脑必通胶囊对局灶性脑缺血大鼠脑血流量及内皮细胞iNOS表达的影响

摘要

目的:观察脑必通胶囊(Braintone)对局灶性脑缺血大鼠脑血流量及内皮细胞iNOS表达的影响。方法:采用大鼠永久性大脑中动脉阻塞(permanent middle cerebral artery occlusion,pMCAO)模型观察脑必通胶囊350mg/kg、175mg/kg、87.5mg/kg对大鼠局部脑血流量的影响.建立人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)缺氧缺糖模型(oxygen-glucose deprivation OGD).采用Real time PCR技术检测HUVEC iNOS mRNA的表达;应用免疫组织化学法及Western-blotting法检测HUVEC缺氧后 iNOS蛋白水平的变化及脑必通胶囊含药血清对HUVEC iNOS蛋白水平的影响.结果:缺血模型组动物脑血流量较假手术组动物及pMCAO前明显减少.脑必通胶囊可显著增加大鼠的基础脑血流量及pMCAO后大鼠缺血部位的脑血流量.Real time PCR结果表明:HUVEC细胞缺氧3h后,iNOS mRNA出现表达高峰。免疫荧光法证明:对照组HUVEC细胞iNOS主要表达在胞浆中,HUVEC细胞缺氧后12h,iNOS阳性细胞显著增多,且主要表达在细胞核.Western-blotting亦显示:HUVEC细胞缺氧后,iNOS蛋白水平明显增加,12h达高峰.结论:脑必通胶囊对大鼠局灶性脑缺血脑血流量有明显增加作用,其作用机制可能与上调血管内皮细胞iNOS表达有关.