与模型组比较,2Hz组大鼠大脑皮层的PKCβ1、p-PKCβ1/PKCβ1均显著提高(P＜0.05),电针组P-gp的IHS评分显著降低(P＜0.05),电针组mdr1、mdr1b mRNA的表达均明显降低(P＜0.05);电针+PKC抑制剂组mdr1amRNA表达高于电针组(P＜0.05). 结论：2Hz、100Hz电针刺激对脑缺血再灌注恢复期大鼠BBB均具有一定开放效应,且无明显脑水肿出现;电针诱导大鼠BBB开放可能是通过促使PKCβ1磷酸化,下调药物外排系统P-gp、mdr1a mRNA,抑制P-gp在大脑皮层毛细血管内皮细胞的表达实现.

摘要： 目的：观察不同频率电针对脑缺血再灌注恢复期大鼠血脑屏障(BBB)开放效应,探讨电针促血脑屏障开放调控机制. 方法：频率研究：150只健康雄性SD大鼠建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,饲养3周后,按随机原则分为模型组、假手术组及2、15、30、50、100Hz组.检测大鼠脑含水量以及伊文思蓝(EB)透过量.机制研究：180只SD大鼠建立MCAO模型,饲养3周后,随机分为模型组、假手术组、电针组、假电针组、电针+PKC抑制剂组;检测大鼠大脑皮层蛋白激酶C亚型β1(PKCβ1)的磷酸化水平、p-糖蛋白(P-gp)以及mdr1a、mdr1b mRNA的表达. 结果：2Hz组、100Hz组大鼠脑组织EB含量明显升高(P＜0.05);模型组与其余4组比较,大鼠脑组织含水量差异无统计学意义.与模型组比较,2Hz组大鼠大脑皮层的PKCβ1、p-PKCβ1/PKCβ1均显著提高(P＜0.05),电针组P-gp的IHS评分显著降低(P＜0.05),电针组mdr1、mdr1b mRNA的表达均明显降低(P＜0.05);电针+PKC抑制剂组mdr1amRNA表达高于电针组(P＜0.05). 结论：2Hz、100Hz电针刺激对脑缺血再灌注恢复期大鼠BBB均具有一定开放效应,且无明显脑水肿出现;电针诱导大鼠BBB开放可能是通过促使PKCβ1磷酸化,下调药物外排系统P-gp、mdr1a mRNA,抑制P-gp在大脑皮层毛细血管内皮细胞的表达实现.

摘要： 目的：观察不同频率电针对脑缺血再灌注恢复期大鼠血脑屏障(BBB)开放效应,探讨电针促血脑屏障开放调控机制. 方法：频率研究：150只健康雄性SD大鼠建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,饲养3周后,按随机原则分为模型组、假手术组及2、15、30、50、100Hz组.检测大鼠脑含水量以及伊文思蓝(EB)透过量.机制研究：180只SD大鼠建立MCAO模型,饲养3周后,随机分为模型组、假手术组、电针组、假电针组、电针+PKC抑制剂组;检测大鼠大脑皮层蛋白激酶C亚型β1(PKCβ1)的磷酸化水平、p-糖蛋白(P-gp)以及mdr1a、mdr1b mRNA的表达. 结果：2Hz组、100Hz组大鼠脑组织EB含量明显升高(P＜0.05);模型组与其余4组比较,大鼠脑组织含水量差异无统计学意义.与模型组比较,2Hz组大鼠大脑皮层的PKCβ1、p-PKCβ1/PKCβ1均显著提高(P＜0.05),电针组P-gp的IHS评分显著降低(P＜0.05),电针组mdr1、mdr1b mRNA的表达均明显降低(P＜0.05);电针+PKC抑制剂组mdr1amRNA表达高于电针组(P＜0.05). 结论：2Hz、100Hz电针刺激对脑缺血再灌注恢复期大鼠BBB均具有一定开放效应,且无明显脑水肿出现;电针诱导大鼠BBB开放可能是通过促使PKCβ1磷酸化,下调药物外排系统P-gp、mdr1a mRNA,抑制P-gp在大脑皮层毛细血管内皮细胞的表达实现.

摘要： 目的：观察不同频率电针对脑缺血再灌注恢复期大鼠血脑屏障(BBB)开放效应,探讨电针促血脑屏障开放调控机制. 方法：频率研究：150只健康雄性SD大鼠建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,饲养3周后,按随机原则分为模型组、假手术组及2、15、30、50、100Hz组.检测大鼠脑含水量以及伊文思蓝(EB)透过量.机制研究：180只SD大鼠建立MCAO模型,饲养3周后,随机分为模型组、假手术组、电针组、假电针组、电针+PKC抑制剂组;检测大鼠大脑皮层蛋白激酶C亚型β1(PKCβ1)的磷酸化水平、p-糖蛋白(P-gp)以及mdr1a、mdr1b mRNA的表达. 结果：2Hz组、100Hz组大鼠脑组织EB含量明显升高(P＜0.05);模型组与其余4组比较,大鼠脑组织含水量差异无统计学意义.与模型组比较,2Hz组大鼠大脑皮层的PKCβ1、p-PKCβ1/PKCβ1均显著提高(P＜0.05),电针组P-gp的IHS评分显著降低(P＜0.05),电针组mdr1、mdr1b mRNA的表达均明显降低(P＜0.05);电针+PKC抑制剂组mdr1amRNA表达高于电针组(P＜0.05). 结论：2Hz、100Hz电针刺激对脑缺血再灌注恢复期大鼠BBB均具有一定开放效应,且无明显脑水肿出现;电针诱导大鼠BBB开放可能是通过促使PKCβ1磷酸化,下调药物外排系统P-gp、mdr1a mRNA,抑制P-gp在大脑皮层毛细血管内皮细胞的表达实现.

摘要： 目的：黄素对人结肠癌耐药细胞株(HCT-8/5-FU)耐药逆转作用及耐药机制. 方法：采用CCK8方法检测非耐药细胞株(HCT-8)和耐药株的生长周期,姜黄素、5-FU以及二者联合应用对两种细胞株的生长抑制率;采用流式细胞术法检测姜黄素、5-FU以及二者联合应用时对两种细胞株细胞周期和凋亡率的影响;透射电镜用于观察两种细胞株的超微结构;RT-PCR和Western blot方法分别用于检测用姜黄素以及5-FU对两种细胞株P-gp和HSP-27 mRNA和蛋白水平的影响. 结果：姜黄素和5-FU均可抑制两种细胞株的指数生长期,且抑制作用呈计量依赖;与耐药株相比,HCT-8对姜黄素和5-FU更加敏感;5-FU联合姜黄素4.0μg/mL或5.5μg/mL对耐药株的IC50分别为179.26μg/mL,89.25μg/mL,耐药逆转倍数分别为1.85和3.71;姜黄素和5-FU联用具有协同效应,可使细胞停留在G0/G1期,发生凋亡;5-FU与姜黄素联用后细胞凋亡率显著高于其他组;5-FU联用中剂量的姜黄素,耐药株P-gp(0.28±0.02)和HSP27(0.28±0.09) mRNA水平低于单独使用5-FU(P-gp, 0.48±0.07,P=0.009;HSP27,0.57±0.10,P=0.007);P-gp(0.25±0.06)和HSP27(0.09±0.02)的蛋白水平显著低于单独使用5-FU(P-gp, 0.46±0.02,P=0.005;HSP27,0.43±0.01,P=0.000). 结论：姜黄素能够抑制人类结肠癌细胞的增殖;与5-FU联用具有协同作用,可逆转多重耐药结肠癌细胞对5-FU的耐药性;姜黄素可能通过下调P-gp和HSP27的水平逆转耐药株对5-FU耐药性.

摘要： 目的：黄素对人结肠癌耐药细胞株(HCT-8/5-FU)耐药逆转作用及耐药机制. 方法：采用CCK8方法检测非耐药细胞株(HCT-8)和耐药株的生长周期,姜黄素、5-FU以及二者联合应用对两种细胞株的生长抑制率;采用流式细胞术法检测姜黄素、5-FU以及二者联合应用时对两种细胞株细胞周期和凋亡率的影响;透射电镜用于观察两种细胞株的超微结构;RT-PCR和Western blot方法分别用于检测用姜黄素以及5-FU对两种细胞株P-gp和HSP-27 mRNA和蛋白水平的影响. 结果：姜黄素和5-FU均可抑制两种细胞株的指数生长期,且抑制作用呈计量依赖;与耐药株相比,HCT-8对姜黄素和5-FU更加敏感;5-FU联合姜黄素4.0μg/mL或5.5μg/mL对耐药株的IC50分别为179.26μg/mL,89.25μg/mL,耐药逆转倍数分别为1.85和3.71;姜黄素和5-FU联用具有协同效应,可使细胞停留在G0/G1期,发生凋亡;5-FU与姜黄素联用后细胞凋亡率显著高于其他组;5-FU联用中剂量的姜黄素,耐药株P-gp(0.28±0.02)和HSP27(0.28±0.09) mRNA水平低于单独使用5-FU(P-gp, 0.48±0.07,P=0.009;HSP27,0.57±0.10,P=0.007);P-gp(0.25±0.06)和HSP27(0.09±0.02)的蛋白水平显著低于单独使用5-FU(P-gp, 0.46±0.02,P=0.005;HSP27,0.43±0.01,P=0.000). 结论：姜黄素能够抑制人类结肠癌细胞的增殖;与5-FU联用具有协同作用,可逆转多重耐药结肠癌细胞对5-FU的耐药性;姜黄素可能通过下调P-gp和HSP27的水平逆转耐药株对5-FU耐药性.

摘要： 目的：黄素对人结肠癌耐药细胞株(HCT-8/5-FU)耐药逆转作用及耐药机制. 方法：采用CCK8方法检测非耐药细胞株(HCT-8)和耐药株的生长周期,姜黄素、5-FU以及二者联合应用对两种细胞株的生长抑制率;采用流式细胞术法检测姜黄素、5-FU以及二者联合应用时对两种细胞株细胞周期和凋亡率的影响;透射电镜用于观察两种细胞株的超微结构;RT-PCR和Western blot方法分别用于检测用姜黄素以及5-FU对两种细胞株P-gp和HSP-27 mRNA和蛋白水平的影响. 结果：姜黄素和5-FU均可抑制两种细胞株的指数生长期,且抑制作用呈计量依赖;与耐药株相比,HCT-8对姜黄素和5-FU更加敏感;5-FU联合姜黄素4.0μg/mL或5.5μg/mL对耐药株的IC50分别为179.26μg/mL,89.25μg/mL,耐药逆转倍数分别为1.85和3.71;姜黄素和5-FU联用具有协同效应,可使细胞停留在G0/G1期,发生凋亡;5-FU与姜黄素联用后细胞凋亡率显著高于其他组;5-FU联用中剂量的姜黄素,耐药株P-gp(0.28±0.02)和HSP27(0.28±0.09) mRNA水平低于单独使用5-FU(P-gp, 0.48±0.07,P=0.009;HSP27,0.57±0.10,P=0.007);P-gp(0.25±0.06)和HSP27(0.09±0.02)的蛋白水平显著低于单独使用5-FU(P-gp, 0.46±0.02,P=0.005;HSP27,0.43±0.01,P=0.000). 结论：姜黄素能够抑制人类结肠癌细胞的增殖;与5-FU联用具有协同作用,可逆转多重耐药结肠癌细胞对5-FU的耐药性;姜黄素可能通过下调P-gp和HSP27的水平逆转耐药株对5-FU耐药性.

摘要： 目的：黄素对人结肠癌耐药细胞株(HCT-8/5-FU)耐药逆转作用及耐药机制. 方法：采用CCK8方法检测非耐药细胞株(HCT-8)和耐药株的生长周期,姜黄素、5-FU以及二者联合应用对两种细胞株的生长抑制率;采用流式细胞术法检测姜黄素、5-FU以及二者联合应用时对两种细胞株细胞周期和凋亡率的影响;透射电镜用于观察两种细胞株的超微结构;RT-PCR和Western blot方法分别用于检测用姜黄素以及5-FU对两种细胞株P-gp和HSP-27 mRNA和蛋白水平的影响. 结果：姜黄素和5-FU均可抑制两种细胞株的指数生长期,且抑制作用呈计量依赖;与耐药株相比,HCT-8对姜黄素和5-FU更加敏感;5-FU联合姜黄素4.0μg/mL或5.5μg/mL对耐药株的IC50分别为179.26μg/mL,89.25μg/mL,耐药逆转倍数分别为1.85和3.71;姜黄素和5-FU联用具有协同效应,可使细胞停留在G0/G1期,发生凋亡;5-FU与姜黄素联用后细胞凋亡率显著高于其他组;5-FU联用中剂量的姜黄素,耐药株P-gp(0.28±0.02)和HSP27(0.28±0.09) mRNA水平低于单独使用5-FU(P-gp, 0.48±0.07,P=0.009;HSP27,0.57±0.10,P=0.007);P-gp(0.25±0.06)和HSP27(0.09±0.02)的蛋白水平显著低于单独使用5-FU(P-gp, 0.46±0.02,P=0.005;HSP27,0.43±0.01,P=0.000). 结论：姜黄素能够抑制人类结肠癌细胞的增殖;与5-FU联用具有协同作用,可逆转多重耐药结肠癌细胞对5-FU的耐药性;姜黄素可能通过下调P-gp和HSP27的水平逆转耐药株对5-FU耐药性.

摘要： 本发明属于医药或食品领域，涉及一种新的甘薯糖蛋白及包含该甘薯糖蛋白的甘薯提取物，以及它们在制备抗肿瘤药物或保健品中的应用。本发明提供的甘薯糖蛋白为单组分物质，生物质谱分子量为7180‑9187，分子中糖的相对含量为73.4％，蛋白质的相对含量为26.6％，对肿瘤细胞的生长抑制作用显著。

摘要： 本发明公开了一种多糖蛋白结合疫苗中多糖蛋白结合位点结合率的测定方法：(1)标准品的酶解；(2)固相萃取富集目标肽段；(3)高效液相色谱串联质谱分析；(4)绘制标准曲线，得标准工作曲线方程；(5)样品检测，计算得到样品中各特征肽段的浓度；(6)计算各特征肽段的多糖结合率、各位点蛋白残留率。本发明实现了多糖蛋白结合疫苗多糖蛋白结合率的多位点定量监测，其中破伤风蛋白涉及20个监测位点，CRM197涉及16个监测位点。本发明不仅可以检测残留蛋白含量，还可以评价多糖蛋白结合疫苗多糖蛋白结合位点的结合率，也可用于多糖或蛋白残余率相同但活性和毒性不同的多糖蛋白结合疫苗的研究，可为改进多糖蛋白结合工艺提供直接的监测方法。

摘要： 本发明涉及具有GnTIVa/b和/或GnTV表达降低的经遗传修饰的细胞系、用于使用所述细胞系产生具有三‑和/或四‑触角N‑聚糖数目减少的N‑聚糖的糖蛋白的方法，及相应的糖蛋白。

摘要： 本发明属分析化学技术领域，涉及糖蛋白质谱相对/绝对定量的方法，具体涉及一种基于糖蛋白非糖肽的质谱多反应监测定量糖蛋白方法，其包括：利用肼化学法对样品中的糖蛋白进行富集，用蛋白酶释放糖蛋白的非糖肽，利用色谱‑质谱鉴定技术对非糖肽进行鉴定，合成适用于MRM定量的标准肽段，然后对这些肽段的保留时间，能量，母子离子对进行质谱优化，并建立相应的数据库；并将肽段可用于样品中糖蛋白的绝对/相对定量。本发明方法步骤简单、操作方便、快速高效，可以实现糖基化的单个蛋白质/糖蛋白质组的快速、精准定量。

摘要： 本发明提供糖蛋白质的制造方法，其包括向鳞翅目昆虫活体导入编码半乳糖转移酶的基因和编码期望的蛋白质的基因的工序，及对上述工序中得到的昆虫活体施用选自脱氧半乳糖野尻霉素、甲基β‑吡喃半乳糖苷及乳糖的1种以上的物质，取得具有在非还原末端有半乳糖的糖链的期望的蛋白质的工序。

摘要： 本发明属于医药或食品领域，涉及一种新的甘薯糖蛋白及包含该甘薯糖蛋白的甘薯提取物，以及它们在制备抗肿瘤药物或保健品中的应用。本发明提供的甘薯糖蛋白为单组分物质，生物质谱分子量为7180‑9187，分子中糖的相对含量为73.4％，蛋白质的相对含量为26.6％，对肿瘤细胞的生长抑制作用显著。

摘要： 本发明提供一种能比过去更精准地检测肝病的糖链标志物糖蛋白的测定方法。本发明提供一种能比过去更精准地检测肝病的肝病检查方法。本发明提供一种用于上述测定方法的糖蛋白定量用试剂。本发明还提供一种能够根据肝病病情发展区别肝病病情的肝病病情指标糖链标志物糖蛋白。本发明提供的糖蛋白测定方法是对采自受检者的试样中所含α-1-酸性糖蛋白(AGP)和Mac-2-结合蛋白（M2BP）至少其中之一的糖蛋白进行测定，当糖蛋白为AGP时，测定与选自AOL和MAL的第一凝集素结合的AGP，当糖蛋白为M2BP时，测定与选自WFA、BPL、AAL、RCA120和TJA-II的第二凝集素结合的M2BP。

摘要： 由具有糖蛋白生成抑制活性的序列表中序列1记载的氨基酸序列构成的蛋白质、其变异体蛋白质、由序列表中序列2记载的核苷酸序列组成的DNA、其DNA变异体以及使用上述蛋白质和DNA的糖蛋白异常症(例如囊性纤维化症)的包括基因治疗在内的治疗药。

摘要： 本发明公开了一种多糖蛋白结合疫苗中多糖蛋白结合位点结合率的测定方法：(1)标准品的酶解；(2)固相萃取富集目标肽段；(3)高效液相色谱串联质谱分析；(4)绘制标准曲线，得标准工作曲线方程；(5)样品检测，计算得到样品中各特征肽段的浓度；(6)计算各特征肽段的多糖结合率、各位点蛋白残留率。本发明实现了多糖蛋白结合疫苗多糖蛋白结合率的多位点定量监测，其中破伤风蛋白涉及20个监测位点，CRM197涉及16个监测位点。本发明不仅可以检测残留蛋白含量，还可以评价多糖蛋白结合疫苗多糖蛋白结合位点的结合率，也可用于多糖或蛋白残余率相同但活性和毒性不同的多糖蛋白结合疫苗的研究，可为改进多糖蛋白结合工艺提供直接的监测方法。

摘要： 提供了一种用于生产以高甘露糖型糖链为主要N‑糖链结构的糖蛋白的动物细胞株、用该细胞株生产糖蛋白的方法、用该方法生产的糖蛋白及其用途，该细胞株的高尔基体甘露糖苷酶基因和内质网甘露糖苷酶基因中的至少两种基因被破坏或敲除。