产黄青霉

摘要： 将产黄青霉(Penicillium chrysogenum)来源的β-甘露聚糖酶(PcMan26A)在毕赤酵母中高效表达,经高密度发酵,发酵液酶活力达25200 U/mL.该酶属于GH26家族,与黑曲霉(Aspergillus niger) CBS 513.88来源的β-甘露聚糖酶同源性最高(67.8％),是一个新型β-甘露聚糖酶.PcMan26A的最适催化条件为pH 6.0和50°C,在pH 4.0～8.0和45°C下具有良好的稳定性.该酶对魔芋粉具有最高的比活力,为3581.0 U/mg.进一步利用该酶水解魔芋粉得到魔芋甘露寡糖,产品得率为86.2％;经分析,其主要组分为聚合度大于4的甘露寡糖.该β-甘露聚糖酶适用于生产魔芋甘露寡糖,为魔芋甘露寡糖的酶法生产提供了更多的选择.

摘要： 为实现抗真菌性能的耐热新型几丁质酶在食品防腐及生物防治方面的应用,从产黄青霉Xch23中分离纯化几丁质酶(Chi-Pc76)并研究其应用特性.通过硫酸铵沉淀、DEAE-Cellulose A52离子交换层析和Sephadex G-100凝胶过滤层析纯化得到均一的Chi-Pc76.最终得到Chi-Pc76纯化倍数17.1倍,回收率21.6％,比活力为584.8 U/mg.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得Chi-Pc76分子质量61 kDa.纯化后的Chi-Pc76最佳反应条件为pH 6.0、温度55°C.Chi-Pc76在宽泛的pH 4.0～10.0之间稳定性强,其显著的热稳定性可达到70°C.Chi-Pc76对底物胶体几丁质具有高的底物特异性,对乙二醇几丁质、α-几丁质、β-几丁质有中等活性,而对其他受试底物无活性或痕量活性.以胶体几丁质为底物Km和Vmax值分别为0.25 mg/mL和20 μmol/ (min·mg).金属离子Ca2+、Ba2+、K+、Na+对酶有明显激活作用;十二烷基硫酸钠、吐温80、苯甲基磺酰氟和尿素对酶活力基本无影响,但Mn2+、C02+、Fe2+、Ag+、Cu2+、Zn2+、pb2+、Hg2+和β-巯基乙醇、二硫苏糖醇均对酶活力有抑制作用.Chi-Pc76对黑曲霉、黄曲霉、尖孢镰刀菌和橘青霉均有显著的抗真菌活性,对比文献为产黄青霉抗真菌几丁质酶.鉴于Chi-Pc76纯化简便、热稳定性好、宽广的pH值稳定性、高效降解几丁质和抗真菌等特点,产黄青霉Xch23几丁质酶在几丁质废料综合利用、生物转化药理活性产品、食品保鲜以及植物病原性真菌和昆虫幼虫生物防治等方面具有潜在价值.

摘要： 为探讨产黄青霉(Penicillium chrysogenum)发酵鸭肉制品的食用品质、微观结构及物理化学特性变化,将产黄青霉接入高温灭菌后的鸭肉中,(27±1)°C下前发酵7?d、30?°C下后发酵14?d得到发酵鸭肉制品.采用质构仪、扫描电子显微镜、透射电子显微镜、拉曼光谱仪、低场核磁共振仪和气相色谱(gas chromatography,GC)-质谱(mass spectrometry,MS)联用仪分别分析产黄青霉发酵鸭肉制品的质地、微观结构、蛋白质构象、水分分布和挥发性物质的变化情况.结果表明,产黄青霉发酵鸭肉的硬度和弹性明显降低,黏性明显增加.扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察到经产黄青霉发酵的鸭肉无完整肌原纤维,呈无序排列并黏连的颗粒状.拉曼光谱表明,产黄青霉发酵鸭肉蛋白质二级结构中α-螺旋相对含量减少,β-折叠相对含量增加,β-转角和无规卷曲相对含量变化不明显;色氨酸、酪氨酸残基微环境疏水性显著增强(P<0.05).低场核磁共振研究发现结合水和不易流动水相对含量显著降低(P<0.05).GC-MS分析表明未发酵鸭肉制品挥发性物质为29种,而产黄青霉发酵鸭肉制品挥发性物质为48种,其中酮类、酯类和酸类是新产生的挥发性物质.产黄青霉可用于生产特定风味和质地的发酵肉制品,为开发可安全食用的发酵鸭肉制品提供了一种新思路.

摘要： 青霉素作为第一个被应用的β-内酰胺类抗生素,至今仍在医疗健康领域发挥着重要作用.在产黄青霉补料分批发酵的传统工艺中,青霉素合成速率在100h左右开始快速下降.针对这一问题,本文设计了后期倒种和后期补盐两种工艺优化策略,对传统工艺加以改进.结果 表明,后期倒种工艺中,发酵250h后仍具有较高的青霉素合成速率,但后期倒种使大量仍具有较强青霉素合成能力的菌体流失,造成严重浪费.后期补盐工艺中,发酵终末青霉素总产量以及产物对糖得率分别较原始工艺提高了28.46％和34.55％.对细胞代谢途径及菌体形态等的进一步探讨表明,传统工艺发酵后期包括磷源及金属离子在内的痕量营养物质的不足会影响菌体的生长,并且抑制前体氨基酸及NADPH的合成,从而造成了青霉素产率的下降,菌株自身的发酵效率潜力依旧可以挖掘.

摘要： 根结线虫是危害最严重的植物寄生线虫,其分布广、寄主多,是威胁农业生产的重要病原物.生物防治是控制根结线虫病的有效措施之一.本课题组前期筛选获得1株对南方根结线虫有高毒力的生防真菌产黄青霉(Penicillium chrysogenum)Snef2367.通过室内试验测定该菌株代谢产物对南方根结线虫(Meloidogyne incognita)2龄幼虫(J2)的毒性和卵孵化抑制的效果,并利用盆栽和温室试验进一步验证其生防效果.室内试验测定结果表明:该菌株代谢产物对南方根结线虫J2具有强毒杀作用,处理24h和72h时,J2的校正致死率分别高达89.16%和98.44%;该菌株代谢产物也显著抑制卵的孵化,处理48 h和72h时,相对抑制率分别高达80.20%和67.63%.盆栽试验结果表明,产黄青霉Snef2367代谢产物可显著降低根结指数和土壤中J2数量,并且显著增加株高、根长、根鲜重和根干重,具有明显的促生效果.温室田间试验结果与盆栽试验结果基本一致,均可显著降低根结指数和土壤中J2数量,并且显著增加株高和根长,但由于田间根结线虫发生严重,使番茄植株根鲜重和根干重显著低于对照处理.同时,盆栽试验显示Snef2367代谢产物对番茄根结线虫的减退率高达56.67%,温室田间试验的防效高达64.29%.可见,产黄青霉Snef2367菌株代谢产物具有很好的促生和防病效果,为植物线虫病的生物防治提供了新的生防资源.%Root-knot nematode (RKN) is the most seriously damaging plant-parasitic nematode and is also an important pathogen in agricultural production owing to its worldwide distribution and numerous hosts. Biological control is one of effective measures to control RKN. Snef2367 strain was screened with high virulence against Meloidogyne incognita and identified as Penicillium chrysogenum by our lab. In order to evaluate the toxicity and biocontrol effect on RKN, the nematicidal activity and the inhibition effect of metabolites from P. chrysogenum Snef2367 were tested against the second juveniles (J2) and egg hatching of M. incognita, respectively. Furthermore, vivo experiments also were conducted to verify the biological control effect of P. chrysogenum Snef2367 on tomato plants infested with M. incognita. The results indicated that the metabolite of Snef2367 showed high lethal effect on the J2 of M. incognita, and the corrected mortality were 89.16% and 98.44% in 24h and 72h after the treatment, respectively. Snef2367 also inhibited egg hatching significantly with the hatching inhibition rate of 80.20% and 67.63% in 48h and 72h after the treatment, respectively. Pot experiment showed that the metabolites of Snef2367 significantly decreased gall index and J2 density in soil and significantly promoted the growth of tomato plants. The results of plot experiment in greenhouse were basically consistent with the results of pot experiment, which could significantly reduce gall index and J2 density in soil and significantly increase the shoot height and root length. Root fresh weight and root dry weight significantly decreased compared to control owing to serious RNK in greenhouse experiments. Meanwhile, pot experiment showed the decrease rate of RKN by Snef2367 was as high as 56.67%. The biocontrol efficacy of Snef2367 under greenhouse was 64.29%. In summary, the metabolite of P. chrysogenum Snef2367 showed excellent effects of promoting growth and preventing disease, and could be considered to be a promising biocontrol agent against M. incognita with a high efficacy in the future.

摘要： 通过形态学观察并结合ITS序列鉴定的方法对真菌菌株产黄青霉AS3.521进行确认,并利用其对根皮素进行转化研究.在28°C、160 r/min与根皮素共同培养3天后,利用水饱和正丁醇溶液萃取发酵液获得转化产物,通过多种柱色谱对转化产物进行分离,运用核磁共振波谱技术(1H-NMR、13C-NMR)结合文献数据鉴定转化产物的结构.结果显示菌株产黄青霉AS3.521可以对根皮素进行转化,且获得了3个小分子转化产物,结构分别为对羟基苯丙酸、对羟基苯甲酸、茴香酸,并推测了转化路径,为化合物合成提供了依据.%Biotransformation of phloretin by Penicillium chrysogenum AS 3.521 was performed and the strain of Penicillium chrysogenum AS3.521 was identified by morphological observation and phylogenetic analysis of the internal transcribed spacer (ITS) gene sequence. The conversion products were obtained in fermentation under the condition of 28 °C, 160 r/min, then extracted by n-BuOH and separated on macroporous resin, silica gel, octadecyl bonded silica gel(ODS) and preparative high performance liquid chromatography(PHPLC) various column chromatography. The structures of transformation products were elucidated by nuclear magnetic resonance spectroscopy(1H-NMR, 13C-NMR) and compared with literatures. The results showed that the strain was not susceptible through long-term subculture, and still resistant as Penicillium chrysogenum. Three structures were identified as 3-(4-hydroxyphenyl) propanoic acid, p-Hydroxybenzoic acid, anise acid respectively and the conversion path was conjectured, which provided the basis for biosynthesis of compounds.

摘要： Taking the Penicilliumchry sogenum strain S1 and Aspergillus niger strain S2 isolated from mol-dy dried Small Calyx persimmon as materials,the technologies for controlling their growth were studied using the food preservatives including chlorine dioxide,sodium benzoate,potassium sorbate and double sodium ace-tate,and the ultraviolet sterilization.The results showed that the food preservatives all had inhibitory effects on the two mold strains especially the chlorine dioxide.The inhibitory rate of chlorine dioxide to S1 was 99.76%at 30 mg/L for 10 minutes,and that to S2 was 90.82%at 30 mg/L for 15 minutes and 99.37%at 50 mg/L for 15 minutes,so using chlorine dioxide could obtain better inhibitory effect on mold at lower concentration in shorter time.The ultraviolet sterilization also could better inhibit the growth of S1 and S2,and the sterilization rate to S1 and S2 reached 93.85%and 76.65%respectively when the irradiation time was 10 minutes.%以小萼子柿饼中分离得到的两株霉菌污染菌S1产黄青霉和S2黑曲霉为原料,利用食品防腐剂二氧化氯、苯甲酸钠、山梨酸钾、双乙酸钠和紫外处理技术对其进行生长控制研究.结果表明:二氧化氯、苯甲酸钠、山梨酸钾、双乙酸钠等食品防腐剂均可抑制霉菌S1、S2生长,并且二氧化氯的抑菌效果最好;霉菌S1产黄青霉在二氧化氯30 mg/L、10 min时抑菌率达到99.76%,霉菌S2黑曲霉在二氧化氯30 mg/L、15 min时抑菌率达到90.82%,50 mg/L、15 min时抑菌率达到99.37%,能在较低浓度和较短时间内达到较好的抑菌效果;紫外处理技术可抑制霉菌S1、S2生长,照射时间为10 min时,对霉菌S1产黄青霉和S2黑曲霉的杀菌率分别达到93.85%和76.65%,抑制效果较好.

摘要： 从分离自山西老陈醋大曲中高产糖化酶和纤维素酶的菌株中筛选优良菌株,制成麸曲与大曲共发酵,采用混料回归设计确定最佳原料配比并检测食醋质量.结果表明,以菌株AS3.4309 (M0)为对照菌株,筛选出产黄青霉(M4)和扣囊复膜孢酵母(M8),大曲与麸曲的最佳总添加量为主料的40％,其中大曲25.10％,M8麸曲6.81％,M4麸曲8.09％,安琪酵母0.06％,料水比1:3 (g:mL),此时酒精度为11.2％vol.制成麸曲与大曲共发酵后酒精度显著高于菌株M0 (P＜ 0.05),与大曲单独发酵相比,麸曲M4+M8+大曲共酵提高原料利用率提高了31.81％,减少大曲用量37.25％,且食醋各项质量指标均符合国家标准.

摘要： 本实验为减少蘑菇种植中产黄青霉的污染,进行了从土壤中分离纯化出了产黄青霉的拮抗菌,及中药黄柏、苦参及多菌灵和中药正交对污染菌的抑制作用等实验.从而需找一种生物防治或中药和农药结合防治的环保方法,以此来解决农药对环境造成的污染及食用菌上的农药残留问题.实验结果表明,中药与多菌灵结合使用,比中药单独使用对产黄青霉的抑制效果更明显.其中,黄柏与多菌灵的最佳组合浓度是黄柏浓度为0.25g/mL,多菌灵浓度为0.1％.苦参与多菌灵的最佳组合浓度是苦参浓度为0.016g/mL,多菌灵浓度为0.1％.土壤中通过直接堆砌法分离出的接抗菌经镜检,可以初步确定是属于根霉属.

摘要： 华木莲(Sinomanglietia glauca Z.X.Yu et Q.Y.Zheng)为木兰科中我国特有的单种属植物,全世界唯宜春特有的珍稀濒危新树种,对从华木莲叶片中分离的多株内生真菌进行抗氧化活性分析,筛选出抗氧化性较高的菌株并鉴定.筛选华木莲叶片的内生真菌,制备其发酵液提取物,采用TBA反应法、超氧阴离子自由基(O2-·)、羟基自由基(·OH)清除能力的分析测定其抗氧化活性,对抗氧化活性高的内生真菌菌株利用试剂盒提取内生真菌总DNA,扩增其rDNA的ITS序列并测序.结果显示,菌株SL-3的总抗氧化活性很高,比对照、以维生素C为底物的高.通过对抗氧化活性成分的分析可知,该菌株含有黄酮类化合物.对菌株SL-3进行形态和分子鉴定,确定为产黄青霉(Penicillium chrysogenum).说明内生真菌SL-3产黄青霉具有明显和稳定的抗氧化活性,可用于抗氧化活性成分发酵生产的微生物资源.

摘要： 本文以青霉素产生菌产黄青霉(Penicillium chrysogenum)为出发菌株,先后利用低能离子注入技术和低温空气等离子体技术对其进行复合诱变,同时研究了空气等离子体处理对分生孢子存活率和突变率的影响,结果显示,孢子存活率随处理时间变化呈现"马鞍型"曲线,处理时间为30min时,正突变率最大达到57%,负突变很少出现.通过多轮选育,获得一株青霉素产量得到明显提高的突变株aPc051345,比出发菌提高了81.0%.通过显微图像对比,发现突变株的菌丝粗壮,分枝多且短而原始菌的菌丝分枝少,且长而细.

摘要： 在发酵过程中,丝状真菌的形态和过程参数,包括:搅拌和物料传递等,相互之间有着紧密的联系,并且作用最终在产物产量上得到体现.本文研究了青霉素原始菌株在3.7L 小型发酵罐和摇瓶中,青霉素产量与菌丝形态,包括菌丝体直径、分支数以及异化率之间的关系.结果表明:发酵罐中菌丝体形态变化远小于摇瓶中的菌丝体,并且青霉素效价与菌丝异化程度之间存在一定的对应关系.当菌丝体异化率达到30%,平均直径4μm以上的临界条件时,青霉素效价最高,异化率超过60%,青霉素产量开始下降.在罐中由于菌丝体形态变化不明显,青霉素效价一直在较低水平.

摘要： 在发酵过程中,丝状真菌的形态和过程参数,包括:搅拌和物料传递等,相互之间有着紧密的联系,并且作用最终在产物产量上得到体现.本文研究了青霉素原始菌株在3.7L 小型发酵罐和摇瓶中,青霉素产量与菌丝形态,包括菌丝体直径、分支数以及异化率之间的关系.结果表明:发酵罐中菌丝体形态变化远小于摇瓶中的菌丝体,并且青霉素效价与菌丝异化程度之间存在一定的对应关系.当菌丝体异化率达到30%,平均直径4μm以上的临界条件时,青霉素效价最高,异化率超过60%,青霉素产量开始下降.在罐中由于菌丝体形态变化不明显,青霉素效价一直在较低水平.

摘要： 在发酵过程中,丝状真菌的形态和过程参数,包括:搅拌和物料传递等,相互之间有着紧密的联系,并且作用最终在产物产量上得到体现.本文研究了青霉素原始菌株在3.7L 小型发酵罐和摇瓶中,青霉素产量与菌丝形态,包括菌丝体直径、分支数以及异化率之间的关系.结果表明:发酵罐中菌丝体形态变化远小于摇瓶中的菌丝体,并且青霉素效价与菌丝异化程度之间存在一定的对应关系.当菌丝体异化率达到30%,平均直径4μm以上的临界条件时,青霉素效价最高,异化率超过60%,青霉素产量开始下降.在罐中由于菌丝体形态变化不明显,青霉素效价一直在较低水平.

摘要： 在发酵过程中,丝状真菌的形态和过程参数,包括:搅拌和物料传递等,相互之间有着紧密的联系,并且作用最终在产物产量上得到体现.本文研究了青霉素原始菌株在3.7L 小型发酵罐和摇瓶中,青霉素产量与菌丝形态,包括菌丝体直径、分支数以及异化率之间的关系.结果表明:发酵罐中菌丝体形态变化远小于摇瓶中的菌丝体,并且青霉素效价与菌丝异化程度之间存在一定的对应关系.当菌丝体异化率达到30%,平均直径4μm以上的临界条件时,青霉素效价最高,异化率超过60%,青霉素产量开始下降.在罐中由于菌丝体形态变化不明显,青霉素效价一直在较低水平.

摘要： 在发酵过程中,丝状真菌的形态和过程参数,包括:搅拌和物料传递等,相互之间有着紧密的联系,并且作用最终在产物产量上得到体现.本文研究了青霉素原始菌株在3.7L 小型发酵罐和摇瓶中,青霉素产量与菌丝形态,包括菌丝体直径、分支数以及异化率之间的关系.结果表明:发酵罐中菌丝体形态变化远小于摇瓶中的菌丝体,并且青霉素效价与菌丝异化程度之间存在一定的对应关系.当菌丝体异化率达到30%,平均直径4μm以上的临界条件时,青霉素效价最高,异化率超过60%,青霉素产量开始下降.在罐中由于菌丝体形态变化不明显,青霉素效价一直在较低水平.

摘要： 本发明公开了一种产黄青霉菌株及其在生产青霉素中的应用。本发明所提供的菌株是产黄青霉(Penicillium chrysogenum)CGMCC No1248。本发明公开的菌株培养条件简单，表达量高。本发明公开了利用上述菌株生产青霉素的方法。

摘要： 本发明涉及分离的来自产黄青霉的新的苯乙酰辅酶A连接酶基因(pclB)、其氨基酸序列和表达载体，并证明了该基因的表达受苯乙酸的诱导，进而构建了含有本发明新基因的表达载体和产黄青霉工程菌菌株，该转基因菌株的青霉素产量明显提高，本发明对于青霉素的生产具有重要意义。

摘要： 本发明涉及单宁降解技术，公开了一种产黄青霉及其在制备单宁酶和降解单宁中的应用。具体地，本发明提供一种产黄青霉，所述产黄青霉的保藏编号为GDMCC No.61268。本发明还提供一种菌剂，该菌剂含有上述的产黄青霉。本发明还提供一种降解单宁的方法，该方法包括：将上述产黄青霉和/或上述菌剂与含有单宁的样品接触。本发明提供的产黄青霉能够高效生产单宁酶，且降解条件具有广泛的pH适应性和温度耐受性，酶解效率高，为单宁酶的工业化生产及其下游产物的全线绿色生产、安全生产提供依据。

摘要： 本发明公开了一种产黄青霉DXY‑1(Penicillium chrysogenum DXY‑1)在生产对羟基苯乙醇中的用途。本发明还公开了一种对羟基苯乙醇的生产方法，包括使用产黄青霉DXY‑1(Penicillium chrysogenum DXY‑1)的步骤。本发明首次采用产黄青霉生产对羟基苯乙醇，其工艺简单，对于拓展对羟基苯乙醇的工业化生产具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一株重组产黄青霉基因工程菌及其构建方法与应用，所述重组产黄青霉基因工程菌由原始产黄青霉菌中StuA基因被Bleo抗性基因替代所得。本发明所提供的基因工程菌使产黄青霉在固定化发酵生产青霉素过程中生物膜量OD570增多了约2.5倍，使菌丝更好的吸附结合在塑料介质上；提高了菌种的抗逆性，使发酵过程中菌种形态更稳定；提高了青霉素的效价达到2126.775U/mL，同时缩短了整个发酵周期约24h，从而提高了发酵效率并减少了生产成本，有效解决了现有技术中产黄青霉发酵生产青霉素菌种形态不稳定，发酵周期长且持续性差，导致发酵效率低且成本高的问题。

摘要： 本发明涉及一种产黄青霉菌菌种的优选方法，具体是，将普通工业生产用产黄青霉菌菌株从米孢子出发，经调配溶液、梯度高浓度青霉素平板培养基筛选、复筛、验证而获得耐受性好的高产菌株。采用梯度高浓度青霉素培养基筛选的菌株的方法，开辟了工业发酵生产用产黄青霉菌的优选的新途径。该方法操作简便，所用仪器设备少，成本低廉，效率高，易于工业生产推广应用。

摘要： 本发明涉及分离的来自产黄青霉的新的苯乙酰辅酶A连接酶基因(pclB)、其氨基酸序列和表达载体，并证明了该基因的表达受苯乙酸的诱导，进而构建了含有本发明新基因的表达载体和产黄青霉工程菌菌株，该转基因菌株的青霉素产量明显提高，本发明对于青霉素的生产具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种产黄青霉菌株及其在生产青霉素的应用。本发明所提供的菌株是产黄青霉(Penicillium chrysogenum)CGMCC No1248。本发明公开的菌株培养条件简单，表达量高。本发明公开了利用上述菌株生产青霉素方法。

摘要： 本发明公开了一株降解木质素的产黄青霉，名称为AF06，分类命名为：产黄青霉(Penicillium chysogenum)，保藏号为CGMCC No.22468，保藏日期为：2021年7月8日，保藏单位为：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，北京市朝阳区北辰西路1号院3号。本发明菌株具有生产速率快、易培养，对小麦秸秆、玉米秸秆与水稻秸秆的木质素降解率分别为46.5％、52.0％与49.1％，且半纤维素、纤维素留存率高，优于已报道菌株，可在农作物秸秆肥料化、饲料化以及农业环境保护等方面具有广泛的应用前景。

摘要： 本发明提供了检测产黄青霉菌基因组DNA的引物对、包含本发明引物对的检测试剂或试剂盒以及利用所述引物对检测产黄青霉菌基因组DNA的方法，所述引物对特异性结合于SEQ ID NO:1所示序列。利用所述引物对的PCR检测方法操作简便快捷、灵敏度高、能区分CHO细胞、Vero细胞、大肠杆菌、毕赤酵母、293T细胞、NS0细胞、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌以及铜绿假单胞菌等干扰性DNA。